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INTERNATIONAL CONGRESS Jornadas Técnicas Resistencias de Malas Hierbas a herbicidas en los cultivos de Olivo, Cereales, Cítricos y Arroz Feria Valencia, 2 de octubre de 2014 Los mecanismos de resistencia de las malas hierbas a los herbicidas Implicaciones para el manejo de las resistencias Mercedes Royuela Dpto. Ciencias del Medio Natural Universidad Pública de Navarra

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Page 1: INTERNATIONAL CONGRESS Jornadas Técnicas Resistencias de Malas Hierbas a herbicidas en los cultivos de Olivo, Cereales, Cítricos y Arroz Feria Valencia,

INTERNATIONAL CONGRESSJornadas Técnicas

Resistencias de Malas Hierbas a herbicidas en los cultivos de Olivo,

Cereales, Cítricos y ArrozFeria Valencia, 2 de octubre de 2014

Los mecanismos de resistencia de las malas hierbas a los herbicidas

Implicaciones para el manejo de las resistencias

Mercedes RoyuelaDpto. Ciencias del Medio NaturalUniversidad Pública de Navarra

Page 2: INTERNATIONAL CONGRESS Jornadas Técnicas Resistencias de Malas Hierbas a herbicidas en los cultivos de Olivo, Cereales, Cítricos y Arroz Feria Valencia,

Los mecanismos de resistencia de las malas hierbas a los herbicidas

Implicaciones para el manejo de las resistencias

La resistencia a herbicidas es la capacidad evolutiva de una población de malezas para sobrevivir a la aplicación de un herbicida que se sabe que previamente la controlaba.

Año 1 Año 2 Años posteriores

El número de individuos resistentes al herbicida en la población cambia con el tiempo.

La tolerancia a herbicidas es la capacidad inherente de una especie para sobrevivir y reproducirse después de un tratamiento herbicida. No ha existido una selección actuando sobre la especie de maleza tolerante y no hay cambios en la falta de respuesta de la especie de maleza al herbicida a través del tiempo.

Año 1 Año 2 Años posteriores

El número de individuos tolerantes al herbicida no es afectado directamente por el herbicida.

Cambio en la respuesta de la pb con el tiempo:

SI, en resistencias, sólamente algunos individuos eran tolerantes

NO, en tolerancias, la población siempre ha sido tolerante al

herbicida.

El mecanismos fisiológico para tolerar o resistir es similar

no hay nuevos inventos (en herb totales?)

-en RESIS sólo algunos individuos tenían la capacidad

-en TOLER la capacidad es característica de la especie

Page 3: INTERNATIONAL CONGRESS Jornadas Técnicas Resistencias de Malas Hierbas a herbicidas en los cultivos de Olivo, Cereales, Cítricos y Arroz Feria Valencia,

No basado en la dianaresistencia no

target-site

(TRANSLOCACIÓN)

ABSORCIÓN

MODODE ACCIÓN

MECANISMODE ACCIÓN

Muerte de la planta

ACCIÓN HERBICIDA

Aplicación herbicida

Los mecanismos de resistencia de las malas hierbas a los herbicidas

sH

sustratoenzima

producto

H

HH

H

HH

H

H

Casos de Resistencia / Tolerancia

H

H HHH

HH

HH

Basado en la dianaresistencia target-site

Supervivencia de la planta

ABSORCIÓN

Aplicación herbicida

TRANSLOCACIÓN

MODO

DE ACCIÓN

MECANISMODE ACCIÓN

SELECTIVIDAD FISIOLÓGICA

basada en las propiedades de

algunas plantas de impedir que el

herbicida actúe como tal una vez absorbido

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No basado en la dianaresistencia no target-site

Absoción reducida

Translocación reducida

Alta tasa de degradación del herbicida

Secuestro del herbicida

Basado en la dianaresistencia target-site

Diana insensible

Mecanismos de Resistencia

Sobreexpresión de la diana

Page 5: INTERNATIONAL CONGRESS Jornadas Técnicas Resistencias de Malas Hierbas a herbicidas en los cultivos de Olivo, Cereales, Cítricos y Arroz Feria Valencia,

