MANUAL DE PROCEDIMIENTOSANÁLISIS DE ORINA

ANÁLISIS DE LA ORINAEl análisis de orina es una de las pruebas de Laboratorio más antiguas,

sencillas y útiles en la práctica clínica. Es una biopsia líquida de riñón y tan esencial como la exploración física para la valoración del paciente.

EXAMEN FÍSICO DE ORINAComprende una serie de análisis macroscópicos como el color, olor,

aspecto y un parámetro para el estudio de otros análisis como la gravedad especifica.

Aspecto: Mezclando muy bien la muestra, mirar a través de la luz el grado de turbidez que presente. Ver visualmente.

Densidad: El método para valorar la densidad es la tira reactiva. Como procedimiento general para éste y los parámetros que siguen: Dispensar en tubo de ensayo, la orina bien mezclada, 10-12 ml. Sumergir la tira reactiva brevemente (1 – 2 segundos como mínimo) en la orina. Al retirarla, rozar la tira reactiva contra el borde el tubo para eliminar el exceso de orina. Al cabo de 60 segundos como mínimo (zona de leucocitos de 60 a 120 seg.) comparar el color de reacción con la escala cromática según la casa comercial.

Color: Reportar el color observado de la orina en el mismo envase. El color de la orina se debe al pigmento urocromo y a la urocromina.

ANÁLISIS QUÍMICO pH: Sumergir la tira reactiva 1 a 2”, eliminar el exceso de orina y leer en 60” Proteínas: Igual procedimiento y leer en 60” Glucosa: Igual procedimiento y leer en 60” Cetonas: Igual procedimiento y leer en 60” Sangre Oculta: Igual procedimiento y leer en 60” Bilirrubina: Igual procedimiento y leer en 60” Urobilinógeno: Igual procedimiento y leer en 60” Nitrito: Igual procedimiento y leer en 60” Estearasa leucocitaria: Igual procedimiento y leer en 2 min.

ESTANDARDIZACIÓN EN LA OBTENCIÓN DEL SEDIMENTO URINARIO PARA EL ESTUDIO MICROSCÓPICO.

Se debe adoptar un sistema uniforme tanto para el análisis físico químico, como para el estudio microscópico. Mezclar bien la orina. Tomar 12 mlts de orina en un tubo de centrifuga.

Centrifugar la orina en el tubo de ensayo de 12 por 75 mm a 2.500 r.p.m. durante 5 minutos.

Decantar el sobrenadante y re suspender suavemente para no dañar los cilindros el sedimento (debe quedar más o menos 1 ml en el tubo).

Colocar 20 microlitos del sedimento sobre el portaobjetos, colocar un cubreobjeto evitando la formación de burbujas.

Dejar en reposo por un minuto y observar al microscopio. Estudiar el sedimento en 10x y en 40x y con luz amortiguada para dar un

contraste adecuado.

ANÁLISIS MICROSCÓPICO DEL SEDIMENTO URINARIO:Después de dispensar 20 microlitros del sedimento de orina y colocarle

el cubreobjetos, leer en 10X, recorrer toda placa y contar los cilindros, pasando a40X para su identificación, teniendo cuidado pues los cilindros tienden a depositarse en los extremos de la placa. Luego pasar a 40X y promediar en 10 campos microscópicos las células epiteliales altas y bajas, leucocitos, eritrocitos, acúmulos de leucocitos, cuerpos ovales, células centellantes etc, y por cantidad los cristales, bacterias, moco, etc.

FUNDAMENTO O PRINCIPIO

ANÁLISIS FÍSICO Aspecto: La turbidez en la orina está dada por precipitación de partículas de

cristales, leucocitos, bacterias, células epiteliales, moco, entre otros. Densidad o Gravedad específica: La tirilla contiene un polielectolito, el cual

reacciona con la concentración iónica de la orina y produce liberación de protones que cambia el PH y produce un cambio de color.

ANÁLISIS QUÍMICO pH: Las tiras reactivas contienen los indicadores rojo de metilo, fenoftaleína

y azul de bromotimol, que al contacto con la orina produce un cambio de color que va desde naranja hasta verde azulado, con un rango entre 5.0 y 9.0.

Proteínas: El Test se basa en el principio de indicadores, es decir que el indicador cambia de color en presencia de proteínas a un pH constante. El papel reactivo para la determinación de proteínas contiene una mezcla de tetrabromofenol o tetrabromofenoftaleína en presencia de proteínas muestra un viraje de color de amarillo a verde y azul.

Glucosa: Se basa en el método específico de glucosa oxidasa – peroxidasa. La prueba es independiente del pH y de la densidad de la orina. El cromógeno varía según la casa comercial.

