Universidad Autnoma MetropolitanaUnidad Xochimilco

lvarez Romn Thania SarahiLarios Ayala Claudia

Aroz Vsquez AlbertoLoeza Coatzozon Grisel

Corrales Andrade Tania GabrielaMartnez Martnez Carlos

Cruz Hernandez BrendaNavarrete Gonzlez Diana Alejandra

Curiel Rojo Alicia MaribelQuiroz Martnez Irving

Dimas Guzmn Cristian Ramrez Vega Aura

Garca Betanzo DelfinaTrejo Lara Melina

Gonzlez Cruz Lucero EdithTurcio Gil Julia Mara

Hernndez Acosta Juan CarlosValerio Ordua Sofa Lizeth

Jernimo Hernndez EduardoVentura Maqueda Diana

Divisin: Ciencias Biolgicas y de la salud.

Departamento: Ciencias Biolgicas.

rea de investigacin: Cientfica.

Ttulo del Proyecto: Agentes patgenos presentes en el agua de los bebederos de las unidades de la Universidad Autnoma Metropolitana

Fecha de inicio: 25/09/2015Fecha de trmino: 4/12/2015

Lugar donde se desarrolla el proyecto: Universidad Autnoma Metropolitana unidad Xochimilco.

Resumen:El agua potable, pasa por procesos fisicos y quimicos con el fin de mejorar su calidad y pueda ser de consumo humano; entendemos que el agua contiene organismos vivos que reaccionan con sus elementos fisicos y quimicos, por lo que es necesario que pase por procesos de purificacin para que sea adecuada para su consumo; Nuestro objetivo es conocer si hay presencia de enterobacterias en los bebederos de la Universidad Autnoma Metropolitana unidades Xochimilco, Cuajimalpa, Azcapotzalco, Iztapalapa, Lerma y Rectora. El estudio es de tipo observacional y longuitudinal. Se tomaron muestras del agua de los bebederos de las diferentes unidades y de rectora, las muestras se tomaron mediante la tcnica de chorro medio y se colocaron en recipientes esteriles de 50 ml. Posteriormente se prepararan las siembras de cultivo en un medio selectivo, despus de 24 hrs se analizarn sus caracteristicas mediante un microscopio y se observara si son Gram + o - mediante la prueba de tincin, por ltimo las pruebas bioquimicas para la identificacin del tipo de bacterias, siendo solo una de las muestras contaminada con enterobacterias, la muestra proveniente de Rectora.

Abstract:

The water goes through physical and chemical processes in order to improve its quality and may be of human consumption; we understand that the water contains living organisms that react to their physical and chemical elements, so it is necessary to go through processes of purifacation to make it suitable for consumption; Our goal is to know if there is presence of enterobacteria in the troughs of the Universidad Autnoma Metropolitana Xochimilco, Cuajimalpa, Azcapotzalco, Iztapalapa, Lerma and Rectory units. The study is observational type. Water samples were taken from the different units and rectory, samples were taken using the technique of midstream and placed in 50 ml sterile containers. Later the samples were prepared in a selective medium, after 24 hrs its characteristics will be analyzed under a microscope and observe if they are Gram + or - Finally the biochemical tests were taken to identify the type of bacterias, being only one of the samples contaminated with enterobacteria, those saples were from Rectory.

Introduccin:El agua es un recurso vital para los seres humanos, sta se encuentra sobre la superficie del planeta y se calcula que el volumen total de agua del planeta equivale a 1,390 millones de km3.[footnoteRef:1] Sin embargo de este total, gran parte del agua no es posible ser directamente utilizable por los seres humanos, slo el 2.5% del total equivale al agua dulce, el resto es agua salada.[footnoteRef:2] [1: Mizari-Hiriat, M. (2003) El agua como recurso. Cmo ves? Revista de Divulgacin de la ciencia de la UNAM. 54: 10-12.] [2: dem]

A pesar del pequeo porcentaje que puede ser consumible, ste ha disminuido progresivamente debido a la contaminacin de los sistemas acuticos, a travs de sustancias como: metales, grasas, aceites, derivados de combustibles, disolventes y miles de microorganismos.Ahora bien, respecto al agua que se puede consumir, encontramos el agua potable. Esta agua pasa por operaciones y procesos, fsicos y qumicos con el fin de mejorar su calidad, hasta hacerla apta para su uso y consumo humano, potabilizacin es entonces diferente a filtracin; un proceso de filtracin es aquel que se lleva a cabo con la finalidad de remover las partculas suspendidas en el agua, hacindolas fluir a travs de un medio filtrante de porosidad adecuada.[footnoteRef:3] Entendemos que el agua contiene organismos vivos que reaccionan con sus elementos fsicos y qumicos por lo que es necesario tratarla para que sea adecuada al uso como abastecimiento de la poblacin ya que los microorganismos causantes de enfermedades que se transmiten por el agua la hacen peligrosa para el consumo humano. [3: Secretaria de Salud. Estados Unidos Mexicanos (2000) Norma oficial mexicana NOM-127-SSA1-1994, "Salud ambiental agua para uso y consumo humano - Limites permisibles de calidad y tratamientos a que se debe someterse el agua para su potabilizacin". Recuperado de http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/127ssa14.html Fecha de consulta 29 Septiembre 2015.]

