Practica # 1:MICROSCOPIA CON

DIFERENCIACION DE CELULAS HEMATICAS.

Dra. Patricia Gómez Ruelas.

Familiarizar al estudiante con el uso del microscopio.

Fundamento:El microscopio es el instrumento de trabajo mas

empleado por el microbiólogo, a través del cual se observan las estructuras invisibles al ojo humano.

Se conocen diversos tipos de microscopios, con diferentes aplicaciones, como el óptico, el de campo obscuro , el de contraste de fase, el de la luz polarizada, el de fluorescencia y el electrónico

Objetivo:

1.- Limpiar las lentes con el papel esencial para dicho objetivo.

2.- Colocar en posición el objetivo seco débil (10x), que se conoce por el click que se escucha cuando esto se ha logrado.

3.- Encender la fuente luminosa. 4.- Colocar la preparación en la platina. 5.- Por el medio del tornillo del enfoque

grueso, bajar el tubo de microscopia hasta el tope.

USO DEL MICROSCOPIO.

6.- observando por los oculares, subir el tubo nuevamente hasta ver enfocada la preparación.

7.- Si se va a usar el objetivo seco fuerte (40x), después del paso 5, se cambia aquel sin necesidad de subir el tubo, si el microscopio lo permite.

Esta operación debe hacerse con cuidado, pues hay modelos de aparato que no son parafocales.

Repetir el paso 6, ajustando la intensidad luminosa por medio del condensador y el diafragma iris.

8.- para observar con el objetivo 100x (de inmersión) deberá colocarse una pequeña gota de aceite de inmersión sobre la preparación y se sigue el paso 6 para enfocar.

9.- al terminar de usarlos, limpiar los lentes con papel especial, sobre todo el objetivo de inmersión.

INMUNOLOGIA: estudio de los mecanismos fisiológicos que el ser humano y otros animales utilizan para defender su cuerpo contra la invasión por otros organismos.

Las enfermedades infecciosas son causadas por mos., que tienen la ventaja de reproducirse y evolucionar más rápido que los huéspedes humanos.

Durante una infección, el mo puede reproducirse. En respuesta, el cuerpo humano reproduce cels dedicadas a la defensa, conocido como sistema inmunitario

DIFERENCIACION DE CELULAS HEMATICAS

Anemias - serie roja.Leucemia e infecciones- serie blanca.Purpura- plaquetas

Ayuda al diagnostico en:

La observación microscópica de un frotis sanguíneo nos

indica:

Forma, tamaño y anormalidades de los eritrocitos que conducen al diagnostico de padecimientos

hematológicos.

El sitio anatómico de la hematopoyesis cambia con la edad. En las 1eras fases embrionarias, las céls sanguíneas se producen 1ero en el saco vitelino y más tarde en el hígado fetal. Del 3ero al 7mo mes de vida fetal, el bazo es el principal sitio de hematopoyesis.

Durante el desarrollo de los huesos en los meses 4to y 5to del crecimiento fetal, la hematopoyesis comienza a trasladarse a la médula ósea, y hacia el momento del nacimiento éste es el único sitio en que ocurre.

En el adulto la hematopoyesis se realiza principalmente en médula ósea de cráneo, costillas, esternón, columna vertebral, pelvis y fémures.

Estas células sanguíneas viven poco, deben renovarse continuamente, y la hematopoyesis es activa por toda la vida.

LINFOCITOSProvienen de los

linfoblastos de la medula ósea y se distribuyen en

la sangre, donde corresponden de 20 a 30% de los leucocitos

circulantesSe dividen en: B y T

pequeños- miden entre 6 a 10 um de diámetro.

Grandes – miden entre 10 a 20 um de diámetro.

Se clasifican:

CARACTERISTICAS:

Núcleo voluminoso en comparación con el citoplasma, redondo u ovalado y muy basófilo, se colorea de color rojo violáceo obscuro y su cromatina es densa.

Su citoplasma se tiñe de color azul celeste intenso.

Fiebre. Hepatitis vírica. Hipertiroidismo. Leucemia linfocítica Tuberculosis. Mononucleosis infecciosa. Paperas. Rubeola. Tosferina.

Los linfocitos se encuentran elevados en:

NEUTROFILOS.

Leucocitos mas abundantes en la sangre del humano

Representa del 50 al 60 % del total de leucocitos

IMPORTANCIA EN:- Componente celular de la inflamación

infecciosa aguda.- Inflamación mediada por bacterias

patogénicas.- Reacciones en las que intervienen complejos

antígeno- anticuerpo.

