Objetivo

El presente documento se elabor para describir las tcnicas de anlisis clnicos realizadas durante el periodo de prcticas profesionales y servicio social que se llevaron a cavo con la finalidad de poner en prctica todo lo aprendido durante la preparacin escolar, de tal modo que se pudiesen reafirmar habilidades as como destrezas en la formacin del tcnico laboratorista clnico.Adems, el servicio social sirve para fomentar valores como la solidaridad al realizar el servicio social en la comunidad al desempearse profesionalmente en el rea del sector salud. Esto es parte de los requisitos que por normatividad exige el departamento de Servicio Social y Titulacin de la D.G.T.I. como parte del trmite para la certificacin profesional.

Justificacin

La presente experiencia de prcticas profesionales tuvo lugar en el rea de laboratorio clnico del Hospital General ISSSTE de Torren colonia Centro, ubicado en las calles Allende y Donato Guerra en la ciudad de Torren, Coahuila.

El mencionado hospital ofrece servicios de salud diversos, de carcter privado y asistencial, tales como consulta externa, consulta de especialidad, rea de urgencias, ciruga, medicina interna, hemodilisis, hemodinamia, pediatra, neonatologa, ginecologa y obstetricia, tocociruga, radiologa y radiodiagnstico, salud pblica, laboratorio clnico y banco de sangre.

El laboratorio clnico de dicha institucin se divide en reas para ofrecer los diversos servicios que lo conforman entre ellas rea de Hematologa (Biometra hemtica, recuento de plaquetas, recuento de reticulocitos, velocidad de sedimentacin globular, grupo y Rh, prueba de Coombs directa e indirecta), Qumica clnica ( Qumica sangunea (glucosa, urea, creatinina, acido rico), electrolitos sricos (Na, Cl, K, Ca, Mg, PO), perfil heptico (TGO, TGP, fosfatasa alcalina, Bilirrubina total, Bilirrubina directa, Bilirrubina indirecta, LDH, FA), perfil de lpidos (Colesterol total, HDL, LDL, VLDL, triglicridos), protenas, enzimas cardiacas (CK, CK-MB) ), Serologa (reacciones febriles, ASTO, Protena C reactiva, VDRL) Microbiologa ( examen general de orina, coproparasitoscopico , parasitoscopico, diversidad de cultivos, BAAR, etc...) Banco de sangre (pruebas cruzadas) entre otros.

Aqu se maneja una gran diversidad de muestras en las diferentes reas, destacando como muestra principal sangre venosa perifrica en sus diferentes derivados del fraccionamiento (suero, plasma, elementos formes). En Mxico la cifra de enfermedades que necesitan de un anlisis clnico a aumentado considerablemente por lo que la nacin necesita tanto de qumicos como tcnicos laboratoristas capaces de realizar su trabajo en tiempo y forma; demostrando sus capacidades y aptitudes, no solo laborales sino humansticas, ya que se tiene que trabajar con honradez, tolerancia, empata y gusto por el trabajo que se realiza.

Realic mis prcticas profesionales y servicio social con la finalidad de poder aplicar las bases tericas adquiridas en clases al mbito prctico y laboral. Tambin es importante mencionar el deseo de obtener la experiencia suficiente en esta rea de trabajo para que al momento de competir por un puesto a nivel privado o institucional tener las armas necesarias para esto. Otras razones importantes es el introducirme en el ambiente con los compaeros de trabajo, conocer las bases administrativas y sindicales de los laboratorios clnicos, conocer el grado de responsabilidad y compromiso que se requieren en el rea de servicios de la salud.

Tal periodo de trabajo consisti en la realizacin de diferentes procedimientos, anlisis y mediciones clnicas que se enlistan a continuacin:

Toma de muestra de sangre perifrica venosaHematologa: Biometra hemtica en aparato automatizado que permite obtener resultados de formula roja (Hemoglobina, Hematocrito), as como el clculo de los ndices eritrocitarios (VGM, HGM, CHGM); frmula blanca (recuento leucocitario, recuento diferencial); y plaquetas. Velocidad de sedimentacin globular (VSG), Recuento de Reticulocitos, Grupo y Rh. Tiempos de coagulacin. Coombs directo e indirecto Pruebas cruzadas

Qumica Clnica Medicin de electrolitos en suero y orina. PFH Perfil de lpidos Enzimas cardiacas Protenas urinarias Qumica Sangunea

Serologa Reacciones febriles VDRL Factor Reumatoide Prueba Inmunolgica de Embarazo (PIE) HIV, VHC y VHb

Microbiologa Examen general de Orina (EGO)

A continuacin explicar en qu consisten las tcnicas de toma de muestra y anlisis que realic durante mi estancia en dicho laboratorio.

Introduccin

Ellaboratorio clnicoes el lugar donde lostcnicosy profesionales en anlisis clnicos, analizan muestras biolgicas humanas que contribuyen al estudio, prevencin,diagnsticoy tratamiento de las enfermedades. Utiliza las metodologas de diversas disciplinas como la qumica clnica, hematologa,inmunologaymicrobiologa. En el laboratorio clnico se obtienen y se estudian muestras biolgicas diversas, como sangre, orina, heces, lquido sinovial (articulaciones), lquido cefalorraqudeo, exudados farngeos y vaginales, entre otros tipos de muestras.Los laboratorios son de gran ayuda tanto para pacientes que se encuentran hospitalizados como para los pacientes externos, es por eso que su ubicacin debe ser en la planta baja, con fcil acceso a la seccin de recepcin del Archivo Clnico y en menor grado con el departamento de Consulta Externa.Las reas que componen al laboratorio clnico son: Sala de Espera y Recepcin. Donde los pacientes esperarn cmodamente a ser atendidos; Cubculos de Toma de Muestras. En este punto se obtienen las muestras para luego ser distribuidas a las diversas secciones del laboratorio.

Secciones de Laboratorio: Hematologa:En este seccin se efecta elHemogramay diversas pruebas para evaluar el sistema deCoagulacin Bioqumica clnica:Aqu se realizan anlisis que se clasifican de la siguiente forma: Qumica sangunea de rutina, lo que abarca multiples parmetros como la determinacin deGlucosa,Colesterol, etc. Exmenes generales de orina Determinacin de gases en sangre ( Presin parcial de oxgeno, de anhidrido carbnico, reserva de bicarbonato, pH, etc.) Microbiologa:Las diversas labores que se realizan aqu pueden clasificarse en la siguiente forma: Coproparasitologa:Tiene por objeto investigar la presencia deparsitosen materias fecales. Bacteriologa:Consiste en examinar directa o indirectamente la presencia o actividad de organismos microscpicos ensangre,orina,materia fecal,jugo gstricoyexudadosorgnicos. Inmunologa:En esta seccin se hacen determinaciones deAnticuerposy otras determinaciones con el fin de evaluar elSistema inmunitario.En esencia, el laboratorio clnico es una herramienta fundamental para el sector salud, ayudando al diagnostico de enfermedades de un paciente afectado; los resultados de los anlisis clnicos van ms all del horizonte sintomatolgico, y ayudan al mdico a realizar un diagnostico acertado y por consecuencia un correcto tratamiento.

1.- Departamento de hematologa

La sangre es un tejido en circulacin continua, que desempea innumerables funciones vitales da su paso por todo el cuerpo. De mxima importancia es su capacidad de transportar oxigeno ligado a la hemoglobina de los eritrocitos, desde los pulmones a los tejidos corporales ,y devolver el bixido de carbono que se genera en los tejidos ,hasta los pulmones .Tambin produce y distribuye anticuerpos formados por los plasmacitos y los linfocitos, transporta granulositos y monocitos que neutralizan y destruyen los patgenos por medio de la fagocitosis, y suministra complemento. Otra funcin es conservar la hemostasia con plaquetas y factores de la coagulacin, que permite la reparacin de lesiones tisulares y evita hemorragia. Regular la temperatura corporal y el estado de equilibrio cido-bsico e hdrico; desplazar nutrimentos y hormonas regulatoria tejidos corporales

El alcance de la hematologa clnicaLa hematologa clnica tiene por objeto el estudio de las perturbaciones y enfermedades de la sangre y de los rganos hematopoyticos.Al sealar que los padecimientos de los rganos hematopoyticos tambin conciernen a la hematologa clnica, debe quedar implcito que algunos de ellos no dan lugar a cambios en la sangre propiamente dicha.Si se desea fijar de una vez por todas el alcance de la hematologa, debe aclararse que ella incluye, adems de las enfermedades del sistema hemtico propiamente dicho, las de tejido linftico y las del llamado sistema reticuloendotelial, ya sea que las alteraciones principales se observen en los elementos circulantes, o en los rganos o sitios donde estos tienen origen .normalmente existe un estado de equilibrio entre la formacin y la destruccin de los elementos figurados de la sangre, lo que se refleja en su composicin celular, que es prcticamente constante .Si la produccin de clulas es insuficiente, o su destruccin excesiva, ello se traducir por un cuadro hematolgico transitorio, o ms o menos permanente .1.1 Sala de toma de muestra Este espacio es el que se brinda para obtener las muestras de sangre requeridas en el laboratorio para los anlisis que posteriormente se realizaran. Si la muestra de sangre no se recoge con una tcnica perfecta hasta el menor detalle, la totalidad del examen hematolgico sufre.Para casi todos los anlisis se necesita una muestra de sangre venosa. La puncin en una vena, aunque es un mtodo bastante sencillo, debe hacerse con cuidado para evitar hemlisis o hemoconcentracin de la muestra, que se forme un hematoma, y que las venas sufran lesin. Los hematomas o las equmosis suelen poner de manifiesto una tcnica o criterio deficiente de la persona que la efecta. Unas palabras bien elegidas servirn para tranquilizar al paciente. La auto confianza y seguridad del tcnico, contribuiran a establecer una relacin adecuada. Es necesario mantener un buen control de la identificacin de las muestras para evitar confusiones que afecten gravemente la situacin.

