manual de transfusion sanguinea

ESE HOSPITAL LOCAL DE PUERTO ASIS

PROTOCOLO

PLC-031

FECHA DE ACTUALIZACIONJUNIO 2015

PROTOCOLO DE TRANSFUSION SANGUINEA

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INTRODUCCION

La transfusión es un tratamiento de un tejido vivo y que por lo tanto le confiere unas

características especiales a otros tratamientos médicos. A pesar de los esfuerzos

realizados en seguridad transfusional, existen una serie de riesgos que pueden llegar a

ser mortales, por otro lado hay que tener presente que es un bien escaso, puesto que

todavía en España el nivel de autoabastecimiento es bajo, por lo que hay que tener

presente que es un producto caro ya que, aunque la donación es altruista, las tareas de

promoción, extracción, fraccionamiento, conservación, técnicas serológicas y su

distribución generan un gasto importante. Por eso la transfusión solo debe emplearse en

circunstancias muy justificadas, los beneficios superan los riesgos, y sus indicaciones

deben ser muy cuidadas. El presente documento no trata más que de ayudar al médico,

mediante unas orientaciones que han tenido el mayor consenso entre los miembros de la

Comisión de Hemoterapia del Hospital y la SETS (Sociedad Española de Transfusión

Sanguínea) para conseguir que el proceso de indicar una transfusión y la administración

de los distintos componentes se realice de la forma más segura posible.

MANEJO DE LOS HEMODERIVADOS

“Al paciente que lo necesite

el componente adecuado

en el momento preciso con indicación correcta”.

PRUEBAS PRETRANSFUSIONALES

Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

Ángela RosalesBacterióloga

William MartínezCalidad

Marino RincónGerente.


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Previamente a la realización de las pruebas cruzadas de compatibilidad, es recomendable

ratificar en una muestra obtenida del tubo colector de la unidad de sangre o concentrado

eritrocitario, el grupo ABO y antígeno Rho (D),mediante una prueba de aglutinación

directa

PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD

DETERMINACION DE GRUPO SANGUINEO ABO

Un grupo sanguíneo es una forma de agrupar ciertas características de la sangre que

dependen de los antígenos presentes en la superficie de los glóbulos rojos y en el suero

de la sangre.

Esta ha sido la base para que se pueda clasificar a la sangre en cuatro grupos en cuanto

al sistema ABO: grupo A, grupo AB, grupo B y grupo O; y en dos con respecto al sistema

Rh: Rh negativo o Rh positivo. Con lo que se puede formar ocho grupos posibles por las

combinaciones posibles entre ambos sistemas.

Las transfusiones de sangre entre grupos incompatibles pueden provocar una reacción

inmunológica que puede desembocar en muerte.

Las personas con sangre del tipo A tienen glóbulos rojos que expresan antígenos de tipo

A en su superficie y anticuerpos contra los antígenos B en el suero de su sangre.

Las personas con sangre del tipo B tienen la combinación contraria, glóbulos rojos con

antígenos de tipo B en su superficie y anticuerpos contra los antígenos A en el suero de

su sangre.

Los individuos con sangre del tipo O no expresan ninguna de los dos antígenos (A o B) en

la superficie de sus glóbulos rojos pero pueden fabricar anticuerpos contra ambos tipos,

mientras que las personas con tipo AB expresan ambos antígenos en su superficie y no

fabrican ninguno de los dos anticuerpos.

A causa de estas combinaciones, el tipo O puede ser transfundido sin ningún problema a

cualquier persona con cualquier tipo ABO y el tipo AB puede recibir de cualquier tipo ABO. Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:





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Los donantes de sangre y los receptores deben tener grupos compatibles. El grupo O es

compatible con todos, por lo que quien tiene dicho grupo se dice que es un donante

universal. Por otro lado, una persona cuyo grupo sea AB+ podrá recibir sangre de

cualquier grupo, y se dice que es un receptor universal.

