manual lucina[1]

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Centro de Bachillerato Tecnológico Industrial y de Servicios No. 76

MANUAL DE HEMATOLOGIA

Grupo: 4 ° “C”

Maestra: Taboada Torres Lucina

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INDICE

1.-Obtención de sangre (venosa y capilar)………………………….. 1-8 2.-Microhematocrito y macrohematocrito…………………….……. 9-123.-Cuantificar la concentración de hemoglobina………….…….. 13-174.-Recuento de glóbulos rojos……………….………………………18-215.-calcula los índices eritrocitarios……………………………… 22-276.-morfología de los glóbulos rojos…………………………….. 26-287.-recuento de los reticulocitos………………………………….8.-recuento de leucocitos…………………………………………

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Practica 1

Obtención de sangre (Venosa y capilar)

Extracción de sangre venosa

Objetivo:

Al término de la práctica el alumno tendrá la habilidad para tomar muestras sanguíneas a partir de las regiones anatómicas mas frecuentes para la toma de sangre venosa.

Introducción:

Para la realización de estudios sanguíneos es necesario obtener muestras de sangre adecuadas, ya que esta si es correcta no produce modificación alguna en los resultados.Casi todas las muestras de sangre se obtienen por punción venosa. Es el método más fácil y adecuado para obtener un volumen de sangre suficiente para llevar a cabo gran número de pruebas como por ejemplo: pruebas serológicas, recuento hemáticos y la química sanguínea. Las venas más utilizadas son las del antebrazo, especialmente las del pliegue del codo, la media cefálica y la basílica, también pueden ocuparse las venas de la muñeca o del dorso de la mano solo en casos muy necesarios. La sangre puede obtenerse con jeringa o agujas ordinarias, con tubos al vacio existentes en el comercio; este método presenta varias ventajas: ya que absorbe cantidades de sangre previstas y los tubos ya cuentan con el anticoagulante necesario.

“Obtención de sangre venosa con jeringa”

Materiales:

*torundas

*Ligadura o torniquete

*Jeringas de 3 ml.

Procedimiento:

1.- Verificar que todo nuestro material esté listo, la ligadura, las torundas, las jeringas estéril y que el paciente se sienta cómodo.

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2.- El paciente deberá abrir y cerrar la mano durante unos segundos y después la mantendrá cerrada, esto ayudará a que las venas resulten más palpables. (fig.3)

3.-Se selecciona la vena adecuada para la punción.Se limpia la zona de la punción con una torunda humedecida con alcohol isopropílico al 70%, o yodopovidona al 1%. Se comienza comienza en el punto de la punción y se prosigue la limpieza hacia afuera siguiendo un movimiento espiral.

.4- Aplicar el torniquete aproximadamente cuatro dedos por encima de la flexión del codo o a 10 cm del codo, sujetar con un medio nudo.

5.- se fija la vena tanto, por encima como por debajo del lugar de punción, con ayuda de los dedos pulgar y medio o índic3 y pulgar.

6.- se realiza la venopunción: a) se penetra la piel con la aguja formando un ángulo de 15º con el brazo y con el bisel hacia arriba se sigue la dirección de la vena; b) se introduce la aguja con suavidad pero con rapidez para reducir las molestias. No hay que “enterrar” la aguja; c) si se utiliza una jeringa, se tira hacia atrás el émbolo, con tensión lenta y uniforme a medida que la sangre va fluyendo en su interior; d) si se utiliza un tubo al vacío, en cuanto la aguja haya penetrado en la vena se dirigirá el tubo todo lo posible hacia adelante apoyándose en el dispositivo de sujeción (de la misma forma en que se introduce el émbolo de una jeringa). Al mismo tiempo mantenga firmemente en su lugar. Una vez que se haya llenado el tubo, se retira cogiéndolo por su extremo y tirando suavemente de él.

7.- cuando la sangre comience a fluir se libera el torniquete. Una vez obtenida la muestra, hay que indicar al paciente que relaje el puño y que no “bombee” con la mano.

8.-coloque suavemente una torunda de algodón estéril sobre el punto de punción. Se extrae la aguja (con un movimiento rápido) y a continuación se ejerce presión sobre la zona.NO aplique masaje.

Puntos para la extracción de sangre

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IMPORTANTE:Compruebe el estado del paciente, verificando si se ha mareado y si la hemorragia está controlada.

Esquemas:

Punción de la vena yugular externa: en los lactantes y niños pequeños puede elegirse la vena yugular externa el lactante se envuelve en una manta para que los brazos queden a los lados del cuerpo. Luego se coloca sobre una mesa con la cabeza colgando sobre el borde, y un ayudante sostiene la cabeza del paciente, volviéndola a un lado. Cuando el niño grita, la vena yugular que expuesta. Se desinfectara la superficie de la piel. Se estira sobre el sitio de punción y se penetra la vena saliente, después de completar la punción, se aplica presión con gasa esterilizada sobre el sitio puncionado y se sienta al niño, apoyando en el cuerpo de la enfermera.

Punción de la vena Femoral: preferiblemente la punción de la vena femoral debe estar a cargo de un médico o bioquímico adiestrado. Se coloca las piernas del

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niño en posición de abducción leve, mientras el cuerpo y los brazos son inmovilizados por un ayudante que se inclina sobre el niño. Se localiza el pulso femoral inmediatamente por debajo del ligamento inguinal; en la unión del tercio medio con los dos tercios exteriores se aplica un antiséptico a la piel y el área que cubre el pulso, se estira entre dos dedos para puncionar con una aguja larga en dirección posterior ligeramente medial con respecto al impulso máximo.

En cuando la guja toca el hueso se retira muy lentamente y al mismo tiempo el émbolo de la jeringa se eleva ligeramente para que la sangre pueda entrar en la jeringa. Después de completar la aspiración, se aplica presión sobre el sitio de punción usando gasa esterilizada.

Obtención de sangre capilar.

Sangre capilar: es una técnica relativamente sencilla y se recurre a la obtención de este tipo de muestra cuando la cantidad de sangre utilizada para los estudios es mínima o para microanálisis, en algunos casos se utiliza cuando la punción venosa resulta difícil.

