Selenito Caldo

Medio de enriquecimiento para el aislamiento de Salmonella spp. a partir de materiales clnicos, especialmente heces.

FundamentoEste caldo selectivo favorece el crecimiento de Salmonella spp.En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, el selenito de sodio inhibe la flora Gram positiva y la mayora de la flora entrica excepto Salmonella spp. durante las primeras 8-12 horas de incubacin. Frmula (en gramos por litro)Instrucciones

Peptona5.0Suspender 23 g del polvo en un litro de agua destilada. Mezclar bien y calentar ligeramente hasta su disolucin completa. Evite el calentamiento excesivo.No esterilizar en autoclave. Distribuir en tubos estriles un volumen no menor a 5 ml. Se recomienda guardar en heladera si no se usa de inmediato.

Lactosa4.0

Fosfato de sodio10.0

Selenito de sodio4.0

pH final: 7.0 0.2

Siembra-Materia fecal: a un tubo con 10-15 ml de caldo selenito, agregar 1-2 ml de una suspensin de materia fecal. -Tejido infectado: macerar 1-2 g de tejido en 10-15 ml de caldo selenito, usando una varilla estril. -Orina: a un tubo con unos 5 ml de caldo selenito doble concentracin, agregar igual volumen de orina.

IncubacinA 35-37 C, durante 16-24 horas, en aerobiosis.Luego, subcultivar en medios selectivos: Salmonella Shigella Agar (B02-138-05/06), Hektoen Entrico Agar (B02-110-05/06), Verde Brillante Agar (B02-124-05/06), Mac Conkey Agar (B02-114-05/06).

Resultados MicroorganismosCrecimiento

Salmonella enteritidis ATCC 13076Bueno

Salmonella typhimurium ATCC 14028Bueno

Escherichia coli ATCC 25922Regular-Escaso

Proteus mirabilis ATCC 43071Regular-Escaso

Limitaciones-Se aconseja usar el medio el mismo da de la preparacin.-No incubar el medio de cultivo sembrado por mas de 24 horas, debido a que el efecto inhibitorio del selenito disminuye luego de las primeras 6-12 horas de incubacin, y adems porque no es favorable para la mayora de las cepas de Salmonella, que pueden no recuperarse.-La nica ventaja de incubar durante 48 horas es el incremento de la recuperacin de Salmonella pullorum.

Caractersticas del medioMedio preparado: mbar claro, traslcido.AlmacenamientoMedio deshidratado: a 10-35 C.Medio preparado: a 2-8 C.Presentacin

x 100g :Cdigo: B02-120-05x 500g :Cdigo: B02-120-06

Agua Peptonada. Medio usado como diluyente y para enriquecimiento bacteriano a partir de alimentos y otros materiales de inters sanitario. Fundamento Medio de enriquecimiento no selectivo, recomendado para ser utilizado en lugar de solucin fisiolgica para recuperar clulas de enterobacterias daadas por procesos fisicoqumicos, a los que ha sido sometido el alimento. Si es utilizado como medio base para la fermentacin de hidratos de carbono, se debe adicionar el indicador de Andrade y el hidrato de carbono en cuestin.Frmula (en gramos por litro)Instrucciones

Peptona de carne 10.0Suspender 15 g de polvo en 1 litro de agua destilada. Mezclar bien y distribuir. Esterilizar en autoclave a 121C durante 15 minutos.

Cloruro de sodio5.0

pH final: 7.2 0.2

SiembraPor inoculacin directa del material en estudio.Como diluyente: realizar las diluciones 1:10 y 1:100, dependiendo del uso que se le quiera dar.

Incubacin Aerbica, a 35-37 C durante 18-24 horas.

ResultadosMicroorganismosCrecimiento

Escherichia coli ATCC 25922Bueno

Staphylococcus aureus ATCC 25923Bueno

Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853Bueno

Control NegativoResultado

Medio sin inocularSin cambio

Caractersticas del medio:Medio preparado: mbar claro.

Almacenamiento:Medio deshidratado: a 10-35 C.Medio preparado: a 2-8 C.Presentacin

x 100g :Cdigo: B02-152-05x 500g :Cdigo: B02-152-06