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UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIAPAS
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICASCAMPUS IV EXTENSIÓN
OCOZOCOAUTLA
BIOLOGIA CELULAR
CATEDRATICO
DR. ANA OLIVIA CAÑAS URBINA
INTEGRANTES
ARÉVALO PÉREZ ALEXANDRA YURIKO
GÓMEZ DEL CARPIO GUADALUPE E.
MANGA CIGARROA JOSARY YAEL
MASTER: NUÑEZ GOMEZ JESUS WILFREDO. Visto bueno
PRACTICA 3:MICROSCOPIO
1
ÍNDICE
INTRODUCCIÓN.....................................................................................................2
OBJETIVO................................................................................................................2
MICROSCOPIO.......................................................................................................3
PARTES DE UN MICROSCOPIO............................................................................3
TIPOS DE MICROSCOPIO......................................................................................4
CABELLO.................................................................................................................7
MATERIALES...........................................................................................................8
METODOLOGÍA.......................................................................................................8
RESULTADOS.........................................................................................................9
DISCUSION DE RESULTADOS............................................................................12
CONCLUSION.......................................................................................................12
REFERENCIAS......................................................................................................13
CUESTIONARIO....................................................................................................14
2
INTRODUCCIÓN
El microscopio es un instrumento de suma importancia debido a que es utilizado
por la ciencia para hacer grandes descubrimientos.
Gracias al uso del microscopio se pudo descubrir la célula, con Robert Hooke.
En la actualidad ya existen varios tipos de microscopio como es el óptico, de
fluorescencia, eléctrico de transmisión y el microscopio eléctrico de barrido.
Con el microscopio óptico se puede observar materia viva, este tipo de
microscopio cuenta con oculares, brazo, revolver, platina, diafragma, lámpara,
tornillo micrométrico y macro métrico, condensador, lámpara y los objetivos que
son cuatro, de: 4x, 10x, 40x y de 100x.
La resolución es lo que ayuda a que se pueda ver en los microscopios, esta
depende de la amplitud del cono objetivo y del condensador. Se puede medir
mediante una fórmula que es la siguiente:
Resolucion= 0.61λnsenΘ
Donde λ es la longitud de onda.
OBJETIVO
El alumno aprenda el manejo del microscopio, conocerá como está constituido y
cuál es su importancia de este.
3
MICROSCOPIO
Tortora, Funke, & Case, 2007 dice que el microscopio es un instrumento óptico
que amplifica la imagen de un objeto pequeño. Es un instrumento que más se
utiliza en laboratorio y que estudian a los microorganismos, mediante un sistema
de lentes y fuentes de iluminación se puede hacer visible un objeto microscópico.
Los microscopios pueden aumentar de 100 a cientos de miles de veces el tamaño
original.
El invento del microscopio se atribuye a Zacharias Janssen, un fabricante
holandés que posiblemente con la colaboración de su hermano y de su padre,
desarrollo el microscopio en 1608.
PARTES DE UN MICROSCOPIO
Imagen 1 partes del microscopio. (Tortora, Funke, & Case, 2007)
4
TIPOS DE MICROSCOPIO
Los microscopios a través de los años han sido mejorados para que se puedan
observar objetos de tamaños más diminutos de una manera más nítida. Es por ello
que en la actualidad existen diferentes tipos de microscopios, mismos que poseen
diferentes formas de dar aumento a las imágenes, pero todos coinciden en el
mismo fin, que es aumentar las imágenes de diferentes cosas que a simple vista
no es posible observar. Fundamentalmente existen dos tipos de microscopio: el
simple y el compuesto (Tortora, Funke, & Case, 2007)
Un microscopio simple está formado por una lente, es decir
una lupa. (Imagen 2)
Un microscopio compuesto es evolución del anterior, este posee múltiples lentes
que se encuentran graduadas y colocadas de tal manera
que el aumento de tamaño al ver los objetos puede superar
las dos mil veces el tamaño real del objeto. (Imagen 3)
El Microscopio Óptico Compuesto (MO) es el más común
utilizado en microbiología. El aumento total de un objeto se calcula mediante la
multiplicación del aumento de la lente objetivo por el aumento de la lente ocular. El
microscopio óptico compuesto es el que utiliza la luz visible. Su resolución máxima
o poder de resolución, es la capacidad de medir dos puntos de un microscopio
óptico compuesto es de 0,2 um; el aumento máximo es de 2000 x. Para este
microscopio las muestras se tiñen para aumentar la diferencia entre los índices de
refracción de la muestra y del medio. El aceite de inmersión se utiliza con las
lentes de inmersión en aceite para reducir la perdida de luz entre el portaobjeto y
la lente. La iluminación con campo claro se utiliza para los extendidos teñidos. Las
Imagen 2. Microscopio simple.
