AUTORIDADES UNIVERSITARIAS

RECTOR Dr. Carlos Sabana Gamarra

VICERRECTORACADÉMICO Dr. Juan Muro Morey

VICERRECTORADMINISTRATIVO Dr. Orlando Velásquez Benites

JEFE DE OGPRODEIN Dr. José Mostacero León

JEFE DE LA UNIDAD DE PROGRAMACIÓNY DESARROLLO

DE LA INVESTIGACIÓN CIENTÍFICA­OGPRODEIN Lic. Julia Pilar Sánchez Mejía

DIRECTOR DE SISTEMA ADMINISTRATIVO III­OGPRODEIN CPC Rosa Violeta León López

UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

Volúmen 9 Número 1 Enero ­ Junio 2006

CONSEJO EDITORIAL

• Federico Gonzáles Veintemilla, UNT. • Hugo Casanova Herrera, UNT. • Enrique Padilla Sagástegui, UNT. • Heber Robles Castillo, UNT. • Rosario Delgado Vásquez, UNT. • Gaspar Ayquipa Aycho, UNT. • Félix Huaranga Moreno, UNT. • Hermes Escalante Añorga, UNT. • Pedro Mercado Martínez, UNT. • Jorge Correa La Torre, UNT. • Mercedes Chaman Medina, UNT. • Dario Medina Castro, UNT. • Ramón Piminchumo Carranza, UNT. • Manuela Luján Velásquez, UNT. • Raúl Beltrán Orbegoso, UNT.

La Revista SCIENDOCiencia para el desarrollo es el órgano oficial de la Oficina General de Promoción y Desarrollo de la Investigación (OGPRODEIN) dedicado a la publicación de los resultados de investigaciones originales e inéditas en las diversas áreas académicas. SCIÉNDO publica trabajos realizados por investigadores de la Universidad Nacional de Trujillo y de otras instituciones nacionales y extranjeras, de caracter multidisciplinario.

Revista arbitrada

Derechos Reservados

• Abundio Sagástegui Alva, Facultad de Agronomía de la Universidad Pri­ vada Antenor Orrego.Trujillo. • Luis Arteaga Temoche, Facultad de Medicina de la UNT. Trujillo. • Ramón Piminchumo, Facultad de Far­ macia y Bioquímica de la UNT.Trujillo.

COMITÉ EDITORIAL

ISSN 1681­7230

• Franklin Ayala Flores, Facultad de CC. Biológicas de la Universidad Nacional Amazonía Peruana, Iquitos.

• Douglas Sharon, University of California, USA. • Reiner W. Bussman, University of Hawai, USA.

• Roberto Kiefling, Instituto Botánica Darwinoin, Argentina. • Paul Berry, University of Wisconsin, USA

DIRECTOR: César A. Jara

EDITOR: Freddy Mejía Coico

DIRECTOR:

EDITOR:

César A. Jara

Freddy Mejía Coico

Publicación Semestral.

Tiraje: 300 ejemplares.

Hecho el Depósito Legal en la Biblioteca Nacional del Peru N° 2006/8275 Queda rigurosamente prohibida sin la autorización escrita del titular del Copyright, bajo las sanciones establecidas en las leyes, la reproducción total o parcial por cualquier medio o procedimiento. El contenido de la información de los artículos incluidos en la presente edición es responsabilidad exclusiva de los autores.

Dirigir correspondencia a: Please direct correspondence to: Interchange of publications is requested Oficina General de Promoción y Desarrollo de la Investigación de la Universidad Nacional de Trujillo. Jr. Independencia Nº 389 Trujillo, La Libertad, Perú. Teléfono: 044­224505 Fax: 044­256629 www.ogprodein.unitru.edu.pe E­mail.ogprodein@chanchan.edu.pe

investigacion.unt@hotmail.com Realización de arte y diagramación: OGPRODEIN Imprenta ArtGraf

Foto de Portada: amancay”. Ismene amancaes “

Con el apoyo de las autoridades universitarias ha sido posible editar un nuevo número de la Revista SCIÉNDO caracterizado por estar actualizado lo cual es bueno resaltar, porque, dadas las dificultades inherentes a la edición, casi siempre se publican números o volúmenes atrazados. En este número, las páginas iniciales han sido cambiadas en algunos aspectos, para cumplir recomendaciones de las entidades encargadas de la indexación en otras fuentes.Al mismo tiempo, se presentan las Normas para los autores, en reemplazo de los que antes era la denominadaGuía para los autores de la Revista SCIÉNDO, más especificada que la anterior, a fin de que puedan cumplirse estrictamente.

En éste número se presentan temas variados de investigación observándose un mayor número de artículos del área de las Ciencias Biológicas y Farmacéuticas, como resultado del cumplimiento de lo estipulado en las mencionadasNormas que señalan que los trabajos serán publicados conforme son aceptados, lo cual al mismo tiempo, está relacionado a la labor que cumplen los árbitros. En el área de las Ciencias Farmacéuticas se presentan dos trabajos, uno relacionado a la fabricación demedicamentos y el otro a la actividad antibacteriana de una planta de nuestra serranía. Por su parte, en el área de las Ciencias Biológicas se presentan trabajos relacionados a la Ecología, Genética, Microbiología, Parasitología, Fisiología Vegetal y la Bioquímica, destacando dos artículos interesantes. En uno de ellos se hace una revisión de los pigmentos anticiánicos y betalámicos como agentes quimiopreventivos contra el cáncer y en el otro, se presenta una relación de especies vegetales para el control de plagas y pestes de plantas y animales domésticos del departamento de La Libertad, Perú, con comentarios sustentados de susbondades biocidas.

Agradeciendo a las autoridades por el apoyo brindado y a los profesores designados como árbitros y que conforman el Cuerpo Consultor, invitamos al profesorado, alumnado de pre y post grado e investigadores independientes a presentar sus artículos, adecuados a lo estipulado en las Normas para losAutores, que pueden encontrarse en la Oficina de Investigación o en la parte final de este número.

Jefe de laOGPRODEIN­UNT DR. JOSÉMOSTACEROLEÓN

EDITORIAL

CONTENIDO

ARTÍCULOS ORIGINALES

Volúmen 9 Número 1 Enero ­ Junio 2006

ISSN 1681­7230

INDUSTRIALIZACIÓN DE LA HOJA DE PREPARACION DE FORMAS MEDICAMENTOSAS:BOLSITAS FILTRANTES Y CAPSULAS

SAMBUCUS PERUVIANA (sauco)

Ortiz de Gómez H, Yon de Prentice MJ, y Ortiz ­Rubio Z. Pag. 01

Industrialization of the leaf of (Sauco), preparation of medicamentals forms: filtering satchets and capsules.

Sambucus peruviana

CARACTERIZACIÓN DEL ACEITE ESENCIAL DE (LABIACEAE) DE LA REGIÓN LA LIBERTAD Y ESTUDIO DE SU ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA IN VITRO

SATUREJA SERICEAE

Vigo­ Alcántara S. y Vigo­ Alcántara V. Pag. 07

Characterization of the essential oil of (Labiaceae) from Region La Libertad and Study of its antibacterial activity

Satureja sericeae in vitro.

VARIACIÓN DEL NIVEL FREÁTICO Y SU EFECTO EN LA ACTIVIDAD AGRÍCOLA EN EL VALLE MOCHE, LA LIBERTAD. 2003

Guerrero­Padilla A M y Florián­Florián J C. Pag. 15

Variation of freatic level and his effect on the agricultural activity in the Moche Valley, La Libertad 2003.

REMOCIÓN DEL METABISULFITO DE SODIO DEL EXTRACTO ACUOSO DE SALVADO DE TRIGO UTILIZADO EN LA PRODUCCIÓN DE EMPLEANDO YODATO DE POTASIO Y CENIZAS DE CARBÓN VEGETAL

BACILLUS THURINGIENSIS

Arellano­Barragán C. e Icanaqué­Ordinola J D. Pag. 27

Sodium metabisulphite Yemoval from aqueous extract of wheat brand used in production using potassium yodate and vegetable carbon ashes.

Bacillus thuringiensis

FRECUENCIA GÉNICA DE LOS MARCADORES Y EN LA COMUNIDAD AGUARUNA DE YAMAYAKAT, REGIÓN NORORIENTAL DEL MARAÑÓN­PERÚ.

DYS199 DYS287

Muro­Morey JC, Rodríguez ­Delfín LA, y Narbaiza­Chanducas M B. Pag. 37

Frequency Genica of the markers , and in the community Aguaruna the Yamayakat ­ Region Northeast of the Maranon ­ Peru.

DYS199 DYS287

DISTRIBUCION DE LAS LESIONES Y PERFILES DE PCR­RFLPS DE LA REGIÓN CONSERVADA DEL GEN DE AISLADA DE PACIENTES DE TRES ÁREAS ENDÉMICAS DE LA PROVINCIA DE OTUZCO­LA LIBERTAD

GP63 LEISHMANIA

Pag. 55 Delgado­ Silva B y Rodríguez­ Delfín L.

Injury distribution and PCR RFLPs profiles of gen conserved region of isolated of patients from Otuzco provinee (La Libertad) three endemic areas.

gp63 Leishmania

!

PARÁMETROS EPIDEMIOLÓGICOS Y SOCIOCULTURALES ASOCIADOS A LA INFECCIÓN INTESTINAL POR ESPECIES DE ANCYLOSTOMIDEOS EN LADRILLEROS DE MOCHE, TRUJILLO­PERÚ. Epidemiological and sociocultural parameters associated to intestinal infection by ancilostomida e species in Moche, (Trujillo Peru) brickmakers.

Pag. 65 Castro Sesquén Y, Vilela Alburqueque M y Escalante Añorga H. ­ ­ ­

AISLAMIENTO Y SENSIBILIDAD ANTIBIOTICA DE EN BIOPSIAS GASTRODUODENALES DE PACIENTES DEL HOSPITAL VICTOR LAZARTE ECHEGARAY, TRUJILLO PERU.

Helicobacyter pylori

Pag. 47

Isolation and antibiotic sensitivity of in gastroduodenal biopsies of Victor Lazarte Echegaray patients, Trujillo Peru.

Helicobacter pylori

Sirlopu­ Agreda L , Salazar­ Castillo M., Y Rodriguez Haro I

ISSN 1681­7230

CONTENIDO Volúmen 9 Número 1 Enero ­ Junio 2006

ARTÍCULO DE REVISIÓN

MYIASIS POR SP. (DIPTERA: CUTEREBRIDAE) EN DEL ALTO MARAÑÓN, AMAZONAS, PERÚ

CUTEREBRA RATTUS RATTUS

Pag. 73

Myiasis by sp. (Diptera: Cuterebridae) in from Maranon, Amazonas, Peru Cuterebra Rattus rattus Ibáñez­Herrera , e la Cruz­ Agreda , Celis­ Alarcón Rodríguez­ Díaz A, Sánchez­ Gavidia W y Rodríguez­ Díaz D.

N D I E.,

EXPERIMENTOS DE EXCLUSIÓN DE HERBÍVOROS EN LA COMUNIDAD INTERMAREAL DEL LITORAL DEHUANCHACO­PERÚ

Pag. 83 Experiment of exclusion of herbivores in the intertidal Community of the litoral (coast) of Huanchaco Peru Bocanegra­ García C A. e Icochea­ Barbaran E.

ASPECTOS BIOLÓGICOS DE (HEMIPTERA: PENTATOMIDAE) BAJO CONDICIONES DE LABORATORIO

PODISUS NIGRISPINUS

Pag. 77

Biological aspects of (Hemiptera: Pentalomidae) under laboratory conditions Podisus nigrispinus Chávez­ Galarza , Delgado­ Silva , Zavaleta­ Esquerre , Rodríguez­ Rodriguez R y Pollack­Velasquez L.

JC Y V

DESARROLLO POST EMBRIONARIO DE EN CONDICIONES DE LABORATORIO

PLATYXANTHUS ORBIGNYI

Pag. 91 Postembryonic development of in laboratory conditions Platyxanthus orbignyi Gómez­Quezada , Pollack­Velásquez , Ramírez­Cruz , Velásquez­Paz A y Rodríguez­Layza J. A L F

EFECTO DE LA LUZ Y LOS REGULADORES DEL CRECIMIENTO EN LA INDUCCIÓN DE CALLOS EN HOJAS DE VAR. ITALIA VITIS VINIFERA

Pag. 99 Light effect and growth regulators in the calluses induction in var. Italia leaves Vitis vinefora Chico­Ruíz Cerna­Rebaza Valentin­Cochachin Pérez­ Benites R, Condemarín­Montealegre C. J, L, B,

ESPECIES VEGETALES PARA EL CONTROL DE PLAGAS Y PESTES DE PLANTAS Y ANIMALES DOMÉSTICOS DEL DEPARTAMENTO DE LA LIBERTAD, PERÚ, 2005

Pag.111 Vegetables species for control of domestic plants and mammals plagues from La Libertad department, 2005 Mostacero­ León J, Ramírez Vargas­ R. y Mejía­ Coico F.

INFLUENCIA DEL SOFTWARE MATEMÁTICO DERIVE EN EL RENDIMIENTO ACADÉMICO DE ESTUDIANTES DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL “ TORIBIO RODRÍGUEZ DE MENDOZA” , AMAZONAS­PERÚ

Pag. 127

Influence of Derive mathematical software on academic performance of Agroindustrial Ingeneering students of the Toribio Rodriguez de Mendoza National University (Amazonas Peru)

García­ Grados OE, Columna­ Rafael W J, Mendoza­ Alfaro AR, Chotón­ Calvo M y Reyes­ Vásquez JC.

PIGMENTOS ANTOCIANICOS Y BETALAMICOS COMO AGENTES QUIMIOPREVENTIVOS CONTRA EL CÁNCER: AVANCES, PERSPECTIVAS Y NUEVAS FUENTES DE OBTENCIÓN

Pag. 135

Antocianic and betalatamic pigments as chemopreventive against cancer: advancesperspectives and new obtaining sources

Seijas­Bernabé P. y Seijas Velásquez S.

01

Industrialización de la hoja de (S preparación de formas medicamentosas:

bolsitas filtrantes y cápsulas

Sambucus peruviana auco),

Industrialization of the leaf of (Sauco), preparation of medicamentals forms:

filtering satchets and capsules

Sambucus peruviana

Hermelinda Ortiz de Gómez , Maria Julia Yon de Prentice y Zoila Ortiz Rubio ¹ ¹ ² ­

RESUMEN

El objetivo del presente trabajo fue preparar bolsitas filtrantes y cápsulas como producto final de la industrializaciónde la hoja de , formasmedicamentosas de fácil administración oral.

La hoja obtenida en buenas condiciones, de la ciudad de Cajamarca, fue estabilizada, pulverizada y tamizada. Del polvo estandarizado se obtuvo extracto fluido mediante el procesamiento “C” de la USP, facilitando la identificaciónde fitocomponentes comoalcaloides, flavonoides, taninosy triterpenoides.

Con el polvo estandarizado de la hoja se preparó bolsitas filtrantes con 1.5 g de contenido cada una y con 168 mgde extracto secopulverizado con232mgde lactosa, sepreparó cápsulas con 400mgdecontenido cada una.

Ambos productos fueron preparados en buenas condiciones, controlado con pruebas de control de calidad y de esterilidadmicrobiana tanto de lamateria prima, cuanto del producto final.

Se concluye que es factible la preparación de bolsitas filtrantes y de cápsulas a partir del polvo estandarizado de la hoja de con buenacalidad sanitaria para ser utilizadas, según laNormaTécnica Peruana 1985 y que, asimismo, es factible su industrialización.

, formasmedicamentosas.

ABSTRACT

The aim of this study was to prepare filtering satchets and capsules as final product of the industrialization of the leaf forms medicamentals of easy oral administration. The obtained leaf, in good conditions, of Cajamarca's city, was stabilized, pulverized and sifted. Of the standardized powder to prepared fluid extract through the procedure “C” of the USP, facilitating the identificationof fitocomponents as alkaloids, flavonoids, tannins and triterpenoids.With the powder standardized of the leaf to prepared filtering satchetswith a contained of 1.5 gr., each one and with 168 mg. of dried extract pulverized with lactose, to prepared capsules with a contained of 400 mg. each one. Both products were prepared in good conditions, controlled with tests of control of quality and ofmicrobial sterility, point of the original matter, all the final product. It is concluded that: It is feasible de preparation of filtering satchets and capsules from the powder standardized of the leaf of

, both forms medicamentals presented sanitary quality to be used, according to the Technical Peruvian Norm1985.Then, it is feasible its industrialization.

: formsmedicamentals.

Sambucus peruviana

S. peruviana

Sambucusperuviana

Sambucus peruviana,

S. Peruvian

Sambucusperuviana

: Palabras clave

Key words

Artículo original

! 1. Universidad Nacional de Trujillo Trujillo­Perú. 2. Laboratorio Clínico y Anatomopatológico “Ortiz”. Trujillo. Perú

Recibido 24 de enero del 2006, aceptado 24 de mayo del 2006.

9(1)2006

02

pacientes con hiperplasia benigna de próstata, sobre todo a aquellos con bajos recursos económicos y además para facilitar la administración oral de la hoja de , a los pacientes que requieren de este tipo de tratamiento, nos propusimos, llevar a cabo el trabajo piloto “Industrializacion de la hoja de

formas medicamentosas: bolsitas filtrantes y cápsulas.

Se utilizaron hojas de sauco) provenientes de la ciudad de Cajamarca, recolectada, secada y transportada en óptimas condiciones. La identificación sistemática se hizo en el de la UniversidadNacional deTrujillo

Las hojas fueron seleccionadas y estabilizadas siguiendo el método de Perrot . La hoja estabilizada fue pulverizada en mortero de fierro a un grado de polvo semifino (tamizNº 26).

Para la preparación de cápsulas, con el polvo de hoja se elaboró el extracto fluido, según el procedimiento“C”de laU.S.P .

El polvo con el que se preparó las bolsitas filtrantes y el extracto fluido a partir del cual se preparó las cápsulas, fueron estandarizados sometiéndolos al procesamiento respectivo en cada caso.

(para bolsitas filtrantes). El polvo estabilizado se sometió a las determinaciones siguientes:

Caracteres organolépticos, análisis por tamizado, humedad, ceniza total y ceniza insoluble en ácido clorhídrico, grado de solubil idad en diferente tipo de disolvente . Reacciones de ident if i cación de componentes químicos, sometiéndolas a reacciones químicas de identificación para alcaloides, flavonoides, taninos y triterpenoides .

S. peruviana

Herbarium Truxillense .

la hoja de preparando las Sambucus peruviana”

S. peruviana (

MATERIALYMETODOS

a. Estandar ización de polvo estabilizado

10

11

12,13

¯

¯

14

INTRODUCCIÓN

,

La flora medicinal , ampliamente distribuida en nuestro país, es muy utilizada para tratar enfermedades de los diferentes sistemas orgánicos: respiratorio, digestivo, cardiovascular, genitour inario , etc . , administradas en la dosis y formas que los habitantes de una comunidad o una región han aprendido a través de la tradición de sus antepasados, preparándolos ellos mismos, en forma de infusión, cocción, cataplasma, etc. , llegando a ser verdaderos herboristas como nuestros indígenas enel tiempode los incas.

En la gran variedad de plantas medicinales de nuestra región se encuentra el

traído a nuestro país por los españoles, aclimatándose muy bien en clima de la sierra como el de Cajamarca. Tiene múltiples propiedades curativas, según los componentes químicos de las diferentes partes de la planta , similares a las de otras especies de

como, y . Ennuestropaís el sauco es utilizado por los

curanderos en la práctica de medicina folklórica, para tratar pacientes con sarampión y viruela, por su efecto antipirético, en los abscesos, por facilitar su drenaje y curación de éstos así como en el tratamiento de la “hidropesía” y de la inflamación de vejiga y próstata .

Por observacion e informacion recogida porOrtiz, enCajamarca, el infuso dehoja de

es usado en pacientes con síntomas compatibles con hiperplasia e hipertrofia benigna de la glándula prostática .

Los principales componentes químicos de la hoja de son: el glucósido sambunigrina, el alcaloide sambucina, acido ursolico, flavonoides y taninos , con efecto anti­inflamatorio y depresor del crecimiento celular, comprobado en glándula prostática de

y en pacientes con hiperplasia benigna de la glándula prostática .

Empeñados en aprovechar mejor los principios activos y efectos farmacológicos de las plantas medicinales de nuestra región, y con el deseo de ayudar a un gran porcentaje de

1

2

3

4,5

6

7

8,9

Sambucus peruviana

Sambucus S. nigra S. ebulus

S. peruviana

Rattus rattus

,

4,

S. peruviana

ORTIZ, H.; et al. 9(1)2006

permisible yel tiempo de disgregación.

Las bolsitas filtrantes fueron cubiertas con envoltura de papel y colocadas en cajas diseñadas e impresas con las ind icac iones r e lac ionadas a la s p r o p i e d a d e s d e l a h o j a d e

y la forma de uso de las bolsitas filtrantes. Las cápsulas fueron colocadas en frascos de plástico, estériles, herméticamente cerrados.

: Los caracteres organolépticos hallados fueron:

d. E m p a q u e d e l a s f o r m a s medicamentosas

RESULTADOS

a.En Relación a Bolsitas Filtrantes

S. Peruviana

Aspecto Polvomoderadamente grueso Color VerdeAmarillento Olor Aromático característico Sabor gradable Reacción Neutra, al papel tornasol

El análisis por tamizado permitió determinar lo siguiente:

: :

: : Α

:

La humedad fue de 8.2%, ceniza total 12.04%, de ceniza insolubles en Acido Clorhídrico 0.58% y la determinación de la solubilidad del polvo estabilizado en diferentes solventes fue:

Respecto de la identif icación de compuestos químicos, resultó positivo a: alcaloides, flavonoides, taninos, y a triterpenoides. El polvo estandarizado de hoja de

Eter sulfúrico : 2.8% Cloroformo : 7.2% Bencina : 2.3% Benceno :3.9% Agua destilada : 10.6%

S.

Clasificación del polvo

Moderadamente grueso

# Nominal del polvo

40

Límite de finura

%

40

# Tamiz

80

03

b. Estandar ización del extr acto fluido (para cápsulas). El extracto fluido de la h o j a d e f u e some t ido a la s det erminaciones siguientes: Caracteres organolépticos. Residuos de evaporación (extracto seco). Grado de solubilidad en diferente tipo de d i so lvente . Dens idad . Secado y pulverizado del extracto. El pulverizado se realizó con lactosa comodiluente . Control de esterilidad microbiana de la materia prima y del producto final. Se r e a l i z ó m e d i a n t e e l a n á l i s i s microbiológico del polvo estandarizado de la hoja y del extracto fluido de la misma, como materia prima, así como de las bolsitas filtrantes y de las cápsulas como producto final. Se tomó una muestra correspondiente al 1% del peso total de cada espécimen, en ambos casos y se efectuó los cultivos de gérmenes, siguiendo las normas microbiológicas del control de calidad y sanidad de productos alimenticios , como sigue:

del extracto seco, pulverizado con lactosa, por su parte, fue envasado en cápsulas con un peso total de 400mg en cada una. El envasado de ambos productos fue realizado en la ciudad de Lima con el apoyo del Insti tuto FarmacéuticoAndinoS.A. (INFAR). En relación a las cápsulas, además, se determinó la desviación de masa

S . p e r u v i a n a

-

-

15,16

17

-

-

-

-

Microorganismos aerobios mesófilos viables, cultivado enagar nutritivo. Coliformes fecales totales, cultivado en caldo lactosadoverde brillante, bilis al 2%.

, cultivado en caldo selenito agar SS ( ­ )

, coagulasa positivo, cultivado en agar BairdParker. Microorganismos anaeróbicos viables, cultivado en agar­cisteina. Hongos y levaduras, cultivado en agar­

Sabouraud.

El polvo estandarizado de la hoja de , fue envasado en bolsitas

filtrantes con un peso de 1.5 g cada una. El polvo

­

­

SalmonellaSalmonella Shiguella

Staphylococcus aureus

S. peruviana

.

c. Preparación de bolsitas filtrantes y de c á p s u l a s c o m o f o r m a s medicamentosas

Industrialización de la Hoja de Sambucus peruviana 9(1)2006

04

peruviana, como materia prima y el contenido en las bolsitas filtrantes como producto final, presentaron esterilidad microbiana, con el resultado siguiente:

Loscaracteresorganolépticos fueron:

1 Investigación de microorganismos aerobios mesófilos viables: NEGATIVO (No hay crecimiento).

2 Investigación de coliformes fecales, totales: NEGATIVO(Nohaycrecimiento). Investigación de : NEGATIVO (no hay crecimiento).

4 Investigación de S. , coagulasa p o s i t i v o : NEGAT IVO (No h ay crecimiento).

5 Investigación de microorganismos anaerobios viables: NEGATIVO (No hay crecimiento)

6. Investigación de hongos y levaduras: NEGATIVO(no hay crecimiento).

Aspecto: Limpioa contraluz Color :Verde Olor :Aromático Sabor :Amargo ardiente ReacciónAcida al tornasol

Respecto de la determinación de solubilidad resultó: Agua : Enturbia Eter etílico :Miscible S.R.HidróxidoAmonio12.5% :Precipita S.R.AcidoClorhídrico : Enturbia

Ladensidad fue de0.915. El secado del extracto fluido, por evaporación dio lo siguiente: Residuo de evaporación = 11.2% 1500ml de extracto fluido, contiene 168 gr. de extracto seco 1.5 ml de extracto fluido, contiene 168 mg. de extracto seco Pulverización del extracto seco con lactosa para el llenado de cápsula. 400 mg. de polvo de cada cápsula esta

conformado por: 168 mg. de extracto seco de hoja de y 232mg. de lactosa. La desviación de la masa permisible de cápsulas Masa declarada o masa en desviación permisible en:

3

.

Salmonella

aureus

S. peruviana

b. En relación a Cápsulas:

Gramos Porcentaje < 0,400 +­ 10 > 0,400 +­ 7,5 El tiempo de disgregación de la cá

1. Investigación de microorganismos aerobios mesófilos viables: NEGATIVO (no hay crecimiento)

2. Investigación de Coliformes fecales, totales:NEGATIVO(no hay crecimiento)

3. Investigación de : NEGATIVO (no hay crecimiento)

4. Investigación de S. , coagulasa p o s i t i v o : NEGAT IVO ( n o h a y crecimiento

5 . I nv es t i g ac i ó n d e : NEGATIVO (no hay crecimiento)

6. Investigación de microorganismos anaerobios viables: NEGATIVO (no hay crecimiento).

7. Investigación de hongos y levaduras: NEGATIVO(nohaycrecimiento)

psula fue de 14minutos. El extracto fluido de la hoja de y el polvo del extracto seco, contenido en las cápsulas, presentaron esterilidad microbiana con el resultado siguiente: Análisismicrobiológico:

La recolección, transporte y estabilización de la hoja de se realizo en buenas condiciones, lo que permitió la conservación de sus caracter í s t icas orgánicas y fisicoquímicas.

El polvo de la hoja sometido a diferentes pruebas de control de calidad, fue catalogado como un polvomoderadamente grueso, con un porcentaje de humedad de 8.2, de cenizas totales de 12.04 y cenizas insolubles en ácido clorhídrico de 0.58, valores aceptados según la NormaTécnicaNacional 209.228 .

El porcentaje de solubilidad en agua de 10.6, mayor que en los otros solventes, es probable que esté favorecido por la presencia de flavonoides, alcaloides, taninos y triterpenoides, identificados en el extracto acuoso de la hoja en estudio, estos principios activos son hidrosolubles en grado variable ,

S. peruviana

S. peruviana

Salmonella

aureus

P s eu domon a s

DISCUSIÓN

18

19

9(1)2006 ORTIZ, H.; et al.

05

además según Castro la hoja de también contiene poliósidos

hidrosolubles, sustancias reductoras solubles en agua, y alcohol y aceites volátiles solubles en éter. Mediante la obtención de DL del extracto

fluido de en , vieja y joven, se determinó la dosis diaria de 1.5 g de polvo de hoja, para ser administrado a pacientes por vía oral en forma de infuso. En tal virtud, se ha considerado para cada filtrante, utilizar 1.5g. de polvo de hoja y para cada cápsula 168mg. de extracto seco. El polvo de hoja y el extracto fluido como

materia prima y el polvo de hoja y extracto seco como producto final contenidos en la bolsita filtrante y cápsula respectivamente, cumplen con los requisitos microbiológicos exigidos por la Norma Técnica Peruana 209.229 . El envasado se realizó con el apoyo del

Instituto FarmacéuticoAndino S.A. (INFAR). El envasado y empaque de ambas formas medicamentosas se realizaron en buenas condiciones sanitarias y buena práctica de manufactura, cumpliendo con los requisitos exigidos por la Norma Técnica Peruana 209.040 . La hoja de en la forma

medicamentosa de bolsita filtrante puede ser empleada en pacientes que requieren este medicamento porque ha sido comprobada la efectividad de sus principios activos, como antimitótico sobre las células de la raíz de

, el efecto antiinflamatorio y depresor del crecimiento celular de la próstata hiperplásica humana y la no toxicidad hemato­hepato­renal del paciente . La formamedicamentosa de cápsula, si bien

el porcentaje de desviación permisible de la masa y el tiempo de disgregación de la cápsula (en el ambiente gástrico) están dentro del rango aceptable , aun no debe utilizarse en pacientes que requieran el medicamento, por cuanto no se ha efectuado el estudio de toxicidad crónica y la efectividad f a r m a c o l ó g i c a e n a n i m a l e s d e experimentación, ni el ensayo clínico, requisitos que exige cumplir, la Investigación científica biomédica. Por el presente estudio y por otros trabajos

previos es de considerar que la planta de reúne las condiciones para

industrializarse porque, es conocida, ha sido

et al. S. peruviana

S. peruviana Rattus rattus

S. peruviana

Allium cepa

S. peruviana

20

21

22

23

24

25

23,24

50

identificada, posee principios activos con efecto farmacológico, identificable y cuantificable. Las partes anatómicas de la planta pueden ser sometidas a las técnicas y procesos necesarios para elaborar finalmente cualquiera de las formas medicamentosas, por lo menos de administración oral como filtrante, cápsulas, comprimidos, etc.

Es factible la preparación de bolsitas filtrantes y de cápsulas a partir del polvo estandarizado de la hoja de

Amba s f o rm a s med i c ame n t o s a s presentaron calidad sanitaria para ser utilizadas, según la Norma Técnica Peruana, 1985. Es factible la industrialización de la hoja de

En la Universidad Nacional de Trujillo se implemente un Centro de Investigación, científico multidisciplinario, de plantas medicinales. La Universidad Nacional de Trujillo

considere, dentro de su línea de investigación científica, la creación de un Centro de producción de formas medicamentosas, a partir de plantas medicinales de nuestra región.

CONCLUSIONES

SUGERENCIAS

Sambucus peruviana

Sambucus peruviana

.

.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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Sambucusperuviana Rattus rattus

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06

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Sambucusperuviana A l l i u m c e p a

. et al

S a m b u c u s p e r u v i a n a

Correspondencia: HermelindaOrtiz deGomez LeonardoDaVinci 470Sto.DominguitoTrujillo Telefono (044) 201752 Correo electrónico: hermelinda _1@yahoo.com

9(1)2006 ORTIZ, H.; et al.

07

Caracterización del aceite esencial de (Labiaceae) de la Región La Libertad y estudio de

su actividad antibacteriana

Satureja sericeae

in vitro

essential oil, antimicrobial activity, beta­haemoliticus, sp aromatogram.

Characterization of the essential oil of (Labiaceae) from Region La Libertad and Study of its antibacterial activity

Satureja sericeae in vitro

Segundo S. Vigo­Alcántara y Valdemar Vigo­ Alcántara ¹ ¹

RESUMEN

Palabras clave:

ABSTRACT

Se determinó la composición del aceite esencial de , “shalgarromero” obtenido enOtuzco, La Libertad­Perú, en julio del 2003 y febrero del 2004 los cuales fueron extraídos mediante destilación por arrastre con vapor, con rendimientos de 0,12%.

El cromatograma de gases del aceitemostró 29 compuestos diferentes, de los cuales 23 fueron identificados mediante espectrometría de masas, destacando como componentes mayoritarios el ­carifileno (18,3 %), la pulegona (12,6%)y el ­cimeno (8,27%). El espectro IRdel aceitemuestra la presencia de losgruposhidroxilo, carbonilo ydobles enlaces carbonocarbono, lo que es coherente con los resultadosdeGC/MS.

Los aromatogramas frente a , S beta­hemolítico y sp muestran sensibilidadde estosmicroorganismos frente aeste aceite esencial.

aceite esencial, actividad antimicrobiana, beta­hemolítico sp aromatograma.

Essential oil isolated from , “shalgarromero” from Otuzco, La Libertad­Peru from July, 2003 to February, 2004, by steam distillation in yield of 0,12%was made in order to determine its composition. Gas chromatogram of oil shows 29 different compounds, 23 of themwere identified by mass spectrometry, the principal components being ­caryphyllene (18,3 %), pulegone (12,6 %) and ­cymene (8,27 %). The IR spectra of oil showhydroxyl and carbonyl groups, aswell as carboncarbon double bonds,which is coherentwith the GC/MS results.Aromatogram of beta­haemoliticus and sp shows that thesemicroorganismsare sensible to essential oil.

Satureja sericeae

trans p

Staphylococcus aureus treptococcus Klebsiella

Satureja sericeae, Staphylococcus aureus treptococcus ,Klebsiella ,

Satureja sericeae

trans p

Staphylococcus aureus, Streptococcus Klebsiella

, S

Key words: Satureja sericeae, Staphylococcus aureus Streptococcus Klebsiella ,

,

Artículo original

1 . Facultad de Farmacia y Bioquímica. Universidad Nacional de Trujillo. Trujillo. Perú

Recibido 13 de enero 2006, aceptado 23 de enero del 2006.

9(1)2006

08

INTRODUCCION

El hombre, desde tiempos remotos, se ha interesado en las fragancias asociadas con algunas plantas. Hace ya mucho tiempo se descubrió que los principios activos o esencias a que se deben esos olores tenían consistencia oleosa y podían ser separados por calentamiento o arrastre con vapor de agua, por lo que se les denominó aceites esenciales. Posteriormente, se amplió esta caracterización para abarcar compuestos aislados por procesos de extracción .

Los aceites esenciales generalmente son mezclas complejas de hasta más de 100 componentes, entre los que se identifican compuestos alifáticos de bajo peso molecular (alcanos, alcoholes, aldehídos, cetonas, ésteres y ácidos), monoterpenos, sesquiterpenos y fenilpropanos .

La separación de los componentes de los aceites esenciales suele realizarse mediante métodos cromatográficos y la caracterización de los mismos se efectúa mediante la determinación de sus propiedades físicas como color, olor, índice de refracción, rotación específica y por técnicas espectroscópicas. Dicha absorción produce transiciones electrónicas entre los diferentes niveles energéticos de los orbitales enlazantes y antienlazantes de las moléculas orgánicas. Mediante la longitud de onda y la intensidad de las diferentes frecuencias absorbidas es posible el reconocimiento de grupos funcionales y cromóforos presentes en las estructuras orgánicas.

La espectroscopía de resonanciamagnética nuclear es la técnica de mayor aplicación para la caracterización estructural de todo tipo de compuestos orgánicos, incluidos los aceites esenciales. Este método se basa en la absorción de energía radiante en el rango de radiofrecuencias, en presencia de un campo magnético, lo que produce cambios en los estados de spin de determinados átomos, tales como H y C. En la actualidad con bases de datos de los espectros, especialmente de C­ NMR para los monoterpenos y sesquiterpenos más frecuentes .

En el Perú, las infecciones respiratorias agudas (IRA), tales como bronquitis, neumonía, rinitis, faringitis, etc., ocupan el primer lugar como causa de enfermedad y muerte, siendo más frecuentes en niños

1,7

10

1 13

13

10

durante la estación fría. La mayoría de las infecciones respiratorias agudas son causadas por microorganismos miembros de la flora normal, debido a una alteración en su población. Dentro de estos microorganismos, l o s c a u s a n t e s m á s c omun e s s o n

y hemolíticos y

En la actualidad, la principal estrategia del programa de laOMSde lucha contra las IRAse opone al uso indiscriminado de antibióticos, ya que éstos deben limitarse al tratamiento de enfermedades graves de las vías respiratorias bajas, como casos concretos de neumonía en niños .

La mayoría de especies vegetales de la familia labiadas son ricas en aceites esenciales, de aplicación terapéutica popular. Por ejemplo, la , que crece en la sierra de La Libertad y es conocida como shalgarromero, es muy utilizada en infusión como carminativo, estomáquico, estimulante, relajante muscular y en el tratamiento del paludismo . Sin embargo, se desconoce la composición del aceite esencial de esta especie y si tiene o no actividad antimicrobiana, habiéndose planteado una investigación tendiente a responder la siguiente pregunta: ¿Cuáles son los componentes del aceite esencial de y posee actividad antibacteriana frente a

y microorganismos comunes de las zonas respiratorios y causantes de IRA, sobre todo en niños.

El presente trabajo de investigación fue realizado con la hojas de , “ halgarromero” de la familia Labiaceae, habitante de la sierra de la Región La Libertad, Perú. La muestra fue recolectada en las alturas de la localidad deOtuzco, en losmeses de Julio de 2003 yFebrero de2004.

Para los ensayos microbiológicos del aceite esencial se utilizaron las siguientes cepas bacterianas: No productores deBeta lactamasas, ß­hemolíticos y sp, cultivadas en agar nutritivoy enagar sangre

El aceite esencial fue extraído mediante destilación por arrastre con vapor de agua a presión ambiente, siguiendo el método descrito por Lorenzo y cols .

Staphylococcus aureus, Streptococcus Klebsiella .

Satureja sericeae

S. sericeae in vitro S. aureus,

Streptococcus Klebsiella

S. sericeae s

Staphylococcus aureus, Streptococcus

Klebsiella

5

4,6

11

10

MATERIAL Y METODOS

Extracción del aceite esencial.

VIGO S. y VIGO V. 9(1)2006

09

Determinación del índice de refr acción.

Rotación específica

Cromatografía de gases ­ espectrometr ía de masas.

Espectroscopía de infrarrojo.

Ensayos microbiológicos

El índice de refracción, n, de una determinada sustancia química es la relación de las velocidades de la luz en dicha sustancia y en un medio de referencia. De acuerdo a la ley de Snell.

La rotación específica es una propiedad física intrínseca de las sustancias ópticamente activas y se refiere la desviación del plano de la luz polarizada por efecto de la asimetría de sus moléculas. La actividad óptica se determina mediante el polarímetro.

La separación cromatográfica de los componentes de ambos aceites esenciales se efectuó en un sistema acoplado de cromatografía de gases­espectrometría de m a s a s G C /M S , P e r k i n ­ E l m e r , Turbochrom/Turbomass, utilizando una columna capilar PE­17 MS de 20 metros de longitud y diámetro interior de 0.18 mm, con una película de 0.18 m. Como gas portante se utilizó helio.

Los espectros de infrarrojo fueron registrados en un espectrómetro Perkin­Elmer 700 como líquidos puros endiscos de cloruro de sodio.

. La actividad antibacteriana se determinó utilizando el método de difusión de Kirbibauer .

.

2,9 Para ello, se tomaron tres a cuatro colonias del cultivo original de cada germen a ensayar con el asa bacteriológica y se suspendieron en 5 mL de solución salina fisiológica. Se dejó en reposo hasta alcanzar una densidad bacteriana similar a la turbidez del tubo N° 3 de Nefelómetro de Mac Farland (900 millones de bacterias por mL). y fueron cultivadas en agar nutritivo DIFCO, mientras que

beta­hemolítico en agar infusión cerebro corazón (BHI). Se vertieron 20 mL en placas petri hasta obtener un grosor homogéneo de aproximadamente 4 mm de espesor. Lasplacas fueronmantenidas a 37° en una estufa, durante a 60min, con la finalidad de eliminar la humedadde la superficie.

S. aureus Klebsiella

Streptococcus

Posteriormente, mediante una pipeta estéril, se vertieron 2 mL del inóculo microbiano sobre las placas de agar nutritivo y agar BHI sobre la superficie de las placas petri. La siembra se hizo usando el asa de Digralski inclinando y eliminando el exceso con una micropipeta; se dejó secar de 3 a 5 minutos antes de depositar lamuestra de aceite esencial.

Sobre las placas sembradas se colocan a la gota 30 mL del aceite esencial aceite esencial diluido en tween 80 a 75 y 50% en los pozos. Una vez depositados los aceites, se procede a sellar cada pozo con agar. Luego, las placas se colocaron a 4° C por un tiempo de 15 minutos. A continuación, se dejó 5 minutos a temperatura ambiente y finalmente, las placas fueron colocadas en incubación aeróbica a 37° C durante 24 horas. Transcurridas 24 horas se procedió a medir el diámetro de los halos de inhibición del crecimiento bacteriano de la muestra de aceite esencial.

Los resultados de los ensayos antibacterianos in vitro fueron sometidos a un tratamiento estadístico de análisis de varianzaANOVA

Se encontró que el porcentaje de rendimiento del aceite esencial extraído de

fue de 0,12% y que las propiedades físicas tuvieron los siguientes valores: densidad, 0,840; índice de refracción, 1,487; y rotación específica de+1,21°. Se detectó 29 diferentes posibles

componentes del aceite esencial, siendo el Trans­Caryphyllene(18.3%) y el pulegone (12.6%) losmás frecuentes (Tabla 1, Fig. 1). Se encontró, asimismo, que hubo actividad

a n t i m i c r o b i a n a c o n t r a l o s t r e s microorganismos probados (Gram positivos y Gram negativos) al apreciar claros halos de inhibición de dimensión variable (Tabla 2). En esta misma Tabla se aprecia que sólo contra

el aceite en estado puro es más eficaz respecto de los estados diluidos. Sin embargo, la capacidad antimicrobiana del aceite de la especie vegetal estudiada es menor que los antibióticos comerciales de uso común para los microorganismosprobados (Tabla 3).

Tratamiento estadístico.

.

RESULTADOS

S. sericeae

S. aureus

Caracterización del aceite esencial 9(1)2006

10

1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011121314151617181920212223242526272829

3.43 3.52 3.70 3.93 3.99 4.06 4.46 4.48 4.51 4.59 4.71 5.07 5.57 5.64 5.69 6.069 6.18 6.40 7.00 7.07 7.38 7.54 7.70 7.77 7.83 8.069 8.30 8.34 8.69

Bicyclo [3.1.0] Hexane, 4­Methyl­1­(1­Methylethyl)­Didehydro Alpha­Pinene (­) Camphene Sabinene Beta­Pinene Beta­Myrcene P­Cymene Lyratyl. Acetate 1,8­Cineole Beta­Ocimen Gamma­Terpinene Linalool Cyclohexanone.5­methyl­2­(1­Methylethyl) Cyclohexanol, 1­methyl­4­(1­methylethyl) Bicyclo [2.2.1] heptan­2­OL, 1,7,7­Trimethyl 1(7), 3, 8­O­Menthatriene Pulegone 4­(Cis­2,5,6,6­Tetramethylcyclohex­2­EN­1­yl) Butan­2­ONE Alpha­Copaene Beta­Boubonene Trans­Caryphyllene Alpha­humulenne Aromadendrene2 Bicyclogermacrene Delta­Cadinene Nerolidol Dispiro[Cyclopropane 1,6': 2,6”­BIS (Exo­6­Bicyclo[3.1.1]Hep Bergamotene 2, 3, 5, 8, 10, 11­Hexamethyenedodecane

0.2384 1.0660 0.344 1.0062 1.9586 0.3372 8.2706 4.3493 0.4311 2.2126 3.1427 4.3493 9.3187 2.3918 1.3512 0.4495 12.5789 1.4649 0.1831 0.8237 18.2895 4.3380 7.7970 2.8393 0.4527 3.6179 4.4427 1.4975 0.4557

Tabla 1. Posibles Componentes del aceite esencial de , “Shalgar romero Satureja sericeae

% COMPONENTE T.R. Nº

Diámetros promedios de los halos de inhibición en mm., desviación estándar (x D.S) y su tratamiento estadístico del aceite esencial de Shalgar romero frente a

, ß hemolíticos y Satureja sericeae,

Staphylococcus aureus Streptococcus Klebsiella.

Tabla 2.

a = Análisis de Varianza = 0.05 (5.12 g.l.); b = Las barras bajo las letras expresan no diferencia estadística significativa; P = Nivel de significancia; L.S.D = Mínima diferencia significativa

9(1)2006 VIGO S. y VIGO V.

11

Tabla 3. Comparación de la actividad antibacter iana del aceite esencial de y antibióticos comunes. Satureja sericeae

Amox.: Amoxicilina; Cefx.: Cefotaxima

0

Scan EI+ TIC

2.31e7 100

Caracterización del aceite esencial 9(1)2006

Fig. 1 Cromatograma de gases del aceite esencial de Satureja sericeae

12

DISCUSION

El tratamiento de la muestra mediante destilación por arrastre con vapor permitió aislar el aceite esencial con rendimiento de 0,12 %, lo cual indica la presencia de compues to s i n so l ub l e s en a gua y suficientemente volátiles. Asimismo, los valores de densidad, índice de refracción y de rotación específica hallados son concordantes con el rango de índice de refracción de los terpenos.

En el cromatogramade gases del aceite de (Fig. 1,Tabla 3) se puede observar que

5 componentes (Fracciones 7, 13, 17, 21 y 23) constituyen el 56% del total de la muestra. Por razones obvias de espacio, no es posible discutir los espectros de masas de todas las fracciones del aceite esencial, por lo que el análisis se limita al primer componente que eluye de la columna y al más abundante, es decir a las fracciones1 (RT3,43min/0,2384%) y 21 (7,38 min/18,2895%). En efecto, la búsqueda computarizada en las bibliotecas digitales Nist y Wiley reporta para para el primer compuesto en eluir (Fracción 1) como pr imera propues ta el 4­Met il ­1­(1­ metiletenil)­biciclo[3.1.0]hexano. Por su parte, la comparación del espectro demasas del componente 21, que eluye a RT=7,386 minutos, con los datos disponibles en las bibliotecas digitales Nist y Willey reporta como las cinco primeras alternativas al ­ Cariofileno. Dicha estructura es nuevamente propuesta cinco veces más en el análisis de las bases de datos.

En el espectro se observa una clara absorción a 3450 cm , que corresponde a las vibraciones de tensión del enlace oxígeno hidrógeno en alcoholes. La presencia de alcoholes (Tabla 3), que muestra la presencia de cuatro alcoholes en el aceite esencial: linalool, 1­metil­4­isopropil­ciclohexanol, 1,7,7­trimetil­biciclo[2.2.1]heptan­2­ol y nerolidol, cuyas concentraciones en conjunto significan el 11,7% de la composición total del aceite esencial.

La actividad antibacteriana del aceite esencial se de termina mediante el

S. sericeae

trans

­1

aromatograma . Los resultados de los halos de inhibición, cualitativamente se interpreta de la manera siguiente :

­ Sensible : Zona de inhibición superior a los 15mm.

­ Resistente: Noexiste zona de inhibición.

El hecho que para el caso de sólo los diámetros de los halos de inhibición producidos por el aceite esencial puro (18.00 ± 2.00 mm) es diferente estadísticamente que los otros tratamientos, demostrando con ello sensibilidad de la bacteria al aceite, que se consideran con efectos semejantes ( 75% (12.00 ± 3.46 mm), 50% (13.33 ± 1.15 mm) podría explicarse por características inherentes a cada especie de bacteria resultando de ello que algunas son resistentes a ciertos antibióticos y a otros no, hecho que conlleva a una búsqueda constante de estas sustancias de amplio espectro y de rápida acción .

La aparente menor actividad antibacteriana del aceite investigado respecto de dos antibióticos de uso común en el tratamiento de infecciones respiratorias agudas frente a tres agentes patógenos típicos en este tipo de dolencias, podría deberse a que los halos de inhibición para el aceite esencial fue registrado en condiciones diferentes que para los antibióticos ya que debido a la insolubilidad en agua del aceite, debieron utilizarse soluciones en Tween 80, el patrón general de sensibilidad por lo menos permite una comparación cualitativa entre la actividad del aceite esencial con las de la amoxicilina y cefotaxima. Debe señalarse, además, que los antibióticos comerciales están purificados y pulverizados lo que le permite actuar mejor, respecto a un aceite esencial más grotesco. Queda, sin embargo, la evidencia de que tiene capacidad antimicrobiana y que estos resultados pueden servir de base para, con una preparación farmacológica mas aparente se podrían encontrar superiores resultados.

12

13

8

S. aureus,

S. sericeae,

9(1)2006 VIGO S. YVIGO V.

13

CONCLUSIONES

El aceite esencial de Satureja sericeae, shalgarromero, puede ser extraído mediante destilación por arrastre con vapor, con rendimiento de0,12%. El aceite es menos denso que el agua, presenta índice de refracción de 1,487 y rotación específica de+ 1,21°. En el aceite de , mediante GC­ MS, se identificaron los siguientes compuestos: 4­metil­1­(1­metiletenil)­ biciclo[3.1.0]hexano, alfa­pineno, camfeno, sabineno , be ta­p ineno , mirceno, ­cimeno, 1,8­cineol, 1,3,6­octatrieno, ­terpineno, linalool, ­5­metil­2­isopropil­ciclohexanona, 1­

metil­4­isopropil­ciclohexanol, 1,7,7­ trimetil­biciclo[2.2.1]heptan­2­ol, 1­(7)­ 3,8­0­mentatrieno, pulegona copaeno, ­bourboneno, ­cariofileno ,

h um u l e n o , a r oma d e n d r e n o ­ 2 , b i c i c l o g e rm a c r e n o , ­ c a d i n e n o , nerolidol.

