DEPARTAMENTO CIENCIAS DE LA VIDA Y AGRICULTURACARRERA DE INGENIERA AGROPECUARIASANTO DOMINGO Asignatura: Microbiologa Estudiante: Pallasco O. Nelly M. Nivel: Tercero

Docente: Ing. Gustavo Nez J. M.Sc

Prctica: No. 5

Fecha: 13 noviembre de 2014 Grupo: 4

Tema: Informe de Observacin e identificacin de microorganismos aislados en el ambiente suelo, agua, aire.

PerodoOctubre 2014 Enero 2015

TEMAObservacin y conteo de esporas de hongos aislados del ambiente aire, suelo, agua.INTRODUCCINLa microbiologa es la ciencia estudia los microorganismos que solo pueden verse con un microscopio, microbiologa se compone de tres partes de origen griego: micro o pequeo, bios o vida y loga o estudio que significa en pocas palabras el estudio de vida pequea.las frutas y las hortalizas son los principales medios de contencin de esporas debido a que es all en donde los microorganismos atacan ya sea antes o despus de su cosecha, segn lo citado por HerreraEstrella y Carsolio (1998) estos pequeos microorganismos pueden provocar prdidas en su produccin de frutas u hortalizas, estos microorganismo son capaces de producir ciertas sustancias debido a su metabolismo secundario, como por ejemplo las micro toxinas estas son distribuidas en el sustrato llegando a ser perjudiciales aun cuando sus concentraciones son muy bajas, representando as un riesgo en la salud de los paises importadores de alimentos que no controlan estos contaminantes.Objetivo general Ejercitarse en las tcnicas de observacin macroscpica y microscpica de microorganismos comunes del ambiente suelo, agua, aire. Objetivos especficos Conocer la estructura de hongos comunes. Ejercitarse en el manejo del microscopio compuesto y de diseccin. (Estereoscopio).

REVISIN DE LITERATURA

La micologa de define como la ciencia que estudia a los hongos, relacionndose ms con los animales que con las plantas. Sin embargo, los hongos se producen esporas sexuales o asexuales para su reproduccin y multiplicacin, cosa que no ocurre a diferencia de los animales (Cubas, 2007).Las esporas pueden ser de origen asexual (mitosporas) o sexual (meiosporas), y por su ubicacin internas o externas. Las mitosporas se originan en las estructuras anamrficas y las meiosporas en las teleomrficas (Carrillo, 2003).Los hongos son organismos eucariotas, son uno de los grupos de seres vivos que contienen ms de 80000 especies, pero hay algunas que no representas estas diferencias morfolgicas, sino que se diferencian genticamente (Cubas, 2007).Los hongos tienen similitud con los animales a diferencia de las plantas.Caractersticas: Su pared celular est compuesto por dos sustancias; quitina y celulosa Estn formados por clulas eucariotas con ncleo verdadero Son hetertrofos no pueden desarrollar sustancias de crecimiento y desarrollo Pueden comportarse como saprofitos y otras especies pueden ser parasitas. Estn firmadas por finos filamentos llamados hifas o micelio, las hifas pueden ser setadas, no cenocticas y tabicadas. Se encuentran en dos formas : de moho y levadura Tienen dos formas de reproduccin sexuales y asexuales por esporas No tienen cloroplastos, ni clofila (No se sintetizan) De ncleos unicelular o pluricelular La hifa contiene protoplasma, que al madurar los ncleos se expulsan formando esporas Gameto masculino(anteridio) Gameto masculino (ovonio) Al conjunto de hifas se llama micelios, que tiene dos tipos; micelio vegetativo y micelio areo (Carrillo, 2003).Aislamiento e identificacin de los microorganismosPara poder aislarlos ha sido necesario utilizar tcnicas de seleccin empleando medios de cultivo que les permita crecer suprimiendo el crecimiento de otros organismos que no pertenezcan o sean parte del estudio. La composicin debe ser determinada por esos microorganismos que pretendemos estudiar, en las bacterias y las levaduras estas son sensibles al crecimiento, concentraciones de agua y a niveles de pH, evitando que otros microorganismos crezcan, se puede tambin emplear fungicidas para suprimir el desarrollo de estos hongos filamentosos, siempre y cuando se lo maneje con mucha precaucin.Para identificar los microorganismos se deben toma en cuenta propiedades tales como:Caracterizacin fisiolgica y bioqumica, fermentacin de carbohidratos y asimilacin de compuestos carbonados (Araya & Brito, 2012).Criterios macroscpicosLa mayora de los organismos crecen en medios de cultivos de laboratorio, pero el Agar glucosado (SDA) es el medio de aislamiento que es de fcil identificacin de levaduras, estas levaduras del SDA suelen ser muy completas de forma abombada o plana, mantecosa, lisa o rugosa segn dependiendo su vejez.En algunos casos las colonias de dichas levaduras no desarrollan el micelio areo, pero pueden aparecer prolongaciones aracneiformes a la periferia de las colonias, si este micelio est definido entonces es considerado como un hongo di mrfico.Un paso para la identificacin de Cyptococcus neoformans depende de que su colonia tenga un aspecto y consistencia mucoide en forma de capsulas.Las colonias que tiene un color rojo-naranjado de una apariencia cremosa y algunas veces rugosa, siendo las ms caracterizadas las especies del gnero Rhodotorula y Sporobolomyces (anaranjado), su color se justifica por la presencia de carotenoides. Ciertos hongos contienen micro toxinas que se encuentran en los granos sembrados pero adems pueden hallarse en el apio, jugo de uvas, manzanas y otras frutas y vegetales (Linares Sicilia & Francisco, 2008).Los hongos tienen ramas y races en forma de hilos finos, siendo difciles de ver cuando el hongo va creciendo en alimentos encontrndose as dentro de los alimentos, las bacterias pueden ser visibles al crecer junto con el hongo segn sus condiciones climticas. Cundo el alimento contiene una gran cantidad de hongos, en ciertos casos no pude penetrar alimentos densos, el hongo ms peligroso se encuentra en las sustancias dainas o alrededor de sus hilachas, y en varios casos se dispersan en todo el alimento (Linares Sicilia & Francisco, 2008).