Cetonas: Se basa en el principio de la prueba de Legal. El ferrocianuro sódico y glicina que reaccionan con el ácido acetoacético y la acetona en medio alcalino para formar un compuesto de color violeta.

Sangre oculta: El papel reactivo contiene un hidroperóxido orgánico que provoca la oxidación del indicador o cromógeno bajo la acción de hemoglobina o mioglobina. Las tiras comerciales actuales permiten la detección de eritrocitos intactos así como de hemoglobina y mioglobina. Los hematíes intactos se hemolizan al contacto con el área reactiva. La presencia de hematíes intactos da una reacción de color punteada, mientras que la hemoglobina libre y la mioglobina dan coloración uniforme.

Bilirrubina: Se trata de una reacción de acoplamiento entre la bilirrubina y una sal de diazonio en medio ácido.

Urobilinógeno: Una sal de diazonio estable produce, con el urobilinógeno en un medio ácido, casi instantáneamente, un cambio cromático.

Nitrito: La prueba se basa en el Test. De Griess, en donde el nitrito en medio ácido reacciona con el ácido parsalínico, o con una amina aromática para formar una sal de diazonio que con una benzoquinolina produce un color rosado y demuestra la conversión de los nitratos en nitritos por la acción bacteriana en la orina.

Estearasa leucocitaria: El test comprueba la actividad estearásica de los granulocitos. Estas enzimas desdoblan un éster de indoxilo a indoxilo el cual se oxida por acción del oxígeno y desarrolla un color violeta.

MATERIAL DE PRUEBA Y ESTABILIDADEl volumen de la orina necesario depende del número de pruebas a

realizar. En general, se requieren de 10 ml a 15 ml de orina. Las muestras deben refrigerarse si no pueden estudiarse de inmediato, pero antes de utilizar las tiras reactivas enzimáticos, es necesario que alcancen la temperatura ambiente.

Las muestras deben estar libres de cualquier contaminación fecal o vaginal y deben estar adecuadamente identificadas. No se recomienda de rutina el uso de sustancias conservantes. La muestra debe ser leída antes de 1 hora desde su recolección.

La muestra debe recogerse en un recipiente limpio y seco. La primera muestra de orina de la mañana es la más aconsejable por ser una orina más concentrada.

MÉTODO DE RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA Micción espontánea: Realizar de forma higiénica la recogida de una

muestra de orina emitida por micción espontánea.

En la mujer: Mantener separados los labios menores y pedir al paciente que orine. Desechar los primeros 20-25 cc de la micción, y sin que esta se interrumpa,

recoger en el contenedor estéril la muestra de orina.

En el hombre: Mantener el prepucio retraído y pedir al paciente que orine.

Desechar los primeros 20-25 cc de la micción, y sin que esta se interrumpa, recoger en el contenedor estéril la muestra de orina.

Volver el prepucio a su posición natural.

Pacientes pediátricos: Colocar una bolsa adhesiva estéril. Vigilar cada 30 minutos si contiene orina. Cambiar la bolsa si se comprueba que está despegada, repitiendo el

proceso de lavado de la zona genital.

EXAMEN PARCIAL DE ORINA Y UROCULTIVONormalmente, se encuentran bacterias en la porción distal de la uretra y

el perineo. Estos microorganismos son contaminantes de la orina y deben evitarse mediante técnicas de recolección asépticas. Limpiar la región periuretral (Extremidad del pene, labios, vulva) por medio

de los lavados sucesivos con agua y jabón o un detergente liviano, enjuagando muy bien con agua esterilizada para quitar el detergente, mientras se mantiene retraído el prepucio o los pliegues de la vagina.

Limpiar la uretra, dejando pasar la primera parte de la micción la cual se desecha.

Recoger directamente en un frasco estéril la orina que se emite a continuación (Orina de segunda parte de la micción).

La orina recolectada se utiliza para cultivo y recuento de colonias. En la mujer, se recomienda recolectar de esta manera (2) muestras

sucesivas para alcanzar un 95 % de seguridad si se emplea el recuento bacteriano de 10 5/mL como índice de bacteriuria, aun cuando este no es el procedimiento de rutina en la práctica, a menos que exista duda con respecto al diagnóstico.

En el hombre, contando con la cooperación del paciente, basta un solo cultivo de orina para establecer la existencia de bacteriuria. Como generalmente la orina favorecerá el crecimiento de la mayoría de los gérmenes urinarios patógenos (Al igual que los medios de cultivo rutinarios) es absolutamente necesario que el cultivo de orina se realice dentro de la primera hora posterior a su recolección o que se mantenga en refrigeración (4º Centígrados) hasta el momento de su procesamiento. Algunos estudios demuestran que se pueden mantener las muestras de orina en refrigeración durante periodos prolongados, sin que se reduzca considerablemente su contenido bacteriano y los recuentos permanecen estables por lo menos 24 horas a la temperatura del refrigerado (4º C). Si en el laboratorio se reciben durante el día diferentes muestras, se podrán colocar en refrigeración a medida que van llegando, para analizarlas todas en un determinado momento.

