nuevas tendencias en extraccion en fase solida (spe)

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Nuevas Tendencias en Extraccion en Fase Solida (SPE)

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  • Nuevas tendencias en Preparacin de Muestras

    David de la Serna. Jefe de Ventas de Columnas y Fungibles

    22 de Febrero de 2011

  • De lo clsico a lo moderno

    Tcnicas: - Filtracin - Extraccin

    Extaccin Lquido / Lquido - Extraccin en Fase Slida

    Hardware Cartuchos Placas de pocillos Discos

  • Extraccin en Fase Slida (SPE)

    Revisin de Terminologa

    Mecanismos Bsicos de SPE

    Tipos de Sorbentes

    1. Acondicionamiento del Cartucho, disco o Placa 2. Carga: Introduccin de la Muestra 3. Lavado: Eliminacin del material no deseado 4. Elucin: Elucin selectiva de los compuestos de inters

    Los 4 pasos de SPE

  • Objetivo de la Preparacin de Muestras

    Pre-purificacin: Eliminar interferencias y la matriz

    Pre-separacin: Mejorar la separacin de los compuestos de inters de forma selectiva

    Pre-concentracin: Mejorar su deteccin

  • Objetivos de la Preparacin de Muestras

    Clean-up y concentracin

    0 Minutos 10 0 Minutos 10

    PresenterPresentation NotesThrough substituting a solid material (solid phase) for the traditional liquid phase or for a physical process such as distillation, clean-up and concentration can be simultaneously satisfied. Solid Phase Extraction (SPE) employs the same principles of selective extraction from a liquid system onto a solid surface that are exploited in HPLC.

  • SPP Formatos Formatos y accessorios

    April 30, 2012 Agilent Confidential

    6

  • Cartucho SPE de Alta Presin(on-line) Cuerpo de PVDF (I.D. 1-3mm), que contiene 20-40mg de sorbente entre dos fritados de acero

    Fritados (polietileno poroso)

    Masa de Sorbente (30-200um partculas de sorbente)

    Placas de 96 Pocillos

    Cartucho o Placas de Pocillos

    96 columnas individuales en un nico soporte

    Cartuchos con masa empaquetada o disco

  • SPE Formatos masa empaquetada - cartuchos Straight barrel 1mL to 60mL, 50mg 10g bed masses

    LRC Large Reservoir Capacity 100 500 mg, 10mL

    Bond Elut Jr. 500mg 1g

    Particles: 40 or 120um (HF, high flow)

    Mega Bond Elut 12 150 mL, 2g 70g

    April 30, 2012 8 Agilent Confidential

  • Formatos SPE Masa Empaquetada Placas de 96 Pocillos

    Estandar 96-well: varias masas empaquetadas, 1mL volumens

    Placas redondeadas: 2 mL volumen placa ,10 100mg

    Versaplate: 25 100mg, 1.8 mL

    April 30, 2012 9 Agilent Confidential

  • Formatos SPE Disco Monoltico Disco Monoltico SPE SPEC Cartuchos 3mL con un disco de 15 o 30mg (2x15mg superpuestos),

    10mL con un disco de 35 o 70mg Placas de 96 pocillos placas de 1mL 15mg (C18 also in 30mg wells) Discos de 47 y 90mm para aplicaciones medioambientales (C18 y 18AR)

    Disco Empore SPE Discos de 4mm /1mL, 7mm/3mL, 10mm/6mL Placas de gran capacidad (2.5mL) y estandar (1.2mL) Discos de 47 y 90mm para aplicaciones mediambientales Alta densidad (partculas de 12um en PTFE ) y densidad estandar

    (partculas de 50um)

    April 30, 2012 10 Agilent Confidential

  • Formatos SPE OMIX OMIX SPE Monoltico Puntas o cama cnica en miniatura masas/volmenes reducidos

    al mnimo Placas de microextraccin OMIX Placas de 96 pocillos

    Versaplate Puntas OMIX para Tomtec Quadra y Hamilton Star Series

    gradilla de 96-puntas , puntas individuales OMIX 10L, 10L MB (minibed), y 100L puntas indiciduales

