Replicación del ADN

Secuencia de bases idénticas

La replicación es semiconservativa

Replicación del cromosoma bacteriano

Horquilla de replicación

Cadena líder y cadena retrasada (cadena contínua y cadena discontínua)

La replicación es bidireccional

ADN polimerasas de bacterias

Las ADN polimerasas catalizan la reacción

Alta precisión en la polimerización

Actividad de exonucleasa (3´--5´)

Por qué no existen polimerasas que catalicen en dirección 3´---5´

ADN primasa

Síntesis de la cadena retrasada o discontínua

ADN ligasa

ADN helicasa

Rompe los puentes de hidrógeno entre las bases

Estructura de las helicasas

Proteínas de unión a cadena sencilla (SSB)

Pol I Pol II pol III

gen pol A polB polC

PM (kDa) 103 90 130

mol/cél. 400 100 10

Vmax 20 nt/s 3 nt/s 750 nt/s

3' exonucl. + + no

5' exonucl + no no

procesiv. 3-200 10000 500000

ADN polimerasas de E. coli

DNA pol I: en la replicación, sustituye el ARN (cebador) por ADN

ADN superenrollado.

DNA topoisomerasa I

Topoisomerasas tipo II (DNA Girasa) participan en la terminación de la replicación de moléculas circulares.

Modelo del dímero

El origen de replicación •  ¿cómo es la señal en el ADN que marca el

origen? •  ¿qué proteínas reconocen esa señal? •  ¿es un sitio único? •  ¿cómo se regula el inicio de la síntesis de

ADN a partir del origen?

¿Qué particularidad tiene el ADN en el sitio de inicio de la replicación?

3 secuencias repetidas directos, de 13 pb, ricas en AT

4 repetidos inversos, de 9 pb

OriC

Modelo de la iniciación de la replicación en oriC, en E. coli

DnaA DnaB helicasa, DnaC DnaG primasa SSB

Proteínas que interactúan con el ADN en el sitio de inicio de la replicación:

ATP

En dependencia de la polaridad que presente la secuencia Ter y por tanto la ubicación de la proteína Tus se detendrá en una u otra horquilla de replicación. La unión de la proteína Tus a la secuencia consenso frena a la horquilla de replicación correspondiente.

Terminación en procariontes

Origen de replicación en eucariotas

Origen de la replicación en eucariontes

Los cromosomas eucariontes tienen múltiples origenes de replicación

No todos los orígenes de replicación se activan al mismo tiempo

ADN polimerasas en células eucariotas

¿Cómo completar la replicación de genomas lineales?

Telomerasa

Las células controlan el tamaño de su telómero