Existen métodos comerciales, con un preservador que elimina la necesidad de refrigeración. Este método, contiene un preservador de ácido borrico, glicerol y formato de sodio.

RECOLECCIÓN DE MUESTRAS DE ORINA EN NIÑOSEn niños, puede utilizarse una bolsa de plástico estéril colectora de orina

(Producto comercial. La bolsa se colocará después de haber lavado los genitales adhiriéndola a la piel por medio de un anillo adhesivo. Si no es posible recolectar orina en los siguientes 45 minutos, deberá cambiarse la bolsa por una nueva. Si no se dispone de bolsa recolectora, podrá acudirse a un guante estéril desechable, cuidando que no contenga talco: adherir el guante desechable con esparadrapo.

Punción suprapúvica: Ocasionalmente, la aspiración por punción suprapúbica de la vagina puede ser necesaria y está a cargo del médico su recolección. Comprende la punción directa de la vejiga a través de las pares abdominal con aguja y jeringa estériles. (Debe asegurarse que el paciente tenga la vejiga llena antes de iniciar el procedimiento )

Uso de Catéteres (Sonda de Foley, Nelaton, etc.) Puede investigarse la presencia o ausencia de infección, obteniendo la muestra de orina por medio de catéter, limpiando debidamente el sitio en donde se va a puncionar. No se debe tomar nunca el recipiente del mecanismo de recolección.

Cultivo de punta de catéter urinario: Se acepta generalmente en la literatura, que la práctica de cultivar la punta de un catéter urinario después de retirarlo es absolutamente inútil, ya que la punta del mismo se contamina al retirarla de la uretra. Se recomienda firmemente no presentar para cultivo puntas de catéteres urinarios, cultivando, en cambio, una muestra de orina.

CULTIVO ANAEROBIO DE ORINALa orina evacuada nunca debe cultivarse anaeróbicamente debido a la

inevitable presencia de anaeróbicos de la flora normal de la uretra y áreas vecinas. Las infecciones anaeróbicas del tracto urinario son sumamente raras; si existe evidencia clínica o radiológica de infección anaeróbica o si la coloración de Gram sugiere la presencia de anaerobios en la orina, debe obtenerse la muestra por punción suprapúbica.

Cultivo de cálculos renales y vesicales: Nemoy y Stamey recomiendan cultivar los cálculos recuperados por aspiración con aguja durante un procedimiento quirúrgico y que el cálculo obtenido se lave cuatro veces con solución salina estéril, hasta pulverizarlo. Cultiva la muestra por procedimiento cuantitativo, como la orina; posteriormente, se identifican los microorganismos. Los organismos que degradan úrea están firmemente enclavados en el cálculo.

Investigación de bacilo de Koch (BK) en orina: La presencia de piuría y hematuria en paciente sin bacteriuria indica la posibilidad de tuberculosis en el sistema urinario.

Utilizar frasco estéril de boca ancha y tapa. Recolectar tres muestras seriadas de la primera orina de la mañana

(Recolectar la primera parte de la micción hasta llenar el frasco proporcionado).

Evitar procesar muestras de 12 y de 24 horas (Proliferación abundante de otras bacterias sobre las Mycobacterias).

RECOLECCIÓN DE ORINA DE 12 HORAS Orinar por la mañana al levantarse y anotar exactamente la hora (Esta

muestra no se recolecta). Recolectar las muestras posteriores de orina (Mañana y tarde) en el

recipiente proporcionado por el laboratorio, hasta cumplir 12 horas de haber desechado la primera muestra de la mañana.

El recipiente debe ser preferiblemente de color opaco. Conservar el frasco en nevera durante el estudio. (Temperatura de 4º Centígrados).

Es importante tener cuidado al vaciar la orina en el frasco para que no se pierda nada de ella. En caso de olvidar recolectar parcial o totalmente alguna muestra, deberá iniciarse nuevamente el estudio.

RECOLECCIÓN DE ORINA DE 24 HORAS Orinar por la mañana al levantarse y anotar exactamente la hora (Esta

muestra no se recolecta). Recolectar las muestras posteriores de orina (Mañana, tarde y noche) en el

recipiente proporcionado por el laboratorio, El recipiente debe ser preferiblemente de color opaco. Conservar el frasco en nevera durante el estudio. (Temperatura de 4º Centígrados).

Al día siguiente, exactamente a la misma hora en que la orina fue desechada el día anterior, se recoge la última muestra.

Conservar el frasco en nevera durante el estudio. Es importante tener cuidado al vaciar la orina en el frasco para que no se

pierda nada de ella. En caso de olvidar recolectar parcial o totalmente alguna muestra, deberá iniciarse nuevamente el estudio.