    8pack, 96 rack de puntas

    OMIX microextraction plate OMIX tips for Tomtec Quadra

    OMIX tips (for standard pipettors/robotic liquid handlers)

    April 30, 2012 11 Agilent Confidential

  • Formatos SPE para automatizacin

    Adems de las placas de 96 pocillos, hay formatos disponibles para automatizacin con los siguientes instrumentos:

    Hamilton (Omix)

    Tomtec (Omix)

    Gilson ASPEC

    Gerstel

    Spark Holland Prospekt

    CTC combiPal

    April 30, 2012 Agilent Confidential

    12

  • Plataformas de Automatizacin

    Spark Holland Pharma Symbiosis

    Hamiton Star Plus

    Tomtec Quadra 3

    Gerstel Multi purpose Sampler (MPS)

    Gilson Aspect

    April 30, 2012 13 Agilent Confidential

  • Formatos SPE SPE Online Cartuchos Prospekt 1mm o 2mm Empaquetado con fase Bondesil Encajan en Spark Holland Prospekt y Symbiosis on-

    line SPE instruments

    Columnas Metaguard para SPE on-line (cambio de columna) Material de 10 o 25um en 4.6mm i.d. HPLC guard

    column utilizado como sistema de SPE on-line

    Columnas Alexa para SPE on-line (cambio de columna) Material Metasil bsico 25-30m en hardware de columna

    HPLC, 1 y 2mm i.ds, 30 y 50mm longitud

    April 30, 2012 14 Agilent Confidential

  • Valvula Posicin A

    Bomba de Carga

    Carga columna 1

    Elucin columna 2

    Bomba de Elucin por Gradiente

    Q3

    Q2

    Q1

    ALexa Plumbing

    April 30, 2012 15 Agilent Confidential

  • Valvula Posicin B

    Bomba de Carga

    Bomba de Elucin por Gradiente

    Carga de columna 2

    Elucin columna 1

    ALexa Plumbing

    April 30, 2012 16 Agilent Confidential

  • Formatos SLLE

    Chem Elut Tierra de diatomeas, Hydromatrix en 0.3 300 mL cartuchos de volumen de

    muestra Flujo por Gravedad

    Combilute Tierra de diatomeas, Hydromatrix en cartuchos de 96 pocillos. Material

    sellador Flujo por Gravedad 200 mg

    Hydromatrix en Versaplate 260 mg

    April 30, 2012 17 Agilent Confidential

  • Manifolds de vaco - Versaplate

    Manifold para Versaplate

    Para uso solo con los productos Versaplate : Productos Versaplate

    (empaquetados con Bondesil/Bond Elut )

    TOP Especficamente diseado para

    que el versaplate se pueda utililzar con los instrumentos Tomtec instruments (Versaplate es demasiado alto para que se puede utilizar con el manifold Tomtec )

    Bomba de Vaco

    Manomentro de vaco

    Aguja de ventilacin Manifold de Vaco con top

    y base

    April 30, 2012 18 Agilent Confidential

  • Manifold de Vaco para placas de 96 pocillos SampliQ y Bond Elut Square

    April 30, 2012 Agilent Confidential

    19

  • Manifolds de Vaco - Captivac

    Collares Captivac Utilizados con:

    Captiva Placas SPEC

    O utilizar el adaptador de Placas de 96 pocillos SPEC con la mayora de los manifolds del mercado

    Bond Elut 96 O utilizar el adaptador de Placas de 96

    pocillos SPEC con la mayora de los manifolds del mercado

    April 30, 2012 20 Agilent Confidential

  • Manifolds de Vaco Vac Elut, Vac Elut 24

    Vac Elut Para usar con:

    Todos los cartuchos con conexin luer que requieran vaco

    Vac Elut SPS 24 tiene 24 posiciones y un embudo de eliminacin

    April 30, 2012 21 Agilent Confidential

  • Presin Positiva y accesorios

    Manifold de Presin Positiva Para utilizar con:

    Cartuchos Bond Elut o SPEC (1, 3, 6mL y LRC)

