MEMO CGC MAR-001

FACULTAD DE INGENIERA MARTIMA, CIENCIAS BIOLGICAS, OCENICAS Y RECURSOS NATURALES

CDIGO

MATERIAMicrobiologa General

LABORATORIO

NOMBREOscar Cotto Ypez

PARALELO1

TEMA DE LA PRCTICAAPI

OBJETIVOS GENERALES: Realizar una identificacin bioqumica por medio del uso de bateras API Establecer las diferentes reacciones para la correcta identificacin de microorganismos.

INTRODUCCIN:Qu es una batera API?Un sistema miniaturizado API es un mtodo de identificacin bioqumica de microorganismos el cual consiste en un dispositivo de plstico con varios microtubos los cuales contienen sustratos de enzimas o medios de cultivo deshidratados de acuerdo a la prueba que quiera hacerse. Un ejemplo de las pruebas a realizarse son: fermentacin de carbohidratos, determinacin de la produccin de H2S.Debido a la variedad de microorganismos que se requieran identificar existen un sinnmero de bateras pero estas son diferentes en nmero y tambin segn la actividad metablica del gnero del microorganismo que se quiere identifica.Los microtubos se inoculan con una suspensin de microorganismos, en agua o solucin salina, que rehidrata los medios. Las tiras o galeras se incuban a 37C y por efecto del metabolismo bacteriano se producen cambios de color espontneos o bien por la adiccin de reactivos.API 20E: Son pruebas de 20 microtubos que se utilizan para identificacin de bacterias de gram negativas y entero bacterias, las cartas de colores para resultados positivos y negativos en esta prueba son los siguientes:

Procedimiento de inoculacin de bacterias en sistemas API:Cada micro tubo del sistema debe inocularse con una suspensin en solucin salina al 0.85% de un cultivo de microorganismo a ser identificado, en algunos casos los microtubos deben llenarse completamente con la suspensin y en aquellos que se requiere una condicin anaerobia se les debe agregar parafina lquida estril.Interpretacin de resultados:La presencia de enzimas y productos metablicos que se generan en el periodo de incubacin reaccionan con los sustratos que se encuentran en los microtubos y desarrollan una coloracin la cual debe ser comparada con la carta de colores, en algunos casos se debe agregar algn reactivo para su revelado. De acuerdo con esto se puede establecer un resultado positivo o negativo.

EQUIPOS Y MATERIALES: Cajas Petri Mechero Bunsen Asa Micropipeta Puntas para micropipeta Tubos de ensayo Batera API Agitador Bacteria aislada Agar sangre

PROCEDIMIENTO:1. Tomar una colonia de cada placa y suspenderla en 5ml de solucin salina o de agua esteril2. Llenar los tubos de todos los pocillos con la suspensin de bacterias.3. Llenar la cpula de los pocillos CIT, VP, GEL con la suspensin bacteriana.4. Llenar con parafina las cpulas ADH, LDC, ODC, URE, H2S para que se mantengan en anaerobiosis.5. Poner la tira en su propia cmara hmeda de incubacin. Previamente poner agua en los alvolos de la cmara para proporcionar una atmsfera hmeda durante la incubacin.6. Incubar a 37 C durante 18-24 h.7. Los resultados debe ser comparando los colores de los pocillos con los de la tabla.

RESULTADOS:

Resultados en los pocillos y agar sangre

Conclusin: El anlisis por medio de colores mostro un resultado concreto para la identificacin bacteriana. El procedimiento segn la reaccin obtenida permiti tambin complementar el anlisis para una correcta identificacin.

REFERENCIAS: http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_anexo2.pdf

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