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ARTICULO CIENTIFICO “COLORANTES NATURALES OBTENIDOS A PARTIR DE Coussapoa villosa (UVILLA), Syzygium malaccence (POMARROSA) Y Simira ruben scen s (PUCAQUIRO)” Por: Alenguer Alva, Karina Arzubialdes-Gonzáles, Ana María Díaz Reátegui IQUITOS – PERU 2009

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ARTICULO CIENTIFICO COLORANTES NATURALES OBTENIDOS APARTIR DE Coussapoa villosa (UVILLA), Syzygium malaccence (POMARROSA) Y Simira rubenscens (PUCAQUIRO) Por: Alenguer Alva, Karina Arzubialdes-Gonzles, Ana Mara Daz Retegui IQUITOS PERU 2009 COLORANTES NATURALES OBTENIDOS APARTIR DE Coussapoa villosa (UVILLA), Syzygium malaccence (POMARROSA) Y Simira rubenscens (PUCAQUIRO)Por: Alenguer Alva, Karina Arzubialdes-Gonzles, Ana Mara Daz Retegui* RESUMEN Delacscaradelosf rutosdelasespeciesSyzygiummalaccence(pomarrosa), Coussapoavillosa(uvilla)ydelamaderadelaespecieSimirarubenscens (pucaquiro),f ueronextradoscondisolventesn-hexano,clorof ormo,etanolyagua.Despusdelaislamientoypurif icacinhastaobtenerloscolorantesnaturalesque f ueronidentif icadasporreaccionesqumicasymedianteespectrometradeUV-Vis. As, dela especie Syzygium malaccence se identif icaron f lavonoides del t ipo f lavonas; Coussapoa villosa f lavonoides del tipo chalconas, auronas y f lavonoles; y de la madera delaespecieSimirarubenscens (pucaquiro), f lavonoidesdeltipochalconas,auronasy f lavonasy quinonas tipo naf toquinonas y antroquinonas. PalabrasClaves:Colorantesnaturales,f lavonoides,quinonas,Syzygium malaccence, Coussapoa villosa, Simira rubenscens ABSTRACT Fromtheskinof thef ruitsof thespeciesSyzygiummalaccence(roseapple), Coussapoavillosa(uvilla)andwoodspeciesSimirarubenscens(pucaquiro)were extractedwithsolventsn-hexane,chlorof orm,ethanolandwater.Af terisolationand purif ication to obtain natural dyes that were identif ied by chemical reactions and by UV-Visspectrometry.Thus,thespeciesSyzygiummalaccenceidentif iedf lavonoidstype f lavones;of Coussapoavillosaf lavonoidstypechalcones,andf lavonolsandaurones andwoodworkingSimirarubenscens(pucaquiro),species f lavonoidstypechalcones, aurones and f lavones and quinones type naphthoquinones anthroquinones.Key words:naturalscolorants, f lavonoids,quinones,Syzygiummalaccence,Myrciaria dubia, Coussapoa villosa, Simira rubenscens * Trabajo Final deCarrera para la obtencin delTtulo deIngeniera enIndustriasAlimentarias INTRODUCCI ON Enlaamazonaseencuentranalrededorde7000especiesdif erentesdeplantas,de lascualessegnArce1(2,000)sehanreconocidomsde100plantascon propiedadescoloridas.Lasespeciesmspromisoriasf uerondelaf amiliamirtaceae: Eugeniacfegensis,Syzygiumcumini,Myrciariadubia,queposeenpigmentos antocinicos;especiesdelaf amiliaBixaceae,Rubiaceae,Leguminoseae,Vitaceae,Melastomataceae que proporcionan colorantes de alto valor comercial.LasespeciesCoussapoavillosa(uvilla),Syzygiummalaccence(pomarrosa)y Simira rubenscens (pucaquiro), se encuentran ubicados en la Amazona baja, el f ruto de la uvilla seusa comoalimento,laresinacomoemplastoylasf loreseninf usinparacombatir laictericia; elf rutodelapomarrosaseusacomoalimento, enjugos,dulcesyen almbar,tambincontieneunaltocontenidodehierro;ylamaderadecolorrosaclaro pucaquiroesusadoenlamedicinatradicionalcomoantirreumt icoyestimulante,la extraccinconhidroalcoholquedaunasolucindecolorrojoesutilizadocomo af rodisaco,deningunodeellossehanreportadootrosestudioscient f icos.(Brack, 1999).Enlosaosrecient esseharenovadoelintersencolorantesnaturalespor recienteslimitacionesenelusodealgunossint ticosenalimentos,medicamentosy enproductoscosmticosdebidoasutoxicidad. Sonf recuenteslasdenunciasporel usodecolorantesnoadecuadosenestosproductosdeusohumano,comopor ejemplolapresenciadecolorantessintticosnocivoscomoRhodaminayNaranja Per manenteenlpicesdelabios,odeotroscolorantesnoper mit idosencaramelos, ref rescosygelatinas(Lock,1997).Porotrolado,mientrasqueunoscolorantesnose permitenenunospases,otrossilopermiten;porejemplo,elRojoAllura(RojoN40) yelAzulbrillante(AzulN1)nosonpermitidose nlaUninEuropeaperosen EstadosUnidos (por la Administracin de Alimentos, Medicamentos y Cosmt ica,