La obtención de un espécimen de sangre por punción cutánea obliga a puncionar la piel de la yema del dedo o el lóbulo de la oreja de los adultos, o del dedo grueso del pie o talón de los neonatos. Para el caso no se escogerán sitios fríos, cianóticos e hinchados, pues las muestras obtenidas serán inadecuadas.

El área donde se hará la punción se limpia con una sustancia antiséptica y se punza con una aguja o lanceta para luego recoger la sangre en una pipeta (tubo pequeño de vidrio), en una laminilla de vidrio, sobre una tirilla de examen o en un recipiente pequeño. Finalmente, se puede colocar algodón o un vendaje en el sitio de la punción si el sangrado persiste.

Material:

Lancetas

Torundas con alcohol

Gasas estériles

PROCEDIMIENTO:

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1.-Seleccionar un punto adecuado para la punción. Este no debe haberse puncionado previamente.

2.-calentar la zona de punción con una compresa húmeda (42ºC); con ello se aumenta el flujo de sangre a través de las arteriolas y capilares y se consigue que la sangre tenga un mayor componente arterial, particularmente útil en las determinaciones de pH y gasometrías.

3.-Limpie la zona de la punción con torundas saturadas con alcohol isopropílico al 70%. A continuación se deja secar la piel.

4.- la punción se lleva a cabo con una lanceta estéril, realizando un único movimiento con el instrumento.

Cuando la punción se efectúa en el talón, éste se sujetara con el primer dedo sobre el arco y con el pulgar próximo al punto de punción, en la zona del tobillo.

5.- desechar la primera gota de sangre enjuagándola con una gasa estéril. Regule el flujo de sangre mediante presión con el pulgar. No realizar maniobras de “ordeña”, ya que se puede hemolizar la muestra e introducir en ello un exceso de líquido hístico.

6.- recoja la muestra en un recipiente adecuado. Un método alternativo es el de microtubos recolectores.

7.- si la muestra se recolecto en tubos capilares, deben sellarse los extremos introduciéndolos en plastilina.

8.- etiquetar el recipiente de la muestra con los datos del paciente

9.-indicar en el informe que los resultados corresponden a sangre de punción cutánea, considerando que existen algunas diferencias en las concentraciones de glucosa, potasio, proteínas totales y calcio entre el suero de este tipo de sangre y el de la sangre venosa.

ESQUEMAS:

RESULTADOS:

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COMENTARIOS:

CUESTIONARIO:

Menciona las ventajas de los especímenes obtenidos por punción cutánea:

Dibuja el sitio adecuado para la punción en el talón:

Describe brevemente la punción de la vena femoral:

Menciona las ventajas de loes especímenes obtenidos por punción venosa:

Realizar un esquema de las venas superficiales del brazo.

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MACROHEMATOCRITO Y MICROHEMATOCRITO

OBJETIVO: el alumno determina el macrohematocrito y el microhematocrito en una muestra de sangre correctamente.

Introducción

El hematocrito es una medida de la proporción de sangre comprende células rojas de la sangre. El valor se expresa como un porcentaje o fracción de células sanguíneas en la sangre. Por ejemplo, con un valor de hematocrito de 40% significa que hay 40 mililitros de glóbulos rojos en 100 mililitros de sangre. El hematocrito se incrementa cuando el número de glóbulos rojos de la sangre aumenta, o cuando el volumen de plasma se reduce, como en los casos de deshidratación. El hematocrito disminuye a un valor inferior a la normal, indicando anemia, cuando el cuerpo reduce la producción o incrementa la destrucción de las células rojas de la sangre, o cuando la sangre se pierde debido a la hemorragia. El hematocrito refleja el número de células rojas de la sangre y su volumen (MCV o el volumen corpuscular medio). Si el tamaño de las células rojas de la sangre disminución, el valor del hematocrito también disminuye y viceversa.Con el valor hematocrito se confirma el diagnostico de diferentes enfermedades y patologías, como es el caso de las anemias y la policitemia. En esta prueba se mide la cantidad de eritrocitos de la sangre en porcentaje del total, o lo que es lo mismo, el porcentaje de células que transportan oxígeno frente al volumen total de sangre, determinado por proceso de centrifugación. En este proceso, se pueden apreciar dos niveles, los corpúsculos formes que se sedimentan, y el plasma total que flota. En definitiva es la relación porcentual entre ambos lo que representa el valor hematocrito.

Macrohematocrito

FUNDAMENTO:

si se toma sangre con anticoagulante y se coloca en un tubo de diámetro uniforme, de fondo plano y graduado de 0 a 10 y se somete a una velocidad de centrifugación determinada, durante un tiempo constante, la parte sólida se va al fondo contituye el paquete de glóbulos rojos, que medido en relación al volumen total de sangre, es el volumen porcentual o hematocrito. Para este método se hace el tubo wintrobe.

Material:

Pipeta pasteur

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Gradilla

Centrifuga

Tubos Wintrobe

EDTA al 10%

Sangre venosa

PROCEDIMIENTO:

1.-Agitar la sangre anti coagulada contenida en el tubo, para homogeneizarla.

2.-Con una pipeta Pateur o de Wintrobe, tomar una muestra de sangre y depositarla en un tubo de Wintrobe, empezando a llenarlo desde el fondo (evitando la formación de burbujas) hasta la marca de 10.

3.-Centrifujar a 3,000 rpm durante 30 min cuando el radio del cabezal de la centrifuga sea de 22.5 cm.

4.-Leer la altura que alcanzó la columna de glóbulos rojos en la escala de numeración descendente.

5.-Expresar el valor en porciento.