• El efecto de inhibición del desarrollo del S beta hemolítico y producido por el aceite esencial de es variable, existiendo una tendencia de presentar una concentración óptima para el mejor efecto. En todo caso, la capacidad de inhibición frente a los cultivos es menor que el producido por la amoxilina en similares condiciones.

S. sericeae

ß p y

cis

æ ß tr ans æ

8

tafilococcus aureus, Streptococcus ­ Klebsiella

S. ser iceae

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Correspondencia: ValdemarVigoAlcántara Praga 526.Sta Isabel ­Trujillo Teléfono: (044) 216463 CorreoElectrónico: Valdemosvial@hotmail.com

et al

h t t p : / / b i l b o . ed u . ug/planta/bolilla4.1de18,12de18

http://www.aromaterapia.com

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Caracterización del aceite esencial 9(1)2006

15

Variación del nivel freático y su efecto en la actividad agrícola en el Valle Moche, La Libertad. 2003

Variation of freatic level and his effect on the agricultural activity in the Moche Valley, La Libertad. 2003.

Ana M. Guerrero­Padilla José C. Florián­Florián ¹, ¹

RESUMEN

.

Palabras clave:

ABSTRACT

Key words:

Se determinó la variación del nivel freático y su efecto en la actividad agrícola en el Valle de Moche entre mayo y noviembre del 2003. Se aplicó, para tal fin, el diseño no experimental longitudinal panel en las mediciones del nivel freático, en pozos de observación ubicados en los distritos deMoche y Trujillo, los cuales han sido analizados estadísticamente mediante comparación de medias, varianzas y pruebas t de Student y de Fisher.

Se encontró que el nivel freático se incrementó enunpromedio de 0,02m, correspondiendo a los distritos de Moche yTrujillo conun incremento de 0,271y0,057m, respectivamente

Se concluye que existen impactos positivos y negativos los que a su vez fueron significativos y no significativos. El impacto positivo de mayor importancia y magnitud fue la disponibilidad de agua y el mayor impacto negativo fue la humedad ocasionado por la elevación del nivel freático siendo estos impactos los que han influidodirectamente en la actividad agrícola en elValleMoche.

Valle deMoche, nivel freático, actividad agrícola.

The variation of freatic level and his effect in the agricultural activity in the Moche valley, during May to November, 2003 was determined. The design non experimental longitudinal panel was applied in the measurement of the freatic level. The wells of observation were located in Moche and Trujillo district, which were statically analysed mean of the comparison of averages and variances, making the isodepth planes, using themethodof extrapolationof points, inwhichwas determined the soil area to different ranges of freatic level. In Moche valley was found the freatic level ascended in mean value of 0,02 m, in relation to Moche and Trujillo districts had an increment of 0,271 and 0,057 m, respectively. Positive and negative impacts were identified during the execution of this work, which could be significant or non­significant. Themost important andwidest positive impact, was the availability water and the biggest negative impact was the high humidity generated by the increase of the freatic level.

Groundwater,Moche valley, freatic level

Artículo original

1. Facultad de Ciencias Biológicas­Universidad Nacional de Trujillo. Trujillo­Perú Recibido 17 de enero 2006, aceptado el 14 marzo 2006.

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INTRODUCCION

En el ámbitomundial la preocupación por la conservación del medio ambiente va en aumento, las organizaciones de todo género están cada vez más preocupadas en lograr y d e m o s t r a r u n b u e n d e s e m p e ñ o medioambiental, controlando el impacto negativo de todas sus actividades o proyectos sobre el ambiente .

El desarrollo de los proyectos de riego que no cuentan con sistemas de drenaje en zonas áridas de México, Chile, Argentina, Perú y el oeste de los EstadosUnidos, hamostrado cómo la riqueza creada y el valor real y potencial de tierra bajo riego puede destruirse en el lapso de unos pocos lustros debido a los altos niveles de salinidad de las tierras y al elevado nivel freático que no permiten un crecimiento adecuado de las plantas. Considerando esta problemática, extensos proyectos de drenaje y rehabilitación de suelos se llevan a cabo en distritos del noroeste deMéxico, así como en el sur deArgentina y la costa delPerú .

Los proyectos de irrigación, durante muchos años, se han ejecutado para dar una solución a la escasez de agua y contribuir con el desarrollo agrícola o industrial e incluso la vida en general, y en el sentido más amplio del término, son el conjunto de acciones y obras encaminadas a lograr el desarrollo socioeconómico de una región árida o semiárida, a partir del aprovechamiento racional y armónico de los recursos hidráulicos. La bocatoma por la cual se captan las aguas, el canal de derivación que conducen las aguas hasta la zona de riego, el sistema de distribución por el cual se aplica el agua al suelo, y el sistema de drenaje que colecta el exceso de agua de riego, son las principales obras de un proyecto de irrigación .

En el Perú el Proyecto Especial Jequetepeque­Zaña y el Proyecto Especial Chavimochic han modificado las condiciones ambientales en su área de influencia, lo cual, sumado al manejo inadecuado del agua y al abandono en la explotación del agua subterránea, han ocasionado el incremento de la salinidad, pérdida de fertilidad, condiciones potenciales para la aparición de enfermedades transmisibles, elevación del nivel freático, entre otras .

El Proyecto Especial Chavimochic es uno de los más ambiciosos de irrigación e hidroenergético con propósitos múltiples; comprende la derivación de las aguas del río Santa desde el sector de Chuquicara hasta las pampas de Urricipe, a la margen derecha del Valle Chicama. El canal principal, denominado Canal Madre, atraviesa los Valles Santa (margen derecha), Chao, Virú, Moche y Chicama, mediante un canal de forma

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trapezoidal, con una longitud aproximada de 275 Km, conformado de secciones de canales abiertos, conductos cerrados y túneles, transportando un caudal de agua que varía de 95m /seg a16m /seg

El proyecto implica la ejecución deobras en tres etapas: la primera etapa cubre el tramo del río Santa hasta el Valle de Virú irrigando un área total de 51905 Ha, facilitando la incorporación de 33957 Ha. Además el desarrollo de esta etapa a permitido que varias localidades cuenten con electricidad producto de la construcción de una minicentral hidroeléctrica de Virú de 7,5 Mw. La segunda etapa comprende las obras de conducción del canal principal tramo Virú­Moche abarcando una longitud total de 66,8 Km irrigando un total 23023 Ha, incorporando 12708 Ha y la tercera (proyectada), obras que permitirán continuar con la construcción del canal madre en el tramo Moche­Chicama, las cuales irrigarán 69457 Ha. e incorporarán 19410 Ha .

Se han realizado estudios referente a “Planeamiento del sistemadedrenaje principal del Valle Moche”, lo que permitió la ejecución de 45 Km de drenes principales con una profundidad entre 2,0 y 3,0 m. En este estudio se recomendó que la entrega de agua a la planta de tratamiento de agua potable de Trujillo, a partir del canal madre Chavimochic, debería realizarse estrictamente para cubrir el déficit actual, también se recomendó que la empresa de Servicio de Agua Potable y Alcantarillado de La Liber tad Sociedad Anónima (SEDALIB) continuara con la explotación de agua subterránea a través de 58 pozos tubulares que producen 3 410 016 748 m /año. Asimismo, se recomendó que la Empresa Agroindustrial de Laredo continúe con la explotación de agua subterránea en un promedio de 5000000m3/año .

Desde 1997 se encuentra en operación la planta de tratamiento de agua potable, la cual tiene una capacidad de 1 m /s, sin embargo es importante destacar que por diferentes circunstancias, SEDALIB desde ese año no utilizó 23 pozos tubulares equivalentes al 40% del total, logrando una producción anual de 42 000 000 m de agua, de los cuales 21 600 000 m se obtuvo a través de la planta de tratamiento de agua y 20 400 000m a través de los pozos tubulares operativos. Asimismo la empresa Agroindustrial Laredo SA sólo ha explotado un promedio anual de 89 000 m de agua subterránea .

Un proyecto de la magnitud de Chavimochic, necesariamente causa efectos ambientales, tanto con relación a la modificación del espacio en que se desarrollan las obras (modificaciones topográficas), como en lo referente a las tierras mismas

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beneficiadas, que de una situación eriaza e improductiva pasaría a las características de una explotación agrícola productiva, competitiva y altamente rentable, con evidentes modificaciones ambientales socioeconómicas y aún climáticas .

Teniendo en cuenta la gran relevancia del proyecto Especial Chavimochic y por la problemática generada por la ejecución del mismo, se planteó una investigación que tuvo comoobjetivo determinar la variación del nivel freático y su efecto en la actividad agrícola en elValle deMoche.

Para efectuar el estudio se empleó una sonda simple y sonda eléctrica para realizar las mediciones del nivel freático y planímetro para determinación de áreas. Equipo GPS, para la ubicación de los pozos a evaluar. Se elaboró, asimismo, planos de ubicación de la zona de estudio.

Se realizó las mediciones en cada pozo en forma directa, utilizando la sonda simple o la eléctrica y dependiendo de la profundidad de la napa freática en cada caso

Se evaluó el área de estudio con el propósito de establecer las condiciones en que se desarrolla la actividad agrícola en el Valle de Moche, para lo cual fue necesaria la obtención de información del Ministerio de Agricultura, Proyecto Especial Chavimochic, Junta de Usuarios de la Zona en estudio y del Instituto Nacional deEstadística e Informática.

Para la identificación de los efectos sobre la actividad agrícola, se consideró el desarrollode este sector así como las diferentes actividades asociadas, confrontando además componentes del medio socioeconómico con la finalidad de determinar los efectos positivos o negativos sobre la agricultura. Para la evaluación de los impactos ambientales se diseñó una Matriz Ambiental General y una Matriz de Importancia .

En la Matriz Ambiental General se consideró si el impacto era positivo o negativo y si a su vez era significativo o no. Lamatriz de Importancia se elaboró calificando los impactos de acuerdo a su naturaleza, intensidad, extensión, periodicidad y recuperabilidad.

Se aplicó el diseño No experimental, longitudinal­panel .

Se empleó los datos sin manipulaciones tal

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MATERIAL YMETODOS

Medición del nivel freático

Diagnóstico ambiental del área de estudio

Identificación de efectos en la actividad agr ícola

Diseñoestadístico aplicado

cual se presentan en su contexto natural, en las diferentes evaluaciones realizadas en los pozos en estudio, así como la evaluación estadística F y t de Student .

Los resultados de las mediciones del nivel freático en los pozos en observación en los sectores del Valle de Moche, así como la diferencia de éstas semuestran en lasTablas 1 y 2, correspondientes a los sectores distritales de Moche y Trujillo respectivamente, cuyos resultados se expresan en las Figuras 1 y 2, respectivamente.

El área de la superficie de los suelos del valle de Moche para diferentes rangos de profundidad, fueron: entre 0,0 m y 1,0 m de 688,00 Ha en mayo y 989,20 en noviembre; entre 1,0 y 2,0 m de 2292,00 Ha en mayo y 2986,00 en noviembre; entre 2,0 y 3,0 m de 1744 Ha en mayo y 15566,80 en noviembre; y entre 3,0 y 4,0mde 952,8'Ha enmayoy 820,80 en noviembre.

Se determinó que el nivel freático en el Valle de Moche en su conjunto no ha variado significativamente en el periodo de estudio, cuyos resultados fueron dados por los análisis estadísticos de la prueba t de Student. El nivel freático en el Valle Moche no cambió significativamente (p = 0,604 0,05) durante el funcionamiento del sistema de drenaje del Proyecto Especial Chavimochic (Tabla 3).

Asimismo, se encontró que el nivel freático en el Valle Moche varió significativamente en los distritos de Moche y Trujillo, datos obtenidos mediante la prueba estadística F de Fisher (43,146). El análisis de varianza indica que la variación del nivel freático en el Valle Moche varió significativamente (p=0,0000,05) en los distritos deMocheyTrujillo (Tabla 4).

En la Tabla 5 se muestra la matriz de importancia de los impactos generados en la actividad agrícola, positivos y negativos, sobre los componentes suelo, agua y aire y los aspectos ecológicos, socioeconómicos y culturales.

LaTabla 6muestra la matriz de importancia de los impactos positivos y negativos generados a consecuencia del incremento de la napa freática en elValleMoche.

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RESULTADOS

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Tabla 1. Determinación del nivel freático en pozos de observación Valle Moche Sector distr ito Moche

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Tabla 2. Determinación del nivel freático en pozos de observación Valle Moche Sector distr ito de Trujillo

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Fig. 1.Nivel freático en pozos de observación valle Moche­Sector distrito Moche (Mayo­Noviembre 2003). P. N.F. : Profundidad del nivel freático en metros, considerando 0,00 el nivel del suelo. Pozo de observación : Número de pozos de observación segúnTabla 1.

Fig. 2. Nivel freático en pozos de observación valle Moche­Sector distrito Trujillo (Mayo­Noviembre 2003).PNF: Profundidad del nivel freático en metros, considerando 0,00 el nivel del suelo. Pozo de observación : Número. de pozos de observación segúnTabla 2

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Mes

Mayo

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Nivel Freático Variación Intervalo Confidencial

P.P.N.F.

3,8144

3,7944

Desviación Estándar 3,8144

3,7944

Desviación Estándar P t P.P.N.F. Inferior Superior

­0,0201 0,4412 ­0,669 ­0,669 ­0,0790 0,0391

Fuentes de var iación

Distritos

Error

Suma de cuadros

Grados de liber tad

Cuadrado medio

P

P.P.N.F., Profundidad promedio del nivel freático en metros;t, valor de t Student; p, nivel de significancia

Tabla 4. Comparación de la variación del nivel freático en el Valle Moche durante el periodo de Mayo a Noviembre del 2003

Valor F, Valor de F Fisher ; p, nivel de significancia

Valor F

Total

18,828

23,019

41,847

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215

4,707

0,019

43,146 0,00

Tabla 5. Matriz de Impactos ambientales en la actividad agrícola generados por la variación del nivel freático en el Valle Moche.

Componente

1. Suelo ­Erosión ­Problemas de drenaje ­Salinización ­Humedad ­Contaminación por sustancias químicas ­Incorporación de tierras agrícolas ­Cambios en la topografía

Fase de ejecución Fase de funcionamiento

N+

Impacto Directo

Impacto Indirecto

Impacto Directo

Impacto Indirecto

2. Agua

3. Aire

­Cambios en la demanda del agua superficial ­Elevación del nivel freático ­Mayor disponibilidad para la agricultura

­Contaminación por ruido ­Modificación del clima

4. Ecologia ­Alteración de la vegetación natural ­Incremento en cosechas ­Cambios de cultivos tradicionales ­Modificación de la biota ­Creación de hábitat para vectores

NA NA NA NA

NA N­

NA

NA NA

NA NA

N+ NA NA NA

NA NA NA NA NA

NA NA

NA

NA NA

N­ NA

NA NA NA NA

NA N+ N+ N+ NA

P+ NA

N+

N+ P+

NA NA

N+ P+ NA NA

NA NA NA NA N­

NA NA

NA

NA NA

NA N­

N+ NA N­N­

NA NA NA N­

N+, impacto negativo significativo; N­, impacto negativo no significativo; P+, impacto positivo significativo; P­, impacto positivo no significativo; NA, no aplicable

Variación del nivel freático y su efecto Tabla 3. Var iación del nivel freático en el Valle Moche durante el per iodo de Mayo a Noviembre

del 2003

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DISCUSION

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La manera más efectiva para asegurar la protección, a largo plazo, de las fuentes de abastecimiento de agua potable es proteger las zonas de captación del recurso, tanto superficiales como subterráneas. Sin embargo, r e l a t i v amen t e poc as empr es a s de abastecimiento de agua potable y las entidades públicas responsables de la prestación de estos servicios son dueños o controlan la mayoría o toda la tierra que se encuentra dentro de las cuencas que las proveen de agua. En áreas que enfrentan la presión del desarrollo urbano o que contienen tierras atractivas para uso agrícola o forestal, el costo para adquirir terreno para proteger las fuentes de abastecimiento de agua potable puede llegar a se r prohib i t ivo . Es ta s i tuac ión es particularmente común para sistemas de abastecimiento de agua potable relativamente pequeños, los cuales enfrentan grandes desafíos financieros por la necesidad de cumplir con nuevas regulaciones de calidad de agua. La mayoría de los servicios de abastecimiento de agua potable y las entidades públicas locales deben enfrentar la situación combinando medidas de manejo de cuencas, manejo de embalses y tratamiento del agua para alcanzar la mejor calidad posible del recurso .

En los sectores distritales de Moche y Trujillo, (Tablas 1 y 2) se registró un descenso de 0,271m en mayo a 0,057m en noviembre debido a que en estos sectores son colindantes con el río Moche y los resultados concuerdan con lo propues to an te r io rmen te , considerándose al río Moche como drenaje natural para los sectores distritales colindantes, especialmente en los últimos meses del año, cuando el caudal del río es mínimo. Los estudios de Impacto Ambiental del Proyecto Especial Chavimochic en el ámbito de la primera y segunda etapa, también concluyen que el río Moche es un drenaje natural .

Se ha determinado que la superficie seriamente afectada, cuyo nivel freático se encuentra entre 0,0 y 1,0 m de profundidad, se ha incrementado en 1,92% en noviembre del 2003 en relación al mes de Mayo del mismo año; en cuanto a la superficie afectada, cuyo nivel freático se encuentra entre 1,0 y 2,0m, y a la superficie ligeramente afectada, en la que el

nivel freático se encuentra entre 2,0 y 3,0 m de profundidad, éstas han disminuido en 1,88% y 1,13%, respectivamente, en Noviembre del 2003 en relación al mes de Mayo del 2003 (Tabla 3). El aumento de la superficie seriamente afectada definitivamente causará daño a los cultivos, debido a que el exceso de agua restringe su crecimiento .

Las pruebas estadísticas aplicadas confirmaron la variación del nivel freático en el valle Moche (Tabla 4), encontrándose que en los distritos de Moche y Trujillo un descenso del nivel freático, debido a que el sistema de drenaje de Chavimochic permitió disminuir riesgos de elevación del nivel freático. Se requiere de sistemas de drenaje secundario y parcelario, tal como se indica en el expediente técnico “Ejecución de Obras ambientales de la segunda etapa del programa de reducción de la vulnerabilidad de los desastres naturales en el Proyecto Especial Chavimochic .

La actividad agrícola no sólo ha modificado el sistema natural en el Valle Moche por la actividad generada del Proyecto Especial Chavimochic, sino que ha dado origen a una dinámica de cambios más profundos indeseados o negativos tanto desde el punto de vista agrícola como ambiental. Para afrontar esta problemática no sólo fue necesario analizar las características del sector productivo y los mecanismos de redistribución social, sino que fue necesario orientar esfuerzos de origen público y privado a la interrelación de recursos, capacidades y oportunidades locales, que permitanmejorar la calidad de vida de los pobladores a través no sólo de la agricultura sino también del turismo por contar con diversos recursos tales como los h i s t ó r ic o ­ cu l t u r a l e s , ec o l óg i c o s y agrotecnológicos.

La matriz ambiental general (Tabla 5), muestra que el Valle Moche se ha visto modificado por los impactos originados durante la ejecución y funcionamiento del Proyecto Especial Chavimochic debido al uso inadecuado e irracional del agua causando impactos negativos significativos como erosión, alteración de la vegetación natural, problemas de drenaje, mayor salinización, incremento de humedad, cambios en la demanda del agua superficial, elevación del nivel freático, conflictos sociales, riesgo en el manejo de plaguicidas y depreciación de viviendas. Entre los impactos positivos

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significativos se encuentran los cambios en la densidad de la población, venta de tierras, incorporando tierras agrícolas.

El impacto negativo de mayor importancia es el incremento de la napa freática en la zona baja con una valoración de 66 y el mayor impacto positivo es la incorporación de tierras agrícolas con un valor de +57, según la matriz de importancia (Tabla 6). El elemento del ambiente impactado negativamente en mayor importancia y magnitud fue el suelo representado por el problema de humedad y el elemento con el mayor impacto positivo fue el agua reflejado en el mayor disponibilidad de ésta para la agricultura, tal como lo revela la matriz de identificación y valoración de impactos. Lo primero se debe a la falta de criterio técnico en el manejo del sistema de riego, lo cual provocó la elevación del nivel freático con los consecuentes problemas de humedad; mientras que lo segundo corrobora el objet ivo de l Proyecto Espec ial Chavimochic, que es de proporcionar agua al agricultor durante todo el año.

La problemática del incremento del nivel freático como lo demuestra el presente estudio se debe a que los centros poblados del Valle Moche, dejaron de consumir agua del subsuelo y además la empresa de agua SEDALIB dejó de operar los pozos tubulares y empezó a brindar sus servicios utilizando aguas del río Santa, disponibles gracias al canal madre de la represa Chavimochic, teniendo así una mayor disponibilidad de agua para la agricultura con el incremento de la napa freática. Los problemas de humedad y salinización, por su lado, motivaron a algunos agricultores de vender sus parcelas y debido a la mayor disponibilidad de agua generada por el Proyecto se produjo cambios en la preferencia de siembra de los cultivos predominantes, donde antes se cultivaba maíz, espárrago y caña de azúcar; actualmente la preferencia es la siembra demaíz, caña de azúcar y espárrago.

Esta ligera disminución del cultivo de espárrago es debido a que muchas áreas dedicadas a la siembra de este vegetal han quedado inutilizadas por los problemas ya mencionados, sin embargo esta disminución es compensada por la producción agrícola de las áreas nuevas incorporadas. A su vez, existe un incremento en la preferencia de siembra de caña de azúcar, el que proviene de la mayor disponibilidad de agua, ya que este cultivo

requiere de riego por anegamiento para su mejor desarrollo, generando el incremento del nivel freático cerrando así el círculo de origen y consecuencia del problema.

Por la mayor disponibilidad de agua y su menor costo de operación provocó el abandono paulatino del uso alternativo de pozos, lo que sumado a la falta de drenes para las aguas no aprovechadas y la utilización no adecuada de este recurso originaron problemas de embalsamiento, por lo que los agricultores han visto disminuida su productividad por el ascenso de la napa freática en la parte baja del valle y la falta de drenes que han ocasionado la pérdida de áreas de cultivo. Las áreas acumuladas de las superficies afectadas correspondieron a aproximadamente 2 986 Ha en noviembre y 2 980 enmayo, en ambos casos se observó que estas superficies se han incrementado con relación a las determinadas en el monitoreo del nivel freático del valle Moche realizado por el Proyecto Especial Chavimochic , precisándose 2 157,88 Ha para mayo del 2003. Estos resultados son concordantes con los del monitoreo del nivel freático de la zona arqueológica de Chan Chan reportado por el Ministerio de la Presidencia mediante el cual se determina que como consecuencia de la disminución del volumen de agua subterránea que se venía explotando para uso poblacional, agrícola e industrial, las superficies afectadas y seriamente afectadas se han incrementadoennoviembre.

Considerando el incremento de las superficies afectadas y el incumplimiento de las recomendaciones planteadas en el estudio “Planteamiento del sistema de drenaje principal Valle de Moche” y de no continuar con la extracción del agua subterránea para uso poblacional yagrícola en forma racional, sería válida una proyección para los siguientes años, de un incremento de superficies afectadas; asimismo, el nivel freático continuaría elevándose, especialmente en los sectores en estudio.

La producción de los cultivos requiere un ambiente edáfico adecuado, el que depende también del régimen térmico e hídrico, así como de su aireación, nivel de salinidad y fertilidad del suelo. En la naturaleza el régimen de reposición de agua del suelo no siempre se ajusta a las necesidades reales de los cultivos, debiendo recurrir al control de la humedad edáfica, que asegure a los cultivos el ambiente

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adecuado para su crecimiento y desarrollo, ya sea reponiendo agua mediante la práctica de riego o evacuando excesosmediante drenaje .

El drenaje tiene como objetivo eliminar el exceso de agua del suelo, a fin de mantener las condiciones de aireación y la actividad biológica del mismo, indispensable para cumplir los procesos fisiológicos relativos al crecimiento radical. De esta manera se garantiza al cultivo la posibilidad de expansión en profundidad, lo que significa un mayor soporte mecánico y el mayor acceso al agua y los nutrimentos . También es importante el drenaje para la remoción de sales del suelo y el mantenimiento de su balance salino, por ello no sólo se entiende la lixiviación de sales que originalmente contiene el suelo, también está referido al abatimiento de los niveles freáticos, para evitar que las sales asciendan a la capa radical a través del agua que consumen las plantas .

La implementación de sistemas de riego por gravedad en las áreas nuevas que están ubicadas en la parte alta del valle no es posible debido a su característica hidrodinámica presentes en los suelos de estas áreas, favorables a altas tasas de infiltración, constituyendo un riego inminente para la afectación de los valles por mal drenaje y salinidad, por estas razones se hace necesario el uso del riego presurizado. La FAO ha tenido una creciente preocupación por los efectos negativos del desarrollo económico sobre el mal uso del agua, habiendo declarado mundialmente la necesidad de “Proteger la calidad del agua” para el manejo seguro y sostenible de los recursos hídricos. De conformidad con esto, han dado simple importancia a los aspectos relacionados con el mejoramiento del manejo del agua en la agricultura que debe ser cada vez más eficiente como insumo de producción. Uno de estos aspectos es la gestión de la calidad del agua, incluyendo la prevención y el control de su contaminación, así como también la protección en las prácticas agrícolas.

El nivel freático en el Valle de Moche en mayo y noviembre del 2003 se ha incrementado en un promedio de 0,02 m,

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CONCLUSIONES

­

correspondiendo a los distritos de Moche y Trujillo un incremento de 0,271 y 0,057m, respectivamente. La superficie seriamente afectada por la variación del nivel freático se incrementó en 301,2 hectáreas, equivalente a 1,92 % de la superficie del Valle Moche, en noviembre del 2003 respecto de mayo del mismo año. E l imp a c t o po s i t i v o de mayo r importancia fue la incorporación de tierras agrícolas y el mayor impacto negativo, la elevación del nivel freático en la zona baja del distrito por las inadecuadas condicionesde drenaje. El elemento ambiental que fue impactado positivamente en mayor importancia y magnitud fue el agua por la mayor disponibilidad de esta para la agricultura, mientras que el suelo fue el elemento impactado negativamente a causa del exceso dehumedad.

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RECOMENDACIONES

.

Cump l i r c on l a s r e c omend a c i on e s planteadas en el estudio Planeamiento del Sistema de drenaje principal del Valle Moche, con la finalidad que dicho sistema c o n s t r u i d o c um p l a s u s o b j e t i v o s propuestos R e a l i z a r e s t u d i o s q u e p e r m i t a n c u a n t i f i c a r l o s n i v e l e s d e a g u a subterránea enbúsqueda deuna solución como es de explotar en recurso para uso poblacional, agrícola e industrial y evitar impactos negativos en elmedio ambiente d e l ValleMoche. El estado debe apoyar la realización de un estudioo ambiental en elValle deMoche, a fin de mejorar la actividad agrícola y el a s p e c t o socioeconómicodel agricultor. El Min is te r io de Agr i cu l tu ra debe c a p a c i t a r y s e n s i b i l i z a r a l a s organizaciones de usuarios para que adminis t ren adecuadamente el agua superficial y subterránea. El estado y el sector privado deben incentivar la promoción de actividades rurales agrícolas y no agrícolas como el t u r i smo a t r avé s d e su s re cu r s o s h i s t ór i cos cu l tu ra l e s , ecológ icos y agrotecnológicos.

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Correspondencia: AnaM.Guerrero Padilla Mz.F­9,Urb. StaMaria 4ta etapa ­Trujillo Teléfono: (044)293743 CorreoElectrónico: Marlequerrero@yahoo.com

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14.Ministerio de la Presidencia. Ejecución d e obras de la segunda etapa y obras del

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Remoción del metabisulfito de sodio del extracto acuoso de salvado de trigo utilizado en la producción de

empleando yodato de potasio y cenizas de carbón vegetal

Bacillus thuringiensis

Sodium metabisulphite removal from aqueous extract of wheat brand used in production using potassium yodate and vegetable

carbon ashes. Bacillus thuringiensis

Julio C. Arellano­Barragán Juan D. Icanaqué­Ordinola ¹, ²

RESUMEN

Palabras clave:

ABSTRACT

Key words:

Con el objeto de extraer nutrientes del salvado de trigo se usó el metabisulfito de sodio (0,45% a 50%C/24h) como agente extractor y yodato de potasio para la eliminación de este agente. El metabisulfito rompe la pared celular de los granos de trigo liberando sustancias al interior. El extractante residual (metabisulfito) es perjudicial para las bacterias y debe ser eliminado. En esta reacción, el yodato de potasio oxida al metabisulfito el sulfato pasando el yodato a yoduro el que es eliminado con cenizas de carbón vegetal. experimenta un buen crecimiento en este medio así tratado, el mismo que es comparable a su desarrollo en el caldonutritivo base.

Con este tratamiento el crecimiento fue similar al delmedio control, debidoprobablemente a que la ceniza de carbón adsorbió el yoduro en el carbonoya queéste tienemayor actividad catalítica por yodo, cloro y bromo.

Este trabajo abre la posibilidad de utilizar sustancias químicas eficaces en la extracción de nutrientes para microorganismos aunqueestos seanpotentes agentes inhibidoresdel crecimientomicrobiano.

metabisulfito, yodato, yoduro, cenizas.

With the purpose of extract nutrients fromwheat bran, sodiummethabisulphyte SM­ (0,45% to 50%e/24h) was used as an extrating agent and potassium yodate for the elimination of this agent. SMbreaks the wheat bran wall cell releasing substances from inside. Residual methasulphyte is harmful to bacterium and it must be eliminated. In this reaction, potassium yodate oxides methabisulphyte to sulphate changing to yodure, which is eliminatedwith ash charcoal. increases his growing verywellwhen this treatedmedium isused in quantity comparable to growing in nutritive broth. Growing was similar like the control medium with this treatment, probably ask charcoal absorbed yodure bymeans of carbon due tomore catalytical activity by iodine, chlorine and bromine. This researching opens the possibility for use efficient agents for extracting nutrients for microorganisms, although theseagents could bepotents inhibitors ofmicrobial growing

,methabisulphyte, yodate, yodure, ash charcoal.

Bacillus thuringiensis

Bacillus thuringiensis,

B. thuringiensis

.

Bacillus thuringiensis

Artículo original

1. Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo. 2. Egresado de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo

ceptado el 18 de abril del 2006. Recibido 30 de mayo 2005, a

9(1)2006

INTRODUCCIÓN

15

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28

18

23

6,20

3,4,5 19 9,17

24

Los medios de producción para microorganismos a nivel industrial son, a veces, de costos elevados por lo que se busca su reducción. Elmedio de cultivo debe asegurar el crecimiento celular y/o la formación del metabolito de interés, con los rendimientos y velocidades requeridos. Mediante el tipo y cantidad de uno o más componentes del medio de cultivo es posible controlar la actividad metabólica. Los componentes empleados en las indus tr ias de fermentación son generalmente complejos

El corn steep liquor es un medio hecho de macerado de maíz con metabisulfito de sodio, es un medio esencial en la producción de antibióticos , se ha demostrado que es muy e f i c i e n t e e n e l c r e c i m i e n t o d e microorganismos, se reportó una buena producción de ácido láctico usando

. También se usa para la producción de xilanasa por

sp. PC22 Se ha logrado, asimismo, el crecimiento de

var israelensis en este medio de cultivo .

registrado por primera vez en 1901 como causante de la enfermedad de “Soto” del gusano de seda del Japón, tomó su nombre en 1927.Años más tarde, ya se usaba a la bacteria como controlador de plagas cuyos resultados permitieron la primera preparación comercial denominada SPORINE en Francia . Su importancia como controlador biológico de insectos plaga se debe a la producción una endotoxina cristalizable denominada delta­ toxina formando un complejo espora­cristal de comprobada eficacia para insectos coleopteros , lepidopteros , dípteros incluyendo vectores de enfermedades humanas. Se ha usado, asimismo, como acaricida en Cuba para el combate del ácaro rojo en cultivos

Lactobacillus delbrueckii

Streptomyces Bacillus

thuringiensis

B. thuringiensis,

.

El complejo espora­cristal que produce esta bacteria sólo es eficaz, si el insecto plaga lo ingiere rápidamente en dosis relativamente elevadas (10, 5, 4) produciendo una parálisis específicamente en su sistema digestivo provocándoles la muerte (3). Preparaciones de endosporas de esta especie esporulada se han utilizado extensivamente durante los últimos 20 años para el control de plagas de insectos. 2

L o s s u l f i t o s s o n a n t i o x i d a n t e s , antimicrobianos y blanqueadores, son usados para numerosos propósitos en alimentos, bebidasy farmacéuticos

El accionar del metabisulfito, de acuerdo a sus características químicas y físicas, causa el desprendimiento de las sustancias naturales de su matriz vegetal y su transición a la fase líquida; probablemente se deba a su capacidad de atravesar la membrana celular en forma de ácido sulfuroso , Rompiendo la pared celular y liberando las sustancias del interior celular.

El salvado de trigo es uno de los subproductos del proceso de molturación y cernido del trigo para la obtención de harina, se usa para alimentación animal, este subproducto contiene un 20% de almidón y el contenido en fibra disminuye paralelamente desde un 10 hasta un 2% de fibra bruta, al igual que el de fósforo (desde 0,9 hasta 0,3%) mientras que el de proteína permanece relativamente estable (13­15%). En cualquier caso, la composición química de estos subproductos es bas tante va r iable , dependiendo de la variedad utilizada (mayor contenido de proteína en las de trigo duro), condiciones de cultivo (clima, fertilización), grado de madurez del grano, y, sobre todo, del sistema de extracción que condiciona la tasa de extracción deharina, y, por tanto, la proporción de almidón que permanece en el salvado. Por ello existen notables variaciones en la composición del salvadoentre proveedores.

Los salvados son una buena fuente de ácido linoleico, que representa un 57% de la grasa total, y de minerales, ya que el 80% de los minerales del grano se encuentran en la capade aleurona y en el pericarpio. Sin embargo debe tenerse en cuenta que, al igual que otros componentes, la concentración de cenizas y, sobre todo, de microminerales, es bastante variable, yqueunaparte importante del fósforo está en forma de fitatos. Los subproductos de cereales tienen un contenido apreciable de proteína, compuesta principalmente de albúminas y globulinas. Como consecuencia, su contenido en lisina es del orden del doble que en el grano de trigo, mientras que el de treonina es algo superior y el de aminoácidos azufrados similar

Recientemente se ha utilizado el macerado de salvado de trigo (bran steep liquor) como sustituto del macerado de maiz (corn steep

1.

7,12,13.

8.

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28

Arellano J., Icanaqué J.

liquor) con la finalidad de emplearlo como medio de cultivo para ,

y sp. determinandose la dificultad en el desarrollo de estos microorganismos debido a la a l ta concentración del metabisulfito de sodio. El metabisulfito es un potente inhibidor del crecimiento de aun a concentración tan baja como 180 ppm. Esto motivó la planificación de una estrategia para eliminar el metabisulfito residual utilizando yodato de potasio y otras sustancias para eliminar el yoduro formado Técnicas de remoción utilizando nitrato de plata ó peroxido de hidrógeno para remover el yoduro formado por la reacción del metabisulfito de sodio con el yodato de potasio, no dieron resultados satisfactorios.

Las cenizas de carbón mineral y el mismo carbón activado son empleados para la remoción de compuestos fenolicos, sales de oro y otras sustancias toxicas con buena capacidad de adsorción y por lo tanto buenos medios para eliminar contaminantes. En el presente trabajo se trata de demostrar la capacidad de remoción del yoduro residual producto del tratamiento con yodato depotasio para la eliminación del metabisulfito de sodio, con las cenizas de carbón vegetal. Los resultados demuestran que las cenizas de carbón vegetal remueven el yoduro residual del macerado de salvado de trigo, permitiendo el uso integral de este producto como unmedio de cultivo eficaz para el crecimiento de

MATERIALYMETODO

A 2 L. de solución de Metabisulfito de sodio (0.45%) se le agregó 200 g. de salvado de trigoy se incubó a50ºCpor 24 horas.

Se midió el pH (pH:4,5), luego se filtró a través de un colador o gasa, se usó el líquido y se descartó el residuo del salvado, al líquido se le filtróhasta su transparencia.

En un matraz con 200 mL de macerado de salvado de trigo (MST) se agregoó10 mL KIO3 en dos e tapas , t r a scur r idos aproximadamente unminuto (c/etapa) se pudo

observar una reacción, al término de esta reacción se hizo una prueba cualitativa para el ion yoduro en un tubo (1mL de MST + 1 mL almidón al 2% ).

Con la finalidad de eliminar el ión yoduro se le agregó 0,5 g de cenizas de carbón, se agitó durante un tiempo y luego se filtró. Se ajustó el pH a 7,0 y luego se esterilizó en autoclave a 15 lb por 15minutos.

Una concentración inicial 1,6 x 105 células/mL de en 100 mL del macerado de salvado de tr igo con metabisulfito se incubó a temperatura ambiente durante 72 horas. Se hizo los recuentos en Cámara de Neubauer cada 12 horas para luego graficar las respectivas curvas de crecimiento. Se realizaron los ensayos por triplicado.

Crecimiento de en el macerado de salvado de tr igo con metabisulfito diluido, y en el diluido suplementado con extracto de levadura.De un cultivo joven de se cosechó con 2 a 3mLde aguadestilada estéril por placa de cultivo.

Se preparó una suspensión de esporas (aproximado al tubo 6 de Mc Farland) de la cual se hizo una dilución al 1/10. Luego a un volumen de 18mLde losmedios respectivos a pH 7.0 (27) se colocó 2mLde esta dilución, se procedió a incubar a temperatura ambiente (21) por 48 horas con aireación. Se hizo los recuentos usando un espectronix/20 previamente se grafico la absorbancia de los tubos del nefelómetro, y su obtuvo la biomasa final. Se realizaron 10 ensayos. Se uso como control caldo nutritivo.

Una concentración inicial 1,6 x 105 células/mL de en 100 mL del macerado de salvado de trigo tratado, se incubó a temperatura ambiente durante 72 horas. Se hizo los recuentos en Cámara de Neubauer cada 12 horas para luego graficar las respectivas curvas de crecimiento. Se realizaron los ensayos por triplicado. Y

B. thuringiensis S. cerevisiae Mucor

B. thuringiensis

B. thuringiensis.

B. thuringiensis

B. thuringiensis

B. thuringiensis

B. thuringiensis

16.

1.34,14,31.

Preparacion del macerado de salvado de tr igo (MST)

Eliminación del metabisulfito de sodio del medio líquido y evaluación del crecimiento.

Crecimiento de en el macer ado de salvado de t r igo con metabisulfito.

Crecimiento de en el macerado de salvado de tr igo tratado con yodato de potasio y cenizas de carbón vegetal.

B. thuringiensis

B. thuringiensis

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Remoción del Metabisulfito 9(1)2006

también se repitió estos ensayos en un medio control (caldo nutritivo).

Se leyó la absorbancia a 530 nm, de los tubos del nefelómetro de Mc Farland, para obtener una curva de la turbidez de los diferentes tubos de Mc Farland medida por absorbancia con lo cual se pudo determinar el número de células a partir de esas lecturas.

A una muestra del macerado de salvado de trigo tratado para eliminar el metabisulfito se le realizó el análisis cuantitativo de nitrógeno, cenizas, sulfatos (11, 26, 30) y glucosa (método enzimático con glucosa oxidasa).

Los resultados obtenidos fueron agrupados a fin de estimar promedios, y luego se les realizó la prueba de t de student no pareada, para determinar la diferencia significativa en cada medio. Para el analisis de los resultados de las curvas de crecimiento se le realizo una prueba deANAVA.

La actividad microbiana se ve afectada no sólo por los constituyentes del medio de cultivo y la concentración de éstos, sino también por las interacciones entre tales componentes . La inter acc ión de l metabisulfito y los componentes del salvado de tr igo probablemente afectan la concentración final de éstos y también al crecimientode

Se preparó medio líquido usando salvado de trigo, empleando metabisulfito de sodio (0,45%) como agente extractor (50°C /24 horas) y yodato de potasio para la eliminación de este agente oxidante. El metabisulfito rompe la pared celular de las células de trigo liberando sustancias del interior y por su naturaleza química perjudicial para las bacterias, debe ser eliminado del medio de cultivo. En esta reacción el yodato de potasio oxida al metabisulfito a sulfato pasando a yoduro, el mismo que es eliminado con las cenizas de carbón vegetal, verificándose su eliminación por el crecimiento de

en estemedio. La adsorción es un proceso por el cualmoléculas de impurezas se adhieren a la superficie del carbón. La adherencia es gobernada por una atracción electro­química, este hecho sucede cuando las cenizas de carbón entran en contacto con el yoduro soluble enelmedio.

La velocidad de crecimiento fue 0.104 h­1

Diseño de una curva del nefelómetro de Mc Far land para cuantificar Nº de células por absorbancia.

Análisis químico

AnálisisEstadístico.

DISCUSIÓN

2 2

B. thuringiensis.

B.thuringiensis

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RESULTADOS

Tabla 1. Recuento celular de en mercado de salvado de tr igo tratado con cenizas de carbón vegetal. B. Thuringiensis

9(1)2006 Arellano J., Icanaqué J.

Tiempo (Horas)

Ensayos (númerodecélulas/mL) 1 2 3

Log del número de células

0 122436486072

2,14E+05 2,33E+06 4,00E+06 2,56E+07 9,31E+07 9,25E+07 8,45E+07

5,434 6,213 6,428 7,189 7,545 7,951 8,022

5,204 6,132 6,357 7,148 7,847 7,880 7,848

5,331 6,367 6,602 7,407 7,969 7,966 7,927

1,60E+05 1,36E+06 2,28E+06 1,41E+07 7,04E+07 7,59E+07 7,05E+07

2,72E+05 1,63E+06 2,68E+06 1,55E+07 3,51E+07 8,93E+07 1,05E+07

31

Tabla 2. Recuento celular de en caldo nutr itivo. B. Thuringiensis

Tabla 3. Recuento celular en la fase exponencial de en macerado de salvado de tr igo tr atado con cenizas de carbón vegetal (MST) y en caldo

nutr itivo. Los datos representan el promedio de 3 exper imentos.

B. Thuringiensis

* No hay diferencia significativa en los valores promedios.

Remoción del Metabisulfito 9(1)2006

Tiempo (Horas)

Ensayos (númerode células/mL)

1 2 3 Log del número de células 0 122436486072

1,60E+05 4,29E+06 1,66E+07 1,72E+08 6,68E+07 2,22E+07 1,96E+07

5,395 6,728 7,249 8,179 7,596 7,398 7,170

5,070 6,678 7,143 8,092 7,684 7,394 7,447

5,204 6,633 7,220 8,236 7,825 7,346 7,292

1,17E+05 4,77E+06 1,39E+07 1,24E+08 4,83E+07 2,48E+07 2,80E+07

2,48E+05 5,35E+06 1,78E+07 1,51E+08 3,94E+07 2,50E+07 1,48E+07

En MST

Recuento de células/mL

En caldo nutritivo

Recuento de células /mL Tiempo Horas) (

4,801E+06 1,609E+07 1,489E+08 3,945E+07

1,77E+06 2,98E+06 1,84E+07 6,62E+07

12243648

ANAVA

F Experimental

Probabilidad* F tabulado

0,55722982 0,488968876 6,607876912

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9(1)2006 Arellano J., Icanaqué J.

y en el medio control de 0.143 h­1. Además se notó en los datos para obtener las curvas de crecimiento que hubo mayor ufc/ml en la fase logarítmica final en el medio tratado que en el medio control, esto debido a que en el medio se encuentra presente glucosa dando así la facilidad que tienen algunas bacterias de incorporar directamente la glucosa para sus funciones metabólica , ahorrando un gasto mayor de energía.

Posiblemente en la formación de cenizas a partir del carbón vegetal, se encuentran moléculas de carbono capaces de atrapar o adsorber los átomos de yodo, formas geométricas de moléculas de carbono atrapando en su interior a los iones yoduro similares a los fullerenos (C60) y una forma alotrópica del carbono que son moléculas formadas a partir de anillos pentagonales de carbono .

Con este tratamiento el crecimiento fue similar al del medio control, probablemente debido a que la ceniza de carbón adsorbió el yoduro en el carbono ya que éste tiene mayor actividad catalítica por yodo, cloro y bromo; la ceniza actuó como un catalizador­sustrato, en este caso el yoduro viene a ser el sustrato. Existen referencias donde se ha usado carbón activado para adsorber oro en biorreactores agitados, pero durante una hora y también donde se han usado cenizas de carbón mineral para la descomposición de fenol . En esta investigación no se sabe con certeza si tiene influencia el tiempo, por queno se experimentó con este parámetro, pero se comprobó que el yoduro fue extraído ya que se logró un buen crecimiento, difícil de lograr con el yoduro presente en el medio de cultivo. Puede ser que también la agitación constante contribuya a la mayor adsorción del yodo, pero en este trabajo no se ha cuantificado este factor.

El efecto del pH también pudo estar involucrado en la adsorción del yoduro por las cenizas de carbón como lo mencionan en trabajos con carbón mineral que a pH ácidos actúa mejor sobre la adsorción de sustancias toxicas como el fenol Nosotros trabajamos manteniendo el pH natural del macerado que fue de 4,5.

Cuando se cultivó en el macerado de salvado trigo sin tratamiento, no hubo crecimiento alguno, esto probablemente debido a la alta de concentración de metabisulfito en el medio de cultivo lo cual

originó la inhibición del desarrollo de la bacteria (datos nomostrados).

Este trabajo abre la posibilidad de utilizar reactivos eficaces en la extracción de nutrientes para microorganismos aunque estos agentes sean potentes inhibidores del crecimiento microbiano ya que pueden se fácilmente removidos.

De lo expuesto podemos concluir que: El licor de salvado de trigo remojado con metabisulfito de sodio, el mismo que es extraído con yodato de potasio y cenizas de carbón vegetal es adecuado para el cultivo de

25

33

34

14

31.

B. thuringiensis

B.Thuringiensis.

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Agrobacterium

Bacillus thuringiensis

Bacillus thuringiensis

Bacillus thuringiensis

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Bacillus thuringiensis

Bacillus thuringiensis.

Bacillus thuringiensis

Bacillus

Bacillus thuringiensis.

Bacillus thuringiensis

Tetranuchus tumidus Tetranychidae

Bacillus thuringiensis

Streptomyces

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Correspondencia: JulioArellanoBarragan SanFrancisco386SanSalvador ­Trujillo Teléfono: (044) 235841 CorreoElectrónico: jcab442@hotmail.com

Lactobacillus delbrueckii

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Remoción del Metabisulfito 9(1)2006

37

Frecuencia génica de los marcadores y en la comunidad aguaruna de Yamayakat Región Nororiental

del Marañón­Perú

DYS199 DYS287 ­

­

Frequency Genica of the markers , and in the community Aguaruna of Yamayakat ­ Region Northeast of the Maranon Peru.

DYS199 DYS287

Juan C. Muro­Morey Luis A. Rodríguez­Delfín y Milenka B. Narbaiza­Chanducas 1 2 3 ,

RESUMEN

Palabras clave: Marcadores y aguarunas, regiónNororiental­Perú.

La porciónno recombinante del cromosomaY(NRPY), es unaherramientaquepermite realizar estudios demográficos

y se esta aplicando en el estudiode las poblaciones humanas paradescifrar la historiamigratoria del hombre.

Se caracterizan los componentes génicos paternos de la población de la etnia Aguaruna de la comunidad nativa de

Yamayakat en el nororientedel Perú.

Lasmuestras de sangre periférica fueron obtenidas de 30 individuos varones adultos, sin parentesco. ElADN se extrajo

utilizando Proteinasa K, Sarcosyl, y precipitando con etanol. Los marcadores moleculares analizados fueron: Inserción

del locus (alelos YAP y YAP )], para el cromosoma Y de origen africano. La mutación de punto CT del locus

(alelos CyT). que define el origen amerindio. La distinción alélica de estos polimorfismos se realizó a través de las

técnicas de PCR PCR “alelo específica” respectivamente. Los productos fueron separados por electroforesis en gel de

poliacrilamiday visualizadosmediante tincióncon nitrato de plata.Comoresultadode este análisis se tuvoque29 individuos

presentan el alelo T del (96.7%). No se reporta la inserción . Se determinaron dos haplotipos, siendo el más

frecuente (YAP /T) (96,7%) y (YAP /C) (3,3 %). La diversidad genética obtenida para el locus fue de 0,067. La

diversidad haplotípica para losmarcadores bialélicos y fue de0,067.

No existe componente genético africano en la comunidad nativa estudiada, ya que el aleloYAP nos indica el grado de

miscegenación con grupos humanos de ascendencia africana. El alelo C no puede ser excluido totalmente, ya que puede

formar parte del patrilinaje autóctono, es necesario caracterizarlo conotrosmarcadores. El valor para el aleloTobtenido en la

comunidad nativa de Yamayakat, está relacionado con las costumbres sociales ancestrales que mantienen aún en la

actualidad, como lo es el tipo dedescendencia cognática obilateral , la reglamatrimonial preferencial entre parientes lejanos,

la existencia de matrimonios polígenos, y el levirato. El 1% del componente paterno no nativo estaría representado por el

haplotipo (YAP /C )de los cromosomas examinados.