TRANSPORTE Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS DE ORINALas muestras para el estudio de la orina deben ser recientes y deben ser

analizadas dentro de la 1° hora después de la micción, o bien refrigerar la orina para posterior estudio o traslado.

Las muestras a temperatura ambiente se descomponen con rapidez principalmente por la presencia de bacterias que desdoblan la urea, produciendo

amoníaco y aumentado el pH de la orina, dándose por esto la disolución de ciertos elementos formes como eritrocitos y cilindros.

Además hay aumento de la turbidez, obscurecimiento del color y olor molesto, las bacterias si están presentes pueden utilizar la glucosa como fuente energética, provocando falsos negativos, y la bilirrubina puede descomponerse si no la resguardamos de la luz. Estos procesos se retardan si la orina es conservada en refrigerador.

CONDICIONES DEL PACIENTEPara la recolección de la muestra de orina se requiere la primera orina

de la mañana, unas instrucciones claras y precisas y un frasco limpio. Para tal efecto proceder de la siguiente manera:

Limpiar la región periuretral (extremidad del pené, labios, vulva) por medio de lavados sucesivos con agua y jabón, enjuagando y secando muy bien.Limpiar la uretra dejando pasar la primera parte de la micción, la cual se desecha. Recoger directamente en un frasco limpio o en una bolsa de plástico estéril colectora de orina especial para lactantes la segunda parte de la micción, si es en el frasco o toda la orina si es un bebé.

MATERIALES Y EQUIPOS. Equipo lector de tirillas (opcional) Microscopio Centrífuga. Pipeta automática de 20 microlitros. Puntas desechables. Tubos de vidrio de 12 x 75 mm. Lápiz de cera. o marcador

REACTIVOS Tirillas reactivas comerciales Control de orinas (normal y anormal) Tiras calibradoras (en caso de contar con el equipo)

MÉTODO DE ESTANDARIZACIÓN Y CALIBRACIÓN Método Manual:

La cantidad de muestra debe ser de 10 mlLa centrifugación debe ser de 5 minutos a 2.500 r.p.m.El tiempo de lectura de las tiras reactivas debe ajustarse a los sugeridos por la casa comercial. Sumergir 1 a 2 Seg. Leer a los 60 seg., ó 2 min sí es para leucocitos.

Método Automático: Además de lo anterior cada equipo debe ser calibrado diariamente antes de comenzar el trabajo de rutina normal o cada que él lo

requiera y este resultado debe consignarse en un registro de control de calidad y resultados de calibración de los equipos del laboratorio clínico.

Para la estandarización del sedimento urinario se recomienda: Mezclar adecuadamente la muestra de orina. Colocar 10 ml de orina en un tubo de ensayo de 12 x 75 nm. Centrifugar durante 5 minutos a 2.500 r.p.m. Descartar el sobrenadante de tal manera que quede en el tubo más o menos

1 ml., de sedimento. Re suspender el sedimento dando golpecitos suaves en la parte inferior del

tubo para mezclarlo. Colocar una gota del sedimento con una pipeta automática de 20 microlitros,

en un portaobjeto, colocar una laminilla y se examina después de 1 minuto de reposo.

La luz del microscopio debe estar amortiguada para dar un contraste adecuado (se cierra parcialmente el iris del diafragma y se ajusta el condensador hacia abajo hasta lograr el contraste óptimo) Es importante anotar que si hay demasiada luz, algunas estructuras se podrán pasar por alto. El examen debe hacerse primero en 10x y luego en 40x.

CRITERIOS Y PROCEDIMIENTOS DE CONTROLSe disponen de diversos componentes liofilizados en tabletas, en

líquidos o en tiras reactivas con diversas concentraciones de los componentes investigados en las pruebas corrientes de orina (seguir instrucciones según fabricante).

Existen también controles con hematíes que se utilizan como control en las pruebas del sedimento urinario.

Adicionalmente se utilizan controles líquidos o liofilizados para comprobar las pruebas de precipitación ácida de las proteínas.

Existe una fórmula de orina simulada así:

A 500 ml de NaCl al .9% añadir: 5 ml de glucosa al 50% 2 ml de acetona 25 Ml de suero 0.1ml de sangre total lisada en 0.1 ml de H2O. Ajustar al pH 6. Su lectura debe ser: pH: 6.0 Densidad: 1.010 Proteínas: +++ Glucosa: ++ Cetonas: +

Esta solución es estable dos semanas si se refrigera herméticamente tapada o por más tiempo si se congela.