ESQUEMAS:

RESULTADOS:

CONCLUSIONES:

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MICROHEMATOCRITO

FUNDAMENTO:

El método de microhematocrito se puede realizar con sangre capilar o venosa. Es una técnica muy utilizada, por necesitar muy poca cantidad de sangre, muy sencilla y poderse realizar en gran número de muestras a la vez y en muy poco tiempo.Se utilizan tubos capilares de vidrio de 7 a 7,5 cm. de longitud por 1mm. De diámetro interno. Heparinizados o no, dependiendo del tipo de muestra (sangre entera anti coagulada o sangre capilar). Si se utiliza sangre capilar, se desechará la primera gota después de la punción. Se llena el tubo capilar hasta tres cuartas partes de su capacidad con la sangre (aproximadamente 50 l). El llenado de los tubos se realiza por capilaridad, favoreciendo el proceso inclinando el capilar hacia abajo a medida que se va llenando. Limpiar con papel o gasa el capilar y tapar el extremo limpio con plastilina o sellándolo a la llama del mechero. Una vez cerrados se colocan los capilares en la centrífuga con el extremo del capilar cerrado hacia fuera y de modo que quede perfectamente equilibrada. Se centrifugan durante cinco minutos a 12.000 rpm. Tan pronto se detiene la centrífuga se extraen los capilares y se procede a su lectura

MATERIAL:

Tubos capilares

Centrifuga para tubos capilares

Regla

Sangre

Centrifuga para tubos capilares

Procedimiento:

1.-Para calcular el valor del hematocrito, en caso de no contar con tubos de Wintrobe, se utilizan tubos capilares (heparinizados si se toma sangre capilar).

2.-llenar los tubos capilares con sangre las 2/3 partes.

3.-una vez cargados con sangre se obturan por un extremo ya sea con plastilina o a la llama del mechero;

4.-se centrifugan durante cinco minutos a 11000rpm en centrífuga a para microhematocrito.

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5.- con una regla se mide la altura de la columna se sangre total y la del paquete de eritrocitos calculando por una proporción el valor hematocritico.

RESULTADOS:

CONCLUSIONES:

CUESTIONARIO:

¿Cuál es la fórmula que se emplea en el macrohematocrito?

¿Cuáles son los valores de referencia del hematocrito?

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PRACTICA 3

“CUENTIFICAR LA CONCENTRACION DE HEMOGLOBINA”

Objetivo:

Los alumnos aprenderán a determinar la concentración de hemoglobina con ayuda de cianometahemoglobina en la sangre humana.

Introducción:

Los exámenes de laboratorio pueden realizarse por muchas razones, como investigación rutinaria de salud o sospecha de enfermedad o de toxicidad. También pueden ser utilizados para determinar si la efectividad de un medicamento mejora o empeora. Los exámenes pueden medir el éxito o fracaso de un tratamiento. Pueden ser solicitados por razones médicas o legales. Las siguientes son posibles razones por las que este examen puede realizarse:

Acidosis láctica Anemia de células falciformes Anemia por deficiencia de hierro Embolia grasa

La hemoglobina es una proteína en los glóbulos rojos que transporta oxígeno. La hemoglobina está compuesta por una proteína (globina) y la no proteína es (Hem, Hemo, Heme) compuesta por hierro y protoporfirina. Un examen sanguíneo puede determinar qué tanta hemoglobina tiene uno en la sangre, lisando a los eritrocitos mientras su contenido es liberado. La densidad de la solución es proporcional a la concentración de hemoglobina, midiéndose en gramos por decilitros (g/dl) representando la cantidad de proteína por unidad de volumen.

La hemoglobina se mide por medio de citometros de flujo, por lo tanto es necesario dar valores de referencia de hombre, mujer y niños los cuales son:

Hombres: 16 g/dl (límites de 14.5-17.5 g/dl) Mujeres: 14 g/dl (límites de 12.5-15.5 g/dl) Niños RN: 13-19 g/dl Mujeres embarazadas: 11-14 g/dl

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Antes de usar el fotocolorímetro o espectrofotómetro para hacer las determinaciones de hemoglobina, es necesario preparar una curva de calibración, para lo que se requiere de una solución de referencia (estándar) de cianometahemoglobina (nombre comercial: Acuglobin). La concentración de soluciones de referencia generalmente se da en mg por 100 ml (mg%). Para calcular el valor de hemoglobina en gramos por 100 ml se usa la siguiente formula:

consentracion de la soluciondereferencia(mg %)1000

x 251

Nota: 1000 es el factor para convertir miligramos a gramos y 251 es el factor de disolución cuando 0.02 ml de sangre se diluyen con 5.0 ml de reactivo de Drabkin. Ya que 251/1000 es casi 0.25, la formula anterior se puede simplificar de la siguiente forma:

Concentración de la solución de referencia (mg%) x 0.25

Fundamento:

Pigmento de color rojo, que al interaccionar con el oxígeno toma un color rojo cereza, que es el color de las arterias y al interaccionar con el dióxido de carbono toma un color rojo oscuro o azulejo, que es el color característico de las venas. -Oxihemoglobina: hemoglobina que se encuentra unida al oxígeno normalmente.-Carboxihemoglobina: hemoglobina resultante de la unión con el CO.La medición de la hemoglobina forma parte de la biometría hemática, sirve para detectar enfermedades que se acompañen de anemia, ayuda a determinar la

intensidad de anemia, a vigilar la respuesta al tratamiento y valorar la policitemia.

Valores de referencia:

Hombres: 16 g/dl (límites de 14.5-17.5 g/dl) Mujeres: 14 g/dl (límites de 12.5-15.5 g/dl) Niños RN: 13-19 g/dl Mujeres embarazadas: 11-14 g/dl

Material:

Tubo con anticoagulante y tapón de hule Tubos de ensayo de 120 x 13 mm Jeringa y aguja hipodérmica No. 20, desechables

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Tubería de aire con boquilla Algodón con alcohol Pipetas graduadas de 5.0 ml. Pipetas de sahli de 20 mmc. Fotocolorímetro o espectrofotómetro Reactivo de Drabkin

Material biológico:

Sangre

Procedimiento:

1. Extraer sangre por puncion venosa recibirla en un tubo de anticoagulante; (agitar suavemente para mezclar).

2. Con pipeta de Sahli tomar una muestra de sangre hasta la marca de 20 mmc o 25 mmc, (con una gasa o papel suave húmedo, limpiar el extremo de la pipeta). En caso de utilizar el método de puncion capilar, tomar la muestra directamente en la herida.