1.2 Puncin venosa

Significado clnicoPara las tcnicas hematolgicas, es fundamental obtener muestras de sangre adecuadas, atenindose a una tcnica muy precisa .si la muestra de sangre no se recoge con una tcnica perfecta hasta el menor detalle, la totalidad del examen hematolgico sufre. Casi todas las muestras de sangre se obtienen por puncin venosa; es el mtodo ms fcil y adecuado para obtener volumen de sangre suficiente para llevar a cabo un gran nmero de pruebas.

FundamentoLa muestra puede dividirse y tratarse conforme a las necesidades del caso; puede mezclarse con anticoagulante para obtener plasma, sangre completa; o pude dejarse coagular para obtener suero. MuestraTipo de tuboAnticoagulantePruebas

SueroActivador de coagulo.Determinaciones en suero para bioqumica, microbiologa, inmunologa, TDM.

Suero con gelActivador de coagulo y gel separador.Determinaciones en suero para bioqumica, microbiologa, inmunologa, TDM.

Suero con grnulosActivador de cogulos y grnulosDeterminaciones en suero para bioqumica, microbiologa, inmunologa, TDM.

Suero para pruebas cruzadasActivador de cogulo.Determinaciones en suero para anlisis de pruebas cruzadas de histocompatibilidad.

PlasmaHeparina Sdica.Determinaciones en plasma heparinizado para bioqumica.

PlasmaHeparina de litioHeparina amnicaDeterminaciones en plasma heparinizado para bioqumica.

Plasma con gelHeparina de litio y gel separador.Determinaciones en plasma heparinizado para bioqumica.

Sangre totalK2 EDTAK3 EDTADeterminacin en sangre total con EDTA para hematologa.

Sangre totalK3 EDTADeterminaciones en sangre total con EDTA para anlisis de pruebas cruzadas de histocompatibilidad.

Sangre totalEDTA K2 Y gel separadorDeterminaciones en sangre total con EDTA para identificar virus, parsitos y bacterias en biologa molecular.

PlasmaCitrato sdico (3.2%)Citrato sdico (3.8%)Determinacin en plasma con citrato para anlisis de coagulo.

PlasmaCTAD (3.2%)Determinacin en plasma con citrato para anlisis de coagulacin cuando se intenta evitar la aparicin de factores plaquetarios en la sangre.

Sangre totalAnticoagulante inhibidor de glicolisis.Determinacin en sangre total anticoagulada y estabilizada o plasma para determinacin de glucosa y lactato.

Suero/PlasmaActivador de coaguloHeparina sdicaDeterminacin en suero/plasma heparinizado para anlisis de traza de metales.

Sangre totalACD-AACD-BCPDADeterminacin en sangre total con ACD/CPDA para anlisis del grupo sanguneo.

Procedimiento: Sistema de tubos al vaco

7.-Desechar el material punzo cortante y el infeccioso en sus respectivos depsitos.

1.3 Biometra hemtica o hemogramaEl hemograma consiste, bsicamente, en el conteo de los diferentes tipos de clulas que se encuentran en sangre perifrica. Bajo el nombre de hemograma se agrupan dos conceptos: (1) Cuantitativo, que comprende los recuentos de eritrocitos, leucocitos y plaquetas, cuantificacin de hemoglobina, medicin de hematocrito y en clculo de ndices eritrocitarios,(2) otro cualitativo (frmula leucocitaria), que es la identificacin microscpica o automatizada de los diferentes tipos de leucocitos y su expresin en valores porcentuales y absolutos.

Este examen, en la actualidad, constituye uno de los ms ampliamente utilizados, en el reconocimiento inicial de pacientes que consultan por patologas diversas. Adems representa una herramienta insustituible, en el monitoreo de evolucin de patologa hematolgica y control teraputico.

En este contexto, la automatizacin del hemograma, una combinacin de metodologas de colorimetra, impedancia elctrica e informtica (Celldyn 1400) ha permitido obtener un mtodo confiable y rpido para enfrentar la demanda creciente por el perfil hematolgico.

Analizador hematolgico CELLDYN 1400El analizador hematolgico CELLDYN 1400 proporciona informacin de 12 parmetros obtenidos, a partir de muestra de sangre total anticoagulada con EDTA, de la manera siguiente:

Medicin directa de: Glbulos rojos (RBC). Glbulos blancos (RBC). Plaquetas (PLT). Concentracin de hemoglobina (HGB).

Parmetros derivados, obtenidos de histogramas: Porcentaje de Linfocitos (% L) Porcentaje de Granulocitos (%G) Volumen corpuscular medio (MCV)Parmetros calculados de los datos medidos y derivados: Nmero total de Linfocitos (LYN) Nmero total de Granulocitos (GRAN) Hematocrito (HCT) Hemoglobina corpuscular media (MCH) Concentracin de Hb corpuscular media (MCHC)

Principio del mtodo

El CELLDYN 1400 utiliza el principio de la IMPEDANCIA O RESISTENCIA ELECTRICA para el recuento y clasificacin por tamao de las clulas sanguneas.

La clula, al pasar a travs de un orificio en el que hay una diferencia de potencial conocida, induce un pulso elctrico que es directamente proporcional al volumen celular, lo que es aprovechado (por la diferencia de tamao de los linfocitos, y granulocitos), para realizar una frmula de dos parmetros.

Para esto la muestra es diluida, automticamente, con una solucin de conductividad fija.

Luego esta muestra es conducida, unidireccionalmente, a travs de una apertura u orificio de tamao determinado.

La no devolucin de la muestra est asegurada por el transductor de Von Behrens que impide la recirculacin de la misma.

Una corriente elctrica constante pasa entre electrodos ubicados a cada lado de la apertura determinando una zona de censado a lo largo de toda la pertura.

Durante el ciclo de medicin, cada clula que atraviesa la zona de censado, interrumpe el flujo de corriente constante generando un pulso elctrico cuya amplitud es directamente proporcional al tamao de la clula.

El nmero de pulsos generados durante cada medicin corresponde al nmero de clulas censadas.

Los pulsos elctricos generados son primero amplificados y luego comparados con voltajes en canales de referencia que han sido previamente calibrados para aceptar slo seales con una amplitud predeterminada.

Dos o ms clulas pueden coincidir simultneamente en la zona de censado durante el ciclo de medicin. En cuyo caso se obtiene un pulso de gran amplitud, el cual es reconocido y rechazado, producindose una prdida de pulsos aceptables. Esta prdida se puede predecir estadsticamente, de manera que los recuentos celulares son corregidos automticamente.

El CELLDYN 1400 realiza MEDICION DE HEMOGLOBINA utilizando el mtodo de la formacin de cianometahemoglobina, que se determina con espectrofotmetro a 540 nm.

Para esto, a una muestra diluida 1:250 se le adiciona un agente lisante, cuya funcin es romper los glbulos rojos y liberar la hemoglobina.

Despus de la medicin el instrumento se lava con el reactivo detergente quedando listo para otro ciclo de medicin.

Especificaciones de ejecucin

SENSIBILIDADLas lecturas son confiables en el siguiente rango

Leucocitos1.000 - 100.000 mm3 (1 - 100 K/uL

Hemates 1.0 - 7.0 millones/mm3 (1 - 7 M/uL)

Hemoglobina 2.5 - 24,0 g/dl

Plaquetas 10 - 999 k/UL

BACKGROUND NORMAL (RECUENTO DE FONDO)Una vez realizado el ciclo de limpieza (mantenimiento diario) los recuentos del backgraund no deben exceder los siguientes limites:

Leucocitos menor o igual a 500 /mm3(0.5 K/uL)

Hemates menor o igual a0.05 millones/mm3(0.05 M/uL

Hemoglobina menor o igual a 0.2g/dl

Plaquetas menor o igual a 10.000 /mm3(10 K/uL)

IMPRESIN DE LISTADO DE RESULTADOS (RESUMEN)El equipo almacena, en memoria constantemente, los registros de las ltimas 320 muestras procesadas.

Por lo tanto, antes de alcanzar esta cifra, se debe imprimir y archivar el listado de resultados a modo de registro de resultados de examen:

TIPO Y RECOLECCION DE MUESTRALa muestra corresponde a sangre venosa, obtenida por venopuncin, recogida en tubos con anticoagulante EDTA/ K3

EQUIPOREACTIVOS REQUERIDOS

Contador hematolgico CELL DYN 1400. Agitador de muestras mecnico.

Reactivo Detergente para Celldyn 1400. Reactivo Diluyente para Celldyn 1400. Reactivo Lisante para Celldyn 1400.

Estos reactivos no deben exponerse a la luz directa del sol.No deben mezclarse.No adicionar restos de uno en otro nuevo.Estos reactivos deben mantenerse y utilizarse dentro de un rango de temperatura entre los 15 y 30 C para asegurar su conductividad.PROCEDIMIENTOS DE CALIBRACION.El funcionamiento del equipo se chequea diariamente, en base al programa de control de calidad interno del laboratorio.Cuando el control aconseje calibrar el instrumento, se puede seguir una de las tres formas de calibracin siguientes: Calibracin con calibrador comercial. Calibracin con sangre fresca. Calibracin mediante entrada de factor.

Procedimiento de calibracin.1. Presionar MAIN.2. Presionar CALIBRATION.3. Seleccionar FRESH BLOOD o CALIBRATOR.4. Seleccionar el o los parmetros a calibrar e ingrese los valores de referencia de la muestra o calibrador.Si se utiliza muestra de sangre fresca, esta debe tener menos de 4 horas de recolectada.Nota: Los valores de referencia aceptables, para calibracin con sangre fresca, deben ajustarse a lmites establecidos para el equipo.

