PRACTICA N 2TEMA: ANLISIS DE MINERALES EN FRUTAS, VEGETALES Y HORTALIZAS SECAS POR ESPECTROFOTOMETRA DE ABSORCIN ATMICA, PREVIA DIGESTIN POR MICROONDASOBJETIVO GENERAL: Cuantificar minerales en varios productos vegetales utilizando la tcnica de Absorcin atmicaOBJETIVOS ESPECIFICOS:Cuantificar mineralesMARCO TERICOEspectrometra de absorcin atmica por llama. La espectroscopia de absorcin atmica de llama es la forma ms utilizada de la espectroscopia atmica, por medio de esta, muchos iones metlicos pueden determinarse fcilmente en niveles de mg/Kg (ppm). En la prctica, la tcnica se basa en una fuente de tomos elementales o iones que estn electrnicamente excitados por la luz monocromtica, la absorcin que se produce se mide por el instrumento.El suministro de una fuente de tomos en forma elemental (o inico elemental), est determinado por un nebulizador, junto con una llama de aire/acetileno, la primera etapa es la formacin de un aerosol de micro-gotas de la solucin del analito por medio del nebulizador, en este proceso, una bomba peristltica pasa por un suministro continuo de la solucin del analito en la trayectoria de un chorro de aire comprimido para producir una fina niebla de gotas diminutas y el aerosol se dirige en una larga y delgada llama de aire / acetileno para dar lugar a la atomizacin del analito. Los gases de combustin se mezclan antes de la combustin, la llama est dirigida por una rendija de chorro gas de aproximadamente 10 cm de longitud y 2-3 mm de ancho, el acetileno se quema para proporcionar una temperatura de alrededor de 2000 C a 2200 C, si se requieren temperaturas ms altas, las mezclas de gases de combustible acetileno /xido nitroso puede ser utilizadas. El acetileno y el aire de la espectroscopia atmica de llama se mezclan antes de pasar a travs del flujo de gas y es en este punto donde la mezcla de estos se enciende y para los gases de escape se coloca una campana de extraccin directamente encima de la chimenea de salida del espectrofotmetro como muestra la Figura 1 (Oxford University, 2004).

Figura 1. Esquema de la llama del espectrmetro de absorcin atmica

Las gotas finas del disolvente en la sustancia analizada (que es casi siempre agua) se evapora muy rpidamente a estas temperaturas. La sal del metal, a su vez se evapora y este se reduce en las altas temperaturas dentro de la llama para completar el proceso de atomizacin, la llama tiene una forma que permite que la radiacin incidente pase a travs de un suministro continuo de la muestra atomizada. Un detector (que es normalmente un tubo fotomultiplicador) puede controlar la intensidad de la radiacin y por lo tanto la absorcin.RECURSOS UTILIZADOSMATERIALESDESCRIPCIONCANTIDAD

POR CURSOPOR GRUPO

Digestores de tefln32

Matraz de 25 mL93

Digestores de tefln62

Matraz de 50 mL93

Pipetas volumtricas 5 mL62

Pipetas volumtricas 1 mL62

Esptula31

Mortero31

Piceta de plstico33

REACTIVOSDESCRIPCIONCANTIDAD

POR CURSOPOR GRUPO

Lmpara de Fe10

Agua destilada (L)103

Agua desionizada 14 M.cm. (L)103

Acido ntrico 65% (mL)330110

Acido sulfrico 98% (mL)155

Solucin de estndar de metal (mL)31

Estndar de Fe31

Acetona (mL)501

EQUIPOSDESCRIPCIONCANTIDAD

POR CURSOPOR GRUPO

Espectrofotmetro de absorcin atmica10

Tamiz malla 6010

Microondas10

PROCEDIMIENTO1. LAVADO DE MATERIALA) Material de vidrioLavar primero con agua y detergente. Enjuagar con agua de la llave, seguido por agua desionizada y luego con la solucin de cido ntrico al 65%. Finalmente enjuagar 4 o 5 veces con agua desionizada y dejar secar el material.B) Material de teflnLavar con agua y detergente. Enjuagar primero con acetona y luego con agua desionizada. Mantener los digestores cubiertos con cido ntrico 0.1M al menos 30 minutos. Enjuagar con agua desionizada y dejar secar.2. PRE-TRATAMIENTO DE LA MUESTRASi el producto son granos secos, se realiza la molienda hasta obtener partculas que pasen por malla 60 mesh. Si el producto es fruta, vegetales, hojas se realiza un secado en estufa hasta peso constante o se liofiliza y luego se muele en mortero.3. Digestin microondasPesar aproximadamente 250 mg de muestra seca directamente en el digestor.Aadir 1,5 mL de cido ntrico concentrado y 1,5 mL de cido sulfrico concentrado. Cerrar el digestor, introducir en el horno microondas y digerir la muestra por un minuto.De igual forma, se prepara en un digestor un blanco que contiene la misma cantidad de reactivos pero sin muestra. Terminada la digestin, dejar enfriar el digestor en agua fra por lo menos 20 minutos y abrir cuidadosamente, trasvasar el lquido a un matraz de 25 mL y aforar con agua desionizada.4. Medicin por espectrofotometra de absorcin atmicaSeguir el instructivo de uso del equipo y esperar aproximadamente 10 minutos hasta que se estabilice, verificando que las longitudes de onda y energa mxima sean las correspondientes para el elemento seleccionado.Previo a la lectura en el espectrofotmetro se preparan las respectivas curvas de calibracin a partir de la solucin patrn inicial las cuales debern cubrir el rango lineal del equipo.La preparacin del set de estndares debe realizarse en el da del anlisis; la aceptacin de la curva de calibracin se la realiza con el criterio de que el coeficiente de correlacin de dicha curva tenga un valor de 0,99.La tcnica de flama es empleada para determinar la concentracin de metales. Se setea la lmpara. Se enciende el quemador y se deja que se estabilice por 10 min. Seguidamente se encera usando el blanco de reactivos que corresponde a agua desionizada y se mide la absrobancia de cada una de las soluciones estndar, de manera similar, se mide la absorbancia de la muestra cuya concentracin es desconocida, la muestra de control de calidad y el blanco de reactivos. Con el objetivo de verificar el buen funcionamiento del espectrofotmetro se intercala la lectura de una solucin estndar. En caso de que la muestra tenga alta concentracin del metal a analizar se procede a diluir.