Alu DYS287

DYS199

DYS199 Alu DYS199

DYS287 DYS199

+ ­

­ ­

+

­

DYS199 DYS287,

Artículo original

1.Facultad deCienciasBiologicasde laUniversidadNacionaldeTrujillo (UNT) 2. Laboratorio de Biología Molecular, Facultad de Ciencias Médicas­UNT 3. Egresada de la Facultad de Ciencias Biológicas­UNT

Recibido el 30 mayo 2006, aceptado el 14 junio 2006

9(1)2006

38

ABSTRACT

Keywords: and markers, aguaruna community,NortheastRegion­Peru

The portion non recombinant of the chromosome DNA (NRPY), it is a tool that allows to be carried out demographic studies and you this applying in the studyof the human populations todecipher theman'smigratory history. Thecomponent paternal genic of the population of the population of the ethnos Aguaruna of the native community of Yamayakat is characterized in the domestic northeast. The samples of outlying bloodwereobtainedof 30maturemale individuals,without relationship. The DNAwas extracted using ProteinaseK, Sarcosyl, and precipitating with ethanol. The analyzed molecular markers: InsertAlu of the locus DYS287 (allelesYAP+ andYAP ­)], for the chromosomeANDofAfrican origin. The point mutation C­­>T of the locus (alleles C and T), that defines theAmerindian origin. The distinction allelic of these polymorphisms was carried out through the techniques of PCR ­ PCR "I stupefy specific" respectively. The products were separated by electrophoresis in polyacrilamide gel and visualized by means of tint with silver nitrate. As a result of this analysis one had that 29 individuals present the I stupefy T of the DYS 199 (96.7%). the insert Alu is not reported. Two haplotyps was determined, being themost frequent (YAP­/T) (96,7%) and (YAP­/C) (3,3%).The genetic diversity obtained for the locus DYS199 was of 0,067. The diversity haplotypic for the markers two allelics and were of 0,067.African genetic component doesn't exist in the studied native community, since the I stupefyYAP+ it indicates us the miscegenation grade with human groups ofAfrican origin. He stupefies C it cannot be excluded totally, since it can be part of the autochthonous father lineage, it is necessary to characterize it with other markers. The value for the I stupefy T obtained in the native community of Yamayakat, it is related with the ancestral social customs that maintain even at the present time, as it is it the type of descendant cognatic or bilateral, the preferential matrimonial rule among distant relatives, the existence ofmarriages polygens, and the levirate. 1%of the component paternal non native would be represented by the haplotyp (YAP­/C) of the examinedchromosomes.

DYS199

DYS287 DYS199

DYS199 DYS287

INTRODUCCIÓN

Las poblaciones ancestrales deAmérica han sido clasificadas en tres grupos denominados: Amerindios, Ná­Dene yAleuti­Esquimales . LosAmerindios se encuentran enAmérica del Norte, Centro y Sur; los Ná Dene ocupan el Noreste de América del Norte y los Aleuti­ Esquimales enAlaska .

Inicialmente en la caracterización de las poblaciones humanas, se utilizó a los llamados “marcadores clásicos” como son: Grupos sanguíneos (ABO, MNS, RH) estudios sobre polimorfismos de proteínas sér icas (haptoglobina, trasferinas, antitripsina), el complejo de histocompatibilidad (HLA), estableciendo relaciones entre poblaciones humanas de América y otros continentes y contribuyendo a la comprensión de los movimientosmigratorios . Técnicas de biología molecular modernas,

han permitido la identificación de un mayor número de marcadores de ADN de importancia antropológica que agrupan a las poblaciones humanas, según el origen étnico/antropológico . Los estudios se han realizado en la décadade los setenta, con el uso de enzimas de restricción y sondas de ADN la implementación de la síntesis química del ADN , reacción en cadena

8,38

29

16

22

39

20,7

in vitro

de la polimerasa (PCR: Polimerasa Chaín reaction) en combinación con RFLP (Restricción fragment length polimorphims) y los STRs (Short tandem repeat) han permitido revelar con mayor detalle la variabilidad humana anivel delADN . Los estudios de genética poblacional y el

interés de conocer el origen del poblamiento americano son posibles con el ADN mitocondrial y el cromosoma Y, los cuales se heredan con baja recombinación, tienen un solo ancestro materno y un solo ancestro paterno respectivamente. En los últimos años el cromosoma Y esta despertando grandes expectativas al revelarse como una útil fuente de polimorfismo de ADN. Es uno de los cromosomas mas pequeños del genoma humano, su tamaño es de 60 Mb El 95% corresponde a la región no recombinante (NRPY) reg ión que se he reda exclusivamente por línea paterna (patrilínea). Desde el punto citológico el cromosomaYestá formado por regiones de heterocromatina y eucromatina; en los mamíferos es el responsable de la codificación del desarrollo testicular (TDF: testis determining factor, Factor de Desarrollo Testicular), en una etapa precozde la embriogénesis . Se conocen diversos tipos de polimorfismos

localizados en este cromosoma, detectables

26

14

5.

1 2 , 1 3

5

MURO , J.; et al. 9(1)2006

39

por métodos basados en PCR entre ellos tenemos: duplicaciones/delecciones , Reordenamiento complejo , mutaciones p u n t u a l e s de c amb io s d e b a s e , inserciones/delecciones y Polimorfismos en ADNrepetido en tandem . L a s s u s t i t u c i o ne s d e u n a b a s e

nucleotídica representan un evento mutacional único, estos polimorfismos son poco variables, su tasa mutación es baja y presentan sólo dos estados alélicos como es el marcador DYS199, mutación de citosina a timina (CT) de la región NRPY . La mutación ocurrió aproximadamente hace 30,000 años en poblaciones ancestrales de América, donde el alelo T (DYS 199T) se encuentra en alta frecuencia, enAmérica del Sur yCentral (90%) y en América del Norte (56­67%) ; las poblaciones europeas, asiáticas, africanas presentan sólo el aleloC (DYS199C) . El locus DYS287 (elemento Y

Polymorphic element), está definido por la inserción de un fragmento de ADN de la familia de 300 pb en la región NRPY del brazo largo Yq11, del cromosoma Y . La inserción Alu ocurrió durante la evolución del hombre en África una única vez, hace aproximadamente 141,000 años . Se ha reportado alta frecuencia en África (46­86%), moderada frecuencia en Europa (4­11%), valores bajos en poblaciones del Sureste de Siberia, Mongolia, Taiwán (1.9 3.2%), las poblaciones deAmérica carecen de la inserción YAP (YAP ) debido a que la mutación ocurrió después de las primeras migraciones de varones desde África hacia EuropayAsia .

Además de los anteriores marcadores, existe el polimorfismo de regiones de 2­20 nucleótidos que se repiten en tandem denominados (VNTRs: Variable number tandem repeats); uno de ellos, los microsatélites, presentan una extensa variación en sus alelos y altos valores de heterogeneidad dentro y entre las poblaciones; pueden informar acerca de algunos aspectos de la historia genealógica y de los procesos de evolución ocurridos en la historia de la humanidad.

En Perú, la diversidad del cromosoma Y en la población mestiza peruana es alta debido almestizaje con poblaciones europeas y africanas. En un estudio con tres marcadores

6 , 16

23

4 1

9

15,34

11 ,41

5

41

17

9

37

­

10,17

AP o ALU

Alu

Homo sapiens

(DYS199, DYS287 y DYS392), se ha estimado la diversidad en 0.871 y cuando se excluye haplotipos no nativos se reduce a 0.697 .Valores similares se ha reportado para tribus amazónicas delBrasil 0.737 .

En la Amazonía Peruana existe más de 20 grupos étnicos, algunos mantienen cierto grado de aislamiento cultural y geográficos como los Bora, Campas, Ashaninkas, Huambisas,Aguarunas, Candoshi, etc. y otros. Interrelaciones culturales entre andinos y amazónicos, han sido relatados por arqueólogos e historiadores en base a los análisis de los artefactos de cerámica, plumas de aves exóticas, plantas medicinales y relaciones culturales. Como lo es el caso del contacto comercial entre Mochicas y Jíbaros (100 a.c. ­ 700 d.c.) en la región de Chinchipe en el departamento de Amazonas , permitiendo el intercambio de oro y productos de la región de los jíbaros, por textiles y otros productos de losmoches.

En el reinado del Inca TúpacYupanqui sus tropas conquistaron a estos pueblos (Huambos) muchos de los indígenas huyeron hacia la selva y los incas enviaron grupos denominados “mitimaes” para poblar el valle. Según las crónicas queda establecido que al margen derecho del río Chinchipe existieron pueblos semi­salvajes, los cuales recibieron diversos nombres entre ellos Jíbaros Aguarunas, a quienes se les llamaba icam yagua “el perro del bosque”, así lo demuestra la llegada de los españoles por el río Chinchipe . Los conquistadores españoles tuvieron sus primeros contactos con los jíbaros cuando fundaron Jaén de Bracamoros en 1549, objetivo de estos colonizadores era la explotación de los depósitos de oro de la región, para ello comenzaron a esclavizar a la población indígena. Como resultado, se produjo la gran rebelión jíbara en 1599, perdiendo los españoles el control de la región por muchos años.

A inicios del siglo XX, las relaciones entre los grupos jíbaros y los colonizadores blancos y mestizos eran aún de gran hostilidad.Apesar de ello en 1925, una misión religiosa protestante nazarena se estableció entre los aguaruna, el Instituto Lingüístico de Verano (ILV) envió a un grupo de lingüistas al territorio aguaruna . En 1949, la Orden Jesuita, estableció su misión en Chiriaco. Así, desde mediados del presente siglo, la población aguaruna ha venido recibiendo educación

32

3

18

24 , 27

2 4 , 2 7 ,2 8 , 30

4

Frecuencia génica de los marcadores DYS199 9(1)2006

40

escolarizada. Durante la década de 1970­1979, muchos aguaruna trabajaron para compañías extranjeras en la construcción del oleoducto trasandino .

De acuerdo al 1º Censo de Comunidades Nativas del Instituto Nacional de Estadística e Informática (INEI) realizado en 1993, los Aguaruna son los más numerosos con 45,137 personas, constituyen el 18.83% de la población indígena censada (INEI, 1999). Es el grupo con el mayor volumen poblacional después de los Asháninka (Bant. 1994), los cuales se encuentran distribuidos en los departamentos de San Martín, Loreto y Amazonas .

La comunidad nativa de Yamayakat , esta ubicada dentro del distrito de Imaza, la cual alberga cerca del 69% de la población nativa de dicho distrito, la población masculina (51.3%) es superior a la femenina (48.7%), siendo la principal actividad económica la agricultura de subsistencia .

En la etnia aguaruna se han realizado estudios lingüísticos, antropológicos, y arqueológicos (Brown, 1994), iniciándose con el presente estudio la caracterización del cromosoma Y en base a dos marcadores específicos como son y para la comunidad nativa de Yamayakat ­ Amazonas, teniendo como objetivos determinar la frecuencia alélica y haplotípica, y la diversidad genética para ambos marcadores.

Yamayakat es una comunidad nativa de la etnia Aguaruna, ubicada en la margen izquierda del río Marañón entre las coordenadas 05.03'24” S' y 78.20' 17” 0', a 35 m.s.n.m , en el distrito Imaza Provincia de Bagua, Dpto. de Amazonas (Región Nor Oriental delMarañón)Perú.

Los individuos fueron seleccionados considerando los siguientes criterios: Personas nacidas en Yamayakat con un apellido perteneciente a la onomástica jíbaro, presente en las tres últ imas generaciones y preferentemente nacidos en Yamayakat. Fueron criterios de exclusión: La presencia de características Europeas (idioma Español, color de ojos, piel caucásica, entre otros) o africana (pelo ensortijado, pigmentación oscura, formade labios).

4

4

42

DYS287 DYS199

MATERIAL YMÉTODOS

Zona de estudio

.

Muestr a

Las muestras fueron obtenidas de 30 varones adultos saludables, que dieron su consentimiento al ser informados sobre la investigación ha realizar.

A cada uno de los individuos seleccionados se les extrajo 2­3mL. de sangre periférica, los cuales fueron colocados en tubos con anticoagulante (EDTA), y mantenidos en refrigeración (­4ºC) hasta su procesamiento en laboratorio.

Las células sanguíneas fueron lavadas con solución TE 20:5. ElADN fue extraído usando Sarkoslyl 1% y proteínasa K, 0.1 mg/ml; se adicionó acetato de amonio 2.5.M. ElADN se precipitó con etanol absoluto helado, resuspendido en soluciónTE 10:1 y mantenido en refrigeración ( ­ 4ºC).

Es un indel (inserción /delección), tipificado y descrito porHammer yHorai . Por técnicas dePCR, cuando existe la inserciónAlu (aproximadamente 300pb) se detecta un producto de 455 pb (YAP ); y si esta no se ha producido, 150 pb (YAP ). La secuenciación ha mostrado que el cromosoma y el elemento se insertan en la misma posición en diferentes individuos.

Extracción deADN

Marcadores del cromosomaY : DYS287

11

+

­

ALU

9(1)2006 MURO , J.; et al.

Tabla 1: Secuencia de cebadores del marcador DYS287

LOCUS REFERENCIA SECUENCIA DE CEBADORES

DYS287 Hammerç & Horai 1995

Forward 5 TATATTTACACA TTTTTGGGCC/3

:

Reverse: TGACAGTAAAAT GAACACATTGC

DYS199: Es un SNP (single nucleotide polymorphism ), presenta un tamaño de 241 pb. La mutación transición C T se ubica en la posición de la base 181 . La tipificación de este marcador se hizo utilizando la técnica convencional denominado “PCR­alelo­ especifica” siendo para el alelo C la combinación (P +P ) y para el aleloT (P +P ).

41

1 3 2 3

Amplificación delADN Componentesdel PCR

Los componentes de PCR (Tabla 3) se mezclaron en un microtubo, colocándose 11,5 µLdevolumendeMIXy luego se colocóADN en cadauno de los tubos.

Tabla 3: Componentes de la reacción PCR y sus concentraciones en un volumen de 11,5 L por tubo µ

41

2,5 Mm dNTPs 2,5 mM Mgd 2 2,5 mM Primers Taq­DNA sol. ADN molde

0,2 mM (c/u) 1,5 mM 0,5 µM

0,5 µL/tubo ­­

11,5 µlMIX + 1,0 µL ADN molde = 12,5 µL

10,0

50,0 1,0 1,0

7,5

Condiciones de amplificación de los sistemas

Sistema (YAP) ( T )

Los programas de amplificación se llevaron a cabo en un termociclador Perkin Elmer 2400 en la Unidad de Biología Molecular del Instituto de Medicina Tropical. Facultad de MedicinaUniversidadNacional deTrujillo.

abla 4 ; para este sistema se calentaron las muestras a 94ºC durante 30 seg. con el objetivo de desnaturalizar el ADN. Posteriormente se disminuyó la temperatura a 56ºC durante 4 seg. para que pudiera llevar a cabo el alineamiento de las cadenas de ADN y la extensión transcurrió a 72 ºC durante 60 seg., se realizaron 30 ciclos

DYS 287

DYS 287 TEMPERATURA ºC

Denaturación 94

Hibridación 56 30

Extensión 72

TIEMPO Nº CICLOS

30

45

60

Tabla 4: Programa de amplificación del sistema DYS287

Sistema DYS 199 (Tabla 5), para este sistema se calentaron a 94ºC durante 30 segundos con el fin de desnaturalizar el ADN. Luego se bajó la temperatura a 60 durante 45 seg. para que tuviese lugar la fase de acoplamientos y, finalmente, la extensión transcurrió a 72 durante 60 seg., se realizaron 35 ciclos.

MIX ­ 10 MUESTRAS

CONCENTRACIÓN

FINAL

ddH O 2 ­­ 34,0 10V H2O 1x 12,5

Frecuencia génica de los marcadores DYS199 9(1)2006

Tabla 5: Programa de amplificación del sistema DYS199

DYS 199

Denaturación

Extensión

TEMPERATURA ºC94

72

TIEMPO

30

60

Hibridación 60 45 35 ciclos

Nº CICLOS

Tabla 2: Secuencia de cebadores del marcador DYS199

LOCUS REFERENCIA SECUENCIA

DE CEBADORES

DYS199

P1 reverse: 5´­ GGTACCAGCTC TTCCTAATTG­3

Underhill et. 1996 al.

P2 reverse: 5´­ GGTACCAGCTC TTCCTAATTA­3 P3 foward: 5´­ TAATCAGTCTC CTCCAGCA­3´

Detección de los productos amplificados El ADN amplificado fue discriminado

mediante electrofores is ver t i cal de poliacrilamida (PAGE) al 4% (20% de acrilamida y 1% de bisacrilamida) en placa de 20 mL. Se aplicó una corriente eléctrica inicial de 80 v durante 5 min, posteriormente se estandarizó a 110 120V. Para el marcador DYS287, el tiempo de corrido electroforético fue de 50 minutos, y para el DYS199 se realizó primero el corrido del alelo C (P +P ) durante 35 minutos y el aleloT (P +P ) durante 30minutos posteriores.

1 3

2 3

42

Para la visualización se utilizó la tinción de plata descrita previamente . 36

Análisis estadístico

Nei:

RESULTADOS

DYS287 DYS199

DYS287

DYS199

Se determinó la frecuencia alélica y haplotípica por conteo de los alelos de cada uno de los marcadores ( :YAP, YAP;

:Alelo C, Alelo T) analizados para la etnia aguaruna.

Ladiversidad genética fue calculada usando la fórmula de

donde “h” es la diversidad y “n” es el número de individuos y “pi” frecuencia alelica y haplotípica (Nei. 1987).

Treinta individuos del sexo masculino de la c omun i d a d n a t i v a d e Yama y ak a t pertenecientes a la etnia aguaruna fueron examinados con dos marcadores polimórficos específicospara el cromosomaY.

No se reporta la inserción del elemento Alu en el locus (YAP), para los individuos analizados.

El alelo C del locus fue observado en un individuo (3.3%) y el alelo T en 29 individuos (96.7%).

Tabla 6: Frecuencia alélicas de los marcadores DYS287 y DYS199 d el cr omosoma_Y para los pobladores de la etnia aguaruna de la comunidad nativa de Yamayakat Amazonas, Perú, 2003.

n n­1 (1 ­ pi ),

2 h=

Se han formado dos haplotipos: 29 individuos presentan YAP /T siendo este el haplotipo más frecuente; YAP /C, presente en un individuo (3,3%).

La diversidad genética para el locus DYS287 en individuos de la etnia aguaruna fue de cero (0) y para el locus DYS199 fue de 0,067. El análisis de la diversidad haplotípica par

los polimorfismos bialélicos (DYS287 / DYS199) en individuos de la etnia aguaruna fue de 0,067.

La gran cantidad de marcadoresmoleculares que se han descrito en el genoma humano a lo largo de los últimos años y la relativa facilidad con que la técnica de PCR permite su análisis, ha resultado en la aplicación de este tipo de polimorfismos en numerosos estudios de caracterización genética .

En tal sentido, la realización del presente trabajo, se ha estructurado alrededor del análisis de marcadores bialélicos como son: DYS287YDYS199, existiendo precedentes de otros estudios ya realizados . Los individuos analizados de la comunidad

nativa de Yamayakat de la etnia Aguaruna no presentan la inserción (YAP ) para el locus DYS287 (100%), es muy similar a los valores obtenidos por otros investigadores en poblaciones autóctonas amerindias . Los individuos de la etnia Aguaruna

presentan el alelo YAP no existe componente paterno africano en este grupo humano; ya que el alelo YAP nos indica el grado de

­

­

31

9,32,33,35,41

+

9,32,33,35,41

+

+

Tabla 7: Frecuencia de dos haplotipos del cromosoma Y en base a dos marcadores de los loci: DYS287 y DYS199, para pobladores de la comunidad nativa de Yamayakat de la etnia aguaruna.

DISCUSIÓN

Alu

Locus Alelos

n = 30 Frecuencia

0 30

%

YAP + YAP ­ DYS 287

DYS 199 T C

29 1

0100 96,7 3,3

YAP DYS199 n = 30 Frecuencia

%

YAP +

YAP ­ T C

29 1

96.7 3.3

9(1)2006 MURO , J.; et al.

La frecuencia haplotípica en la población seleccionada para los locus bialelicos (DYS287 / DYS199) son mostrados en la Tabla 7.

miscegenación con grupos humanos de ascendencia africana . Se tiene conocimiento que los incas no pudieron conquistarlos y tampoco pudieron someterlos; fueron sometidos a ser adoctrinados por los misioneros, entre ello Jesuitas y Domínicos; los aguarunas impidieron todos los avances de colonos y destruyeron asentamientos españoles hasta inclusive, entrada el siglo 20 de acuerdo a estos datos históricos ayudan a dilucidar la ausencia del alelo YAP en la etnia aguaruna. Estudios de caracterización del

cromosoma Y en poblaciones nativas de América, el alelo T del locus DYS199, define el haplotipo fundador amerindio (Underhill.1996). Los resultados presentados en este estudio (Tabla 6) afirman la prevalencia del alelo (96,7%), indicando el origen ancestral autóctono americano del linaje paterno en la etnia aguaruna, este valor es cercano a valores reportados para otras tribus amazónicas sudamericanas de Brasil, superior a los valores encontrados en pobladores del distrito de Moche Provincia de Trujillo La Libertad, con 73,3% , pobladores quechua de Santiago de Chuco, con 53%, pobladores quechua de Lima Pasco con 44% y pobladores quechua de Arequipa Tayacaja (75,6%) . El valor obtenido para los individuos de la comunidad nativa de Yamayakat está relacionado con la estructura social que mantienen aún en el siglo XXI, como lo es el tipo de descendencia cognática o bilateral que presenta la etnia aguaruna, la regla matrimonial preferencial entre parientes lejanos, la existencia de matrimonios polígenos y el levirato según el cual, cuando muere un hombre, su hermano mayor tiene el derecho de casarse con la viuda después de un tiempode luto .

El alelo estuvo presente solo en un individuo (3.3%), indicaría un bajo grado de miscegenación en este grupo amerindio, esta se ha dado durante la época del “Boom cauchero” y la inserción de las misiones evangelizadores en las comunidades nativas, la construcción del oleoducto transandino, entre otros procesos migratorios ocurridos en la etnia Aguaruna . Este valor es inferior al obtenido para otros grupos amerindios como lo es en pobladores quechuas de Lima Pasco (56%), poblaciones quechuas de Arequipa

33

4

+

28

35

40

1,2,4, 30,43

4

T

C

Tayacaja (24.4%), población con ancestro mochero La Libertad con 26.6% , pobladores quechuas de Santiago de Chuco La Libertad con 46.7%. Esto sugiere la prevalencia del carácter endógamo del grupo cognático, así como la existencia de factores demográficos, geográficos, culturales­étnicos y políticos que a veces terminan en el aislamiento de los grupos humanos. Pero no se puede descartar que algunos cromosomas como el alelo C ó haplotipo YAP /C , también tenga un origen autóctono americano

La diversidad genética calculada para el locus DYS199 fue de 0.067, valor inferior al reportado porBianchi (0.098), para tribus amazónicas del Brasil entre ellas tenemos: Arara, Kayapo, Wayampi, Wayan, Apal , Yanomama. La carencia de Cromosomas Y con el alelo YAP, esta es la causa de no poder obtenerla ya que no hay componente paterno africano .

Se han formado dos haplotipos por la asociación de los marcadores bialélicos

y , siendo el haplotipo de mayor frecuencia (YAP­ / T), demostrándose la homogeneidad genética y la prevalencia del componente paterno amerindio­amerindia que semantiene en este grupo humano apesar de las intensas campañas colonizadores a las cuales han sido sujetas desde la época del incanato hasta la actualidad . La ausencia del haplotipo (YAP / T), es

esperada, pues la mutación C T ha ocurrido en un cromosoma Y ancestral con alelo YAP; las mutaciones que originaron estos polimorfismos son considerados no recurrentes . El haplotipoYAP /C (3.3%) estuvo presente

en un solo individuo, pero no puede descartar el componente autóctonoamericano . El grupo étnico aguaruna presenta un bajo

valor de diversidad genética (h = 0,067) , este valor es inferior al obtenido para grupos amazónicos del Brasil obtenido por Núñez en pobladores mocheros (h=0.405), existiendo un alta predominacia de cromosomas amerindios. Se han realizado estudios de caracterización

genética de poblaciones nativas Peruanas con ADNmt, permitidiendo verificar que el haplogrupo B ADNmt es el de mayor frecuencia en las actuales poblaciones nativas peruanas, como lo es la población de la isla de

28

­

21,33,41,44.

3

4

9,41

­

33,41

3 28

et.al

DYS287 DYS199

43

Frecuencia génica de los marcadores DYS199 9(1)2006

Taquile ; este haplogrupo es el mas frecuente t an to pa ra poblac iones and inas y amazónicas siendo particularmente llamativo que tanto en la población amazonica como en la isla de Taquile, los individuos del haplotipo B son del haplogrupo B1, con los reportes expuestos anteriormente se ha dadoa conocer que existe el componente amerindio a nivel deADNmit y con el presente estudio el cual ha sido realizado utilizando marcadores del Cromosoma Y, se reafirma el componente autóctono en los individuos de la etnia Aguaruna.

Los individuos de la etnia Aguaruna, no presentan el alelo YAP del locus DYS287; indicando la ausencia de cromosomas Y de origen africano. La frecuencia del alelo T de locus DYS199(96.7%), indica la presencia del componente paterno amerindio en individuos de la comunidad Yamayakat; el alelo C (3.3%) representaría un origen noAmerindio.

45

25 , 46

?

?

CONCLUSIONES

?

?

?

Se obtuvieron dos (02) haplotipos para los marcadores bialelicos analizados, siendo el más frecuente el YAP­/T/(96.7%) y el YAP­/C/ (3.3%). La diversidad genética calculada para los individuos de la comunidad nativa de Yamayakat para el locus DYS199 es de 0.067. El valor de la diversidad haplotípica estimada para el grupo étnico Aguaruna fue de 0.067, indican un bajo de gradodemiscegenación. La etnia aguaruna de la comunidad de Yamayakat, no se ha miscegenado con etnia africana.

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9(1)2006 MURO , J.; et al.

!

Aislamiento y sensibilidad antibiótica de en biopsias gastroduodenales de pacientes del

hospital Victor Lazarte Echegaray”, Trujillo­Perú

Helicobacter pylori

Isolation and antibiotic sensitivity of in gastroduodenal biopsies of Victor Lazarte Echegaray patients, Trujillo Peru

Helicobacter pylori

Leslie Sirlopú­Agreda Marco Salalazar ­Castillo y Icela Rodriguez­Haro 1 , 1 1

RESUMEN

El presente estudio tuvo como objetivo aislar y determinar la prevalencia de positividad y la sensibilidad antibiótica de de 100 muestras de biopsias gastroduodenales obtenidas de pacientes que acudieron al servicio de endoscopia delHospitalVíctorLazarte Echegarray­EsSALUD, de la ciudaddeTrujillo, durante losmesesde Setiembre aDiciembre de1999.

Se colectaron tres biopsias gastroduodenales de cada paciente: una para elTest deUreasa y las otras enmedio de transporte Stuart para su siembra y aislamiento en medio selectivo para con antibióticos. La identificación se realizó mediante pruebas morfológicas, culturales y bioquímicas. La prueba de sensibilidad a los antimicrobianos se realizó en el medio de cultivoAgar­Yema de Huevo, según la técnica descrita por Kirby bauer.

fue aislado en un 55%del total de muestras, principalmente en las de úlcera duodenal con 76,5%, y de gastritis crónica con57,6 fue sensible enun90%a la tetraciclina, 80%a la amoxicilina y enun50%a la claritromicina, siendo resistente almetronidazol enun65%.

: sensibilidad antibiótica; biopsias gastroduodenales

The aim of this study was to determine the prevalence and the antibiotic­sensitivity of isolated from gastroduodenal biopsies of patients from the “Victor Lazarte Echegaray Hospital Endoscope Service (Trujillo, Peru), between September to December, 1999. It was collected three samples of biopsies: one of this for the Ureasa­Test and the other two for its transport in Swart medium and subsequent culture in

culture medium with antibiotics. The identification it was made utilizing morphological, cultural and biochemical criteria and the sensitivity test was made in a egg­agar medium in accordance with the indications proposed by Kyrbybauer. The global prevalence of infections was 55%,mainly in the duodenal ulcera (76,5%) and the chronic gastritis (57,6%). The sensitivity detected was: 90% for tetracycline, 80% for amoxiciline, and50%for claritromicine,whilewas resistant fonmetronidazol (65%).

: antibiotic sensibility; gastroduodenale biopsy

Helicobacter pylori

H. pylori

H. pylori H.pylori

Helicobacter pylori;

Helicobacter pylory

H. pylory

H. pylori

Helicobacter pylori;

Palabras clave

ABSTRACT

Keywords

1. Departamento Microbiología y Parasitología, Facultad de Ciencias Biológicas UNT. ptado el 24 de abril 2006. Recibido 26 de enero 2006, ace

Artículo original 9(1)2006

47

INTRODUCCION

La úlcera es una inflamación o lesión que se forma en la cubierta del estómago o del duodeno, donde el ácido clorhídrico y la pepsina están presentes. Estas úlceras son llamadas ú l c e r a s g á s t r i c a s y d u o d e n a l e s , respectivamente, a las que en general se les conoce comoúlcera péptica

Por mucho tiempo se pensó que debido a malas costumbres de vida como, ingerir bebidas alcohólicas, fumar en exceso, alimentarse con desórdenes en cuanto a la hora, originaban las enfermedades gastroduodenales, como la úlcera y la gastritis. Actualmente se sabe que estas costumbres son sólo factores que irritan las úlceras siendo dañinas para las personas que las padecen y que la presencia de

en la mucosa gástrica de pacientes con gastritis crónica activa y úlcera péptica, en porcentaje de 53% a 94% y con cáncer gástrico 75%, es otra de las causas que originan las enfermedadesgastroduodenales

Durante el desarrollo del EUROGAST, un estudio epidemiológico realizado en múltiples centros que abarcó 17 poblaciones separadas en 13 países europeos e incluyó también a Japón y los EstadosUnidos, se determinó que existe una relación significativa estadísticamente entre la infección determinada mediante la detección de anticuerpos IgG contra y lamortalidad e incidencia por cáncer gástrico; así como un riesgo relativo de padecer cáncer 6 veces superior en poblaciones con alta prevalencia de la infección, en comparación con poblaciones no infectadas. Por otra parte, las tasas de infección de y el cáncer gástrico se correlacionan de manera inversa con el nivel socioeconómico y aumentan con la edad, concluyéndose que existe una importante asociación entre esta infección y el cáncer gástrico

El es una bacteria espiralada, curvada, gram negativa y móvil por la presencia de flagelos múltiples, con diferencias en los perfiles de ácidos grasos celulares y en las quinonas respiratorias. Es microaerofílico estricto y no sacarolítico La infección por este micrroorganismo ocurre predominantemente en la infancia aunque continua durante la vida adulta, lo cual está asociada a un efecto de cohorte, relacionado con un riesgo decreciente de infección en la infancia a medida que las

condiciones de vida y el saneamiento ambiental han idomejorando H. pylori produce ureasa, que desdobla la

úrea en bicarbonato y amonio lo cual probablemente constituya una estrategia útil p a r a l a s u p e r v i v e n c i a d e e s t e microorganismo en el medio ácido de la mucosa gástrica Existen ciertos factores de virulencia y fisiopatológicos que le permiten sobrevivir en un medio adverso. Su forma de espiral y su motilidad lo hacen resistir al movimiento y vaciamiento gástrico El jugo gástrico normal posee un pHmenor

de 4, el cual le confiere un carácter bactericida y por tanto capaz de eliminar a muchas de las bacterias que llegan al estómago con la ingesta de agua y alimentos, por ello epidemiológicamente se hace referencia al estómago como la “barrera ácida”. Por lo tanto, la colonización de la mucosa gástrica por , implica la capacidad de esta bacteria para sobrevivir en ese ambiente ácido. Cuando se descubrió esta bacteria su localización gástrica presumía un comportamiento acidófilo; pero la confirmación de que el pH óptimo para su cultivo era cercano a la neutralidad, se transformaba en uno de los escollos importantes que se enfrentó al principio de la historia de , pues a parte de aceptar que una bacteria tendría como nicho esa barrera ácida, no había una explicación para tal resistencia al pH ácido. La clave para la adaptación al pH gástrico reside en la producción deureasa La ureasa (urea amidohidrolasa) cataliza la

hidrólisis de urea para proporcionar amonio y carbamato, el cual se descompone para producir otra molécula de amonio y ácido carbónico, con lo cual neutraliza el microambiente de las glándulas gástricas colonizadas. Por otra parte, el hidróxido de amonio generado durante la hidrólisis de urea contribuye significativamente al daño histológico asociado con esta infección; aunque debe enfatizarse que directamente el amonio no es tóxico, si no que el daño infringido es el resultado del ión hidróxido generado por el equilibrio del amonio con el agua. Éste desdobla el moco gástrico, haciéndolo más fluido, con lo cual la bacteria puede desplazarse más fácilmente, para ganar los espacios intercelulares

1

2,3

4

5

6

7.

8,

9

7.

10.

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Helicobacter pylori

H. pylori

H. pylori

H. pylori

H. pylori

H. pylori

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9(1)2006 Sirlopú L. et al.

El diagnóstico de la infección por puede hacerse a través de exámenes no invasivos como la serología y pruebas en aire espirado y por exámenes invasivos como la prueba de ureasa en biopsia antral, histopatología, cultivo y PCR El cultivo, que presenta una sensibilidad de 72­99% y una especificidad de 100% para la detección en biopsias, es útil en pacientes en los que el tratamiento no ha logrado la erradicación, para evaluar la sensibilidad a los antimicrobianos y para orientar la terapia posterior

es sensible a una amplia variedad de antibióticos , pero muchos son ineficaces. Las sales de bismuto,metronidazol, amoxicilina y furazolidona son drogas que presentan los mejores resultados para la erradicación de la bacteria usándolas en monoterapia. La terapia doble combina amoxicilina con una droga del grupo imidazólico, erradicando al en un 43%. Utilizando el esquema triple donde se combina el bismuto con un imidazálico y amoxicilina o tetraciclina. Con este esquema se puede erradicar la bacteria en 80­90%

Los estudios de la patogénesis del ha conducido a la identificación de los antigénos bacterianos como candidatos para la inclusión en las nuevas vacunas contra la enfermedad. Tanto la vacunación profiláctica como la terapéutica han sido demostrada en modelos animales. Las evaluaciones de varios antígenos están en camino y las pruebas de vacunación en humanosestánplaneadas La prevalencia de infección por en el

Perú es alta en los casos de gastritis, ya sea superficial o atrófica; hallándose entre las más altas del mundo (92% de los casos de gastritis superficial y 98% de los casos con gastritis atrófica . En Trujillo, Pérez Esquerre en un estudio en 300 pacientes con patología ácido péptica, encontró que el 67.3% estuvieron colonizados por ; sin embargo, en otros trabajos se encontraron que de 72 biopsias procedentes de úlceras con diagnóstico de gastritis crónica, el 37.7% estuvieron infectados por esta bacteria y de 100 pacientes con diagnóstico de enfermedad gastroduodenal, se halló que el 75% estuvieron infectados respectivamente. A pesar de que en otros países se utiliza

el cultivo en el diagnóstico de enfermedades gastroduodenales, en el nuestro no se considera

dicho método debido al alto costo que implica su realización. Además, se conoce que el tratamiento antibiótico busca la erradicación de siendo necesario conocer su sensibilidad antibiótica. Por tales motivos el propósito del presente trabajo de investigación fue aislar y determinar la sensibilidad antibiótica de a partir de biopsias gastroduodenales obtenidas de pacientes que acudieron al Servicio de endoscopía del Hospital Víctor Lazarte Echegaray de Trujillo­Perú, en el tercer trimestre de 1999.

Se examinaron 100 biopsias gastroduodenales correspondientes a igual número de pacientes entre, de ambos sexos, cuyas edades estuvieron comprendidas entre 18 y 70 años, que acudieron al servicio de endoscopía del Hospital de Apoyo III Víctor Lazarte Echegaray EsSALUD de Trujillo, entre septiembrey diciembrede1999.

Según el diagnóstico de las biopsias se distribuyeron de las siguiente manera: gastritis crónica, 59; ulcera duodenal, 17; ulcera gástrica, 14; otros, 10. Éstas (tres en cada caso) fueron tomadas del antro gástrico por el médico gastroenterólogo utilizando una pinza de endoscopio estéril y retiradas con mondadientes, también estériles. Dos de las biopsias fueron colocadas en Eppendorf con 1.5mLde caldo BHI con glicerol al 20% ymantenidos a 4ºChasta su procesamiento.

La biopsia restante es colocada en un Eppendof con 1.5 mL de caldo Urea e incubada a temperatura de ambiente por 2 a 3 horas, a finde realizar elTest deUreasa.

Las muestras fueron tratadas con un homogeneizador de tejidos antes de ser sembradas en placas que contenían medio selectivo para y luego fueron i n c ubados a 3 7°C en a tmó s fe r a microaeróbica empleando la mezcla de gases hasta 5 días. Para efectuar la identif icación , inicialmente fueron catalogadas como sospechosas, aquellas colonias de 1­2 mm de diámetro, no hemolíticas, planas, grisáceas de bordes

H. pylori

H. pylori in vitro in vivo

H. pylori

H. pylori

H. pylori

H. Pylori

H. pylori

H. pylori

H. pylori

12.

7,13.

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15.

2 2

2

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18

18

MATERIAL YMETODOS

Mater ialBiológico

Cultivo de lasmuestras e identificación del .­ H. Pylori

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9(1)2006 Aislamiento y Sensibilidad

irregulares que desarrollaron a lo largo del estriado. Estas colonias se seleccionaron por su morfología típica mediante coloración Gram La identificación definitiva de se realizó mediante las pruebas de: Oxidasa en papel filtro y catalasa en lámina, utilizando peróxido de hidrógeno al 3%.

A partir de los diferentes cultivos se realizaron suspensiones en 3 mL de PBS hasta obtener una concentración similar al tubo 3 del nefelómetro de Mac Farland. La prueba de sensibilidad se realizó empleando el método de Kirby Bauer o de difusión en disco sobreAgar Yemadehuevo

Los antimicrobianos elegidos para este estudio son los mayormente usados en los diferentes esquemas de tratamiento, los cuales presentan una concentración estàndar: Amoxicilina ( 10 ug), Tetraciclina (10ug), Metronidazol ( 5ug), y Claritromicina ( 30ug). El grado de sensibilidad se determinó mediante la medición de los halos de inhibición de crecimiento con cada uno de los agentes antimicrobianos, comparándolos con valores

preestablecidos.

De la evaluación de 100 biopsias gastroduodenales de pacientes del Hospital de Apoyo III Víctor Lazarte Echegarray EsSalud de Trujillo, de Setiembre a Diciembre 1999 se encontró a en 55 de ellos (55%) por medio del cultivo. Donde se aisló a en 34 (57.63%) de 59 casos de gastritis crónica; en 6 (42,86%) de 14 casos de úlcera gàstrica; en 13 (76.47%) de 17 casos de úlcera duodenal y en 2 (20%) de 10 casos deotras enfermedades (Tabla 1).

La frecuencia de infección por fue mayor en el sexomasculino, con 63.16%, que en el femenino, 44.18% (Tabla 2) y en el grupo etáreo conformado por la cuarta y quinta década de la vida, con 71.80% (Tabla 3).

fue sensible en un 90% a la tetraciclina, 80% a la amoxicilina y en un 50% a la claritromicina; el 65% resistente al metronidazol (Tabla 4).

19.

.

20

H. pylori

H. pylori

H. pylori

H. pylori

(19)

18

Sensibilidad antibiótica de .­

RESULTADOS

H. pylori

Tabla 1: Frecuencia de positividad de en biopsias gastroduodenales, según diagnóstico clínico, de pacientes del Hospital de Apoyo III Víctor Lazar te Echegaray EsSalud de Trujillo, Setiembre­Diciembre 1999

Helicobacter pylori

50

9(1)2006 Sirlopú L. et al.

51

9(1)2006 Aislamiento y Sensibilidad

Tabla 2: Frecuencia según el sexo de positividad a en biopsias gastroduodenales de pacientes del Hospital de Apoyo III Víctor Lazar te Echegaray

EsSalud de Trujillo, Setiembre­Diciembre 1999

Helicobacter pylori

Sexo Nº de Muestras Nº Muestras Positivas

Frecuencia %

MASCULINO FEMENINO

5743

3619

63.16 44.18

Tabla 3: Frecuencia según el edad de positividad a en biopsias gastroduodenales de pacientes del Hospital Víctor Lazar te Echegaray

EsSalud de Trujillo, Setiembre­Diciembre 1999

Helicobacter pylori

Tabla 4: Porcentaje de sensibilidad de 55 cultivos de frente a diver sos agentes antimicrobianos

Helicobacter pylori

*Método :KirbyBauer; = concentración ;Resistemnte <12mM;sensible >18mM.

Grupo de Edad (años) Nº de Muestras

Nº Muestras Positivas

Menores de 40 Entre 40 ­ 59 Mayores de 60

413920

172810

41.46 71.80 50.00

%

Antibioticos Grado de Sensibilidad

Amoxicilina Tetraciclina Claritromicina Metronidazol

10 ug 10 ug 10 ug 5 ug 20

10205065

Sensible Resistente

10205065

90805035

90805035

Nº Nº % Nº %

DISCUSION Las biopsias fueron tomadas del antro

gástrico, el cual es el sitio donde prolifera y permanece por encontrar las condiciones ideales, allí ocasiona tanto el compromiso local, como la úlcera duodenal, . La prevalencia de infección hallada (55%) fue menor a la informada anteriormente en Lima, donde se hallaron prevalencias del orden de 75% ; sin embargo, en todas ellas se deja notar una evidente relación directa entre el aislamiento de con las enfermedades gastroduodenales. La prevalencia hallada en el presente estudio fue menor a la encontrada por l o s au t o re s a nt e r io rmen t e c i ta do s , probablemente debido que las biopsias fueron escogidas al azar entre los pacientes que fueron preparados para realizarles una endoscopía. Los resultados obtenidos por los autores antes

mencionados, contrastanmarcadamente con los obtenidos en poblaciones de países desarrollados. En estas poblaciones, los investigadores muestran tasas de infección menor al 5% en niños menores de 15 años, 20% en edades de 15 a 40 años y de 50%entre 50 y 80 años Esta prevalencia diferente demuestra la relación entre el riesgo de infección y la fuente de origen del agua debebida de los países en vías de desarrollo, el reciente aislamiento de

en deposiciones sugieren fuertemente una transmisión fecal oral

La prevalencia de positividad a fue mayor en sexo masculino que en el femenino, concordando con los encontrados por autores locales en cambio otros autores reportan una mayor prevalencia del sexo femenino 57.10% sobre el masculino 30.40% Esto indicaría que si bien la relación ulcera­presencia del microorganismo es directa, esta no se relaciona con el sexo, que tiene la misma conformación anatómica en ambos sexos y que la presencia o no tiene que ver, más bien, con los factores predisponentes antes nombrados.

Los grupos etáreos mas susceptibles a la infección por son de la cuarta y quinta década de la vida, con 71.80% cifras similares a las encontradas por otros autores reportándose el uso indiscriminado de analgésicos potencialmente ulcerigénicos, el aumento de situaciones de conflicto o stress de vida competitiva de las grandes ciudades como posibles razones para que estos grupos etáreos sean losmasafectados

Recientes estudios de prevalencia del

, en personas asintomáticas revelan una notoria asociación con respecto a la edad. Así en personas jóvenes, saludables,menores de 30 años tienen una prevalencia de alrededor de 10%, lo cual se acerca a los encontrados: 41.46%con la diferencia de que hemos considerado una década de vida mayor; mientras que los que pasan de los 60 años poseen un porcentaje cercano al 60%, concordando con lo hallado en este estudio. Así mismo se coincide en señalar que la infección ocurriría a edades tempranas de la vida y que podrían estar influenciado por factores como la raza, nivel económico, etc.

En relación con las enfermedades estudiadas, la prevalencia fue mayor en Gastritis crónica con 61.82%, seguido de Ulcera duodenal con 23.64% y Ulcera Gástrica con 10.91%, concordando con el grupo llamado Gastrointestinal Phisiology WorkingGroup ofCayetanoHeredia andThe Jhons Hopkins Universities quienes encontraron que la prevalencia de colonización por es alta en la gastritis sobrepasando enelPerú el 90%.

Actualmente se acepta que el interviene en la producción de la gastritis y entre los factores que intervienen en la producción de la misma se ha mencionado a la Ureasa, una enzima de potente actividad que se encuentra en grandes cantidades en la gruesa pared bacteriana, llegando a constituir hasta el 10% del peso total seco del gracias a ésta la abundante producción de amonio actuaría como buffer, bloqueando la acidez del jugo gástrico

En relación a la sensibilidad antibiótica realizada in vitro, Fue sensible en un 90% a la Tetraciclina, la que presentó buena actividad, in vitro aunque no puede utilizarse en enfermos en edad pediátrica . Frente a la Amoxicilina la sensibilidad fue 80%, siendomuy útil al tratamiento, debido a que presenta mayor estabilidad en medio ácido y alcanza mayores concentraciones en tejidos después de una dosis oral que otros betalactámicos ; sin embargo algunos médicos substituyen la amoxicilina por la tetraciclina .

Se conoce que la Claritromicina, tiene una alta sensibilidad ácida y alta concentraciónen te j i do s además de se r exce len te

H. pylori,

H. pylori

H. pylori

H. pylori

H. pylori

H.pylori

H. pylori

H. pylori

H. pylori,

H.pylori.

(1)

21,17

17.

7,17

13

16

1 3 , 1 7

(14).

16,22.

2

5

16,23

5

5

1

52

9(1)2006 Sirlopú L. et al.

antibacteriano in vitro , sin embargo se encontró un 50% de resistencia a este antibiótico. En estudios reciente se reemplaza el Metronidazol por la Claritromicina debido que se ha reportado alta resistencia de frente al Metronidazol, lo cual se demostró en nuestro estudio.

La resistencia alMetronidazol es el casomas dramático en relación al tratamiento de

En nuestro país se ha encontrado que entre el 50 al 70% de los pacientes albergan cepas resistentes al metronidazol, mientras que la resistencia a la claritromicina se reporta en el rango del 7%. Se especula que esto podría deberse a la alta tasa de exposición que tiene la población a los antibióticos, usualmente como parte del tratamiento de procesos infecciosos y debido también a la falta de control en la prescripción de fármacos. Además, el patrón de infección temprana por que se ve en países en vías de desarrollo como el nuestro, permitiría un mayor tiempo de exposición inadecuada del a los antibióticos, con lo que se favorecería el desarrollo de resistencia bacteriana.

La importancia del presente trabajo fue el haber usado un método de diagnóstico de alta sensibilidad y especificidad, como lo es el cultivo a partir de biopsias gastroduodenales, correspondiendoles un 72­99% y 100% respectivamente , siendo el valor predictivo negativo bajo, podría presentarse una alta tasa de resultados falsos negativos debido: a la probabilidad de tomar la biopsia en una zona de mucosa no colonizada o con bacterias con reducida variabilidad y a la lidocaína utilizada habitualmente en la endoscopía . Estos obstáculos se lograron superar tomando dos b iops ia s an t r a le s pa ra i nc rement a r sustancialmente la sensibilidad del cultivo . La utilidad del cultivo radica, a nivel experimental, en determinar la resistencia bacteriana a los antibióticos usados en el tratamiento, el cual debe de ser específico a los pacientes con enfermedad gastroduodenal, infectados con H.pylori. Esto significa que no se debe ajustar al paciente estrictamente a los esquemas sino por el contrario, adaptar los esquemas al paciente y usarlos como guía para su real beneficio, teniendo en cuenta que en la práctica diaria debemos contemplar casos individuales y no protocolosy consensos .

Es importante mencionar también que,

existen algunas estudios epidemiológicos donde han encontrado que la prevalencia de la infección por es igual en varones y en mujeres y que algunas poblaciones africanas poseen una elevada tasa de infección por

5

1

13

1

5

1

24 H. pylori

H. pylori.

H. pylori

H. pylori

H. pylori

H. pylori.

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Helicobacter pylori

Helicobacter pylori

Helicobacter pylori

Helicobacter pylori

Helicobacter pylori

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53

9(1)2006 Aislamiento y Sensibilidad

1(1)48­52

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Correspondencia. MarcoSalazarCastillo RobertoCarpio 148­Dpto. 501 San FernandoTrujillo Teléfono: (044) 235841 CorreoElectrónico: untmarko@hotmail.com

Helicobacter pylori

Helicobacter pylori.

Helicobacter pylori.

Helicobacter pylori

Helicobacter pylori

Helicobacter pylori

Helicobacter pylori.

Helicobacter pylori:

54

9(1)2006 Sirlopú L. et al.

55

Distr ibución de las lesiones y per files de PCR­RFLPS de la región conservada del gen de aislada de

pacientes de tres áreas endémicas de la provincia de Otuzco­La Liber tad

gp63 Leishmania

Injury distribution and PCR RFLPs profiles of gen conserved region of isolated of patients from Otuzco province (La Libertad) three

endemic areas

gp63 Leishmania

Bedsabe Delgado­Silva y Luís Rodríguez­Delfín 1 2

RESUMEN

Palabras clave

ABSTRACT

Key words:

Un total de 40 pacientes fueron estudiados de las áreas endémicas de leihsmaniasis de los Distritos de Salpo (26), Samne (9) y Sinsicap (5) de la Provincia deOtuzco, Departamento de La Libertad. El parásito fue aislado y analizado mediante la técnica de PCR­RFLPS. Los perfiles de RFLPs del gen fue obtenido mediante las enzimas RI, I y I.

Los resultadosmuestran dos patrones de RFLPs (genotypes): parásitos con sitios de digestión y si ellos. Con la enzima RI, el 63%de las cepas presentaron digestión parcial con fragmentos de 1300, 800 y 500 pb. Con

I, cuatro cepas presentaron digestión parcial con fragmentos de 1300, 1200 y 100 pb.Ninguna cepa presento sitio de restricción con I. ELDistrito de Salpo presento 15 cepas con sitio de restricción para RI y cuatro para I. Sinsicap presentó tres y dos cepas con restricción para RI y dos para I. Las siete cepas de Otuzco presentaron restricción con RI.