1 Arce Hidalgo, Julio. Informacin Personal. 2000 AMC),mientrasqueenloscolorantescarmoisina( E122)yelponceau4R(E124), sucede lo contrario. (Toyof a y Garca, 1996). Loscolorantesnaturalesvienensiendoutilizadosenlapreparacindealimentosy bebidasporsiglos,posteriormente,cuandoseempezausarengrandescantidades f ueronreemplazadosporcolorantesartif icialesenlapreparacinyprocesamientode aliment os en f orma industrial, ya que estos son f ciles de obtenerse a bajo costo. Lasespeciesvegetalescitadascrecenenchacras,purmas,laderasderosyt ienen pocovalorcomercialyenmuchoscasostienenusosdesconocidos.Portodoeso,se hacenecesariocontinuarlainvestigacindeloscolorantesnaturalesenbuscademejorar y adecuar una f orma de extraccin de bajo costo, contribuir a obt ener un valor agregadoparaestasespecies,encontrarunatecnologadeextraccinquepuedaser transf erida y aprovechada por la industria de alimentos, textilera, cosmt icos y otros. MATERIAL Y METODOS Procedimientos Generales LosespectrosdeUV-Visf ueronobtenidosenMeOHyEt OH/ OH,enun espectrof otmetroTHERMOSPECTRONIC,modeloGnesis6yprocesadosporun sof twareVisionNlitedeTher moelectronCorporationylosreactivosdeShinoday Borntrger. Paralacromograf aencolumna(CC)seusgeldeslice60F254( MerckS.A.)y cromatograf aencamadadelgada( CCDseuscromatoplacasdegeldesliceF 1500/LS254(Schleicher&Schuell).Engeneral,comoeluyenteseemplen-hexano,clorof ormo y metanol ( Merck S.A.). Recoleccin del material vegetal Losf rutosdelasespeciesSyzygiummalaccence(pomarrosa)yCoussapoavillosa (uvilla);ylamaderadeSimirarubenscens(pucaquiro),f ueronobtenidosenla inmediaciones dela ciudad deIquitos y reposa un espcimen de cada uno de ellos en elHerbarium Amazonense de laUNAP.Extraccin y fraccionamiento Lascscarasdelf rutodelapomarrosayuvilla,lamaderaenvirutadelpucaquiroy luegollevadasalprocesodeextraccinconn-hexano,clorof ormoyetanol(96%) sucesivamente(7dasporcadasolventepor3vecesconsecutivas)quedespusde evaporarlossolventesenunevaporadorrotativoseobtuvolosextractosetanlicos quetenanelcolorcaracterstico.Elf raccionamientoserealizconsolventesn-hexano,clorof ormoymetanolsobreunamezcladelextractocongeldeslicepara columnayqueposterior ment esesometiacromatograf aencolumnausandogradienteden-hexano:clorof ormo,clorof ormo:metnolparadarvarias f raccionesquea su vez f ueron unidas por cromatograf a de camada delgada, enel caso del extracto del pucaquiroserealizCCrepet itivahastalograrsupurif icacinyCCDpreparat iva eludas enmezcla de clorof ormo: metanol (95:5). RESULTADOS YDI SCUSIN DelaespecieSyzygi ummalaccence(pomarrosa)loscolorantesaislados presentaronconelreactivodeShinodaunacoloracinrosadaindicandopresenciade f lavonas. (Lock, 1997). Figura1. Espectro UV-Vis en MeOH del colorante de la pomarrosa. EnlaFigura1elespectrodeUV-Visenmetanol(MeOH)paraladeterminacinde f lavonoides,muestranabsorbanciasa220nmdealtaintensidad,270nmdemediana intensidady330nmy530nmdebajaintensidad, tambinsepuedeapreciarlas absorbanciaobtenidasenlatabla01.SegnLock(1997)af irmaquelasabsorbancias a 250 280 nm (bandaII) y 310-350 nm (bandaI) pertenecen alas f lavonas. Tabla 01: Longitudes de onda y sus Absorbancia del Colorante en MeOH Longitud de onda (nm) Absorbancia(A) 2000.220 2200.900 2700.345 3300.158 4950.102 5300.146 5600.126 Delaespecie Coussapoa villosa (uvilla) los colorantes purif icados con el reactivo de Shinodadaunacoloracinhastaderosado,indicandolaposiblepresenciade f lavonoides, (Lock, 