Metodologa:Material: Cajas de agar MacConkey Frascos estriles 50 ml Tubo estril con tapn de rosca o de algodn de 16x150 mm Pipeta estril de 10 ml Pipetas estriles de I ml Propipeta o pipeteador manual Mechero Gradilla Pipeta Pasteur Solucin salina isotnica (SS1), estril. Microscopio Asas bacteriolgicas Hisopos estriles Portaobjetos Cubre objetos Cubre bocas Cerillos o encendedor Mechero Hipoclorito al 10% Masking tape Juegos para uncin de Gram Frasco gotero con aceite de inmersin Tiras de papel filtro Whatman No.1 de 2x3 cm estriles Frasco gotero mbar con reactivo para la prueba de oxidasa Frasco gotero mbar con agua oxigenada al 3%. Tubos 13x 100mm con medio agar Hierro Triple Azcar (TS1) (Medio inclinado, color anaranjado) Tubos 13x1(10mm con Caldo Urea (Color rosa) Tubos de I 3x100mm con medio inclinado de agar Cidrato de Sintamos (Medio inclinado color verde) Tubos de 13x100mm con caldo semislido de SIM (Color mbar) Tubos de 13x 100mm con caldo VP-RM (Voges Proskauer-Rojo de Metilo) (Color mbar)

Trabajo en laboratorio:

PRIMERA SESIN: Sembrado en Agar MacConkeyAntes de comenzar a trabajar fue importante realizar la esterilizacin de rea de trabajo para evitar cualquier tipo de contaminacin.

Para el cultivo de la muestra estas fueron tratadas de dos maneras:1) Dilucin de la muestra 1:10, que consiste en tomar 1ml de la muestra y diluirla en 9ml de Solucin Salina Isotnica estril (SSI) 2) Muestra directa, sin ningn tipo de dilucin

En ambos casos el cultivo se realiz de la misma manera: Con ayuda de un el asa bacteriolgica estril se tom una pequea cantidad de la muestra de agua y se procede a estriar el inocuo en la caja de Petri sobre el agar siguiendo un patrn de cuatro cuadrantes y una estra abierta.

Cada agar se sell con un pedazo de masking y se etiquet con los datos solicitados; especificando el nmero de muestra y si era diluida o pura.

Las cajas de agar MacConkey se incubaron a 37 C durante 24 horas. SEGUNDA SESIN: Aislamiento y observacin de las caractersticas macroscpicas y microscpicas de las Enterobacterias.

Despus de la incubacin de las muestras, se realiz la seleccin de colonias desarrolladas de agar MacConkey para asi llevar acabo la resiembra de stas, con la finalidad de obtener un cultivo puro de bacterias.

Observacin microscpica de los cultivos seleccionados por Tincin de Gram.Para la observacin microscpica de las bacterias desarrolladas se prepar el frotis con la tincin con la finalidad de determinar si las enterobacterias presentes eran de carcter Gram+ o Gram- as como su morfologa.

TERCERA SESIN: Pruebas de identificacin bioqumica de los cultivos puros seleccionados Prueba de catalasa: Mediante esta prueba se pretende conocer si las bacterias reaccionan ante la presencia de perxido de hidrgeno, aquellas bacterias positivas liberan pequeas burbujas y las negativas no las producen al adicionar el agua.

Prueba de la oxidasa: El objetivo de dicha prueba es conocer si las bacterias son o no organismos aerobios o anaerobios. Se utiliza el reactivo clorhidrato de p-fenilendiamina, en dnde aquellos organismos positivos producen un color negro o azul intenso en 10 segundos, puede existir una reaccin retardada si ocurre entre 10 y 60 segundos despus de haber utilizado el reactivo. Si rcidyr un cambio de color despus de los 60 segundos, la reaccin es negativa. Los diferentes cultivos fueron sometidos a distintas pruebas bioqumicas, las cuales fueron: Voges-Proskauer, Rojo de metilo, Citrato de Simmons, Indol cido sulfihidrico, Ureasa, TSI (hierro triple azcar)

Se realizaron los mismos pasos en tres ocasiones, la primera sin bacterias para los tubo de control, la segunda para los tubos con la muestra pura y la tercera para los tubos con las muestra diluida 1:10Todos los tubos se dejaron incubar a 37 C durante 24 horas CUARTA SESIN: Lectura de pruebas bioqumicas

Resultados:. En el caso de las muestras de Rectora de los 10 cultivos totales solo 2 presentaron desarrollo de colonias bacterianas, ambas correspondieron a la muestra nmero 5 (Dosificador de la caseta de vigilancia en la entrada principal) observando mayor desarrollo en el cultivo puro a comparacin con el cultivo diluidoAl observar las tinciones al microscopio se determin que las enterobacterias presentes en dicha muestra eran de carcter Gram+ debido a que presentaban una coloracin azul violeta. Tambin se observ la presencia de un hongo en segundo plano