3. En un tubo de ensayo de 120 x 13 mm, colocar 5.0 o 6.25 ml de reactivo Drabkin (según el aforo de la pipeta que se vaya utilizar). La disolución debe ser 1:251.

4. Descargar el contenido de la pipeta en el reactivo enjuagando por succion varias veces, con el mismo reactivo, a fin de arrastrar toda la sangre de las paredes de la pipeta.

5. Por burbujeo brusco homogenizar la sangre con el reactivo.6. Dejar reposar por lo menos 10 minutos a la temperatura del laboratorio.7. Leer en el fotocolorímetro a 550 nm, ajustando el aparato a 100% de

transmitancia con el reactivo de Drabkin8. Extrapolar la lectura registrada en la curva o tabla de calibración para

obtener el resultado que se expresa en g/100 ml de sangre.

A continuación un pequeño ejemplo de cómo utilizar la curva de calibración :

Concentración de la solución de referencia= 60.0 mg/100 ml (60 mg%) concentración de hemoglobina= 60 x 0.25= 15.0 g/100 ml

Procedimiento:

1. A partir de la solución de referencia prepare por lo menos cuatro diluciones según se indica a continuación

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Tubo numero 1 2 3 4Solución de referencia 4.0 2.0 1.3 1.0Reactivo de Drabkin (ml) 0 2.0 2.7 3.0Dilución 1:1 1:2 1:3 1:4

2. Mezcle sus contenidos y déjelos reposar durante cinco minutos3. Realice las lecturas en el fotocolorímetro usando un filtro verde o una

longitud de onda de 550 nm, si se usa en un espectrofotómetro utilice una longitud de onda de 540 nm. (el cero del aparato se ajusta con el reactivo de Drabkin)

4. Usando papel semilogaritmico grafique la concentración sobre las abscisas(eje horizontal), contra la transmitancia en % sobre las ordenadas (eje vertical). Si se utilizan lecturas de densidad óptica, la grafica se trazara sobre el papel lineal común. (en ambos casos se obtiene una línea recta)

5. A partir de la grafica se prepara una tabla de valores de hemoglobina( 2.0-18.0 g/100 ml) con sus respectivas lecturas de transmitancia o densidad óptica.

Esquemas:

Resultados:

Conclusión:

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Cuestionario:

1. Menciona cuales son algunas causas de error para determinar la concentración de hemoglobina:

2. ¿Cuáles son las cifras en adolescentes de hemoglobina en g/dl?

3. ¿Cómo se produce las anemias?

4. Menciona la fórmula de la hemoglobina

5. ¿Cuál es el valor normal de hemoglobina en recién nacidos?

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Practica 4

“RECUENTO DE GLÓBULOS ROJOS”

OBJETIVO:

Los alumnos efectuaran e interpretaran los recuentos de los glóbulos rojos en la sangre humana

INTRODUCCIÓN:

El resultado final de la eritropoyesis es la producción de una célula : El eritrocito con capacidad de ejercer una función principal, que es la de transportar oxígeno y bióxido de carbono. Su falta de núcleo le da la capacidad de llevar más oxigeno sin consumir prácticamente nada de él, su forma bicóncava es la que mejor se presenta para afrontar la hemolisis; su membrana impide la salida de la hemoglobina.Los eritrocitos son celulas adultas que presenta la ultima etapa de la eritropoyesis. Se trata de dicos biconcavos. Carecen de nucleo y se tiñen de color rosa o gris rosaceo con el colorante Wrigth, debido que la hemoglobina es acidòfila, es decir atrae al colorante acido, la eosina, en la tinciòn de Writh. El diametro de los eritrocitos es aproximadamente de 6 a 8 micrometros y 2 micrometros de espesor y cada uno contiene aproximadamente 29 pg de hemoglobina, asì exsisten en promedio 900 gramos de hemoglobina en un hombre adulto.Factores necesarios para su producción* Vitamina B12: Es un factor necesario para la síntesis y multiplicación de las células. Debido a que las células madre de la médula ósea deben multiplicarse muy rápidamente para producir glóbulos rojos, la falta de vitamina B12 origina anemia. * Acido fólico: Es necesario para la síntesis de glóbulos rojos, y su falta en la dieta también puede producir anemia. * Hierro: Es necesario para la producción de hemoglobina. La mayor parte del hierro se encuentra en la hemoglobina. Valores disminuidos* Embarazo * Anemias varias * Cáncer * Hemorragias * Enfermedades sistémicas

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* Alteraciones en la dieta * Fibrosis de médula ósea Valores aumentados* Enfermedades pulmonares crónicas * Cardiopatías * Altitud: Un conteo de glóbulos rojos alto es común en personas que en altitudes elevadas debido a que es la manera en que el cuerpo se adapta a la falta de oxígeno.* Poliglobulia de diferentes causas

Utilización de la cámara de Neubauer

Para los globulos rojos la muestra debe examinarse en un plazo de 2 horas y mezclarse muy bien, se agita la pipeta para rojos, se desechan las 4 primeras gotas y se llena la camara por capilaridad, colocando la punta en uno de los extremos abiertos de la camara, se deja asentar la mezcla en la camara y se enfoca el cuadrado central y los 4 cuadraditos de las esquinas.Se calcula el número de globulos rojos por mm3 agregando 4 ceros al total de globulos rojos contados en 5 cuadrados.RBCs x mm3 es igual a las celulas contadas en 5 cuadrados ENTRE la superficie contada x altura de la camara x dilucion de la sangre o seaCelulas contadas ENTRE 5/25 x 1/10 x 1/200 igual a celulas contadas por 10000.

Los cálculos son:

N x 200 x10 x 40080

=N x10,000

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N= número de eritrocitos contados 200= factor de dilución 10= corrección de la altura de la cámara N x 10,000= eritrocitos / mm3

FUNDAMENTO:

Diluir la sangre con los líquidos de Gower, en una cantidad exacta para así poder examinar al microscopio una porción de la muestra, que se ha colocado en la cámara de Neubauer, para así contar el número de glóbulos rojos que hay en la cuadricula media de la cámara.

