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Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén
ESPECTROFOTOMETRÍA UV-VISIBLE
Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén
1. Propiedades de la luz
2. Absorción de luz
4. Instrumentación
4.1. Fuente de radiación
4.2. Selector de longitud de onda
4.3. Recipientes para muestra
4.4. Detector
2.1. Fenómeno de la absorción
2.2. Espectros de absorción molecular
2.3. Tipos de transiciones electrónicas
3. Ley de Lambert-Beer
Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén
longitud de onda (λ)
1. Propiedades de la luz
λ ν = c
Longitud de onda x Frecuencia = velocidad de la luzOnda
Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén
Longitud de ondaEnergía
1. Propiedades de la luz
ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO
Longitud de onda (nm)
Luz visible
Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén
Estadofundamental
Estadosexcitados
ABSORCIÓNDE RADIACIÓN (hν)
EMISIÓNDE RADIACIÓN (hν)
2. Absorción de luz
- Cuando una molécula absorbe luz aumenta su energía
- Cuando una molécula emite luz disminuye su energía
Ener
gía
2.1. Fenómeno de absorción de radiación
Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén
Energía
2. Absorción de luz
Longitud de onda (nm)
e-
Rotura de enlacee ionización
excitaciónelectrónica
vibración
Luz visible
Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén
S0
S1
Niveles rotacionales
Niveles vibracionales
V0
V1
V1
Vo
V2
Ener
gía
2. Absorción de luz
Transicioneselectrónicas
2.2. Espectros de absorción molecular
h ν (UV-Vis)
Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén
2. Absorción de luz
Transiciones electrónicas y espectros UV-Visibleen moléculas
Transiciones electrónicas y espectros de los átomos
S1
S2
Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén
Longitud de onda (nm)200 250 300 350
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
A
Ác. acetilsalicílico
Paracetamol
Cafeína
Propifenazona
2. Absorción de luz
ESPECTRO DE ABSORCIÓN
Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén
2. Absorción de luz
AZUL DE BROMOFENOL (λmax = 614 nm)
Luz blanca Luz azul
*
Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén
2. Absorción de luz
*
*
Espectro de absorción de la clorofilaen la región visible. Obsérvese queabsorbe en las regiones del rojo y delazul.
Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén
1. Propiedades de la luz
2. Absorción de luz
4. Instrumentación
4.1. Fuente de radiación
4.2. Selector de longitud de onda
4.3. Recipientes para muestra
4.4. Detector
2.1. Fenómeno de la absorción
2.2. Espectros de absorción molecular
2.3. Tipos de transiciones electrónicas
3. Ley de Lambert-Beer
Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén
Fuentede luz
Selector de longitudde onda
Detectorde luz
b
Io I
Instrumentación para medir absorción de luz
Muestra I ≤ Io
I0 (intensidad radiante) I (intensidad transmitida)
3. Ley de Lambert-Beer
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Io I
b
c
Ley de Lambert-Beer → A = ε b cε : coeficiente de absortividad molar (l mol-1 cm-1)b : espesor de la célula (cm)c : concentración (moles/l)
3. Ley de Lambert-Beer
- Transmitancia → T = I / Io
→(fracción de la luz incidente que sale de la muestra)→ varía entre 0 y 1
- Absorbancia → A = - log T = log (Io / I)
Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén
1. Propiedades de la luz
2. Absorción de luz
4. Instrumentación
4.1. Fuente de radiación
4.2. Selector de longitud de onda
4.3. Recipientes para muestra
4.4. Detector
2.1. Fenómeno de la absorción
2.2. Espectros de absorción molecular
2.3. Tipos de transiciones electrónicas
3. Ley de Lambert-Beer
Mª Luisa Fernández de CórdovaUniversidad de Jaén
4. Instrumentación
Fuentede luz
Selector de longitudde onda
Detectorde luz
b
Io I
Instrumento para medir intensidad de radiación
Muestra
Espectrofotómetro
Fuente de radiación
Sistema de selección de longitud de onda
Recipiente para la muestra
Detector
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MONOCROMADOR
rendija entrada
rendija salida
red o prisma
fuenteespejos
detector
4. Instrumentación
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MONOCROMADOR DE RED 4. Instrumentación
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4.3. Recipientes de muestra
UV : cuarzo
Visible: cuarzo o vidrioMaterial
4. Instrumentación
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Macro-células
UV Vis
Células semi-micro
UV Vis
4. Instrumentación
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4. Instrumentación
Esquema de un espectrofotómetro de haz simple
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ESPECTROFOTÓMETROS, FOTÓMETROS, COLORÍMETROS
Espectrofotómetros portátiles
Espectrofotómetro de doble haz
4. Instrumentación