7/24/2019 Prueba de Kastle

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Prueba de Kastle-MeyerLa prueba de Kastle-Meyeres una prueba forensepreliminar, descrita por vez primera en1903, en la que se usa el indicadorqumicofenolftalena. Se fundamenta en la actividad,similar a unaperoxidasa, de lahemolobinaen la sanre, para catalizar la oxidaci!n de lafenolftalina "la forma reducida incolora de la fenolftalena# a fenolftalena, que es visible por sucolor rosado brillante.

ndice

$ocultar%

1 &'todo

( Limitaciones

3 &ecanismo

) *eferencias

Mtodo$editar%

+na muestra que se presume contena sanre es recolectada con una torunda. Se le areauna ota de reactivo fenolftalina, despu's de unos seundos, se aplica una ota de per!xidode hidr!enoa la torunda. Si la torunda se vuelve rosada r-pidamente, se dice que la pruebapreliminar de sanre es positiva. Si se ha de esperar m-s de 30 seundos, resultar- en quemuchas torundas se vuelvan rosadas naturalmente, puesto que se oxidar-n por su cuenta enel aire.

pcionalmente, la torunda puede ser tratada primero con una ota de etanol, con el fin de lisarlas c'lulas presentes, anar sensibilidad especificidad. /sta prueba no es destructiva de lamuestra, que puede uardarse ser usada en otras pruebas en el laboratorio sin embaro,pocos laboratorios usaran la misma torunda usada en la prueba de astle2&eer en cualquierotra prueba, optando en su luar por usar una nueva torunda de la muestra oriinal.

Limitaciones$editar%

unque se ha reportado que la prueba de astle2&eer es capaz de detectar diluciones desanre hasta de 14105, ha un n6mero de limitaciones importantes para el test. La prueba dar-un resultado falso positivo en la presencia de peroxidasas veetales, como los encontrados enla cola de caballo, br!coli, coliflor, etc.1dicionalmente, otras especies oxidantes en lamuestra causar-n un falso positivo. xidantes qumicos como las sales de cobreo

de nqueltambi'n causar-n que el reactivo de astle2&eer se vuelva rosado antes de laadici!n del per!xido de hidr!eno, por lo que es de vital importancia arear el reactivoprimero, esperar unos cuantos seundos, lueo arear el per!xido de hidr!eno.

La prueba de astle &eer tiene la misma reacci!n con la sanre humana que con cualquierotra sanre basada en hemolobina, as que debe realizarse una prueba confirmatoria, comola prueba de uchterlonpara concluir definitivamente de qu' especie proviene la sanre.

Las pruebas catalticas de color son mu sensibles, pero no especficas. +n color positivo dela prueba, solo, no debe ser interpretado como una prueba positiva de la sanre. Sin embaro,

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7/24/2019 Prueba de Kastle

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un resultado neativo es eneralmente prueba de la ausencia de cantidades detectables deheme.

Mecanismo$editar%

La fenolftalena usada en esta prueba ha sido modificada de su forma convencional, en que

ha sido reducidapor dos electrones, predisuelta en una soluci!n alcalina. /sto se consiuetpicamente hirviendo una soluci!n alcalina de fenolftalena con polvo de zinc, que reduce lafenolftalena a fenolftalina. 7on la reducci!n, el color rosado intenso de la fenolftalena sedesvanece a un color amarillo d'bil. /s en esta forma como est- presente en los 8its de laprueba de astle2&eer. 7on el fin de eneral el color rosado intenso indicativo de una pruebapositiva, la fenolftalena reducida debe ser oxidadade vuelta a su forma coloreada normal.

/n la reacci!n relevante, el per!xido de hidr!enoreacciona con lahemolobinaen la sanre.La fenolftalena no participa en este primer proceso. /n su reacci!n con el per!xido dehidr!eno, el centro hemode la hemolobina sufre la reacci!n dehom!lisisdel enlace 24

: ;e3:$hemo% < ;e):=$hemo% : > : :

Los productos de esta reacci!n son un equivalente tanto de la especie de oxo hierro de

valencia alta, el radical hidroxilo, cualquier de los cuales es capaz de oxidar lafenolftalena reducida hacia la forma coloreada. La cantidad de -cido producido en estareacci!n es insinificante en comparaci!n con la concentraci!n de la base presente en lasoluci!n de reactivo de fenolftalina. dem-s, esta reacci!n de heme con per!xidoes cataltica, haciendo de la prueba mu sensible a peque?as cantidades de sanrepresentes en la torunda de prueba.

Referencias$editar%

1. @olver arriba A7ox, &. "1991#. B Stud of the Sensitivit and Specificit of ;our

Cresumptive Dests for EloodF. J. Foren. Sci. 3G"H#.

na 7astello Conce and ;ernando . @erdu Cascual. 7ritical *evision of CresumptiveDests for Eloodstains. ;orensic Science 7ommunications. Iul1999.http4JJKKK.fbi.ovJabout2usJlabJforensic2science2communicationsJfscJul1999Jindex.htmJponce.htm 7ulliford, E., Dhe /xamination andDpin of Eloodstains in the 7rime Laborator. +.S. Movernment Crintin ffice, 1951.&etropolitan Colice ;orensic Science Laborator, Eiolo &ethods &anual. 195N.Saferstein, *., ;orensic Science andboo8. Crentice all, Onc., 19N(. ir8, C.L., 7rimeOnvestiation. Iohn Pile and Son, 195). Maensslen, *., Sourceboo8 in ;orensic Serolo,Ommunolo, and Eiochemistr. +.S. Movernment Crintin ffice, 19N3.

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