Para la densidad calibrar con agua destilada debe dar 1.000.Con cloruro de sodio al 3% debe dar 1.015 +/- 0.001Con cloruro de sodio al 5% debe dar 1.022 +/- 0.001Con sacarosa al 9% debe dar 1.034

Debe presentarse una atención especial al tiempo de almacenamiento, temperatura y fechas de caducidad de las preparaciones de control.

Un programa de control de calidad de los exámenes de orina de rutina debería comprender los siguientes puntos:

En los procedimientos manuales se debe dar una descripción de cada uno, señalando las pruebas confirmatorias y describiendo los controles que se usarán en cada prueba.

Deben llevarse a cabo controles positivos y negativos por lo menos una vez con cada cambio. Donde sea posible, introducir muestras repartidas como controles secretos. Registrar los resultados de los controles.

Registrar las temperaturas de neveras, Efectuar y registrar diariamente la calibración y control de todos los instrumentos y equipos.

Realizar el mantenimiento preventivo del instrumental.Seguir las indicaciones del fabricante para el almacenamiento y uso de

las tiras reactivas. Comparar cuidadosamente con la tabla de colores proporcionada por la

casa comercial al hacer el reporte de los resultados (en el caso de hacer el proceso manualmente).

Al preparar el sedimento urinario cumplir con el tiempo y las revoluciones de la centrifugación, al igual que registrar el resultado del control de calidad que se haga (control de eritrocitos para el proceso de análisis del sedimento en el microscopio)

CONTROL DE CALIDAD PARA ANÁLISIS FÍSICO QUÍMICO-ORINA

CRITERIOS Y PROCEDIMIENTOS DE CONTROL QUE DEFINENRESULTADOS INACEPTABLES

El análisis de la muestra de orina se ve afectado por algunos factores como:

Limpieza del recipiente de recolección de la muestra (afecta la calidad de la muestra en cuanto a contaminación).

Tiempo transcurrido entre la recolección de la muestra y su análisis (influye en el cambio de las estructuras y cambio en los componentes y metabolitos).

Momento de obtención de la muestra (dilución o concentración de la orina).

Método de recolección de la muestra (debe estar acorde al análisis que se le haga a la orina, para no afectar el proceso).

Utilización de medicamentos y diferentes sustancias (causa interferencia en algunas pruebas).

Volumen de la muestra de orina (para que se conserve la representatividad en la misma).

Tiempo y revoluciones en el proceso de centrifugación (puede ocasionar distorsión en el análisis).

Técnica de lectura de la tirilla reactiva y del sedimento (presencia de falsos positivos o negativos según el caso).

Falta de calibración de los diferentes equipos (afecta la calidad de los resultados).

ACCIONES CORRECTIVAS PARA RESULTADOS INACEPTABLESEl recipiente para la recolección de la muestra debe estar muy limpio,

preferiblemente estéril y que sea de plástico con tapa rosca para evitar derrames.

Para la recolección de las muestras en niños se recomienda utilizar la bolsa colectora desechable.

El tiempo transcurrido para el análisis de la muestra no debe sobrepasar 1 hora contados desde el momento de su recolección, y si no va a analizarse inmediatamente, debe conservarse en nevera para evitar la proliferación de bacterias y el consumo y transformación de los diferentes compuestos de la orina.

La muestra ideal es la primera orina de la mañana, ya que es más concentrada debido a la poca ingesta de líquidos durante la noche. Muestras recogidas en el transcurso del día, corren el riesgo de estar muy diluidas y dar resultados erróneos.

En caso de no poder recoger la primera muestra de orina en la mañana, se recomienda que como mínimo haya una retención urinaria de 4 horas para un análisis más acertado.

Según el análisis a realizar, la muestra de orina puede ser recogida de diferentes formas; la clase de método en la recolección es importante según el tipo de análisis a efectuar.

Muchas sustancias interfieren con la prueba de orina, como por ejemplo el consumo de ciertos medicamentos.

El volumen de orina debe ser de 10 ml. y en caso de obtener volúmenes muy pequeños, debe hacerse la aclaración en el reporte de los resultados.

El tiempo de centrifugación debe ser de 5 minutos a 2.500 r.p.m., ya que de lo contrario podrían dañarse algunas estructuras muy delicadas como los cilindros y los eritrocitos.

La técnica de lectura del sedimento urinario debe estar estandarizada, no sólo en el reporte, si no en la cantidad de la muestra a analizar, el recorrido que se haga de la muestra, para evitar así falsos positivos o negativos.

El control de calidad y la calibración periódica de los equipos y reactivos utilizados en el estudio de la orina debe convertirse en una constante en el laboratorio clínico.

Durante el análisis químico de la orina el frasco de las tirillas reactivas no debe dejarse durante mucho tiempo destapado para así evitar la hidratación de las mismas y la coloración de las zonas de reacción.

Orinas refrigeradas deberán colocarse a temperatura ambiente antes de realizar el análisis físico-químico.