    Adaptadores Bond Elut Conectan Cartuchos en

    Serie Permiten conectar jeringas

    para presin positiva Llaves de paso Luer

    Paran el flujo en todos los cartuchos con conexin luer

    April 30, 2012 22 Agilent Confidential

  • SPE Monoltico SPEC y OMIX

    April 30, 2012 Agilent Confidential

    23

  • Tecnologa Disco Monoltico: SPEC y Omix

    Pre-Filtro

    SPECDisc

    SPEC Masa Empaquetada

    Frit soporte

    Lecho de Part

    Frit soporte

    Disco Monolitico, bajo masa Masa Empaquetada 40um partcula

    Void volume 120 uL/100mg Capacidad ~10% de masa

    Volumen Muerto~1 - 3ul/mg de masa

    Capacidad ~1- 5% de masa empquetada

    Volumen Muerto ~120ul/100mg de masa empaquetada

    April 30, 2012 24 Agilent Confidential

  • Monolitica

    Masa slida con poros

    Mayor area superficial que las masas empaquetadas lo que proporciona:

    Mayor capacidad (con lo que son masas empaquetadas de menor tamao)

    Menores Volmenes de elucin Sirven para tamaos de Muestras muy pequeas

    April 30, 2012 25 Agilent Confidential

  • SPEC: Menores Volmenes de Elucin

    60

    70

    80

    90

    100

    1000uL

    500 uL 250uL 150uL 100uL 75uL

    SPECPolymeric

    % Rec.

    Elution Volume

  • Cama Monoltica

    Masa Empaquetada

    Monolitica

    SPEC es slica monoltica SPEC estructura del poro: Macro partculas (7m) forman un

    laberinto complejo

    Acelerar el flujo Minimiza el atasco Promuve el contacto

    superficial Poros estandar (70) forman un rea

    superficial expandida

    Mxima interaccin con el analito objetivo

    April 30, 2012 27 Agilent Confidential

  • Caractersticas Especiales de las camas Monolticas

    Monolitos tienen mayor capacidad por unidad de masa til para formatos de SPE ms pequeos Debido a la disminucin de cantidad de masa, los monolitos dan:

    Volmenes de Elucin ms bajos que la masa empquetada de SPE (silica)

    Esto da lugar a menor uso de disolventes y Sensibilidad MS incrementada

    Monolitos permiten flujo birideccional Se pueden empaquetar en formato de puntas

    Se puede automatizar. Tambin se puede usar por gravedad Se mejora la facilidad de uso, los tiempos de poroceso y la

    reproducibilidad

    April 30, 2012 28 Agilent Confidential

  • Fases SPEC

    Fase Reversa C2, C8, C18, C18AR, PH

    Fase Normal e Intercambio Inico NH2, CN, Si, PSA, SAX, SCX Modo Mixto

    MP1, MP3 (SCX y no polar)

    Cartuchos de 3 mL y 10mL (15 o 30 mg) 15 y 30mg placas de 96 pocillos (~ 1mL) Discos de 47mm para extracciones medioambientales

    April 30, 2012 29 Agilent Confidential

  • OMIX vs SPEC

    Omix se basa en material SPEC. Las diferencias son las siguientes:

    SPEC es un formatos en cartuchos/disco, mientras que OMIX

    tiene un formato de punta de pipeta En OMIX no hay prefiltros OMIX tiene masa de material ms pequea La densidad del material de Omix se ha optimizado para un

    contacto optimo con el analito y flujo de la muestra a travs de la punta.

    puntas 10 L y 100 L , 0.25mg - 1mg de fase, C18, C4, SCX

    April 30, 2012 30 Agilent Confidential

  • Si el analito est bien retenido . . .

    . . . Solo una pequea masa de sorbente es necesaria

    La masa empaquetada retiene las impurezas

    Se requiren mayor volumen de elucin El extracto se enriquecer de impurezas

    impurezas

    Masas empaquetadas pequeas SPE OMIX

    April 30, 2012 31 Agilent Confidential

  • Recomendaciones de Muestra y volmenes de elucin

    Mximo Volumen de Elucin Dependiente del tipo de muestra (viscosidad, partculas en

    suspensin, etc). Para puntas Tomtec , 150 L plasma es elmximo de Seguridad

    recomendado (antes del pretratamiento de la muestra) Par puntas Hamilton, se han probado volmenes de plasma hasta

    100ul (2000 ng/mL)