MATERIAL:

Hemocitometro completo Microscopio Tubos de ensayo 120 x 13 mm Agitador hemático EDTA al 10% Solución Gower

Material biológico:

Sangre

Procedimiento:

1. Se aspira sangre en la pipeta para hematíes hasta la marca de 0.5, con mucha exactitud.

2. Limpiece con una gasa el exterior de la pipeta3. Se aspira el liquido de disolución (Gower) hasta la señal 101 4. Se agita durante 3 minutos para mezclar perfectamente. (en caso de dejar

la pipeta en reposo repetir este paso)5. Cargar las cámaras de hemocitometro. (se llena una cámara por cada

pipeta)6. Dejar reposar de 3 a 5 minutos sobre la platina del microscopio 7. Con un poco de aumento se localiza al cuadro central de los 9 mayores 8. Con gran aumento (40x) se contaran los eritrocitos de las cuatro esquinas y

el cuadro central

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Esquemas:

Resultados:

Conclusión:

Cuestionario:

1. ¿Cuál cuadricula de la cámara de Neubauer es la que tenemos que contabilizar?

2. Para qué sirve el recuento de los globulos rojos

3.- Cuáles son las cifras normales en los recién nacidos

4 cual es la zona de la cámara de Neubauer que se debe contar?

5. Menciona de que tamaño son los glóbulos rojos

6 que sucede si hay una baja de glóbulos rojos?

PRACTICA 5

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CALCULA ÍNDICES ERITROCITARIOS

CUENTA ERITROCITARIA

Introducción:

Cuando la eritropoyésis tiene lugar normalmente, su resultado final es la producción de una célula-eritrocito perfectamente diferenciada y apta para su función principal que es la de transportar oxígeno y CO2 . La falta de núcleo le confiere la virtud de acarrear el oxígeno sin consumir prácticamente nada de el; su forma bicóncava es la que mejor se presta para afrontar la hemólisis; su membrana no admite la salida de hemoglobina.

Fundamento teórico:

Consiste en diluir la sangre con el líquido de Hayem en una proporción exacta y luego examinar al microscopio una pequeña cantidad de la muestra colocada en la cámara de Neubauer, contando el número de elementos que se encuentran en el retículo de la cámara y mediante una operación matemática se obtiene la cifra total.

Material:

Tubos de ensayo de 13x100mm

pipetas de Thomas para glóbulos rojos

cámara de Neubauer

boquillas

microscopio

gasa

gradilla

sangre capilar o venosa con anticoagulante

Cámara de Neubauer

La que más se utiliza es la de Neubauer que presenta un retículo con una superficie total de 9mm2 dividida en 9 cuadros de 1mm2 los cuatro cuadros grandes de los extremos son los que usualmente se emplean para contar leucocitos. De los 9 cuadros centrales grandes el central es el único dividido en 25 cuadros.

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Reactivos:

EDTA (sal di sódica) al 10%

Líquido de Hayem:

Cloruro de mercurio 0.5 g

Cloruro de sodio 1.0g

Sulfato de sodio 5.0g

Agua destilada 100ml

Procedimiento:

Las pipetas están constituidas por dos porciones capilares y un bulbo central. El tubo capilar inferior está dividido en 10 partes iguales con marcos de0.5 y 1.0.

En el interior del bulbo existe una perlita de plástico (roja), para favorecer la mezcla de la sangre con el líquido y en el capilar superior hay una marca 101.

1.- llenar con sangre bien mezclada la pipeta de Thoma, hasta la marca 0.5.

2.- se limpia cuidadosamente con gasa la parte externa de la pipeta.

3.- completar con líquido de Hayem hasta la marca 101.

4.- agitar durante 3 minutos para mezclar perfectamente.

5.- colocar el cubre hematímetro sobre la cámara.

6.- desechar las primeras 4-5 gotas de la pipeta y llenar la cámara por uno de los bordes del cubre hematímetro.

7.- se deja que el líquidos penetre lentamente entre la cuadrícula y el cubre hematímetro hasta que la plataforma de recuento este completamente cubierto.

8.- dejar reposar de 3.5 minutos sobre la platina del microscopio.

9.- con objetivo de 40x se encuentra los eritrocitos contenidos en 80 cuadros pequeños; uno central y cuatro de los extremos.

Cálculos:

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Si se considera que el retículo central tiene 400 cuadritos se realizará el siguiente cálculo.

N x 200 x 10 x 400 = N x 10,000

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N= número de eritrocitos contados

200= factor de dilución

10= corrección x altura de la cámara


Hombres 4.5 x 106 - 5.5 x 106 mm3

Mujeres 4.3 x 106 - 5.0 x 106 mm3

Los índices eritrocitarios Sirven para clasificar a los eritrocitos de acuerdo a su tamaño y contenido de hemoglobina

Se utiliza el hematocrito y la cuenta de eritrocitos para calcular los índices:

-VCM (Volumen Corpuscular Medio)

-CMHC (Concentración Media de la Hemoglobina Corpuscular)

-HCM (Hemoglobina Corpuscular Media)

Es posible medir de manera directa los índices eritrocitarios en contadores celulares automáticos. Por ejemplo: el coulter; al pasar los eritrocitos a través de un orificio en el cual fluye una corriente eléctrica.

cuestionarios

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¿Para qué sirven los índices eritrocitarios?

¿Para qué se utiliza el hematocrito y la cuenta de eritrocitos?

¿Cuáles son los valores de referencia en un hombre?

¿Con que aparato es posible medir de manera directa los índices eritrocitarios?

¿Qué significan las siglas –CMHC?

PRACTICA 6

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“Morfología de los glóbulos rojos”

INTRODUCCION: se utiliza para el diagnóstico de algunas anemias, presentan alteraciones características esferocitosis hereditaria, hemoglobinopatia S, eliptocitosis congénita. Asimismo, ante cualquier anemia de origen desconocido, resulta útil valorar la intensidad de la policromatofilia, presencia de normoblastos, punteado basófilo, anillos de Cabott, cuerpos de Howell-Joly.