EQUIPOSEquipos:Microscopio estereoscopioMicroscopio compuestoEstufa de incubacinEstufa de esterilizacinCmara de flujo laminarAutoclaveCocineta elctrica

Materiales:

Placas porta objetoPlacas cubreobjetoVasos de precipitadosErlenmeyerMatracesKit de diseccinMechero de alcoholPlatos petri conteniendo medio de cultivo

Reactivos e insumos:Alcohol antispticoAgua destiladaLactofenol

PROCEDIMIENTO:Observacin macroscpica Se coloc debajo del lente el objetivo a observar en el microscopio estereoscopio (Diseccin), una parte pequea del material para observar, se examin cuidadosamente hasta tener una buena visualizacin (40 x).Observacin microscpica Se limpi la placa portaobjetos. La placa debe estar exenta de pelusas, esto lo consigue flamendola sobre la columna de fuego del mechero bunsen. Con l cuenta gotas se coloc una gota de agua destilada, lactofenol o colorante sobre la placa portaobjeto. Con la ayuda de una aguja de diseccin se raspo el sitio en donde se visualice la presencia de hongos, o zona afectada (podrida) y se puso en la placa con ligeros movimientos. Se coloc el cubre objeto, haciendo coincidir una arista de la placa con el borde del agua. Se coloc la placa sobre la platina del microscopio, asegurndola mediante las pinzas. Se procedi a la observacin.

RESULTADOS Se logr diferenciar los diferentes tipos de esporas y hongos cultivados en un medio de cultivo, sin embargo muchos de ellos fueron contaminados por otro tipo de agentes patgenos encontrados en el medio.En mi medio de cultivo PDA queso, las caractersticas de mi hongo fueron:Forma: RugosaColor: BlancoCrecimiento: RadialCarente de hifas, de forma redonda.CONCLUSIONES Se observ a simple vista, con la ayuda del microscopio a describir de mejor manera la parte superficial de las esporas del hongo Se utiliz agua destilada para una mejor observacin microscpicaRECOMENDACIONES Tener cuidado con los lentes de observacin del microscopio, ya que podra existir un excesivo acercamiento dandose los lentes. Luego de tomar la muestra del hongo, cubrir la muestra para no evitar posibles contaminaciones con papel parafilm. Al tomar la muestra, raspar pequeas cantidades para observar los microorganismos de mejor manera.BiBLIOGRAFIA

Araya, N., & Brito, A. (2012). Aislamiento e identificacin morfolgica de microorganismos que viven en el hogar. Manquehue: SSCC.Carrillo, L. (2003). Los hongos de los alimentos y forrajes. Jujuy, Argentina.Cubas, P. (2007). Botnica. Recuperado el 10 de Noviembre de 2014, de Hongos: http://www.aulados.net/Botanica/Curso_Botanica/Hongos/31_hongos_general_texto.pdfLinares Sicilia, M. J., & Francisco, S. C. (2008). Identificacin de levaduras. Murcia: Asociacin Espaola de Micologa.

CUESTIONARIO

Seale con que lente hace la observacin de los hongos?Para realizar la observacin de un hongo, ya colocada la placa procedemos a observar con el lente nmero 5x, y aumentamos a 10x, y finalmente observamos con el lente nmero 40x que ser con el que identifiquemos al hongo y sus diferentes partes.

Cul es la estructura de la pared celular de los hongos?La pared celular permite la interaccin con el medio externo ya que algunas de sus protenas son adhesinas y receptores. Algunos de sus componentes tienen una alta capacidad inmunognica. La pared celular es una estructura caracterstica de los hongos y est compuesta por glucanos, quitina y glicoprotenas

ANEXOS

Hongo en medio de cultivo PDAEsporas observadas con lente nmero 5

Esporas observadas con lente nmero 10

Esporas observadas con lente nmero 40