Imagen 3. Microscopio compuesto.
5
células no teñidas se observan mejor mediante la microscopia de campo oscuro,
contraste de fase.
Microscopio de Campo Oscuro (MCO) muestra una
silueta luminosa de un organismo contra un fondo
oscuro. Es más útil para detectar la presencia de
organismos extremadamente pequeños. Utiliza un
condensador especial con un disco opaco que bloquea
la luz que llega directamente al objetivo; solo ingresa en
el objetivo la luz reflejada por la muestra y la muestra
contra un fondo negro. (Imagen 4)
Microscopio de Contraste de Fase (MCF) une los rayos
directos y los rayos reflejados o difractados de luz (en
fase) para formar una imagen de la muestra en el
ocular. Permite la observación detallada de los
organismos vivos. No requiere de tinción. El diafragma
permite que la luz directa del condensador pase, se
enfoque la luz sobre la muestra y en una placa de difracción en la lente objetivo.
(Imagen 5)
Microscopio de Contraste por Interferencia Diferencial
(MCID) proporciona una imagen tridimensional
coloreada del objeto que se va a observar, permite
observaciones detalladas de las células vivas. Utiliza
dos fases de luz separados por prismas; la muestra
aparece coloreado como resultado del efecto prisma.
No requiere tinción. (Imagen 6)
Microscopio de Florescencia (MF), las muestras se
tienen que teñir primero con fluorocromos y luego se
visualizan a través de un microscopio compuesto
mediante el empleo de una fuente de luz ultravioleta.
Los microorganismos aparecen como objetos brillantes
Imagen 4. Ilustración de una muestra a través del MCO.
Imagen 5. Ilustración de una muestra a través del MCF.
Imagen 6. Ilustración de una muestra a través del MCID.
Imagen 7. Ilustración de una muestra a través del MF.
6
con un fondo oscuro (teñidos de verde). La microscopia fluorescente se utiliza
sobre todo en un procedimiento diagnostico denominado técnica con anticuerpo
fluorescentes o inmunoflorescencia. (Imagen 7)
Microscopio Confocal (MC) utiliza luz por láser para iluminar. En la microscopia la
muestra se tiñe con un colorante fluorescente y se ilumina un plano por vez. Se
utiliza unos ordenados para procesar las imágenes; pueden obtenerse imágenes
bidimensionales y tridimensionales de las células. (Imagen 8)
Microscopio Acústico de Barrido (MAB) se basa en la
interpretación de ondas sonoras que atraviesan una
muestra. Se utiliza para estudias células vivas
adheridas a las superficies como células cancerosas,
placas arteriales y películas biológicas. (imagen 9)
Microscopio Electrónico (ME) se utiliza un haz de
electrones en lugar de luz, los electrones atraviesan la
muestra. Para el control del foco, la iluminación y el
aumento se utilizan lentes electromagnéticos en lugar
de lentes de vidrio. Los cortes delgados de los
organismos pueden observarse en una microfotografía
electrónica producida como un microscopio
electrectonico de transmisión (MET) que aumenta
10000-100 x el poder de resolución 2.5 um. (Imagen 10)
Microscopio Electrónico de Barrido (MEB) utiliza un
haz de electrones en lugar de luz; los electrones se
reflejan desde la muestra; dada la longitud de onda
más pequeña de los electrones, pueden resolverse
estructuras menos de 0,2 um. La imagen producida es
tridimensional. (Imagen 11)
Imagen 8. Ilustración de una muestra a través del MC.
Imagen 9. Ilustración de una muestra a través del MAB
Imagen 9. Ilustración de una muestra a través del MAB
Imagen 10. Ilustración de una muestra a través del ME
Imagen 11. Ilustración de una muestra a través del MEB
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Microscopio de Sonda de Barrido por Efecto Túnel
(MBT) utiliza una sonda delgada de metal que
recorre una muestra y produce una imagen que revela
las protuberancias y las depresiones de los átomos
sobre la superficie de la muestra. El poder de
resolución es mucho mayor que el de un microscopio
electrónico. No se aprecia una preparación especial.
Producen imágenes tridimensionales de la superficie
de una molécula. (Imagen 12)
Microscopio de Fuerza Atómica (MFA) utiliza una
sonda de metal y diamante que se aplica con una
fuerza suave a lo largo de la superficie de una
muestra. Produce una imagen tridimensional. No se
precisa una preparación especial (Tortora, Funke, &
Case, 2007). (Imagen 13)
CABELLO
El cabello o pelo, es una continuación de la piel cornificada, formada por una fibra
de queratina y constituida por una raíz y un tallo. Se forma en un folículo de la
dermis, y constituye el rasgo característico de la piel delgada o fina. La diferencia
entre la queratina de la capa córnea y la queratina del pelo es que en el pelo las
células quedan unidas siempre unas con otras, dando lugar a una queratina más
dura (Wikipedia, 2017). Cada uno de los pelos consiste en una raíz ubicada en un
folículo piloso y en un tallo que se proyecta hacia arriba por encima de la
superficie de la epidermis. La raíz se agranda en su base.