REGISTRO DE RESULTADOS ESPERADOSCon los resultados obtenidos se procede a calcular la concentracin del elemento (C) en la muestra de acuerdo a la siguiente ecuacin:

Donde: C = Concentracin del elemento en la muestra (Base Seca) (mg.kg-1)Cf = Concentracin del elemento medida en el equipo (mg.L-1)Cb = Concentracin del blanco (mg.L-1)Fd = Factor de dilucinM = masa de la muestra secaSi la muestra fue secada y el resultado debe ser reportado en base hmeda, se utiliza la siguiente correccin:

Donde:CBH = Concentracin del elemento en la muestra (Base Hmeda) (mg.kg-1)% Humedad = contenido de humedad de la muestra (g agua en 100 g de muestra) ANEXOS.BIBLIOGRAFA AOAC Official Method 999.10 (2000), Chapter 9, p.16-22.

PRACTICA N 3TEMA: DETERMINACIN DE PARMETROS TECNOLGICOS, HOMOGENIZACIN, TAMAO, PESO, ACIDEZ TITULABLE, pHOBJETIVO GENERAL: Cuantificar parmetros tecnolgicosOBJETIVOS ESPECIFICOS:Homogenizar muestrasDeterminar el tamao de varios productos vegetalesDeterminar el pesoDeterminar el pH de varios productos vegetalesMARCO TERICOEl manejo de productos vegetales depende del estado de madurez, ya que repercuten directamente en la calidad y potencial de conservacin en fresco. Los indicadores que se utilizan para establecer el estado de desarrollo de los productos vegetales pueden ser:Cronolgicos: la madurez puede definirse cronolgicamenteFsicos: forma, tamao, color y las caractersticas de la superficie (rugosidad, brillo, serosidad)Qumicos: Grados brix, slidos solubles totales, almidn, acidez titulableFisiolgicos: patrn respiratorio y produccin de etilenoRECURSOS UTILIZADOSMATERIALESDESCRIPCIONCANTIDAD

POR CURSOPOR GRUPO

Matraz de 200 mL93

Cuchillo con filo31

Papel toalla31

Calibrador31

Probeta de 100 mL31

Vaso de precipitacin 250 mL31

Piceta de plstico33

REACTIVOSDESCRIPCIONCANTIDAD

POR CURSOPOR GRUPO

Solucin de fenoftalena (mL)100

EQUIPOSDESCRIPCIONCANTIDAD

POR CURSOPOR GRUPO

Extractor de jugo10

Exprimidor de ctricos31

pHmetro31

PROCEDIMIENTOa) HOMOGENIZAR Seleccionar un kilo de producto vegetal Realizar el proceso de cuarteb) TAMAO y PESO Del producto vegetal seleccionado, escoger de forma aleatoria por lo menos 10 ejemplares a los cuales se cuantificar las dimensiones (longitud, ancho, dimetro, permetro) con la ayuda de calibradores, regla, cinta mtrica. Registrar previamente el peso de cada uno de los ejemplares seleccionados Determinar el volumen del producto vegetal utilizando desplazamiento de agua.c) ACIDEZ TITULABLEMTODO VOLMETRICOUtilice un volumen conocido del jugo de su producto o una dilucin de ste, adicione 2 o 3 gotas de fenoftalena y titule con la solucin de NaOH o,1 N a un punto final de pH= 8.2 (momento en que ocurre el cambio de color del indicador). En el caso de productos de color rojo u otro que no permite ver el vire, utilice un pHmetro. La acidez puede calcularse con la siguiente ecuacin:% acidez= mL NaOH * NNaOH* meq. cido* factor dilucin*100 g o vol jugo* mL muestra tituladaUtilice el valor del miliequivalente del cido orgnico predominante en el producto. AcidoPeso miliequivalente

Ctrico0,064

Mlico0,067

Tartrico0,075

d) pHColocar un extracto del producto vegetal y determinar el pH con el phmetro.ANEXOS.BIBLIOGRAFA AOAC Official Method 999.10 (2000), Chapter 9, p.16-22.