COLONIA 1Muestra PuraCOLONIA 2Muestra 1:10

MORFOLOGA COLONIAL

FormaCircularCircular

ColorAmarillo / DoradoAmarillo / dorado

ElevacinUmbilicada con rugosidadUmbilicada con rugosidad

BordeIndefinidoIndefinido

ConsistenciaViscosaViscosa

TamaoGrande y puntiformeGrande y puntiforme

OpacidadAusenteAusente

SuperficieIrregularIrregular

COLONIA 1Muestra PuraCOLONIA 2Muestra 1:10

PRUEBAS BIOQUMICAS

Voges ProskauerNegativaNegativa

Rojo de MetiloNegativaNegativa

Citrato de SimmonsPositivaPresenta crecimiento con ligero cambio de coloracin hacia un tono azul verdosoPositivaPresenta ligero crecimiento con cambio de coloracin hacia un tono azul intenso

IndolNegativaNegativa

cido Sulfhdrico (H2S)NegativaNegativa

MovilidadPositivaPositiva

UreasaPositivaPositiva

TSI (hierro triple azcar)PositivaPico de flauta rojo y Profundidad amarillo.Medio Alcalino/cido (Alc/A).PositivaPico de flauta rojo y Profundidad amarillo.Medio Alcalino/cido (Alc/A).

Despus de realizar las pruebas necesarias se pudo determinar la presencia de Enterobacterias en las muestras del agua recolectadas en uno de los dispensadores de la Rectora de la UAM que est localizado en la caseta de vigilancia de la entrada principal y en base a la identificacin bioqumica las posibles bacterias presentes en dicha muestra podran ser: Shigella, Grupos A, B, C Shigella, S. Sonnei Edwarsiella, E. Tarda Salmonelleae Citrobacter, C. Koseri Hafnia, H. Alves Pantoea, P. Agglomerans Serratia, S. Marcescens Proteus, P. Vulgaris Proteus, P. Miriabilis Morganello, M. Morganii Providencia, P. Rettgeri Providencia, P. Stuartii Providencia, P. Alcalifaciens

Es importante resaltar que le objetivo de esta investigacin es solo evidenciar la presencia de las Enterobacterias, ya que si se desea especificar cul es el organismo presente en dichas muestras se tendra que proceder a realizar las pruebas especficas correspondientes.En relacin a las muestras de los bebederos de la Universidad Autnoma Metropolitana unidades Cuajimalpa, Lerma, Xochimilco y Azcapotzalco no hubo desarrollo de bacterias dentro de las muestras de agua que se distribuye en los bebederos, en cuanto a la Unidad Iztapalapa el servicio est suspendido por lo que no hubo muestras.

CONCLUSIN:

A travs de la investigacin se verific que el agua que es distribuida en las diferentes unidades de la Universidad Autnoma Metropolitana es apta para el consumo humano, puesto que se encuentra libre de entero- bacterias.Sin embargo, es importante mencionar que slo una de las muestras recolectadas dio como positivo a la presencia de Entero-bacterias, la muestra hace referencia al agua recolectada en Rectora, cabe recalcar que no hay bebederos, por lo que para la distribucin del agua se utiliza un dispensador en donde se colocan los garrafones de agua, dado que solo la muestra tomada de este dispensador gener colonias de Entero-bacterias, creemos que el agente contaminante puede ser el dispensador, es posible que ste se encontrara sucio o sin mantenimiento adecuado, con esta interrogante dejamos la investigacin concluida y abierta a nuevas incgnitas para la realizacin de investigaciones posteriores.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS.

1. Mizari-Hiriat, M. (2003) El agua como recurso. Cmo ves? Revista de Divulgacin de la ciencia de la UNAM. 54: 10-12.2. Organizacin de Naciones Unidas (2002) Agua: Cuestin de Vida y Muerte. En Boletn ONU naciones unidas. Centro de informacin para Mxico, Cuba y Repblica Dominicana. 02/175.3. Comisin Nacional del Agua (2014) Captulo 6: Agua, salud y ambiente. Estadsticas del agua en Mxico. Mxico. 140.4. Secretaria de Salud. Estados Unidos Mexicanos (2000) Norma oficial mexicana NOM-127-SSA1-1994, "Salud ambiental agua para uso y consumo humano - Limites permisibles de calidad y tratamientos a que se debe someterse el agua para su potabilizacin". Recuperado de http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/127ssa14.html Fecha de consulta 29 Septiembre 2015.5. Cazares Estrada, Lizett Arianna Agua Purificacin Agua, purificacin, pozos, bombas y Lampara Ultravioleta pp. 51-536. Ing. Orellana, Jorge A. Caractersticas del agua potable en Ingeniera Sanitaria- UTN FRRO, http://www.frro.utn.edu.ar/repositorio/catedras/civil/ing_sanitaria/Ingenieria_Sanitaria_A4_Capitulo_03_Caracteristicas_del_Agua_Potable.pdf, consultado el 20-09-15 a las 18:45pm7. Rodier, J (1990). Anlisis de las aguas: aguas naturales, aguas residuales, agua de mar. Barcelona: Ediciones Omega, S.A.8. Romero, J (2009). Calidad del agua. Colombia: Editorial Escuela Colombiana de Ingeniera.