Fundamento: La sangre es un tejido fluido de un color rojo característico por la presencia de la hemoglobina contenido en los eritrocitos. La sangre es considerada un tipo de tejido conectivo especializado. Presenta una fase sólida, integrada por los elementos formes que comprende a los glóbulos blancos, los glóbulos rojos y las plaquetas; y una fase líquida, o fracción a celular (matriz), representada por el plasma sanguíneo.

Los eritrocitos en la sangre se presentan como discos circulares homogéneos de tamaño casi uniforme, variando entre 6 micras a 8 micras de diámetro, sin embargo se pueden encontrar tamaños desde 5.5 a 9.5 micras de diámetro, en el centro los eritrocito son más pálidos que en la periferia, en enfermedades el eritrocito varia de contenido de hemoglobina, tamaño, propiedades de tinción y estructura.

MATERIALES

Sangre con anticoagulante.

Lámina portaobjetos.

Pipeteador.

Wright.

Agua destilada.

Microscopio.

Aceite de inmersión.

PROCEDIMIENTO

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Se realiza un extendido sanguíneo.

Se deja secar.

Se cubre con colorante de Wright.

Se diluye con agua destilada (30 gotas).

Se esperan 10 minutos.

Se deja secar.

Se observa en el microscopio en 100X.

MORFOLOGÍA NORMAL

Caninos: células de tamaño similar y palidez central destacada.

Felinos: células más pequeñas que las del canino, ligera anisocitosis y palidez central limitada.

ANORMALIDADES EN EL TAMAÑO.

Como se anotó anteriormente el diámetro de la célula roja oscila entre 6.2 - 8.2 micras con un tamaño promedio de 7.2 micras.

Cuando patológicamente se aumenta o disminuye dicho diámetro el resultado será:

Macrocitos: Son eritrocitos con diámetro superior a 8.5 micras. La macrocitosis está usualmente acompañada de un PVC por encima de 100 fL. Su aparición puede estar asociada a: Deficiencia de vitamina B12 y/o ácido fólico. Estrés medular cuando hay eritropoyesis acelerada. Trastornos hepáticos. Es importante anotar que normalmente los extendidos de sangre periférica de neonatos se caracterizan por presentar una macrocitosis significativa.

Cuestionario:

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¿Para qué sirve la morfología de los eritrocitos?

¿Qué son los macrositos?

Este tipo de eritrocito tiene diámetro superior a 8.5 micras, y está usualmente acompañada de un PVC por encima de 100 fL.

¿Por qué la prueba de drepanocitos cambia la morfología de los eritrocitos?

¿Qué se nota en la anormalidad de tamaño de un eritrocito?

Practica 7

29

RECUENTO MANUAL DE LOS RETICULOCITOS.

Los eritrocitos atraviesan seis etapas hasta conseguir su maduración. Los reticulocitos son los glóbulos rojos jóvenes que circulan en la sangre desde hace menos de un día (duración de vida de los glóbulos rojos:120 días ). Estos se encuentran ya en médula ósea y en sangre perisférica, en médula ósea permanecerán 2 días madurando, y en sangre perisférica 1 día más. Convirtiéndose finalmente en hematíes maduros. INTRODUCCIONLos reticulocitos son eritrocitos inmaduros no nucleados que contiene RNA residual. En la secuenciade madurac ión de l e r i t roc i to , és te permanecerá dos d ías en la médu la ósea y un d ía en a l sangre periférica, al madurar el eritrocito disminuye la cantidad de RNA

Fundamento: Ellos se evidencian sobre unos frotis gracias a ciertos colorantes supravitales como el azul de metileno o azul de cresil brillante, que permite observar los organoides citoplasmáticos que aún llevan y que han desaparecido en los glóbulos rojos adultos: es la <<sustancia reticulofilamentosa>>. La técnica ha de realizarse a ser posible antes de que transcurra 2 horas de la extracción, con un máximo de 24 horas.

Puede apreciarse sobre un porta el porcentaje de glóbulos rojos que son reticulocitos, pero es deseable expresar los resultados en valores absolutos, así pues como el ciclo vital de un hematíes es de 120 días, la médula ósea reemplaza todos los días aproximadamente 1% de hematíes. Material y reactivo: - Microscopio 100x.- Portas.- Tubo comercial con azul cresil billante al 1% o azul de metileno.- Pipeta Pasteur.

Muestra:- Sangre venosa con EDTA o sangre capilar.

Procedimiento:

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1. Añadir 3 gotas de sangre al tubo comercial.2. Mezclar bien.3. Incubar a temperatura ambiente de 10 a15 minutos.4. Volver a mezclar y hacer las extensiones.5. Dejar secar.6. Observar con objetivo de inmersión 100x.

Cálculo: Se realiza el recuento de reticulocitos en 10 campos, en los cuales, haya aproximadamente 100 hematíes/campo. Seguidamente calculamos la proporción de reticulocitos en dichos campos.

% Reticulocitos = nº de reticulocitos observados X 100nº de hematíes contados

Valores normales:

En adultos de 0.5 a 2%. En recién nacidos de 2,5 a 6,5%,

alcanzando al valor del adulto a las dos semanas de vida.

Cuando existe anemia, con disminución del número de hematíes. Su valor deber ser corregido de acuerdo a la intensidad de la anemia, aplicándose la siguiente fórmula: % Reticulocitos corregidos = % reticulocitos observados x hematocrito del paciente hematocrito normal (45)

Cuestionario:

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¿Qué ocurriría si existe anemia con disminución del número de hematíes?

¿Qué son los reticulocitos?

¿Cuál es la muestra que se necesita?

¿Cuáles son los valores normales de un recién nacido?

¿ y cuáles son los valores normales de un adulto?

PRACTICA 8

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*CUENTA LEUCOCITARIA

Introducción:

La leucopoyésis es un proceso que se lleva a cabo con gran actividad, ya que si el número de granulocitos circulantes de ninguna manera es comparable al de los eritrocitos, en cambio se estima que la sobrevida de los neutrófilos no excede de 5 días, de las cuales solo pasan 10 hrs. en la sangre circulante.