CÁLCULOS Análisis Físico: No aplica. Análisis Químico: No aplica. Análisis del sedimento urinario: Para el reporte de las diferentes

estructuras como leucocitos, eritrocitos, células epiteliales altas y bajas, cuerpos ovales grasos, células centellantes, acúmulos de leucocitos, se hace un promedio de las estructuras observadas en 10 campos microscópicos, con objetivo de 40x. Los elementos como bacterias, moco, cristales, células espermáticas cuando son de una muestra de un hombre, tricomonas, blastoconidias y pseudomicelios de Cándida se reportan por cantidad, escasa media o abundante.Los cilindros se cuentan en todos los campos de la placa y se reportan. TC o sea en todos los campos.

EXPRESIÓN DE RESULTADOS Análisis Físico:

Color: Se informa según el color de la orina así: Incoloro, Amarillo claro, Amarillo fuerte, Anaranjado, Verdoso, Marrón, Rojo.

Aspecto: En la orina el aspecto varía así: Transparente, Ligeramente turbio, Turbio, Muy turbio.

Densidad: Se informa desde 1.003 hasta 1.035, cuando supera este valor se informa “mayor de 1.035”.

Análisis Químico: pH: Informar como 5, 6, 7, 8 ó 9 (o según casa comercial). (ácido, neutro

u alcalino). Proteínas: Se informa como negativo, indicios o trazas, 1+, 2+, 3+, 4+ ó

en mg/dl, según la casa comercial. Glucosa: Se informa en mg/dl. Cetonas: Se puede reportar por cruces o se puede informar por mg/dl. Sangre oculta: Se puede reportar por cruces o por eritrocitos/ul. Bilirrubina: Se informa como negativo o si da positivo en mg/dl o por

cruces. Urobilinógeno: Se informa como mg/dl ó en UE/dl si es positivo, sino se

informa como Normal.

Nitritos: Se reporta como Negativo o Positivo. Estearasa leucocitaria: Se informa como leucocitos/ul.

SEDIMENTO URINARIO Elementos formes de la orina: Los hematíes, leucocitos y células

epiteliales se reportan en alto poder (AP 40x) mínimo en 10 campos microscópicos significativos.Si el número de células epiteliales altas es significativo, hay que registrar su presencia. Las bacterias y Hongos se registran por cantidad escasa, media o abundante, al igual que la presencia de moco, el cual existe normalmente en la orina en pequeñas cantidades, puede ser abundantes en inflamación o irritación del tracto urinario.La presencia de espermatozoides en la orina masculina puede deberse a enfermedades de los órganos genitales o a espermatorrea; informar su presencia. Si el número de cristales es elevado o su aspecto es anormal se debe reportar su presencia en cantidad escasa, media o abundante. Los cristales de mayor importancia son: cistina, tirosina, leucina, colesterol, bilirrubina y hemoglobina (granos de color amarillo), y por ultimo las sulfamidas. La formación de cristales depende del pH, por lo cual es útil conocer el pH de la orina al efectuar el examen microscópico.

Cristales de orinas ácidas: Ácido úrico, oxalato de calcio, uratos de sodio y uratos anormales; con menos frecuencia, cristales de sulfato de calcio, uratos de sodio, ácido hipúrico, cistina, leucina, tirosina, colesterol y sulfamida.

Cristales de orinas alcalinas: Fosfatos triples, fosfatos amorfos, carbonatos de calcio, fosfato de calcio y uratos de amonio.

Los cilindros se cuentan en bajo poder (BP 10x) pero se identifican y clasifican en alto poder (AP 40x) y se reportan haciendo un promedio de las estructuras vistas en 10 campos microscópicos y en bajo poder (BP 10x) y diciendo de que tipo es. Cilindros hialinos: Pueden aparecer en pequeñas cantidades en orinas

normales. Cilindros eritrocitarios: Son siempre patológicos. Cilindros leucocitarios: Se observan en infección renal y en procesos

inflamatorios de causa no infecciosa. Cilindros granulosos: Casi siempre indican enfermedad renal significativa. Cilindros de células epiteliales: Son siempre patológicos. Cilindros céreos: Su presencia indica enfermedad renal grave. Cilindros grasos: Son siempre patológicos.

Los parásitos que se encuentren en la orina debido a la contaminación fecal se reportan como presencia. Para confirmar la identificación de los

elementos presentes en la orina se utiliza la coloración del sedimento, para esto se coloca una gota de sedimento re suspendido sobre uno de los extremos de una lámina portaobjetos. Añadir una gota del colorante Cristal violeta- Safranina. Mezclar y colocar un cubreobjetos sobre la preparación. Sobre el otro extremo de la lámina colocar una gota del sedimento sin colorante con su cubreobjetos. Examinar las dos preparaciones en pequeño aumento (10x) y con luz atenuada. Se deben leer 10 campos microscópicos.