Clasificación ABO – Rh (Tubo)

Fundamento

El primer sistema de grupo sanguíneo identificado y el más significativo en medicina

transfusional es el ABO, por tanto su determinación es obligatoria y rutinaria en el banco

de sangre y debe incluir la prueba celular y la prueba sérica, en el primer caso se utilizan

anticuerpos (antisueros) anti A y anti B para determinar la presencia o ausencia de

antígenos del grupo A, B o A, B en los glóbulos rojos del donante. En el segundo caso se

emplean glóbulos rojos A1 y B como reactivo para detectar anticuerpos naturales anti A y

Anti B y confirmar el grupo detectado en la prueba globular o eritrocitaria. Por otra parte

los antígenos D del sistema RH son los más relevantes después de los antígenos A, B y

A, B del sistema ABO y su presencia en los donantes debe ser evaluada obligatoriamente

y de rutina, empleando antisueros que permitan detectar las variantes parciales y débiles

del mismo.

Muestras requeridas

- Suspensión de glóbulos rojos 3 – 5%

- Suero del donante o receptor

Reactivos






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Para efectos prácticos, los antisueros y células utilizados fueron controlados antes de la

práctica: dicho control consistió en: prueba de potencia, avidez y especificidad para

antisueros y para reactivos celulares prueba de especificidad.

- Antisuero Anti A, Anti B, Anti A, B y Anti D.

- Antisuero Lectina A1 (La utilización de este solo se dará cuando la muestra sea grupo

A o AB).

- Células para prueba inversa de la hemoclasificación: A1, A2, B y O.

- Solución salina 0,9%( control negativo de la prueba directa)

- Control del Rh.

Equipos y materiales

- Tubos de Kahn

- Pipetas: 10 – 100 uL; 20 – 200 uL y 100 a 1000 uL.

- Puntas par pipeta.

- Serofuga.

Desarrollo del procedimiento

- Para la prueba directa marque seis (6) tubos de la siguiente forma con el No de la

muestra asignada (XXX) y agregue los reactivos en volumen y orden de acuerdo al

grafico:

ABO Rh






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1. 50 uL anti A 50 uL anti B 50 uL anti A,B 50 uL S.S 50 uL

anti D Control Rh

+ + + + +

+

2. 50 uL Mx 50 uL Mx 50 uL Mx 50 uL Mx 50 uL

Mx 50 uL Mx

Suspensión de glóbulos rojos 3 – 5%

- Para la prueba inversa marque cuatro (4) tubos de la siguiente forma con el No de

la muestra asignada (XXX) y agregue los reactivos en volumen y orden de acuerdo al

grafico:

1. 50 uL células A1 50 uL células A2 50 uL celulas B 50

uL células O

+ + +

+





XXXX XXXX

XXXX

XXXX

XXXX

XXXX

XXXX

XXXX

XXXX

XXXX


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2. 100 uL Mx 100 uL Mx 100 uL Mx

100 uL Mx

Suero

- Agite suavemente y centrifugue los tubos el tiempo, establecido para la centrifuga a

utilizar (Tiempo de lectura).

- Lea aglutinación o hemolisis en cada uno de los tubos y reporte en formato

correspondiente.

- Registre la interpretación de la clasificación sanguínea, de acuerdo al siguiente

cuadro

Anti A Anti B Anti

A,B

Contro

l

Cel A1 Cel A2 Cel B Anti D Contro

l

Interpretaci

ón

Ø Ø Ø Ø 3+ ó

4+

3+ ó

4+

3+ ó

4+

3+ ó

4+

Ø O Positivo

Ø Ø Ø Ø 3+ ó

4+

3+ ó

4+

3+ ó

4+

Ø Ø O

Negativo

3+ ó

4+

Ø 3+ ó

4+

Ø Ø Ø 3+ ó

4+

3+ ó

4+

Ø A Positivo

3+ ó

4+

Ø 3+ ó

4+

Ø Ø Ø 3+ ó

4+

Ø Ø A Negativo

Ø 3+ ó 3+ ó Ø 3+ ó 3+ ó Ø 3+ ó Ø B Positivo






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4+ 4+ 4+ 4+ 4+

Ø 3+ ó

4+

3+ ó

4+

Ø 3+ ó

4+

3+ ó

4+

Ø Ø Ø B

Negativo

3+ ó

4+

3+ ó

4+

3+ ó

4+

Ø Ø Ø Ø 3+ ó

4+

Ø AB Positivo

3+ ó

4+

3+ ó

4+

3+ ó

4+

Ø Ø Ø Ø Ø Ø AB

Negativo

Confirmación del Antígeno D

Fundamento.

