laboratorio de bioquimica 4 y 6 y7 terminado

7/25/2019 Laboratorio de Bioquimica 4 y 6 y7 Terminado

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Laboratorio 4


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ESUMEN

En esta prctica analizaremos el punto isoelctrico de la casena y gelatina en lacual lo observaremos mediante un pequeo precipitado; esto nos indicara a quepH la gelatina y la casena son neutros. El pH que encontramos para la casenafue de 4! la cual en la tabla es el tubo n"mero # y para la gelatina el pH fue de#$% la cual en la tabla esta entre en el tubo & y '. El p( es el pH en el que lamolcula se disocia por igual en ambos sentidos y como equidista de los dosvalores de p) puede obtenerse por su semisuma*

+as molculas comple,as tales como las protenas se combinan con los iones

-idrgeno y con otros iones presentes en la disolucin dando lugar a la carga

neta de la molcula. / la concentracin de ioneshidrgeno o al pH para el cual la

concentracin del ion -brido de una protena es m0ima y el movimiento neto de

las molculasde solutoen un campo elctricoes prcticamente nulo se le

denomina punto isoelctrico.

+os aminocidospueden e0istir como sal interna llamadazwitterin. Esto ocurre

porque un electrndel o0geno del grupo carbo0iloes atrado por el

grupoamino1H&2ya que al nitrgeno le sobraban dos electrones de valencia3 que

est en posicin alfa y quedando este como grupo amonaco1H'.
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gelatina .


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/l determinar el punto isoelctrico2p(3 de la caseina el tubo que mostro una

pequea turbidez fue el numero # la cual tiene un pH @4!. / este pHlaovoalb"mina se encuentra en su punto de menor solubilidad debido a lareduccin de repulsiones intermoleculares por lo que precipita.

/l determinar el punto isoelctrico de la gelatina esta nos result un

pH@#$%se pudo observar un pequeo precipitado entre los tubos & y ' .+agelatina y otras protenas se disuelven por completo en el agua aun en supunto isoelctrico por lo tanto se le aadi el agente precipitante como elalco-ol etlico para -acer manifiesto el precipitado.


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Laboratorio

ESUMEN


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En esta prctica se tiene como ob,etivo la comparacin de la actividad enzimticacon un catalizador no biolgico usando como enzima a la A amilasa salival y comocatalizador no biolgico al H8l en la -idrlisis del almidn la misma que secomprob con el reactivo de Be-ling por medio de la reduccin del 8u & a8u&92s3 2ro,o3 por accin de la maltosa 2disacrido reductor3 formado en la

-idrlisis del almidn. /dems se pudo observar la velocidad de la -idrolisismediante la reaccin del almidn con el lugol la cual dio una coloracin azul queluego va decolorndose por la formacin de la maltosa lo que manifest que seprodu,o la -idrolisis.

+aamilasaoptialina es un enzima-idrolasaque tiene la funcin de catalizar lareaccin de -idrlisis de los enlaces $=4 del componente C=/milasa al digerirel glucgenoy el almidnpara formar az"caressimples.


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Dcido 8lor-drico $:. /lmidn. /zul de Fetileno :.:$. Bormalde-do :.4. Gugo de papa.

+ec-e de vaca. E0tracto de rbano.

Materiales:

5ubos de ensayo. radillas. Iipetas. Jaguetas. 5ermmetro

En tres tubos de ensayo colocamos*

5ubo 1K $ * $ F+ de /gua. 5ubo 1K & * $ m+ de Dcido 8lor-drico. 5ubo 1K ' * $ m+ de


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MUESTRA COLORACION

5ubo 1K $ /zul

5ubo 1K & /marilla

5ubo 1K ' /marilla

+uego para la determinacin de maltosa se tom $m+ de casa solucin y leaadimos $m+ del reactivo de Be-ling el cual nos determinar la presencia demaltosa al formase un precipitado ro,o de 0ido cuproso.