    Volumen de Elucin Tambin dependiente del analito. Unos analitos muestran recuperacin suficiente con 2 x 25ul,

    mientras que otros pueden requerir hasta 2 x 150ul

    April 30, 2012 32 Agilent Confidential

  • Puntas de Microextraccin Omix. Ventajas y Limitaciones

    Ventajas

    Permite Volmenes extremadamente bajos 20 uL de muestra 25-50 uL de elucin

    Manual con un pipeteador de canal nico o multipes

    Puntas Tomtec y Hamilton para conseguir una automatizacin total

    Limitaciones

    Fases no altamente

    especialozadas Opciones de masa limitadas Capacidad Limitada

    (usualmente no es un problema en Pharma)

    April 30, 2012 33 Agilent Confidential

  • Caractersticas Productos Monolticos y beneficios

    Los Productos SPEC SPE tienen una alta capacidad lo que da lugar a mayores recuperaciones utilizando volmenes de elucin ms bajos que las fases empaquetadas de SPE.

    Reduce el tiempo de secado, mejora la sensibilidad, y se minimiza el uso de disolventes.

    Puntas de SPE Omix, tecnologa monoltica SPEC, aplicada a una gran variedad de formatos de puntas.

    Reduce el consumo de tiempo del operario y permite incrementar la productividad con una automatizacin completa.

    Capacidad para bajos volmenes, lo que tiene mucha relevancia en el bioanlisis en Pharma

    April 30, 2012 34 Agilent Confidential

  • Ventajas de las Tcnicas Modernas

    - Reduccin del tiempo

    - Reduccin de Disolventes

    - Automatizacin

    - Mejor Rendimiento: Mayor Factor de Concentracin, Mejor Selecividad, Purificacin Mejorada

    - Menos dependiente del Operario

    - Menores Costes de Operacin

  • FASES NO POLARES

    C18 Octadecyl C2 Ethyl CH Cyclohexyl PH Phenyl

    FASES POLARES

    CN Cyanopropyl 2OH Diol NH2 Aminopropyl SI Silica

    FASES DE INTERCAMBIO INICO

    SCX Strong cation exchanger CBA Weak cation exchanger SAX Strong anion exchanger NH2 Weak anion exchanger

    FASES ESPECIALES

    PBA CERTIFY ENVIRELUT ACCUCAT

    Incr

    emen

    to d

    e la

    Pol

    arid

    ad

    Clases de Fases Enlazadas a base de Silica

    PresenterPresentation NotesAnother crucial reason for why silica is so prevalent in SPE is that it can be modified by reaction. The above list is a short one compared to the total number of sorbents produced on silica in only the last few years.Accucat- mtodo mixto con SCX y SAXEnvirelut- SDB no polarCertfy- C8 ms SCXAccucat especialmente para extracccin de catecolaminas a partir de fluidos biolgicos. Permite la extraccin selectiva de comp ac, basicos y neurtos modificando el pHPBA- ac fenilboronico . Mecanismo enlazes covalentes, especial para retencin de catcolaminas, RNA y DNA.The raw material for the sorbent must be reactive enough to permit its surface to be modified by chemical reaction, yet stable enough to allow use on a wide range of samples and under a wide range of conditions. Silica meets these requirements.

    These classes have been grouped by their common sample preparation uses. Thus, non-polar phases are often (but not exclusively) used to extract non-polar, water-insoluble compounds from aqueous matrices, and so on.

  • Por qu predominan los sorbentes a base de Silica?

    Tamao de Partcula Controlada (e.g. 40 y 120 m)

    Tamao de Poro Controlado (e.g. 60 A)

    rea Superficial Controlada (hasta 600 m2 /g)

    Fortaleza Mecnica / rigidez

    Estabilidad Qumica / Amplia compatibilidad con Disolventes

    PresenterPresentation NotesA trade-off between efficiency, capacity, rapid sample flow and fast equilibration is made in selecting the optimum sorbent support. That is why 40um supports are by far the most common. Larger mean particle sizes result in lower efficiency and correspondingly small breakthrough volumes. Smaller sorbent particles cause excessive backpressure and may often plug or block up during sample application.