Calibracin mediante entrada de factor:1. Presionar Calibration.2. Presionar ENTER FACTOR3. Con el cursor posicionarse en la entrada de factor correspondiente e ingresar nuevo factor.Esta opcin permite ingresar directamente los valores de factores de calibracin. La calibracin es programable cuando se introduce un factor de 1.00Ejemplo: Si los recuentos de leucocitos ests aumentados en un 2%, el operador puede ingresar como factor 0,98 para disminuir los recuentos en un 2%.PASOS DEL PROCEDIMIENTO

Como muestra se utiliza sangre venosa recogida en EDTA (tubo tapa Lila).La muestra debe agitarse por inversin, cuidando no someterla a excesiva agitacin que pueda destrozar los elementos o alterar el volumen celular.La muestra debe invertirse de 10 a 15 minutos si se hace a mano.En agitador mecnico: de 5 a 15 minutos.Nunca agitarlas ms de 30 minutos.Muestras procesadas hasta 8 horas de la recoleccin dan resultados confiables.

La muestra puede diluirse, previo a la medicin, utilizando diluyente para CELLDYN o suero fisiolgico. La dilucin 1:10 es suficiente en la mayora de las situaciones de parmetros elevados ms all del limite superior de lectura.

1. Para su proceso, colocar el tubo con la muestra debajo de la sonda de aspiracin.2. Precionar la palanca que est detrs. Automticamente la sonda aspirar 30 ul de muestra. Espere el beep de trmino de aspiracin del equipo antes de retirar el tubo. En este momento la muestra aspirada ser automticamente diluida, repartida en diferentes circuitos, incubada con reactivos especficos (lisis, hemoglobinometra) y leda por los dispositivos correspondientes.3. Ingresar identificacin del examen (digitar nmero de folio del examen). Presionar ENTER.PROCEDIMIENTOS DE CONTROL DE CALIDADEl programa de control de calidad del examen, se realiza en base a dos elementos:-Verificacin de Resultados en asociacin con la seccin de hematologa del Lab.Central. -Verificacin de constantes hematolgicas con relacin al programa de control interno del equipo. (Programa de la media X - B) Verificacin de Resultados en asociacin con la seccin de hematologa del Laboratorio Central.

Consiste en analizar diariamente una muestra de sangre proporcionada por la seccin de hematologa del Laboratorio Central. Esta muestra es procesada como una muestra ms de la rutina. Los resultados son remitidos a la seccin de hematologa para su anlisis.

Esta muestra de control es procesada, en seccin hematologa, en dos auto analizadores hematolgicos (Celldyn 3500 y Micros ABX) y comparados sus resultados entre los tres analizadores y con la medicin del hematocrito procesado manualmente.

El anlisis de calidad de los resultados de la muestra control, se relaciona con la reproducibilidad de resultados entre los distintos equipos, considerando el hematocrito manual y la verificacin microscpica de la muestra.

La comparacin de resultados de muestras de control, con resultados de equipos de seccin de hematologa, se basa en la calibracin de estos con calibradores comerciales y controles comerciales.

Verificacin de constantes hematolgicas con relacin al programa de control interno del equipo.Programa de la media X B.Permite revisar los valores para VCM, HCM y CHCM calculados segn el mtodo Levey-Jennings para grupos de 20 muestras. La impresin del reporte proporciona una grfica de los resultados.

INTERFERENCIASLos resultados del examen pueden verse interferidos por la presencia de diferentes elementos de la siguiente forma:

WBC:falso incremento por crioglobulinas, heparina, protenas monoclonales,eritroblastos, agregados plaquetarios, falso descenso por cogulos, clulas atpicas, uremia + inmunosupresores. RBC: falso incremento por crioglobulinas, macroplaquetas, hemlisis,policitemia, falso descenso por crioaglutininas, microcogulos, clulas microcticas. HGB:falso incremento por crioglobulina, carboxihemoglobina, hemlisis, hiperbilirrubinemia, lipemia severa, falso descenso por microcogulos. Hematocrito: falso incremento por crioglobulina, macroplaquetas, hiperglicemia (600 mg/dl),falso descenso por cogulos, hemlisis. PLT: falso incremento por crioglobulinas, hemlisis, hemates microcticos, falso descenso por macroplaquetas, heparina, agregados plaquetarios.

PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO PARA CALCULAR RESULTADOS

El equipo realiza la medicin directa, por impedancia y colorimetra de:

Glbulos rojos (RBC). Glbulos blancos (WBC). Plaquetas (PLT). Concentracin de hemoglobina (HGB).

Los resultados para Parmetros derivados, se obtienen de datos de distribucin de elementos medidos (histogramas):

Porcentaje de Linfocitos (% L) Porcentaje de Granulocitos (%G) Volumen corpuscular medio (MCV)

Los Parmetros calculados de los datos medidos y derivados son: Nmero total de Linfocitos (LYN) Nmero total de Granulocitos (GRAN) Hematocrito (HCT) Hemoglobina corpuscular media (MCH) Concentracin de Hb corpuscular media (MCHC)

Clculo de Hematocrito:Es la razn de eritrocitos en un volumen de plasma y se expresa como porcentaje del volumen de sangre total. HCT = RBC x VCM 10Clculo de hemoglobina corpuscular media: Expresa el contenido medio de Hb que hay los hemates. Se expresa en picogramos. HCM=Hb (gr/lt ) x 10 RBCClculo de concentracin de Hb corpuscular media: Es la razn entre la hemoglobina respecto al hematocrito. Indica la concentracin de Hb en el promedio de los eritrocitos.

CHCM = Hb x 100 HCTREPORTE E INTERPRETACIN DE RESULTADOSEl reporte incluye los siguientes parmetros:

1.- Nmero de hemates: por medicin directa se obtiene el nmero de GR por volumen.

2.- Concentracin de Hb: por medicin directa por espectrofotometra (mtodo de la cianmetahemoglobina). El valor puede estar falsamente aumentado en hiperleucocitosis. Se utiliza para la valoracin de anemia.

3.- Volumen corpuscular medio (VCM): derivado de histograma de distribucin, representa la media del volumen de los hemates. Define la micro-normo-macrocitosis.

4.- Hematocrito: es la relacin entre el volumen de los hemates respecto a la sangre total. Se obtiene de multiplicar el VCM por el nmero de hemates. Es discretamente inferior al obtenido por centrifugacin. Se utiliza como indicador de anemia, hemorragia, hemoconcentracin, etc.

5.- Hemoglobina corpuscular media (HCM): resulta de dividir la concentracin de Hb por el nmero de hemates. Se usa como marcador hipocroma.

6.- Concentracin de Hb corpuscular media (CHCM): es la cantidad de hemoglobina que hay en un decilitro de hemates. Su valor normal es 34 y la desviacin standard de 2 %. La CHCM es el mtodo ms til para detectar la deshidratacin del eritrocito. En la microesferocitosis familiar est sobre 36 (mg/dl) en el 50% de los casos. La CHCM disminuida bajo 30 %, se considera marcador de hipocroma y se ve en condiciones que llevan a una sntesis insuficiente de Hb.

7.- Nmero de plaquetas: se mide directamente el nmero de plaquetas por volumen.

8.- Nmero de leucocitos: es el conteo de clulas de determinado tamao que resisten el procedimiento de lisis especfica para los hemates. Se mide directamente.

9.- Frmula leucocitaria: Derivado de histograma, corresponde al porcentaje de linfocitos y granulocitos.

Neutrfilos elevados, acompaado de fiebre, indica probabilidad de infeccin por bacterias. Neutrfilos disminuidos pueden deberse a infeccin severa, reaccin a drogas, irradiacin o acompaar ciertos tipos de anemia.

Linfocitos elevados se asocia ms frecuentemente con infeccin viral. Pero tambin esta elevacin se observa en cuadros hematolgicos como la Leucemia de tipo linfoide.Una correcta interpretacin del examen, en funcin de los hallazgos clnicos, permite una orientacin diagnstica en muchos casos, tambin constituye en otros, un importante elemento en el pronstico y tratamiento.

La concentracin de eritrocitos, leucocitos y plaquetas en la sangre vara con la edad y sexo.

En clnica pueden observarse aumentos o disminuciones patolgicas de los niveles de estos elementos que no siempre obedecen a enfermedades del sistema hematopoytico. Tambin se observan fluctuaciones de orden fisiolgico como en el embarazo, el ejercicio, stress o ritmo circadiano.

El aumento de la concentracin de eritrocitos, de contenido hemoglobnico normal, suele acompaarse del aumento de la concentracin de hemoglobina y se denomina poliglobulia. Cuando el aumento de la concentracin de eritrocitos se acompaa de disminucin del contenido hemoglobnico, se habla de pseudo- poliglobulia. La pseudo-poliglobulia puede acompaarse de microcitosis e incluso anemia, como por ejemplo en la talasemia, anemia ferropnica (pseudopoliglobulia microctica).