Basado en la dianaresistencia target-site

Diana insensible

enzima diana

ss

s

s

s

s

+

enzima diana

no sensible

ss

s

s

+s

H

HHH H

H

H

p

enzima diana

no sensible

enzima diana

enzima diana

H

HH

enzima diana

no sensible

Mecanismos de Resistencia

s

penzima+

ss

s

senzima enzima

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Basado en la dianaresistencia target-site

Diana insensible

enzima diana

enzima diana

no sensible

Mecanismos de Resistencia

H

H

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H

enzima diana sensible

gen

H: herbicidaS: sustratoS: sustrato H: herbicida

Page 8: INTERNATIONAL CONGRESS Jornadas Técnicas Resistencias de Malas Hierbas a herbicidas en los cultivos de Olivo, Cereales, Cítricos y Arroz Feria Valencia,

H

S: sustrato

H: herbicida

enzima dianano sensible

enzima diana sensible

H: herbicida

gen

H: herbicidaS: sustratoS: sustrato H: herbicida

gen*

S: sustrato

Page 9: INTERNATIONAL CONGRESS Jornadas Técnicas Resistencias de Malas Hierbas a herbicidas en los cultivos de Olivo, Cereales, Cítricos y Arroz Feria Valencia,

H

S: sustrato

H: herbicida

enzima dianano sensible

enzima diana sensible

S: sustrato H: herbicida

gen

H: herbicidaS: sustratoS: sustrato H: herbicida

“modificación”

-proteína muy homogénea en todos los organismos del reino (plantas), no existe la modificación

-mutación que se genera tras muchos ciclos reproductivos-puntualmente está en algunos individuos.-característico de la especie-característico de la clase: mono, dico.

frecuencia de la "modificación"-

+

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S: sustrato H: herbicida

S: sustrato H: herbicida

Basado en la diana

Diana insensible

Mecanismos de Resistencia

enzima diana

enzima diana

no sensible

H

H

Características del herbicida-muy eficaz - muy persistente

Caracterísicas de la mutación (frec. de la mutación)-un único gen-dominante/recesiva-herencia citoplásmica-relación con el lugar activo

evolución de la resistencia

coste fisiológico de la mutación

Es el mecanismo de resistencia más frecuente en malas hierbas

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inhibidores PSII a triazinas

inhibidores de ALS

inhibidores ACCasa

glifosato: mutaciones EPSPS Pro-106

inhibidores de proto-porfirinógena IX oxidasa

S: sustrato H: herbicida

S: sustrato H: herbicida

Basado en la diana

Diana insensible

Mecanismos de Resistencia

enzima diana

enzima diana

no sensible

H

H

Es el mecanismo de resistencia mas frecuente en malas hierbas

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Inhibición competitiva por el sustrato (PQ). Una mutación de resistencia única ha evolucionado de forma independiente a nivel mundial. Una mutación puntual en el gen cloroplástico psbA (herencia materna) codifica la proteína D1: sustitución de aminoácido Ser-264-Gly en el sitio de unión PQ. Con algunas excepciones prácticamente todas las especies de malezas resistentes a triazinas tienen esta mutación.

Ser-264-Gly ---------- +triazinas - der.UREA

Ser-264-Thr * ------------------- +triazinas + der.UREAVal-219-Ile ------------------- - triazinas + der.UREAAsn-266-Thr * --------------- - triazinas + der.UREA Ala-251-Val ------------------- - triazinas + der.UREA Phe 255-Ile ------------------- - triazinas + der.UREA

inhibidores PSII a triazinas

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inhibidores PSII a triazinas

inhibidores de ALS

inhibidores ACCasa

glifosato: mutaciones EPSPS Pro-106

inhibidores de proto-porfirinógena IX oxidasa

S: sustrato H: herbicida

S: sustrato H: herbicida

Basado en la diana

Diana insensible

Mecanismos de Resistencia

enzima diana

enzima diana

no sensible

H

H

Es el mecanismo de resistencia mas frecuente en malas hierbas

Page 14: INTERNATIONAL CONGRESS Jornadas Técnicas Resistencias de Malas Hierbas a herbicidas en los cultivos de Olivo, Cereales, Cítricos y Arroz Feria Valencia,