VALORES DE REFERENCIAANÁLISIS FÍSICO

Color: Puede variar de una amarillo pálido a un ámbar oscuro. Aspecto: La orina normal habitualmente es clara. Densidad:

EDAD VALOR DE REFERENCIA Recién nacidos (primeros días) 1012 Lactantes 1002 – 1006 Adultos 1001 – 1035 Adultos (con ingestión normal de líquidos) 1016 - 1022

ANÁLISIS QUÍMICO pH: El valor promedio se encuentra alrededor de 5 y 6. Proteínas: Pequeñas cantidades pueden detectarse en individuos sanos;

Normalmente es negativo. Glucosa: Por lo general no existe Glucosa en orina hasta que el nivel en

sangre no supera los 160 mg/dl a 180 mg/dl (umbral renal normal para la glucosa). A veces pequeñas cantidades no significativas pueden detectarse en orinas normales.

Cetonas: Normalmente no debe existir en orina. Sangre oculta: Normalmente no existe sangre en orina, ni hemoglobina libre

(por lisis del eritrocito). Bilirrubina: No debe existir en orinas normales. Urobilinógeno: Normalmente existen en orina en concentraciones de 1

UE/dl o menos. Nitritos: Normalmente son negativos, más sin embargo un resultado

negativo nunca debe interpretarse como indicador de ausencia de infección bacteriana; esto puede deberse a: Pueden existir gérmenes patógenos en la orina que no forman nitritos. La orina pudo no haber estado en la vejiga bastante tiempo como para que el nitrato se convirtiera en nitrito.Existen casos en los que la orina no tiene nitrato y puede existir infección bacteriana. En algunas circunstancias las enzimas bacterianas pueden haber reducido el nitrato en nitrito y el nitrito en Nitrógeno con resultados negativos por consiguiente.

Estearasa leucocitaria: Se considera normal entre 10 a 30 leucocitos/ul.

SEDIMENTO URINARIONormalmente no aparecen hematíes en la orina, pero la presencia de 1 a

2 eritrocitos por campo no se considera anormal. Algunos estudios recientes han revelado que la morfología de los hematíes permite separar en muchos casos la hematuria glomerular de la postglomerular. Los hematíes que atraviesan el filtro glomerular aparecen “dismorficos” en un elevado porcentaje se desforman y fragmentan y contienen muescas su tamaño es variable al igual que el contenido de Hb. Luego hay que diferenciarlos de los hematíes uniformes de origen posglomerular. La hematuria glomerular, se sospecha cuando más del 80% de los hematíes tienen un aspecto dismórfico. Más del 80% de los hematíes normales, sugieren un origen postglomerular.

El promedio de leucocitos en la orina normal es de 2 leucocitos por campo. Las células epiteliales del túbulo renal (altas) pueden existir normalmente en número reducido, las células epiteliales de transición (medias) también pueden existir en pequeñas cantidades como consecuencia normal del proceso de descamación y las células epiteliales escamosas (bajas) en la orina de la mujer posee escaso significado diagnóstico.

Por lo general no se encuentran cristales en la orina recién emitida y la presencia en pequeñas cantidades de algunos no es considerada patológico.

En orinas normales pueden encontrarse cilindros hialinos en pequeñas cantidades, la presencia de otros tipos de cilindros es considerada patológica.

(Cuerpos ovales grasos) Ciertas células del túbulo renal, pueden identificarse con bastante exactitud, mediante microscopio de campo claro. Se trata de cuerpos grasos ovalados, es decir, células tubulares que contiene lípidos, (lipoproteínas con colesterol y triglicéridos), procedentes de los glomérulos nefróticos; en consecuencia, los cuerpos grasos ovalados, corresponden a un tipo especial de lipiduria. También pueden desarrollarse en la orina, lípidos en forma de góticas de grasa libres.

Dichas góticas, aunque de morfología parecida a los hematíes, presentan un tamaño variable y no se derrumban al presionar sobre el cubreobjetos.

El tamaño de los cuerpos ovales grasos, puede. Superar al de las células tubulares normales, los histiocitos pueden fagocitar lípidos y entonces es imposible diferenciarlos de los cuerpos ovales grasos; sin embargo, su importancia clínica es parecida.

Finalmente, los lípidos pueden incorporarse a la matriz de los cilindros en forma de gotas de grasa libres o de cuerpos grasos ovalados. Estos cilindros se denominan cilindros grasos.

Como método de apoyo en la identificación de las estructuras están las coloraciones en el caso de la grasa existe:

Tinción de la grasa con Sudan III. Para esta tinción se prepara una tinción saturada de Sudan III en alcohol al 70%. Al sedimento obtenido en forma

habitual se añaden 2 gotas de dicha solución, se mezcla y se deja por 15 minutos. La grasa contenida en las células o cilindros se tiñe de color rojo anaranjado y se reconoce con gran facilidad.