Los resultados indican que existen más de dos genotipos de en las áreas endémicas del Departamento deLaLibertad.

: , PCR,RFLPs, genotipos, 63.

Atotal of 40 patients were studied in the endemic areas of leishmaniasis fromDistricts of Salpo (26), Samne (9) and Sinsicap (5), Province of Otuzco, Department of La Libertad. The parasites were isolated and analyzed by means of the technique of PCR­RFLPs. The patterns of RFLPs of the gene gp63 were obtained by means of the enzymes RI, I and I. The results show two patterns of RFLPs: parasites without and with restriction sites.With EcoRI, 63%of the strains presentedpartial digestionwith fragments of 1300, 800 and500 pb. With Salt I, four strains presented partial digestion with fragments of 1300, 1200 and 100 pb. No strains presents restriction place with Bgl I. The District of Salpo presents 15 strains with restriction place for RI and fourwith I. Sinsicap presents three and two strainswith restriction for RI and I respectively.The seven strains of Otuzco presented restriction with RI. The results indicate that exists nor less than of two genotypesof in theendemic areas ofDepartment ofLaLibertad.

, PCR, RFLPs, genotypes, 63.

gp63 Eco Sal Bgl

Eco Sal

Bgl Eco Sal Eco Sal

Eco L. peruviana

Leishmania gp

Eco Sal Bgl

Eco Sal Eco Sal

Eco L. peruviana

Leishmania gp

Artículo original

1. Instituto de Medicina Tropical e Infectología, Facultad de Medicina, Universidad Nacional de Trujillo 2. Instituto de Biotecnología Molecular, Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo

Recibido 15 de enero 2006, aceptado 5 de mayo 2006.

9(1)2006

56

INTRODUCCIÓN

A pesar de los programas de control del Ministerio de Salud para reducir la incidencia d e l a , lo s í nd ice s epidemiológicos se han incrementado sostenidamente en los últimos 25 años. Anualmente se reportan un promedio de 7,000 a 10,000 casos probables de leishmaniosis con 1'187,104 personas en riesgo de contraer la enfermedad. El 74% del territorio nacional presenta área endémicas y no menos de 15 departamentos están afectados con una de las dos formas clínicas de la leishmaniasis: la cutáneo o “uta y la cutáneomucosa o “espundia” . Estas formas clínicas son producidas por especies distintas del parásito:

y . El 75% de los casos

clínicos corresponden a la forma cutánea y el resto a la forma más severa, cutáneamucosa. La enfermedad es de severidad variable y en algunos casos cursa con lesiones que pueden llevar a la incapacidad física. Otras tres especies de han sido reportada en nuestro país, ; y

, que representan el 10% de las leishmaniasis . Limitaciones metodológicas de los análisis

del zimodemo, serodemo y schizodemo dificultan una eficiente identificación y caracterización del parásito. Actualmente, la amplificación de ADN mediante la Reacción en Cadena de Polimerasa (PCR) ha facilitado el análisis directo del ADN nuclear y del cinetoplasto . En combinación con otros marcadores de ADN y técnicas de la Biología Molecular se han desarrollado nuevos métodos de análisis para identificar especies, subgéneros o complejos del parásito . Las técnicas de amplificación aleatoria de segmentos repetitivos ADN, RAPD , polimorfismos en longitud de fragmentos de restricción, PCR­ RFLP y microsatélites son algunas de ellas. El tamaño del genoma de se ha

estimado en 32'816,678 pares de bases (pb), estimándose 911 genes de ARN, 39 seudogenes y 8272 genes que codifican proteínas, de las cuales 662 se agrupan familias génicas . Uno de ellos, el gen gp63 , codifica la principal glicoproteína de superficie de , que a igual de los

l e i s hma n io i s i s

Leishmania (Vianna) peruviana Leishmania (Vianna) braziliensis

Leishmania L(V) guyanensis L(V) lainsoni

L(V) amazonensis

in vitro

Leishmania

Leishmania

1,2,3

4

5,6,7,8,9 10,11,12,13

10,14,15,16,17,18,19

20,21

15,22,23,24,25 14

26,27

28

fosfolipoglucanos (LPG), están relacionadas con la capacidad antigénica e inmunológica del parásito . La proteína GP63 o leishmanolisina tiene

63kDa y en está compuesta de 599 a 601 aminoácidos, con transcriptos de 3 kb en promedio. La proteína se caracteriza por presentar una molécula de Zinc con actividad proteolítica de tipo endopeptidasa .El metal se une en tres sitios de glicosilación, que en

presenta la secuencia consenso Asn­X­ Ser/Thr . Diversos estudios de mapeamiento

peptídico, clonación y secuenciamiento muestran que la glicoproteína GP63 es una molécula conservada, que cont iene plegamiento de tipo antiparalelas y hélice, de la estructura secundaria. Cristales de GP63 están siendo analizados con rayos X para describir la estructura terciaria . Los estudios con anticuerpos monoclonales para GP63 de muestran que ésta proteína antigénica se encuentra en la fase estacionaria de los promastigotas de

, El aumento de la proteína fue

asociado con el incremento de la infectividad de durante la fase de crecimiento del parásito . También los análisis de cDNA de gp63 de sugieren la presencia de múltiples isoformas de la glicoproteína . Entre las especies de , el gen

gp63 presenta una gran variabilidad respecto al número de copias y expresión génica. En

, la proteína GP63 esta codificada por 18 genes y tres clases de ARNm son transcriptos 63: mspL, mspS, mspC. Cada clase está relacionada con un estadio específico de crecimiento del parásito. En el estadio logarítmico se transcriben 12 o más genes

L, en el estadio estacionario se expresan cuatro genes S y en el estadio constitutivo apenas 2 genesmspC son transcriptos . Para

, tres de ARNm fueron descritos, C1, C2 yC3, cada una definida por el patrón de restricción específico para las enzimas I, I y I, respectivamente: el gen ­C2 está presente con cuatro copias, el ­C1 con cinco copias y ­C3 con una copia . En los genes

están localizados en dos bandas cromosómica, de 590 kb y 550 kb y la familia multigénica se agrupan en tres clases:A, B yC;

29

30

31

32

19,33

34

35

36

L. major

L. major

L. braziliensis

L. braziliensis L. peruviana, L. panamiensis y L. guyanensis.

L. braziliensis in vitro

L. guyanensis

Leishmania

L. chagasi

gp

msp msp

L. mexicana gp63

Cla Kpn Xho gp63 gp63 gp63

L. guyanensis, gp63

DELGADO B, RODRIGUEZ L. 9(1)2006

57

cada una con sitios específicos de restricción ( I, II y I­ I respectivamente) . Para , los genes gp36 se agrupan en familias organizadas en unidades que se repiten en ; los genes se localizan en una o dos bandas cromosómicas, con tamaño que varía entre 600 a 750 kb, y las unidades repetitivas del gen pueden estar seguidas de unaomás copias distantes .

Basado en estas evidencias, el presente estudio tiene como objetivo determinar los perfiles genéticos de la región conservada del gen de aislada de pacientes de las áreas endémicas de Salpo, Samne y Sinsicap de la Provincia de Otuzco Departamento de La Libertad mediante la técnica dePCR­RFLPs.

Las muestras fueron obtenidas de pacientes procedentes de áreas endémicas de los distritos de Salpo, Sinsicap y Otuzco (Samne), en la provincia de Otuzco, departamento de La Libertad, durante 2002al 2003.

El material se obtuvo realizando raspados de las lesiones sospechosas de leishmaniasis de 40 pacientes procedentes de las áreas endémicas indicadas anteriormente en el Instituto de Medicina Tropical e Infectología de laUniversidadNacional deTrujillo. El material obtenido fue colocado en tubos

con SSF (2mL) para el análisis directo y cultivos . A partir de los tubos con SSF se procedió a inocular en medio bifásico agar base enriquecida con infusión cerebro­corazón (BHI) y suplementado con sangre de conejo desfibrinada al 10%. Para evitar el crecimiento bacteriano se agregó a la fase líquida una solución de penicilina/ estreptomicina a una concentración 750µg/mL. Los cultivos fueron incubados a 23°Cpor 3­4 semanas.

Para la obtención de los perfiles referenciales del análisis de RFLPs, se utilizaron las siguientes cepas:

(MHOM/BR/75/M2903 y MHOM/PE/84/LC53), (MHOM/PE/84/LC26), (MHOM/BR/75/M4147), (MNYC/BZ/62/M379),

) y

Apa Bgl Not Cla L. peruviana

tandem

gp63

gp63 Leishmania (V) peruviana

in vitro

L. (V.) br a ziliensis

L. (V.) peruviana L. (V.) guyanensis L. (L.) Mexicana L. (L.) mayor

(MHOM/SU/73/5­ASKH L. (L.) chagasi

28

17

MATERIALES YMÉTODOS

Áreas de estudio

Aislamiento del parásito

Cepas referenciales

(474), las cuales fueron proporcionadas por el Instituto Nacional de Salud y por el doctor Jorge Arévalo del Instituto de Medicina Tropical “Alexander Von Humboldt”, UniversidadPeruanaCayetanoHeredia.

Los cultivos con los parásitos fueron lavados tres a cuatro veces con solución de TE 20:5 y centrifugándolos a 8000rpm por 8 minutos. Posteriormente fueron incubadas a 100ºC por 15 minutos, luego se centrifugó a 13,000 rpm a 4º C por 2 minutos y el sobrenadante fue conservado a ­20ºC para su posterior análisis.

Se realizó la amplificación de la región conservada del gen de mediante la técnica de la PCR. Los iniciadores están localizados entre los nucleótidos 410 al 422 y 1,721 al 1,741 de la secuencia de cDNA del clon Lg63c1 de . Los cebadores presentan secuencias de 23 oligonucleótidos cada uno y fueron TDM1: 5'

3' y TDM2: 5'­ ­ 3 ' .

Reacciones de PCR de 50 µL fueron usadas para amplificar parte del gen gp63 de cada muestra y estaba compuesta de 200µM de desoxinucleótidos trifosfato (dATPs, dTTPs, dGTPs y dCTPs), 1µM de los cebadores TDM1 y TDM2, 1.5mM de MgCl Buffer 1X, H O bidestilada, 2U de la enzima Taq polimerasa (Promega) y 3µL de ADN. La amplificación de las muestras se llevó a cabo en un Termociclador (PERKIN­ELMER 2400) en las siguientes condiciones: denaturación inicial a 94ºC por 5', seguido por 30 ciclos, cada uno incluyó una denaturación a 94ºC por 30'', hibridación a 58ºC por 1' y una extensión a 72ºC por 1' 30'', finalmente se realizó una extensión a 72ºC por 7', conservándose a 4ºC.

Los perfiles de PCR­RFLPs de se obtuvieron mediante la digestión del producto de PCR con las enzimas R I, I y I. Los fragmentos amplificados de 1.3 kb del gen fueron digeridos en una reacción de 20 µL de solución conteniendo buffer específico para cada enzima, 0.2 µL BSA (10µg/µL), 3 UEnzima y H O bidestilada para completar un volumen de 10µL, al cual se le adicionó 10µL del ADN amplificado. Las muestras fueron incubadas a 37ºCdurante toda

Extracción delADN

Amplificación del gen

Análisis de Polimorfismo en Longitud de Fragmentos deRestr icción (RFLPs)

gp63

gp63 Leishmania

gp63 L. (V) guyanensis

gtctccactgtagacctcactga­ t g a t g t a g c g g c a a t a c a c g a a g

Leishmania

Eco Sal Bgl

gp63

24

2,

2

2

Distribución de las lesiones y perfiles 9(1)2006

58

la noche.

Para verificar los productos amplificados por la PCR y separar los fragmentos de PCR­ RFLPs se realizó electroforesis en geles de poliacrilamida al 4%. Los productos PCR­ RFLP fueron mezclados con un buffer de electroforesis y luego en cada pocillo del gel se colocaron las muestras de restricción. Para crear el campoeléctrico se utilizó una fuente de poder E­C con un voltaje constante de 120V con 78mAenuna cámara vertical. Se utilizó un regla estándar 174 III para determinar el tamaño de los patronesRFLPs del gen .

Finalizada la electroforesis se realizó la tinción con nitrato de plata. Los productos PCR­RFLPs fueron visualizados en un transiluminador de luz blanca, fotografiados y registrados para suanálisis respectivo.

La Tabla 1 presenta informaciones del número y distribución de las lesiones por sexo y edad. Las regiones del cuerpo más expuestas a la picadura de los vectores de la leishmaniasis son la cara (22 de 66 lesiones) y los miembros superiores (21/66). Los pacientes más afectados y con mayor número de lesiones son de sexo masculino y femenino menores de 15 años. Una paciente de seis años procedente deOtuzco presentó seis lesiones en el cuerpo. Las regiones más afectadas fueron los miembros superiores en hombres del Distrito de Salpo y cara enmujeres de Sinsicap y Samne (tabla 2). Los patrones estándares de restricción

fueron obtenidos usando cepas referenciales (tabla 3). En la mayoría de las cepas, la digestión enzimática fue parcial, es decir, además al producto de PCR amplificado (1300 pb) se observaron fragmentos adicionales de menor tamaño. Esto debido al reconocimiento

Separación de los Productos PCR­RFLPs

RESULTADOS

Hae gp63

y corte en las secuencias palindrómicas GAATTC/CTTAAG y GTCGAC/CAGCTG por las enzimas RI y I dentro del fragmento de1,300pb. La Fig 1 muestra los perfiles de RFLPs con RI. Además de la banda de 1,300 pb, se

observa dos fragmentos adicionales de 800 y 500 pb en las cepas de ,

y . Esto indica que la secuencia gp63 presentó un único sitio de corte enzimático (columnas 5 y 6). Las cepas restantes no presentaron sitio de corte para RI. La Fig 2 presenta los perfiles con los parásitos aislados de los pacientes y en 25 muestras presentaron digestión parcial y 15 carecíande sitio de corte para RI (tabla 4). Los perfiles de RFLPs con I se observan

en la Fig 3. Apenas seis muestran presentaron digestión parcial con bandas de 1,300, 1,200 y 100 pb (Tabla 4; columna 1 de la Fig. 3 y pacientes N° 5, 9, 20, 23, 28 y 29). Este perfil no fue reportado para (columna 6 de la Fig 3).Unpaciente proveniente deChota, Cajamarca, el parásito aislado presento el perfil de (bandas de1,100 y 200 pb). Ninguna cepa aislada de los pacientes

presentó sitio de corte enzimático con la enzima I. Cuatro muestras aisladas presentaron, simultáneamente, dos sitios de corte para las enzimas RI y I (pacientes N°9, 20, 23y 29). La distribución de los perfiles de RFLPs por

distrito semuestra en la tabla 5.Más del 50%de las muestras de Salpo fueron polimórficas para

RI (15/26) y apenas en cuatro cepas fueron cortadas con I. EnSinsicap igual número de muestras presentaron sitios de corte para ambas enzimas. Siete cepas procedentes de Otuzco mostraron sitios de corte para RI. Cuando comparamos en base a edades no se encuentra diferencia.

Eco Sal

. Eco

L. chagasi L. guyanensis L. peruviana

Eco .

Eco Sal

.

L. peruviana .

L. braziliensis

Bgl

Eco Sal

Eco Sal

Eco

Tabla 1. Frecuencia absoluta de las lesiones por edad, sexo y región corporal afectada

Sexo Edad n Cara MSD MSI MID MI I

Espalda Abdomen Total

M (19)

<15 años >15 años

13 6

8 2

5 3

1 1

­ ­

­ ­

4 2

1 ­

19 8

F <15 años 15 12 5 3 5 1 ­ ­ 26 (21) >15 años 6 ­ 2 1 6 3 ­ 1 13 Total 22 15 6 4 6 2 66 11

MSD: miembro superior derecho MID: miembro inferior derecho MSI: miembro superior izquierdo MII: miembro inferior izquierdo

9(1)2006 DELGADO B, RODRIGUEZ

59

Distr ito

Código

Edad

Especie

Masculino (n) Femenino(n) n R

Bgl I

Salpo (26)

1 MHOM/SU/73/5­ASKH

Sinsicap (5)

<15 años >15 años

L. mayor

<15 años >15 años

Otuzco­Samne(9) <15 años >15años

Tabla 2. Procedencia de los pacientes por sexo (R: Región del cuerpo con mayor incidencia)

Tabla 3. Tamaños de las bandas deADN producidas por el corte del fragmento de 1,300 pb con las enzimas RI y I en las cepas referenciales. Eco Sal

n R

9 4

1 ­

3 2

MSD (4) MSD (2)

2400

Cara(1) ­

Cara(3) Cara(1)

9 4

2400

3 1

3 1

Cara (5) MID (3)

1300

Cara (5) MID (1)

Cara (2) MID (1)

EcorR I Enzima* Sal I

2 474 L. chagasi 1300, 800, 500 1300, 1200, 100 1300, 100, 300 3 MNYC/BZ/62/M379 L. mexicana Na 1300 Na 4 MHOM/BR/75/M2903 L. braziliensis 1300 1300, 1100, 200 1300 5 MHOM/PE/84/LC53 L. braziliensis 1300 1300 1300, 800, 500 6 MHOM/PE/84/LC26 L. peruviana 1300, 800, 500 1300 1300 7 MHOM/BR/75/M4147 L. guyanensis 1300, 800, 500 1300 1300, 1000, 300

Tabla 4. Frecuencia de los perfiles de RFLPs por sexo.

EcoR I 1300, 800, 500 1300 1

2515

13 6

12 9

Enzima

Sexo

Fragmentos de restr icción

EcoR I Sal I

Número de muestr as (n=40)

EcoR I Sal I

Sinsicap (n=5)

M F

Sal I 1300, 1200, 100 1300 1

6 34

2 17

4 17

Bgl I 1300 1 40 19 21

1 : muestras que no presentaron sitio de restricción (SR)

Tabla 5. Procedencia los patrones de RFLPs según edad, sexo y procedencia.

Salpo (n=26) Otuzco 2 (n=9)

EcoR I Sal I Edad CR SR CR SR CR SR CR SR CR SR CR SR

5 4 1 8 1 ­ ­ 1 2 1 ­ 3 M <15años 3 1 1 3 ­ ­ ­ ­ 2 ­ ­ 2 >15años

5 4 2 7 1 2 2 1 2 1 ­ 3 F <15años 2 2 ­ 4 1 ­ ­ 1 1 ­ ­ 1 >15años

15 11 4 22 3 2 2 3 7 2 ­ 9 Total

Distribución de las lesiones y perfiles 9(1)2006

CR: con restricción, SR: sin restricción, : Localidad de Samne

2

1 2 3 4 5 6 7 8

~ 2,400

~ 1,300

~ 800

~ 500

Figura 1. Perfiles de digestión del gen 63 con RI. Columna 1: producto de PCR de 1,300 pb; columnas 2 y 3: paciente N°8 y 23; columna 4:

; 5: ; 6: ; 7: ; 9:

gp Eco

L. chagasi L. guyanensis L. peruviana L. major L. braziliensis.

1 2 3 4 5 6 7 8 9

Perfiles de restr icción del gen con la enzima RI en las muestr as aisladas. Columnas 1y 7: producto de PCR del paciente N°23 y ; 2, 3, 4, 5 y 6: Per fil de los paciente 23, 36, 29, 20 y 26 respectivamente; 8:

;; 9:

gp63 Eco

L. guyanensis

L.(V.) guyanensis L. chagasi.

Figura 2.

~ 1,300

~ 800

~ 500

44

Perfiles de digestión del gen 63 con I. Columna 1: perfil del paciente

N°9; 2: paciente N°26; 3: producto de PCR del paciente N°9; columnas 4, 5, y 7: pacientes N°6, 33 y 38; columna 6: per fil de ; columna 8: paciente 103 patrón similar a .

gp SaI

L. peruviana

L. braziliensis

Figura 3.

~ 1,300

~ 1,100 0

~ 1,300 ~ 1,20

60

DISCUSION

La leishmaniosis es una infección que se conocía antes de la llegada de los españoles; sin embargo, poco se ha avanzado en el control epidemiológico de la enfermedad. En la actualidad dos vacunas se han desarrollado sin que ninguna otorgue protección inmunológica satisfactoria. Además, el desarrollo de las técnicas moleculares de análisis en la detección y genotipificación de las especies causantes de enfermedades, son de difícil acceso y no disponibles en las áreas endémicas .

La parte superior del cuerpo demenores de 15 años de ambos sexos, en especial de cinco años, son las más expuestas a la picadura de los insectos infectados. Como este grupo etario no participa en las actividades agrícolas, se acepta que se infecten dentro o alrededor de sus viviendas. Las horas de mayor riesgo de infección son al inicio de la mañana o al final de la tarde, donde el insecto vector, , realiza su mayor actividad alimenticia. Estudios similares en Lima­ Ancash y Piura reportan un patrón distinto respecto a la localización de las lesiones. En Piura tanto el número de lesiones de la cabeza, miembro superior e inferior presentan similar incidencia (35­40%, 35­55%, y 40­42%). Los porcentajes de lesiones de la cabeza y miembro inferior son similares a las observadas, en las tres áreas endémicas de La Libertad (44% y 42%) y diferentes a las de Lima­Ancash (60­75%y20­30%).

La heterogeneidad génica de está bien documentada y probablemente asociada a la protección inmunológica al parásito durante la infección del hospedero y la invasión de los macrófagos. La región intergénica 1300 pb examinada presenta dos tipos de secuencia, una con sitio de restricción (digestión parcial) y otra sin puntos de corte.

Las cepas referenciales de no

presentaron digestión parcial para R I (1300, 1100 y 200 pb), a diferencia de lo que se observa en la tabla 2 enVictoir El cambio e

3

1,2

17,24,25,28

24

Lutzomyia

gp63

L. braziliensis:

Eco MHOM/BR/75/M2903yMHOM/PE/84/LC53

n la secuencia del gen podría estar asociado al prolongado crecimiento de la cepas referenciales .

gp63 in vitro

38

9(1)2006 DELGADO B, RODRIGUEZ L.

24

25

39

28,35 ,38,40

28

2

Además, la inestabilidad del gen puede ser una consecuencia de la diversidad fenotípica de la virulencia. En 27 aislamientos de (67%), el segmento de PCR fue digerido con las enzimas R I y I, todas con digestión parcial. Cuatro cepas presentaron simultáneamente ambos puntos de digestión (10%). Los patrones de digestión parcial con

R I fueron concordantes con los reportados por Victoir . La falta de sitios de corte en 15 muestras es un hallazgo particular y no observada anteriormente para aislada de pacientes de áreas endémica de Perú. De manera similar, seis pacientes presentaron puntos de corte para I con fragmentos de ADNde 1200 y 100pb, distinto a que registra los fragmento de 1100 y 200 pb;

no presenta sitios de corte. Estos patrones de restricción son distintos a los publicados en la literatura para cepas aisladas las áreas endémicas de Piura, Lima­Ancash y Cuzco .

Estos resultados indican que las leishmanias de las áreas endémicas presentan dos tipos de secuencias : una con sitio de restricción y otra sin reconocimiento enzimático. Su asociación con el cuadro clínico u origen ecogeográfico no fue establecida en este u otros estudios . El polimorfismo evidenciado por PCR­RFLPs en

, locus , probablemente se deba a dos fenómenos: cambios en la organización genómica del gen con dos familias de genes repetitivos, como fue reportado a nivel d e s u b g é n e r o , e s p e c i e y s t o c k s individuales . La heterogeneidad genética también puede ser causada por cambios en la región que rodea a la familia de gen , como fue reportada en

. Asimismo, hay que considerar los efectos selectivos que ejercen el vector y/o reservorios sobre estas secuencias y que no han sido estudiadas. Además de la

principales vector de otras especies de vectores como

han sido encontradas infectadas con Los hallazgos sugieren que el parásito

que circulan en las áreas endémicas

gp63

Leishmania Eco Sal

Eco

L. peruviana

Sal L. braziliensis

L. peruviana

gp63

L.(V) peruviana gp63

gp63

gp63 L(V) guyanensis

Lutzomya verrucarum L. (V) peruviana, Lutzomya peruensis,

L.(V) guyanensis .

Leishmania

de la región La Libertad presenta más de un genotipo de , perfil RFLPs, lo que no ocurre en otras áreas endémicasdelPerú .

Conocer las fuentes de variabilidad de organismos patógenos es importante en la obtención de medicamentos cada vez más eficaces y específicos, que afecten menos al hombre, como con los fármacos a base de amonio pentavalente. En , tanto los fosfoglucanos como las glicoproteínas son las responsables o asociadas a los mecanismos de defensa del parásito, proporcionando el sistema de variabilidad y que se debe conocer para desarrollar vacunas eficaces .

Los pacientes más afectados son hombres y mujeres menores de quince años. Las regiones del cuerpomásexpuestas a la picadura de los vectores son la cara y los miembros superiores.

Del análisis de los perfiles PCR­RFLPs del gen gp63 de en los pacientes en estudio, más del 50% de las m u e s t r a s d e S a l p o p r e s e n t a n polimorfismo para R I y cuatro cepas fuerondigeridas con I.

En Sinsicap igual número de muestras presentaron sitios de corte para ambas e n z im a s . S i e t e c e p a s d e O t u z c o mostraron sitiosde corte para R I. Ninguna muestra representó sitio de corte para I.

Los parásitos de de las áreas endémicas de Salpo, Sinsicap y Samne de la Provincia deOtuzco .

Departamento de La Libertad presentan dos fami l ia s de genes repe t i t ivos , genotipos, uno con sitios de restricción y otro, sin ellos.

Al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología­CONCYTEC y al Instituto de Medicina Tropical e Infectología de la Facultad de Medicina­Universidad Nacional Trujillo. Trujillo­Perú, por el apoyo económico y

gp63

Leishmania

Leishmania

Eco Sal

Eco Bgl

Leishmania

41

29

CONCLUSIONES

AGRADECIMIENTO

­

­

­

­

­

Distribución de las lesiones y perfiles

61

9(1)2006

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:

et al.

Leishmania :

Le i s hma n i a Viannia

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Leishmania Viannia

et a l Leishmania

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24.Victoir K, Bañuls AL, Arevalo J, Llanos­ Cuentas A, Hamers R, Noel S , De DonckerS, .The gene locus, a target

Leishmania Viannia

:

Leishmania Viannia :

Le i s hma n i a :

.

Leishmania b r a z i l i e n s i s

17 Leishmania

peruviana

18

Leishmania : .

Leishmania major.

Le i s hma n i a

:

Lei s hma n i a L.

b r a z i l i e n s i s

Leishmania :

23

Leishma ni a :

et al gp63

Distribución de las lesiones y perfiles

62

9(1)2006

f o r g e n e t i c c h a r a c t e r i z a t i o n o f belong to subgenus .

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Leishmania :

et a l Leishmania major

:

Leishmania guyanensis :

Le i s hma n i a :

Leishmania mexicana

:

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:

Leishmania braziliensis

:

Le is hma n ia cha ga s i . :

Leishmania mexicana

:

gp63 Leishmania Viannia braziliensis Le i s hma n i a ( Vi a nn i a ) p e r u v i a n a

:

Leishmania donovani :

63

9(1)2006 DELGADO B, RODRIGUEZ L.

64

65

Parámetros epidemiológicos y socioculturales asociados a la infección intestinal por especies de ancylostomideos en

ladrilleros de Moche, Trujillo­Perú. Epidemiological and sociocultural parameters associated to intestinal

infection by ancilostomidae species in Moche, (Trujillo Peru) brickmakers

Yagahira Castro­Sesquén , Milene Vilela­Alburqueque y Hermes Escalante­Añorga 1 1 1,2

RESUMEN

Palabras clave:

ABSTRACT

Keywords

Se determinó la prevalencia de la infección intestinal por y y su asociación con algunos parámetros epidemiológicos y socioculturales, en ladrilleros del distrito de Moche, Trujillo­Perú, desde julio a octubre del 2005. El estudio fue realizado en 81 ladrilleros de ambos sexos (de 10 a 65 años). La determinación del parasitismo se realizó por la técnica directa y la de Sheather y el desarrollo de las larvas filariformes por la técnica deHaradaMori.

La prevalencia de infección por ancylostomideos fue de 24.69 %, siendo de 14.81 %, 2.46 % y de la coinfección y 7.41 %. Relacionando la infección por

ancylostomideos con los factores epidemiológicos y socioculturales se encontró una mayor prevalencia en: los varones (23.46%), el grupo etáreo de 20 a 29 años (8.64%), los procedentes de la Sierra (16.05%) y en los que tenían su domicilio ubicado en la zona rural (17.28%), bebían agua de pozo (20.99%), defecaban al aire libre (12.35%), tenían solo educación primaria (12.3%), habían trabajado antes en otras ladrilleras (16.05%) y habían laborado entre 5 a10 años en el oficio (8.64%).

Se concluye que existe una alta prevalencia de infección por ancylostomideos en los ladrilleros de Moche, Trujillo­Perú, siendo la especie predominante y que los parámetros epidemiológicos y socioculturales evaluadosno condicionan a la infecciónpor ancylostomideos.

Prevalencia, ancylostomideos, parámetros epidemiológicos / socioculturales, ladrilleros.

The prevalence of the intestinal infection by and , and its association with some epidemiologists and sociocultural parameters in brickmakers of the district of Moche, Trujillo­Peru, from July to October of the 2005 was determined. The studywasmade in 81 brickmakers of both sexes (ten to sixty­five years old). For this, the fecal samples were analyzed by the direct and Sheather techniques and the identification of the filariform larvae by those of Harada Mori technique. The global prevalence of parasitism by hookworms was of 24.69%, being of 14.81%, 2.46% and of the coinfección 7.41%. It was found themost prevalence inmen (23.46%) than women, as well as, in the follow groups: aged of 20 to 29 years (8.64%), that coming from the Mountain range (16.05%), that had their home located in the countryside (17.28%), that drank well water (20.99%), that defecated outdoors (12.35%), had single primary education (12.3%), had worked before in other brickmakers (16.05%) and had worked between 5 to 10 years in the occupation (8.64%). It was concluded that the brickmakers of Moche, Trujillo­Peru, were high parasitism prevalence for ancylostomideos being the predominant species ; while, the parasitism by ancilostomideos it was not associated with epidemiological and sociocultural parameters evaluated.

: Prevalence, ancylostomideos, epidemiologists/sociocultural parameters, brickmakers.

Ancylostoma duodenale Necator americanus

A. duodenale N. americanus A. duodenale N. americanus

A. duodenale

Ancylostoma duodenale Necator americanus

A. duodenale N. americanus A. duodenale­N. americanus,

A. duodenale

Artículo original

1.UniversidadNacional deTrujillo. 2. Centro deAnálisis e Investigación EIRL.Trujillo­Perú.

Recibido 4 de abril 2006, aceptado 23 de mayo 2006. escalabs

9(1)2006

66

INTRODUCCIÓN

La ancylostomosis humana es causada principalmente por y por , especies que afectan una parte importante de la población rural, particularmente en regiones tropicales donde las temperaturas superiores a 13°C, la permanente humedad del suelo, su contaminación con heces humanas y la costumbre de caminar descalzo facilitan la transmisión de esta parasitosis .

Los ancylostomideos adultos parasitan la mucosa intestinal causando pérdidas de sangre debido a su actividad hematófaga y a la ruptura de la mucosa intestinal produciendo anemia y/o úlceras intestinales, repercutiendo negativamente en el crecimiento, el estado nutricional, el estado psicológico y la actividad física , lo cual dependerá del huésped, intensidad de la infección y la especie de ancylostomideo involucrada .

En América Latina, en 1987, se encontró que 72millones de personas estaban infectadas por ancylostomideos y que la infección mas frecuente era causada por . En Perú, la OMS y el INS en 1981 encontraron cifras de 0.57% en la costa, 0.77% en la sierra y de 37.2 % en la selva. Estudios realizados en Trujillo determinaron que la especie más frecuente es . (de 1 a 84.6%), mientras que la infección por , asociada o no con era de 0.5 a 46.2 % . Los porcentajes de infección por ancylostomideos en diferentes sectores y grupos etáreos de Trujillo son de 0 a 2.15% , cifras que aumentan en los pobladores que trabajan en contacto con suelo , siendo los ladrilleros los que presentan cifras de hasta 18.3% , correspondiendo el mayor número de casos a los ladrillerosdeMoche .

Considerando las altas cifras de infección por ancylostomideos en los ladrilleros de Moche, las repercusiones en la salud, actividad física y económica que produce esta parasitosis, la existencia de condiciones adecuadas para el desarrollo de esta enfermedad en estas ladrilleras y la necesidad de actualizar y ampliar la información existente para iniciar programas de control adecuados, la presente investigación estuvo orientada a determinar la prevalencia de la infección intestinal por

y , y su asociación con algunos parámetros

Ancylostoma duodenale Necator americanus

N. americanus

A duodenale N. americanus

A. duodenale,

Ancylostoma duodenale Necator americanus

1,2

1

1, 3­5

6

7

8, 9

10­12

8, 9, 13

9

8, 9, 13

epidemiológicos y socioculturales, en los ladrilleros del distrito de Moche, Trujillo­Perú desde julio a octubre del 2005.

El estudio se realizó en el distrito de Moche, Trujillo­Perú, en 10 ladrilleras distribuidas en los sectores de la Campiña deMoche,Curva deSun, Camino a la Rosita y La Quinta. La temperatura y humedad ambiental promedio fueron de: 23°C y 75%, respectivamente. Todas las ladrilleras pertenecieron al sector rural, tenían moderada y abundante vegetación, siete tenían contaminación fecal en el área de trabajo y todas ellas tenían contaminación fecal cerca al área de trabajo; así mismo, ninguna contaba con sistema de letrina siendo el lugar de defecación al aire libre. El agua que utilizaban para la elaboración de ladrillos era agua subterránea y de regadío.

El estudio se realizó en 81 ladrilleros (9 mujeres y 72 varones, de 10 a 65 años) seleccionados por métodos no probabilísticos, los criterios de inclusión fueron: no haber recibido tratamiento antiparasitario dos meses antes del estudio y dar su consentimiento informado de participación en la investigación.

Los participantes recibieron charlas informativas sobre la ancylostomosis y sus repercusiones en la salud de los parasitados, se les entregó un vaso descartable para la recolección de una muestra de heces y se les realizó algunas preguntas a fin de llenar sus fichas personales y obtener datos como: sexo, edad, lugar de procedencia, localización de domicilio, tipo de agua de consumo, lugar de defecación en su domicilio, grado de instrucción, el antecedente de haber trabajado en otras ladrilleras y el tiempo que labora en el oficio.

Se realizaron los análisis coproparasitológicos por la técnica directa y la de Sheather. En los casos positivos se solicitaron dos muestras fecales adicionales de cada paciente para la identificación de la especie de ancylostomideo, para la cual se obtuvieron las larvas filariformes por la técnica de Harada Mori, las que fueron identificadas según los criterios establecidos por elManual del INS .

MATERIALYMÉTODOS

Área de estudio:

Población estudiada:

Análisis coproparasitológico:

14

CASTRO, Y.; et al. 9(1)2006

Análisis estadístico de datos:

Consideraciones éticas:

RESULTADOS

Se determinó la frecuencia de la infección por cada una de las especies de ancylostomideos y su asociación con los parámetros epidemiológicos y sociocultutales aplicando el test de Ji­ cuadrado, siempre que el número de individuos sea superior de cinco, con un nivel de significancia de 0.05% .

Los participantes del estudio dieron su consentimiento informado de participación en el estudio, los individuos infectados recib ieron gratui tamente tratamiento antiparasitario acompañado con sulfato ferroso, contando para ello con la participación deunmédico especialista.

La prevalencia de la infección por ancylostomideos en los ladrilleros del distrito de Moche, Trujillo­Perú fue de 24.69 %. La mayor prevalencia correspondió a la infección por en un 14.81%, seguido de la coinfección por y en un 7.41% y de en un 2.46% (Fig. 1).

Re l a c i on ando l a i n f e c c i ó n po r anc y lo s t om ideo s con l o s f ac t o re s epidemiológicos y socioculturales se encontró una mayor prevalencia de infección en: los varones (23.46%, Tabla1), el grupo etáreo de 20 a 29 años (8.64%, Tabla 2), los procedentes de la Sierra (16.05%, Tabla 3), y en los que tenían su domicilio ubicado en la zona rural (17.28%, Tabla 4), bebían agua de pozo (20.99%, Tabla 5), defecaban al aire libre (12.35%, Tabla 6), tenían solo educación primaria (12.3%, Tabla 7), habían trabajado antes en otras ladrilleras (16.05%, Tabla 8) y habían laborado entre 5 a 10 años en el oficio

15

A. duodenale A. duodenale N. americanus N. americanus

14.81% (n=12)

7.41% (n=6) 2.46%

(n=2)

0% 2% 4% 6% 8% 10% 12% 14% 16%

Prevalencia (%)

Especie de ancylostomideo

A. duodenale A. duodenale y N. americanus N. americanus

Fig.1 Prevalencia de la infección intestinal por y

en ladr illeros del distr ito de Moche, Trujillo­ Perú, durante julio a octubre del 2005

Ancylostoma duodena le Neca tor americanus

67

Tabla 1. Prevalencia de la infección intestinal por especies de ancylostomideos en ladrilleros de Moche, Trujillo­Perú, según el sexo durante julio a octubre del 2005

Sexo

Especie

Masculino Femenino Total

Nº % Nº % Nº %

11

2

13.58

2.47

1

0

1.23

0.00

12

2

14.81

2.47

Ancylostoma Duodenale Necator americanus

6 7.41 0 0.00 6 7.45 A. duodenale/N americanus

19 23.46 1 1.23 20 24.69 Parasitados

53 69.14 8 9.88 61 75.31 No parasitados

72 88.89 9 11.11 81 100.00 Total

(8.64%, Tabla 9), sin embargo, la diferencia no fue significativa estadísticamente para ninguno de los parámetros epidemiológicos y socioculturales evaluados.

Tabla 2. Prevalencia de la infección intestinal por especies de ancylostomideos en ladr illeros de Moche, Trujillo­Perú, según elgrupo etáreodurante julio a octubre del 2005

Parámetros epidemiológicos y socioculturales 9(1)2006

68

Tabla 3. Prevalencia de la infección intestinal por especies de ancylostomideos en ladr illeros de Moche, Trujillo­Perú, según la región de procedencia, durante julio a octubre del 2005

Tabla 4. Prevalencia de la infección intestinal por especies de ancylostomideos en ladr illeros de Moche, Trujillo­Perú, según la localización de su domicilio, durante julio a octubre del 2005

Tabla 5. Prevalencia de la infección intestinal por especies de ancylostomideos en ladr illeros de Moche, Trujillo­Perú, según el tipo de agua de consumo, durante julio a octubre del 2005

Tabla 6. Prevalencia de la infección intestinal por especies de ancylostomideos en ladr illeros de Moche, Trujillo­Perú, según el lugar de defecación durante julio a octubredel 2005

9(1)2006 CASTRO, Y.; et al.

69

Tabla 7. Prevalencia de la infección intestinal por especies de ancylostomideos en ladr illeros de Moche, Trujillo­Perú, según elgradode instrucción, durante julio a octubredel 2005

Grado de instrucción

Tabla 8. Prevalencia de la infección intestinal por especies de ancylostomideos en ladr illeros de Moche, Trujillo­Perú, según el antecedente de haber trabajado en otras ladriller as, durante julio a octubre del 2005

Especie

Ha trabajado en otras ladrilleras

Tabla 9. Prevalencia de la infección intestinal por especies de ancylostomideos en ladr illeros de Moche, Trujillo­Perú, según el tiempoque labora en el oficio, durante julio a octubredel 2005

DISCUSIÓN

9

13

La alta prevalencia de infección por ancylostomideos en los ladrilleros del distrito de Moche obtenida en el presente estudio indica que la ancylostomosis en estos trabajadores continua siendo un problema de salud pública, ya que anteriormente en este sector también se han encontrado altas cifras de infección, como de 35.2% de un total de 17 ladrilleros deMoche , y de18.3%deun total de 71 trabajadores ; sin embargo, en el presente estudio la prevalencia fue de 24.69%, lo cual

indica un aumento en la prevalencia de esta parasitosis y muestra que esta helmintiasis no sólo se mantiene, si no que además tiende a incrementarse debido a las faltas de políticas de prevención ycontrol.

La prevalencia de infección por ancylostomideos en los ladrilleros es mayor a lo reportado en otros estudios realizados en diferentes grupos etáreos de la población general de Moche que muestran prevalencias de 0 a 2.15% , esto se relaciona con los estudios realizados en las minas de carbón de Chile donde se encontraron larvas de

11, 12

Parámetros epidemiológicos y socioculturales 9(1)2006

70

ancylostomideos solo en el suelo de lasminas y no en el campo cercano a las minas , estos datos indican que son los factores existentes en las ladrilleras como adecuada temperatura, presencia de agua, abundante vegetación y ausencia de letrinas, y las costumbres de los ladrilleros como trabajar descalzo, no usar guantes y falta de normas mínimas de higiene, etc, los que favorecen la ancylostomosis.

La prevalencia de infección por fue mayor a la de

(Fig 1), lo cual difiere de los estudios realizados en la selva peruana que indican que

es la especie mas prevalente , sin embargo, en Trujillo se han encontrado resultados similares a los presentados aquí, Ruiz en un estudio realizado en obreros encontró una prevalencia de 1% para

y de 0.5% para ; Uribe y cols encontraron que de13 ladrilleros infectados por ancylostomideos el 84.6% estaba infectado por , ninguno por

y el 46.2%por ambas especies a la vez, en el presente estudio la prevalencia de

fue 2.47%, lo cual puede indicar un aumento de la prevalencia de este geohelminto

La identificación de las especies de ancylostomideos es importante por las diferencias que existen entre estos parásitos tanto en la patología causada, formas de transmisión y sensibilidad a las drogas antiparasitarias. Allí estriba la importancia del presente estudio, habiéndose determinado una mayor prevalencia de ya que este parásito además de ser considerado mas patógeno que por producir mayores pérdidas de sangre, tiene dos formas de transmisión: por el contacto de la piel con suelo contaminado y por la ingestión de formas infectivas a través de los alimentos , lo cual debe ser considerado en las medidas de prevencióny control.

De los datos presentados en la Tabla 1 se puedeobservar que la prevalencia fuemayor en los varones debido probablemente a que las mujeres se dedican temporalmente al oficio, sin embargo, esto no fue significativo dado a que el número de varones evaluados fue mayor al demujeres. El grupo etáreomas afectado fue de 20 a 29 años (Tabla 2), lo cual se relaciona a lo observado por Mata y cols quienes determinaron unmayor número de casos en los ladrilleros del grupo etáreo de 21­25 años, cabe

16

17

8

9

18

13

A. duodenale N. americanus

N. americanus

A. duodenale N. americanus

A. duodenale N. americanus

N. americanus

.

A. duodenale

N. americanus

señalar la importancia del número de casos en los adultos ya que ellos se comportan como portadores y diseminadores del parásito constituyendo una fuente de infección para los niños. Se observó un menor número de individuos infectados de la primera década de vida, debido a que los niños y jóvenes se dedican temporalmente al trabajo. La d i s t r i b u c i ó n d e l a s e s p e c i e s d e ancylostomideos no estuvo asociada al sexo y grupo etáreo, lo cual se relaciona con los estudios realizados por Córdova en una comunidad deMadre deDios.

Se encontró que la mayor parte de los trabajadores infectados procedían de la Sierra y Costa (Tabla 3) y que de los procedentes de la Selva ninguno presentó infección por a n c y l o s t om i d e o s , p o r o t r o l a d o estadísticamente no se observó asociación entre el número de individuos infectados y la localización del domicilio (Tabla 4), esto coincide con lo observado por Uribe y cols y descarta la posibilidad de haberse adquirido la infección de su lugar de origen o de donde habitan; ya que, en la Sierra y Costa la prevalencia de ancylostomideos es menor, siendo los habitantes de la Selva los que presentanmayores cifras de infección , de igual forma estudios realizados en asentamientos humanos donde algunos ladrilleros habitaban reportan que la prevalencia de infección por ancylostomideos es nula o baja . No se encontró asociación con el tipo de agua de consumo, el lugar de defecación en el domicilio, el grado de instrucción ni con el hecho de haber trabajado en otras ladrilleras (Tablas 5, 6, 7 y 8), esto se debería a que todos los trabajadores están expuestos a las mismas fuentes de infección en su lugar de trabajo, pese a que en su domicilio pueden carecer de ellas, así mismo en casi todas las ladrilleras se observaron los mismos focos de infección, razón por la cual no se encontró diferencia significativa en el número de casos entre los que si y no habían laborado enotras ladrilleras.

Los resultados indican la urgencia de iniciar programas de control tomando como ejemplo las acciones realizadas por otros países que han logrado erradicar la enfermedad , para lo cual sería necesario la implementación de servicios sanitarios, tratamiento adecuado de los parasitados, educación sanitaria, control de materia orgánica, desinfección con cal viva, la desecación, etc, lo cual permitirá el bienestar de

17

9

7

10

2

9(1)2006 CASTRO, Y.; et al.

71

la poblacióny evitará pérdidaseconómicas.

A todos los ladrilleros de Moche, Trujillo­ Perú que participaron en la investigación por su constante colaboración, al Dr. Hernán Cruz Pachamango del Centro de Salud Clas de Moche por su ayuda en la administración del tratamiento de los pacientes y al Centro de Análisis e Investigación por la donación de las drogas antiparasitarias

AGRADECIMIENTOS

ESCALABS EIRL

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S t a t e , N ig e r i a A f r i c an Jou r na l o f Biotechnology2003; 2 (11): 470­3.

Correspondencia: YagahiraCastroSesquen MonserrateMzDLt.04 ­Trujillo Teléfono: (044) 9719973 CorreoElectrónico yagahiraelizabeth@hotmail.com

Ancylostoma duodenale Necator americanus

Neca tor amer inus Ancylos toma duodenale

Parámetros epidemiológicos y socioculturales 9(1)2006

72

73

Myiasis por sp. (Diptera: Cuterebridae) en del Alto Marañón, Amazonas, Perú

Cuterebra Rattus rattus

Myiasis by sp. (Diptera: Cuterebridae) in from Alto Mara n, Amazonas, Peru

Cuterebra Rattus rattus ñó

Nicanor Ibáñez­Herrera , Iván de la Cruz­Agreda , Edwin Celis­Alarcón , Ángela Rodríguez­Díaz , William Sánchez­Gavidia y

David Rodríguez­Díaz

1 1 1

1 1

1

RESUMEN

ABSTRACT

Se da a conocer por primera vez en el Perú, un casodeMyiasis ocasionada por una larva del género encontrada en la columna vertebral de procedente de las viviendas de los pobladores nativos aguarunas, de las cercanías del Puerto de Imacita,RìoMarañon,Bagua,Amazonas, Perú.

:Myiasis, , aguarunas,Amazonas, Perú.

Gives to knowing for the first time in Peru, Myiasis case caused by a larva of the kind sp., registered in the vertebral column of proceeding from the housings of the native settleres aguarunas, of the surroundingsof the Port Imacita,Marañón river, Bagua,Amazon,Per .

: Myiasis, Aguarunas, Amazon, Peru.

Cuterebra Rattus rattus

Cuterebra Rattus rattus,

Cuterebra Rattus rattus

Cuterebra, Rattus rattus,

Palabras clave

Key words

ú

INTRODUCCIÓN

Myiasis es el parasitismo por larvas de moscas biontófagas, distribuidas en todo el mundo, especialmente en los países tropicales y subtropicales. Muchas especies causantes lo hacen obligadamente porque, comoparte de su ciclo vital, tienen que parasitar al hombre o a los animales mamíferos, depositando sus huevos en una herida o invadiendo tejidos sanos de la nariz, la nasofaringe, los senos paranasales, los ojos, el intestino o el aparato urogenital.

Los dípteros de interés médico se encuentran en las siguientes familias:

esta última de roedores. Estos insectos que pertenecen al Orden Diptera Linneo, 1758, y al Sub orden: CyclorrhaphaBrauer, 1863, se multiplican por metamorfosis completa y sus larvas se desarrollan de un modo general en materia orgánica. Las Myiasis en el Perú han existido desde tiempos inmemoriales, por tener

Muscidae, Sarcophagidae, Calliphoridae, Oestridae y Cuterebridae,

Dípteros autóctonos en todo el territorio nacional .

Los primeros casos de gusanera en las fosas nasales fueron registrados en Lima y fueron estudiados por Manuel Odriozola en 1845 cuando comienza su práctica médica en el hospital SanAndrés y observa que en cada año se presenta cuando menos dos pacientes con gusaneras en la nariz, en el curso de cuatro años sucesivos. En aquella época para el tratamiento se empleaba las hojas de albahaca y la sebadilla en polvo ( ) que hacía estornudar fuertemente y de esa manera, eliminaban las larvas de moscas de sus narices .

El mayor número de casos humanos de Myiasis cutánea en el Perú son provocadas por , denominada corrientemente como “el tupe' o “intuto”, de igual modo, se registran casos por

, 1858 y , 1761, mosca vivípara de origen europeo .

El presente trabajo estuvo orientado a

1,2,3,4

11,12

5,6,7,8,9,10

Veratrum sebadilla

Dermatobia hominis

Cochliomyia hominivorax, Coquerel Oestrus ovis Linneo

Artículo original

1. Facultad de Medicina de la Universidad Privada “Antenor Orrego” Trujillo, Perú. Recibido 25 de enero 2006, aceptado 4 de mayo 2006.

9(1)2006

74

identificar y describir una larva encontrada en , procedente del Puerto Imacita,

Bagua,Amazonas.