-Inhibición no competitiva. El herbicida se une fuera del lugar de acción del herbicida, cerca de la unidad reguladora. En Pro-197, hay 11 sustituciones posibles . Las mutaciones Pro-197 son, con mucho, las más frecuentemente observadas .

inhibidores de ALS

Pro-197-Ser -particularmente común con respecto

a otras Pro197-es la que más probablemente

proporciona resistencia sin “coste”-requiere sólo una mutación de

nucleótidos

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inhibidores PSII a triazinas

inhibidores de ALS

inhibidores ACCasa

glifosato: mutaciones EPSPS Pro-106

inhibidores de proto-porfirinógena IX oxidasa

S: sustrato H: herbicida

S: sustrato H: herbicida

Basado en la diana

Diana insensible

Mecanismos de Resistencia

enzima diana

enzima diana

no sensible

H

H

Es el mecanismo de resistencia mas frecuente en malas hierbas

Page 16: INTERNATIONAL CONGRESS Jornadas Técnicas Resistencias de Malas Hierbas a herbicidas en los cultivos de Olivo, Cereales, Cítricos y Arroz Feria Valencia,

-No del todo conocido, parece inhibición semicompetitiva por el sustrato acetilCoA-Mucha variedad en “coste”, en resistencias a carios tipos de herb. ....

Ile 1781 leu, la más frecuente

inhibidores ACCasa Enzima ACCasa gramíneas dicotiledóneas

plastidial homomérica Multimérica (proc.)

Diana de 3 tipos de Herb

Insensible a herbicidas

FOPS DIMS fenilpirazolinas

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inhibidores PSII a triazinas

inhibidores de ALS

inhibidores ACCasa

glifosato: mutaciones EPSPS Pro-106

inhibidores de proto-porfirinógena IX oxidasa

S: sustrato H: herbicida

S: sustrato H: herbicida

Basado en la diana

Diana insensible

Mecanismos de Resistencia

enzima diana

enzima diana

no sensible

H

H

Es el mecanismo de resistencia mas frecuente en malas hierbas

Page 18: INTERNATIONAL CONGRESS Jornadas Técnicas Resistencias de Malas Hierbas a herbicidas en los cultivos de Olivo, Cereales, Cítricos y Arroz Feria Valencia,

glifosato: mutaciones EPSPS Pro-106-Ser

Inhibición competitiva por el segundo sustrato, muy difícil encontrar modificación que siga con funcionalidad

Pro-106 -región altamente conservada(muy poca resistencia)

-ser, Eleusine indica-thr, Eleusine indica-ala, Lolium

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Basado en la diana

Diana insensible

Mecanismos de Resistencia

enzima diana

enzima diana

no sensible

HH

Sobreexpresión de la diana s

s

s

s

+H

HH s

enzima

s

enzima

s

enzima

s

enzima

s

enzima

s

enzima

H

enzima diana

s

H

enzima diana p

enzimaenzima

enzimaenzima

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H

enzima diana sensible

gen

promotor

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Basado en la diana

Diana insensible

Mecanismos de Resistencia

Sobreexpresión de la diana

enzima diana

enzima diana

no sensible

H

H

Es un mecanismo de resistencia muy poco común en poblaciones de malas hierbas- Grupo G

Page 22: INTERNATIONAL CONGRESS Jornadas Técnicas Resistencias de Malas Hierbas a herbicidas en los cultivos de Olivo, Cereales, Cítricos y Arroz Feria Valencia,

Basado en la diana

Diana insensible

Mecanismos de Resistencia

Sobreexpresión de la diana

enzima diana

enzima diana

no sensible

H

H

-No incrementar la presión de selección (frecuencia de uso de herbicidas del mismo mecanismo de acción sobre las mismas poblaciones)

-especial riesgo con algunos herbicidas:-grupo de acción: A, B, C...(variabilidad natural del lugar de accción, del enzima diana)

-especial riesgo con algunas especies-Autógamas porque replican la variación intrínseca de las poblaciones-Alógamas porque la variabilidad es mucho mayor-especies con alta velocidad de reproducción 2-3 ciclos anuales

Implicaciones para el manejo

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No basado en la Dianaresistencia no target-site

