Lab. 3: BACTERIASLab. 3: BACTERIAS

BIOL 3052

Instructora: MILENA BENAVIDES-SERRATO

Entender la clasificación de las bacterias y las características usadas para colocarlas en reinos y dominios.

Describir las estructuras de las bacterias. Practicar técnicas de cultivos de bacterias.

OBJETIVOSOBJETIVOS

Sistema de Cinco Sistema de Cinco ReinosReinos

Robert Whittaker (1969) Procariotas: célula con ADN libre en el

citoplasma, no hay núcleo celular diferenciado. Reino Monera

Eucariotas: célula con ADN confinado a un núcleo celular diferenciado.

Protista Fungi Plantae Animalia

Sistema de tres dominiosSistema de tres dominios

Aceptado después de 1970 Procariota

Bacterias Archaea

Eucariota Eukarya

PROCARIOTAPROCARIOTA

Archaea

Bacteria

•Composición diferente en el ARNr.

•Las Archeas, tienen lípidos peculiares y diferentes en la composición de su membrana.

•Los procariotas viven en grandes extensiones, y en cualquier lugar: sitios fríos, cálidos, alcalinos o ácidos.

•Pueden realizar el proceso de la fotosíntesis, aunque la mayoría son organismos heterótrofos, absorbiendo nutrientes del ambiente que los rodea.

BACTERIASBACTERIAS

• Las bacterias son relativamente pequeñas, pero tienen un enorme impacto en nuestro mundo, ya que algunas son causantes de enfermedades graves.

• Las bacterias son benéficas y nos pueden ofrecer muchos beneficios tales como la Descomposición y biorremediación, síntesis de vitaminas y antibióticos, industria de alimentos (Yogurt), equilibrio ecológico,fijación de nitrógeno, flora natural del cuerpo entre otros.

BACTERIAS: CaracterísticasBACTERIAS: Características

Procariotas. Unicelulares. Carecen de organelos rodeados por

membranas. Pared celular de peptidoglucano. DNA en forma de anillos – plásmidos. No tienen cromosomas.

BACTERIAS: CaracterísticasBACTERIAS: Características

Reproducen por fisión binaria (duplicación: dar origen a dos células o más).

Presentan estructuras especializadas

Pili (Intercambio de material genético)

Flagelos (Movimiento)

Cápsulas (Protección del medio ambiente)

BACTERIAS: CaracterísticasBACTERIAS: Características

Autótrofas (prod. su propio alimento) Fotosintéticas o quimiosintéticas

Heterotrofas Absorben nutrientes del ambiente

Hábitat Suelo, aire, cuerpos de agua Condiciones normales o extremas

MORFOLOGÍAMORFOLOGÍA

A. Forma de caña (Bacilos).

B. Redondos, en líneas (Estreptococos*).

C. Redondos, en cúmulos (Estafilococos*).

D. Redondos, en pares (Diplococos*).

E. En forma de espirales (Espirilos).

F. En forma de coma (Vibrios).

*Todos son la forma de cocos

ALGUNAS ESPECIESALGUNAS ESPECIES

IDENTIFICACIÓN DE IDENTIFICACIÓN DE BACTERIASBACTERIAS

•Tinción Gram: Las bacterias reaccionan por las pruebas de:

Gram +

Gram –

Gram Variable

• La respuesta de las células a la tinción se debe a diferencias en la complejidad y química de su pared celular, la cual contiene un polímetro llamado Peptidoglicano.

• La pared celular de las bacterias Gram – , contienen menor cantidad de peptidoglicano comparado con las bacterias Gram +.

EJERCICIO 1: EJERCICIO 1: Morfología de Morfología de coloniascolonias

•Lea en su material técnicas de asepsia (recordar para el examen y quiz de la semana entrante) y póngalo en práctica durante este laboratorio.

•Lea los materiales a usar (página 323).

•Observe las colonias bacteriales de la caja de Petri por medio de un microscopio, siga la figura 13.1 (página 324); dibuje las colonias que observa.

EJERCICIO 2: EJERCICIO 2: LaminillasLaminillas

•Observe en un microscopio compuesto laminillas preparadas, utilize aceite de inmersión al 100 %.

•Describa las formas que observa: las tres básicas:

COCOSBACILOSESPIRILOS

•Observa alguna otra forma? Cual?

EJERCICIO 3: EJERCICIO 3: Identificando Identificando bacterias por Tinción Grambacterias por Tinción Gram

Obtener y observar células bacterianas presentes en la boca

Procedimiento: Preparar laminilla con UNA gota de

agua. Frotar el interior de la boca con un

palillo de madera. Esparcir por la laminilla. Sujetar la laminilla y secar en

mechero.

EJERCICIO 3: EJERCICIO 3: Identificando Identificando bacterias por Tinción Grambacterias por Tinción Gram

Teñir con 3-4 gotas de cristal violeta.

Esperar 1 minuto. Lavar con agua. Secar suavemente. Observar bajo el microscopio

(utilizar aceite de inmersión al 100%).

Dibujar.

EJERCICIO 4: EJERCICIO 4: Bacterias Bacterias ambientalesambientales

Tomar placa con agar

a. Exposición al ambienteb. Muestreo de superficiesc. Muestreo de agua

Hacer estriado en placa. Sellar la placa con parafina. Rotular. Incubar 48 hrs (Incubadora

25ºC). Anotar observaciones y dibujar.

Control de crecimiento bacteriano

Importancia: Bacterias crecen en una variedad de

ambientes Crecimiento descontrolado o en exceso

puede causar daños ambientales o enfermedades.

Agentes de control bacteriano: Antibióticos Antisépticos desinfectantes

Antibióticos Químico producido por una bacteria u

hongo que puede controlar el crecimiento de otra bacteria u hongo.

Antiséptico Controla crecimiento bacteriano en

tejidos vivos. Desinfectantes

Controla el crecimiento bacteriano en objetos inanimados.

** los antisépticos y desinfectantes no matan todas la bacterias como ocurre en esterilización.

** reducen el número de bacterias en la superficie.

EJERCICIO 5: EJERCICIO 5: Controlando el Controlando el crecimiento de bacteriascrecimiento de bacterias

Dividir el plato petri en cuatro cuadrantes.

Marcar cada cuadrante: control, antiséptico, antibiótico y desinfectante.

Sumergir el isopo estéril en el caldo de bacterias (ojo! Asepsia).

Estriar en plato.

EJERCICIO 5: EJERCICIO 5: Controlando el Controlando el crecimiento de bacteriascrecimiento de bacterias

En cada cuadrante rotulado colocar:

1. Disco estéril (grupo control).

2. Disco con antibiótico.3-4. Disco con desinfectante

y antiséptico.

Sellar con parafina. Incubar 48 hrs (37ºC) Observar resultados.

1 2

3 4

EJERCICIO 5: EJERCICIO 5: Controlando el Controlando el crecimiento de bacteriascrecimiento de bacterias

Observar inhibición de crecimiento.

Medir halo de inhibición en mm.

Halo de inhibición – área alrededor del disco donde el crecimiento bacteriano ha sido inhibido.

Anotar resultados (Lab 4) y traerlos al próximo laboratorio (Lab 5)

INDIVIDUAL

PARA LA PRÓXIMA PARA LA PRÓXIMA SEMANASEMANA•Traer bata.

•Quiz del laboratorio de Bacterias.•Se observarán los resultados del laboratorio de bacterias.•Informe: Control de crecimiento bacteriano: INDIVIDUAL.

Portada y título.Introducción (1 página).Materiales y Métodos (en forma detallada y debe iren pasado.Resultados.Discución.Conclusiones.Revisión de literatura.