practica 4
DESCRIPTION
nematdosTRANSCRIPT
-
UNIVERSIDAD AUTNOMA
CHAPINGO
DEPARTAMENTO DE PARASITOLOGA AGRCOLA
NEMATOLOGIA AGRICOLA
TRABAJO:
PRACTICA 4 EXTRACCIN DE NEMATODOS
PRESENTA:
GLVEZ FLIX ABEL
BOLAOS ZAPATA CELESTE
CRUZ JIMENEZ EDGARDO
EUDOXIO MACARIO ERASMO
ACOSTA MARTINEZ KENIA
JIMENEZ BACA ELIAS
IGNACIO GUTIERREZ JUAN PABLO
MAYORAL VASQUEZ MARCOS
LEDESMA MACIAS ANA GABRIELA
TOVAR HERNANDEZ VICTOR ULISES
OSORIO SARMIENTO CUTBERTO
SAUCEDO RUEDA ALMA LORENA
ESCOBEDO CARDENAS CASSANDRA
PROFESOR:
DR. EDILBERTO AVITIA GRACIA
CHAPINGO, MX., A 28 DE AGOSTO DEL 2015.
-
INTRODUCCIN
Los nemtodos son organismos fitopatgenos que pertenecen al reino Animal y
son probablemente los organismos pluricelulares ms abundantes en el mundo,
despus de los insectos. Su tamao flucta entre unas cuantas micras hasta 0.5-1
mm.
Los nemtodos son gusanos cilndricos con cuerpo alargado y delgado con
simetra bilateral. Su cutcula es lisa, no segmentados y carecen de patas u otros
apndices. Presentan todos los sistemas fisiolgicos principales de los animales
como lo son el sistema excretor, nervioso, reproductor y digestivo.
Durante el ciclo de vida de los nemtodos se llegan a presentar cinco estados y
cuatro mudas. En algunas especies de nemtodos la primera y segunda etapa
larval no puede infectar a las plantas y sus funciones metablicas son realizadas a
expensas de la energa almacenada en el huevecillo.
Los nemtodos fitopatgenos presentan gneros ectoparsitos, los cuales pasan
toda su vida en el suelo y se alimentan externamente de las races de las plantas
hospederas, por ejemplo, Cricononemoides, Hemicycliophora, Cacopaurus,etc.
Otros gneros son endoparsitos, produciendo lesiones internas en los tejidos
vegetales. Generalmente se ubican en el parnquima cortical, o bien llegan hasta
el clindro central de las races hospederas, en donde permanecen o migran
hacia otros rganos de las plantas, por ejemplo, Aphelenchoides, Anguina,
Ditylenchus, etc.
Otros gneros pasan una parte de su vida como endoparsitos y la otra parte la
pasan en el suelo que se encuentra alrededor de las races que parasitan , a estos
se les conoce como nemtodos semiendoparsitos, Algunos ejemplos de estos
son Meloidogyne, Heterodera y Tylenchus.
-
De los nematodos fitoparsitos, los gneros Aphelenchoides, Dytilenchus,
Meloidogyne, Xiphimena, Pratylenchus, Tylenchulus, Globodera y Heterodera,
causan prcticamente el 100% de los daos en cultivos econmicamente
rentables.
Existen muchas tcnicas diferentes para la extraccin de los nematodos del suelo.
En general, las ms utilizadas son aquellas basadas en la capacidad de los
nematodos de migrar del suelo al agua a travs de un filtro, embudo de Baermann
y bandejitas, o aquellas basadas en su densidad especfica, centrifugacin es
diferencial es en gradientes de sacarosa o sales. Una vez realizada la toma de
muestras de suelo y plantas, los nematodos deben ser extrados para su recuento.
Si este no se va a realizar inmediatamente, deben guardarse en sitio fresco hasta
su procesamiento.
OBJETIVO
Familiarizarse y dominar las diferentes tcnicas que existen para la extraccin de
nematodos del suelo en especial Fitonematodos.
MATERIALES
200 mL de muestra de suelo
Probeta de 5 L
Tamices de 400u, 325u, 200u, 100u, 60u, 35u.
Recipiente de 10 L
Cubeta
Agua de la llave
Centrifugadora
Azcar
Agua destilada
Agitador
-
Tubos de ensayo de plstico
METODOLOGIA PRACTICA DE TAMIZADO Y CENTRIFUGADO DE COBB
1. se coloc 200 ml de suelo en una probeta con agua 500ml.
2. se pas toda la suspensin a otro recipiente o balde y se le agregaron 2
litros ms de agua, a los cuales con las manos se desasen los terrones y s
deja sedimentar.
3. Se coloca un balde los tamices, agrupndolos de mayor a menor de la
siguiente manera de 40, 60, 100, 200, 325, siendo el de 325 el que quede
en el inferior.