El descenso de la concentracin de eritrocitos en sangre se acompaa siempre de la disminucin de la concentracin de Hemoglobina (anemia) y puede obedecer a una prdida por hemorragia, a hemlisis o a una falta en su formacin a nivel de la mdula sea.El aumento de la concentracin de leucocitos se denomina Leucocitosis y puede obedecer a muchas causas, entre las que destacan los procesos infecciosos e inflamatorios agudos y crnicos. Cuando se utilizan sistemas automatizados de recuento, debe tenerse presente que estos no diferencian entre eritroblastos y leucocitos (debido a que ambas clulas tienen ncleo), por lo que si en la observacin microscpica del frotis se aprecia una cifra de eritroblastos superior al 10 % se debe proceder a una correccin del recuento leucocitario:Leucocitos reales = Leucocitos contados x 100 Eb (por 100 leucocitos)+ 100 Donde Eb: eritroblastosLa disminucin de concentracin de leucocitos se denomina leucopenia y en caso de insuficiencia medular grave (aplasia medular) se acompaa casi siempre de anemia y trombocitopenia. La leucopenia afecta siempre la totalidad de los leucocitos circulantes, en especial los ms abundantes (neutrfilos y linfocitos).

La disminucin selectiva de granulocitos neutrfilos se llama agranulocitosis o neutropenia y la de linfocitos, linfopenia. Debe descartarse que una leucopenia aislada de evolucin prolongada sea el primer signo de una enfermedad hematolgica grave (leucemia, linfoma o anemia refractaria).

El aumento de la concentracin de plaquetas se denomina trombocitosis, mientras que su disminucin se denomina trombopenia.Utilidad clnica de los ndices eritrocitarios:Anemia microctica: VCM < 80 fLAnemia macroctica: VCM > 100 fLAnemia normoctica: VCM = 80 100 fLAnemia hipocrmica HCM < 30 pg

Causas de anemia microctica-hipocrmica:Ferropenia o carencia de hierro, talasemia.Causas de anemia macroctica:Dficit de vitamina B12 o acido flico, hepatopatas crnicas, alcoholismo, tabaquismo.La determinacin de CHCM es til para detectar aumentos de la concentracin hemoglobnica intraeritrocitaria, ya que en este caso es siempre superior a 35 g/dL. El aumento de la CHCM nunca obedece a un aumento de la sntesis de Hb, sino siempre a una alteracin de la membrana o del contenido acuoso del eritrocito: disminucin de la relacin entre la superficie y volumen eritrocitario (esferocitosis) o prdida de agua deshidratacin eritrocitaria (xerocitosis).

VALORES DE REFERENCIA

EDADWBC(K/Ul)RBC(M/uL)HGB(g/dl)Hto(%)VCM(fL)HCM(pg)CHCM(g/dl)Plaq(K/uL)

0-2 sem

9.0-30.04.1-6.114.5-24.544-6498-11234-4033-37150-450

2-8 sem5.0-21.04.0-6.012.5-20.539-5998-11230-3632-36150-450

2-6 mes

5.0-19.03.8-5.610.7-17.335-4983-9727-3331-35150-400

6m-1a

5.0-19.03.8-5.29.9-14.529-4373-8724-3032-36150-400

1- 6 a5.0-19.0

3.9-5.39.5-14.130-4070-8423-2931-35150-400

6-16 a4.8-10.8

4.0-5.210.3-14.932-4273-8724-3032-36150-400

16-18 a4.8-10.8

4.2-5.411.1-15.734-4475-8925-3132-36150-400

>18 a h5.0-10.0

4.5-5.514.0-17.442-5284-9628-3432-36140-400

>18 a m5.0-10.0

4.0-5.012.0-16.036-4884-9628-3432-36140-400

FUENTES POTENCIALES DE VARIABILIDAD

Temperaturas sobre 30 grados Celsius pueden concentrar los reactivos, porevaporacin alterando los resultados. Temperaturas menores de 15 grados pueden precipitar o inactivar los reactivos.

Voltaje red elctrica. El equipo trabaja con 220 voltios y 50 Hertz. Grandes oscilaciones de voltaje de la red pueden alterar los recuentos. Equipos de rayos X. fotocopiadoras, computadoras, centrfugas no deben ser instaladas cerca del CELLDYN para prevenir interferencias.

NOTAS ADICIONALES

En caso de prdida de presin de vaco del sistema, descubrir el panel frontal y llenar manualmente la copa de dilucin con reactivo diluyente (15 ml aprox.), luego pulsar Run.

1.4 Frotis sanguneo; recuento diferencial de leucocitos

Significado clnico Evala la distribucin y la morfologa de los glbulos blancos y, de este modo, aporta informacin ms especfica respecto al sistema inmunitario de los pacientes. Es el nmero relativo de leucocitos de cada tipo, en la sangre. Al multiplicar la cifra porcentual de cada tipo por el recuento total, el investigador obtiene el nmero absoluto de leucocitos de cada especie celular. Preferentemente se utiliza el colorante de Wright y una solucin amortiguadora un pH de 6.8.

FundamentoConsiste en que el colorante de Wright, que tiene un carcter cido base que permite teir todas las clulas blancas y distinguirlas mediante el color que toma cada una de ellas.

Procedimiento

1.5 Grupo sanguneo y Rh

Significado clnico Los eritrocitos del hombre, poseen ms de 100 antgenos que se encuentran en la membrana celular, estos antgenos constituyen lo que se llama grupos sanguneos, los cuales estn determinados por numerosos loci genticos.Los sistemas ABO y Rh tienen mayor importancia como causa de reacciones transfucionales.

Sistema ABO: El ms importante de los diversos sistemas de clasificacin de la sangre humana, basado en los componentes antignicos de los hemates. Fue el primero en conocerse gracias a los trabajos de clsicos de Landesteiner quien defini los primeros isoantgenos .Los antgenos presentes en los eritrocitos se denominan aglutingenos y son de los tipos Ay B ,los cuales se heredan de alguna manera que originan diferentes grupos, esto es, una persona puede tener uno de ellos los dos simultneamente ,o ninguno. La expresin en el eritrocito de los antgenos ABO est constituida por un solo gen con tres alelos (A, B y O).Sistema Rh: Los antgenos Rh recibieron este nombre, por haberse identificado inicialmente en los eritrocitos del mono Macacus Rhessius. Fisher y Race sugirieron que los antgenos Rh estn determinados por tres genes: C, D y E con pares de alelos que codifican para cinco determinantes antignicos .El ms importante de estos loci se denomino D: Antgeno D, este es el que determina que una persona sea Rh positivo o Rh negativo, las personas con genotipo DD o Dd son del tipo Rh positivo, en tanto que los individuos con genotipo dd pertenece al tipo Rh negativo.

Fundamento: Los antgenos de los eritrocitos lavados de la muestra de sangre reaccionaran con los anticuerpos de los sueros tipificadores A, B, AB, D. Por medio de una aglutinacin visible.

Procedimiento; mtodo en tubo

INTERPRETACINGrupo Anti A ANTI BAnti AB -Rh

A+-++/-

B -+++/

AB++++/

O---+/

1.6 Determinacin de la variedad Du

Significado clnico Despus de los antgenos A y B del sistema de grupos sanguneos el D es el antgeno de grupo sanguneo ms importante de la rutina de banco de sangre. La prueba de la antiglobulina fue introducida por Coombs, Mourant y Race en 1945 como mtodo para deteccin de anticuerpos incompletos, denominado as porque no puede causar aglutinacin en un medio salino, an en presencia de sus antgenos eritrocitarios especficos .Este es el caso de anticuerpo Rh, que si une al antgeno Rh presente en la superficie del eritrocito, pero es incapaz de producir una reaccin de aglutinacin visible. El fenotipo D- negativo se presenta con una incidencia de aproximadamente 15% en la raza blanca y de 9 a 10% en raza negra .El trmino DU fue originalmente utilizado para descubrir la reactividad variable de ciertas sangres con sueros que contienen Anti-D salino reactivo. Este trmino ha sido reemplazado por el trmino D dbil para descubrir las formas del antgeno D se determina mediante las pruebas de los glbulos rojos y el Anti-D. En ocasiones, los hemates de algunas personas Rh-positivas reaccionan dbilmente en la prueba de tipificacin Rh estndar (D dbil, o Du, positivo), pero siguen considerndose Rh-positivas.Fundamento: La albmina funciona para detectar anticuerpos del sistema Rh (C,D,E,c,e) y el suero de coombs detecta anticuerpos incompletos IgG del sistema Rh .Esto sirve para que sea visible la aglutinacin en caso de que haya reaccin de Ag-Ac.Procedimiento:

INTERPRETACIN

Si hay aglutinacinRh + positivo

Si no hay aglutinacinRh -negativo

1.7 Tiempos de coagulacinLa hemostasia (interrupcin de la salida de sangre de un vaso) est regulada por mecanismos extravasculares (msculo, piel y tejido subcutneo), vasculares (vasos sanguneos) e intravasculares (adhesin plaquetaria, retraccin del coagulo y cuagulacin de la sangre)La Comisin internacional para la Nomenclatura de los Factores de la Coagulacin de la Sangre ha designado numricamente los factores de la coagulacin de la sangre;

El fibringeno y los factores V y VII estn ausentes en el suero sanguneo normal como consecuencia del proceso de coagulacin. La interaccin de los factores de la coagulacin puede desencadenarse a travs de las vas intrnseca o extrnseca.

En el sistema intrnseco se encuentran presentes todos los factores en la sangre, mientras que en el sistema extrnseco est activado por la liberacin de tromboplastina tisular.

Aunque la naturaleza exacta de las secuencias enzimticas del proceso de coagulacin no es clara, se trata sin duda de un proceso de amplificacin biolgica que comienza a partir de la pequea reaccin que implica el contacto tisular a la rpida conversin de fibringeno en fibrina.

Las pruebas de coagulacin de rutina efectuadas en el laboratorio son indicadores de la funcin vascular (fase vascular y adhesin plaquetaria) o de mecanismos de coagulacin intrnsecos.