  • Fortaleza del Disolvente

    SORBENTE Incremento de la fortaleza de elucin

    Silica Hexano Metanol, AcCN

    Agua

    Styrene Divinyl Benzene

    Agua Etilo acetate

    Hexano

    Slica Enlazada

    Agua/ Metanol, AcCN

    Aqu se ignoran aspectos cinticos y termodinmicos de la solubilidad del analito

    PresenterPresentation NotesChemical strength is always relative: a strong solvent with respect to a bonded silica surface is one that can supply each interaction the solid phase can supply. Thus mixed solvents such as methanol/water or the water-miscible organics are "strong". This is an important consideration if we are trying to elute a compound containing hetero-atoms with a solvent such as hexane or methylene chloride.

  • Bond Elut Plexa Un nueva clase de Material

    Polimrico SPE

  • Como funciona Bond Elut Plexa

    Aplicacin de Muestra Lavado

    Largas Protenas endgenas no pueden

    acceder a los poros

    Los analitos permanecen enlazados fuertemente

    con el ncleo hidrofbico del polmero

    La estructura del poro est diseada especialmente

    para permitir un elucin excelente

    El analito es transferido

    dentro del polmero

    con una cintica

    excelente

    Componente hidroflico del polmero

    permitiendo una excelente transferencia

    de fase Las Protenas endgenas son eliminadas

    Se obtiene un extracto limpio

  • Plexa Una nueva clase de Polmero

    Las drogas polares y no polares enlazan con la parte hidrofbica del final del poro en la estructura de SDVB

    Hay un ligando hidroxilado en la superficie de y en las zonas superficiales de los poros. En el interior de los poros hay material hidrofbico. A diferencia de otros materiales polimricos del mercado, no hay grupos amida derivados de la n-vinyl pyrrolidona que contribuyen al mantenimiento en la superficie de interferencias de la matriz.

    Protenas excluidas La frecuencia de los grupos OH se reduce

    Grupos OH Hidroflicos DVB Hidrofbico

    Cambio en polaridad

  • Como se compara con sus rivales ?

    Grupos Amida permite interacciones proteina-polmero

    Lpidos se pueden tambin unir a los grupos polares polimricos

    Durante la elucin, las protenas y los analitos pueden co-eluir

    Lider del Mercado tiene un esqueleto de N-vinilpirolidinona

    Bond Elut Plexa no contiene nitrgeno!

  • Como funciona Bond Elut Plexa PCX

    CARGA Superficie hidroflica permite una excelente transferencia de fase de los analitos bsicos a los lugares de intercambio catinico del polmero

    LAVADO Los analitos se mantienen fuertemente enlazados al polmero mediante interacciones inicas fuertes

    ELUCIN El cambio de pH permite la elucin de los analitos de los sitios de intercambio catinico

    Las largas Protenas endgenas no pueden acceder a los poros

    Interferencias como lpidos se pueden lavar sin perder analitos bsicos

    Analitos limpios con una recuperacin elevada

  • Metodologa Plexa Sencilla

    Bases/Neutros

    Acondicionamiento: 500 L MeOH 500 L water

    Aplicacin muestra: 100 L plasma dil 1:3 w/ 2% NH4OH

    Lavado: 500 L 5% MeOH

    Elucin: 500 L MeOH

    Acidos

    Acondicionamiento: 500 L MeOH 500 L water

    Aplicacin muestra: 100 L plasma dil 1:3 w/ 1% formic acid

    Lavado: 500 L 5% MeOH

    Elucin: 500 L MeOH Mtodos para 10 mg Plexa en placa de 96 pocillos

    Bond Elut Plexa Bases Acondicionamiento: 500 L MeOH 500 L water Aplicacin muestra: 100 L plasma dil 1:3 w/ 2% phosphoric acid Lavado cido: 500 L 2% aqueous formic acid Lavado Neutro: 500 L MeOH:ACN (1:1 v/v) Elucin: 500 L MeOH:ACN (1:1 v/v) + 5% NH3 (28-30%).