4. Se basea el contenido del balde en los tamices pero dejando la tierra
sedimentada en el balde.
5. Los residuos del tamiz de 40 y 60 se desecha. El contenido del tamiz de
100 se pasa al de 200 con agua de la pipeta, de igual manera el de 200 se
pasa al de 325.
6. El contenido del tamiz se pasa a un vaso de precipitado con agua,
considero que sea poca el agua usada.
7. El contenido en el precipitado se centrifugara, el cual previamente es
pasado a los tubos de centrifugacin en 2 partes iguales del mismo peso y
se agreg 1 gramo de caoln a cada frasco y se centrifugo a 3500 rpm por 5
min
8. Los tubos posteriormente se les decanta en agua y se eliminan los residuos
con agua pero cuidando no romper la capa sedimentada
9. A los tubos limpios se les agrega una solucin azucarada de igual dejando
en igual peso cada tubo y se revuelve el contenido de los tubos
10. Los tubos son centrifugados nuevamente a 3500 rpm por 3 min
11. Al terminar de centrifugar se decanta el contenido de los tubos en un vaso
de precipitado y se observa al microscopio
-
RESULTADOS
TCNICA DE TAMIZADO
Agua para aforar con el suelo
Agregar el suelo para aforar
Se vaco de la probeta a la cubeta para diluir
Se vaca la mezcla a los tamices
Lavado de tamices Vaciado del ultimo tamiz a un vaso de precipitado
-
TECNICA DE CENTRIFUDADO
Se pesa 1 gramo de caoln y las muestras
Centrifuga Muestra que sali de la centrifuga
Muestra final lista para ser observada al microscopio
-
DISCUSIN
Es muy importante asegurarse de que durante todo el proceso, todos los
recipientes utilizados para cada muestra estn etiquetados de forma correcta y
consistente durante todo el proceso ya que es muy fcil cometer equivocaciones.
Las extracciones de suelo y races se deben etiquetar por separado.
Las muestras de suelo hmedo se deben mezclar muy bien antes de tomar sub-
muestras para la extraccin de los nematodos. Romper los terrones o grumos de
suelo y eliminar las piedras, races y restos vegetales. Pasar el suelo hmedo por
un tamiz con malla gruesa que se colocar sobre un recipiente adecuado y
mezclar muy bien. Tomar una sub-muestra de la mezcla con un vaso o recipiente
de volumen conocido. Separar las races del suelo y eliminar cualquier suelo
adherido a las mismas golpendolas suavemente o enjuagndolas con cuidado
bajo el grifo o en un recipiente con agua.
CONCLUSION
Los nematodos son habitantes comunes del suelo, algunos pueden tener un
efecto benfico para los ecosistemas (degradando materia orgnica, parasitando
plagas, etc.) mientras que otros son parsitos de muchos cultivos, entre ellos los
hortcolas, afectando su desarrollo, rendimiento y calidad. El anlisis de suelo es
fundamental para diagnosticar la presencia de nematodos parsitos de plantas
antes de establecer un cultivo o cuando se observan sntomas en campo. Los
sntomas producidos por nematodos no son tpicos de esta plaga (tambin podran
ser causados por otras plagas y enfermedades), por lo cual debe realizarse un
anlisis de suelo para obtener un correcto diagnstico. En un cultivo afectado
pueden observarse plantas con menor crecimiento, con acortamiento de los
entrenudos, las hojas pueden presentar amarillamiento y en algunos casos
-
deformaciones. a nivel subterrneo es posible observar el sistema radical
destruido, prdida de color y firmeza de los bulbos, presencia de agallas o ndulos
en las races y en los tubrculos. por todo esto se hace el muestro en campo.
BIBLIOGRAFA
Romn J. 1978. Fitopatologa tropical. Universidad de Puerto Rico. Rio
Piedras, P.R. Pag 210.
Christie, J. R. 1970 "Nematodos de los vegetales. Su ecologa y control".
Ed. Limusa, Mxico.
Cepeda, S.M. 1996 Nematologia agrcola. Ed Trillas: UAAN, Mxico.
Bongers, T. 2011 Morfologa de los nematodos curso de identificacin.
UNA (Universidad Nacional de Costar rica).
Coyne, J.M. & B. Claudius Nematologa prctica:Una gua de campo y
laboratorio.CIIMYT,Syngenta,IPM,IITA.
Carrillo, F.C. 1996. Nematodos y nematicidas, Ed. Universidad Autonoma
Chapingo, pag 56.
Southey, J.F. 1970. Laboratory Methods for work plant and soil nematodes,
London. Pag 123
www.fhia.org.hn/downloads/proteccion_veg_pofs/muestrasanalisisnematod
os.pdf
nema-agris.blogspot.mx/2011/03/muestreo-para-estimar-poblaciones-
de_10.htm
tarwi.lamolina.edu.pe/~fonz/fitonematologia/practicas/pract4.htm