TECNICAS INMUNOLOGICAS

Dr. Oscar Walter Torres

Técnicas inmunológicas– Fundamento: Fundamento: reacción específica entre Ags-Acs. – Utilidad :Utilidad :

• Detección, identificación, tipificación y cuantificación de microorganismos, Ags y Acs. de grupos sanguíneos

• Detección y cuantificación de enzimas microbianas y toxinas de origen microbiano

– ClasificaciónClasificación• Lectura directa

– Aglutinación– Precipitación

• Lectura indirecta– Reacción de Fijación de Complemento– Neutralización– Inmunomarcado

» Radioinmunoensayo (RIE)» Enzimoinmunoensayo (ELISA)» Inmunofluorescencia

Técnicas inmunológicas

• Sensibilidad: capacidad para detectar pequeñas cantidades de Ags ó Acs.

• Especificidad: capacidad para distinguir entre Ags o microorganismos diferentes y no dar falsos negativos

• Uso de Testigos +/-

Técnicas inmunológicasAglutinación

• Definición: técnica de lectura directa, efectuada “in vitro” en medio líquido o sólido.

• Clasificación– Activa (Ag. particulado natural: GR, virus, bacteria, hongo,

parásito, etc.)– Pasiva (Ag particulado artificial: GR, látex, gelatina)– Reversa pasiva: se adsorbe el Ac a un soporte sólido

• Anticuerpo: aglutinina• Característica: técnica cualitativa y/o cuantitativa (por

titulación)

Título: máxima dilución que da positiva una reacción

Técnicas inmunológicasAglutinación: etapas

• Sensibilización– Temperatura, afinidad Ag-Ac, pH, tiempo de

incubación, concentración relativa entre Ag y Ac y fuerza iónica del medio

• Aglutinación– Potencial Z, tipo de Ig y densidad del Ag

AGLUTINACION

Técnicas inmunológicasPrecipitación

• Definición: técnica de lectura directa, efectuada “in vitro” en medio líquido o semisólido (inmunodifusión).

• Ag: soluble

• Ac: precipitina

• Ejemplos: ID radial, inmunoelectroforesis

Técnicas inmunológicasPrecipitación

Técnicas inmunológicasPrecipitación

Técnicas inmunológicasPrecipitación

Técnicas inmunológicasReacción de Fijación de Complemento (RFC)

• Definición: técnica de lectura indirecta, efectuada “in vitro” en medio líquido.

• Ag: soluble

• Ac: fijador de complemento

• Fundamento: 2 sistemas Ag-Ac.– Problema– Detector o mezcla hemolítica

Técnicas inmunológicasReacción de Fijación de Complemento

Técnicas inmunológicasReacción de Fijación de Complemento

Reacción Positiva Reacción Negativa

Técnicas inmunológicas

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