No todos los glóbulos rojos pueden ser clasificados como Rh positivo o Rh negativo,

mediante las pruebas de aglutinación directa con los sueros anti Rh. La mayoría de

muestras de sangre de donantes generan aglutinaciones de tres o cuatro cruces, bien

definidas y claras inmediatamente después de la centrifugación y por tanto pueden ser

fácilmente clasificadas como Rh positivo. Sin embargo las muestras para las que no se

evidencia aglutinación directa al contacto con el antisuero Anti D, no pueden ser

clasificadas inmediatamente como Rh negativo, dado que es posible que el antígeno D

esté presente en las células del donante en una expresión débil que puede ser:






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Antígeno D débil: Antígeno D que cuenta con todos los epitopes antigénicos del

antígeno D convencional, sin embargo su expresión hereditariamente o por interacción

genética es débil y generalmente su reacción es negativa o muy baja al enfrentarlo con el

antisuero anti D en fase salina. Los individuos que lo poseen no se sensibilizan con el

antígeno D dado que su estructura antigénica esta completa.

Antígeno D parcial: Antígeno D que estructuralmente presenta ausencia de una o más

subunidades y generalmente su reacción es negativa o muy baja al enfrentarlo con el

antisuero anti D en fase salina. Los individuos que lo poseen pueden sensibilizarse o

crear anticuerpos anti D contra la subunidad ausente

Y para demostrar su presencia se requiere potenciar la unión antígeno anticuerpo y la

aglutinación llevando la reacción a incubación a 37oC y fase de coombs o prueba de anti

globulina.

“DE ACUERDO A LO ANTERIOR ESTA PRUEBA SOLO SE REALIZARA PARA

MUESTRAS Rh NEGATIVO”

Muestras requeridas:

Suspensión de glóbulos rojos 3 – 5%.

Reactivos

- Antisueros Anti D.

- Solución salina 0,9%.

- Potenciador Dia LISS

- Suero de CoombsElaborado por: Revisado por: Aprobado por:





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- Células Control Coombs

Equipos y materiales: los mismos requeridos en la clasificación sanguínea.

Desarrollo del procedimiento.

- Marque dos (2) tubos de la siguiente forma con el No de la muestra asignada (XXX)

y agregue los reactivos en volumen y orden de acuerdo al grafico:

1. 50 uL anti D 50 uL Control Rh

+ +

2. 50 uL mx (suspensión de glóbulos rojos 3-5%)

- Agite y centrifugue los tubos el tiempo, establecido para la centrifuga a utilizar

(Tiempo de lectura).


correspondiente.

- Agregue 4 gotas de potenciador DiaLISS.

- Mezcle e incube durante 5 minutos a 37oC.

- Centrifugue los tubos el tiempo, establecido para la centrifuga a utilizar ( Tiempo de

lectura).


correspondiente.

- Lave tres (3) veces con solución salina isotónica 0,9%:Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:




XXXX XXXX


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Desprenda bien el botón de glóbulos rojos del fondo del tubo, con

movimientos circulares suave (si aplica).

Agregue aproximadamente 1 ml de solución salina al 0,9% con frasco lavador,

agite suavemente y complete el volumen hasta 1cm antes de la boca del tubo

(evite llenarlo completamente para evitar contaminación).

Centrifugue los tubos el tiempo establecido para la centrifuga a utilizar

(Tiempo de lavado).

Decante el sobrenadante en solución desinfectante, volteando el tubo una

sola vez firmemente.

Repita este procedimiento tres veces seguidas. Después del último lavado y

decantación de la solución salina:

- Agregue dos (2) gotas de suero de coombs y agite suavemente.

- Centrifugue los tubos el tiempo, establecido para la centrifuga a utilizar (Tiempo de

lectura).


correspondiente.

- Para descartar aglutinación, observe al microscopio los tubos negativos.