Fundamento:

La sangre se diluye 1:2 con una solución hipotónica de ácido acético que destruye a los eritrocitos.

El azul de metileno permite reconocer fácilmente el líquido y observar mejor los glóbulos blancos, a los que tiñe ligeramente

Los normoblastos no se destruyen, por lo que se deben tomar en cuenta para corregir los resultados

Material:

Tubos de ensayo de 13 x 100mm

Pipeta de Thoma para glóbulos blancos

Cámara de Neubauer

Microscopio

Boquillas

Gasa

Sangre capilar o venosa con anticoagulante

Reactivos:

EDTA (sal disódica) al 10 %

Liquido de Turk:

Ácido acético glacial 3.0 ml

Agua destilada c.b.p. 100 ml

Adicionar 1 o 2 gotas de azul de metileno

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Procedimiento

1.- Llenar la pipeta con sangre bien mezclados hasta la marca de .5

2.- Limpiar cuidadosamente la pipeta por fuera

3.- Aforar con solución de Turk hasta la marca de II

4.- Agitar la pipeta durante 3 min.

5.- Se desechan las primeras 4 o 5 gotas de la pipeta y se carga la cámara de Neubauer

6.-Dejar reposar la cámara durante 3 min.

7.- En el microscopio con el objetivo de 10x, se cuentan los leucocitos presentes en los cuatro cuadros grandes de los extremos

8.- Multiplicar por 50 el promedio de los leucocitos con la siguiente fórmula

Células contadas x 20 (dilución) x 10 (corrección de altura) /

4 (núm. De cuadro de 1mm contados)

Este factor varía si se cambia la dilución y o el número de cuadros contados

*En caso de existir normoblastos (eritrocitos nucleados) deberá hacer la cuenta diferencial leucocitaria


Leucocitos:

-Adultos: 5000 - 10 000 / mm3

- Recién nacidos: 10 000 - 25 000 / mm3

-Niños: 8000 - 15 000

Por este proceso se podrá decir cuántos normoblastos hay por cada 100 leucocitos. Ejemplo:

Si hay 28 normoblastos por cada 100 leucocitos se aplica la siguiente relación:

128 - 100

12000 -- x

x = 9375 leucocitos

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La cuenta leucocitaria diferencial es el conteo del número de los distintos tipos de leucocitos. Identifica a los individuos con una mayor susceptibilidad a la infección


Valores normales en la cuenta leucocitaria

· En el recién nacido de 10 a 26 mil/mm3

· A los 3 meses de 6 a 18 mil/mm3

· Al año de vida de 8 a 16 mil/mm3

· Entre los 3 y 5 años de 10 a 14 mil/mm3

· De los 5 a los 15 años de 5,5 a 12 mil/mm3

· En el hombre adulto de 4,5 a 10 mil/mm3

· En la mujer adulta de 4,5 a 10 mil/mm3

CUESTIONARIO:

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¿Para qué sirve el recuento leucocitario?

¿Qué liquido nos permite reconocer fácilmente el líquido y observar mejor los glóbulos blancos, a los que tiñe ligeramente?

¿Qué es un leucocito?

¿Cuáles son los 2 tipos de leucocitos que podemos encontrar gracias a este procedimiento?

¿Cuáles son los valores de referencia en un hombre adulto?

Practica 9

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“Recuento diferencial de glóbulos blancos”

OBJETIVO:

Efectuar la cuenta diferencial de leucocitos utilizando la tinción de Wright, identificando los diferentes tipos de glóbulos blancos (Neutrófilos, Linfocitos, (Células B y T), Monocitos, Eosinofilos, Basófilos) contenidos en un frotis teñido, para la determinación de posibles leucemias o para el complemento de una biometría hemática.

FUNDAMENTO:

La tinción de Wright es una tinción de tipo Romanowsky. Es extremadamente importante en el laboratorio de hematología este tipo de tinción, ya que puede obtenerse una cantidad abundante de información a partir del examen de un frotis de sangre periférica bien teñido Una tinción de Romanowsky consiste en azul de metileno y sus productos de oxidación, así como eosina Y o eosina B.

INTRODUCCIÓN:

La cuenta diferencial mide los porcentajes de cada tipo de leucocitos, el conteo de estos puede indicar enfermedades inflamatorias, leucemia, linfoma y trastornos de medula ósea. En el ser humano existen un conjunto de células sanguíneas que son los efectores celulares de la respuesta inmunitaria, estos se llaman leucocitos, como ya sabemos estos intervienen en la defensa del organismo contra sustancias extrañas o agentes infecciosos (conocidos como antígenos), podemos clasificar a los leucocitos como constituyentes del sistema inmunológico.

MATERIAL: REACTIVOS:

Muestra de sangre * Colorante Wright Portaobjetos * Agua destilada Pipeta * Aceite de inmersión Microscopio

PROCEDIMIENTO:

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1.- Frotis sanguíneo

1.1.- se coloca una pequeña gota de sangre en un porta objetos (Fig. 1)

1.2.- se coloca un segundo porta objetos formando un ángulo de 45° con el primero, asegurándose de que se apoya en todo el borde. (Fig. 2)

1.3.- se desliza lentamente el porta objetos hacia la gota de sangre (veras como la sangre se extiende por el borde) (Fig. 3)

1.4.- ahora con un movimiento rápido y uniforme se desliza el porta objetos haciendo que la gota de sangre se extienda sobre todo el porta objetos. (Fig. 4)

2.- Tinción de Wright

2.1.- Una vez hecho el frotis sanguíneo se deja secar

2.2.- Después se cubre el frotis con colorante Wright

2.3.- Se diluye con agua destilada (30 gotas)

2.4.- Se espera 10 min.

2.5.- Se deja secar.

3.- se observa al microscopio a 100x

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

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NOTA: la formula leucocitaria absoluta nos indica la cantidad de elementos por milímetro cubico.