INTERFERENCIA TÉCNICA Color: Sustancias que pueden colorear la orina:

COLOR PATOLÓGICAS NO PATOLÓGICAS. Blanco Quilo, Pus (muchos leucocitos) Fosfatos Amarillo o AnaranjadoBilirrubina, Urobilina Acriflavina, Azo-Gantrisin,Colorantes de alimentos, Nitrofurantoina, Orina concentrada, Pyridium, Quinacrina, Riboflavina, Ruibarbo, Serotonina, Sulfasalazina, zanahoria.Rosado o Rojo Eritrocitos, Hemoglobina, mioglobina, porfobilina, porfirinas Aminopirina, Antipirina, Bromosuftaleina, Colorantes de alimentos, Difenilhidantoína, Fenacetina, Fenoftaleina, Fenolsulfonftaleína, Fenotiazina, Metildopa, Pyridium. Remolacha Roja o Castaño a Púrpura Porfobilina, Porfobilinógeno, Uroporfirina.Castaño a Negro Ac. Homogentísico, Ac. Parahidroxifenilpirúvico, Bilirrubina, Fenol, Melanina, Metahemoglobina, Mioglobina, Porfirinas Cptos. de hierro, Cloroquina, Hidroquinona, Levadopa, Metildopa, Metronidazol, Nitrofurantoína, Quinina, Resorcinol Azul a Verde Biliverdina, Infección por Pseudomonas Acriflavina, Amitriptilina, Azul de Evans, Azul de metilo, Complejo de Vit. B, Fenil salicilato, Timol

Aspecto: El aspecto puede verse afectado por:

ASPECTO CAUSA Turbio: Fosfatos, Carbonatos, Uratos, Ac. Úrico, leucocitos, hematíes,

Bacterias, Levaduras, Espermatozoides, Líquido prostático, Mucina, moco, cálculos, arenilla, grumos, pus, tejidos, contaminación fecal, medios de contraste radiológico.

Lechoso: Piuria (muchos leucocitos), grasas, lipuria, cremas vaginales. Densidad: La densidad puede verse afectada por sustancias como glucosa

o urea en concentraciones mayores de 1%, ya que dan valores bajos, mientras que cantidades superiores de proteínas pueden determinar lecturas elevadas. Las orinas muy alcalinas determinan también lecturas de valor inferior, por eso se sugiere que debe sumarse 0,005 a los valores de densidad con orinas de pH mayor o igual de 10,5. El pH puede aumentarse en orinas viejas por la pérdida de Dióxido de carbono y a que el crecimiento bacteriano produce amoníaco a partir de la urea.

La lectura de las proteínas puede dar resultados falsos positivos en orinas con pH mayor o igual a 9, si se deja mucho tiempo sumergida la tirilla reactiva, restos de desinfectantes con amoníaco. Los resultados falsos negativos pueden darse en orinas diluidas y con otras proteínas diferentes a la albúmina.En la sangre oculta puede presentarse falsos positivos en presencia de Hipoclorito en el envase que contiene la orina, al igual que en orinas con alta concentración de bacterias puede haber una reacción positiva falsa por acción de las peroxidasas bacterianas. Si la muestra de orina no se mezcla bien puede presentarse un falso negativo ya que los hematíes suelen ubicarse en el fondo. En las bilirrubinas se pueden presentar falsos negativos en presencia de elevada concentración de ácido ascórbico, de nitrito o si se oxidó la bilirrubina. Los falsos positivos dan en pacientes con altas dosis de clorpromacina y otros fármacos.

BIBLIOGRAFÍA Graff, Sister Laurine. Análisis de orina, Atlas de color. Ed Panamericana.

1987. Henry, Jhon Bernard. Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el Laboratorio.

Ed. Salvat. ed. 8°. 1988. Navarrete, Silvia M., Gladys Villamil de G. Química Clínica y Orinas, Manual

de Procedimientos. Ministerio de Salud, Instituto Nacional de Salud, 1986. Ministerio de Salud.

Muestra de orina

La muestra de orina de "toma limpia" se lleva a cabo recogiendo la orina a mitad del chorro. Los hombres y los niños deben limpiarse la cabeza del pene. Las mujeres y las niñas deben lavar el área entre los labios de la vagina con agua

jabonosa y enjuagarla bien. Se debe dejar caer en el inodoro una pequeña cantidad de orina antes de tomar la muestra (esto elimina de la uretra elementos contaminantes). Luego, se recoge de una a dos onzas de orina en un recipiente

limpio que posteriormente se aparta del chorro de orina. Éste se le entrega al personal médico.