1997) EnlaFigura1elespectrodeUV-Visenmetanol(MeOH)paraladeterminacinde f lavonoides,muestranabsorbanciasa224nmdealtaintensidad,270nmdemediana intensidad y 346 nm de baja intensidad. Figura 2. Espectro UV-Vis del colorante enMeOH Tambinsepuedeapreciarlasabsorbanciaobtenidasenlatabla02ysegnLock (1997)af irmaquelasabsorbanciasa230270nm(bandaII)y340-390nm(banda I)pertenecenalaschalconas;lasabsorbanciaa230270nm(bandaII)y380 y430 nmpertenecenalasauronasylasabsorbanciasa250-280nm(bandaII)y330360 nm (bandaI) pertenecen a los f lavonoles. Tabla 02: Longitudes de onda y sus Absorbancia del Colorante en MeOH Longitud de onda (nm) Absorbancia(A) 2040.518 2100.681 2242.116 2700.972 3460.678 DelaespecieSi mi ria rubensces(pucaquiro)elcoloranteaisladoenlasolucinde Borntrger da un color rojo en la f ase acuosa indicativo dela presencia de quinonas, y queconelreactivodeShinodadaunacoloracinhastaderosadoclaro,indicandola presenciadef lavonoides(Lock,1994;Gibaja,1998).AldisolverloconCarbonat ode sodioyBicarbonatodesodio sedisuelvenparcialmente,demostrandolapresenciade quinonas - y - Hidroxilados. (Gibaja, 1998) Figura 3. Espectro UV.-Vis del Colorante enEtOH/ OH El espectro deUV-Vis de la f igura 3,muestran bandas a 240 de alta intensidad (banda II),290demediaintensidad(bandaI),340deintensidadbaja,tambinsepueden apreciar las absorbancia obtenidas en la tabla03. Tabla 03. Longitudes de onda y sus Absorbancia del Colorante enEtOH/ OH Longitud de onda (nm) Absorbancia (A) 1950.665 2050.614 2401.734 2900.925 3400.578 SegnLock(1997),lasnaf toquinonaspresentanlasbandasa245,257hy335nm; una seal a 257h corresponde a transiciones electrnicas en el sistemaquinoideo y en cambio las antraquinonasmuestran intensa absorcin bencenoide a 250 nm y de intensidadmediaa 322 nm, la absorcin quinoidea f uerte se observa a 263 y 272 nm y una dbil a 405 nm.PorotroladoGibaja(1998),af irmaquelasnaf toquinonasinvolucranlosmximosde absorcindelgrupoquinonicoybencenoico,dansealesentre240-290nmf uerte, cercade335nmmedianaenregin400-510nmyencambiolasantraquinonas presentanmximosdeabsorcinentre240-260nm(bencenoide),a260-300nm (quinonico) y otra regin 360-520 nm. Figura 4. Espectro UV-Vis del colorante enMeOH EnlaFigura4elespectrodeUV-Visenmetanol(MeOH)paraladeterminacinde f lavonoides,muestranabsorbanciasa224y228nmdealtaintensidad,284nmde medianaintensidady328nmdebajaintensidad,tambinsepuedeapreciarlas absorbanciaobtenidasenlatabla04.SegnLock(1997)af irmaquelasabsorbancias a230270nm(bandaII)y340-390nm(bandaI)pertenecenalaschalconas;las absorbancia a 230 270nm (bandaII) y 380 y 430 nm pertenecen a las auronas y las absorbanciasa250-280nm(bandaII)y310350nm(bandaI)pertenecenalos f lavonas. Tabla 04: Longitudes de onda y sus Absorbancia del Colorante en MeOH Longitud de onda (nm) Absorbancia(A) 2040.555 2080.689 2241.616 2281.636 2840.702 3280.452 CONCLUSI ONES Conlosresultadosanterioresseconf irmalapresenciadef lavonoidesdeltipode f lavonasenlaespecieSyzygiummalaccence(pomarrosa),f lavonoidesdeltipode chalconas,auronasyf lavonolesenlaespecieCoussapoavillosa(uvilla)y naf toquinonas,antroquinoasyademslosf lavonoidescomochalconas,auronasy f lavonas de la especie Simira rubenscens (pucaquiro). AGRADECIMIENTOS AlaOf icinaGeneraldeInvestigacionesdelaUNAPporelf inanciamient obrindado para el proyecto de investigacin presentado. REFERENCIASBI BLIOGRAFICAS 1.BRACK,A.1999.DiccionarioenciclopdicodeplantastilesdelPer.PNUD.556 p. 2.GIBAJAS.1998.PigmentosNaturalesQunonicos.PrimeraEdicin.Editorial Universidad NacionalMayor de SanMarcos. Lima,Per.3.LOCKO.1997.ColorantesNaturales.PrimeraEdicin.Pont if iciaUniversidad Catlica delPer. Lima,Per. pp.137-163.4.TOYOFAA.,GARCIAE. 1996.Colorantes.EnBiotecnologaAliment aria.(GarcaM.,QuinteroR.,Lpez A. Eds.)Ed. Limusa.Mxico.Pp. 34-52.