    Bond Elut Plexa PCX

  • 45

    Plexa - Resultados

    Analito Plexa

    Albuterol 97.9

    Atenolol 97.0

    Loratadine 71.0

    Metoprolol 92.0

    Naltrexone 85.7

    Zolpidem 93.0

    pKa LogP

    10.3 1.3

    9.6 1.3

    4.9 5.2

    10.8 1.3

    9.2 1.8

    6.2 3.9

    Condiciones: Recuperacin Absoluta a partir de plasma humano (vs. patrn postextraccin.)

    Condiciones bsicas de carga, n=6, 200 ng/ml

  • Precisin mejorada - Supresin inica reducida

    PCX

    Otro Polimero La superioridad del Bond Elut PLexa PCX es evidente en la eliminacin de la supresin inica

    inducida por la matriz.

    PresenterPresentation NotesHere you can see a real post column infusion comparing our PCX polymer with a leading competitor. You can see that both have ion suppression on the left hand side (owing to salts, which are not an issue as they elute in the very early stages of separation) but the competitor device has dips in the green (lipid) and red (protein) areas. This shows that the SPE device used in the bottom has not removed all the interferences.

  • Cmo identificar la Supresin Inica. Experimento de Infusin post-columna

    47

    Bomba Masas

    Muestra (matriz) inyectada

    Columna

    Jeringa de Infusin Seal MS

    Tiempo

    Muestra (matriz) (SPE) Gradiente. Solo analito Isocrtico. Solo analito

    PresenterPresentation NotesThis is a reasonably complex slide to explain and will be covered in more detail during the training run-through..

    But in brief.. A drug of known quantity is infused into the mass spec post column. As the mobile phase runs through you see the following mass responses (red-isocratic) and (blue gradient) (the blue line has the characteristic shape due to the changing eluotropic strength of the mobile phase, analytical chemists will expect this.We then inject a sample of plasma that has been added as a blank run in the SPE method. i.e. the plasma has been extracted and eluted under the manufacturers SPE method.This is injected onto the LCMS. If there are any matrix interferences left over after the SPE step (i.e. the Spe device is poor in clean up) then when those interferences meet the infused analyte post column, they will cause ion suppression..this can be seen as dips in the purple trace

    On the next page we can show a real example

  • Recuperacin Absoluta vs. Recuperacin Relativa Recuperacin Absoluta (AR)

    1 - Plasma + ISTD + frmaco

    2 - Extraccin

    3 - Inyeccin

    Comparado con:

    Fase Mvil+ ISTD + frmaco

    No extraccin, no hay prdidas en las recuperaciones

    No plasma, no hay efectos de matriz

    Recuperacin Relativa (RR)

    1 - Plasma + ISTD + frmaco

    2 - Extraccin

    3 Inyeccin

    Comparado con:

    Un grfico de farmacos de control extraidos (curva de calibracin)

    Los frmacos son los mismos y se deberan extraer con las mismas eficiencias

    Si las curvas de calibracin se hacen con datos de recuperacin del 80%, y los desconocidos se recupern al 80%, las recuperaciones relativas mostrarn un 100%!!

  • Recuperacin Absoluta vs. Recuperacin Relativa

    Recuperaciones relativas Se aaden concentraciones conocidas de patrn en la matriz, extraen(SPE),

    y luego se crea una curva de calibracin Se usa la curva de calibracin para calcular las concentraciones del

    compuesto desconocido Se puede enmascarar los efectos de la supresin inica

    SI el patrn se extrae al 80% de recupercin, y el desconocido tambin, se mostrarn resultados de recuperacin del 100%.

    Las recuperaciones Absolutas no suprimen estos efectos Se compara un desconocido con el patrn inyectado directamente

    Pequeas diferencias entre las recuperaciones absolutas vs. relativas es indicativo de la mayor limpieza del extracto o de caractersticas de extraccin superiores

    April 30, 2012 Confidentiality Label

    49

  • Recuperacin Absoluta vs. Recuperacin Relativa

    Recuperacin Absoluta

    Recuperacin Relativa

    Pequeas diferencias entre AR y RR indican mayor eficiencia de extraccin y menor prida de seal debidoa la supresin inica.

    Diferencias mayores indican problemas de sensibilidad debidas a baja eficiencia de extraccin o supresin inica

    Catlogo Plexa

    April 30, 2012 50 Confidentiality Label

  • Sumario

    Bond Elut Plexa es un material Polimrico nuevo.