Formula absoluta=Recuento total leucocitario x% del tipo devariedad100

VALORES DE REFERENCIA

CELULAS VALORES RELATIVOS VALORES ABSOLUTOSNeutrófilos totales 40 – 65% 2,500 – 7,000 / mm3

Neutrófilos segmentados 40 - 65% 2,500 – 7,000 / mm3

Neutrófilos en banda 0 – 2% 0 – 200 / mm3

Linfocitos 20 - 45% 1,500 – 4,500 / mm3

Monocitos 4 - 9% 200 – 800 /mm3

Eosinofilos 1 – 4% 40 – 440 mm3

Basófilos 0 – 1% 0 – 100 /mm3

VALORES NORMALES EN LA CUENTA LEUCOCITARIA ·

En el recién nacido de 10 a 26 mil/mm3 · A los 3 meses de 6 a 18 mil/mm3· Al año de vida de 8 a 16 mil/mm3· Entre los 3 y 5 años de 10 a 14 mil/mm3· De los 5 a los 15 años de 5,5 a 12 mil/mm3· En el hombre adulto de 4,5 a 10 mil/mm3· En la mujer adulta de 4,5 a 10 mil/mm3

Alteración en los parámetros normales La disminución en el número de leucocitos es denominado como leucopenia. Esta aparece en procesos de depresión o fallo de la actividad de la médula ósea por diferentes factores como son:

* las infecciones virales, * enfermedades del hígado y riñón * mononucleosis, * fiebre tifoidea, * tumores,

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* fibrosis, * intoxicaciones y demás; asimismo, * tratamientos con quimioterápicos, * ingestión de sales de oro o metales pesados,Presencia de sustancias citotóxicas e intoxicaciones diversas como arsénico o benceno,

ESQUEMAS:

RESULTADOS:

COMENTARIOS:

Fig. 1 Fig. 2 Fig. 3

Fig. 4

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CUESTIONARIO:

1. ¿Para qué se usa la tinción de Wright?

2. ¿Cuáles son los factores que pueden incluir en el resultado de una buena tinción?

3. ¿Cómo podemos medir los porcentajes de cada tipo de leucocitos, ya que estos puede indicar enfermedades?

4. ¿Cuáles son los reactivos que utilizamos para esta práctica?

5.- La disminución en el número de leucocitos ¿Cómo es denominado?

Practica 10

“Recuento de Plaquetas”

OBJETIVO:

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Realizar el conteo de plaquetas existentes en un milímetro cúbico de sangre total. Las plaquetas son las que ayudan a la coagulación de la sangre y son más pequeñas que los glóbulos blancos y los glóbulos rojos.

FUNDAMENTO:

INTRODUCCION:

Las plaquetas son células producidas por los megacariocitos en la médula ósea mediante el proceso de fragmentación citoplasmática, circulan por la sangre y tiene un papel muy importante en la coagulación.

Para ello forman nudos en la red de fibrina, liberan substancias importantes para acelerar la coagulación y aumentan la retracción del coágulo sanguíneo.En las heridas las plaquetas aceleran la coagulación, y además al aglutinarse obstruyen pequeños vasos, y engendran substancias que los contraen.

El recuento de plaquetas es la medida de concentración de plaquetas que circulan por la sangre y junto a los eritrocitos, leucocitos, concentración de hemoglobina, el valor de hematocrito y los índices eritrocitarios (VCM, HCM, CCHM), constituyen el llamado perfil hematológico básico o hemograma.

El resultado del RECUENTO DE PLAQUETAS es importante ya que desempeña un papel vital en la hemostasia. Los recuentos celulares pueden realizarse mediante métodos manuales (recuentos en cámara) o automáticos (recuentos en contadores electrónicos

MATERIALES 1. cámara de Neubauer 2. Solución de procaína 3. Pipetas 4. Cámara húmeda 5. Tubos de ensaye 6. Microscopio

MÉTODO

1. Mezclar bien la muestra de sangre obtenida con EDTA 2. Hacer una dilución de 20 ul de sangre total con 380 uL de solución de procaína en un tubo de ensaye (dilución 1/20). 3. Dejar en reposo por 15 minutos en una gradilla. 4. De esta dilución, llenar en cámara de Neubauer.

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5. Dejar en reposo por 15 minutos en cámara húmeda. 6. Enfocar con objetivo de 40x y contar las plaquetas en el retículo central de 1 mm2 cuadrado. 7. Calcular el número total de plaquetas según la fórmula que se lee a continuación:

RESULTADOS

Se aplica la siguiente fórmula:

Nº de plaquetas x mm3 = plaquetas contadas en 5 cuadrados pequeños altura x dilución x área

Reemplazando

= plaquetas contadas en 5 cuadrados pequeños 1/10 x 1/20 x 1/5 = plaquetas contadas en 5 cuadrados pequeños 1/1000 = plaquetas contadas x 1000

Valores de referencia 150 000 - 450 000 plaquetas/mm3

Recuento en lámina Se cuentan 10 campos con objetivo de 100x y se multiplica por 1000 que es la Fórmula convencional para recuento de plaquetas. Valores de referencia 150 000 - 450 000 plaquetas/mm3

Un número de plaquetas por debajo de lo normal (trombocitopenia) puede deberse a:

Quimioterapia contra el cáncer Ciertos medicamentos Coagulación intravascular diseminada (CID) Anemia hemolítica Hiperesplenismo

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Púrpura trombocitopénica idiopática (PTI) Leucemia Transfusión de gran cantidad de sangre Válvula cardíaca protésica Púrpura trombocitopénica trombótica (PTT) Celiaquía Deficiencia de vitamin k

Un número de plaquetas más alto de lo normal (trombocitosis) puede deberse a:

Anemia Leucemia mielocítica crónica (LMC) Policitemia vera Trombocitemia primaria Extirpación reciente del bazo

ESQUEMAS:

RESULTADOS:

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COMENTARIOS:

CUESTIONARIO:

¿Para qué sirve el recuento de plaquetas?

¿Qué son las plaquetas?

¿Porque es importante el resultado del recuento de plaquetas?

manual lucina[1]

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