- Para los tubos negativos (en los que no se observa reacción), observe al microscopia

para descartar aglutinación, agregue 1 gota de células control coombs y centrifugue,

con el fin de evaluar la eficacia de todo el procedimiento; si este se realizo de forma

adecuada se obtendrá aglutinación. Reporte los resultados obtenidos en el formato

correspondiente.

- Registre la interpretación de la prueba de acuerdo al siguiente cuadro:






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Anti D Control Rh ( Negativo) Interpretación

Negativo: 0+ Negativo: 0+

Rh : NEGATIVO

Confirmación del D : NEGATIVO

La unidad debe ser rotulada como Rh

Negativo y el donante o receptor

catalogado como tal.

Positivo

1+ a 4 +

0/ weak : fase coombs

Negativo: 0+

Rh : POSITIVO

Se evidencia la presencia de un antígeno

D débil o antígeno D parcial, por tanto la

unidad debe ser rotulada como:

Rh: negativo

Du: positivo

Con el fin de no generar confusión.

Para el caso del receptor debe ser

clasificado como Rh: Negativo con el fin

que sea transfundido como tal

Positivo: 1+ a 4+

0/ weak: fase coombs

Positivo: 1+ a 4+

0/ week: fase coombs

Prueba no valida, se debe investigar

coombs directo positivo.


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Rastreo de anticuerpos irregulares

Fundamento.

El rastreo debe ser realizado a todas las unidades recolectadas y receptores de sangre o componentes, en busca de anticuerpos irregulares de significancia clínica. La detección de anticuerpos irregulares en los donantes previene su transferencia pasiva al receptor, pues la detección origina la eliminación de componentes plasmáticos; en los receptores como prueba pretransfusional aporta mayor seguridad a la transfusión pues el hallazgo de anticuerpos irregulares obliga la identificación del anticuerpo y la búsqueda de unidades que no contengan el antígeno correspondiente, independiente del resultado de la prueba cruzada mayor. En ambos casos esta prueba contribuye a disminuir el riesgo de reacciones adversas a la transfusión.

El rastreo de anticuerpos irregulares se realiza enfrentando el suero o plasma del donante o receptor con células que exhiben la mayoría de antígenos generadores de anticuerpos de significancia clínica, de manera que si en la muestra estudiada se encuentran anticuerpo(s) irregulares su unión con el antígeno presente en la célula testigo o de rastreo, generara aglutinación o hemolisis, es importante aclarar que esta unión debe ser potenciada por diferentes mecanismos por lo que se hace necesario someter la reacción a la prueba de antiglobulina indirecta con el fin de potenciar la unión antígeno anticuerpo y hacerla visible.


Suspensión de glóbulos rojos 3 – 5% y suero o plasma

Reactivos

- Células de rastreo de anticuerpos: I, II y III- Solución salina 0,9%.- Potenciador Dia LISS- Suero de Coombs






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- Células Control Coombs

Equipos y materiales:

Los mismos requeridos en las pruebas anteriores.

Desarrollo del procedimiento.

- Marque cuatro (4) tubos de la siguiente forma con el No de la muestra asignada (XXX) y agregue los reactivos en volumen y orden de acuerdo al grafico:

1. 50 uL Cel I 50 uL Cel II 50 uL Cel III 50 uL suspension GR

+ + + +

2. 100 uL Mx 100 uL Mx 100 uL Mx 100 uL Mx Suero

- Agite y centrifugue los tubos el tiempo, establecido para la centrifuga a utilizar ( Tiempo de lectura).

- Lea aglutinación o hemolisis en cada uno de los tubos y reporte en formato correspondiente.

- Agregue 4 gotas de potenciador DiaLISS.- Mezcle e incube durante 5 minutos a 37oC.- Centrifugue los tubos el tiempo, establecido para la centrifuga a utilizar ( Tiempo de

lectura).- Lea aglutinación o hemolisis en cada uno de los tubos y reporte en formato

correspondiente.Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:




XXXX

Cel II

XXXX

Cel I

XXXX

Cel III

XXXX

Auto


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- Lave tres (3) veces con solución salina isotónica 0,9%:

Desprenda bien el botón de glóbulos rojos del fondo del tubo, con movimientos circulares suave ( si aplica).