1.7.1 Tiempo de protrombina

Significado clnicoEs una determinacin analtica que se efecta antes de una intervencin quirrgica para determinar problemas hemorrgicos potenciales, el TP es la determinacin ms usada para controlar la terapia con anticoagulantes orales al ser sensible a los factores VII y X. Las prolongaciones pueden deberse a deficiencias de los factores que integran la va extrnseca clsica. Factores V, II, X, VII y fibringeno a una combinacin de dichos factores o a la presencia de un inhibidor.Fundamento: Se realiza aadiendo una fuente de extracto hstico al plasma citrado, incorporando un exceso de calcio y midiendo el tiempo que tarda en producirse la formacin del cogulo.

Procedimiento

Valores Normales: 8 - 15 segundos

1.7.2 Tiempo parcial de tromboplastina activadaSignificado clnico

Se efecta en plasma citratado mediante la activacin de los factores de contacto; la incorporacin de un preparado fosfolpido estndar como sustituto de las plaquetas y la medicin del tiempo de formacin del cogulo tras la adicin de un exceso de calcio. Se prolonga cuando existe una deficiencia de los factores que intervienen en la va intrnseca clsica precalicrena, CEPM, factores XII, XI, IX, VIII, XV, II y fibringeno o por la presencia de inhibidores contra los factores o complejos de dicha va.

Fundamento: APTT es un reactivo de factor plaquetario 3, conteniendo un activador particulado y un tampn apropiado. Al mezclarse APTT con el plasma, se obtiene un nivel ptimo de factor plaquetario 3 y una activacin uniforme de la muestra. Despus de un determinado periodo de incubacin a 37 C, la reaccin se inicia aadiendo solucin de cloruro de calcio, midindose el tiempo, en segundos, que transcurre hasta la formacin del coagulo.

Procedimiento

Valores Normales: 25 43 segundos.

1.8 Velocidad de sedimentacin globular (VSG)

La velocidad de sedimentacin globular es la velocidad a la cual los eritrocitos se asientan de sangre coagulada en una hora.

La velocidad de asentamiento depende de:

La composicin de protenas del plasma. El tamao y forma de los eritrocitos. La concentracin de los eritrocitos.

El incremento de los valores de las protenas del plasma (principalmente fibringeno) resulta en una disminucin del potencial zeta (carga negativa) que rodea a los eritrocitos pueden unirse en formacin de pila de moneda y asentarse en el plasma a una velocidad ms rpida.

De igual manera el tamao y la forma de los eritrocitos afectan la velocidad de sedimentacin. Los macrocitos se asientan ms rpidamente que los eritrocitos normales y los microcitos de manera ms lenta .Debido a su forma irregular, los poiquilocitos no pueden formar pilas de monedas y se asientan a una velocidad ms lenta.La concentracin de eritrocitos afecta directamente a la VSG y mientras mayor sea la concentracin de eritrocitos menor es a VSG.El material que se utiliza para esta prueba es el siguiente: Tubo de Wintrobe, pipeta de Wintrobe o Pasteur.

Procedimiento

1.- Realizar toma demuestra en un tubo con EDTA.2.-Antes de empezar la determinacin invierta el tubo con muestra suavemente 30 o 40 veces para mezclar por completo la sangre y el anticoagulante.3.-Enseguida tome sangre del tubo con una pipeta Pasteur, transfirela a un tubo de Wintrobe y llnelo hasta la marca de 0 0 10. Debe procurar que al vaciar la pipeta la punta de sta quede al fondo del tubo e ir vaciando la sangre suavemente, al mismo tiempo que se va retirando la pipeta del fondo.4.-Lleve el tubo de Wintrobe a la gradilla e inicie el conteo de tiempo, dejando reposar la muestra durante una hora.5.- Transcurrida una hora, mida el espacio que ocupa el sobrenadante desde la superficie hasta el borde superior de los eritrocitos sedimentados, haga la lectura en mm.6.- Reporte sus resultados mm/Hora.

Valores de referencia Hombres menores de 50 aos; 0 15 mm/hora Hombres mayores de 50 aos; 0 20 mm/hora Mujeres menores de 50 aos: 0 25 mm/hora Mujeres mayores de 50 aos: 0 30 mm/hora

1.9 Recuento de reticulocitos

Significado clnico La cuantificacin de los reticulocitos presentes en sangre perifrica proporciona un mtodo para evaluar la actividad eritropoytica de la medula sea, la cual se usa en el diagnostico diferencial de anemias y en la vigilancia de la respuesta eritropoytica de un paciente en tratamiento.

Fundamento: Los reticulocitos son eritrocitos, inmaduros no nucleados que contienen RNA residual, que en condiciones normales se encuentran en menos del 1% en el torrente sanguneo, incrementndose ste valor en procesos donde el aporte de oxgeno no es el adecuado.Este tipo de eritrocitos es evidenciado Con el uso de un colorante supravital (nuevo azul de metileno o azul de crecilo brillante) se precipita el ARN ribosmico residual dentro de los reticulocitos. Un eritrocito que contiene dos o ms partculas de material teido de azul es un reticulocito.

Procedimiento1.- Se obtiene la muestra de sangre con EDTA o sangre capilar.2.- Mezclar la muestra adecuadamente invirtiendo el tubo suavemente 30 o 40 veces para mezclar por completo la sangre y el anticoagulante.3.- De la muestra se aaden dos o tres gotas de sangre en un tubo de ensaye seco y limpio.4.- En el mismo tubo se le agregan de igual manera dos o tres gotas de colorante azul de cresilo al 1%.5.- Se mezcla y se incuba a 37C durante 15 a 20 minutos .No se debe pasar de este tiempo.6.- Se vuelve a mezclar y de la suspensin se hacen dos frotis en portaobjetos en la forma habitual, quiz un poco ms delgados.7.- Realizar el recuento de reticulocitos al microscopio de la siguiente manera:- Se escoge una zona del frotis en donde no haya superposicin de glbulos.- Es til contar con un ocular provisto de diafragma ajustable.- Los reticulocitos son de color azul plido y contienen un retculo o material granular azul oscuro, y los glbulos rojos se tien de color azul plido o verde azulado.- Contar el nmero de reticulocitos por 1,00 glbulos y exprselo como el nmero de reticulocitos por 100 glbulos rojos.

Valores normalesDe 0.5 a 1.5 %Recin nacidos hasta 2.5 %

1.10 Prueba de coombs

El Coombs directo se realiza a pacientes en los primeros momentos de una reaccin hemoltica y en el diagnstico de anemias hemolticas autoinmunes, hemlisis inducidas por drogas, y enfermedad hemoltica del recin nacido.

El Coombs indirecto se realiza a pacientes politransfundidos, embarazadas. El Coombs cruzado es una variante del Coombs indirecto y se realiza a pacientes politransfundidos, pacientes con antecedentes de reaccin post transfusional hemoltica y a multparas para escoger sangre compatible.

MaterialReactivos

Centrfuga para tubos de mesa- Aglutinoscopio.- Tubos de ensayo de13x100- Gradillas para tubos de ensayo- Jeringuillas de 10 o 20 mL- Agujas 20 o 21- Torundas- Ligaduras- Aplicadores de madera.Anticoagulante EDTA o heparina- Alcohol al 70% o hibitane alcohlico- Suero de Coombs poliespecfico- Suero de Coombs monoespecfico anti IgG y anti C3d.-Solucin salina

1.10.1 Coombs indirecto y cruzado1. Centrifugue la muestra de sangre 10 min a 3 000 rpm para obtener el suero y decntelo en un tubo debidamente identificado.2. Prepare una suspensin al 2-5 % con la mezcla de hemates O y en el caso del Coombs cruzado utilice una muestra de la sangre a transfundir para preparar la suspensin.3. En un tubo debidamente rotulado aada dos gotas del suero y dos gotas de la suspensin y mezcle bien.4. Prepare un tubo control rotulado C+ (control positivo) y aada en l dos gotas de la suspensin de hemates O y dos de suero hemoclasificador anti-D y mezcle bien5. Incube ambos tubos en un Bao de Mara a 37C por 30 minutos6. Lave tres veces con solucin salina escurriendo totalmente el sobrenadante del ltimo lavado.7. Aada dos gotas de suero de Coombs poliespecfico a cada tubo.8. Centrifugue 1minuto a 1000 rpm.9. Lea desprendiendo suavemente el botn en la lmpara aglutinoscopio.Interpretacin de los resultados Si en la prueba de Coombs directo observa aglutinacin esto indica presencia de anticuerpos y /o complemento unidos a los hemates in vivo, repita nuevamente el procedimiento pero utilizando los reactivos monoespecficos anti-IgG y anti-C3d.Patrones de reaccinReactivos monoespecficos 1 2 3 4_____________________________________________________Anti Ig G + + - -Anti C3 - + + -1.10.2 Coombs directo

Permite demostrar la presencia de anticuerpos incompletos mediante el uso de un segundo anticuerpo, que es una antiglobulina. Se basa en el principio de los ateroanticuerpos contra componentes del suero humano segn la descrita por Mareschi y los principios de la aglutinacin publicados por Landsteiner. Los eritrocitos humanos en presencia de un anticuerpos dirigido contra un antgeno que posean, pueden ser sensibilizadas para no lograr la aglutinacin por la naturaleza misma del anticuerpo o el antgeno en cuestin. El suero antihumano, reaccionar contra la gamma globulina que han sensibilizado a componentes del complemente humano y propiciar la aglutinacin de los eritrocitos.El suero antiglobulina humana (de Coombs) permite reconocer estos glbulos rojos sensibilizados al combinarse con los anticuerpos globulinicos que ya cubren su superficie, con lo cual se produce la aglutinacin. Puesto que el suero contiene globulinas que neutralizan muy rpidamente los anticuerpos antigobulinas humanas (de Coombs), es evidente que para identificar los glbulos sensibilizados es absolutamente necesario remover la totalidad del suero de los glbulos mediante lavados repetidos (tres cuando menos) con grandes volmenes (50 a 100 veces el volumen de los glbulos rojos) de suero fisiolgico estril.