Durante una excursión al Alto Marañón, en Agosto del 2001, en el Puerto de Imacita, Distrito de Imaza, Provincia de Bagua, Departamento de Amazonas (Fig. 1), se capturaron cuatro ejemplares de “rata” de las viviendas de los aguarunas. En una de ellas, en el costado derecho de columna vertebral y por detrás del omóplato, se detectó una herida de tres centímetros de largo por un centímetro de ancho, de donde se extrajo una larva grande de color oscura, la que inmediatamente fue depositada en una caja Petri con solución salina para la observación en el Estereomicroscopio y posteriormente para su mejor observación microscópica se conservó en alcohol al 70%. La identificación se hizo en la Universidad Agraria La Molina (Lima, Perú).

Rattus rattus

Rattus rattus

MATERIALY MÉTODOS

Fig. 1. Ubicación geográfica del Puer to de Imacita, Bagua, Amazonas, donde se capturaron ejemplares de infestadas con sp.

Rattus rattus Cuterebra

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

La larva de color negro, con una longitud de 29mm, un ancho de 12.5mm yuna altura de l2 mm, y con segmentaciones transversales en

toda su longitud fue identificada como perteneciente al género (Fig.2), cuyaubicación sistemática es:

Orden :Diptera Linneo, 1758. SubOrden :CyclorrhaphaBrauer, 1863. Familia : Cuterebridae Sub familia: Cuterebrinae Genero : Clark Especie : sp

Cuterebra

Cuterebra

Fig. 2. Espécimen de larva de sp. Recolectada de de Imacita,Bagua,Amazonas

Cuterebra Rattus rattus

Cuterebra

Cuterebra Cuterebra ernasculator Cuterebra lepusculi Cuterebra baeri Cuterebra apicalis Cuterebra thomomuris Cuterebra horripilum Cuterebra latifrons Cuterebra polita Cuterebra jellisoni Cuterebra tenebrosa

Se tiene conocimiento que la mosca , después de haber colocado los

huevos en la espalda de los roedores, eclosionan larvas y comienzan a horadar la piel para producir una herida subcutánea, la que después de 3 a 4 semanas alcanza aproximadamente 25 mm de longitud; y en donde puede vivir de 4 a 5 meses. Después de este tiempo, la larva emerge de la herida y cae a la tierra para la formación del estadío pupario, época que coincide al término del Invierno y en principios de Primavera cuando sale la mosca adulta, la misma que vive alrededor de 2 semanas

Se han descrito hasta la fecha para el continente americano diez especies de

Clark: Fitch, 1856

Townsend, 1897 Shannon&Greene, 1926 _Guer&Schmalzi, Lutz

Jellison, 1949 Haas, 1958

Coquillett Capelle, 1970 Baird, 1971 Baird, 1975

Por el momento, no se puede precisar a que especie pertenece la larva en mención, hasta

2 .

• • • • • • • • • •

IBAÑEZ, N.; et al. 9(1)2006

75

obtener el estadio adulto, para lo cual será necesar io llevar acabo un proceso experimental en el Laboratorio, obteniendo nuevas muestras del material biológico. Sin embargo, las características genéricas son precisas y correspondientes con el ejemplar hallado. La información que se presenta constituye el

primer registro de parasitismo por en roedores en el Perú.

Al personal de la Biblioteca de la Facultad de Medicina San Fernando de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos de Lima por brindar las facilidades en la búsqueda bibliográfica nacional; al Dr. William E. Dale de la Universidad Nacional Agraria por la identificación de la larva y, asimismo, a la Srta. Sulma Hinojosa por su aporte en el trabajo dactilográfico.

Cuterebra

AGRADECIMIENTOS

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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Cu t e r eb r a tenebrosa

Cuterebra tenebrosa

Oestrusovis

Stomoxys calcitrans

C. hominivorax O. ovis

Dermatobia hominis

Cochlyiomia hominivorax

Cuterebra

peruanode oculomiasis producidopor larvas de ,Linneo, 1785.Rev M é d Peru 1955; 26 (316):95­ 99.

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Correspondencia: Nicanor IbañezHerrera Paraguay 160 ­UrbElRecreo Teléfono: 297071 CorreoElectrónico: oribanezh@upao.edu.pe

10.

11.

Myiasis por Cutebra sp. 9(1)2006

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Aspectos biológicos de (Hemiptera: Pentatomidae) bajo condiciones de laboratorio.

Podisus nigrispinus

Biological aspects of (Hemiptera: Pentalomidae) under laboratory conditions

Podisus nigrispinus

Julio C. Chávez­Galarza , Yolanda Delgado­Silva , Victor Zavaleta­Esquerre , Roberto Rodríguez ­Rodriguez y Luis Pollack­Velasquez .

1 1 1

1 1

RESUMEN

Palabras clave

ABSTRACT

Keywords

El objetivo del presente trabajo fue conocer algunos aspectos biológicos de Dallas bajo condicionesde laboratorio a 25±2ºCde temperatura, 65±5%dehumedad relativa y10hde fotoperiodo.

La ninfa I se alimentó con agua azucarada al 10% y hojas tiernas de maíz, las ninfa II­V y adultos fueron alimentados con larvas III­V de . La longitud y ancho cefálico en adultos para el macho fue 9.4 y1.97mmypara la hembra 11.4 y2.15mm, respectivamente.

El ciclo total promedio del macho fue 56.6 y la hembra 62.8 días, desarrollo promedio ninfal duró 19.8 días; la relación de sexos 0.60, número promedio de cópulas 4.1, número promedio de oviposiciones, huevos por oviposición y huevos total fueron 8.2, 28.3 y 280.2. El período promedio de precópula 3.5, preoviposición 7.6, oviposición21.8 ypostoviposición5.5 días.

: , aspectosbiológicos.

The objective of the present work was to know some biological aspects of Dallas low laboratory conditions to 25±2ºC of temperature, 65±5% of relative humidity and 10 h of photoperiod. The nymph I fed with sugary water to 10% and tender leaves of corn, nymphs II­V and adults were fed with larvaes III­V of . The longitude and wide cephalic in adults for the male was 9.4 and 1.97 mm and for the female 11.4 and 2.15 mm, respectly; the total average cycle of males was 56.6 and females 62.8 days, development average nymphal was 19.8 days; the sexual ratio was 0.60, number average of sexual intercourses was 4.1, average number of ovipositiones, eggs for oviposition and eggs total were 8.2, 28.3 y 280.2. The average periodof precopule 3.5, preoviposition 7.6, oviposition 21.8 andpostoviposition 5.5 days.

: , biological aspects

Podisus nigrispinus

Spodoptera eridania

Podiscusnigrispinus

Podisus nigrispinus

Spodoptera eridania

Podiscusnigrispinus

Artículo original

1.Facultad deCienciasBiológicas,UniversidadNacional deTrujillo Recibido 16 de enero 2006, aceptado 31 de marzo 2006.

9(1)2006

78

INTRODUCCIÓN

1

2

3

4,5,6 7,8,9

10 11 12

13 14

1 5

16 17

18 15

19

El control biológico puede reducir poblaciones de insectos plaga y mantener el balance del ambiente sin utilización de insecticidas, el cual puede mejorar la calidad de vida en diferentes ecosistemas .

Trabajos específicos sobre la bionomía de algunas especies promisorias para el control biológico, han sido realizados en algunos países, en especial del pentatómido predador del género que se alimentan de larvas de lepidópteros y coleópteros ; sin embargo, sólo aproximadamente el 10% de las 300 especies asopinas conocidas han sido estudiadas en detalle .

Estudios realizados respecto de la biología de diferentes especies de pentatómidos como

; ; ; ; ;

y , han permitido obtener resultados favorables para su crianza y aplicación en los métodos de control biológico.

En el Perú se han realizado algunas investigaciones relacionados a la biología y compor t ami ent o de sp . , determinándose a éste como predador de

; ; ; ;

, y .

Estudios relacionados a la biología de controladores biológicos permiten la obtención de conocimientos básicos para su utilización en estrategias de control de insectos plaga, por lo que el objetivo del presente trabajo fue determinar algunos aspectos biológicos de Dallas (Hemiptera, Pentatomidae) en condiciones de laboratorio, con la finalidad de obtener nuevas informaciones para la mejora de la crianza masiva y su posterior liberación en el campo dentro de los programas de control biológico.

MATERIALYMÉTODOS

El trabajo fue realizado en el Laboratorio de Crianza de Insectos Benéficos del Centro de Investigaciones Agroecológicos, bajo las condiciones de 25±2ºC de temperatura, 65±5% de H.R., y fotoperiodo de 10 h. Para iniciar la crianza se colectaron ninfas y adultos de cultivos de maíz, los que fueron

Podisus

Podisus nigrispinus P. maculiventris P. mucronatus P. sagitta P. distinctus Brontocoris tabidus Stiretrus anchorago

P od isu s

Heliothis virescens Anomis texana Mescinia peruella Leptophobia aripa Spodoptera frugiperda Heliothis zea Pococera atramentalis

P. nigr ispinus

acondicionados en cajas de Petri y separados en parejas en vasos plásticos de 200 mL tapados con organza.

Las ninfas recién eclosionadas fueron alimentadas hasta ninfa II con solución azucarada al 10% embebidos en algodón y hojas de cogollo demaíz. Los estadíos ninfales II, III, IV, V y adultos fueron alimentadas con larvas de de estadíos III, IV, V que fueron colectados de campo y criados en laboratorio; determinándose la duración de cada estadío y su porcentaje de viabilidad.

Se registró la relación de sexos, número promedio de cópulas, oviposición, huevos colocados por postura. Se realizó la medición de los diferentes estadíos ninfales y adultos en ejemplares de cría. La longitud de ninfa y adulto fueron tomados desde el ápice del tylus hasta la parte caudal del abdomen y el ancho cefálico se consideró el espacio existente entre los márgenes externos de los ojos compuestos. Las medidas de cada estadío se realizaron con 25 ejemplares, en microscopio “Olympus” y estereoscopio “CarlZeiss”.

Las dimensiones de los caracteres morfométricos de la longitud de huevos, ancho cefálico y longitud de ninfas y adultos se presentan en la Tabla 1. Estas medidas coincidieron con los encontrados para sp dando entender que está especie sería también pero de la zona de Huanuco­Perú , y aproximándose a la especie

de la zona de Florida yCaribe Los huevos son de color blanquecino al

momento de la postura para tornarse de un color amarillo­verdoso antes de la eclosión, tienen una forma subglobosa a oval con proyecciones en forma de espinas, observaciones concordantespara la especie . La longitud promedio fue 0.93 mm, con una duración del período promedio de incubación de 5.7 días y una viabilidad del 47.3% (Tablas 1, 2, 3, Figs. 1, 2, 3). Estos resultados se asemejan con los hallados para sp. y

que presentaron una longitud de 0.92 y 0.91mm, respectivamente , el período promedio de incubación y viabilidad determinados en el presente trabajo alimentados con no coincidieron

Spodoptera eridania

Podisus .

P. nigrispinus

P.mucronatus

Podisus P. mucronatus

S. eridania

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

15

10

20,21

10,15

CHAVEZ , J.; et al. 9(1)2006

79

con los realizados en una población de Brasil que presentó 3.5 días y 35.4% posiblemente por haber sido alimentada con “el gusano de seda” ; al parecer el tipo de alimento influye en el período de incubación y viabilidad de como se indican en otros trabajos para otra especie

, en la que se utilizó como alimento larvas con un período embrionario de 4.0 días y 69.0% y con larvas de

5.2 días y 75.3% . Durante el desarrollo del ciclo biológico

(Figs. 4­7), se determinó que las ninfas pasan por 5 estadíos, confirmando los resultados obtenidos por otros investigadores . La duración promedio del desarrollo ninfal fue 19.8 días teniendo una viabilidad de 80.3% (Tabla 2­3). El resultado encontrado del período ninfal se asemeja al determinado en una población de Brasil que fue de 19.6 días; pero, en el porcentaje de viabilidad de huevos difieren en 10% al encontrado por otro investigador ; estudios de comparación en el tipo de alimentación de con larvas de , y evidenció diferencias en la viabilidad , lo cual indicaría que el tipo de alimento sería una variable a tomar en cuenta en programas de crianzamasiva.

Bombix mori

P. nigrispinus Brontocoris

tabidus B. mori

Tenebrio monitor

P. distinctus B. mori T. monitor Musca domestica

21,22

4,5

21

12

P. nigrispinus

P. nigrispinus S. eridania

El ciclo promedio total de fue 59.7 días; en machos 56.6 y hembras 62.8 días, la longevidad promedio de machos 31.2 y hembras 37.8 días; la relación de sexos fue 0.60, el número de cópulas fue 4.1 veces (Tablas 2, 3 y 5), no habiendo preferencia por determinado horario, resultados coincidentes a los encontrados . Las observaciones de una mayor proporción de hembras y tiempo de vida influiría en el potencial reproductivo de esta especie y consecuentemente su potencial biótico . Las hembras copuladas ovipositaron un número promedio de 8.2 masas de huevos, 28.2 huevos por masa y un número total de huevos por hembras de 280.2 (Tabla 5). Estos resultados coinciden con los indicados en crianza de laboratorio y evaluaciones de campo . La duración promedio de precópula, preoviposición, oviposición y postoviposición fueron 3.5, 7.6, 21.8 5.5 días, respectivamente (Tabla 4); resultados que difieren muy poco con estudios ya realizados para con otro alimento diferente a .

4,23

21

21

5

5,15,21

Tabla 1. Medidas morfológicas promedio en mm de huevos, estadíos ninfales y adultos de Podisus nigrispinus.

Número promedio de huevos por oviposición de . Podisus nigrispinus

Fig 1. Viabilidad promedio de huevos por oviposición dePodisus nigrispinus

Fig 2 .

Aspectos Biológicos de Podisus nigrispinus 9(1)2006

80

Duración promedio del ciclo de vida de Podisus nigrispinus

Viabilidad de huevos y estadíos ninfales de Podisus nigrispinus.

Tabla 2 .

Tabla 3.

Período promedio en días de pre­ copula, pre­oviposición, oviposición y post­oviposición de Podisus nigrispinus.

Tabla 4.

Valores de relación de sexos, nº promedio de cópulas, oviposiciones, huevos por postura y huevos por hembra en Podisus nigrispinus

Tabla 5.

F a ses d el d esa r r ollo de . Fig 3. Huevos. Fig 4.

Nin fa s I . F ig 5. Nin fa I I I a limentándose de lar va de

. Fig 6.Ninfa IV. Fig 7. Ninfa V.Fig 8.Adulto

P. nigrispinus

S. eridania

Figs 3­8.

AGRADECIMIENTOS

Al Blgo. Fernando Díaz Silva, por las facilidades brindadas para la realización del presente trabajo en la Empresa Centro de InvestigacionesAgroecológicas S.A.C.

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Podisus nigr ispinus

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Podisus maculiventr is P. sagitta

et a l.P od i s us d i s t i nc tus

B o m b y x m o r i

Podisus nigrolimba tus

Podisus ma cu l i ve n t r i s St i r e t r u s anchorago

Epilachna varivestis

P o d i s u s s p

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Correspondencia: JulioChavezGalarza EstadosUnidos288Urb. ElRecreo ­Trujillo Teléfono: (044) 235841 Correo Electronico: alucara_jul@hotmail.com

Spodoptera Heliothis zea

Diatraea saccharalis Pococera a tr amentalis

.

P o d i s u s connexivus

Brontocor is tabidus P od i s u s n i g r i s p i n u s

P o d i s u s n i g r o l i m b a t u s

Tenebrio mon i t o r

Podisus sp

Aspectos Biológicos de Podisus nigrispinus 9(1)2006

83

Experimentos de exclusión de herbívoros en la comunidad intermareal del litoral de Huanchaco­Perú

Experiment of exclusion of herbivores in the intertidal Community of the litoral (coast) of Huanchaco Peru

Carlos A. Bocanegra­García y Elena Icochea­Barbaran 1 1

RESUMEN

Palabras clave

ABSTRACT

Keywords

Se describe y evalúa las interacciones y efectos de los herbívoros (recolectores humanos y molusco sobre la abundancia temporal del alga , mediante experimentos de exclusión

en el intermareal deHuanchaco, durante losmeses de febrero anoviembre del año2002. De partida se evaluó un sector sometido permanentemente a la presión extractiva del hombre y al pastoreo

del molusco , el cual funcionó como testigo o control. Los resultados evidenciaron fluctuaciones marcadas, conbiomasas notoriamente decrecientes enverano.

El primer experimento de manipulación de herbívoros, consistió en aislar un sector del litoral de los recolectores (exclusión de humanos) habituales de mariscos y algas. Los resultados mostraron un incremento significativo de la biomasa algal, con máximos valores en primavera­verano, para luego decrecer dramáticamente.

El segundo experimento consistió en excluir tanto a los recolectores humanos, como al molusco Tegula atra (herbívoros). Se obtuvo resultados crecientes de biomasa a través del tiempo, cuya función de crecimiento siguió el típico comportamiento deuna curva logística, convaloresmáximos enverano.

:Herbivoría/ intermareal/Huanchaco

Evaluation of the interactions and effects of the consumers (herbivorous: human gatherers and mollusc ) on the temporal abundance of the alga , through experiments of

exclusion in the intertidal of Huanchaco are described and evaluated, since February to November of 2002.At first time a section under permanent extractive pressure of the man and pasturing of the mollusc , which was the test or control was evaluated. Results show evidence of marked fluctuations, with significantly decreasing biomasses during summer. The first experiment of manipulation of herbivorous, was the isolation of a section of the littoral without habitual gatherers (exclusion of humans) of molluscs and algae. The results showed a significative increase of the algal biomass, with maximum values in spring summer, and then decreased drastically. The second experiment consisted in the isolation of the human gatherers and the mollusc

(herbivorous). Increasing results of biomass were obtained through the time, wich growing funtion follows the typical behavior of a logistic curve,withmaximumvalues in summer.

:Herbivory/ intertidal/Huanchaco

Tegula atra) Chondracanthus chamissoi

T. atra

Tegula atra Chondrocanthus chamissoi

T. atra

T. atra

Artículo original

1. DepartamentoAcadémico de Pesquería. Facultad de Ciencias Biológicas ­ Universidad Nacional de Trujillo. Trujillo­Perú. Recibido17de enero 2005, aceptado16deenero 2006.

9(1)2006

84

INTRODUCCIÓN

En los últimos años la ecología experimental ha operado un significativo auge y desarrollo, hecho que la han convertido en una sub disciplina científica cuyo objetivo es no sólo describir las especies sus patrones espaciales distribuciones geográficas y temporales, sino entender los procesos naturales que puedan estar involucrados en ella; tal como sostiene Paine , la búsqueda de generalización confiable, a menudo basado en evidencia descriptiva requiere del entendimiento de las fuerzas físicas que influyen en el ensamble natural. Los experimentos e investigaciones realizadas en la naturaleza han sido posible, en gran parte, en base a la creación de áreas protegidas, sobre todode pequeñas reservas marinas costeras, donde se han evidenciado importantes cambios directos e indirectos en las comunidades intermareales y submareales como consecuencia de la exclusión de importantes eslabones de la cadena trófica . El significado e importancia de la herbivoría

como agente estructurador de los patrones comunitarios de macroalgas bentónicas ha sido un aspecto central de la ecología de comunidades marinas cuyos efectos están ampliamente documentados . Es importante señalar que en el

herbivorismo o depredación de plantas, el depredador consume solo una parte, a diferencia del depredador de animales que en la mayoría de las veces es un fenómeno de ¨todo o nada¨ , hecho que asegura la supervivencia de las especies , que si bien las plantas no pueden escapar a un consumidor corriendo o ocultándose, pueden defenderse produciendo estructuras anti herbívoros como espinas, repelentes químicos y sobre todo su gran capacidad de regeneración. En términos generales las referencias consultadas, revelan información sobre el rol del pastoreo sobre las algas como alimento de invertebrados, mas no del rol del hombre quien se comporta como un c omp e t i d o r h e r b í v o r o a l e x t r a e r selectivamente las algas ya sea para consumo humano directo o para su transformación. No obstante se requiere conocer no sólo los efectos del impacto ecológico provocado por los depredadores, sino evaluar la intensidad del pastoreo y la capacidad de soporte del sistema,

1

2,3,4,5,6,7,8,9,10

11,12,13,14,15,16,17,18,19,20

21

22

por cuanto en una comunidad participan generalmente un gremio de consumidores, los cuales tienen un rol particular y que sumados impactan en los especies basales como las algas. La antigua caleta de pescadores artesanales

de Huanchaco (Perú), ahora convertida en uno de los principales balnearios turísticos de la ciudad de Trujillo, presenta una franja litoral compuesta por un mosaico de sedimentos, donde se asienta una variada flora y fauna marina; la zona intermareal se caracteriza por el dominio del alga roja

sobre los otros componentes comunitarios. Este recurso desde tiempos precolombinos es permanentemente extraído por los pobladores nativos del lugar, la misma que es utilizada principalmente para consumo directo. En las ultimas décadas por el incremento del número de recolectores, el aumento del esfuerzo de extracción ha conducido a la población de ésta especie a niveles de escasa disponibilidad , por ejemplo durante la década del 80, prácticamente desapareció, bajando su sponibilidad a niveles insignificantes, situación que nuevamente se presentó en el año 2000 además se refiere que la escasez de este recurso, ha repercutido en la disponibilidad de otros recursos como moluscos, crustáceos y peces . Casos de sobreexplotación de recursos litorales, contaminación y erosión costera, han sido documentados también para las costas de Latinoamérica , para Argentina y en Uruguay , donde al igual que la casi totalidad del mundo, son una consecuencia lógica y directa de la estricta relación causa­efecto existente en el proceso de uso y/o explotación de los recursos marinos y costeros, cuando aquel no es realizado con sabiduría. En consideración a lo mencionado

anteriormente, la presente investigación está orientada a evaluar el efecto de los herbívoros (recolectores humanos y el molusco gastrópodo ), sobre la abundancia temporal de este importante recurso algal, mediante experimentos realizados en la zona intermareal de Huanchaco, desde la perspectiva de la interacción alga herbívoro.

Chondracanthus chamissoi,

Tegula atra

23,24

25,26

24

27

28

BOCANEGRAC., ICOCHEAE. 9(1)2006

85

MATERIAL YMÉTODOS

Area de estudio El estudio se realizó, en el litoral de la Bahía de Huanchaco Perú (08º 04' 36'' S; 79º 07' 11'' W)

situada a 13 kilómetros de la ciudad deTrujillo (Figura 1).

Fig 1. Ubicación geográfica del distr ito de Huanchaco, Trujillo­Perú FUENTE: Diseñado por el Autor con información del Atlas Ambiental de Trujillo, 2003

Metodología

Se demarcó tres áreas con características similares a exposición al oleaje y tipo de sustrato, donde se realizaron experimentos de exclusión de herbívoros, durante los meses de febrero a noviembre del 2002.

Enprimer término, se evaluó un sector del litoral sometido permanentemente a la presión extractiva de los recolectores humanos y a la presión del pastoreo por elmolusco herbívoro . Este sector se considero como testigo o control (Fig 2). En segundo lugar, se aisló un sector del litoral de los recolectores habituales de mariscos y algas, para tal efecto se delimitó un área de 5,000 m , que

T. atra 2

Experimentos de exclusión de herbivoros 9(1)2006

86

permaneció protegida (Fig 3). Esta acción fue definida como exclusión humana (herbívoro selectivo). En tercer lugar, se delimitó otra área donde se mantuvo la ausencia constante de los recolectores humanos y del molusco , a fin de anular su efecto sobre las algas en estudio (Fig 4). La ausencia de se consiguió removiendo manualmente los ejemplares en horas demarea baja.Aesta acción se denominó ausencia total de herbívoros.

La variación de biomasa (peso húmedo por área) del alga fue evaluado siguiendo el método de la cosecha o “standing crop”, en base a transectos perpendiculares a la línea de orilla y con un cuadrante de 0.25m de área, los transectos fluctuaron entre 30 a 50 metros y fueron aplicados tres veces durante las mareas bajas. Con los datos de biomasa obtenidos, se construyó las curvas de abundancia mensual, procediéndose a realizar su representación gráfica, la misma que evidenciaría las respuestas poblacionales del alga a las fuentes de variación. 79º 07' 11'' W) situada a 13 kilómetros de la ciudad de Trujillo (Figura 1).

T. atra

T. atra

Ch. chamissoi,

2

Fig 2: Sector con extracción por recolectores humanosypastoreodeTegula atra

Fig 3: Sect or solo con exclu sión d e recolectores humanos.

Fig 4: Sector con exclusión de recolectores humanosydeTegula atra.

RESULTADOS

Los resultados de las experiencias realizadas se tradujeronen: En el primer caso, sector sometido permanentemente a la presión extractiva de los recolectores humanos y pastoreo del molusco

, los resultados evidenciaron fluctuaciones marcadas. La biomasa algal alcanzó valores de hasta 342 g/0.25 m decreciendo paulatinamente en el tiempo (Fig 5).

T. a tr a

2

Var iación temporal de Biomasa de en

condiciones de extracción permanente por recolectores humanos y pastoreo de ( ) y en exclusión de consumidores ( )

Chon dr a ca n th u s ch ami ssoi

Tegula atra

Fig 5:

En el segundo caso, donde se mantuvo sólo la exclusión de los recolectores humanos sobre el alga se observó un incremento inicial moderado durante los primeros meses, para luego incrementar explosivamente la biomasa a valores máximos de 779,0 g/0.25 m , y finalmente decrecer dramáticamente en

Ch. chamissoi,

2

9(1)2006 BOCANEGRAC., ICOCHEAE.

87

Fig 6: Var iación temporal de Biomasa de e n

condiciones de exclusión de recolectores humanos ( ). ( ) exclusión de consumidores.

C h o n d r a c a n t h u s c h a m i s s o i

T. atra Ch. chamissoi,

C. chamissoi

En el tercer caso, la exclusión tanto de recolectores humanos como de remoción permanente del molusco , los valores de biomasa de mostraron una variación con tendencia creciente a través del tiempo, cuya función de crecimiento sigue el típico comportamiento de una curva logística, con un aumento lento en los meses de julio agosto (fase de establecimiento), seguido de otro más rápido en los meses de setiembre octubre (acercándose a la fase logarítmica), para finalmente decrecer gradualmente en los meses de diciembre febrero (fase de aceleración negativa), hasta alcanzar un valor máximo de producción de 350 g / 0.25 m En este experimento natural, los ejemplares de

, alcanzaron longitudes de hasta 80 cm. no observadas ni reportadas anteriormente (Fig 7).

2 .

el tiempo (Fig6).

Fig 7: Var iación tempor al de Biomasa de e n

condiciones de exclusión de recolectores humanos y de ( ) (Las fot ogr a f ía m u es t r a l a lon gi t u d alcanzada).

Ch on d r a c a n t h u s c h a m i s s o i

Tegula atra

DISCUSIÓN

La experiencia de protección del alga , de la extracción humana en el

intermareal de Huanchaco, se tradujo en importantes cambios en la dinámica poblacional de , como del herbívoro , resultados que se manifestaron por la interacción alga herbívoro. La inhibición de los recolectores de

, quienes se comportan como herbívoros selectivos, permitió un incremento explosivo de la biomasa algal en el tiempo en una primera etapa, para luego decrecer drásticamente al extremo de no encontrarse disponible. Estos resultados son sólo comparables con los obtenidos en las reservas marinas del litoral chileno, donde se encontró que en experimentos manipulativos, la ausencia de herbívoros en la comunidad produjo el mismo proceso en especies de algas diferentes, demostrándose la existencia de especies competitivas .

La interacción alga herbívoro, se manifestó durante la fase final de la experiencia de protección de , tiempo en el cual se cuadruplicó la densidad del herbívoro

probablemente atraídos por una mayor oferta de alimento, mayor sobrevivencia de reclutasy a eventos demigración . El efecto destructivo que ocasionara en la pradera de confirma lo reportado para el intermareal del sur de Chile , en el sentido de que se comporta como un herbívoro eficiente, capaz de producir áreas blanqueadas, “barren grounds”, en la zona sur de Chile. Esto explicaría en gran parte la brusca caída de la biomasa algal tanto en el área protegida, como en la no protegida; efecto conocido “sobrepastoreo”, resultado observado en la Reserva Marina de Mehuin (Chile), donde se evitó la extracción de los grandes herbívoros (fisurelidos “lapas”). Sin embargo lo ocurrido en Huanchaco se diferencia de las experiencias chilenas en el hecho que los herbívoros principalmente

no es recolectado para consumo humano, por lo que a la larga se produjo un reemplazo entre los recolectores humanos o herbívoros selectivos por otro herbívoro

, proceso conocido como efecto cruzado “Cross linkage” enel segundo nivel trófico.

La ausencia total de consumidores de , vale decir los recolectores humanos

Ch chamissoi

Ch. chamissoi T. atra

Chondracanthus

Chondracanthus

T. atra,

Tegula Chondracanthus,

Tegula

Tegula

Tegula

C. chamissoi

18

23

18

1

Experimentos de exclusión de herbivoros 9(1)2006

88

y el caracol evidenció un incremento de la biomasa algal moderada siendo mayor en primavera y verano. Es importante resaltar la longitud alcanzada por los ejemplares de

de hasta 80 cm. longitudes no observadas ni reportadas anteriormente y que se diferenciaron notoriamente de las dos experiencias anteriores; hecho atribuible a la ausencia de perturbación biológica de depredación.

En general se puede decir que la función de crecimiento del alga sigue el típico comportamiento logístico, la biomasa en los meses de julio agosto presenta la fase de aumento lento; seguido de otro más rápido en los meses de setiembre octubre, para luego decrecer gradualmente. Está última es atribuible a la resistencia ambiental que estaría generando efectos de in terfer encia intraespecífica (sombreamiento, competencia por espacio), hecho que ha sido observado en otras macroalgas cuyas tasas de crecimiento bajo ciertas condiciones, en terreno o en laboratorio, siguen la descripción universal de las curvas de crecimiento sigmoidal ; también se ha reportado que lamortalidad en las algas es una función de los efectos de sombreamiento, producidos por los individuos reclutados en los niveles inmediatamente superiores .

Los resultados de los experimentos anteriores difieren de los obtenidos en este trabajo cuando se ejerce una presión de los dos herbívoros ( recolectores humanos y ), quienes se comportarían como competidores y por lo tanto reguladores de la población algal, hecho que evitaría el agotamiento o disponibilidad del recurso , en el sentido que los depredadores herbívoros no solo tienen efectos tanto negativos como positivos en sus presas, sino también ejercen efectos importantes en la composición de la comunidad completa .

La permanencia de los principales herbivoros (recolectores humanos y molusco ) del alga

mos t ró f l uc tuac iones decrecientes enel tiempocon tendencia No dramática, demostrándose que los recolectores humanos y el molusco se comportan como competidores por el recurso, hecho que permite no agotar el

T. atra,

C. chamissoi

T. atra

Tegula atra Ch cha mi sso i

.

,

CONCLUSIONES

29

30

22

1

?

?

.

recurso algal. La exclusión de los recolectores humanos del sistema evidenció un fuerte incremento de la biomasa algal en una primera etapa, para luego decrecer drásticamente colocando en riesgo la disponibilidad del recurso algal, debido a l in c r emen to exp los ivo de la abundancia del molusco que ante la sobre oferta algal incremento su reclutamiento yconsumo

?

Tegula atra,

. ?

.

La exclusión de los herbivoros (recolectores humanos y del molusco

) del sistema, mostró variación temporal de la biomasa del alga . , representado por una función de tipo logístico, evidenciando que la población algal tiende a buscar su equilibrio por factores endógenos

Tegula a tr a

Ch chamissoi

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Correspondencia: CarlosBocanegraGarcía Av.TupacAmarú 409 ­Urb.LasQuintanas Trujillo Teléfono: 9392939 CorreoElectrónico: boquini6@hotmail.com

Experimentos de exclusión de herbivoros 9(1)2006

Desarrollo post embrionario de en condiciones de laboratorio

Platyxanthus orbignyi

Postembryonic development of in laboratory conditions

Platyxanthus orbignyi

Alfredo Gómez­Quezada , Luis Pollack­Velásquez , Florencio Ramírez­Cruz , Andrés Velásquez­Paz y Juan Rodríguez­Layza

1 1 1

1 2

RESUMEN

Palabras clave:

ABSTRACT

Keywords:

Para determinar el desarrollo post­ embrionario de en condiciones de laboratorio, se colectó hembras ovígeras de la playa de Puerto Morín, Provincia de Virú, Región La Libertad; las que fueron acondicionadas en un acuario con agua de mar filtrada. Las larvas recién eclosionadas se trasladaron a un acuario con sustrato de arena, con agua de mar filtrada, salinidad 33 o/oo, temperatura de 25 0.5º C y una densidad de 30 larvas por litro; alimentándose a las larvas con nauplios de . Se logró determinar 5 estadíos larvales, de los cuales 4 son de zoea y una magalopa antes de llegar a juvenil, con una duración de 38 días.

In order to determine the post embryonic development of in conditions of laboratory, ovigeras females were collected on the beach of Morin Port, province of Viru, La Libertad region. Those were prepared in an aquarium with sea water filtered. The larvae were feeding with nauplios of

. Were determined five stages, of which four are of zoea ah one of megalopa before arriving at youthful stage,with adurationof 38days.

Platyxanthus orbignyi

Artemia salina

Platyxanthus orbignyi

Artemia salina

desarrollo post­embionario

post­embryonic development

Platyxanthus orbignyi,

Platyxanthus orbignyi,

INTRODUCCIÓN

Platyxanthus orbignyi

P. orbignyi

“cangrejo violáceo”, es un crustáceo de la sección Brachyura, que se distribuye geográficamente desde el Ecuador a Chile ; especie de alto contenido proteico y muy utilizada en la alimentación humana, que en los últimos años ha sido sometida a una explotación comercial indiscriminada, ocasionando una disminución significativa de la población de esta especie.

En la li teratura existen estudios relacionados a su descripción morfológica, comportamiento y ecología del adulto , el contenido bacteriano del cefalotórax , la época de reproducción y fecundidad y a la biología y pesquería de , no existiendo trabajos referentes al desarrollo post embrionario.

Ante esta situación, a fin de incrementar el conocimiento de la biología reproductiva de los crustáceos marinos del mar peruano, que es

1,7

1

2

3

8

base en la que debe fundamentarse la utilización racional de todo recurso renovable, el laboratorio de biología de crustáceos de la Facultad de Ciencias Biológicas, ha realizado el presente estudio de investigación, cuyo objetivo fue determinar y describir en forma detallada los estadíos de desarrollo post embrionario de , “cangrejo violáceo”, en condiciones laboratorio.

Se colectaron hembras ovígeras de “cangrejo violáceo” de

la playa de Puerto Morín, Provincia de Virú, Región La Libertad, las que se trasladaron al laboratorio de biología de crustáceos de la Universidad Nacional de Trujillo, colocadas en un acuario para eclosión, con agua de mar filtrada y abundante aireación; se las alimentó con trozos de pescado. Diariamente se extraían 5 huevos de la masa ovígera de las hembras, para determinar el estado de

P. orbignyi

Platyxanthus orbignyi

MATERIALYMÉTODOS

91

Artículo original

1. Universidad Nacional de Trujillo. 2. Universidad Nacional Daniel Alcides Carrión (Oxapampa­Pasco).

ceptado el 1 de marzo 2006. Recibido 15 de setiembre 2005, a

9(1)2006

92

desarrollo embrionario; una vez eclosionados los huevos, las larvas (primera zoea) se les “sembró” en dos acuarios para crianza larval de 38 x 38 x 57 cm. de alto, ancho y largo respectivamente, con sustrato arenoso, en agua demar filtrada en piedra porosa, a unadensidad de 30 larvas / litro, con salinidad constante de 33 /oo a la temperatura a 25º C 0.5, y ventilación constante. Los cambios de agua se realizaron cada cinco días con agua de mar y se les alimento durante todo el desarrollo larval con nauplios recién eclosionadas de .

“cangrejo violáceo” desde la eclosión de los huevos hasta estadio juvenil, pasó por cuatro estadios de zoea y una megalopa, con una duración total de 38 días. A continuación se indica el tiempo de duración, longitud total y se describe las características diferenciales de cada uno de los estadios larvales.

(Fig1). Duración cinco días; longitud de 2,82 mm;

coloración pardo claro; Caparazón (A) desnudo, espina rostral y dorsal bien desarrollado con prominentes espinas laterales. Ojos compuesto grandes y sésiles (A) . Anténula (B) unirramosas , no segmentadas más o menos cónicas con aestatas y dos setas desnudas terminales. Antena (C) exopodito la mitad del proceso espinoso protopodial y con tres setas desnudas en su parte apical. Proceso protopodial con dos filas de espínulas desde la mitad hasta el final de la parte distal. Mandíbula (D) sin palpo, proceso molar más o menos subcilíndrico, levemente dentado y proceso incisivo con

o

A. salina

P. orbignyi

Los cambios de estadío se determinó, mediante observaciones diarias de las larvas en el microscopio y se conservaron cinco individuos de cada estadío en alcohol al 70 % para su disección y descripción posterior. Se disecaron dos larvas de cada estadío, utilizando un esterioscospio American Optical Forty y un Microscopio binocular Carl Zeiss Jena; se montaron los apéndices en glicerina. La descripción de los estadíos larvales se hizobasándose en la terminología de Mori (1991); Rodríguez Paula (1993). Los esquemas fueron hechos a escala y la longitud total de las larvas fue tomada desde la punta del rostro hasta la punta del telson, sin considerar las setas.

et al.,

RESULTADOS

Primera zoea

dientes cortantes.Maxílula (E) endopodito con dos segmentos, el proximal con una seta biplumosa; segmento distal con tres setas terminales y dos setas subterminales biplumosas; endito coxal con siete setas biplumosas; endito basal con cinco setas biplumosas y pubescentes en el margen lateral externo. Maxila (F) endopodito bifurcado con cuatro setas biplumosas terminales y dos setas biplumosas subrerminales; endito coxal bilolabado con fórmula setal 4+3, setas biplumosas marginales pubescentes en su margen lateral. endito basal bilobado con fórmula setal 4+3 setas biplumosas; escafognatito con cuatro setas maginales biplumosas y un proceso biplumoso posterior. Primer maxilípedo (G) basipodito alargado subcilídrico con 10 setas biplumosas, Fórmula setal: 2+2; 3+3 del proximal al distal; endopodito con cinco segmentos y 11 setas biplumosas, fórmula setal 2+2+1+2+4; exopodito con una constricción en su parte media y con cuatro setas largas biplumosas natatorias en su parte distal. Segundo maxilípedo (H) basipodito alargado sub cilíndrico con tres setas biplumosas, fórmula setal: 1+1+1; endopodito con tres segmentos y seis setas biplumosas, fórmula setal 1+1+4; exopodito medianamente constreñido y con cuatro setas largas biplumosas natatorias en su parte distal. Abdomen (A) con cinco somites, con espinas post laterales del segundo al quinto segmento abdominal. Telson (I) triangular, bifurcado, margen posterior cóncavo con tres pares de setas biplumosas, fórmula setal 3 + 3.

(Fig 2). Duración seis días; longitud de 3,56 mm;

coloración pardo claro Caparazón (A) desnudo; o jos compues tos grandes pedunculados. Antenula (B) con cuatro aestatas y una seta desnuda terminal. Antena (C) con menor número espinas en el proceso

Segunda zoea

Fig 1: Primera zoea de P. orbignyi.

GOMEZ, A.; et al. 9(1)2006

protopodial. Mandíbula (D). Maxílula (E) endopodito con dos segmentos, el proximal con una seta biplumosa; segmento distal con cuatro setas terminales y dos setas subterninales biplumosas; endito coxal con siete setas biplumosas; endito basal con siete setas terminales biplumosas y una seta biplumosa lateral Maxila (F) endopodito bifurcado con cuatro setas biplumosas terminales y tres setas bip lumosas subrerminales; endito coxal lobado con fórmula setal 4+4; endito basal lobado con fórmula setal 4+5; escafognatito con 13 setas biplumosas laterales. Primer maxilípedo (G) exopodito con dos segmentos y con seis setas largas biplumosas natatorias en su parte distal. Segundo maxilípedo (H) basipodito alargado sub cilíndrico con cuatro setas biplumosas, fórmula setal: 1+1+1+1; exopodito con dos ganchitos y con seis setas largas biplumosas natatorias en su parte distal. Telson (I) con una espina en cada lado delmargen lateral.

Fig 2. Segunda zoea de P. orbignyi.

Tercera zoea (Fig 3). Duración siete días; longitud de 5,35 mm;

coloración pardo claro. Caparazón (A) desnudo. Anténulas (B). Antena (C) aparición del endopodito, no segmentado que alcanza un cuarto del tamaño del proceso protopodial; exopodito y proceso protopodial similar a la segunda zoea. Mandíbulas (D). Maxílula (E) endito coxal con ochosetasbiplumosas; endito basal con nueve setas terminales biplumosas y una seta biplumosa lateral. Maxila (F) endito coxal bilolabado con fórmula setal 5+5 setas biplumosas; endito basal lobado con fórmula setal 5+5; escafognatito con 25 setas biplumosas laterales. Primer maxilípedo (G) basipodito alargado subcilídrico con nueve setas biplumosas, fórmula setal 2+1+3+3, del proximal al distal; endopodito con 5 segmentos y 12 setas biplumosas, fórmula setal 2+2+1+2+5. Segundo maxilípedo (H). Primer periópodo (3I) pequeño con una insinuación de una quela. Segundo, tercer, cuarto, y quinto periópodos (J, K, L, y M) pequeños con insinuación de segmentación con dos constricciones que aparentan tres segmentos. Abdomen (A). Telson (N) con la adición de un par de setas simples pequeñas en la parte central delmargen posterior.

93

Experimentos de exclusión de herbivoros 9(1)2006

Cuarta zoea (Fig 4). Duración 12 días; longitud de 6,60 mm;

Caparazón (A) con aparición de espina rostral más corta. Anténula (B) con 17 aestatas, aparición de la rama interna como pequeño mamelón y dos setas setas simples en su parte apical.Antena (C) endopodito con insinuación de segmentación de igual tamaño ymás grueso que el proceso protopodial y exopodito juntos Mandíbula (D) con aparición del palpo como un pequeño mamelón. Maxilula (E) endito coxal con nueve setas biplumosas; endito basal con 14 setas terminales biplumosas y una seta biplumosa lateral. Maxila (F) con endito coxal bilolabado con setas biplumosas y con fórmula setal 7+4; endito basal bilobado con fórmula setal 6+7; escafognatito con 40 setas biplumosas laterales. Primer maxilípedo (G) endopodito con cinco segmentos y 10 setas biplumosas, fórmula setal 1+1+1+2+5; exopodito con dos segmentos y siete setas natatorias en su parte distal. Segundo maxilípedo (H) endopodito con tres segmentos y cinco setas biplumosas, fórmula setal 1+0+4; exopodito con dos segmentos siete setas largas biplumosas natatorias en su parte distal y tres más cortas en su borde lateral. Tercer maxilípedo (I) es pequeño birramoso con insinuación de segmentación Periópodos el primer periópodo segmentado y quelado (J); segundo tercero cuarto y quinto periópodos (K, L,MyN) desarrollados con insinuación de cinco segmentos. Abdomen (A) con seis segmentos. Pleópodos: enxopodito del primero al cuarto (O, P, Q, R) con bordes sinuosos y endopoditos pequeños; quinto pleópodo (S) tiene la forma de mamelón. Urópodo como un pequeño mamelón. Telson (T) con dos pares de setas pequeñas biplumosas, en la parte central del margen posterior.

Fig 4. Cuar ta zoea de P. orbignyi

Megalopa (Fig 5). Duración ocho días; longitud total de 8,26

mm. color marrón rojizo. Caparazón (A) es superficie lisa y forma rectangular, más largo que ancho, región frontal ancha, sin las espinas rostrales, dorsales laterales. Anténula (B) con tres segmentos, el segundo con dos setas, el tercer segmento con un seta; endopodito con tres setas simples; exopodito con cuatro segmentos, 15 aestatas y dos setas simples terminales. Antena (C) pedúnculo con tres segmentos, fórmula sestal 2+1+1 de setas simples y flagelos de seis segmentos, fórmula setal

94

9(1)2006 GOMEZ, A.; et al.

0+0+4+0+0+4 de setas simples. Mandíbula (D) con palpo de tres segmentos con 14 setas biplumosas en el segmento terminal; proceso incisivo formando un ángulo cortante. Maxilula (E) endopodito con dos segmentos, fórmula setal 1+6; endito coxal con 11 setas biplumosas; endito basal con 15 setas biplumosas terminales y una seta biplumosa lateral. Maxila (F) endopodito pequeño con cinco setas biplumosas; endito coxal bilobado, fórmula setal 11+6; endito basal bilobado, fórmula setal 8+7; escafognatito con 53 setas biplumosas laterales. Primer maxilípedo (G) con epipodito con seis setas simples marginales; exopodito con dos segmentos y cinco setas biplumosas en el segmento distal y dos setas biplumosas sobre el segmento proximal; endopodito no segmentado con 13 setas simples; endito basal con 16 setas simples; endito coxal con seis setas simples. Segundo maxilípedo (H) epipodito pequeño con una seta simple terminal; exopodito con dos segmentos y cuatro setas biplumosas en el segmento proximal; endopodito con cuatro segmentos, fórmula setal 6+2+6+7 setas simples. Tercer maxilípedo (I) con epipodito con 35 setas simples distribuidas en todo su borde; exopodito con dos segmentos con cinco setas biplumosas en el segmento distal y cuatro setas simples en el segmento proximal; endopodito con cinco segmentos, fórmula setal 13+11+6+7+8 del proximal al distal con 15 setas simples. Periópodos: del primero al tercero (J, L y K). son desarrollados con cinco segmentos con dáctilo alargado, curvados y terminados en punta. Abdomen (A) con seis segmentos. Pleópodos: desarrollados con exopoditos de 15 a 21 setas biplumosas natatorias en todo sus bordes; segundo pleópodo (M) y cuarto pleópodo (N) con endopoditos unisegmentados con cinco ganchos curvados en su parte distal. Urópodo (O) sin endopodito y con 12 setas biplumosas natatorias en el segmento distal. Telson (P) truncado, más ancho que largo, margen posterior con tres setas pequeñasbiplumosas.

95

Experimentos de exclusión de herbivoros 9(1)2006

Fig 5: Megalopa de P. orbignyi.

DISCUSIÓN

El número de estadios larvales (cuatro zoeas y una megalopa) de desarrollo post embrionario de , encontradas en el presente trabajo, coinciden con lo reportado para y para

por que presenta igual número de estadios larvales.

La zoea I del desarrollo post embrionario de se caracteriza por presentar ojos

sésiles, carecer del tercer maxilípedo, de periópodos y pleópodos; en cambio la zoea II presenta ojos pedunculados y con una espina en cada lado del margen lateral del telson. La zoea III se caracteriza por la aparición del endopodito en la antena con pleópodos en forma de mamelones; los periópodos con insinuación de segmentación y aparición de un par de setas simples entre los tres pares de setas biplumosas del borde posterior del telson. La zoea IV presenta reducción de la espina rostral del caparazón, aparición de la rama interna de la anténula como un pequeño mamelón, el desarrollo del exopodito de la antena con insinuación de segmentación, aparición del tercer maxilípedo birramoso con insinuación de segmentación, periópodos desarrollados con insinuación de segmentación, pleópodos birrámeos desarrollados; el telson con dos pares de setas biplumosas en la parte central, de los tres pares de setas del borde posterior. La megalopa se caracteriza por la desaparición de las espinas rostral y posterior. El caparazón mas largo que ancho, periópodos y pleópodos desarrollados, abdomen corto y ligeramente

Platyxanthus orbignyi

Zebrida adansii Panopeus africanus

P. orbignyi

4

6

curvado hacia abajo, telson truncado más largo ancho y pleópodos desarrollados con exopoditos con 3 setas biplumosas. Estos resultados no son posibles compararlos con Mori y Rodríguez & Jones quienes describen el desarrollo larval de , y

respectivamente, por que la aparición sucesiva de los apéndices y número de sus setas, de los diferentes estadios larvales difieren de la especie estudiada en la presente investigación.

Por lo que la presente investigación, es la primera determinación y descripción de los estadíos larvales de , faltando realizar una muda para convertirse en juvenil; lo cual coincide con Mori y Rodríguez & Paula quienes reportan una megalopa para

, y (Brachura) respectivamente; ambas especies también criadas en condiciones de laboratorio.

El tiempo de duración de desarrollo post­ embrionario de fue de38 días. Se identificaron cuatro estadios larvales de zoea y unamegalopa. Las características de las larvas son similares a las de otras especies Brachuyura, presentando diferencias en la forma, setación y aparición sucesiva de los apéndices.

et al Z. adamsii P.

africanus,

P orbignyi

et al Z.

a damsii P a fr ica nus

P orbignyi

4 5

4

6

CONCLUSIONES

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•

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,

P la tyxanthus orbignyi

Platyxanthus orbignyi .

Platyxanthus orbignyi

Zebrida adamsii

96

9(1)2006 GOMEZ, A.; et al.

304. 3. Rodríguez A, Jones D. Larval development of

(Eydoux, 1985) (Decapoda: Ocypodidae) reared in the laboratory. J Crust Biol 1993;13(2): 309­321.

