SEPARACIÓN DE PIGMENTOS SEGÚN SU SOLUBILIDAD

MATERIAL:

●Tubos de ensayo.●Probetas.●Pipetas.●Cuentagotas.●Embudos.

●Pigmentos fotosintéticos.●Hexano.●.Metanol

Separación de clorofilas:

Poner en un tubo de ensayo 2 ml de la solución de pigmentos fotosintéticos. Añadir 4 ml de hexano, agitando bien el tubo.Dejarlo en la gradilla esperando a que se separen dos fases o capas: una superior de color verde, y otra inferior, alcohólica, de color amarillo.

Con un cuentagotas, coger la fase superior, verde, y pasarla a otro tubo.

Añadir luego 2 ml de metanol, agitar y dejar el tubo en la gradilla: se apreciarán dos capas o fases: una de color verde azulado (clorofila a) y otra de color verde limón (clorofila b)

Separación de carotenoides:

Poner en un tubo de ensayo 2ml de pigmentos fotosintéticos. Añadir 1ml de hexano. Agitar el tubo y añadir luego 1 ml de agua, volviendo a agitar. dejar reposar el tubo en la gradilla.Aparecerán dos fases: una superior de clorofilas y una inferior de carotinoides.Introducir un cuentagotas hasta el fondo del tubo, tomando con cuidado la fase de carotenoides.

Poner dicha solución en otro tubo, y llevar éste al baño maría para que se evapore parte del contenido y quede reducido a un pequeño volumen.

Sacar entonces el tubo y, cuando esté frío, añadir 1 ml de hexano y 1 ml de metanol.

Clorofila bClorofila a

XantofilaCaroteno