ProcedimientoLa muestra empleada es suero del paciente.1. Preparar glbulos rojos del grupo O Rh positivos, lavados y resuspendidos al 5%. 2. Agregar en un tubo 2 gotas de suero del paciente y 1 gota de glbulos rojos del grupo O Rh positivos al 5%. 3. Centrifugar por 15 segundos a 3400 rpm. 4. Observar si hay o no aglutinacin. Si no la hay proceder a la fase de albmina. 5. Agregar dos gotas de albmina (potenciador) al tubo de la reaccin negativa. 6. Incubar 30 minutos a 37 C y centrifugar durante 15 segundos a 3400 rpm. li>Observar si hay o no aglutinacin. Si no la hay proceder a la fase de Coombs. 7. Lavar esta mezcla tres veces con solucin salina. 8. Agregar 2 gotas de suero de coombs a cada tubo. Centrifugar y leer. 9.Comprobar las pruebas negativas con clulas control de coombs.

Interpretacin de los resultadosSi la prueba con las clulas control de coombs es positiva:

Demuestra que la tcnica de lavado fue correcta y que el reactivo de antiglobulina tiene actividad anti IgG y por lo tanto la prueba es vlida. Si la prueba de control es negativa la prueba queda invlida y debe repetirse. Clulas control de coombs: 4 gotas de anti D + 4 gotas de solucin salina + 4 gotas de glbulos rojos Grupo O Rh positivo. Incubar 1 hora a 37 C. Lavar 4 veces con solucin salina. Reconstituir con 2ml de solucin salina

2.- Departamento de serologa e inmunologa

La inmunologa se inicio como una rama de la microbiologa medica, relacionada con el estudio de la resistencia a las enfermedades infecciosas. En la actualidad, empero, se le reconoce por meritos propios como un campo de la investigacin biomdica, sin limitarla de ninguna manera a la zona de las infecciones .En realidad el termino inmunidad, tal como lo usan los inmunlogos, ya no implica necesariamente una respuesta que resulte protectora para el individuo.

Puede considerarse a la inmunidad como un estado de respuesta alterada ante una sustancia especifica, a causa de un contacto anterior con dicha sustancia.

El sistema inmunitario normal tiene como fusin la vigilancia fisiolgica ininterrumpida. Protege al cuerpo de la invasin de microorganismos y conserva la homeostasia al regir la degradacin celular normal y la eliminacin de clulas lesionadas. Tambin identifica y elimina clulas anormales que surgen continuamente en el interior del cuerpo.

Los estudios de disfuncin inmunitaria poseen enorme importancia clnica. El numero de estudios inmunolgicos para estudiar reacciones antgeno-anticuerpo ha aumentado rpidamente desde 1975, hasta nuestros das. Las pruebas existentes se modificaron o fueron substituidas por otras que reflejan nuevos datos y tcnicas .Los estudios recientes de la respuesta inmunitaria mediada por clulas y sus componentes se crearon con base en la aplicacin de la inmunopotenciacin, inmunosupresin e inmunomodulacin, en la teraputica clnica. Los mecanismos de defensa inespecficos y especficos protegen al cuerpo contra el ataque de elementos no propios.

La determinacin de este tipo de pruebas son de utilidad para diagnostico de enfermedades de transmisin sexual, problemas de articulacin, infecciones por microorganismos, y la deteccin de embarazo. Se cuenta con personal capacitado y con experiencia para la realizacin de todas estas pruebas.

2.1 Factor reumatoide

Significado clnico

El factor reumatoide es el termino para describir el grupo de autoanticuerpos con actividad anti-IgG; aproximadamente, el 80%-90% de los pacientes con artritis reumatoide tienen anticuerpos IgG. Estos anticuerpos, llamados factor reumatoide (anti.IgG), tambin se ven en la endocarditis bacteriana, quistosomiasis, lepra, osteomielitis, y otras infecciones crnicas. Tambin se encuentra en algunos pacientes con otras enfermedades del tejido conectivo. Aunque la presencia de este anticuerpo en el suero no causa la enfermedad, el factor reumatoide, locamente producido en las articulaciones, puede producir efectos y formacin de complejos inmunes, pudiendo provocar una respuesta inflamatoria.Un 80% de los pacientes con artritis reumatoide tiene un factor reumatoide en su sangre.

Fundamento: el factor reumatoide es un anticuerpo circulante que reacciona con algunos componentes de inmunoglobulinas, generalmente es un anticuerpo IgM (19 S) que reacciona con inmunoglobulinas de origen animal, humano o autlogas (las propias IgG del paciente). La prueba de aglutinacin con partculas de latex es el mtodo ms comn, en donde la gamma globulina agregada es absorbida sobre partculas de latex que se aglutinan en presencia de factor reumatoide; esta no es una prueba muy especifica pero si es muy sensible.

Procedimiento; prueba cualitativa

1. Utilizar reactivos y muestras a temperatura ambiente.2. Preparar una dilucin 2:20 del suero problema, diluyendo 0.05 ml del suero con 1 ml de solucin amortiguadora.3. Poner una gota (aprox. 0.05 ml) del suero diluido en las reas marcadas de la laminilla.4. Aadir una gota del reactivo de ltex al suero problema.5. Mezclar con un aplicador.6. Agitar durante 2 minutos.7. Observar inmediatamente la aglutinacin utilizando una fuente de luz directa.

Interpretacin-Positivo; Aglutinacion visible de las partculas de latex.-Negativo; No aglutinacin o una ligera granulosidad que no excede a la observada en el control negativo.

Nota; Si hay aglutinacin realizar las siguientes diluciones: 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:34 y multiplicar (2.5) (Dilucion)=Resultado verificado por duplicado.

Si no hay aglutinacin reportar: < 2.5 ul/ml

2.2 Protena C reactiva

Significado clnico Durante las infecciones se incrementa la concentracin srica de ciertas protenas, llamadas protenas de fase aguda. Una de stas es la protena C reactiva (PCR) llamada as porque se une a la protena C de los neumococos. La PCR fue descrita por primera vez en 1931 por Tillet y Francis, quienes reportaron una reaccin de presipitacion que poda ser demostrada en el suero de pacientes que padecan neumona lobular por cepas de neumococos.El extracto de neumocccico era un carbohidrato denominado C, y la protena humana selectiva capaz de precipitar se le denomino protena C reactiva. Independientemente de le neumona lobular, la PCR se ha asociado a una gran variedad de enfermedades infecciosas, a procesos inflamatorios no infecciosos y a ciertos padecimientos malignos.

Fundamento: la prueba es usada frecuentemente para monitorear la actividad en pacientes con fiebre reumtica y artritis reumatoide. La prueba de PCR ltex consiste en usar molculas inertes biolgicamente de poliestireno ltex que son sencibilizadas con anti-PCR de origen animal. La PCR presente en el suero del paciente sirve como antgeno y cuando se mezcla con el reactivo de ltex sensibilizado se produce una aglutinacin detectable macroscpicamente.

Procedimiento; Mtodo cualitativo en placa.1. Utilizar reactivos y muestras a temperatura ambiente.2. Depositar 0.95 ml de diluyente glicina salina diluido (de acuerdo a las instrucciones del fabricante) en un tubo de ensaye.3. Aadir a este tubo 0.05 ml del suero problema para asi obtener una dilucin 1:20 y estar lista para su uso.4. En un anillo de la placa depositar 0.05 ml del suero diluido.5. Mezclar el reactivo PCR ltex hasta tener una suspensin homognea y aadir una gota del reactivo de ltex a cada suero.6. Mezclar con un aplicador diferente para cada muestra.7. Agitar la placa durante dos minutos.8. Observar inmediatamente la aglutinacin utilizando una fuente de luz directa.

Interpretacin -Positiva: aglutinacin visible en las partculas de ltex similar a la del suero control positivo.-Negativo: No aglutinacin o una ligera granulosidad que no exceda a la observada e en el control negativo.

2.3 Prueba de V.D.R.L.

Significado clnico La prueba VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) es una reaccin de floculacin que utiliza cardiolipina para revelar la presencia de anticuerpos anti-Treponemas,y hacer el diagnstico de la sfilis. Sin embargo, la prueba VDRL no es especfica para demostrar la presencia de anticuerpos anti-Treponemas, puesto que la cardiolipina se obtiene del corazn de bovinos. A pesar de que la prueba solo permite el diagnstico de un 75% de los casos de sfilis primaria y de que puede dar reacciones falsas positivas con los anticuerpos anti-DNA, la cardiolipina continua siendo un reactivo til para el diagnostico de la sfilis por las dificultades que existen para cultivar in vitro el Treponema Pallidum.

Fundamento: Las "reaginas", presentes en individuos infectados por T. pallidum se detectan en suero por la reaccin con un antgeno cardiolipnico purificado y estabilizado. Si la muestra contiene reagina, sta se unir al antgeno produciendo una floculacin visible en microscopio. Las reacciones inespecficas se evitan con el empleo de antgeno altamente purificado y el agregado de cloruro de colina caracterstica de la tcnica USR (Unheated Serum Reagin) en la que no es necesario inactivar la muestra.

ProcedimientoTanto los reactivos como la muestra deben estar a temperatura ambiente antes de realizar la prueba.

I- PRUEBA CUALITATIVA EN SUERO O PLASMA1. En cada uno de los sectores delimitados de la placa colocar: Muestra; 50 ulCon gotero provisto colocar: Antgeno; 1 gotaAgitar horizontalmente la placa a 180 rpm durante 4 minutos. Observar inmediatamente en microscopio con poco aumento (60 a 100 X).