Marginan las cavidades de las células

endoteliales, se adhieren a esta y cruzan los sitios

de lesión

Diámetro aproximado entre 11 a 14 um.

Citoplasma abundante, lleno de gránulos pequeños que no se tiñen en forma intensa con colorantes ácidos ni básicos.

El núcleo se tiñe de rojo violáceo constituido por dos o mas segmentos unidos entre si por filamentos de cromatina

Características

Eosinofilos.

En sangre se encuentran del 1- 5 %

Citoplasma incoloro, cubierto de granulaciones refringentes ricos en arginina y tienen afinidad por los

colorantes ácidos como la eosina y se tiñe de un color rojo anaranjado.

Núcleo excéntrico en el citoplasma y bilobulado y elipsoide

SE ENCUENTRAN ELEVADOS EN:

• Alergia a fármacos.• Anemia perniciosa.• Picadura de araña viuda negra.• Asma bronquial.• Colitis ulcerativa.• Enfermedad de Cronh.• Dermatitis hipertiforme.• Enfermedad por Echinococcus.• Policitemia vera.• Postradiccion.• Triquinosis.

• Eritema multiforme.• Fiebre de heno.• Intoxicación por fosforo.• Gastroenteritis eosinofilica.• Enfermedad de Hodgkin• Leucemia miolegena crónica.• Pénfigo.• Poliarteritis nudosa.• Postesplenectomia.• Sarcoidosis.• urticaria

Basófilos.

Diámetro de 14-

18 umCitoplasma se

tiñe de color rosa

leve o incoloroNúcleo no plenamente segmentado y puede ser disimulado por los abundantes gránulos

ELEVADOS:Anemia hemolítica crónica.

Embarazo.Mixedema.Nefrosis.

Enfermedad de Hodgkin.

Fase de infección aguda.

Leucemia miologena crónica.

Metaplasia mieloide.

Policitemia veraSinusitis crónica.

varicela

DISMINUIDOS O NEGATIVOS EN :

Hipertiroidismo.Postesplenectomia.

postradiacion

Monocitos.

Leucocitos

sanguíneos

fagociticos.

1-3% de los leucocitos en circulación.

Miden entre 10-

20 um

Núcleo voluminoso, puede ser ovalado,

escotado o en forma de riñón o

herradura.Citoplasma abundante .

ELEVADOS:

SarcoidosisTifus.

tripanosomias

is

Enfermedad de Hodkin

Intoxicación por

tetracloroetano.Tuberculosis.

Artritis reumatoide.Brucelosis.

Colitis ulcerativa

crónica

Malaria.Metaplasia

mieloide.Policitemia vera.

Fiebre macular de las montañas

rocosas.Leucemia monocitica.

Lupus eritematoso sistémico.

Enfermedad de Crohn

Endocarditis infecciosa

Enfermedad de Gaucher

Eritrocitos.

Forma bicóncava, sin núcleo y de

color rojo-amarillento

Mide 7-7.5 um

Plaquetas. miden de 2- 3

micras

Células anucleadas, poseen glucógeno,

ADP, ATP, y enzimas glucoliticas y trombostenina

ELEVADAS:Deficiencia de

hierro.Leucemia.Linfoma o

cáncer.Terapéutica

postadrenalina.Enf.

Intestinales inflamatorias.

Postesplenectomia.

Postratamiento con vit. B12

DISMINUIDAS.• Anemia aplasica.• Anemia perniciosa.

• Complicación del embarazo.• Deficiencia de

folato.• Enfermedad de tejido conectivo.• Infección vírica.

• Administración de

heparina.•Mielodisplasi

a.•Postransfusion sanguínea.• Fármacos.

REALIZACION DE LA PRACTICA

La sangre se obtiene del pulpejo del dedo medio o anular, aunque también se puede obtener del lóbulo de la oreja, previa limpieza del sitio elegido, se hace la punción con una lanceta, se limpia la primera gota de sangre, y ejerciendo ligera presión, se deposita la segunda gota en un portaobjetos limpio y seco, se produce la preparación del frotis.

Una vez hecha la preparación, se deja secar, se fija con metanol y se tiñe con el hemocolorante rápido de sigma; un minuto en solución No 1, lavar con agua del grifo y sumergir otro minuto en la solución No 2; lavar con agua y secar al medio ambiente observar al microscopio con 100x

FIN