MUESTRA FORMACION DE PRECIPITADO

5ubo 1K $ 1egativo

5ubo 1K & Iositivo

5ubo 1K ' Iositivo

CONCLUSIONES


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+a alfa=amilasa act"a rompiendo el glucgeno inicialmente en de0trinasramificadas de peso molecular mediano formando solamente pequeascantidades de maltosa; posteriormente disminuye el peso molecular de lasde0trinas a travs de rompimientos relativamente lentos dando glucosa y

un oligosacrido con un residuo de glucosa menos.

+a -idrlisis del glucgeno 2 almidn3 puede ser catalizada por cidos

por enzimas. +as reacciones catalizadas por enzimas son muc-os masrpidas y mas completas que las correspondientes reacciones nocatalizadas.

El incremento de la velocidad en las reacciones catalizadas depende de la

colocacin e0acta del sustrato en la pro0imidad y con la orientacinadecuada respecto al grupo cataltico.

+a C=amilasa cataliza la -idrlisis rpida y ordenada de enlaces internos C2$=43 y no -idroliza los enlaces C 2$=%3.

+os productos finales de la degradacin por -idrlisis del almidn son*

glucosa maltosa e isomaltosa.


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Laboratorio !

ESUMEN

+as enzimas pertenecen a seis grupos que aparecen a continuacin*90idoreductasas act"an en reacciones de o0idoreduccin y se las llama tambin


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des-idrogenasas. 5ransferasas transfieren grupos funcionales de un compuesto aotro. +as quinasas representan un grupo especializado que transfiere gruposfosfato. Hidrolasas rompen un enlace adicionando una molcula de agua. +iasasrompen enlaces por mecanismos distintos a la -idrlisis o la o0idacin. +asdecarbo0ilasas y aldolasas son e,emplos de liasas.(somerasas catalizan

reacciones de interconversin de ismeros.+igasas unen molculas utilizandoenerga proveniente del /5I. 5ambin se llaman sintetasas.

Esta prctica se tiene como ob,etivo la revelacin de las o0ido reductasas enmaterial biolgico. Nsamos la papa rbano y la lec-e a las dos primeras se leagrego bencidina y per0ido ya que estos tubrculos presentan la enzimapero0idasa la cual va a catalizar la reaccin de o0idacin de la bencidina adifenoquinoidiimina esta reaccin se manifest por la formacin de un comple,overde azulado. ?ebido a que la lec-e presenta la enzima alde-ido0idasa se leagrego formalde-ido esta enzima cataliza la reaccin de des-idrogenacin de

diferentes alde-dos lo cual se puede observar por la decoloracin del azul demetileno.

P OCEDIMIENTO EXPE IMENTAL

Revelacin de Aldehidoxidasa en la Leche


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En esta primera e0periencia se utiliz dos tubos de ensayo en la cual se agreg #m+ de lec-e a cada una. /l tubo 1K$ se le agrego $m+ de agua y al segundo tuboformalde-ido seguidamente a ambos tubos se le aadi $m+ de azul de metileno.


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Revelacin de la Peroxidasa en la Papa y el Rbano

En dos tubos de ensayo agregamosen el primero $m + de ,ugo de papa y en elsegundo e0tracto de rbano ./ ambos tubos aadimos # gotas de la solucinalco-lica de bencidina y una gota de per0ido de -idrogeno.

Bigura 17$


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- Pepas de sandia

/gregamos en un tubo de ensayo unas cuantas pepitas de sanda un poco deagua destilada y urea se agit bien con la bagueta y seguido se agreg un par de

gotitas de fenoltalena en la cual se pudo observar el cambio de coloracin arosadoy esto nos indica que la enzima presente es la ureasa.

- Pimentn

En tres tubos de ensayo colocamos trocitos pequeos de pimentn

Tubo N 1Tubo N 2


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CONCLUSIONES


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BIBLIOGRAFA

Bioqumica Mdica, John W. Baynes y Marek H. Dominiczak, Editorial

Elservier, 2da Edicin, pg. 54-56.


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