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Uca tangeri

Panopeus africanus

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Correspondencia: Luis PollackVelasquez Mz.A Lt. 29Urb.Trupal ­Trujillo Teléfono: (044) 9604775 CorreoElectrónico: 1pollack@pq.unitru.edu.pe

P la tyxanthus orbignyi

4574

Experimentos de exclusión de herbivoros 9(1)2006

Efecto de la luz y los reguladores del crecimiento en la inducción de callos enhojas de var. Italia Vitis vinifera Light effect and growth regulators in the calluses induction in

var. Italia leaves Vitis vinefora

Julio Chico­Ruíz ; Lisi Cerna­Rebaza ; Betty Valentin­ Cochachin ; Rocío Pérez­ Benites , Carlos Condemarín­Montealegre

1 2 2

2 2

RESUMEN

embriogénesis somática indirecta

inducción de callos

ABSTRACT

La vid, es un cultivo de gran importancia económica e industrial en nuestro país. Comúnmente es propagada por esquejes para establecer una plantación clonal, con los inconvenientes de su sanidad y subaja producción. Por eso es necesario sanearlas y luego propagarlasmasivamente por vía asexual, y una alternativa es la ; para ello es necesario, primero, establecer un protocolo para la inducción de callos que nos permita, posteriormente, una propagación en serie de callos y finalmente la obtención de los embriones somáticos. En esta oportunidad iniciamos varios ensayos para establecer unprotocolo de y a la vez queobservamos algunos aspectosde sumorfogénesis.

Se iniciaron los ensayos, para la inducción de callos, a partir de las hojas, evaluando para ello el efecto de la luzy de los reguladores del crecimiento:ANA,BAPy2,4.D .

Para el cultivo se utilizó elmedio basal deMurashige y Skoog (MS, 1962 ); el cual fue reducido a lamitad de su concentración, (MS1/2 ), éste a su vez fue suplementado con vitaminas, sacarosa (3%), fitagel ( 0.3%), y reguladores de crecimiento a concentracionesque variaron de 1y 5 uM. El pH se estableció entre 5.5 y 6.0.

Se concluye que el 2,4­D (5 uM) es un eficiente inductor de callos a los 15 días en presencia o en ausencia de luz. Las concentraciones de ANA y BAP (5 uM) en ausencia de luz, inducen la formación de raíces (organogénesis) en callos de .La luz presenta un efecto variable sobre la inducciónde callos.

The cultivation of grapevine, , are great economic and industrial important in our country. Commonly it is propagated by rootstock for establish a clonal plantation,with disdvantages of his healthwhich decreases its production. For that reason it is necessary to adjust them and soon to propagate themmassively by asexual route, and an alternative is the indirect somatic embryogenesis, for it necessary to establish a protocol for the induction of callus. With this study to wish for simultaneously to establishing conditions that can allow a propagation in series of calluses and examinedyourmorphogenesis.Wehas initiated a series of experiments that improved the development of protocols for the induction of calluses from the leaves, evaluating for it the effect of the light and plant growth regulators: NAA(naphthaleneacetic acid), BAP(6­benzylaminopurine) and 2,4­ D(2,4­dichlorophenoxyacetic acid). For the culture the nutritivemediumofMurashige Skoogwere used (MS, 1962)): wich was reduced to half of its concentration, (MS ½) at these supplemented with vitamins, sucrose (3%), phytagel (0,3%), and regulators of growth to 1 ­5 uM. The pH settled down between 5,5 6.0We concluded that 2,4­D (5uM) is an efficient inductor of calluses to the 15 days in both the dark and the light regimes. The concentration ofNAAandBAP(5uM) induce in darkness the formation by roots (organogenesis) in calluses of . Effect light is variable.

Vitis vinifera

in vitro

V. vinífera

Vitis vinifera

in vitro

Vitis vinifera

,

Palabras clave

Keywords

: ,micropropagación, reguladores del crecimiento, luz

: ,micropropagation, growth regulator, light

Vitis vinifera

Vitis vinifera

99

Artículo original

1. Laboratorio de Fisiología y Cultivo de Tejidos Vegetales. Departamento de Ciencias Biológicas ­ UNT. 2. Asistentes de investigation de la UNT.

ceptado 19 de mayo 2006. Recibido 24 de octubre 2005, a

9(1)2006

100

INTRODUCCION

Vitis vinifera

in vitro

in vitro in vitro

La vid, es un cultivo de gran importancia económica e industrial en muchas regiones templadas de América. Es originaria de las regiones cercanas de los mares Negro y Caspio, enAsia Menor. Esta especie fue traída al Perú desde México en los siglos XVII y XVIII y su adaptabilidad permitió que sea el frutal más industrializado y vendido en nuestro país, siendo Ica el mayor productor a nivel nacional . Comúnmente la vid es propagada por esquejes para establecer una plantación clonal, resultando un incremento en la uniformidad y producción pero, lamentablemente los virus, bacterias y otros microorganismos son transmitidos en este tipo de propagación mermando, además de las mutaciones que en ellas pueden ocurrir con el tiempo, la producción de los viñedos. Por eso es necesario sanearlas y luego propagarlas masivamente. También la productividad de la vid puede ser incrementada a través de un programa de mejoramiento, pero ello es difícil y a la vez consume tiempo por su complejidad y larga fase juvenil .

Los métodos de selección y mejora vegetal se han visto fuertemente potenciados con la utilización del cultivo , tecnología que muestra su mejor campo de aplicación no solo en la obtención de clones fijos, tolerantes a diferentes agentes ambientales y productivos, sino también en los estudios bioquímicos y genéticos en plantas. Una de estas técnicas de cultivo es la inducción de callos .

La producción de callos es utilizada en la actualidad con fines tanto comerciales como de investigación mediante tecnología aplicada para la micropropagación, embriogénesis somática, eliminación de virus, recuperación de embriones, producción de haploides, manipulación de la ploidía, a lm a c enam i e n t o y t r a n s po r t e d e l germoplasma, etc. El proceso de inducción de callos se origina a partir del aislamiento de órganos o tejidos diferenciados, los cuales posteriormente son llevados a una desdiferenciación celular, presentando estas células una proliferación continua acelerada y de apariencia desorganizada, que da origen a una masa amorfa de tejido. Esta masa celular puede presentar diferentes tipos morfológicos, los cuales varían según la apariencia externa,

,

1,2,3

4,5

6

textura y composición celular. Durante el proceso de diferenciación, cada punto activo de crecimiento puede producir una plántula y consecuentemente un callo puede regenerar muchas plantas. Esto da ventaja para aislar los diferentes vástagos o plántulas del callo en orden de incrementar su eficiencia. También es posible obtener callos embriogénicos, o sea embriones somáticos. Los callos pueden ser iniciados de varios órganos de plantas: vástagos, peciolos, flores, frutos, pero las condiciones para un crecimiento saludable de un callo durante una serie de subcultivos no ha sido establecido aún, especialmente en

. Las fitohormonas cumplen un papel

importante en el proceso de inducción de callos. En general las auxinas más usadas en la iniciación y mantenimiento del cultivo de callos son el ácido indol­3­acético (AIA), ácido naftalenacético (ANA) y el ácido 2,4­ d i c l o r o f e n o x i a c é t i c o ( 2 , 4 ­D ) e n concentraciones que oscilan de 0.1 a 10 mg/L, encontrándose una concentración óptima del regulador para la inducción y mantenimiento del callo, según la especie. Las auxinas, como ANA y 2,4­D, estimulan la división de las células, promoviendo el desarrollo de los callos, no son sintetizadas por las plantas, no son fitohormonas y se les clasifica como reguladores del crecimiento vegetal .

Las citoquininas son clásicas hormonas estimuladores de la división y diferenciación celular que afectan una amplia gama de procesos de desarrollo de las plantas, entre las que cabe citar la iniciación del desarrollo del cloroplasto, el retraso de la senescencia, la movilización de nutrientes, la estimulación de la expansión de los cotiledones, así como la inducción de la formación de brotes en cultivo de tejidos vegetales Los efecto de las citoquininas son muy variables lo que indica que las citocininas pueden tener mecanismos de acción diferentes en los distintos tejidos. La estimulación de la citocinesis es una de las propiedades mas importantes permitiendo la proliferación celular en la inducción de callos vegetales .

En las plantas superiores, el desarrollo, además,está regulado por factores ambientales y genéticos. Bajo condiciones naturales, uno de los factores más importantes es la luz. Esta regula la continua organización, movilización, utilización y expansión del crecimiento. De la

Vitis 7.8.9.10

8,11,12

12,13

CHICO,J.; et al. 9(1)2006

captura de los fotones por los vegetales, se der ivan t res tipos de efectos: ( a) fotoenergéticos ­reacciones metabólicas o t r a n s f o r m a c i o n e s q u í m i c a s ­ ( b ) fotocibernéticos ­altera estructura para controlar el metabolismo, crecimiento y la diferenciación­ y (c) fotodestructivos ­a muy altas irradiancias­ .

El efecto de la luz sobre la formación de callos depende de la especie vegetal. La luz influye en el desarrollo a través del efecto del fototropismo, es decir controla el desarrollo estructural o morfogénesis. Este fenómeno está en relación con la regulación de los procesos de desarrollo por parte de las fitohormonas y los reguladores del crecimiento Las plantas poseen sistemas de percepción y respuesta a una amplia gama de estímulos externos, que regulan su metabolismo y desarrollo, y les permite optimizar su funcionamiento frente a las variadas condiciones ambientales. La luz es el estímulo que afecta más drásticamente el desa rro l lo del vegetal induciendo germinación, floración, desarrollo de las plántulas, del aparato fotosintético, producción de pigmentos, etc. Los mismos procesos, están sujetos a la regulación hormonal interna que puede desencadenar respuestas idénticas a las inducidas por la luz

Algunas experiencias sobre el tema pueden ser comentadas como los realizados en explantes de epicótilo, hoja, brotes y cotiledones de seis especies de sp., siendo en las hojas donde se obtuvo altos porcentajes de callos (84%). También se pudo inducir callos en brotes apicales de

siendo el mayor número de callos en la oscuridad, cuyo medio contenía 2,4­D (20­80 uM).Además se obtuvo callos a partir de meristemos caulinares de maíz, utilizando como sustancia inductora el 2,4­D a concentración de 9 uM, y la formación del callo es debido a un desarrollo hipertrófico por acción del 2,4.D en una fase específica del desarrollo. En hipocótilo de

se utilizó la combinaciónANA(0,1 mgL ) y 0,1 mgL de BAP produciendo una limitada cantidad de callos con diámetros menores de 0,5 cm. Y, por último, se pudo inducir callos en peciolos de , con luz continua y ANA (1 mg/l) y usando brotes axilares se obtuvo callos con BAP (10 10

14,15

­1 ­1

­7 ­6

in vitro

.

Helianthus

Heliconia

Eucalyptus urophylla

Vitis

,

13, 16

M) . En esta investigación damos a conocer el

efecto de la luz y los reguladores del crecimiento: ANA, BAP y 2,4.D en la inducción de callos a partir de hojas jóvenes de vid.

Las hojas jóvenes de var. italia, donadoras de explantes para el cultivo , se recolectaron del campo experimental del laboratorio de Fisiología y Cultivo de Tejidos Vegetales de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo (Trujillo, Perú). Estas presentaron aproximadamente 1.22 dm de área foliar y 20 días de edad. Para el cultivo se preparó el medio

nutritivo deMurashige y Skoog (MS, 1962 ); reducido a la mitad de su concentración, ( MS, 1/2 ), cuya composición es una mezcla de micro y macronutrientes, éste a su vez fue suplementado con vitaminas, sacarosa (3%), fitagel ( 0.3% ), y reguladores de crecimiento. El pHse estableció entre 5.5y 6.0 . Posteriormente el medio sólido, contenido

en frascos de penicilina y sellados con papel de aluminio, se autoclavó a 1 atmósfera de presión por treintaminutos. La introducción de los explantes se realizó

en la cámara de siembra en condiciones asépticas. Para ello las hojas previamente fueron lavados con detergente y agua de caño. Al interior de la cámara, las hojas se desinfectaron con alcohol etílico al 70% durante 30 segundos y con hipoclorito de sodio al 2% por 3 minutos, al término del cual se enjuagó con agua estéril por tres veces. Los explantes se cortaron en secciones aproximadas de0.5cmpor lado. Los tratamientos fueron los siguientes:

Los tratamientos fueron separados en dos grupos, un grupo (A) fue colocado en los anaqueles de incubación donde recibieron iluminación artificial ( luz blanca de fluorescente, 40 W) y fotoperiodo de 16:8 y a

5,9,17,18,19

2

20

MATERIALYMETODOS

V. vinifera in vitro

in vitro

T (2,4­D: 1uM) T ( 2,4­D: 5uM) T (ANA: 1uM) T (ANA: 5uM) T (BAP: 1uM) T (BAP: 5uM )

1

2

3

4

5

6

101

Efecto de la luz y los reguladores 9(1)2006

una temperatura de 20 ±2 Cy el otro grupo (B) estuvo en ausencia de luz y a una temperatura de 20 ± 2 C. El tiempo de incubación para ambos grupos fue de 45 días. Se realizaron tres repeticiones para cada tratamiento y grupo, y con un tamaño de muestra heterogénea de 118 a 140 explantes para cada tratamiento. Los frascos se rotularon con fecha y tratamiento para su respectiva evaluación que se realizó cada 15 días.

Se realizaronmétodos estadísticos como el ANAVA, test de contingencia (prueba del Chi2) y prueba deDuncan, siendo las variables que se analizaron diámetro, peso, color, tipo, presencia de callos en la luz y oscuridad.

En presencia de luz, el 2,4­D pudo inducir callos en hojas de a los 15 días (32%)cuando la concentración es de 5µM(T2) y a los 45 días ambas concentraciones de 2,4­D (T1 yT2) han inducidos callos en 45%y 53%, respectivamente, de explantes introducidos.El regulador del crecimientoANArecién a los 30 días comienza a inducir callos. Así, (T3) comienza induciendo un 30%y termina con un 57%; y T4 a los 45 días sólo ha inducido callos en el 32% de los explantes. El BAP no pudo inducir callos. En este caso el análisis de varianza para los callos inducidos nos indica que hay diferencias significativas entre los tratamientos a los 45 días.(Tabla 1, Fig. 3 y 5).

En lo que respecta al peso de los callos, cuando se utiliza 2.4­Dcomo inductor, el peso de los callos va disminuyendo con el tiempo, y con ANA el peso de los mismos es variable (Tabla 1).

Para el diámetro de los callos, sus medidas van en aumento para todos los tratamientos, siendo el más alto, 8 mm, con T2 (2,4­D, 5 M)

En ausencia de luz, los callos inducidos en mayor porcentaje (64%) fue con el tratamiento T2 (2,4­D, 5µM), pero en este caso los callos aparecen a los 15 días en ambos tratamientos con 2,4­D. En cambio al utilizar ANA y BAP los callos recién aparecen a los 30 días; T4 (5 M) induce callos en un 57%, mucho más queT3 (45%). Resultados similares se observa con BAP, siendo la más alta concentración

o

o

RESULTADOS

V. vinifera

µ

µ

(5 M) la que induce un mayor porcentaje de callos (47%).Nohay diferencias significativas cuando el tratamiento es con 2,4­D, pero si hay diferencias con los demás tratamientos, al evaluar los datos enANAVA (p< 0.01). (Tabla 2, Fig. 4 y6).

Con el peso de los callos, estos van disminuyendo con el tiempo, para el 2,4­D, similar cuando está frente a la luz. Como a los 30 días recién se observan callos con ANA y BAP, su peso aumenta en 15 días, salvo T5 cuyo peso disminuye de 0,088 mg (30 días) a 0,017 mg a los 45 días (Tabla 2). El diámetro de los callos aumenta con el tiempo de cultivo, siendo el diámetro mayor de 9 mm con T2 (5 M)yT1 (1 M) con 8mm.(Tabla 2).

Si se compara el efecto de la luz con la ausencia del mismo, vamos a encontrar que es en este último que se producen el mayor porcentaje de callos inducidos a los 15 días con los dos tratamientos de 2,4­D (T1= 23% y T2=23%) y también presentan los más altos porcentajes a los 45 días (T1=60%yT2=64%). Cuando se utiliza BAP sólo se observa presencia de callos cuando hay ausencia de luz y estos recién aparecen a los 30 días, con ambos tratamientos, T5 y T6, pero en este último se observa presencia de raíces, un caso de organogénesis (Tabla 2 y 4, Fig. 6). Al utilizar ANA para inducir callos, estos aparecen a los 30 días en oscuridad para ambos tratamientos(T3 y T4) y sus porcentajes de inducción, a los 45 días, son muchos mayores que cuando se utiliza BAP (T3=45% y T4=57%) y en T4 hay presencia de raíces, otro casodeorganogénesis (Tabla 2, Fig. 6). No se observa variación en los peso de los callos cuando están permanentemente frente a una fuente luminosa o cuando están au s en t e s de e l l a . En c amb io l o s diámetros de los callos son mayores en oscuridad, logrando lasmáximasmedidas para T1 y T2 . Esto se confirma al aplicar el análisis de varianza para el peso y diámetro de los callos(Tabla 2 y6). Con la prueba de Duncan se encontró que el d i áme t ro p r omed i o de l o s c a l l o s inducidos fuemayor en los tratamientos T1 y T2 (menor de 9mm.) en presencia de luz y o s c u r i d a d a l o s 4 5 d í a s e n

µ

µ µ

102

9(1)2006 CHICO,J.; et al.

comparación con los callos inducidos con los tratamientos T3, T4, T5 y T6 que presentaron un diámetro menor de 5 mm. Sin e m b a r g o n o h a y d i f e r e n c i a significativa entre los tratamientos al analizar el peso promedio de los callos, siendo que los tratamientos indujeron callos con un peso promedio de 0.02 mg a los 45 díasde haber sidoanalizados (Tabla 3). La inducción del crecimiento del callo en un medio de cultivo es lento, y solo una pequeña porción de células están en contacto con el medio observándose a los 15 días unencorvamiento en los bordes p o r efecto del tratamiento con reguladores d e l crecimiento. Los callos inducidos con ANA, BAP y 2,4­D presentan diferentes formas celulares: células alargadas y asimétricas, presentandopocos Cloroplastos en cuyo interior había presencia de almidón, esto se pudo observar a los 30 días (Fig. 1 y 2). Los callos no fueron homogéneos en color y textura, formándose regiones blanco nieve, crema, marrón y verde. Las

r e g i o n e s v e r d e s p e r m a n e c e n relativamente pequeñas y si la incubación sigue, el callo se vuelve crema o blanco. A s í tenemos que todos ellos se inician tomando un color blanco y así se mantienen hasta los 45 días,T yT (con luz) y T , T y T en ausencia de luz. En cambio los demás tratamientos cambian s u color a crema hasta tomar un color marrón final (Tabla 4). Sobre los tipos de callos, en todos los tratamientos se observaron callos del tipo friable y así se mantuvieron hasta los 45 días, siendo T el de mayor porcentaje, con luz y T y T en ausencia de luz; en cambio T (luz) T , T (oscuridad) presentan ademáscallos del tip o compacto. Además en ausencia de luz, T y T indujeron la formación de raíces (Tabla 4, Fig. 3,4,6,7,8). Para establecer si la luz intervino en la inducción de callos en hojas de se aplicó la pruebadeChi cuadrado (Tabla 5) de l a cu a l s e dedu ce que l a f ue n t e luminosa no es indispensable para inducir callos.

3 4

4 5 6

2

1 3

2 2 4

4 6

V. vinifera

Evaluación de los callos inducidos, cada 15 días, en hojas de var. italia, utilizando como inductoresANA,BAPy2,4­Dyen presencia de luz.

Vitis vinifera Tabla 1.

103

Efecto de la luz y los reguladores 9(1)2006

Edad 15 días 30 días 45 días

Tratamiento Nº de explante Peso promedio de callos

Diámetro promedio de callos

% total de callos

% total de callos

% total de callos

Peso promedio de callos

Peso promedio de callos

Diámetro promedio de callos

Diámetro promedio de callos

2,4 ­D ANABAP

µ M1,0 5,0 1,0 5,0 1,0 5,0

390 360 360 360 360 360

% 0 32 0 0 0 0

mg0

0.081 0 0 0 0

mg 0.0940 0.0173 0.0100 0 0 0

mm0 2 0 0 0 0

%225330 0 0 0

mm3 6 2 0 0 0

%45535732 0 0

mg 0.0278 0.0294 0.0240 0.0220 0 0

mm7 8 4 0 0 0

Evaluación de los callos inducidos, cada 15 días, en hojas de var. italia, utilizando como sustancias inductorasANA,BAPy2,4­Dyen ausencia de luz

Vitis vinifera .

Tabla 2.

Prueba de comparación múltiple deDuncan para el análisis de las variables diámetro y peso de los callos de hojas de var. italia según los tratamientos con ANA, BAP y 2,4­D en concentraciones de 1uM y5uM en presencia y ausencia de luz, a los45días.

Vitis vinifera Tabla 3.

LEYENDA:

104

9(1)2006 CHICO,J.; et al.

TRATAMIENTOS PESO PROMEDIO DE GALLOS

DIAMETRO PROMEDIO DE GALLOS

T1 T2 T3 T4 T5 T6

0.0278 0.0287 0.0338 0.1120 0.0545 0.0100

7.5 8.5 4.0 2.5 2.0 1.0

gr. m.m

TRATAMIENTOS

DIAMETRO

PESO

T2 T3 T5 T1 T4 T6

Edad 15 días 30 días 45 días

Tratamiento Nº de explante Peso Promedio de callos

Diámetro promedio de callos

% total de callos

% total de callos

% total de callos

Peso promedio de callos

Peso promedio de callos

Diámetro promedio de callos

Diámetro promedio de callos

2,4 ­D ANABAP

µ M

1,0 5,0 1,0 5,0 1,0 5,0

420 350 360 360 360 360

%

2323 0 0 0 0

mg

0.0081 0.0970 0 0 0 0

mg

0.09400 0.01710 0.01290 0.00950 0.08800 0.00753

mm

2 2 0 0 0 0

%

604822271725

mm

4 6 2 2 2 1

%

516445573547

mg

0.0278 0.0280 0.0196 0.0224 0.01700 .0218

Mm

8 9 4 5 3 2

Tipo y color de callos, según la edad, inducidos a par tir de hojas de var. italia, evaluados cada 15 días en presencia o en ausencia de luz.

Vitis vinifera Tabla 4.

105

Leyenda: B: callo blanco C: callo crema D: callo marrón

Prueba de Chi cuadrado para los callos inducidos en presencia o ausencia de luz. Los explantes procedieron de hojasde var. Italia Vitis vinifera

Tabla 5.

FACTOR CALLOS TOTAL

PRESENCIA DE CALLOS

Presencia de luz Ausencia de luz

Promedio de callos inducidos

Promedio de callos no inducidos

TOTAL

123

237

360

228

132

360

351

369

720

Hoja de con bordes cóncavos que indican el inicio del proceso de inducción de callos. La sustancia inductora es el 2,4­D(5 uM) en presencia de luz y a los 15 días de iniciado la experiencia

V. vinifera

.

Fig. 1. Célula con cloroplastos, procedente de un callo. Se determinó la presencia de almidón (a) utilizando lugol. 400x La sustancia inductora fué el 2,4­D (1 uM) a los 30días y en presencia de luz.

Fig. 2.

Efecto de la luz y los reguladores 9(1)2006

Tratamiento Color de Callo Observaciones

L U Z

P R E S E N C I A

T1 T2 T3 T4 T5 T6

Callo Compacto Callo Fr iable

L U Z

A U S E N C I A

15 Días 15 Días 15 Días

T1 T2 T3 T4 T5 T6

B B B B 0 0 B B B B B B

C B B B 0 0 C C B B B B

M C B B 0 0 MM C B B B

No se formó callos

No se formó callos

Formación de raíces

Formación de raíces

+ + + + 0 0 + + + + + +

­ + ­ ­ 0 0 ­ + ­ + ­ ­

106

Callos tipo friables inducidos con BAP(1 uM), 2,4­D (1 uM) yANA(1 uM) a los 30 días y en presencia de luz.

Fig. 3.

Callos fr iables inducidos con ANA (1 uM), 2,4­D (1 uM) y BAP (1 uM) a los 30 días y en ausencia de luz.

Fig. 4

Respuestas de los explantes cuando las sustancias inductor as est án a la concentración de 5 uM, a los 45 días y en presencia de luz. Sólo se forma callo con 2,4­D.

Fig. 5.

Respuestas de los explantes cuando las sustancias inductor a s est án a la concentración de 5 uM, a los 45 días y en ausencia de luz. Hay presencia de raíces cuando el tr atamiento es conANAyBAP.

Fig. 6.

Tipos de callos inducidos en hojas de var. italia utilizando ANA,

BAP y 2,4­D. Los resultados son a los 45 días en presencia de luz.

Vitis vinifera Fig. 7.

Tipos de callos inducidos en hojas de var. italia utilizando ANA,

BAP y 2,4­D. Los resultados se muestr an a los 45días en ausencia de luz.

Vitis vinifera Fig. 8.

DISCUSION

21

La inducción de un callo a partir de un explante está acompañada por una serie de cambio drásticos en el aspecto morfológico y en elmetabolismo celular, aunque la naturaleza precisa de la respuesta a las condiciones de cultivo que resulta influida tanto por la composición del medio nutritivo como por las características fisiológicas del tejido del explante. Una vez que se ha inducido el callo el mantenimiento de estas células se ven influenciadas por distintos cambios que se dan en fases del ciclo de crecimiento, estas fases son: de latencia, división celular, fase estacionaria .

El tamaño y forma del explante puede redundar en una falta de respuesta, siendo recomendable utilizar fragmentos de tejidos que contengan gran número de célula ( explante de ± 5.0 a 10 mm por lado), pues con

9(1)2006 CHICO,J.; et al.

107

ello se incrementa la posibilidad de éxito del cultivo . En esta experiencia las dimensiones promedio fueron 1 cm por lado y todos los explantes fueron inducidos a formar callos. (Fig. 1).

La formación del callo se inicia cuando las células del explante comienzan a crecer, tanto en número como en tamaño ; por efecto de los reguladores de crecimiento comoANA,BAPy 2,4­D, finalizando con el aumento al máximo de su masa celular, siendo las auxinas ANA y 2,4­D en concentraciones de 1 uM y 5 uM las que permiten una mayor proliferación celular, evidenciándose esto en el diámetro y peso promedio muy superior al ocasionada por las citocininas (Tabla 1, 2, 3).

El callo no puede ser mantenido por más de 10 semanas en el medio con 2,4­D porque toma un color marrón (observación personal) por la periferia del mismo, quizás debido a un estrés nutritivo. Se recuperan si son transferidos a unmedio basal fresco. Incluso la regeneración es exitosa si se incuba en oscuridad .

La frecuencia en la formación de callos no difiere inicialmente , las condiciones del cultivo en oscuridad fueron mas efectivos que en la condición de luz (Tabla 2), considerando el mantenimiento y futura proliferación del callo embriogénico .

Las auxinas, en esta experiencia, inducen la formación de callo en corto tiempo, siendo el 2,4.­D ( 5 uM ), en presencia y ausencia de luz, el que induce la formación de callos a tan solo 15 días de edad con un peso y diámetro promedios superiores en comparación con los otros tratamientos (Tabla 3A, 3B). Las auxinas, como el ANA y 2,4­D, promueven el desarrollo de los callos estimulando la división de las células. En el crecimiento inducido por las auxinas, el potencial hídrico semantiene no sólo más negativo que el de la solución circundante sino también más negativo que el de las secciones control. Esto se debe a que las paredes tratadas con auxina ceden con gran facil idad. Las auxinas provocan un ablandamiento o aflojamiento en la pared. Se piensa que estas enzimas rompen enlaces en los polisacáridos de la pared, permitiendo que las paredes se expandan con mayor facilidad .El 2,4­D estimula a las células a proliferar activamente y cesa la acumulación de almidón. Así el contenido de almidón por célula disminuye según la proliferación celular

8

8

18

22

16,23,24,25

avance, a la vez que este almidón se va degradando y d i f e r enc iándose de amiloplastos a proplastidios (Fig. 2). Las auxinas y citoquininas estimulan la proliferación de callos compactos verdes en contraste al callo friable blanquecino, suave, inducido con ACC (1­aminociclopropano­1­ acido carboxílico). La respuesta final es el alargamiento de células de ambos tipos y la energía requerida se genera durante la degradación del almidón .

No se observó lo mismo con ANA y BAP quizás porque estos reguladores son muy fotolábiles o que su absorción sea muy lenta, no se ha encontrado explicación porque a altas concentraciones (5 uM) no se hallan formando callos cuando el explante está expuesto a la luz (Tabla 1 y 3, fig. 5).

Las citocininas estimulan la división y la expansión celular. El crecimiento de los callos inducidos por citocininas como el ácido 6­bencilaminopurina se debe a la absorción de agua que estimula la expansión celular, ya que el peso seco de los tejidos no aumenta. La variabilidad de los efectos de la citocininas sugieren que estas pueden tener distintos mecanismos de acción en distintos tejidos; sin embargo, lo más sencillo sería que un efecto común fuera seguido por numerosos requerimientos secundarios que dependieron del estado biológico de las células blanco. Como en el caso de otras hormonas, para que se inicie la inducción del callo debe ocurrir amplificación del efecto inicial, porque las citocininas están presentes en bajísimas concentraciones en la hoja por lo cual se sospecha que el explante haya tenido una concentración más elevada de auxinas que de citoquininas y así la formación del callo ha sido rápida (fig. 3,4,5) .

La luz es uno de los factores ambientales más importantes quedesencadena procesos de desarrollo en la inducción de callos. No solamente la presencia de la luz es importante sino su calidad y a veces su cantidad y periodicidad, y algunas de estas respuestas son muy afectadas también por la temperatura, pues ambas permiten cambios en los niveles endógenos de varios reguladores del crecimiento. Muchas de las respuestas inducidas normalmente por la luz pueden simularse por la aplicación de hormonas apropiadas, generalmente auxinas o citoquininas . Esto explica porque la

26

12,14,27

28,29

Efecto de la luz y los reguladores 9(1)2006

inducción de callos se puede realizar en la luz y oscuridad lográndose un mayor número de callos en la oscuridad (Tabla 3 Ay 6), )Fig 9 y 10). Quizás el efecto de la luz sea a nivel de metabolismo, porqueun callo que es inducido a la luz y se deja crecer con esta fuente luminosa, a los 60 días, tiende a tomar un color rojo, que indica presencia de antocianinas, y no forma embriones somáticos (datos no publicados).

Además es necesario conocer que las lámparas fluorescentes, que emiten luz blanca, emiten principalmente en la región visible, pero tiene cierta energía en las bandas contiguas, ultravioleta e infrarroja, además es más eficiente (204 mW/W) por las respuestas de las plantas a esta fuente luminosa .

Los callos inducidos fueron reconocidos como formaciones de masas celulares amorfas de color blanco tanto en luz como en oscuridad, cambiando a un color amarillo a los 45 días quizás debido a una exposición prolongada de los callos a los tratamientos con reguladores del crecimiento . demostrándose que los factores como: el tiempo de exposición, la cantidad de espacios intercelulares, la diversidad celular presente en el tejido, la edad de esos cultivos y la composición de el medio influyen en la constitución del tejido (Tabla 5).

Estudios microscópicos han demostrado que los tejidos de tipo calloso generalmente son heterogéneos en su composición celular; es decir un mismo callo puede presentar varios tipos celulares (células redondas, alargadas, etc. (Fig 2), la coloración de este tejido también varía, aún derivando de la misma especie (se pueden presentar callos que carece de pigmentación, mientras otros pueden ser de diferentes tonos, verde, amarillo, café o rojo). El tipo o grado de pigmentación está marcadamente influenciado por factores nutricionales y ambientales y se manifiesta por la presencia de clorofila, caroteno, antocianinas, etc. . Callos inducidos con 2,4­ D fueron blanco pálidos desorganizados sin estructura en particular y no regenerables (Tabla 5).

Las formas del callo tanto friables como compactas, se diferencian observando la forma de agrupación de las células, produciéndose un mayor número de callos friables que de callos compactos (Tabla 5), fig, 9 y 10), la morfología del callo puede describirse como friable (aquella en la que las células están asociadas unas a otras de manera relativamente laxa) o

14

8,30

8,31

compacta (si las células se agregan más densamente). Los distintos tipos de callo pueden caracterizarse por la diferente composición de sus respectivas paredes, poseyendo los callos compactos una proporción mayor de pectinas y hemicelulosas que los friables. Sin embargo ambos tipos no suelen ser específicos de una especie determinada, sino intercambiables y dependientes de la composición del medio . Los callos descritos como compactos o nodulares pertenecen a la clasificación de tipo I por presentar estructuras pro­embriogénicas y los callo friables están considerados del tipo II por ser lisos y presentar una alta capacidad regenerativa en un período largo (fig. 3,4,5,6)

Los callos friables en cultivo, están formados de una variedad de células parenquimáticas altamente organizadas con propiedades de primordio de órgano (Tabla 5). En su mayoría están constituidos por masas de grandes células vacuolizadas, cubiertas de zonas superficiales de pequeñas células meristemáticas, que producen hacia dentro masa de callo y hacia fuera yemas de raíz o de tallo o embriones . Esto se observó al inducir los callos con los reguladores del crecimiento ANA y BAP a una concentración de 5 uM en ausencia de luz (fig. 6,7,8).

El 2,4­D induce callos a los 15 días a una concentración de 5 uM en presencia y ausencia de luz. Las altas concentraciones de ANA y BAP (5 uM) inducen en ausencia de luz la formación de raíces en callos de . La luz, en esta experiencia, nomuestra efecto en la inducción de los callos.

21,30,31

30,32

31

CONCLUSIONES

V. vinífera

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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M o l e n a a r J . I n d u c t i o n a n d

9(1)2006 CHICO,J.; et al.

111

Especies vegetales para el control de plagas y pestes de plantas y animales domésticos del departamento de La

Libertad, Perú, 2005 Vegetables species for control of domestic plants and mammals plagues from

La Libertad department, 2005

José Mostacero­León , Rosa A Ramírez­Vargas y Freddy R Mejía­Coico

1 1

1

RESUMEN

Palabras clave

ABSTRACT

Actualmente las actividades agropecuarias están acercándosemás a las ciencias básicas, como la botánica, a fin de encontrar alternativas técnico­científicas, limpias ybaratas que les permitan sudesarrollo e ir sentando las bases de una agricultura sustentable. Al respecto investigaciones de este tipo en nuestro país son muy escasas. Existe un desconocimientomuy generalizado sobre las bondades de las plantas, aún cuando hay publicaciones y programas específicos que buscan alternativas no químicas para controlar plagas que vienen promoviendo la utilizaciónde plantas conpropiedades biocidas para proteger los cultivos y animalesde lasmásdiversas plagas y pestes. Es así que investigaciones del departamento de Agricultura de los EE.UU. Reportan más de 1200 especies de plantas biocidas para el mundo, las cuales 300 se encuentran en el Perú. Esta problemáticamotivó la realización de este trabajo encaminado a inventariar la flora biocida del Perú, empezando por hacer el catálogo taxonómico (morfología, sinonimia vulgar y científica, fenología); determinar las características ecológicas (hábitat, distribución latitudinal, clima, suelo) y delimitar la fitogeografía de las comunidades vegetales y usos de las plantas biocidas que vegetan en el Departamento de laLibertad. Producto de ello se reporta 84 especies de plantas bioicidas para el Norte Peruano; las que están distribuidas en 20 ordenes, 32 familias y 64 géneros; siendo las Fabaceae con 11 géneros y 15 especies, las Solanaceae, con 7 géneros y 13 especies y lasAsteroideae con7génerosy8 especies las familiasmás representativas e importantes.

: PlantasBiocidas

At themoment the agricultural activities are coming closermore to the basic sciences, as the botany, in order to find alternative technician­scientific, clean and cheap that allow them their development and to go sitting down the bases of a sustainable agriculture. In this respect investigations of this type in our country are very scarce.Averywidespread ignorance exists about the kindness of the plants, stillwhen there are publications and specific programs that look for not chemical alternative to control plagues that you/they come promoting the use of plants with biocidas properties it pairs to protect the exops and animals of themost diverse plagues and pests. It is so investigations of theDepartment ofAgriculture ofUSAreportsmore than1200 species of biocidas plants around theworld,which300 are inPeru. This problemmotivated the realization of thisworkguided to inventory the biocida flora in Peru, beginning making the taxonomyc catalogue (morphology, synonymy vulgare and scientific, fenología); to determine the ecological characteristics (ecological growth, latitudinal distributation, climate, soil) and to define the phytogeography of communities and uses of the biocidas plants that vegetate in the Department La Libertad. Product of it is reported there are 84 species of bioicidas plants in the Northern; distributed in 20 order, 32 families and 64 genera; being the most representative and important families the Fabaceae with 11genera and 15 species, the Solanaceae,with 7 genera and13 species and theAsteroideaewith 7 generaand8 species

Key words: Plant Biocidas

Artículo original

1. Sección Botánica de la Facultad de Ciencias Biologicas. UNT. Trujillo. Perú

ceptado 26 de junio 2006. Recibido 18 de mayo 2006, a

9(1)2006

112

INTRODUCCIÓN

El problema derivado del uso y abuso de los plaguicidas, constituye una preocupación de suma importancia en los programas de conservación ambiental en todo el mundo. Ha sido demostrado que muchos agroquímicos poseen propiedades cancerígenas y producen deformaciones, que sus residuos pueden ser bioacumulados, y que han desarrollado resistencia al efecto de los plaguicidas usados para sucontrol . Ante esta indiscutible evidencia, surge la

pregunta: ¿Qué hacer entonces, para combatir las plagas y pestes....?. El reconocimiento de esos problemas ha llevado al hombre a buscar respuesta a tan importante inquietud y ya se cuenta con suficiente información y experiencia en el uso de tecnologías para enfrentarnos a la competencia que, día a día, libran las plagas y pestes para adueñarse de los alimentos que el hombre cultiva y animales que cría .

Se han descrito diversos métodos de poco impacto para combatir las plagas, desde el combate biológico clásico, con el uso de entomófagos, entomopatógenos, parasitoides, hasta técnicas que utilizan métodos autocidas (como el uso de feromonas y el de insectos esterizados que se liberan para que competir con las plagas y eviten su reproducción), trampas con atrayentes específicos, con cebos tóxicos o con ambos; variedades de plantas resistentes al ataque de ciertas plagas, novedosas medidas de cultivo y el uso de insecticidas específicos, entre otros . Sin embargo, la tendencia actual no es

utilizar uno de estos métodos en forma independiente; sino la estrategia de moda es el Combate Integrado de Plagas (CIP). Para algunos autores, esta estrategia se basa en el mejoramiento de los enemigos naturales establecidos, mediante prácticas de conservación . Otros la consideran como una técnica que incorpora la aplicación juiciosa de los métodos más eficientes para mantener las poblaciones de las plagas en niveles tolerables, utilizando coordinadamente múltiples técnicas , o bien, como la selección, la integración y la puesta en práctica de tácticas para el combate de plagas que permitan anticipar las consecuencias económicas, ecológicas y sociológicas que producen las plagas y otros autores han descrito el CIP

2,13,15,32

9,12,31

1,2,26

6

26

18

como “la combinación de métodos que permiten aún mantener la plaga en niveles bajos de densidad de población, entendiendo las interacciones de los componentes del agrosistema, para favorecer los factores naturales de mortalidad”. En sentido semejante, la Organización de la Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación (FAO), considera el CIP como “un enfoque ecológico multidisciplinario, al manejo de poblaciones de plagas, que utiliza variedad de tácticas de control compatibles en un solo sistemacoordinadopara elmanejo deplagas”. Véase que todas estas ideas coinciden en que

el propósito del CIPes disminuir la densidad de la plaga en niveles que no produzcan daño económico, en la necesidad de reducir el impacto ambiental producido en el combate de las plagas y, casi, explícitamente, en usar en forma muy racional y con sumo cuidado los plaguicidas, mediante una combinación de métodos y técnicas de combate de plagas para no atenerse, exclusivamente, a sólo uno de ellos . Desde luego que un programa de CIP

requiere de todo un equipo humano adecuadamente capacitado para que planifique, ejecute y evalué una campaña de tal naturaleza y envergadura. Esto nos lleva a exponer la idea según la cual el combate de plagas debe ser un programa que ejecute una organización técnica y que trascienda las fronteras de una finca en particular, una región y hasta un país, según sea el caso. Esta es la idea contraria a la ejecución de prácticas en el combate de plagas “chacra a chacra”, individualmente, metodología muy común en la actualidad. Pero..... ¿Es factible llevar a la práctica una

campaña de este tipo? Desde luego que la respuesta es afirmativa. Varios ejemplos desarrollados en otros países nos muestran tal factibilidad. Hoy en día las actividades agropecuarias

están tomando un acercamiento más estrecho con las ciencias básicas, como la botánica, a fin de encontrar alternativas técnico­científicas, como herramientas indispensables para el desarrollo de sus actividades, que permiten al hombre siempre buscar y contribuir al desarrollo de tecnologías limpias y baratas como medios para sentar las bases de una agricultura sustentable . Por ello la investigación desde el punto de

26

12

9(1)2006 MOSTACERO J.,et al.

113

vista botánico estuvo orientado a la búsqueda no sólo de plantas superiores sino también de plantas inferiores como recursos biocidas para constituir una tecnología más, que se sume al resto de tecnologías que considera el CIP en su afán de combatir con mayor eficiencia y eficacia las más diversas plagas y pestes que atacan tanto a las plantas cultivadas como animales domésticos que el hombre utiliza para obtención de sus alimentos . Investigaciones realizadas al respecto en

nuestro país son muy escasas, y lo que es más, existe un desconocimiento muy generalizado sobre las bondades de éstas especies, aún cuando hay publicaciones y programas específicos planteados por Gomero y la RAAA (Red Alternativa al Uso de Agroquímicos), que buscan alternativas no químicas para controlar plagas que vienen promoviendo la utilización de plantas con propiedades biocidas para proteger a los cultivos y animales de lasmásdiversas plagasy pestes. La gran diversidad vegetal con la que cuenta

el Perú comparada con la de otros países, da una clara ventaja competitiva y que la investigación de nuestra flora sobre este aspecto particular, pueda deparar hallazgos y resultados de especies vegetales con propiedades biocidas muy particulares, que permitan al CIP como metodología moderna, contar con recursos de primera línea para hacer frente a las más diversas plagas y pestes de la agricultura y ganadería hoy y en el futuro . El Departamento de Agricultura de los

EE.UU reporta más de 1200 especies de plantas biocidas para el mundo, de las cuales 300 se encuentran en el Perú . Esta problemática motivó la realización de esta investigación encaminada a inventariar a flora biocida del Perú, empezando por hacer el catálogo taxonómico (morfología, sinonimia vulgar y científica, fenología); determinar las características ecológicas (hábitat, distribución latitudinal y altitudinal, clima, suelo) y delimitar la fitogeografía de las comunidades vegetales y usos de las plantas biocidas que vegetanen elDepartamento de laLibertad.

: La investigación se ejecutó en las regiones

de Costa, Sierra y Selva (Selva Alta) hasta el límite que señala el curso del río Marañón, del

5,32

12

3,25

12,29

MATERIAL YMETODOS

Área de estudio

Departamento de La Libertad; abarcando un área desde los 07º02'21” L.S. (Longotea ­ Bolívar) en los límites con el Departamento de Amazonas y los 07º10'06” L.S. (Pacanga ­ Chepén) en los límites con los Departamentos de Lambayeque y Cajamarca, hasta los 08º27'15” L.S.(Huancaspata Patáz) en los límites con el Departamento de Huánuco y los 08º24'34” L.S.(Virú) en los límites con el Departamento de Ancash. Longitudinalmente abarcará la extensión comprendida entre los 76º58'30” L.O. (Ongón ­ Pataz) en los límites con el Departamento de San Martín hasta los 79º33'45” L.O. (Pacasmayo) en los límites con elOcéanoPacífico .

: La metodología incluyó en primer término

una amplia revisión y análisis de la información bibliográfica existente sobre plantas biocidas. Además del análisis de la información recopilada por los autores desde 1976 a la fecha. Luego se revisó y analizó la información del status taxonómico, distribución y demás datos registrados en el Herbarium Truxillense de la Universidad Nacional de Trujillo (HUT) y el Herbario de la Universidad Privada “AntenorOrrego” (HAO) de Trujillo, los que fueron visitados de acuerdo a un cronograma y en el lapso comprendido entre Enero ­Mayo del año 2005, es decir como un trabajo previo y en estrecha relación con las exploraciones botánicas programadas entre Abril ­ Octubre del año 2005. La información de los Herbarios así obtenida fué cotejada con la documentación disponible en la Base de Datos del Field Museum Of Natural History (DATBASE) y el Archivo de Registro de Especimenes Vegetales en el Missouri Botanical Garden (W TROPICOS: http://mobot.mobot.org./Pick/Search/pick.htm l.).

El material botánico colectado y posteriormente herborizado, se determinó taxonómicamente con la ayuda de Claves Botánicas y Monografías . El Catálogo de las Especies Vegetales Biocidas del Departamento de La Libertad se confeccionó en forma definitiva tomando en cuenta las colecciones durante las exploraciones, material registrado en los Herbarios visitados (HUT,HAO), información documentada en las más diversas fuentes bibliográficas nacionales

Toma dedatos

Análisis de los datos:

,

14

3

20,25,33

Especies vegetales para el control de plagas pestes 9(1)2006

114

y extranjeras y de la obtenida por agricultores y ganaderos de todas las zonas visitadas; catálogo que es presentado de acuerdo al SistemadeClasificación deEngler

La caracterización edafo­climática de las especies se determinó teniendo en cuenta la i n fo rmac i ón ob t en i da du ra n te l a s exploraciones, más los datos registrados en los Herbarios ya mencionados, los que fueron cotejados y estandarizados por los Mapas de Clasificación Climática y de Suelos del Perú, delMinisterio deAgricultura

Las características fitogeográficas de las especies fueron comparadas cualitativamente con el Sistema de Clasificación propuestos por Mostacero .

7.

16.

25 et al

RESULTADOS

Descr ipción bot án ica y ca r act er íst ica s agronómicas

PROPIEDADESAGROTECNICAS.

PROPIEDADESAGROTECNICAS

­ L. : “mi shqu ina” , “huaylulo”Hojasglabras normalmente de 7 ­ 10 pares de forma oblongo elípticas de 1 cm largoy0,50 cm. ancho; flores de 10 ­ 12 mm largo: fruto vaina de 2.5 cm largoy de12 ­ 14mm ancho; semillas de 3 5 por vaina ovoide­ elipsoidal, escarlata normalmente negra en base.

Semillas tóxicas que contienen alcaloide abrina que es mortal incluso para animales mayores Reportada como insecticida .

L. “cebolla” Planta herbácea con hojas fistulosas (huecas), muy cultivada por sus bulbos tun i cados . Exi s t en d ive r sa s fo rmas hortenses; éstos órganos subterráneos contienen una esencia sulfurada, picante (tiopropionaldehído), que al esparcirse por el a i r e c u a n d o s e l o s c o r t a o desmenuza, tiene las conocidas facultades l a c r i m ó g e n a s d e b i d o a q u e s e descomponen en el líquido lacrimal, dej ando en l i be r t ad muy pequeñas cantidades de ácido sulfúrico. Además c o n t i e n e s u s t a n c i a s q u e p o r descomposición fermentativa liberael é s t e r d e l á c i d o t i o su l f í n i c o , d e a c c i ó n b a c t e r i o s t á t i c a ( i n h i b i d o r a d e l crecimiento las bacterias ) . Cont iene esencia volátil y lacrimógena de diversos sulfuros, entre el los el disulfuro de alilpropilo y flavonas.

Bulbo que al ser macerado con ajos es un

Abr u s pr eca to r i u s

Alliumcepa

23.

12

­

potente insecticida contra ácaros, hongos, bacterias y previene la rancha .

L.: “ajo” Hierbaanual dehasta 40 cmaltura, posee u n bulbomacizo subterráneo integrado p o r v a r i o s g a j o s l l a m a d o s d i e n t e s , recubierto por una fina película que forma la cabeza del ajo, cuyas escamas están soldadas en un cuerpo sólido y carnoso, flores blancas y florecen en primavera y verano. Cultivado por sus bulbos que son utilizados como condimento. Contiene el glucósido sulfurado aliína, a partir del cual se forma por acción del fermento alinasa una esencia sulfurada (disulfuro de alilo) queda el olor característico que tiene.

Bulboque al sermacerado con cebolla es u n po t en t e i ns ec t i c i da con t r a áca r os , hongos, bacterias y previene la rancha .

Willd.:“marco”, “altamiza”, “amargo”, “marcju” Planta de fuerte aroma y sabor muy amargo; flores en capítulos amarillos dispuestos en racimos, fruto aquenio; hojas divididas bi y tripennadas, dentadas y por s u p a r t e i n t e r i o r p l a t e ada s ; t a l l o s rectos, acanaladosgrises;muycomún en l a costa peruana creciendo a lo largo de los caminosy cultivos. El zumode la planta e r a usado para la conse rvación de los cadáveres por los Antiguos Peruanos. Tam b i é n e n f u m i g a c i o n e s c o m o insecticida.

El extracto de las hojas controla plagas del m a í z e n e s p e c i a l l a s d e l g é n e r o

. R e p o r t a d a c o m o insecticida .

Arbol de 30 m a más, madera de color pardusca conolor a cumarina, hojas de 7­ 1 5 cm., en variedadesperuanas raramente de 15 ­ 2 5 d e f o rm a o v a d a ­ l a n c e o l a d a , ovada oblonga de 6 7 cm largoyde 2 ­3 c m ancho; inflorescencia de 4 cm largo semiglabra, fruto vaina redondeada en ambosextremosde 4,5 ­ 7 cm largoy1.5 c m a n cho , c a s t a ñ o b a s t an t e l u s t r os o , semillas solitarias raramente 2 semillas.

Toda la planta contiene cumarina . A l ca l o i d e t óx i c o con p r op i ed ad e s insecticidas .

12

12

1 2

28

2 5

20

­

­

­ (Al lem.) A.C . Smith “ishpingo”, “cumarú de cheiro”, “sandemático”.