II- PRUEBA SEMICUANTITATIVA EN SUERO O PLASMA1. Preparar diluciones de la muestra 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 y 1:32 con solucin fisiolgica y realizar para cada dilucin la prueba como se describe en I.

III- PRUEBA CUALITATIVA PARA LCR1. Diluir el Antgeno 1:2 con solucin de cloruro de sodio 10 g/dl. Emplear dentro de las 2 horas de preparacin.2. En cada sector delimitado de la placa colocar: Muestra 50 ulCon aguja calibre 6 agregar: Antgeno diluido 1 gota (10 ul)3. Mezclar bien y agitar horizontalmente la placa durante 8 minutos a 180 rpm. 4. Leer los resultados en microscopio con poco aumento (60 a 100 X).

Interpretacin de los resultados

-Reactivo: presencia de floculacin.-No reactivo: ausencia completa de floculacin.Prueba semicuantitativa: el ttulo estar dado por la inversa de la ltima dilucin que se observe reactiva. Leer atentamente las LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO.

METODO DE CONTROL DE CALIDAD

Para controlar la calidad del sistema procesar un Control Positivo (suero seguramente reactivo) y un Control Negativo (suero seguramente no reactivo) utilizndolos de la misma forma que las muestras.LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. Resultados falsamente positivos pueden ser observados en individuos con cuadros patolgicos diversos como hepatitis, influenza, brucelosis, lepra, malaria, asma, tuberculosis, cncer, diabetes y enfermedades autoinmunes.Estos casos no son muy comunes y generalmente presentan reacciones con ttulos bajos y una historia clnica que no coincide con las caractersticas de sfilis. Es imprescindible por estos motivos ante toda prueba cualitativa reactiva realizar la prueba semicuantitativa.Resultados falsamente negativos pueden observarse cuando se presenta el fenmeno de prozona. Por este motivo se recomienda repetir la prueba en suero diluido 1:5 con solucin fisiolgica para verificar el resultado. Si en estas condiciones se observa floculacin la muestra es reactiva.A pesar de las ventajas de este mtodo, sus resultados al igual que los de cualquier prueba serolgica, slo constituyen un dato auxiliar de diagnstico que debe corroborarse con la historia clnica del paciente.

2.4 Reacciones febriles

Significado clnico

La infeccin causada por microorganismos de diversas especies produce entre otros sntomas una marcada elevacin de la temperatura, tal es el caso de la fiebre tifoidea causada por Salmonella typhi, S. Enteritis, as como las paratifoideas causadas por S. Paratyphi A y B; y el Tifo causado por el gnero Rickettsias .La infeccin por estos microorganismos induce a una respuesta inmune de tipo humoral con la produccin de anticuerpos que pueden ser detectados por el antgeno especifico.

Fundamento: La prueba se basa en una reaccin inmunolgica entre los anticuerpos sricos y el antgeno correspondiente como lo son el Tfico O (somtico), Tfico H (flagelar), Paratfico A, Paratfico B, Proteus OX-19; produciendo una reaccin de aglutinacin macroscpica.

Procedimiento: Mtodo Cuantitativo

1.- Obtener la muestra de sangre sin anticoagulante y separar el suero que este bien identificada.

2.- Llevar los reactivos correspondientes a temperatura ambiente y marcar en una placa de vidrio correctamente indicando el antgeno que este usando (O, H, A, B, Proteus OX-19).

3.- Depositar en sitios diferentes de la placa las siguientes cantidades de suero a probar: 0.04 ml, 0.02 ml ,0.01ml, 0.005 ml.

4.- Agitar el antgeno a utilizar y aadir una gota de la suspensin a cada una de las diferentes cantidades de suero.

5.- Mezclar el antgeno y el suero utilizando un aplicador diferente para cada una de las cantidades de suero.

6.- Girar la placa manualmente o utilizando un agitador mecnico (120 rpm) durante dos minutos.

7.- Realizar la lectura utilizando una fuente de luz directa y observar la aglutinacin macroscpica. Reportar de acuerdo a la dilucin que haya llegado.

Interpretacin de los resultados El grado de aglutinacin se registra como sigue:

4+Aglutinacin del 100% de los organismos

3+Aglutinacin del 75% de los organismos

2+Aglutinacin del 50% de los organismos

1+Aglutinacin del 25% de los organismos

-Aglutinacin del 0% de los organismos

El titulo del suero ser la inversa de la dilucin ms alta en donde se observa una aglutinacin del 50 % de organismos (2+)

Volumen del sueroTitulo

0.08 ml1:20

0.04 ml1:40

0.02 ml1:80

0.01 ml1:160

0.005 ml1:320

Valores Normales: Negativos

2.5 Rosa de bengala

Significado clnico Es una prueba de aglutinacin rpida en placa para la deteccin temprana de aglutininas especificas de Brucella (Brucella melitensis, abortus y suis).

Fundamento: Se utiliza un antgeno de Brucella abortus biotipo 1 acidificado regulado y teido con Rosa de Bengala a un pH de 3.65 +/- 0.05 para la deteccin de aglutininas especificas de Brucella.

Procedimiento: 1.- Obtener la muestra de sangre y separar el suero.

2.- Utilizando una pipeta automtica adicione 30 l de la muestra del paciente en un crculo de la placa.

3.- Mezcle bien el antgeno despus coloque una gota sobre el suero y mezcle con un aplicador.

4.- Agitar la placa con movimientos rotatorios por 4 minutos. Y con la ayuda de una fuente de luz directa lea el resultado.

Interpretacin de resultados.La lectura debe llevarse a cabo exactamente a los 4 minutos tomados a partir de que se comenz a mezclar. Este es un tiempo lmite ptimo en el que se da un espacio para la observacin de ciertas aglutininas que se revelen lentamente y que de otra manera se pueden omitir.Si hay cualquier cantidad de aglutinacin es positiva.Si no hay aglutinacin es negativa.

Valores Normales: Negativo

2.6 Prueba inmunolgica de embarazo por inmunoensayo cromatogrfico con partculas de oro coloidal para deteccin de beta hcg en orina o suero.

Significado clnico La gonadotropina corinoica humana (hCG) es secretada normalmente por la placenta .En el embarazo, la secrecin aumenta tiempo despus .La hCG se excreta por la orina y se alcanzan niveles relativamente altos, lo que permite la utilizacin de tcnicas rpidas y simples para la determinacin del embarazo

Durante el tiempo de atraso del ltimo periodo menstrual, los niveles de hCG es suero son de 100mlU/ ml con niveles pico de 100,000 a 200,000 mlU/ ml observados al final del primer trimestre.

Fundamento: El ensayo utiliza una combinacin nica de anticuerpos monoclonales y policlonales, reactivos que detectan selectivamente niveles bajos de hCG en la muestra. La prueba se lleva a cabo mediante la adicin de muestra en la zona de prueba, seguido de la formacin de lneas coloridas en las zonas de la muestra y de control. La muestra migra por accin capilar a lo largo de la membrana y reacciona con los conjugados coloridos.

Procedimiento:

1.- Obtngase la muestra de sangre y separe el suero. O tambin muestra de orina.

2.- Remueva el dispositivo de prueba de su bolsa protectora y pngalo sobre una superficie plana .Identifique el dispositivo con los datos del paciente.

3.- Sosteniendo el gotero desechable e forma vertical, vierta cinco gotas de suero u orina (aproximadamente 0.2 ml) dentro del orificio de muestra.

4.- Lea a los 3 minutos muestras de orina y a los 5 minutos muestras de suero.

NOTA: Dependiendo de la concentracin de HCG, un resultado positivo pude ser observado en tan solo 40 segundos. Sin embargo, para confirmar un resultado negativo, se requiere de esperar 5 minutos. No se deben interpretar los resultados despus de 5 minutos.

INTERPRETACINNegativo. nicamente aparecer una banda de color rosa en la zona de control (C). No aparece banda sobre la regin del paciente (T).Positivo. En adicin a la banda de control, deber aparecer una segunda banda de color rosa en la zona del test (T)No valido. Una total ausencia de color en ambas regiones.

2.7 Determinacin de HIV y HCV

Significado clnicoLa Prueba Rpida de Anticuerpos HIV y HCV detecta cualitativamente la presencia de anticuerpos VIH y HCV en muestras de suero, plasma o sangre completa. Cualquier persona expuesta al VIH o HCV producir los anticuerpos que son indicadores de la infeccin. La deteccin de dichos anticuerpos, representa un resultado positivo (indicando que el individuo est infectado). La ausencia de anticuerpos al momento de la prueba (indicando que el individuo no est infectado) es indicativo de un resultado negativo, sin embargo no descarta totalmente una infeccin de VIH o HCV. Puede llevar hasta tres meses, tras la exposicin al VIH o HCV, el desarrollo de estos anticuerpos.

Fundamento. La prueba se basa en poner en contacto una muestra de suero con un conjugado de Ag viral-oro coloidal (VIH o HCV) embebido en el pocillo de muestra el cual reacciona con los Ac presentes en la muestra formando un complejo Ac-Ag-conjugado, la mezcla emigra a lo largo de la tira de prueba el cual es captado por un Ag de VIH recombinante inmovilizado en una membrana y formando una banda colorida en la regin de prueba.Una muestra negativa no produce una banda colorida debido a la ausencia del complejo conjugado de oro coloidal/anticuerpos (anti-VIH o anti-HCV).Los Ag utilizados en la prueba de conjugado son protenas recombinantes altamente inmunoreactivas de VIH-1 y VIH-2.Una banda coloreada en la regin control aparece al final de la prueba sin considerar el resultado de la prueba. Esta banda control es el resultado de la unin del conjugado de oro coloidal al anticuerpo viral (VIH o VIH) inmovilizado en la membrana. La banda control indica que el conjugado de oro coloidal es funcional.