Agregue aproximadamente 1 ml de solución salina al 0,9% con frasco lavador, agite suavemente y complete el volumen hasta 1cm antes de la boca del tubo (evite llenarlo completamente para disminuir riesgo de contaminación).

Centrifugue los tubos el tiempo establecido para la centrifuga a utilizar ( Tiempo de lavado).

Decante el sobrenadante en solución desinfectante, volteando el tubo una sola vez firmemente.

Repita este procedimiento tres veces seguidas. Después del último lavado y decantación de la solución salina:

- Agregue dos (2) gotas de suero de coombs y agite suavemente.- Centrifugue los tubos el tiempo establecido para la centrifuga a utilizar (Tiempo de

lectura).- Lea aglutinación o hemolisis en cada uno de los tubos y reporte en formato

correspondiente. - Descarte aglutinación en los tubos negativos, observando al microscopio.- Para los tubos negativos ( en los que no se observa reacción), agregue 1 gota de

células control coombs y centrifugue, con el fin de evaluar la eficacia de todo el procedimiento; si este se realizo de forma adecuada se obtendrá aglutinación. Reporte los resultados obtenidos en el formato correspondiente.

- Registre la interpretación de la prueba.

Negativo: ausencia de aglutinación o hemolisis en todos los tubos. Positivo: presencia de aglutinación o hemolisis en uno o varios tubos.

Coombs directo

Fundamento.

Es usada para detectar sensibilización in vivo de los glóbulos rojos. Es de gran utilidad en el diagnóstico de enfermedad hemolítica del recién nacido, anemia hemolítica autoinmune, anemia hemolítica, sensibilización inducida por drogas e investigación de reacciones transfusionales. Consiste en evaluar la presencia de anticuerpos sensibilizando el glóbulo rojo del paciente o donante mediante la utilización de la prueba






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de antiglobulina directa, en la cual se enfrentan los glóbulos rojos en estudio con un anti anticuerpo. La presencia de aglutinación o hemolisis evidencia la unión del anticuerpo unido al glóbulo rojo (sensibilización in vivo) y en anti anticuerpo agregado en el suero de coombs o antiglobulina.


Suspensión de glóbulos rojos 3 – 5%.

Reactivos:

Suero de Coombs

Equipos y materiales:

Los mismos requeridos en las pruebas anteriores.

Descripción del procedimiento

- Marque un (1) tubo de la siguiente forma con el No de la muestra asignada (XXX) y agregue los reactivos en volumen y orden de acuerdo al grafico:

50 uL suspensión de glóbulos rojos 3 – 5% (Mx) +

1. 50 uL de suero de Coombs2.





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Coom


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- Agite y centrifugue los tubos el tiempo establecido para la centrifuga a utilizar (Tiempo de lectura).

- Lea aglutinación o hemolisis en cada uno de los tubos y reporte en formato correspondiente.

- Registre la interpretación de la prueba:

Negativo: ausencia de aglutinación o hemolisis. Positivo: presencia de aglutinación o hemolisis.

ANEXO 1 Lectura e interpretación de reacciones de aglutinación

0/weak: No se ve aglutinación macroscópica, solo al microscopio.

1+: Sobrenadante turbio y muchos aglutinados pequeños.

2+: Sobrenadante claro y varios aglutinados medianos.

3+: Sobrenadante claro y aglutinado grande acompañado de varios de menor tamaño.

4+: Sobrenadante claro y un botón solido de eritrocitos.






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BIBLIOGRAFIA

1. Circular nº 26, del 11 de abril del 2000 del MINSAL “Recomendaciones para el

uso de transfusiones de sangre y sus componentes”

2. Resolución exenta nº 2.171 del 06 de diciembre de 1999

3. Guía del comité medicina transfusional del Hospital San Camilo

4. Terapia transfusional del Hospital Clínico de la Universidad de Chile

5. Instructivo para solicitar transfusiones, Sociedad Chilena de Hematología,

capitulo de medicina transfusional

6. Dr. Pedro Meneses, Uso y abuso de la terapia transfusional, SS Valparaíso-San

Antonio, 2002





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