prácticas ftos. microbiología aplicada
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Prácticas de Fundamentos de Microbiología Aplicada (4º Biología UAH)* Detección de actividades bioquímicas en bacterias: hidrólisis de almidón, proteínas, lípidos, celulosa y xilano; utilización de hidratos de carbono.* Análisis microbiológico de agua de piscina.* Estudio de la sensibilidad de un microorganismo a un antibiótico “in vitro” por la técnica de macrodilución en caldo (C.M.I y C.M.B).* Búsqueda de Salmonella en carne picada.* Observación de las bacterias acéticas y de levaduras de la flor del vinagre.TRANSCRIPT
Alberto Fonte Polo 4º Biología (2009-2010)
Escherichia coli
Bacillus subtilis
Pseudomonasaeruginosa
Agar Almidón
Amilasas
Lugol
Staphylococcus aureus
Bacillus subtilis Pseudomonasaeruginosa
Agar Spirit Blue
Lipasas
Escherichia coli
Bacillus subtilis
Enterococcus faecalis
Agar Gelatina
Proteasas
Reactivo de Frazier
Proteus vulgaris
Tubos con caldo lactosado y caldo
con sacarosa con campana
Durham
Utilización de azúcares
AmarilloGas
E. coli
Fermentativo
Medio de Hugh y Leifson
Oxidación/Fermentación de azúcares
vaselina
Enriquecimiento
Caldo Mc Conckey con
campana Durham
Caldo Rothe
Caldo GiolittiCantoni
E. coli
Enterococcus faecalis
Staphylococcus aureus
vaselina
TurbidezAmarillo
Gas
Turbidez
TurbidezEnnegrecimiento
Aislamiento
E. coli
Agar Levine
Enterococcus faecalis
Medio KAA Agar Cetrimida
Pseudomonas aeruginosa
Aislamiento Confirmación
Medio Baird-Parker PCA
Colonias negras y con halo de aclaramiento
Colonias doradas
Pruebas confirmativas
Tinción de Gram
E. coli Pseudomonas aeruginosa
Bacilo
Gram –
Bacilo
Gram –
Pruebas confirmativas
Tinción de Gram
Enterococcus faecalis Staphylococcus aureus
Diplococos
Gram +
Cocos
Gram +
Pruebas confirmativas
E. coli
Pseudomonasaeruginosa
Prueba de la oxidasa
Oxidasa +
Oxidasa –
Pruebas confirmativas
Prueba de la catalasa
Catalasa +Catalasa –Enterococcus faecalis Staphylococcus aureus
Burbujas
Pruebas confirmativas
Medio KIA
Ac/Ac; SH2 –; Gas +24 h
Producción de indol
positivo
Escherichia coli
Pruebas confirmativas
Medio KIA
Alk/N.C.; SH2 –; Gas –
Microorganismo Oxidativo
Pseudomonas aeruginosa
Medio de Hugh Leifson
vaselina
Prueba O/F de la glucosa
Pruebas confirmativas
Formación de pigmentos
Piocianina Pioverdina
Pseudomonas aeruginosa
Actividad ureasa
Medio King A Medio King B
Positivo
Tubo de agar-urea
Pruebas confirmativas Pseudomonas aeruginosa
Reducción de nitratos
¿negativo?
Reactivo A Reactivo B
Limaduras de zinc
PositivoTubo de caldo
nitratado
Pruebas confirmativas
Crecimiento en caldo BHI con
NaCl 6,5%
Turbidez en
ambos tubos:
Prueba positiva
Enterococcus faecalis
Crecimiento en caldo BHI a 42ºC
Pruebas confirmativas
Prueba positiva
Prueba de la DNAsa Prueba de la actividad proteolítica
Agar-gelatinaAgar-DNA
Prueba positiva
Control negativo
Control positivo
Turbidez No turbidez
0,25 0,5 1 2 μg/ml 4
CMI
CMB=4 μg/ml
Enriquecimiento
Medio de Müller-Kauffmann
Aislamiento
Medio XLD
24 h 48 h
Proteus sp.Salmonella sp.
Salmonella sp.¿ ?
Aislamiento
Medio HEA
24 hProteus sp.Salmonella sp.¿ ?
Pruebas confirmativas
Prueba de la oxidasa
Oxidasa –
Prueba de la catalasa
Catalasa +
Pruebas confirmativas
Tinción de Gram Medio KIA
Alk/Ac; SH2 +; Gas +
24 h
Bacilo
Gram –
Pruebas confirmativas
Prueba de la lisina descarboxilasaPrueba de la ureasa
positivonegativo
Pruebas confirmativasPrueba de
Voges-Proskauer
IMViC
Producción de indol
Rojo de metilo
Prueba del citrato
IMViC–+–+
Tubo de agua de peptona
Reactivo de Kovacs
RMVP RMVP Medio de Simmons
Potasaα-naftol
Rojo de metilo
Vinagre añejoVinagre jovenVino
Tinción de Gram
Gluconobacter sp.Acetobacter sp.
Bacilos Gram +
Vinagre de vino joven
Agar-Etanol-Carbonato cálcico
Vinagre de cerveza añejo
Medio YEM
Saccharomyces cerevisiae