Absoción reducida

Translocación reducida

Alta tasa de degradación del herbicida

Secuestro del herbicida

Basado en la Diana resistencia target-site

Diana insensible

Mecanismos de Resistencia

Sobreexpresión de la diana

Page 24: INTERNATIONAL CONGRESS Jornadas Técnicas Resistencias de Malas Hierbas a herbicidas en los cultivos de Olivo, Cereales, Cítricos y Arroz Feria Valencia,

H

HHH

H

H HH

H

Aplicación herbicida

Supervivencia de la planta

ABSORCIÓN

TRANSLOCACIÓN

MODO

DE ACCIÓN

MECANISMODE ACCIÓN

No basado en la dianaresistencia no target-site

Absoción reducida

Translocación reducida

Alta tasa de degradación del herbicida

Secuestro del herbicida

Mecanismos de Resistencia

Page 25: INTERNATIONAL CONGRESS Jornadas Técnicas Resistencias de Malas Hierbas a herbicidas en los cultivos de Olivo, Cereales, Cítricos y Arroz Feria Valencia,

Indices restringidos de translocación de herbicidas / secuestro-glifosato

-en Lolium rigidum, Conyza, Sorghum-más frecuente que la mutación EPSPS Pro-106-en Lolium aparece adicionalmente a Pro-106-mecanismo desconocido, probable transportador de membrana de la vacuola (secuestro)-tiene un coste fisiológico

- -paracuat mecanismo desconocido, probable transportador de membrana de la vacuola (secuestro)

No basado en la dianaresistencia no target-site

Absoción reducida

Translocación reducida

Alta tasa de degradación del herbicida

Secuestro del herbicida

Mecanismos de Resistencia

Page 26: INTERNATIONAL CONGRESS Jornadas Técnicas Resistencias de Malas Hierbas a herbicidas en los cultivos de Olivo, Cereales, Cítricos y Arroz Feria Valencia,

Citocromo P450 (P450 monooxigenasas)-hay más de 2000 secuencias distintas de P450 monoox., no del

todo conocidas sus funciones fisiológicas.-En los casos de resistencias hay mayor actividad de algunas

P450 modificadas, sin conocer específicamente.-muchas veces seguido de conjugación y secuestro del producto -No es específico de un grupo de herbicidas, hay herbicidas de

diferente mecanismo de acción que son metabolizables por estos enzimas ----> hay casos de resistencia cruzada a distintos tipos de herbicidas

Glutation S-transferasa-Enzimas multifuncionales que catalizan conjugación con glutation. Posteriormente puede darse secuestro vacuolar o exudado radical-Las resistentes presentan GST mutantes más eficaces , más activos (no más expresados), con mejor unión al herbicida.-A veces va unido citocromo P450-Abutilon (atrazinas), Echinochloa (fenoxaprop)

Absoción reducida

Translocación reducida

Alta tasa de degradación del herbicida

Secuestro del herbicida

Mecanismos de Resistencia

En tolerancias, es muy habitual como mecanismo en cultivos:-Atrazinas (Maíz) -Inhibidores ALS (casi todos los cultivos)

No basado en la dianaresistencia no target-site

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En general poligénicos,Muy poco conocidos,No responden a grupos de mecanismo de acción

No basado en la dianaresistencia no target-site

Absoción reducida

Translocación reducida

Alta tasa de degradación del herbicida

Secuestro del herbicida

Mecanismos de Resistencia

Page 28: INTERNATIONAL CONGRESS Jornadas Técnicas Resistencias de Malas Hierbas a herbicidas en los cultivos de Olivo, Cereales, Cítricos y Arroz Feria Valencia,

No basado en la diana

Absoción reducida

Translocación reducida

Alta tasa de degradación del herbicida

Secuestro del herbicida

Basado en la diana

Diana insensible

Mecanismos de Resistencia

Sobreexpresión de la diana

Manejo-Evitar Presión de selección sobre los grupos

de acción herbicida (A, B…) rotar herbicidas de distintos grupos

-Dejar de aplicar el grupo de herbicidas al que hay resistencia

-Atención a la pareja: especie con poblaciones resitentes/herbicida, de la bibliografía

-Cuidado sobre todo con las dosis subletales.

-Falta conocimiento

enzima diana

enzima diana

no sensible

HH