La zona papilar o papila dérmica está compuesta de tejido conjuntivo y vasos
sanguíneos, que proporcionan al pelo las sustancias necesarias para su
crecimiento (Wikipedia, 2017).
Imagen 12. Ilustración de una muestra a través del MBT
Imagen 13. Ilustración de una muestra a través del MBT
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MATERIALES
Microscopio
Portaobjeto
Cubre objeto.
METODOLOGÍA
Para la realización de la práctica de microscopio, se utilizara de muestra el
cabello de cada integrante del equipo.
Cada cabello se colocara en el porta objeto.
Se colocara las muestras en la platina del microscopio y con ayuda de los
tornillos macro y micrométricos, se subirá y enfocara cada muestra.
Las muestras se observaran con los objetivos 4x, 10x y 40x.
Anotar las observaciones.
Por último apagar el microscopio utilizado y proceder a limpiar el área de
trabajo.
RESULTADOS
Como resultados de la práctica del microscopio, se pudo conocer las partes que lo
constituyen y observar la raíz capilar del cabello con los objetivos de 4x, 10x y
40x, al mirar en el ocular obtuvimos los grados de cada integrante y en la platina
encontramos las coordenadas en donde se localizó de la muestra deseada.
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Partes del microscopio (imagen 14):
Ocular: es la lente que se ubica en la parte
superior, con los oculares se pudo
observar nuestras muestras de manera en
que los grados obtenidos nos diera una
sola imagen.
Revólver: este nos permitió cambiar de un
objetivo a otro.
Platina: es el lugar donde se coloca la
preparación que se va observar.
Objetivo: son las lentes principales que
amplía la imagen de la muestra,
determinando la cantidad de aumento con
la deseamos observar.
Tornillo macrométrico y micro: que nos
sirvió para acercar la platina a los
objetivos y que aproxima al enfoque y con
el micro se logró realizar el enfoque hacia
la muestra.
Durante la práctica obtuvimos diferentes coordenadas y grados (tabla 1) que junto
a mis compañeras pasamos a observar en los oculares y con nuestra muestra
puesta obtuvimos nuestras coordenadas, lo cual nos dio lo siguiente:
Imagen 14. Microscopio Óptico Primo Star, foto tomada con el celular Huawei
de 13 megapíxeles por Josary Yael Manga Cigarroa.
Tabla 1. Coordenadas y grados obtenidos por cada alumna.
Alumnos (a) coordenadas grado
1 (28,15) 600, 600
2 (12,24) 660,660
3 (37,16) 660,660
10
Los resultados de la visualización de los objetivos de 4X, 10X, 40X (tabla 2).
Imagen 15. Raíz del cabello
Con el objetivo de 4x se distinguió la
raíz del cabello de un tamaño muy
pequeño, lo se observa como una
bolita negra. (imagen 15)
Imagen 16. Raíz del cabello
Con el objetivo de 10x se distinguió la
raíz del cabello de un tamaño un poco
grande donde sebe la bolita negra con
mas forma. (imagen 16)
Imagen 17. Raíz del cabello.
Con el objetivo de 40x se distinguió la
raíz del cabello de un tamaño grande
donde el puntito negro es algo
asombroso tiene la forma de una pepa.
(imagen 17)
11
Imagen 18. Raíz del cabello (cana)
Se visualizó con el objetivo 40x la raíz
del cabello de una cana, lo cual se
parece a una gota blanca. (imagen 18)
Tabla 2. Imágenes tomadas con el celular Huawei de 13 megapíxeles por Josary Yael Manga Cigarroa.