Procedimiento 1.- No abrir los sobres sellados hasta que se est listo para la prueba. Dejar que los reactivos y las muestras alcancen la temperatura ambiente.2.- Sacar el cartucho de su sobre y colocarlo en una superficie seca.3.- Identificar los cartuchos para cada muestra o control.

4.- Colocar una gota de muestra o control (con el gotero proporcionado) en el pocillo S. 5.- Posteriormente agregar 1 gota del diluyente en el pocillo S (para prueba de VIH) y en el pocillo D (para prueba de HCV).

INTERPRETACION:

POSITIVO: Tanto la banda de prueba como la banda control se colorea de rojo prpura. NEGATIVO: Solo la banda control aparece de color rojo prpura en la membrana. INVALIDO: siempre tendr que haber una banda color rojo prpura en la regin de control independientemente del resultado de la prueba. Si la banda control no se observa la prueba se considera invlida. Repetir la prueba empleando un nuevo cartucho.

C C CC CT T TT T

Positivo Negativo Invlido

3.- Departamento de orinas

Desde hace mucho tiempo se reconoce que las propiedades fsicas y qumicas de la orina constituyen indicadores importantes del estado de salud.

El anlisis de orina incluye el examen del color, del aspecto, de la densidad, del pH, la deteccin de protenas, glucosa, cetonas, sangre oculta, bilirrubinas, nitrito urobilingeno, as como el examen microscpico del sedimento.

Los principales constituyentes de la orina son agua, urea, cido rico, creatinina, sodio, potasio, cloro, calcio, magnesio, fosfatos, sulfatos y amoniaco. En 24 horas el organismo excreta aproximadamente 60g de material disuelto, la mitad de la cual esta constituida por urea. En algunos procesos patolgicos aparecen en gran cantidad, sustancias tales como cuerpos cetnicos, protenas, glucosa, porfirinas y bilirrubina. La orina tambin puede contener estructuras como cilindros, cristales, clulas sanguneas y clulas epiteliales.

Entre las enfermedades urolgicas que el anlisis de orina ayuda a diagnosticar pueden mencionarse la cistitis (inflamacin de la vejiga), la nefritis (inflamacin del rin que puede presentarse con infeccin bacteriana, pielonefritis o sin ella, glomerulonefritis) y la nefrosis (degeneracin del rin sin inflamacin).

Significado clnicoLa orina es un material que permite obtener una considerable informacin, de forma rpida y econmica. Los anlisis de orina deben realizarse de forma cuidadosa y perfectamente controlada. El estudio de la orina puede plantearse desde dos puntos de vista: diagnostico de enfermedades renales o de tracto urinario y para la deteccin de enfermedades metablicas o sistmicas no directamente relacionadas con el sistema urinario.

Fundamento: La orina es una solucin acuosa de sustancias orgnicas e inorgnicas, de las cuales la mayor parte, son de desecho del metabolismo celular .Las tiras reactivas Ames Bayer para uroanalisis son bases plsticas en las que hay adheridas diversas reas reactivas para determinar glucosa, bilirrubina, cetona, gravedad, pH, leucos, etc. Los resultados obtenidos proporcionan informacin referente al metabolismo de carbohidratos, funcin heptica, y renal, balance cido base e infecciones del tracto urinario.

3.1 Recoleccin de la muestra de orina 0. La muestra deber recolectarse en un recipiente estril, limpio y seco, de preferencia deber ser la primera de la maana por ser la ms concentrada y a mitad de chorro, a fin de evitar su contaminacin por alguna descarga hemorrgica.0. El anlisis de la orina recolectada en 24 hrs. Y adecuadamente conservada, proporciona una medida cuantitativa ms exacta de la excrecin de protena y otros constituyentes.0. La cateterizacin se considera como un procedimiento innecesariamente peligroso, debido a riesgo de que cause infecciones genitourinarias y pielonefritis. A veces puede ser necesario taponar la vagina, pero las muestras de orina libremente emitidas son preferibles.0. La orina debe examinarse siempre fresca, de ser posible, dentro de los 30 minutos siguientes a su emisin y a una temperatura no menor de 20 C. 0. Evitar la presencia de conservadores o diluyentes, rotular con los datos completos del paciente.

3.2 Examen fsico de la orina

El examen fsico se debe realizar en la muestra previamente agitada y sin centrifugar.

Color

La orina normal presenta una amplia gama de colores, lo cual est determinado por su concentracin. El color puede variar de un color amarillo plido a un mbar oscuro, segn la concentracin de los pigmentos urocrmicos.

Sin embargo existen muchos factores y constituyentes que pueden alterar el color normal de la orina, incluyendo medicamentos as como productos qumicos. En el siguiente cuadro se presentan algunas sustancias que pueden influir en el color.

SUSTANCIAS QUE PUEDEN COLOREAR LA ORINA

COLORPATOLGICASNO PATOLGICAS

BlancoQuiloPus (muchos leucocitos)Fosfatos

Amarillo a anaranjadoBilirrubinaUrobilinaAcriflavinaAzo-GanstrisinColorantes de alimentosNitrofurantoninaOrina concentradaPyridiumQuinacrinaRiboflavinaRibarboSena Serotonina

Rosado a rojoEritrocitos HemoglobinaMioglobinaPorfobilinaPorfirinasAminopirinaAntipirinaBromosulftaleinaCascaraColorantes de alimentosFenacetinaFenolftaleinaMetildopaRemolacha

Rojo a castao a prpuraPorfobilinaPorfobilinogenoUroporfirina

Castao a negrocido homogentisicoBilirrubinaFenol MelaninaMetahemoglobinaMioglobinaPorfirinasCompuestos de hierroCloroquinaHidroquinonaLevodopaMetildopaNitroforantoinaQuininaResorcinol

Azul a verdeBiliverdinaInfeccin por pseudomonasAcriflavinaAmitriptilinaAzul de EvansAzul de metilenoAzur AComplejo de vitamina BCreosotaFenil salicilatoTimolTolonioTriampireno

Si bien algunos laboratorios ya no informan mas sobre el color de la orina, no deben subestimarse las pistas dadas por las caractersticas fsicas. Debera informarse siempre sobre todo color muy anormal, como negro o castao, as como tambin la presencia de orinas rojas con lectura negativa para sangre oculta.

AspectoLa orina habitualmente es clara pero puede tornarse turbia por precipitacin de partculas de fosfato amorfo en orinas cidas. La orina puede ser turbia por presencia de leucocitos o de clulas epiteliales. Las bacterias pueden causar turbidez. El moco puede dar a la orina un aspecto brumoso.

OlorExisten solo unas pocas sustancias donde el olor de la orina tiene importancia. Las cetonas pueden concebirle un olor dulce o a frutas. Una muestra contaminada con bacterias puede tener un olor picante. Se dice que la orina de un lactante con fenilcetonuria tiene un olor rancio o a ratn. El olor de orina que se asemeja al de pies sudados se encuentra en la acidemia isovalerica o en individuos que presentan cantidades excesivas de cido butrico o hexanoico. La hipermetioninemia a sido asociada con un olor a manteca rancia o a pescado.Peso especificoEl peso especifico es la relacin o cociente entre el peso de un volumen de orina y el peso del mismo volumen de agua destilada medidos a una temperatura constante. Constituye un ndice de la concentracin del material disuelto en la orina. El peso especfico se utiliza para medir el poder concentrador y diluyente del rin en su esfuerzo por mantener la homeostasis en el organismo.El intervalo normal para una muestra tomada al azar es de 1.003 1.035 aunque en casos de hidratacin excesiva la lectura puede llegar a 1.001 (el valor del agua es 1). El valor vara enormemente segn el estado de hidratacin y el volumen urinario. El rango para la muestra de 24 hrs. es de 1.015 1.025.

3.3 Examen qumico de la orina

El anlisis de orina incluye pruebas qumicas para pH, protenas, glucosa, cetonas, sangre oculta, bilirrubinas, nitrito y urobilingeno. Estos procedimientos pueden ser mediciones cualitativas (positivos o negativos) o semicuantitativas (por ejemplo, de trazas de 4+).Desde la introduccin de tiras reactivas simples y mltiples el examen qumico de la orina se ha convertido en un procedimiento sensible y rpido. Actual mente es posible analizar hasta 9 pruebas diferentes en menos de 60 segundos.Una tira reactiva es esencialmente una banda angosta de plstico con pequeos tacos adheridos. Cada taco contiene reactivos para una reaccin diferente. El procedimiento para usar las tiras reactivas es el siguiente:

1) Sumergir completamente las reas de prueba de la tira en orina fresca, bien mezclada y sin centrifugar y retirar la tira en forma inmediata.2) Eliminar el exceso de orina en la tira.3) Comparar las reas reactiva con la correspondiente carta de colores del envase.

pH URINARIO El pH de la orina esta determinado por la concentracin de H+ libre.Como el pH es la reciproca de la concentracin de ion hidrogeno (H+), a medida que la concentracin de este ion aumenta, el pH disminuye y viceversa. El pH de la orina puede variar entre 4.6 y 8, pero en promedio se encuentra alrededor de 6.

Tiras reactivasUtilizan dos indicadores, el rojo de metilo y el azul de bromotimol, que cubren la escala de pH entre 5 y 8, 5 o 9. Los colores van del anaranjado al amarillo y del verde al azul.

PROTEINAS En el rin normal solo una pequea cantidad de protenas de bajo peso molecular se filtra en el glomrulo. La mayor parte de la protena filtrada se reabsorbe en lo tbulos; se excretan