UNIVERSIDAD TECNOLOGICA EQUINOCCIALCampus Arturo Ruiz

Santo Domingo

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA INGENIERIACarrera Ambiental y Manejo de Riesgos Naturales

Asignatura:LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

Docente:LUIS GUSQUI

Alumno:JOSUE ENCARNACION

Nivel:2do

Fecha:20 de Octubre de 2015

CUESTIONARIO:

1. Cuáles son las explicaciones posibles para la reacción de Gram?

Sobre la base de su reacción a la tinción de Gram, las bacterias pueden dividirse en dos grupos, Gram positivas y Gram negativas.

Las bacterias Gram-positivas y Gram-negativas tiñen de forma distinta debido a las diferencias constitutivas en la estructura de sus paredes celulares.

La pared celular de las bacterias tiene permeabilidad, por medio de esta permite la absorción de sustancias. En la tinción Gram, diremos que sustancias como (colorantes, mordantes, alcohol). También para este procedimiento depende principalmente de cuantas capas de glucopeptidos posee la pared celular de la bacteria.

2. Explique lo que sucede durante cada una de las etapas de este procedimiento, tanto en bacterias Gram – positivas como Gram – negativas

El colorante « violeta de genciana » penetra en todas las células bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas) a través de la pared bacteriana.

Luego con el lugol o también conocido como mordiente es un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de potasio), el cual está presente para solubilizar el yodo, y actúa de mordiente, haciendo que la violeta de genciana tenga mayor fijación a la pared de la célula bacteriana.

El alcohol nos permite que se agregue, sirve para realizar la decoloración, ya que en la misma es soluble el complejo I2/cristal violeta. Los organismos Gram positivos no se decoloran, mientras que los Gram negativos sí lo hacen.

La safranina sirve como un segundo colorante. Al término del procedimiento, las Gram positivas se verán azul-violáceas y las Gram negativas, se verán rosa (si no utilizamos safranina) o rojas (safranina).

3. Señale algunas propiedades de las bacterias Gram – positivas y Gram – negativas

Gram positivas

Sin membrana externa Pared celular interna y una pared de glucopéptidos. Llega a tener hasta 40 capas Retienen la tinción azul. En su pared celular posee glucopeptidos en porcentaje de 40% al 90% En la pared celular posee 40 capas o laminas

Con la tinción Gram tiñen de color “azul violeta”

Gram negativas

Pared celular más compleja. Presentan una sola capa Quedan decoloradas. En su pared celular posee glucopeptidos en porcentaje de 1% al 10% En la pared celular posee 1 solo capa o lamina Con la tinción Gram tiñen de color “rojo” Contiene membrana externa.

4. ¿Cuál considera Ud. que fue el objetivo de pasar el frotis por la llama del mechero?

Que en ocasiones el colorante tiñe sólo en caliente, por lo que el tiempo que dure su actuación se deberá sostener el portaobjetos sobre la llama del mechero para que humee el colorante, pero teniendo mucho cuidado de que no llegue a hervir ya que se produciría la destrucción de las células.

CONCLUCIONES:

Las bacterias pueden reaccionar ante este procedimiento, manifestándose con dos tipos de colores como son el “rojo claro” (Gram-) y “violeta” (Gram+).

Al reconocer una bacteria si es gram+ o gram- nos permite también reconocer cuantas capas de glucopeptidos posee en su pared celular.

Existen sustancias químicas que nos permiten observar bacterias, por medio de la tinción, dependiendo del número de capas de peptidoglucanos que tengan en su pared celular.

RECOMENDACIONES:

Cuando realicemos el frotis en la placa porta objetos, tenemos que tratar de eliminar en su totalidad el agua, y dejar bien fijado el frotis a la placa, ya que si no existe un buen fijado del frotis, tendremos la eliminación del mismo, en el momento de proceder a lavar las sustancias sometidas a la muestra.

Esterilizarse antes de realizar esta práctica. Mantener el tiempo estimado de las sustancias en la placa, esto nos

representara una mejor tinción al observar. Si utilizaremos la llama del mechero para fijar nuestra muestra, tener cuidado

de exponerlo mucho a la llama, podríamos matar las bacterias. Evitar la propagación de las esporas de los cultivos de bacterias, siempre

representa peligro para los estudiantes.

BIBLIOGRAFIA:

http://es.scribd.com/doc/43696269/Tincion-de-gram-Introduccion-desarrollo-e-interpretacion-de-resultados-Practica-2

http://frootlupiz.blogspot.com/2009/11/bacterias-gram-positivas-y-gram.html http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioTinciones.htm http://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_de_Gram