DISCUSION DE RESULTADOS
Llegamos a una discusión con mis compañeras que el microscopio es de mucha
utilidad en los laboratorios, ya que nos ayuda a ver microorganismos más
pequeños que a la vista no podemos ver ni distinguir y gracias al microscopio
podemos observar cómo están conformados y las estructuras que estos tienen. En
esta práctica nos enseñó nuestro master Jesús a manejar de forma correcta el
microscopio nos mostró cada una de sus partes, primero a encenderlo, luego a
12
poner la muestra en la platina ,luego adaptar los oculares a la vista de cada una
para apreciar bien la imagen, usar el tornillo macro métrico para hacer un
movimiento rápido hacia arriba o hacia bajo la platina y micrométrico para hacer
un buen enfoque y observar bien la imagen y cada practica ir mejorando, también
que tenemos que tener cuidado para el manejo del microscopio en cómo debemos
agarrarlo . En esta práctica visualizamos el pelo de cada una de nosotras desde
el tallo hasta la raíz de nuestro cabello y una cana de nuestro master. Primero
colocamos nuestro cabello en un porta objeto, lo colocamos cada una para
aprender, luego lo colocamos en la platina y después usamos la macro y micro
con el objetivo 4x, también con nuestra cana y así sucesivamente con los
diferentes objetivos, practicando con nuestro master. Nuestros cabellos eran
gruesos, negros y alargados, nuestras raíces más gruesas y gordita mientras que
aumentábamos de objetivo, se ven las fibras y mucho más grande que con el ojo
no podemos visualizar, vimos la cana era alargada y blanca, al ver por el objetivo
40x vimos la raíz gruesa como una gota muy blanca como algodón.
CONCLUSION
Con base a lo realizado en la práctica se llegó a la conclusión de que es
importante saber el manejo y la función de cada una de las partes que componen
al microscopio, debido a que para nosotros como Químicos fármaco biólogos es
una herramienta clave y de su suma importancia en nuestro campo de trabajo y de
investigación.
REFERENCIAS
Alberts, B., Bray, D., Hopkin, K., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., . . . Walter, P. (2004). Introduccion a las celulas. En B. Alberts, Introduccion a la biologia celular (págs. 8-10). España: Editorial medica panamericana.
Tortora, G., Funke, B., & Case, C. (2007). Bases de la microbiologia. En G. J. Tortora, Introduccion a la microbiologia (págs. 56-71). España: Editorial medica panamericana.
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Wikipedia. (11 de Marzo de 2017). Wikipedia, la enciclopedia libre. Obtenido de https://es.wikipedia.org/wiki/Pelo
CUESTIONARIO
1. Defina longitud de onda, espectro visible, resolución y apertura numérica
R. Longitud de onda: es la distancia que hay entre dos crestas.
Espectro visible: es la luz que alcanza a percibir el ojo humano.
Resolución: el alcance que tiene el ojo humano o ya sea un microscopio u otro aparato que se use para observar o percibir cosas.
Apertura numérica: magnitud del ángulo en donde llega de enfoque de luz.
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2. ¿Cuál es la importancia del uso del condensador?
R. Nos ayuda a tener una mejor resolución de la muestra.
3. ¿Qué diferencia hay entre el ojo humano, microscopio óptico y microscopio electrónico?
R. Alberts et al, 2004, dice que el ojo humano tiene una resolución de aproximadamente 200 µm, el microscopio óptico tiene una mínima resolución de 200 nm y el microscopio electrónico tiene un resolución mínima de 0,2 nm
4. ¿Para qué se emplea el microscopio de campo oscuro, el microscopio de contraste de fases y el microscopio de fluorescencia? ¿Qué es microscopia led?
R. El microscopio de campo oscuro, se utiliza para examinar microorganismos vivos que no se pueden observar en un microscopio común, debido a que no pueden teñirse con los métodos estándares (Tortora, Funke, & Case, 2007).
Microscopio de contraste de fase, permite observar con as detalle las estructuras internas de los microorganismos vivos.
Microscopio de fluorescencia, se utiliza cuando las células son teñidas con colorantes fluorescentes específicos, estos microscopios tienen esa capacidad de poder observar esas células, como el del DNA (Alberts, et al, 2004)
Microoscopia led, es un nuevo sistema de iluminacion para los microscopios y asi tener una mejor resolucion de las muestras.
5. Explique qué son tinciones simples y qué son tinciones diferenciales y dé 2 ejemplos de cada una de ellas.
R. Las tinciones simples son aquellas que solo tienen un solo componente, como el azul de metileno o safranina.
Las tinciones diferenciales, son las que tienen más un componente o donde se usan varias, como en al tinción de Gram y tinción de Wright.
6. ¿Por qué existen objetivos con diferentes aumentos? ¿Le sirvieron en la presente práctica? Explique sus respuestas ¿Qué dificultades se presentarían si se iniciara un enfoque de muestra con la lente de mayor aumento? ¿Por qué debe emplearse aceite de inmersión con el objetivo de 100X?
R. Existen varios objetivos con diferente aumento, para que tenga diferentes perspectivas de la muestra. Cada objetivo nos fue útil esta práctica, para observar con diferente resolución la muestra, en este caso fue un cabello.
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No se va poder observar bien debido a que para el objetivo de 100x es necesario usar aceite de inmersión, este se usa para que los fotones no se escapen por completo y la luz sea dirigida hacia la muestra y tener una mejor resolución.