PRACTICA #MONTAJE PERMANENTE DE NEMATODOS FILIFORMES

INTRODUCCIÓN

El estudio detallado de los nematodos requiere la preparación de láminas temporales,

semipermanentes o permanentes que faciliten la observación de las características más relevantes

de los especímenes.

Los montajes permanentes son muy útiles, cuando por la naturaleza de la investigación, es

necesario preservar los montajes de especímenes por más tiempo, lo que permite al investigador

realizar las mediciones, fotografías y dibujos de los nematodos recolectados también son

recomendados este tipo de montajes para mantener los especímenes en colecciones de referencia

en museos, universidades e institutos de investigación.

OBJETIVOS

Aprender a realizar montajes permanentes de nematodos filiformes.

METODOLOGIA

1. Transfiera los nemátodos procesados (filiformes) a un recipiente con glicerina.

2. Limpie el cubre y portaobjeto con alcohol al 96%. Coloque una gota de glicerina sobre el

portaobjeto lo más centrado posible.

3. Se ponen Tres o cuatro pelos de ángel en el centro de la gota de glicerina, estos pelos son del

diámetro similar al de los nemátodos y se le denominan como calzas y su fin es evitar que los

nematodos se aplasten a la hora de sellar la preparación, estas calzas se ponen en forma de

triángulo si se colocaron 3 o en forma de cuadrado si se pusieron 4 pelos de ángel.

4. Coloque los nemátodos a montar en el centro de la gota de glicerina y en posición radial a la

gota.

5. Deposite suavemente un cubreobjetos tibia para que no quede burbujas de aire. El cubre

objetos queda sobre las fibras de vidrio las que impiden que los nemátodos sean presionados por

el cubreobjetos.

6. Si la gota no llena el cubreobjetos, se puede añadir glicerina. Si lo sobrepasa retire el exceso con

pedazos de papel filtro.

7. Fije el cubreobjetos con tres gotas de esmalte de uñas transparente, aplicados en tres puntos

distintos. Después de 5 minutos selle completamente con esmalte de uñas transparente mediante

un pincel.

8. Una vez montado los nematodos ponga una etiqueta con los datos correspondientes de la

muestra.

RESULTADOS

Ilustración 1 Pesca de nematos para el montaje

Ilustración 2 Nematodo montado con calzas rodeándolo para evitar que se aplaste

Ilustración 3 Montaje terminado etiquetado y listo para dejarlo secar

DISCUSION

Algunos autores consideran que durante el procedimiento a realizar primero se coloquen los

nematodos en la gota de glicerina del portaobjetos y después se coloquen las “calzas”, pero en la

práctica este método es algo complicado y resulto ser más conveniente colocar primero las calzas

ya que así es más fácil poner correctamente en el centro de la gota a los nematodos a estudiar.

CONCLUSION

El uso de las calzas es indispensable para poder realizar un montaje de calidad, ya que si estos no

se ponen los nematodos quedan dispersados por todo el portaobjetos o se pueden aplastar al

entrar en contacto con el cubreobjetos haciendo inservible el montaje.

Otro factor muy importante para el éxito del montaje es que este quede sin burbujas de aire a la

hora de colocar el cubreobjetos, ya que si la muestra presenta burbuja con el tiempo el nematodo

se deshidratara y no servirá para observaciones posteriores.

El uso de glicerina es un poco más complicado debido a su consistencia y se tiene que tener más

cuidado y ser más limpio a la hora de sellar el montaje, ya que como en las preparaciones

temporales a la hora de usar agua esta se puede limpiar más fácil a la hora de sellar, caso contrario

de la glicerina.

BIBLIOGRAFIA

Mena Adriano, José Daniel 2008 Manual de Prácticas de Nematología, Universidad

Autónoma de Sinaloa, México http://www.slideshare.net/themena1/antologia-practicas-

nematologa

Sosa-Moss, Carlos, 1997 Manual de técnicas para el diagnóstico de las enfermedades de

las plantas, Instituto Interamericano de cooperación para la agricultura agencia de

cooperación técnica ICCA, México.