Detección rápida de microorganismosTendencias

Detección rápida de microorganismosTendencias

César Fernández Sánchez

Detección rápida de microorganismosTendencias

Contaminación por microorganismos

E. Coli O157:H7

Detección rápida de microorganismosTendencias

Niveles y análisis en aguasAguas de consumoValor máximo admisible (VMA) = 0 UFC/mL

Aguas embotelladasVMA = 0 UFC/mL

Aguas de bañoVMA = 0 UFC/mL

Aguas residuales regeneradas (según su uso)Urbano = 0‐2 UFC/mLAgrícola = 1‐100 UFC/mLIndustrial = 0‐100 UFC/mLRecreativo = 2‐100 UFC/mLAmbiental = 0‐100 UFC/mL

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Análisis de parámetros microbiológicos

Métodos de análisis estandarizados• Fermentación en tubos múltiples• Cultivo de tubos positivos en medio de confirmación• Recuento según la cantidad más probable  o filtrado en membrana, cultivo en medio apropiado, sub‐cultivo e identificación de cepas sospechosas

Tiempo de análisis: 16‐48 h, pudiendo extenderse hasta 72 h.

Robustos FiablesLargosCarosLaboratorios especializadosPersonal entrenado

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BiosensoresRobustos, compactos, fiables, fáciles de manejar, instrumentación sencilla 

COSTE POR ANÁLISIS

Aguas residuales regeneradas

Detección directa (sensibilidad)

• Rapidez• Frecuencia de muestreo

• Medida in situ

Aguas de consumo (embotelladas, baño)

Muestreo y cultivo

Detección 

• Disminución tiempo de cultivo• Mínimo consumo de reactivos

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Biosensores: dispositivo GTQInmunosensor impedimétrico para la medida directa de E.coli

• Pequeño tamaño, robustez – técnicas de microfabricación• Selectividad ‐ Inmunodetección• Detección directa ‐ Una única incubación• Sensibilidad ‐ límite de detección de 300 UFC/mL• Selectividad añadida – Impedancia ‐ detección de células viables• Rapidez – 1 h tiempo de análisis

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Biosensores: dispositivo GTQ ‐ Funcionamiento

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Biosensores: dispositivo GTQ ‐ Funcionamiento

LOD = 300 UFC/mL

• Concentración más baja medida: 100 UFC/ml• Límite de detección: 300 UFC/ml

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Biosensores: dispositivo GTQ ‐ Selectividad

Detección de células viables

Células vivas

Células muertas

Vivas

Muertas

105 UFC/mL

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Biosensores: Inmunosensor GTQ ‐ Perspectivas

Inmunosensor GTQ• Potencial para la detección rápida y fiable de microorganismos en aguas• Medida directa• Detección eléctrica – instrumentación compacta y sencilla• Selectividad a la detección de microorganismos vivos – menos falsos positivos• Mínima interferencia de contaminantes – medida robusta y reproducible

Trabajo a realizar• Mejora de la sensibilidad – Optimización de la geometría• Versatilidad – aplicación a la detección de otros microorganismos• Automatización – medida in‐situ

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César Fernández Sánchez

Gracias por su atención