    Mtodos simples de usar

    Extractos limpios

    Exclusin de la albmina srica

    Supresin Inica reducida

    Tolera el secado

    Volmenes de elucin bajos

    Excelentes caractersticas de flujo

  • Extraccin Lquido-Lquido sin embudo de decantacin

    Extraccin Lquido / Lquido

  • 53

    Fase Orgnica

    Matriz Acuosa

    Extraccin L/L clsica

    Como mejorar el rea de contacto entre la fase acuosa/fase orgnica?

  • 54

    Chem Elut

    Fase Acuosa Alta rea superficial

    x

    x

    x x x

    x x

    x

    x

    x

    x

    x x

    x

    Extraccin L/L sobre soporte slido

  • Manual de uso de Chem Elut

    55

    PASO 1: Aplicar la muestra acuosa sobre el cartucho seco de Chem Elut

    Flujo por Gravedad! No se necesita vaco !

    Hydromatrix Dry sorbent

    Seleccin del tamao adecuado del cartucho ChemElut/ToxElut o material de hidromatrix basado en el volumen de muestra acuosa. Regla general para la capcidad de adsorcin: 1 g Hydromatrix para 1 ml de muestra.

  • Manual de uso de Chem Elut

    56

    Fase Acuosa

    PASO 2: Esperar 5-15 minutos

    Que ocurre en la superficie de Chem Elut?

    Las muestras adsorbidas son estables y no necesitan ser extraidas inmediatamente. Esta es una ventaja de los cartuchos chem elut, donde la muestra est protegida de la evaporacin y se puede utilzar como almacenamiento de la muestra y medio de transporte. Para trabajar al pH ptimo de los analitos, se puede cambiar el pH de la muestra acuosa dentro del cartucho. Esto permite la elucin fraccionada de los compuestos cidos, bsicos y neutros.

    PresenterPresentation NotesThe pre-measured aqueous sample spreads as a thin film over the Hydromatrix sorbent and thus acts as a liquid stationary phase. Water, ions, and very small, polar compounds are absorbed into the porous material, depositing analytes onto the surface of the Hydromatrix.

  • Manual de uso de Chem Elut

    57

    Fase Orgnica

    PASO 3: Aadir disolvente orgnico de extraccin

    Que ocurre en la superficie de Chem Elut ?

    La Elucin se lleva a cabo utilizando disolventes orgnicos que son inmiscibles con el agua. En general, la extraccin con 2-3 veces volumen de muestra es suficiente.

    Flujo por Gravedad No se necesita vaco

    PresenterPresentation NotesThe extract is water free and free of interfering emulsions.It can be directly analysed or evaporated and reconstituted for further analysis.

  • Sorbentes y Productos

    Los productos Agilent para la extraccin lquido/lquido estn basados en tierra de diatomeas ultralimpia con un alto volumen de poro. (Hydromatrix TM)

    ChemElut pretamponado: cartuchos (pH 4.5 y pH 9) eliminan la necesidad de ajustar el pH de la muestra previo a la extraccin

    ChemElut Plus: tierra de diatomeas sinttico. Es muy limpio y tiene una alta resitencia a la rotura.

  • CombiLute: Placa de 96 pocillos de SPE con material Hydromatrix. Cada placa est rellena de 200 mg de Hydromatrix y sellado con un material sellante.

    Combilute es efectivo, fcil, automatizable, y ofrece un sistema de clean-up con reduccin de consumo de disolvente

    Productos Liq/Liq en placas de Pocillos

  • Aplicaciones Casi todas las extracciones, que se han llevado a cabo utilizando el embudo de decantacin, se pueden transefir a ChemElut.

    Especialmente para la preparacin de muestras de orina, sangre total, plasma, suero y otros fluidos biolgicos, se recomiendan los cartuchos ChemElut .

    El producto Combilute juega un papel importante para purificacin rpida y simple bibliotecas combinatorias sintetizadas por la tcnica de sntesis paralela.

    Otras aplicaciones son en el campo medioambiental y anlisis de residuos, e.j. El anlisis de agua de bebida y agua residual.