A. sativum

Ambrosia per u vian a

PROPIEDADESAGROTECNICAS

PROPIEDADES AGROTECNICAS.

PROPIEDADESAGROTECNICAS.

S p o d o p t e r a

Ambu r a n a cea r en s is

MOSTACERO J., et al. 9(1)2006

115

­ Annona squamosa

Argemone mexicana

L.: “anona”. Árbol pequeñodeaproximadamente 10m.de a l t o ,

de fo l l a j e semicaduco , f l o re s muy aromát icas. El fruto se compone de numerosos carpelos unidos en un eje central suave, es de tamaño y forma variables, generalmente grande, globular, ovoide, cónico y con superficie lisa, tuberculada o mamilada; cada carpelo tiene una semilla de color negro brillante a c a f é oscuro, más o menos de 1 cm. de longitud, rodeada de una pulpa blanca, suave, dulce y de exquisito sabor. Se propagapor semillas y vegetativamente.

­ L.: “cardosanto“, “amapola mexicana”, “cardo amarrillo”, “carhuincha”, “carhuinchuca”. Planta anual de 0.40 ­ 1 m altura, tiene látex amarillento; flores solitarias, amarillas, grandes; frutos en cápsulas espinulosa, c o n s e m i l l a s n u m e r o s a s p a r d o ­ negruzcas de 2 m m l a r g o ; h o j a s p e n n a t i l o b a d a s , c o n l ó b u l o s e sp inosos , co n manchas b l anca s y cubiertas por un polvillo séreo; tallos h e r b á c e o , e r e c t o ; r a í z p i v o t a n t e ; propagación por medio de semillas; hábita en el interior de todos los campos cultivados; es resistente a la sequedad de los suelos.

­

Semillas irritantes y reducidas a polvo se utilizan como insecticidas .

Extracto de hojas controla plagas del “maíz” en especial las del género .

L.: ajenjo” Hierba perenne algo arbustiva de 0.5 ­1,20 m alto, blanco sedosa, hojas alternas, 5 ­15 cm largo, bi hasta tripinnati divididas en lóbulos oblongo obtusos, blanco pubescente en ambas caras ; i nf lo rescenc ias en cabezuelas de 3­4 mm diámetro agrupadas en panículas foliosas, receptáculo piloso; habita entre los cultivos ybordesde camino.

Se utiliza la planta fresca o seca, repelente de hormigas, pulgones, orugas ypiojos

­ L. “espárrago” “espárrago silvestre” Planta perenne, rizomatosa de 0.50­1.50m altura; flores solitarias, dioicas, pequeñas, campanuladas blanco­verdosas, fruto baya roja, globosa de 5­10 mm diámetro: hojas escamiformes, r eemplazada s en sus func iones por cladodios filiformes; tallo comprimido, con

PROPIEDADESAGROTECNICAS

PROPIEDADES AGROTECNICAS.

PROPIEDADESAGROTECNICAS.

23

12

12.

Spodoptera

Artemisia absintium

Aspa r agus officin a lis

hojas rudimentarias, de color verde que realizan la función clorofílica (fotosíntesis), cladodios; propagación por medio de semillas, rizomas: habita dentro de los campos, prefiere suelos sueltos y ricos.

Sus raíces cuando son suculentas secretan sustancias tóxicasparaciertos nemátodos .

­ Cav.: “garbancillo” Planta arbustiva, erectadesde 10 ­ 50 cm a l t o ; t a l l o robus to g l ab ro más o menos piloso; en partes altas su crecimiento es r educ ido l l egando muchas v ece s a arrastrarse; hojas con estípulas prominentes, hojas de 10 ­ 15 pares oblonga­elípticas, pilosas, emarginadas de 10 mm largo; flores de 10 mm de largo, de colores que van desde el amarillo al púrpura, cáliz piloso normalmente negro de 8mm largo, f ru to v a i n a o v o i d e o b l o n g a a l g o comprimida.

Sus semillas contienen sustancias tóxicas como l a cumar in a . I nsec t i c i da ba s t an t e tóxico .

­ (L) Koch: “ mostaza silvestre” “mostaza negra” “mostaza” Hierba anual, erecta de 0.70 ­ 1.20 m altura; flores amarillas, con cuatro pétalos e n cruz , inflo rescencia racimosa; f ruto silicua de 2 ­ 3 cm largo, adosada al tallo, con 8 semil las por lóculo, ovoides ; hojas pecioladas, verdeoscuras, pubescentes, l a s superiores casi enteras, dentadas; las inferiores lirado­pinatisectas con lóbulos laterales dentados; tallo erecto, herbáceo; r a í z pivotante, polimorfa ; propagación por medio de semillas; hábitat dentro de los campos d e c u l t i v o , p r e f i e r e s u e l o s sueltosy ricos.

Las raíces de esta especie del género secretan sustancias que si se

encuentran en cant idades suficientes neutralizan los brotes de larvas de ciertos nemátodos .

­ L: “nabo” Hierba erecta, de raíz gruesa, carnosa, en t a l l a a l segundo año alcanza 1 m al tura glauca, glabras o pilosas, hojas inferiores pinnatisectas, flores amarillas en racimos ebracteados, en su inflorescencia los pimpollos superan a las flores abiertas muycultivadas.

Reportada como nematicida .

Astragalus garbancillo

Bra ssica n igra

B.napus

PROPIEDADES AGROTECNICAS

PROPIEDADES AGROTECNICAS

PROPIEDADES AGROTECNICAS

PROPIEDADES AGROTECNICAS

4

2 5

12

4

4

Brassica

Especies vegetales para el control de plagas pestes 9(1)2006

116

­

Brugmansia sanguinea

Bursersa graveolens

Caesa lpin ia pu lcher r ima .

C. spinosa

B.napus var napo brassica Mill. “Colinabo” . Produce el nabicol que es la raíz hinchada y jugosa, junto con la basedel tallo.

Reportadacomonematicida

­ (R. & P.) D. Don “floripondio rojo”, “misha­maqui”, “puca campacho”. Arbusto o árbol con flores rojas que vive en la RegiónAndina, entre los 2400y 4000 m.s.n.m. en los departamentosde Piura, La Libe rtad y Ancash , sobre todo, donde frecuenta laderas, bordes de ríos, campos de cultivo y bordes de caminos. Cu l t ivado en el Perú como plan ta ornamental. Esmuyvenenoso. Sus flores y hojas tienen propiedades alucinógenas utilizadas en ceremonias de curandería y brujería.

De las hojas y flores secas se extraen alcaloides altamente tóxicos . Planta venenosa .

­ (H.B.K.)TRyPL.: “palo santo”Planta leñosa; de las partes secas de la costa y bajas de las vertientes occidentales del norte peruano fácilmente reconocibles por no presentar hojas. Especie arbustiva o arbórea, olorosa, de hasta 15 m. de alto, tronco grueso de 35 ­ 50 cm. de diámetro, botones purpuráceos; del bosque subxerofítico desde laCosta Norte peruana hacia el Ecuador. Frecuente en laderas a b i e r t a s , r o c o s a s , t e r r e n o s arenosos, quebradas rocosas, cerca de carreteras, donde crece entre los 55 ­ 1500 m.s.n.m. en los departamentos de Tumbes, Piura, Cajamarca, Lambayeque y La Libertad. Su corteza presenta resinas aromáticas y principios amargos, usado en fumigaciones.

La c o r t e za a s t i l l ad a con t i e ne una oleorresina volátil muy usada contra las termites .

­ (L) Swartz.: “penacho” Arbusto o arbolillo de flores rojas y e s t a m b r e s e s c a r l a t a d o s , h o j a s impresas subsésibles de6 ­ 12pares de forma o b l o n g a , d i s t r i b u i d a s e n c l i m a s cálidos creciendo en la costa norte del Perú, cultivada como ornamental, fruto vaina.

Las hojas contienen alcaloides tóxicos . Reportada como insecticida

­ (Molina ) Kuntze.: “tara” ,

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.

Capsicum frutescens

Cen tr osema plumier i .

Cestrumauriculatum .

Cicer arietinum

“taya” Pequeño árbol espinosode 8m. de alto y 25 cm. de diámetro, sus frutos secos son l e g u m b r e s , o b l o n g a s , s é s i l e s , ligeramente falciformes, comprimidas, de unos 8 cm.de longitud, indehiscentes, con e l exoca rp io l i so , ama r i l l o ­ ro j i zo , e l mesocarpio arenoso­esponjoso (muy rico e n proteínas) y alto contenido en taninos el q u e puede llegar hasta el 50%a60%, por l o que se usa comomaterial curtientede a l t a calidad.

De los frutos secos en decocción se extraen taninos con efectos astringentes sobre piojos, pulgones y cigarritas etc .

­ L.: “ají” P l a n t a h e r b á c e a c o n d i f e r e n t e s var iedades , ta l los d ico tómicos muy ramificados erguidos y cilíndricos de color verde claro a verde oscuro con nudos u n t a n t o h i n c h a d o s , f r u t o b a y a bacciforme.

Las paredes divisorias del fruto se maceran y t ienen efectos sobre los mosquillas, pulgones, cigarritas, gorgojos y mazorquero etc

­ (Turp.) Benth.: “chucho de burro” Hierba sufrutescente, volubles con hojas trifoliadas, flores con corola blanca­purpúrea o rojizo, fruto vaina glabrade formaoblonga de 10 ­ 15 cm.

La s semi l l as t óx i ca s par a pece s . Propiedadesparecidas a rotenona

­ L. (Herit).: “ h i e r v a s a n t a ” A r b u s t o d e l g a d o ramificadode unoovariosmetros dealto c o n flores terminales en panículas verde amarillentas, fruto carnoso negro, crece en la costa, sierra y selva hasta los 3,000 m.s.n.m. frecuente en lugares aledaños a ríos y riachuelos.

Hojas conpropiedadesdesinfectantes .

­ L.: “garbanzo” Arbusto de 30 ­ 40 cm alto; tallo ramoso, belloso; hojas pecioladas, alternas de 9­15 pares oblongo, elípticas ­ obtusas de 1 cm aproximadamente; f lores largas con pedicelo de 6 ­ 8mm largo, fruto vaina de 2 ­ 2.5 cmespesor.

Tallos y hojas son altamente venenosas . Reportada como tóxica .

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­ R. & P. “pareira” Bejuco leñoso del Brasil y Perú, frecuente en bosques primarios; cuya raíz se le utiliza por la accióndevarios a l c a l o i d e s : p e l o s i n a , c h o n d o d e n d r i n a , chondrodina, berberidina. Es componente del curare . Los indígenas de la Selva , preparan con esta especie un extracto venenoso, denso y oscuro denominado “ampi” o “curaré” con el cual untan las puntas de las flechas y dardos para matar enemigosy animales.

Raíces que contienen varios alcaloides t ó x i c o s , c om p o n e n t e s d e l c u r a r e (Mostacero & Cols., 2002). Sustancia insecticida: curare

­ H. & B. “mio­mio”. Especie subarbustiva con tallos y ramas débiles, extendido­recurvadas deunos3 m. de l a r g o , i n f l o r e s c e n c i a s p é n d u l a s , púrpuras; frutos púrpuras jugosos, que habita en losValles InterandinosyCeja de Selva; a l o l a r g o d e r í o s p e q u e ñ o s y arroyos, laderas abiertas y de arbustos, quebradas húmedas y bordes de carreteras ubicados entre los 8003700m.s.n.m. Los frutos s o n a g r a d a b l e s a l p a l a d a r p e r o narcóticos y aún tóxicos. Es un arbusto venenoso que mata los roedores con facilidad .

Reportada como insecticida

­ L . : “ chamico” , “datura”, “estramonio”, “yerba de brujo” Hierba anual de 0.80 ­ 1.50 m altura, erecta; f lores grandes, blanquecinas, tubulosas; fruto en cápsula cubierta de grandes espinas que se abre por cuatro valvas, semillas numerosas, reniformes, parduscas; hojas simples, groseramente dentadas , a l te rna s, pecio ladas ; ta l l o erecto, algo carnoso; ra íz pivotante ; propagación por medio de semil las ; hábitat comúnen los terrenosde cultivo.

Sus semil las , f lo res y hojas t ienen sustancias act ivas como la atropina , datur ina con efectos tóxicos contra mosquillas, pulgas, cigarras y gorgojos . Venenosoparaanimales .

­ ( L ) Wi l l d . : “arbasco”, “barbasconegro” Arbusto de 0 .30­ 1 .50mlargo; raíz leñosaygruesa tallo p o c o ramificado verde parduzco; hojas compuestas biparipinnadas flores pequeñas blancas

Chondodendron tomentosum .

Coriaria ruscifolia

Da tu r a s t r amon ium .

D e sma n t h u s v i r g a t u s .

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dispuestas en capítulos auxiliares paucifloras, pedunculadas fruto legumbre; frecuente en bordesde camposde cultivo.

Ba rba s co ; ven eno con p rop i edad e s insect icidas parecidas a la rotenona (Schery, 1956; Dajoz, 1978). Irritante, tóxica en fuertes dosis .

­ P l a n c h . : “barbasco”. Especie leñosa de amplia d i s t r i b u c i ó n en e l P e r ú , c omo en Ca j amarca , San Mar t í n , Amazonas , Loreto, Ucayali, Pasco y Junín. Las hojas trituradas se usanpara la pesca.

B a r b a s c o ; v en eno con p rop i e da de s insecticidas parecidas a la rotenona . Hojas tóxicas para peces .

­ Labil.: “eucalipto” Árbol que crece rápidamente alcanzandouna altura de 20 m, las primeras hojas de las ramas jóvenes son estrechas, ovales o acorazonadas, alternas y sin pecíolos, luego son reemplazadas por otras de forma ovoide. Contiene aceite esencial (eucaliptol 80 %), con cineol, taninos, ác idos : gál ico y elágico, principios amargos, resinas, ceras y una substancia bacteriostática.

Las ramas y hojas contienen sustancias activas como el eucaliptol con efectos tóxicos sobre el gusano de la papa, ciertos coleópteros y lepidópteros .

­ ( L . ) O . K u n t z e . : “contrayerba”, “mata gusano”. Hierba anual, ramosa, alcanza hasta 1m alto; inflorescencia en cabezuelas, de color amarillo, de aspecto compacto; fruto seco, negruzco, pequeño, aquenio sin papus; hojas s i m p l e s , o p u e s t a s s u b s é s i l e s , aserradas en el margen con tres nervaduras p r i n c i p a l e s , g l a b r a s ; t a l l o e r e c t o , s em i l e ñ o s o , c i l í n d r i c o , e s t r i a d o , r am i f i c a d o d i c o t óm i c amen t e ; r a í z pivotante; propagación por medio de semillas; habita dentro de los campos de cultivo, en bordede caminosy acequias.

Reportada como insecticida . ­ (L)Merr. “soya” Planta herbácea anualde tallos ramosos q u e a lcanza de 0,5 ­ 0.7 m al to; hojas pecioladas, alternas verde claro flores pedunculadas blanco rosado, reunidas en pequeños ramilletes axilares terminales, f ru to v a i n a g r u e s a , c o r t a , v e l l o s a , comprimida e indehiscente, cultivada para

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D i c t yo l om a p e r u v i a n u m

Eucalyptus globulus .

F l a ve r i a b i d e n t i s

Glycinemax

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Especies vegetales para el control de plagas pestes 9(1)2006

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consumohumano.

C o n t i e n e a c e i t e s e s e n c i a l e s c o n propiedadesinsecticidas .

­ L.: “catahua”, “habilla”, “patagua” Arbolmonoicode hasta20m. d e alto y de 60 ­ 90 cm. de diámetro, fácil d e determinar por sus cápsulas de 5por 10 c m . , c omp r im i d a s , mu l t i v a l v a d a s , muy lignificadas cuando maduras y cuando se exponen al sol violentamente se abren, partiéndose en numerosas valvas que contienen una sola semilla de color moreno­parduzco con ornamentaciones.

Reportada como insect icida . De la semilla se obtiene un aceite venenoso. Especie tóxica para elganado.

­ H.B.K. “barbasco” Especie arbórea con hojasmucronadasy flores a m a r i l l e n t a s q u e f r e c u e n t a l o s montes pluvifolios ubicados alrededor de l o s 650 m.s.n.m. en los departamentos de Cajamarca yAmazonas.

Verbasco con propiedades parecidas a rotenona .

L. “tomate” Originario del Perú ymuycultivado desde l a antigüedadpor sus frutos comestibles, q u e contienen vitaminas A, B , B , B y C; t ambién con t i enen sa le s mine ral e s : potasio, fósforo, sodio, magnesio, cobre, calcio, cloro, hierro y azufre, entre otros principios. Toda la planta contiene un potente alcaloide (solanina). El fruto, por e l contrario no contienemás que indicios d e l mismo (0.007%); la pulpadel fruto es r i c a en saponinas y contiene una sustancia colorante (l icopina) , caroteno, ácido málico, ácidos orgánicos, aceite graso e histamina.

L a s h o j a s c o n t i e n e n s u s t a n c i a s antisépticas e insecticidas contra a mosca blanca .

­ WaIp.: “maca” Especie bianual propia de los Andes. Crece por sobre los 3500 m.s.n.m. La raíz es c o m e s t i b l e y u n p o d e r o s o reconstituyente sexual. Se cultiva en la Sierra C e n t r a l d e l P e r ú , d o n d e s o n ampliamente utilizadas para aumentar la fertilidad, vitalidad y la capacidad mental; además refuerza el sistema inmunológico. S e

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Hura crepítans .

Jacquinia pubescens

Lycopersicon esculentum

Lepidiummeyenii

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c on sume f re s ca o p ro c e s ad a como suplemento n u t r i c i o n a l e n h a r i n a s ,

caramelos,mermeladas obebidas.

Reportada como insecticida .

­ L.: “chocho” Arbusto de 1­1.5 m alto, hojas impresas oblongas ­ lanceoladas, redondeadas­ obtusas a veces agudas las puntas, flores azules o blancas, fruto vaina de 8 cmlargo y 1 6 mm ancho, semillas negras o blancas.

Principios venenosos . Las semillas son altamente tóxicasque a n t e s de ser consumidas por el hombre tienen que ser lavadas varias veces, la primer agua usada se utiliza como insecticida contra mosquillas y pulgones

­ Killip. & Smith. “barbasco” Arbusto erecto que se vuelve u n gran bejuco, hojas ovadas­oblongas y pilosasde 10 ­ 31 cmde largoy6 ­ 16 cm. d e ancho, inflorescencia de 10 ­20 cm con l cáliz cilíndrico y campanulado, pétalos color violeta rojizos, vainas de 4 ­ 9 cm de largo y 2.5 ­ 3 cm ancho estas vainas son r e d o n d e a d a s y fuertementecomprimidas.

De sus raíces se extrae rotenona .Las ho j a s y tallo después de sermaceradas se extrae u n a s u s t a n c i a a c t i v a l l a m a d a comer c i a lmen t e r o t enona que t i en e efectos insecticidas sobre pulgas, insectos chupadores y mast icadores de hojas, actualmente este producto es ampliamente distribuido en ciertos países andinos .

­ (AubI.)DG.: “barbasco”, “cube” Arbusto que vegeta en zonas no inundadas y b osques p r ima r io s de l a Amazon i a peruana. De sus raíces se obtiene la “rotenona”. Losnativos lautilizan para pescar “embarbascando” el agua, aunque la pesca con “barbasco” u otros ictiotóxicos está vetado, ésta planta es todavía usada en otros lugares y debido a su inocuidad para el hombre y animales domésticos se le emplea para el control de plagas a g r í c o l a s y g a n a d e r a s . L o s Brasileños del Timbo usan 3 ppm para eliminar pirañas y sus huevos en 15 minutos.

Principio activo la rotenona .

­ A.C.Smith “barbasco” Planta leñosa de amplia distribución en los departamentosde SanMartín yLoreto.

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8,.9,12,.29

Lupinusmutabilis

Lonchoca rpus urucu .

e

L. nicou

L. utilis

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Principio activo la rotenona

L.: lantana”, “hierba de l a maestranza”. Especie arbustiva de unos 3 m . de alto, con flores rojas. Frecuenta zonas n o i n u n d a d a s y b o s q u e s secundarios. Su principio activo es la

, alcaloide soluble en agua y como tal es usado como sustituto de la quinina. Las hojas hervidas se usan para c a lma r e l e s c o zo r c au s ado po r e l sarampión y la viruela loca. Especie tóxica para elganado.

Con t ro la ec topa rá s i tos de ovej a s y ganado .

­ Cav. : “con toya” Espec ie he rbácea de la s Ver t i en te s Occidentales del Perú. La infusiónde la raíz es unpurgantedrástico y el látex se u s a c o m o cáustico.Contiene 4.10g. de lobelina por c a d a kg. de planta, por lo que se recomienda como insecticida. También es empleada contra los parásitos de los animales (“alicuyas”).

Contiene alcaloides dealto poder tóxico .

­ L.: “manzanilla”. E spec ie he rbácea, anua l con f l ore s blancas, originaria de Europa, Norte de Asia y naturalizada enAmérica.En las f l o r e s s e e n c u e n t r a n l o s h e t e r ó s i d o s f l av ón i cos : pa lu s t r i n a , q ue r ce to l y apigenina.

S u s f l o r e s t i e n e n p r o p i e d a d e s desinfectantes, fungidas contra la rancha, polvillo, carbón, roya y desinfección de semillas

­ L.: “cinamono” Arbol ramoso, vigoroso alcanza alturas de 6 ­ 8 m ; h o j a s c a d u c a s p e c i o l a d a s , pinnadas foliadas, ovales agudas enteras dentadas, verdeoscuro, brillantes por el haz y p á l i d o e l e n v é s ; f l o r e s p e qu e ñ a s pedunculadas, tubulosas, reunidas en ramilletes axilares lilas. Fruto lobuloso, carnoso, valioso, indehiscente, cultivada e n jardinería.

Produce fitoecsinoides o mímicos de la muda, p r o d u c i e n do i n d i v i d uo s p e q u e ño s , malformados, incapaces de reproducirse .

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­

lantanina

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Lantana camara

Lobel i a decu r r en s .

Matricaria recutita

Melia azederach

­ Griseb.: “muña”, “champcua”, “chancás” Planta herbácea de

1 ­ 2 m de alto, flores con corola blanca, pequeñas situadas en verticilos globosos ubicados en las axi las de las hojas superiores; fruto tetraquenio, hojas verdes pecioladas, elípticas, lanceoladas agudas, redondeadas en la base, poco aserradas o dentadas, tallos de ramas divaricadas; propia de pisos medios de las vertientes occidentales del Perú.

Raíces, ramas y hojas producen aceites esenciales utilizados para almacenar papas y granos .

­ L.: tabaco cimarrón” Hierba anual, ramificada, frondosa, de 1.50 ­ 2 m altura; tallos divergentes, ramoso, pubescente; ra íz fasciculada f i b ros a ; ho j a s al t e rna s , pecio l ada s , pubescentes, redondo ­ cordadas, cordadas triangulares, conbordes ondulados; flores e n r a c imo s , peduncu l ada s , t ub u los as ­ acampanadas rosado ­ verdoso: cáliz densamente piloso­ viscoso, fruto cápsula ovoidal, semillas numerosas, parduscas, propagación por semillas; habita en suelos semiáridos, quebradas, dentro de los camposde cultivo.

De lashojas secas se extrae la nicotinaun ácido a l t amen t e t ó x i c o c on p r op i e d a d e s fungicidas e insecticidas .

­ Graham.: “tabaco silvestre” Arbusto vivaz, ramoso de 2 m alto, hojas pecioladas, alternas, anchas cordadas verde g l a u c o ; f l o r e s p e d u n c u l a d a s , tubulares verde ­ amarillo, reunidas en ramilletes terminales; fruto capsular, dehiscente.

T i e n e n c om o p r i n c i p i o a c t i v o l a nicotina

L.: “tabaco cimarrón”, ccama sayari”, “ccamasayri” Hierba

anual robusta foliosa quepuede alcanzar 2.5 m alto; tallo cilíndrico, puberulento en l a pa r t e i n fe r i o r , v i scoso en la par t e super i or : ho ja s a l t ernas pec io l adas , puberulenta de 2 ­ 9 cm longitud Ovadas c o r d a d a s e n l a b a s e su b a g ud a s o redondeadas en ápice flor con cáliz estrechamente cilíndrico, corola verde amar i l l en t a ; f ru to cápsu l a e l l i p to ­

Min thostachys mollis .

Nicotiana glutinosa

N. glauca

N. pa n icu la ta “ .

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N. rustica .

N. tabacum

.

Neriumoleander

Ocimun basilicum .

ovoidea; distribuida en región occidental y miembro integrante de la región lomal.

T i e n e n c om o p r i n c i p i o a c t i v o l a nicotina .

­ L. “tabaco silvestre” Especie subarbustiva con flores amarillentas que frecuenta terrenos pedregosos, bordes de caminos, laderas escarpadasy riberasde l o s ríos ubicadas entre los 1800 ­ 3150 m.s.n.m. en los departamentos de La Libertad, Cajamarca y Amazonas, por ejemplo.

T i e n e n c om o p r i n c i p i o a c t i v o l a nicotina .

­ L: “tabaco”, “tabaquera” Planta herbácea anual, de tallo simple, que alcanza alturas de 1.5 m; hojas sésiles, alternas, amplexicaules, grandes, largas, anchas, enteras gruesas, sedosas verde oscuro; f lores grandes , pedunculadas tubulares, infundibuliformes amarillo; inflorescencia ramosaal extremodel tallo, f r u t o cápsula ovoide asi llonada, valvoso y dehiscente

T i e n e n c om o p r i n c i p i o a c t i v o l a nicotina .

­ L. “laurel rosa” Arbusto leñoso, ramoso de 2­3 m alto, hoja persistente peciolada, opuesta, elíptica, entera, lisa verde oscuro brillante; flores peduncu ladas , de cál iz monosépalo , irregularmente labiadas , t r i lobuladas, tubulosas purpúreas, estriadas de blanco, reunidas en largas espigas terminales, vegeta en bosques y se cultiva como ornamental.

Extracto de hojas de hojas utilizada como fungicidas, contra y

.

­ L.: “albahaca” Planta herbácea anual de tallos ramosos, de 0.4 ­ 0 . 5 cm al t o hoja s pecio ladas, opues tas , ancha s , l arga s verde os curo, f lo res numerosas, pequeñas, sésiles, labiadas blanco oscuro reunidas en penacho al extremo de los ta llos. Fruto cápsula valvosa; se cultiva y adapta a climas templados.

Extracto de la hoja se utilizaparacontrolar larvas de .

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8,9,12

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Fusa r ium solani Rizotocnias solani

Plutella xilostela

­ Don.:” saucesillo” Ärbol dioico, dehasta unos25m. de altura y d e 80 ­ 100 cm. deDAP, fuste cilíndrico, c o n h o j a s s imp l e s , r í g i d a s , c o r i á c e a s , lanceoladas, semiangostas o angostas, agudas en el ápice. Flores masculinas cilíndricas, en amentos, axilares a las hojas, flores femeninas axilares, solitarias. Semillas 1 ­ 2. Se distr ibuye desde Améri ca Tropi cal ha s ta Bol iv ia , en Bosques Húmedos Montanos Bajos y hasta los3000m.s.n.m.De losAndes, de l a s Ve r t i e n t e s Oc c i d e n t a l e s d e l No r t e peruano, vegetaenbosquesde neblina, de 2000 ­ 3500msnm.

Produce fitoecsinoides o mímicos de la hormona de lamuda, produce individuos m a l formados incapacesde reproducirse .

­ L.: “chanviro” Especie herbácea, perenne de unos 2 m. de altura, cultivada, en el valle delHuallaga, tiene o l o r parecido a los “ajos”. Usado en la preparación del curare y es tóxica para el ganado.

Reportada como insecticida .

­ H . B . K . : “ailambo” Hierba o arbusto glabro, con hoj as a l t e r n a s , e l i p s o i d e s ; r a c i m o s o p u e s t o s a l a s h o j a s , s u b s é s i l e s , densamente floridos ; f lores rosadas. Frecuente en la Sierra del Perú: bordes de c a r r e t e r a s , q u e b r a d a s , t e r r e n o s pedregosos, bordes de terrenos de cultivos y laderas rocosas, ubicadas entre 1000 ­ 3850 m . s . n .m . Lo s f r u t o s s em im ad u r o s contienen saponinas y como tal, son usados como sustituto del jabón, por los campesinos.

Reportada como insecticida

­ Macbr.: “ami” Especie arbórea de unos 12 m. de altura, frecuente en zonas no inundadas, bosques primarios, lugares inundablesy riberas de l o s r íos con aguas “negras” de toda la Amazonia peruana.

De las astillas de la madera se extrae un pest icida contra pulgones, orugas de mosca y acaros .

­ Hook. F.: “café rana” Especie

Podocarpus oleifolius

Petiveria alliacea .

P h y t o l a c c a b o g o t e n s i s .

Picramnia lineata

P. sprucei .

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MOSTACERO, José [et al.] 9(1)2006 MOSTACERO, J.; et al.

P. macran tha .

.

Persea americana .

Plantagomajor

P lu ch ea ch in goyo .

Quassia amara .

arbórea de unos10m. de alto, frecuente en zonas inundablesy riberas de los ríos con aguas “blancas” de la SelvaBaja del Perú.

Reportada como insecticida .

­ L.: “michoscaspi” Con s i m i l a r e s c a r a c t e r í s t i c a s q u e l a s especies anteriores

Reportada como insecticida .

­ Mill.: “palto” Arbol q u e puede alcanzar hasta 20 m altura de copa e s f é r i c a ; f l o r e s a g r u p a d a s e n panículas que brotan en el ápice de las ramillas o axilas de las hojas, el eje de la panícul a es fuer te , pubescente , con brácteas caedizas, flores hermafroditas c o n p e d i c e l os co r t o s ; f r u to d r u pa c on mesocarpo carnoso de forma ovoide­ piriforme, hojas alternas peninervias o s eudo t r i p l e ne r v i a s , t a l l o l eñ o so cilíndrico.

La semilla de la palta se pulveriza, se d i l uy e en agua y se u t i l i z a como insecticida para combatir pulgones y arañita roja .

­ L.: “llantén” Hierba perenne de 0.10 ­ 0.40maltura, flores h e rma f r o d i t a s , en e s p ig a t e rmi n a l densa, multif lora, de 0.10 ­ 0.30 m l o n g i t u d . S e m i l l a s g r i s o s c u r o , acanaladas; fruto c á p s u l a c ó n i c o , dehiscente transversalmente; hoja en roseta basal, aovado­oblongas, con 5­7 nervaduras prominentes y con pecíolo ancho; tallo desprovisto de hojas que sostiene la i n f l o re scenci a (e scapo f l o ra l ) ; r a í z pivotante; propagación mediante semillas; hábi ta t en suelos húmedos , canales, acequias.

Su extracto tiene acción fungicida y bactericida .

­ D.C.: “chingoyo” Especie arbustiva, ribereña, comúnen la Costa p e r u a n a , d o n d e c o n v i v e c o n l o s “chilcos” y “pájaro bobo” y se emplea contra lamordedurasde víboras.

E x t r a c t o c o n t r o l a .

­ L.: “cuasia” Arbusto vivaz leñoso, ramas que alcanzan alturas de 2­ 3 m;

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9

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12 P h t h o r i m a e a

operculella

Q. multiflora .

Rumex crispus

Ricin u s commun is

hojas persistentes, pecioladas, alternas, compuestas, pennadas en pares de 3 ­ 5

foliolos sésiles oblongo, puntiagudo, liso, enteros, verde por el haz y de nervaduras rojizas por el envés; flores de estambres muy sobresalientes, bracteoladas, pedunculadas, pequeñas rojizas, reunidas en ramilletes terminales; fruto drupa, ovoide, roja cuando estámadura.

La cuasina, un extracto hidrosoluble que se extrae del leño de este árbol cuando las plantas en crecimiento pueden absorber d e l s ue lo l a s o luc ió n d e cua s ina p a ra inmunizar a este del ataque de ciertos insectos .

­ AL. Juss.: “cuasia” Con cara terís t icas s imi laes a la especie anterior.

Sustancia activa la cuasina .

­ L.: “lengua de vaca”, ” acelga”, “malahierba”, “romaza' Hierba perenne, de 0.60 ­ 1.20 m alto; flores en panojas densas terminales, verde oscuro rojizo; fruto aquenio piramidal, s emi l l a s t r i angu l a re s envu e l t a s en brácteas membranosas; hojas grandes, o b l o n g o ­ l a n c e o l a d a s , r u g o s a s , largamente pecioladas; tallo en estado vegetativo reducido, cuando va a florecer es alargado, herbáceo; glabro, angular con estrías verdes a rojizas; raíz napiforme, gruesa; propagación por semillas; habita en todos los terrenos de cultivo, prefiere suelos húmedos.

Con propiedades antisépticas y insecticidas controlando pulgones, orugas, larvas, babosas etc .

­ L. : “higuer i l la” , “ricino”. Planta arbórea arbustiva, anual, perenne, de 0.50 ­ 3 m altura; flores d i s p u e s t a s e n r a c imo s , mono i ca s , ocupando las femeninas la parte superior; fruto cápsula erizada, trilocular con una semilla en cada lóculo, las semillas elípticas comprimidas con carúncula, lisas, con manchas jaspeadas de color marrón, contienen en su albumen aceite; hojas alternas, largamente pecioladas, de l imbo p e l t a d o con v a r i o s l ó bu l os fuertemente dentados; tallo sin látex, cilíndricos verde rojiza, glabros; raíz pivotante; propagación por semil las; habita dentro de los campos de cultivo,

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9,29

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Salvia oppositiflora .

Sambucusperuviana

Ser ja n ia glabra ta .

Schinus molle .

prefiere suelos sueltosy ricos.

Se extrae cierto tipo de aceite con p r op i e d ad e s t óx i c a s p a ra in s ec to s chupadoresymasticadores .

­ R. y P.: “hierba de la sarna” Especie herbácea o sufrútice con f lores ro jas , ta l los , ramas y hoj as glutinosas, endémica de la Región Andina del Perú donde frecuenta bordesde carreteras, laderas abiertas y rocosas, p a s t i z a l e s , pendientes rocosas, terrenos rocosos y terrenospedregososubicados entre los 2000 ­ 4000m.s.n.m.

En animales agropecuarios controla la sarna

­ H.B.K.: “saúco” Árbol o a rbus to , hoja s compuest as imparipinnadas, flores dispuestas en corimbos, fruto baya dispuesto en forma d e racimos de uva, cultivada en las partes altas de los andes.

Fruto y hojas después de ser hervidas en agua son utilizadas como insecticidas y s u s e f e c t o s c on t r o l an mo squ i l l a s , pulgones, cigarritas y gorgojos, además controla roedores .

­ H.B.K.: “macote” Enredadera de amplia distribución en el Perú, como en Piura y Cajamarca en el Norte hastaMadre deDios en elSur.

Sustancias toxicas extraídos de sus tallos conpropiedades igual a losbarbasco .

­ L.: “molle” Arbusto o arbolillo de hasta 10 ­ 41 m altura, inflorescencia heteroclamideas uní o bisexuales, cáliz capuliforme corola diapétala, pétalos imbricados elípticosy b l ancos , androceo con10 estambres gineceo con ovario súpero unilocular fruto drupa esférica de 5 mm diámetro de rosado oscuro brillante, tallo cilíndrico, ramoso y leñoso de hasta 1 m de diámetro, originaria del Perú, crece en climas t emplados y t rop i ca l e s , vege t a en quebradas cálidasy abrigadasde los v a l l e s c á l i d o s d e l a s v e r t i e n t e s occidentales, se le encuentra hasta los 3,300msobre elnivel delmar.

Las hojas y frutas maceradas actúan como insecticidas repelentes, elimina pulgones, piojos de la alfalfa y del repollo, controla

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12

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hormigas .

­ L.: “coconilla d u l c e ” Especie arbustiva deunos2m.de alto, con flores azulinas que frecuenta bordes de carreteras, zonas no inundadas y bosques s e c u n d a r i o s . C u l t i v a d a c o m o ornamental y tóxica para el ganado. Los frutos, unas cápsulas amarillas, con5 apéndices mamiformes en la base, contienen alcaloides narcóticos muy peligrosos si se consumen más de lo necesario. Los frutos son usados como veneno. El fruto esusado comoacaricida y antimicótico. Las semillas son usadas como insecticidas.

Sus frutos contienen alcaloides narcóticos altamente tóxicos para ciertos insectos .

Mill.: “hierbamora”. Hierba anual, robusta, erecta de 0.20 ­ 1 m altura; flor cima umbeliforme, blanco violáceo, pequeñas; fruto baya globosa verde y negra al madurar, semillas aovadas, amarilentas; hojas simples, pecioladas, alternas, aovadas, o aovado­lanceoladas, borde entero o ligeramente ondulado; tallo herbáceo, algo lignificado en la madurez, verde, morado oscuro en los nudos; raíz pivotante; propagación por medio de semillas; habita en los bordes de los campos y dentro de los cultivos.

Asteroides, alcaloides extraídos del tallo con propiedades insecticidas

­ L.: “papa”, “patata” Planta herbácea anual, carnosa; tallos ramosos que alcanzan 60 ­ 70 cm alto; hojas pecioladas, alternas, segmentadas, vellosas, dentadas, verde oscuro el haz y claro por el envés; flores pedunculadas morada, pétalos estrellados reunido en corimbos terminales, fruto globuloso, carnoso cultivada por sus tubérculos.

Se tratade un insecticida de contacto elaborado a partir de hidrato de carbonode la “papa” .

­ L.: “pegapinto” Especie herbácea o sufrúticede las Vertientes Orientales del Perú, donde la raíz al estado fresco es venenosa. Es una especie tóxica para el ganado. También es usado comounpurgante p e l i g r o s o , e n p e q u e ñ a s d o s i s p a r a e l i m i n a r parásitos; pues en grandes dosis, puede matar a una persona.

Solanummammosun .

­ S. americanum

S. tuberosum .

SpigeIia anthelmia

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Reportada como insecticida .

­ L.: “clavelina” Especie herbácea anual de hasta 1 m. de alto,muyapreciadaen jardinería.

Nematicida reduce la producción de .

­ L.: “flor demuerto” Especie herbácea originaria de América, con flores anaranjadas se propaga por semillas.

S u s r a í c e s s e c r e t a n s u s t a n c i a s nematicidas .

­ (L.) Sch. Bip.: “ c r i s a n t e m o ” E s p e c i e h e r b á c e a originariadeEuropa, introducida y cultivada como ornamental. Constituye la Flor Nacional del Japón, por lo que aparece en su Escudo Oficial. Contiene aceite esencial, compuesto de alcanor, terpeno y borneol, diversos ésteres y unasustancia amarga.

De la flor seca se extrae unasustancia t ó x i c a llamada piretrina que elimina todos los insectos chupadores y masticadores . Flores que producen polvo insecticida comercial llamado pelitre comercial . Efecto “choque” o “know down” .Efecto de derribo .

­ L. (Pers).: “barbasco” Especie nativa deAméricaTropical, donde se distribuye desde El Caribe hasta Argentina. Subarbusto o sufrútice de 1 m. de alto, c o n f l o r e s l i l a s . C o m ú n encontrarla enbordesde carreteras, t e r r e n o s arcillosos, seco­pedregosos, arenosos, seco, áridos y en laderas, ubicadas entre los 450 ­ 1140 m.s.n.m. en los departamentos de Tumbes, Piura, Lambayeque, LaLibertad, Cajamarca, Ica y Amazonas.También es invasorade cultivos y es usadopara “pescar”.

Especie de la que se extrae, la tefrosina un a l c a lo i d e c on p r op i ed a d e s t ó x i c a s (Mostacero y Mejía, 1993). Especies seleccionadas de este género producen rotenona .

­ L. (Pers).: “Barbasco”, “cube” Subarbusto decumbente, frecuente en m o n t e s pluvifolios ubicados alrededor de l o s 6 5 0 m.s.n.m. Contiene el alcaloide tefrosina. Utilizan

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1 2

29

8

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Tagetes erecta

T. patula

Tanacetum parthenium .

Tephrosia cinerea

T. toxicaria

Pratylenchus

sus raíces para la “pe sca” en los r í os . Cultivada como venenopara peces.

Sustancia activa tefrosina . Sustancia activa rotenona

­ L.: “mastuerzo” A rb u s t o ornamental, perennemuy cultivado en la costa, tallos volubleshasta 70 cm alto, hojas orbiculares, peltadas, flores con pétalos anaranjados, rojo­ amarillentos oscuros hacia la base.

Controla ácaros, abollado de las hojas, p o d r e dumb r e g r i s c h a n c r o , p u l g a lanigera .

­ L.: “ishguin”, “ortiga may o r ” Planta anual con pelos urticantes, de tallos erguidos de 15 50 cm alto hojas opuestas, elípticas ovadas u orbiculares; flor unisexual, pecíolos pequeños verdosos, fruto aquenio de 1.6 mm largo, común en cultivo depapa,maíz, alfalfa.

Toda la planta contiene histaminas, sustancia tóxica de contacto usada para controlar pulgones, arañita roja .

­ Poir.: “ortiga”, “ihsguin” Hierbaperenne, tallos glabros, hojas o v a d a s , lanceoladas, flores en glomérulos o espigas delicadas, fruto aquenio.

Sustancia activa:Histaminas .

­ (Cav.)Link.: “cuncun” Arbusto perenne erguido de hasta 2.5 m al to, f lores pequeñas hermafrodi tas , pediceladas, reunidas en racimos laterales opuestos a las hojas en las terminaciones de l a s ramas , s emi l l a s ren i f o rmes alargadas, de consistencia leñosa y r o d e a d a p o r u n a s u s t a n c i a m u c i l a g i n o s a blanquecina. Habita en zonas tropicales y s u b t r o p i c a l e s , p e r t e n e c e a l a s comunidades de los algarrobales.

Planta fungicida controla hongos como

­ H.B.K.: “verbena”, “verbenade campo” Hierba perenne, erecta, de 040 ­ 1 m altura; flor en espiga en el extremo del tallo o en las ramas, flores pequeñas azulmorado; fruto drupáceo, conteniendo cuatro semillas pequeñas, oblongas; hoja opuestas, simples, con incisiones características en sus bordes,

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2 3

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Tropaeolummajus

Urtica dioica .

U.magellanica

VaIlesia glabra

Ver bena littora lis .

Fusarium, Solani yRhizoctonia solani

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Vitexgigantea

V. pseudolea

V. triflora

Zea maíz

subsésiles; tallo herbáceo, ramificado en la parte superior, de forma tetragonal; raíz pivotante; propagaciónpor medio de semillas; hábitat en los campos de cultivo, borde de carreteras, terrenosbaldíos.

Fitoecsinoides omímicos de lamuda, p r o d u c e individuosmal formados e i n c a p a c e s d e reproducciones .

­ H.B.K.: “pechiche”. E s p e c i e arbórea propia delNorte y Oriente del Perú.

Reportadacomo insecticida .

­ Rusby. : “aceitunademonte” Especie arbórea propia de las Vertientes Orientales del Perú. Sus semillas son comestibles.

Reportada como insecticida .

­ VahI.: “taruma”, “tahuari” Especie arbórea de unos 10 m. de altura que frecuenta en zonas no inundadas y bosquesprimariosde laAmazonía peruana. Presenta semillas comestibles.

Reportada como insecticida .

­ L.: “maíz” Planta herbácea anual, monoica, de tallo simple de 2 m altura, hojas envainadas alternas, largas lanceoladas, lisas enteras verde oscuro brillante; flores masculinas ama r r i l l o , d i s p u e s t a s e n p a n í c u l a terminal, las femeninas situadas en las axilas foliares, dispuestas en espiga larga, sésil, formando un eje carnoso, defendido por unashojitas sin limbo, cada flor femenina arroja un prolongado est igma, cuyo conglomerado forma una cabellera rojiza en principio y negruzca luego, cultivada para consumo humano.

De la semilla se extraen aceites esenciales que se utilizan como insecticida .

En el presente Catálogo se inventariaron 84 especies con propiedades biocidas consideradas así por su naturaleza fotoquímica y por las experiencias realizadas por entomólogos que al comprender los resultados de aplicaciones con agroquímicos versus los tratados con especies diferentes con este tipo de propiedades, dan a conocer las ventajas que ofrecen este tipo de recursos. La taxonomía, origen, distribución y datos ecológicos de plantas biocidas reportadas en el

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DISCUSIÓN

12

12

12

12

12

3,10,17,20,2122,23,27,28,30

6,8,11,1215

9,12,15,18

8

29

8,10,12.

1 17

6 9.

1,2,11,12

`

presente trabajo han sido tomadas de publicaciones previas . En cuanto a

las características botánicas se encuentran todo tipo de plantas; desde simples hierbas hasta árboles de gran porte, igualmente los hábitat son diversos. La utilización de plantas con propiedades biocidas son un instrumento tecnológico importante dentro delmarcodemanejo ecológico de plagas agrícolas . Habitualmente se supone que el empleo de un pesticida elaborado a partir de raíces, corteza o flores es un modo inocuo de controlar las plagas, todos los pesticidas son tóxicos algunos más que otros, la ventaja de los pesticidas a partir de productos naturales es su baja toxicidad . Ciertas tribus Indias deAmérica del Sur emplean una maceración de plantas que vertidas en los ríos, mata a peces sin que por ello dejen de ser comestibles por el hombre . La rotenona un veneno misterioso y no identificado, llamado verbasco se usaba contra peces en el corazón de la jungla Sudamericana . Muchas de estas especies luego de un proceso, son distribuidas comercialmente como insecticidas, especialmente las que contienen rotenona o sus afines. Dentro de estas especies con este tipo de características encontramos no sólo insecticidas si no también fungicidas, nematicidas, bactericidas, repelentes etc. pero lo mas importante es que estas especies no tienen efectos residuales, muy por el contrario se degradan rápidamente por la luz solar Es necesario definir criterios metodológicos y parámetros de evaluación para el proceso de investigación de plantas con propiedades biocidas. Este trabajo debe ser ejecutado interdisciplinariamente por Biólogos, Químicos, Botánicos, otras profesiones y los Agricultores; tal como lo proponenAlbarracín , Juscafesa , De Bach yForsythe Diveros autores recomiendan manejar cuidadosamente cierto tipo de extracto por ser altamente tóxicos y sin especificaciones definidas , toda vez que la investigación química de las Plantas Biocidas aún es incompleto o escaso; pues la investigación debe orientarse al análisis fitoquímico de estos recursosvegetales biocidas.

Se reporta84 especies para elNorte Peruano Las especies están distribuidas en20 o rd en e s , 32 familias, 64géneros y84 especies Las familiasmás representativas son Fabaceae c o n 1 1 g é n e r o s y 1 5 e s p e c i e s ; Solanaceae con 7 géneros y 13 especies y Asteroideae con7 génerosy8 especies.

CONCLUSIONES

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E l g é n e r o má s r e p r e s e n t a t i v o e s con5 especies.

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Nicotiana

Glycinemax

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Correspondencia: JoséMostaceroLeón Cavero yMuñoz 492 lasQuintanas ­Trujillo Teléfono: (044) 224505 CorreoElectrónico: jubry1990@yahoo.com

3

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Influencia del software matemático Derive en el rendimiento académico de estudiantes de Ingeniería Agroindustrial de la Universidad Nacional “Toribio

Rodríguez de Mendoza”, Amazonas­Perú Influence of Derive mathematical software on academic performance of Agroindustrial Ingeneering students of the Toribio Rodriguez de Mendoza

National University (Amazonas Peru)

Oscar E. García­Grados , Walter J. Columna­Rafael , Agustín R. Mendoza­Alfaro , Mariel del Rocío Chotón­Calvo y Julio C. Reyes­Vásquez

¹ ¹ ¹ ¹ ²

RESUMEN

Palabras clave

ABSTRACT

KeyWords

En la presente investigación se realizó un estudio descriptivo con el propósito de observar las condiciones en que se puede aplicar el software matemático Derive, ya que en las universidades publicas se viene dando desde muchos años elmétodo tradicional, donde el docente universitario es el eje central de la enseñanza y aprendizaje.

Lamuestra se obtuvode los alumnosdel segundo ciclo de laCarrera Profesional de IngenieríaAgroindustrial en el curso de análisis matemático I, utilizando el muestreo probabilístico, formado por dos grupos: el experimental (15) y el de control (15) .

Los medios y materiales usados por los estudiantes del grupo experimental fue el software derive versión 6.00y losdel tradicional pizarra, plumón y listade ejercicios.

La participación del alumno en el proceso de enseñanza aprendizaje logra mayor rendimiento académico, logrando la adquisición de capacidades, es decir el nivel de significancía del software matemático Derive es muchomayor que elmétodo tradicional.

Los resultados dados a conocer demuestran un nivel de diferencia significativa en el rendimiento académico obtenidopor el grupo experimental con respecto al grupode control conun95%de confianza.

: Método tradicional, rendimiento académico, software derive.

In the present investigation ,it was carried out a descriptive study with the purpose of observing the conditions in that you can apply themathematical software Derives, since in the public universities come giving from many years the traditional method, where the educational university student is the central axis of the teaching and learning.The samplewas obtained of the students of the second cycle of theCarrera Profesional de IngenieríaAgroindustrial in the course of mathematical analysis I, using the sampling probabilistic, formed by two groups: the experimental (15) one and the control (15). Themeans andmaterials used by the students of the experimental group were the software it derives version 6.00 and those of the traditional group, wes a slate, fasten and a list of exercises. The student's participation in the process of teaching learning achieves bigger academic yield, achieving the acquisition of capacities, that it means the level of significance of the mathematical software Derives it is much bigger that the traditional method. The results, which we knew, demonstrate a level of significant difference in the academic yield obtained by the experimental group with respect to the control groupwith 95%of trust.

:Traditionalmethod, academicyield, software derive.

Artículo original 9(1)2006

1. Departamento Académico de Ciencias Básicas. Carrera Profesional de Ingeniería Agroindustrial.UniversidadNacionalToribio RodríguezdeMendoza deAmazonas. Chachapoyas­ Perú.

2. Departamento deEconomía.Escuela deEconomía.Facultad deCienciasEconómicasUNT. Recibido 9 de enero 2006, aceptado 17 de marzo 2006.

INTRODUCCIÓN

En la Ciudad de Chachapoyas , principalmente en la primera casa superior de estudios no existe, hasta donde se conoce, estudios relacionados con la aplicación del Software Matemático Derive y su implicancia en el rendimiento Académico de los estudiantes del segundo ciclo de la carrera profesional de Ingeniería Agroindustrial en el curso deAnálisisMatemático I.

Aprender es una aventura intelectual. El docente desempeña un papel importante en el sistema universitario, influyendo en gran medida en el rendimiento que alcanzan los estudiantes. Las relaciones que establece con el e s tudiante , pa r t i c ip an tanto en su comportamiento como en su aprendizaje . Sin embargo, el método tradicional no está dando resultados alentadores con respecto al rendimiento académico de los estudiantes del nivel superior. Esta es una realidad preocupante, puesto que como docentes comprometidos con la enseñanza en la Educación Superior, nos crea la necesidad de seguir investigando y enfrentar el problema y buscar alternativas de solución .

La investigación educativa permite conocer los problemas y factores que condicionan el desarrollo académico de los estudiantes inmersos en esta realidad educativa . El problema del rendimiento académico en los cursos de matemática superior no solo ocurre en nuestra región sino también en el resto de universidades públicas de nuestropaís.

Esta situación debe cambiar con la llegada de nuevos conocimientos, métodos y con la tecnología de última generación, aunque costosa, es de mucha ayuda para nuestro jóvenes estudiantes, especialmente para la Ca r r e r a Pro fe s i ona l de Ingeni e r ía Agroindustrial.

El grupo de investigadores en el año 2004 en la Carrera Profesional de Ingeniería Agroindustrial en el curso de Matemática Integrada se utilizó el enfoque constructivista en comparación con el método tradicional que se viene trabajando actualmente en las universidades públicas de nuestro país, donde este estimulo constructivista tubo mejores resultados que el tradicional ya que los estudiantes mejoraron su rendimiento académico.

La presente investigación tuvo como

8

1

4

objetivo: determinar la influencia del Software Matemático Derive en el Rendimiento académico de los estudiantes de la Carrera Profesional de Ingeniería Agroindustrial de la Universidad Nacional Torib io Rodríguez de Mendoza de Cahachapoyas (Amazonas, Perú) UNAT­A­, en la asignatura de Análisis Matemático I año en el año académico 2005.

Alumnos: El universo estuvo conformado por todos

los estudiantes del segundo ciclo de la Carrera Profesional de Ingeniería Agroindustrial de la UNAT­A, en el curso de análisis matemático I, año 2005 (N = 54), distribuidos en la secciónA (42) y en la secciónB (12), de los cuales fueron encuestados en total de 39 estudiantes, cuyas características son las siguientes:

La muestra se obtuvo de los alumnos del segundo ciclo de la Carrera Profesional de Ingeniería Agroindustrial en el curso de análisis matemático I, utilizando el muestreo probabilístico, formado por dos grupos: el experimental y el de control. Por ser heterogéneo el número de alumnos por aulas, se realizó la selección en forma aleatoria resultando 5 alumnos de la sección A y 10 alumnos de la sección B para el grupo Control. Así también se seleccionaron 15 alumnos de la secciónA,para el grupo experimental

Se consideró como unidad de análisis a: Un estudiante matriculado en el curso de análisis matemático I de laUNAT­A.

El marco muestral lo constituyó la Nómina

MATERIAL YMETODOS

Alumnos cuya edad promedio es de 18,85 años. Su condición económica es media para abajo, el 59% tiene ingresos de s/ nuevos 500 a 1000. Esta constituido por mas varones (76,9%) quedamas (23,1%). La mayoría vive en el cercado de Chachapoyas. Su rendimiento académico esmedio. El 74.4% ingreso a la primera vez a la UNAT­ A.El 17.9% trabaja y estudia. Todos son solteros. Todosprovienende colegios estatales.

15 estudiantes grupo experimental 15 estudiantes grupo control.

128

GARCÍA, O.; et al. 9(1)2006

129

de matrícula de estudiantes y registros oficiales de la Oficina General de Registros y Asuntos Académicos de la UNAT­A, año 2005.

Para obtener el tamaño de muestra se obtuvo encuenta los siguientes elementos:

Se considerará un nivel de confianza del 95%.

Se considerará un error de muestreo de 5%.

Como no se conoce la variabilidad de las inasistencias frecuentes a clases debido a que no existen estudios anteriores, entonces se tomará el criterio de varianza máxima, donde p = 0,5 , q = 0,5 , entonces p q= 0, 25.

Como , se utilizará el factor de corrección

La estratificación se hizo utilizando la fijación uniforme, quedando de la siguiente manera:

Sección A: 15 Sección B : 15

Uso del software matemáticoDerive

El software matemático Derive es uno de los programas de cálculo simbólico avanzado muy fácil de trabajar en matemática, es muy eficaz, haciendo cálculos rápidos y efectivos, ademásde representar graficas en 2Dy3D.

El rendimiento académico de los estudiantes.

Se denomina rendimiento académico al nivel de conocimientos demostrado en una materia, comparado con la norma (edad y nivel académico).Para poder medir el rendimiento académico de los estudiantes de la Carrera Profesional de Ingeniería Agroindustrial en el Curso de Análisis Matemático I como modelos adecuados de evaluación del estudiante son cuantitativos de 0 a20.

Obtención del tamaño demuestr a

Nivel deConfianza

Error de estimación

P or cen t a j e d e la ca r a ct er ís t ica estimada

Variable independiente:

Var iab le dependiente:

Diseño de contr astación de la hipótesis

n O N =

n O =

n=30 Estudiantes

n= N n O 1+

Sedenominó: G.E.Grupo experimental G.C.Grupo de control GE: 01 < x < GE:03 la aplicación del

softwarematemático Derive GC: 02 GC: 04 De tal manera que: 01 y 02 representan

evaluaciones de entrada y 03 y 04 evaluaciones de salida de los estudiantes en el curso de análisis matemático I usando el software D e r i v e y e l m é t o d o t r a d i c i o n a l respectivamente.

Los datos fueron recolectados en forma directa de los registros de asistencias y de evaluación del docente de los estudiantes previamente seleccionados aleatoriamente

La información fue recolectada, teniendo en cuenta los siguientes aspectos: Número de inasistencias a clases en el curso deAnálisis Matemático I, por unidad didáctica. Notas promedio del curso en cada unidad didáctica para el año académico 2005.

Los procedimientos seguidos en la presente investigación para recolectar la información fueronde la siguientemanera:

Se le entregó una encuesta para conocer información de los estudiantes y pasado un tiempo prudencial se le aplicó la prueba de entrada. El grupo denominado experimental, realizó sus clase con estímulo en el Centro de cómputo de laUNAT­A. El grupo control, usó la metodología tradicional, donde el profesor fue el eje central de la enseñanza­ aprendizaje. Después de desarrollar los temas del silabo que corresponde a una unidad de aprendizaje, se realizó la experimentación o investigación a ambos grupos, para ello se aplico la prueba de salida correspondiente para medir o evaluar los resultados. Los datos obtenidos fueron tabulados en cuadros estadísticos de entrada simple y doble. Se graficó la información y luego se obtuvo las frecuencias absolutas y porcentuales. La medición e interpretación del grado de r e l ac i ón o asoc ia c i ón en t r e e l rendimiento académico con el método

“x”

Instrumentos

Procedimientos

9(1)2006 Influencia del software matemático

130

tradicional y el software Derive, se utilizó el coeficiente de t­student, con un

nivel de significancía de 0,5.

Los datos obtenidos fueron procesados y analizadosde la siguientemanera:

Obtención de cuadros y gráficos estadísticos utilizando el software SPSS for Windows versión 11 para las variables en estudio. Obtención de indicadores estadísticos, tales como frecuencias absolutas, po r c en t ua l e s , med i a , v a r i a nz a , coeficiente de variación. La prueba de significación estadística es el t student como indicador para comparar las medias de los resultados, con las siguientes formulas:

Para , si P>0,05Noes significativo:No existe relación P<0,05Si es significativo:Existe relación P < 0,001 muy altamente significativo: Existe relación Prueba de hipótesis para la diferencia demedias

La información obtenida de los estudiantes del grupo control y grupo experimental del II ciclo de la carrera Profesional de Ingeniería Agroindustrial en el curso de análisis matemático I, en el cuál se experimentó sobre los logros obtenidos en ambos grupos, en un grupo se aplicó el método tradicional y en el otro el software Derive, sobre el nivel de aprendizaje en una etapa de lamatriz empleada produjo una sensación de satisfacción en los estudiantes con el Software Derive por ser novedad ya que nunca habrían conocido un programa matemático que les permitiera resolver sus problemas de cálculo, por el contrario el otro grupo del enfoque tradicional una cierta disconformidad por no salir en el sorteo y conformarse que el docente seria el artífice del aprendizaje.

Procesamiento yanálisis estadístico

RESULTADOS

~ n 1 S 1

t e= ~t( n 2 + ­2 g1 S 2 + n 1 n 2

x 1 x 2 ­ µ 1 µ 2 ­ ­

2 2

Por ejemplo en la Tabla 1 con la prueba de entrada se observó que los alumnos evaluados con enfoque tradicional, el número de desaprobados eramuchomayor, el 53%obtuvo la nota cero y el 13,4% aprobó el examen, en el grupo experimental el 33,4% aprobó la prueba de entrada (Tabla 2)

En la Tabla 4 se muestra el número de inasistencias a clases de los estudiantes, el 33.3% falto por lo menos una vez, cabe mencionar que al aplicar las clases en el centro de cómputo con el software derive, los alumnos que no estuvieron seleccionados de ambos grupos, intentaron participar de las clases.

Los alumnos de ambas aulas antes de ser evaluados con una prueba de salida, fueron preparados convenientemente cada uno en su grupo, se observó que los estudiantes del grupo control, ocho estudiantes obtuvieron la nota diez, cinco estudiantes con once y un estudiante con trece, obteniendo el 40% de aprobados en el examen de salida, al menos se llegó al nivel mínimo de logro (Tabla 5); mientras que aquellos que fueron evaluados con el software Derive con una enseñanza personalizada, una PC por estudiante el porcentaje fue del 80% de aprobación, esto nos demuestra que los estudiantes preparados con el software derive pueden responder mucho mas que aquellos preparados con influencia con elmétodo tradicional.

Las ventajas que se observa se debe a que el estudiante del grupo experimental puede aprender el lenguaje simbólico fácilmente y usarlo para ejercicios complicados y ver las graficas de 2D y 3D y hacerlo girar haciéndose participante de su aprendizaje con los temas que se encuentra en su Silabos.

En laTabla 6 se observó que la máxima nota fue trece para ambos grupo, el mínimo nueve y diez, lamedia fue de 10.47 y 11.33, lamoda fue de 10 y 12 respectivamente en cada grupo, por ello el grupo experimental influye en el rendimientoacadémico de los estudiantes.

9(1)2006 GARCÍA, O.; et al.

131

Notas

Grupo Control

0 Frecuencia

Número Media

8 %

Std. Desviación

53.3 2

Control

2

15

13.3

18.06

3

Experimental

2

15

13.3

24.88

7 1 6.7 11 1 6.7 13 1 6.7

Total 15 100.00

Varianza 4.25 4.99

2.73 6.80

Notas 0

Frecuencia 3

% 20.0

4 1 6.7 5 4 26.7 6 1 6.7 8 1 6.7 11 1 6.7 12 1 6.7 13 1 6.7 14 2 13.3

Total 15 100.00

Notas 0

Frecuencia 7

% 23.3

1 10 33.3 2 6 20.0 3 1 3.3 4 2 6.7 5 3 10.0 6 1 3.3

Total 30 100.0

Grupo Control Número Media

Std. Desviación

Control 15 .838 Experimental 15 .810

Varianza .915 .900

10.47 11.33

Notas 10

Frecuencia 3

% 20.0

11 5 33.3 12 6 40.0 13 1 6.7 Total 15 100.00

Notas 9

Frecuencia 1

% 6.7

10 8 53.3 11 5 33.3 13 1 6.7 Total 15 100.00

Distr ibución de estudiantes según el nivel de conocimientos en la Prueba de Entrada del Grupo Control UNAT­A 2005

Tabla 1.

Distr ibución de estudiantes según el nivel de conocimientos en la Prueba de Entrada del Grupo Experimental UNAT­A2005

Tabla 2.

Fuente: Registro de evaluación 2005

Fuente: Registro de Evaluación 2005

Distr ibución de los alumnos según las notas con la Prueba de Entrada en el curso deAnálisisMatemático I UNAT­ A­2005

Tabla 3.

Reemplazando en la fórmulaT student para la diferencia demedias se obtuvo: con Por lo tanto existe diferencia

significativa entre el rendimiento académico promedio del grupo experimental y el rendimiento académico promedio del grupo control, con el 95% de confianza.

Resultados de las inasistencias de los estudiantes del cur so de Análisis Matemático I ­UNAT­A­

Tabla 4.

Fuente: Registro de asistencia 2005

Resultados de la influencia en el r en d im ien t o a ca d ém ico d e los estudiantes del cur so de Análisis Matemático I Grupo Control con la Prueba deSalida UNAT­A­2005

Tabla 5.

Distr ibución de los alumnos según la Prueba de Salida con el Grupo Exper imental en el cur so de Análisis Matemático I,UNAT­A­2005

Tabla 6.

Fuente: Registro de Evaluación 2005

Distr ibución de los alumnos según las notas con la Prueba de Salida en el curso deAnálisis Matemático I UNAT­ A­2005

Tabla 7.

9(1)2006 Influencia del software matemático

132

Reemplazando en la fórmula T student para la diferencia demedias se obtuvo: t =­2.614 con p=0.0142<0,05 Por lo tanto existe diferencia

significativa entre el rendimiento académico promedio del grupo experimental y el rendimiento académico promedio del grupo control, conel 95%deconfianza.

La participación del alumno en el proceso de enseñanza aprendizaje logra mayor rendimiento académico, logrando la adquisición de capacidades, es decir el nivel de significancía del software esmuchomayor que elmétodo tradicional (Tabla 7). La información obtenida de los estudiantes

de ambos grupos del II ciclo de la Carrera Profesional de Ingeniería Agroindustrial en el curso de análisis matemático I, se observo que en el grupo del enfoque tradicional tiene un alto número de desaprobados y que el trabajo lo realiza el docente universitario, siendo este el eje central de su aprendizaje, y con el software derive esto se disminuye por la forma de trabajo utilizando la tecnología de última generación, con el PC cada estudiante en el menor tiempo puede realizar los cálculos que antes le era difícil de emplear, tiene un alto grado de satisfacción porque no solo hace sus cálculos sino también puede ver en la pantalla las graficas de funciones en 2D y 3D y hacerlos girar para apreciar los cambios notorios que pueda tener, lo que no se observa en una pizarra convencional. La influencia del software derive es mucho mayor para lograr mejorar el rendimiento académico en el procesode enseñanza y aprendizaje . La observación que al iniciar el Software

Derive, los estudiantes tenían dificultad al no tener conocimientos de este programa, para ello se instruyó adecuadamente del manejo y prácticas del lenguaje y símbolos a usar, que luego se hizo familiar al estudiante, y cada vez realizabamás rápidamente sus cálculos . Para medir el rendimiento académico se uso

la prueba de significación estadística como indicador para comparar las medias de los resultados, tanto en la prueba de entrada y la prueba de salida en ambos grupos. (Tablas 3 y 7). En cuanto al rendimiento académico se obtuvo de los 15 evaluados existe una diferencia significativa en las notas promedio

c

DISCUSIÓN

2,3,6

5,6

de análisis matemático I con un nivel de confianza de95%en el año 2005. Z RRHo, entonces se rechaza Ho, con =0,05. Existe diferencia significativa en las notas

promedio obtenidos en el grupo experimental y el grupo control, con un 95%de confianza. En lo que respecta a la comparación con

otras investigaciones citamos la obtenida en el año 2004 en la Carrera Profesional de Ingeniería Agroindustrial de la UNAT­A en el curso de Matemática Integrada, donde el alumno al aplicarle el estimulo del enfoque constructivista con respecto al enfoque tradicionalmejoro su rendimiento académico . Al comparar los resultados estadísticos entre

estas dos formas de trabajo se puede ver que el uso del Software derive esmuchomas efectivo para mejorar el rendimiento académico de los estudiantes universitarios, al observar los resultados en las medias de 9,45 y 11,14 en el trabajo citado y en nuestro trabajo de 10,47 y 11,33 en el grupo control y experimental respectivamente.

Los resultados dados en las notas demuestran un nivel de diferencia significativa en el rendimiento académico obtenido por el grupo experimental con respecto al grupo de control con un 95% de confianza. L o s f a c t o r e s q u e i n f l u y e n significativamente en mejores logros y mejores capacidades en los estudiantes cuando participa en su aprendizaje y usa la tecnología de última generación para realizar sus saberes. Los estudiantes demuestran mayores aprendizajes y son más prácticos y creadores si han sido preparados con los conocimientos del Software Matemático Derive que elmétodo tradicional. Aquellos alumnos que se le da la tecnología de última generación en el p r o c e s o d e a p r e n d i z a j e u s a n d o mot ivaciones y e tapas adecuadas muestran mejores actitudes de cambio en su comportamiento para lograr sus aprendizajes.

d ∈ α

7

CONCLUSIONES

9(1)2006 GARCÍA, O.; et al.

133

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Adel C. Estrategias para mejorar el r endimiento académico de los Adolescentes.Edit Pirámide.México. 2002.

2. Castro I. Como hacer Matemática con DERIVE. Reverte Colombia S.A. Colombia. 1992.

3. Castro I. 1992. Aplicaciones al Álgebra Lineal utilizando DERIVE. Reverte Colombia S.A.Colombia. 1992.

4. Gálvez J. Métodos y técnicas de aprendizaje. Tercera ed. Asociación

Martínez deCompañón.Perú. 1996. 5. Gonzáles A. Matemáticas con Derive en la

economía y la empresa. Rama.España. 1995. 6. Llorens L. Introducción al uso de

DERIVE. Publicaciones de la Universidad Política.España. 1993.

7. Sanz P. Problemas de álgebra lineal: cuestiones, ejercicios y tratamiento en DERIVE. PrenticeHall. España. 1998.

8. Soria A. Adolescencia y Rendimiento Académico. Disponible en:

Correspondencia: OscarGarcíaGrados Jr. LaMerced1100 ­ Chachapoyas Teléfono: (041) 9998153 CorreoElectrónico: oscarggrados@hotmail.com

http://www.mi pediatra.com.mx/mx/infantil/adolescente1.h tm.

9(1)2006 Influencia del software matemático

Pigmentos antocianicos y betalamicos como agentes quimiopreventivos contra el cáncer: avances, perspectivas y

nuevas fuentes de obtención

Antocianic and betalatamic pigments as chemopreventive against cancer advances, perspectives and new obtaining sources

:

Priscilla Seijas­Bernabé y Segundo Seijas­Velásquez ¹ ²

135

INTRODUCCION

1,2

La eliminación de carcinógenos conocidos del ambiente es una manera de reducir la incidencia de cáncer, pero ésta es una tarea difícil que no puede lograrse con una alta eficiencia. Alternativamente, algunos cambios en el estilo de vida ( ej, la restricción calórica) podría reducir la incidencia de cáncer. Desafortunadamente, la etiología de diversos tipos de esta enfermedad no se conoce aún. Debido a esta situación, se han desarrollado diferentes líneas de investigación en la lucha contra el cáncer, siendo una de las más importantes, la que se dirige hacia su prevención; por lo que una nueva dirección en el control del cáncer es la quimioprevención definida como el uso de agente químicos específicos naturales o sintéticos para la reversión o supresión de la carcinogénesis y prevenir el desarrollo del cáncer invasivo . El término quimioprevención fue acuñado

en 1970 por Sporn , para distinguir entre el proceso de prevención de cáncer y la práctica de quimioterapia, un proceso de inhibición de la progresión de enfermedades avanzadas . La quimioprevención normalmente implica prevención de enfermedad con una alta eficacia demedicamentos con concentraciones no tóxicas, considerando que generalmente se asumen los agentes quimioterapéuticos para ser usado para la dirección de la enfermedad establecida . Aunque la quimioprevención aún no esta

establecida como una terapia estándar, los resultados de pruebas o ensayos reportados son muy promisorias y se tienen grandes intereses en esta estrategia para prevención la de cáncer, habiéndose realizado mayor tipo de investigaciones sobre quimioprevención de cáncer a la piel , así como cáncer de mama, pulmón, colon, cabeza y cuello ypróstata . En los últimos años se han reportado

diversas sustancias fitoquímicas de plantas

2,3,4

2,4

2,4,5

Artículo de revisión 9(1)2006

1. Universidad Nacional de Trujillo. Facultad de Ciencias Biológicas 2. Universidad Nacional de Trujillo. Facultad de Ingeniería

Recibido 31 de marzo 2006, aceptado 17 de mayo 2006.

I INTRODUCCIÓN II. ANTOCIANINAS

III. BETALAINAS

IV. PERSPECTIVAS DE INVESTIGACIONYNUEVAS FUENTES DE OBTENCION DE PIGMENTOSANTOCIANICOS Y BETALAMICOS

V. CONCLUSION VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

.

Características y Propiedades química y biológicas Efecto Quimiopreventivo contra el cáncer de las antocianinas

Características y Propiedades químicas y biológicas Efecto Quimiopreventivo contra el cáncer de las Betalainas

135 136

137

139 140

140 143 143

136

con actividad antitumoral o inhibitoria de agentes cancerígenos como betacaroteno, alfa tocoferol, calcio, selenio, retinoides, Vitamina E,Antiinflamatorios no esteroideos y diversos compuestos polifenólicos ; por lo que la aplicación de estos fármacos o compuestos fitoquímicos en la prevención del cáncer es una posibilidad real, partiendo de la base que éste puede prevenirse o controlarse mediante la interferencia de los factores que intervienen en la iniciación (cambios genéticos iniciales), promoción (progresión de la célula iniciada en el proceso carcinogénico con cambios fenotípicos) o progresión .

P u e d e n c o n s u m i r s e a g e n t e s quimiopreventivos como parte de la dieta o pueden administrarse como preparaciones farmacéuticas normales. Alternativamente, algunos productos naturales pueden administrarse como los suplementos d i e t é t i co s . En cua lqu i e r caso , la quimioprevención ofrece la gran esperanza de reducir la morbosidad y lamortalidad asociada con el cáncer .

En la búsqueda por nuevos agentes quimiopreventivos se ha identificado a las antocianinas y betalainas, los cuales son pigmentos naturales de actividad antioxidante y que son empleados en la industria alimentaria , para los procesos de coloración de bebidas alcohólicas y carbonatadas, caramelos, jaleas, mermeladas, yogurt, gelatina entre otros pero como una perspectiva esta también emplearlos en la industria farmacéutica no solo por su actividad antirradicales , sino que son potenciales agentes anticáncer . Por lo que el objetivo de esta revisión es de recopilar y resumir investigaciones o reportes sobre los avances de la quimioprevención del cáncer por la actividad tanto de las antocianinas como betalainas, las perspectivas que se tienen acerca de estos compuestos ya sean como productos o aditivos en el área alimentaria o farmacéutica así como tratar sobre nuevas fuentes vegetales de obtención de estos pigmentos, que se localicen principalmente en nuestro país. Antes de ahondar sobre estos temas, se trató acerca de puntos generales que se deben conocer sobre estos pigmentos como son sus características, propiedades químicas y biológicas.

6

7

7,8

II. ANTOCIANINAS

2.1 Caracter ísticas y Propiedades químicas y biológicas:

3,10

10,11.

10,11,12

13,14,15,16

0 0

15,16

17 , 18

18,19,20,21

Constituyen los pigmentos principales de las flores y de las hojas de otoño, sus colores van desde el rojo hasta el azul. Son glicósidos de polihidroxiflavilio, en los cuales la unión glicosídica está principalmente enC3 .

Entre sus propiedades químicas principales resaltan la isomerización por cambios de pH, variando de color y estructura del anillo central. Presentan variación de su coloración con el cambio de pH, de rojo en medio ácido, pasando por amarillo, a violeta y azul en medio alcalino. Son termolábiles y sensibles a la presencia de oxígeno

Las antocianinas de las flores se han señalado como marcadores genéticos y por ello son utilizados en lamanipulación genética para obtener nuevas variedades de petunias, rodondendros, camelias, etc. Son también atractantes y repelentes para diversas especies animales tanto por la coloración que proporcionan en las plantas (atractantes) o en el segundo caso por el sabor que les confiere, considerando por ello que poseen una función ecológica .

Entre otras de sus funciones es que su presencia permite el aumento o mejora las respuestas contra el estrés abiótico es decir presentan mejor tolerancia al frío, daños físicos, heladas, contaminación por metales pesados y desecación .

Se han determinado que la deficiencia de fósforo en el suelo, las bajas temperaturas (de 0 Ca 5 C) y la exposición a ozono, aumentan el contenido de antocianinas .

En cuanto a las propiedades biológicas relacionado con la función de protección están las que protegen los compuestos fotolábiles por intercepción de la alta energía quántica por ejemplo en el caso de la tiarubrina A, protegido por las antocianinas cyanidin­3­ ­ g l ucos ido y cyan id in ­3 ­ ­ (6 ' ­ ­ malonylglucosido) . Los pigmentos antociánicos protegen el sistema fotosintético pues reducen la frecuencia y la severidad de la fotoinhibición así como permite la recuperación fotosíntética. Además actúan como pantalla protectora contra la radiación ultravioleta protegiendo de diversos daños y mutaciones alADNvegetal .

Pero también presentan actividades

O O O

SEIJAS P., SEIJAS S. 9(1)2006

137

biológicas que conllevan al bienestar de la salud como antioxidante, antimutagénica y actividades anticancerígenos . Además, son compuestos vasoactivos con comprobada actividad antielastasa . Los estudios que se han realizado, han demostrado que poseen propiedades captadoras de radicales superóxido e hidróxilo e inhibidoras de la peroxidación lipídica, de igual manera que lo hacen los antocianósidos de

“arándano” y “ grosellero negro” , siendo más activas aún que los compuestos antioxidantes de

, vitaminas E (1000 veces más), C (575% más eficaz), betacaroteno (575% más eficaz) y que los taninos condensados de

“ciprés” . Estas propiedades antirradicales refuerzan los efectos antiinflamatorios y la capacidad antiproteasa del organismo .

Las antocianinas de la uva, en el vino tinto, se han encontrando que en pruebas en humanos inhiben la oxidación de lipoproteínas de baja densidad (LDL) . En el área dermatológica, las antocianinas pueden incluirse dentro de los tratamientos cosmético medicinales indicados para el tratamiento de pieles envejecidas o deterioradas por acción de agentes externos deletéreos: rayos UV, radicales libres y factores climáticos adversos entre otros. Su efecto antioxidante contribuiría enormemente a detener dicho deterioro. Se ha observado que las antocianinas pueden inhibir varios grupos enzimáticos, tales como elastasas, colagenasas, hialuronidasas y betaglucoronidasas .

Actualmente debido a las restricciones sanitarias hacia el uso de colorantes sintéticos, y problemas de salud que puede producir (alergias) las antocianinas presentan un amplio interés comercial para la industria alimentaria y se ha comenzado a industrializar en el área farmacéutica por las propiedades antioxidantes que presenta .

Los estudios realizados para investigar y determinar el efecto quimiopreventivo de estos pigmentos determinaron hallazgos que expliquen el mecanismo anivelmolecular de la acción preventiva de las antocianinas, realizando trabajos así como también reportes realizados en modelos experimentales

22,23

23,24

25,26

25,26

24,26

27,28,29

24,25,27

26

Vaccinum myrtillus Ribes nigrum

Ginko Biloba

Cupressus sempervirens

in vitro

2.2 Efecto Quimiopreventivo contr a el cáncer de las antocianinas

en animales . Por ello, en cuanto a las basesmoleculares o

mecanismos relacionadas con las etapas de la quimioprevención del cáncer se observó el efecto o acción de las antocianinas a través de: (i) La inhibición de la transformación celular a través de la ruta de la proteína quinasa mitógeno activada y el factor 1 activador de proteína, (ii) La supresión de la inflamación y carcinogénesis a través de la actuación nuclear en la ruta del factor B y el gen de la ciclooxigenasa 2 y (iii) La inducción apoptótica de células cancerosas por las antocianinas a través de las especies reactivas de oxígeno (ROS) c­Jun NH2­terminal quiinasa (JNK)­ mediadas por activación de la caspasa .

En ensayos se determinó el efecto inhibitorio que poseen las antocianinas de morera (Morus alba) sobre la migración e invasión de una línea celular humana de cáncer de pulmón (células de carcinomaA549 metastásico) . Estas antocianinas son: cianidin 3­rutinosido y cianidin 3­glucosido. Este trabajo concluyó que estas antocianinas disminuían in Vitro la invasión de las células cancerosas. Diversas investigaciones demostraron la inducción de apoptosis por parte de antocianinas de arándano” que contenía un extracto

alcohólico de este fruto este efecto se observó en células de leucemia humana HL60 y células humanas de carcinoma de colon HCT116 .

Mayormente las investigaciones realizadas para determinar la actividad quimiopreventiva de las antocianinas han sido en el caso de cáncer colorrectal. Así tenemos que se encontraron que las antocianinas y la aglicona de tipo cianidina de las cerezas agrias reducían el crecimiento de líneas celulares de cáncer de colon humano . Como parte del estudio, también se realizó en modelos experimentales con ratones, dividiéndose en grupos, en uno de ellos se les dio que consumieran una dieta rica en cerezas, otro grupo una dieta enriquecidas con antocianinas (aisladas) y finalmente se les proporcionó en forma de agl icona (antocianidina) , los que exhibieron significativamente pocos y pequeños adenomas .

Las antocianinas y diversos flavonoides de bayas como cerezas agrias, arándanos entre otros han demostrado la capacidad de inhibir no solo para los estados de iniciación de la

30

30,31

32

33

34,35

34,35

kappa

in vitro

Vaccinium myrtillus “

(NF­ B) ê

9(1)2006 Pigmentos antocianicos

138

carcinogénesis inducidas químicamente sino también para los estados tardíos de proliferación ypromoción .

Investigando vegetales que posean agentes quimiopreventivos se ha encontrado que las antocianinas de camote ( L.) y la col roja ( L.) suprimen el proceso de carcinogénesis de colon en ratas inducido por 1, 2­dimetilhidrazina y 2­ amino­1­metil­6­fenilimidazo­ [4,5­b] piridina . Además las antocianinas pueden ser absorbidas directamente y distribuidas en la sangre (humanos y ratas) después del consumo en la dieta que contenga estos pigmentos . Otras investigaciones han encontrado que los pigmentos antociánicos del maíz morado también poseen actividad anticancerígena es un estudio relacionado con el cáncer colorrectal, donde indica el decrecimiento de la carcinogénesis de colon en ratas F344/DuCrj , inducidos por PhIP (2­ amino­1 metil­6 fenil­imidazo 4,5­b piridina, por acción de PCC (potencial de color de maíz morado) o antocianinas naturales .

Con elmaízmorado también se ha realizado estudios preliminares relacionados con la quimioprevención en piel (aplicación tópica) observando que el extracto de maíz morado concentrado posee un efecto preventivo ­ protector en piel ante sustancias como el aceite de antraceno y hollín (mezcla) promotoras de lesiones del tipo inflamatoria hiperplásica, pues poseen hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAPs) de comprobada actividad cancerígena. Siendo 50 y 54,4mg/mL las concentraciones óptimas para obtener ese efecto y las antocianinas que se encuentran en el extracto de maíz morado son: Cianidin 3­ ­ glucósido, Pelargonidin 3­ ­ glucósido, Peonidin 3­ ­ glucósido, Cyanidin 3­ ­ ( 6­ malonil glucósido),Pelargonidin 3­ ­ ( 6­ malonil glucósido), Peonidin 3­ ­ ( 6­ malonil glucósido) .

También extractos de frutos como la zarzamora poseen actividad quimiopreventiva en el cáncer al colon. Se reportó en un modelo experimental, donde se administró el fruto (extracto liofilizado) en la dieta de ratas de la cepa F­344, en concentraciones de 2.5; 5.0 y 10% después del tratamiento con azoximetano, determinándose que las

32,33,34,35

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35,36

36

37

Ipomoea batatas Brassica oleracea

Mus musculus

O­­D O­­D O­­D

O­­D O­­D

O­­D

zarzamoras previnieron el desarrollo de tumores en el colon en un 60% y de adenocarcinomas en un 80% .

Además, el extracto secado y congelado de las zarzamoras suministrado al 10% en la dieta inhibió el 50% del desarrollo de tumores intestinales (poliposis adenomatosa) .Esta baya tamb ién pos ee prop iedades quimiopreventivas en el proceso de tumorogénesis esofagal producido por Nitrosometilbencilamina, en roedores (ratas F344) . Observándose que las zarzamoras incorporadas en la dieta inhibían la multiplicidad de tumores, regulando (inhibiendo) la Ciclooxigenasa­2, Oxido nitrico sintasa inducible, y c­

En preparados comerciales de uva ( ) ,arándano( L.),y

E.) denominados extractos ricos en antocianinas (AREs) también se investigó su actividad quimiopreventiva potencial contra el cáncer al colon . El crecimiento del cáncer de colon derivado HT­ 29 y colonico no tumorigénico NCM460l las células expuestas al AREs semipurificado (10­75 microgramos de antocianina monómerica /mL) fue monitoreado por m a s d e 7 2 h o r a s u s a n d o un ensayo de sulforhodamina B . Todos los extractos inhibieron el crecimiento de las células HT­29 siendo el mas potente inhibidor el ARE de . Las células HT­29 fueron inhibidas aproximadamente un 50% después de 48 horas de exposición a 25 microg/mL deARE de . Es muy importante, el crecimiento de las células NCM460 las cuales no fueron inhibidas a bajas concentraciones, por lo que las altas concentraciones de estos compuestos es muy importante para un ef icaz efecto quimiopreventivo . Los extractos fueron semipurificados y caracterizados por cromatografía HPLC, espectrofotometría y colorimetria. Por lo que se concluyó que la composición variada de los AREs (cada uno poseía diferentes tipos de antocianinas glicosidadas) y los grados de crecimiento celular, sugieren que la estructura química de la antocianina juega un rol importante en la actividad inhibitoria del crecimiento células cancerosas de los AREs (extractos ricos en antocianinas) comerciales que se emplearon .

38

38

40

39,40

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41

Jun Vitis

vinifera Vaccinium myrtillus Aronia meloncarpa

A. meloncarpa

A. meloncarpa

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139

Ese efecto que poseen tanto los polifenoles como las antocianinas es debido a que estas moléculas poseen anillos aromáticos con sustituyentes hidroxilos (Fig. 1), por lo que por su estructura química (donadoras de H o electrones) actúan como antioxidantes, evitando la reacción oxidativa que activa los compuestos cancerígenos y que son promotores principales de las lesiones precancerosas o de cáncer .

+

30,31

B A Estructura de pigmentos betalámicos , forma betacianina (A) y forma betaxantina (B) (Strack ) et al

Fig. 2.

III.BETALAINAS: 3.1.Car acter íst icas, Pr opiedades Quí­ micas yBiológicas Son pigmentos hidrosolubles nitrogenados

que derivan del ácido betalámico. La DOPA­ dioxigenasa es la enzima clave relacionada en la síntesis de betalainas. Se convierte en 3,4­ dihidroxifenilalanina a ácido betalámico , un cromóforo amarillo. El ácido betalámico tiene luego dos rutas. Se puede condensar como aminoácidos o aminos a la forma de betaxantina (amarillo­naranja) con picos máximos de absorción alrededor de 480 nm, o condensarse como derivados del ciclo DOPA derivando a la forma de las Betacianinas (rojo­ violeta) con picos máximos cercanos a 540 nm (fig. 2AyB) . 42,43,44

Caryophyllales Centrospermales

Amanita muscaria

Centrospermales .

Las betalaínas se acumulan en flores, frutos y ocasionalmente en tejidos vegetativos de plantas que pertenecen al orden de los

o , sin embargo hay dos excepciones: la familia Caryophyllaceae y la familia Molluginaceae que acumulan antocianinas en vez de, pigmentos derivados de los flavonoides lo que ocurre en todas las demás familias de plantas que florecen . Desde el punto de vista taxonómico resulta llamativo el hecho de que exista una sustitución excluyente entre la presencia de los antocianos y las betalaínas; no obstante, este hecho no implica la ausencia de otros tipos de pigmentos tales como flavonoides . En relación a esto, resulta notable la presencia de betalaínas en el hongo

que carece de cualquier r e l a c i ó n f i l o g e n é t i c a c o n l a s

Esta circunstancia podría corresponder a un caso de convergencia química bajo presiones evolutivas o quizás simplemente a una rareza bioquímica aislada . A diferencia de las antocianinas, no son

indicadores de pH, pues su color es estable en un amplio rango de pH . Cuando se oxidan toman un color marronáceo y se previene adicionando ácido ascórbico 0.1%. Además presentan estabilidad limitada al calor, luz, oxígeno y dióxido de azufre, especialmente, en sistemas de elevada actividad de agua . La importancia biológica de estos

compuestos incluye tener actividades antibacterianas y son también marcadores taxonómicos y filogenéticos. Desempeñan un papel importante como las antocianinas en la atracción de dispersadores de semillas y de polinizadores. Tienen un alto potencial como pigmentos naturales para los usos en la industria alimentaria pues se han utilizado como sustitutos del colorante sintético en el proceso de la gelatina de yogurt de fresa, del helado de las ensaladas de frutas, de los caramelos yde lasgalletas . En estas últimasdécadas se ha reportado una

propiedad muy importante que presentan, es la de ser limpiadoresde radicales libres es decir también presentan capacidad antioxidante, previniendo la oxidación de moléculas biológicas. Los diversos estudios se han realizado mayormente en el grupo de las betacianinas . Estos pigmentos previenen procesos oxidativos los cuales contribuyen al ataque de varias enfermedades degenerativas

45,46

46

47

46

47

44,46,47

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48,49

9(1)2006 Pigmentos antocianicos

Fig. 2. Estructura de antocianinas de maíz morado, conformado por anillos aromáticos con sustituyentes hidroxilos ( ) Hou, et al

en e l humano y p res en t an buena biodisponibilidad, por lo que pueden proporcionar protección contra ciertos desórdenes oxidativos relacionados al estrés . Por último, se les está incorporando en las

comidas , c osmé t ico s , o p roduc to s farmacéuticos como un indicador de frescura y preservación. , a parte que al ser integradas a algún producto, mejorarán el color, consistencia, longevidad, sabor, calidad, seguridad, y nutrición del producto, pues debido a sus propiedades beneficiosas se le considera como un compuesto nutracéutico al igual que los pigmentos antociánicos .

L o s e s t u d i o s P r e l i m i n a r e s d e quimioprevención de cáncer con el extracto de la remolacha crudo han mostrado protección contra el cáncer a la piel y los pulmones en modelos experimentales con animales (los ratones). Esta protección es ligeramente mayor que

la producida por los pigmentos antocianicos (obtenidos de la piel de cebolla roja) o carotenoides (de los pimientos verdes rojos) . En particular, un pigmento del grupo de las

betalaínas, la betanina, parece ser un compuesto anticancerígeno potente, incluso a dosis muy bajas. El extracto de remolacha, rico en pigmentos betalámicos, ha demostrado propiedades quimiopreventivas en cánceres de piel y pulmón . En concreto, estudios llevados a cabo en ratones demostraron que el extracto de la raíz de remolacha presenta un significativo efecto inhibitorio tumoral a nivel de piel y pulmón. Estos resultados ponen de manifiesto la importancia de una mayor investigación acerca del poder de la remolacha para evitar la malignidad del cáncer en los humanos .

En un estudio con diferentes fenotipos de la remolacha o betarraga, fueron las de mayor actividad anti­scavenging o antirradical la que poseían mayor pigmentación (ricas en betacianina) y también eran capaces de inducir a la quinona reductasa en las células de hepatoma murino .

Laquinona reductasa es la enzimade la fase II , la cual detoxifica y compite con electrófilos activados (carcinógenos), las enzimas fase II también complementan la activación de las enzimas en fase I para limitar la acumulación

50

51,52

53

54

53,54

55,56

3.2 Efecto Quimiopreventivo contra el cáncer de lasBetalainas

in vitro

de electrófilos, reduciendo el riesgo de iniciación .

Durante los últimos 30 años, la investigación en el campo de la nutrición y la enfermedad crónica ha permitido realizar avances significativos para el entendimiento de los factores específicos de riesgo y los agentesquimiopreventivos relacionados con la enfermedad yel cáncer

Los nutrientes dietéticos pueden influenciar el riesgo de cáncer ya sea d i sminuyendo o i n t en s i f i cando la carcinogénesis a través de diversos mecanismos de acción. La identificación y elucidación de sus sitios de acción han sido un enfoque de la nutrición e investigación de cáncer pormás de cuatro décadas .

La vitamina D, calcio, folato, selenio, genisteina y resveratrol están destacando, porque representan clases específicas de nutrientes o compuestos nutracéuticos e ilustran la necesidad de buscar e investigar una variedad de nutrientes y comprender su significancia fisiológica en la prevención del cáncer. Como la ciencia de la nutrición, abre nuevos conocimientos acerca de cómo estos compuestos pueden modular riesgo de cáncer a través de interacciones y como los alimentos pueden ser cambiados por estrategias agronómicas y/o biotecnológicas . Además se adoptará nuevas tecnologías genómicas que ofrecerán oportunidades excitantes para avances en el amplio campo de la nutrición, especialmente relacionado con la quimioprevención .

La investigación en nutrición y prenoción de cáncer en este nuevo milenio debe dar prioridad a los estudios que investiguen la comprensión de la base molecular y mecanismos genéticos por lo cual los nutrientes influencian en las diferentes etapas en el proceso de la carcinogénesis. Una buena coordinación y esfuerzo multidisciplinario entre científicos, incluyendo científicos nutricionales, biólogos moleculares, genetistas, estadísticos e investigadores en la parte de cáncer clínico, serán requeridos para avanzar una aproximación molecular a la

55,56

57

57

58 ,59 ,60

58

I V . P E R S P E C T I V A S D E INVESTIGACION Y NUEVAS FUENTES DE OBTENCION DE PIGMENTOS ANTOCIANICOSYBETALAMICOS:

140

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141

nutrición relacionada con investigación del cáncer, un área de investigación compleja que presenta enormes desafíos .

La investigación rigurosa y concentrada ayudará a construir el conocimiento fundamentalmente de los eventos moleculares que gobi e rnan l a r e l ac i ón cánce r nutracéuticos, conocimiento que será esencial para desarrollar estrategias basadas en evidencias para prevención de cáncer a través de la modificación de la dieta incluyendo estos compuestos .

Entre estos compuestos están los pigmentos como las antocianinas y betalaínas , los cuales ya se hanmencionado anteriormente y están siendo investigados en esta nueva área que es la quimioprevención, observándose que las investigaciones relacionadas con antocianinas se han realizado en fuentes vegetales como la uva y bayas de arándanos, frambuesas, moras, zarzamoras , grosellas oscuras entre otras .

Asimismo estas investigaciones son realizadas principalmente en países de América del norte y Europa de donde son oriundas estas frutas a parte que se puede obtener fácilmente extractos concentrados o se pueden aislar los pigmentos antocianicos (Figs 3.AyB) .

56,58

58

56,57

59

A

B

Fr u tos de bayas de “hierba carmín” (A) y de

“arándano” (B)

Phytolacca americana Vacciniummyrtillus

Fig. 3.

59

36

47

60

En América latina incluido nuestro país no se han realizado esta clase de estudios, lo cual se debe a la falta de información sobre plantas oriundas del medio que contengan alta concentraciones de estos pigmentos o también a la falta de interés o información. Pero se podría realizar esta clase de investigaciones porque en nuestro país hay vegetales que poseen cantidades apreciables de estos pigmentos como es el caso del maíz morado, camote morado, y otros tipos de bayasque crecen en la zona andina .

El maíz morado posee diversos compuestos fenólicos y una alta cantidad de antocianinas , por lo que sería interesante e importante que se realicen diversas investigaciones promisorias para la sostenida batalla contra el cáncer dirigiéndose al área quimiopreventiva a través de la realización de estudios preliminares donde el estudio se haría en las antocianinas (como extracto de una fuente vegetal), y luego aislarlas , para que sean sustancias activas ya sea para colocarlas en los alimentos procesados como bebidas, yogures entre otras como un aditivo con actividad nutracéutica o en productos f a rma c éu t i co s c omo p a s t i l l a s o comprimidos, y también como cremas protectores contra agentes que ocasionen cáncer en este caso sería a la piel . También produciría un gran impacto en la economía nacional; ya que el Perú es el único país con sembríos comerciales de maíz morado constituyendo un gran potencial como materia prima para la fabricación de dicho producto.

En cuanto a las betalaínas son menos empleadas en el procesamiento de alimentos, a comparación de las antocianinas y carotenoides aunque estos pigmentos hidrosolubles, estables entre pH3 y 7 son preparados para pigmentar alimentos ácidos . La fuente industrial más importante de betalainas principalmente de betaninas (grupo de betacianinas) es la remolacha o betarraga ( ), por lo que los estudios se están dirigiendo h a c i a l o s c u l t i v o s c e l u l a r e s correspondientes así como, las raicillas pero hasta ahora no se puede competir con la raíz de la planta adulta (50­60 t/ha con . 0.5 g betanin/kg) con respecto a la acumulación de betaninas, pues esta última es muy

Beta vulgaris subsp. vulgaris

9(1)2006 Pigmentos antocianicos

142

superior (60). Actualmente están siendo caracterizadas los pigmentos betalámicos e investigadas a nivel de cultivos celulares:

y (Figs 4AyB).

Portulacca grandiflora Dorotheantus bellidiformis 61

A

A

B

F lor a ción comú n de P or t u la ca ( y un cultivo de callo derivado (A) y floración común y un cultivo en suspensión derivado de

(B)

Portulaca grandiflora)

Dorotheantusbellidiformis

Fig. 4.

62,63,64,66

62,63

66.

En la búsqueda de otras fuentes vegetales que se puedan aislar, investigar e industrializar están las betacianinas de las plantas de la familia Amarantaceae fueron probadas para evaluar sus propiedades colorantes y estabilidad pigmentaria en modelos de sistemas alimentarios , entre ellas t e nemo s a , “Kiwicha” especie altamente nutritiva, que está fuertemente difundida en la zona andina del Perú

Ama r a n t h u s c a ud a t u s

A

B

Ch en opod ium qu in oa

Amaranthus caudatus

”Qu in u a ” var iedad r osada de J unín (A) y

“kiwicha”(B) ambas especies se cultivan en la zona andina del Perú

Fig. 5.

Chenopodiumquinoa

Otros trabajos se han realizado en Ch en op od i á c ea s , c omo l a qu i nu a

donde se determinó que la producción de las betalainas aumenta por factores abióticos adversos principalmente por influencia de la luz y radiación Uv (fig 5A). Este vegetal también se cultiva ampliamente en nuestro país en las ciudades de Huancavelica, Ayacucho, Puno y en el Cusco donde se están evaluando70 ecotipos delValle de Vilcanota, con la participación del INIA (InstitutoNacional de InvestigaciónAgraria) .

67

66

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143

CONCLUSION

Las antocianinas y betalainas son pigmentos naturales que son utilizados en la industria alimentaria como aditivos colorantes para diversos productos, mejorando sus propiedades organolépticas pero últimas investigaciones han demostrado que también podrían ser empleadas en la industria farmacéutica debido a queposeen interesantes propiedades biológicas tales como actividad antioxidante y efecto quimiopreventivo del cáncer, por lo que se podría prevenir esta enfermedad con es tos compues tos polifenólicos. También estos descubrimientos otorgarían un valor adicional a los alimentos y extractos que contengan tanto pigmentos antociánicos como betalámicos en productos comerciales ya que los compuestos aislados pueden ser empleados como ingredientes funcionales o principios activos por sus cualidades colorantes, antioxidantes y quimiopreventivas.

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( Wil ld )

Chenopodium qu in oa

Correspondencia: Priscilla SeijasBernabé LasGaviotas 1250Urb.Los Pinos ­Trujillo Teléfono: (044) 9654892 CorreoElectrónico: Priseb@yahoo.es

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México. 1997. • HammerMF,Horai S.TheRole of theChromosome inHumanEvolutionaryStudies. EvolAntropol 1997; 12:116­134. • Yengle J,Ramirez J. Prevalencia de geohelmintos y algunos factores epidemiológicos asociados en niños de 06mes a 09 años

del del Sector de la Campiña delDistrito deMoche. Tesis de Bachiller enMedicinaUniv.Nac. deTrujillo. Perú. 1996. • GreashamR, Inamine E.Nutricional Improvement of Processes. In:DemainA, SalomonN (eds).Manual of industrial Microbiology

andBiotechnology.American Society formicrobiology1979. • Sánchez VG Cisneros F. Ocurrencia estacional de Sp odoptera (J.E. Smith), Heliothis zea (Boddie) (Lepidotera:

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el orden debe ser: título, autor (es), institución (es) resumen con palabras claves al final, abstract con keywords al final, cuerpo (donde en forma continua y resumida se redactará la introducción,material ymétodos, resultados (se puede incluir Tablas yFiguras), discusión, agradecimientos (si lo hubiera) y referencias bibliográficas.

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