    Hydromatrix ha probado ser una herramienta til en extracciones de fluidos supercrticos (SFE) y extracciones de disolvente acelerada(ASETM). Las propiedades adsorbentes de Hydromatrix la hace ideal para usarse con soporte slido en SFE y ASE.

  • Placas de 96 pocillos de filtracin

    Cartuchos de Filtracin

  • Muestras ms claras y limpias en menos de 15 minutos

    Ms rpido que la centrifugacin Proporciona muestras ms limpias Fcilmente automatizable No hay interferencias Permite una vida media ms larga

    Ventajas de las Tcnicas de Filtracin Modernas

    0 20 40 60 80

    Captiva vs. Centrifugation

    Tiempo total

    Tiempo de Procesamiento

    Tiempo de Puesta en Marcha

    Tiempo de pretratamiento de la Muestra

  • Filtracin General

    Captiva est listo

    Pipetear la muestra

    Introducir la pipeta dentro de Captiva y filtrar

  • Aplicaciones de Filtracin Captiva

    Filtracin y Almacenamiento de Plasma

    Precipitacin de protena plasmtica Filtracin

    Filtracin General de la Muestra

  • Resumen: Preparacin de Muestras Moderna

    -Reduccin del tiempo de preparacin

    - Reduccin uso de disolventes

    -Automatizable

    - mejor rendimiento:

    Mayor factor de concentracin, Mejor selectividad, Purificacin mejorada Menos dependiente del operario

    Menos costes de operacin

    Extraccin en Fase Slida Extraccin Liquido / Liquido Filtracin

    Beneficios: Hardware

    Cartuchos Placas de Pocillos Discos

    Seleccione el material apropiado para:

    BBDD ScanView para aplicaciones

    GC, HPLC y SPE

    Nuevas tendencias en Preparacin de Muestras David de la Serna. Jefe de Ventas de Columnas y Fungibles22 de Febrero de 2011De lo clsico a lo modernoExtraccin en Fase Slida (SPE)Objetivo de la Preparacin de MuestrasObjetivos de la Preparacin de MuestrasSPP FormatosSlide Number 7SPE Formatos masa empaquetada - cartuchosFormatos SPE Masa Empaquetada Placas de 96 PocillosFormatos SPE Disco MonolticoFormatos SPE OMIX Formatos SPE para automatizacinPlataformas de AutomatizacinFormatos SPE SPE Online ValvulaPosicin AValvula Posicin BFormatos SLLE Manifolds de vaco - VersaplateManifold de Vaco para placas de 96 pocillos SampliQ y Bond Elut Square Manifolds de Vaco - CaptivacManifolds de Vaco Vac Elut, Vac Elut 24Presin Positiva y accesoriosSPE MonolticoTecnologa Disco Monoltico: SPEC y OmixMonoliticaSPEC: Menores Volmenes de ElucinCama MonolticaCaractersticas Especiales de las camas MonolticasFases SPEC OMIX vs SPECMasas empaquetadas pequeas SPE OMIXRecomendaciones de Muestra y volmenes de elucinPuntas de Microextraccin Omix. Ventajas y LimitacionesCaractersticas Productos Monolticos y beneficiosVentajas de las Tcnicas ModernasClases de Fases Enlazadas a base de SilicaPor qu predominan los sorbentes a base de Silica?Fortaleza del DisolventeSlide Number 39Como funcionaBond Elut Plexa Plexa Una nueva clase de PolmeroComo se compara con sus rivales ?Como funciona Bond Elut Plexa PCX Metodologa Plexa SencillaPlexa - ResultadosPrecisin mejorada - Supresin inica reducidaCmo identificar la Supresin Inica. Experimento de Infusin post-columnaRecuperacin Absoluta vs. Recuperacin RelativaRecuperacin Absoluta vs. Recuperacin RelativaRecuperacin Absoluta vs. Recuperacin RelativaSumarioSlide Number 52Slide Number 53Slide Number 54Manual de uso de Chem Elut Manual de uso de Chem ElutManual de uso de Chem ElutSorbentes y ProductosProductos Liq/Liq en placas de PocillosAplicacionesSlide Number 61Slide Number 62Filtracin General Aplicaciones de Filtracin Captiva Resumen: Preparacin de Muestras Moderna