instrucciones de recogida y envío de muestras a los laboratorios de

GOBIERNO DE EXTREMADURA

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Consejería de Agricultura, Desarrollo Rural, Medio Ambiente y Energía Dirección General de Agricultura y Ganadería

Servicio de Sanidad Animal

INSTRUCCIONES PARA LA RECOGIDA DE MUESTRAS Y ENVÍO A LABORATORIOS DE

SANIDAD ANIMAL

Rev. 2

Fecha: 6/09/2011

LABORATORIOS DE SANIDAD ANIMAL DE EXTREMADURA


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ÍNDICE 1. OBJETO 2. ALCANCE 3. REFERENCIAS 4. GENERALIDADES 5. REALIZACIÓN SEGÚN TIPO DE MUESTRAS 5.1. Sueros Sanguíneos y Sangre Entera. 5.2. Heces. Análisis Parasitológicos. 5.3. Culicoides. 5.4. Pelos, Costras y Raspados Cutáneos. 5.5. Esperma para Análisis de Tricomonas. 5.6. Muestras (ganglios) para cultivo microbiológico. 5.7. Muestras para análisis de PNIR. 5.8. Muestras para análisis Toxicológicos. 5.9. Piensos para el Análisis de Proteinas Animales Elaboradas (Plan de Vigilancia de las EETs) 5.10. Pienso, cereales, leche o subproductos para alimentación animal para análisis físico- químicos. 5.11. Muestras para el análisis de Encefalopatías Espongiformes Transmisibles. 5.12. Muestras para el Programa Nacional de Vigilancia y Control de Salmonella en explotaciones avícolas. 5.13. Muestras para el Programa Regional de Vigilancia Sanitaria permanente de la Enfermedad de Newcastle, la Influenza aviar y la Salmonelosis. 5.14. Muestras para el Programa de Vigilancia de la Influenza Aviar en España 5.15. Otras muestras. 6. ANEXOS Anexo 1: Modelo de Hoja de envío de muestras. Programas Nacionales de

Erradicación y Vigilancia de Enfermedades Animales. Anexo 2: Modelos Solicitud de análisis de Patología Porcina a.-Hoja de reproductores.

b.- Hoja de animales de cebo. Anexo 3: Modelo de Hoja de Envío de Muestras Cinegéticas. Estudio de Prevalencia en Fauna Silvestre. Anexo 4: Envío de Muestras al Laboratorio para diagnóstico de Enfermedades No sujetas a Programas Oficiales de Control y Erradicación. CENSYRA Anexo 5: Modelo de Hoja de Envío de muestras. Programa Entomológico de Vigilancia de la Lengua Azul. Anexo 6: Hoja de envío para análisis parasitológicos Anexo 7: Toma de muestras cultivo microbiológico Anexo 8: Modelo de Acta de Toma de muestras del Servicio de SanidadAnimal. Anexo 9: Solicitud de Análisis de Toxicología Anexo 10: Modelos de Hoja de Toma de muestras:

a.- Programa de Vigilancia de la EEB b.- EET en Ganado Ovino y Caprino.

Anexo 11: Modelos de Hoja de Toma de muestras y envío al Laboratorio. Programa Nacional de Vigilancia y Control de Salmonella.

a.- Explotaciones Avícolas de Puesta b-. Explotaciones Avícolas de Carne Anexo 12: Hoja de Toma de muestras y envío al Laboratorio. Programa

Regional de Vigilancia y Control en aves cinegéticas y silvestres. Anexo13: Hoja de Toma de muestras y envío al Laboratorio. Programa de Vigilancia de la Influenza Aviar en España Anexo 14: Hoja de Toma de muestras y envío al Laboratorio. Aves silvestres. Programa de Vigilancia de la Influenza Aviar en España Anexo 15: Hoja de envío de muestras (Para otras solicitudes de análisis no recogidas en los puntos anteriores)


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1.- OBJETO El objeto de estas instrucciones es establecer condiciones para la recogida y el envío de muestras a los Laboratorios de Sanidad Animal de Extremadura.

2.- ALCANCE Se aplicará a todas las muestras que lleguen a los Laboratorios de Sanidad Animal de Badajoz, Zafra y Cáceres y de acuerdo a los Catálogos de Servicios de cada laboratorio. 3. REFERENCIAS 1.- Programas Nacionales de erradicación de enfermedades http://rasve.mapa.es/Publica/Programas/Normativa.asp 2.- Programa Regional de Vigilancia Sanitaria permanente aves cinegéticas y silvestres y otras Instrucciones del Servicio de Sanidad Animal: Portal de Sanidad Animal. http://libre1/sanidad_animal/novedades.php?modulo=lear 4. GENERALIDADES Las muestras se remitirán siempre PERFECTAMENTE ENVASADAS, IDENTIFICADAS Y EMBALADAS. Se recomienda envolver los envases en papel absorbente o si se trata de tubos colocarlos en gradillas de poliestireno y sus cajas e identificarlas, introducirlos en una bolsa de plástico y colocar ésta en una caja hermética, que garantice la seguridad del personal transportista y receptor. Las hojas de envío o solicitud de análisis deberán venir debidamente cumplimentadas, evitando en todo momento su contacto directo con las muestras. Se enviarán las muestras siempre junto con su documentación. LAS MUESTRAS SE ENVIARAN LO MÁS RÁPIDAMENTE POSIBLE AL LABORATORIO En caso de necesitar condiciones de refrigeración se recomienda el uso de acumuladores de frío. El laboratorio evaluará el estado de las muestras determinando si son aptas o no para realizar los análisis solicitados. Ante cualquier duda contactar previamente con el la boratorio.

Laboratorio Regional de Sanidad y Producción Animal de BADAJOZ Camino Sta. Engracia s/n 06007/ BADAJOZ Tfno: 924/012240 Fax: 924/012242

Laboratorio de Sanidad Animal de CACERES C/Arroyo Valhondo nº 2 10800/ CACERES Tfno: 927006428 Fax: 927/006430

Laboratorio de Sanidad Animal de ZAFRA C/ Extremadura s/n 06300 Zafra (Badajoz) Tfno: 924175813 Fax: 924175824

HORARIO DE RECEPCIÓN DE MUESTRAS

EN LOS LABORATORIOS: LUNES a VIERNES de 8.30 A 14.30H


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5. REALIZACIÓN SEGÚN TIPO DE MUESTRAS 5.1. Sueros Sanguíneos y Sangre Entera Las muestras se remitirán en los tubos específicos (Ver cuadro) bien identificados, en gradillas de poliespán, manteniéndolas en posición vertical.

Cuando se requiera la remisión de muestra de sueros, el tubo lleno de sangre, se dejará en reposo a temperatura ambiente hasta la retracción del coágulo.

En el caso de sangre recogida en tubo con anticoagulante, se volteará el tubo varias veces para facilitar la mezcla y cuidadosamente para evitar la rotura de los glóbulos rojos. Tabla 1.- Indicaciones de uso de los tubos

Color tapón Anticoagulante Solicitud de Análisis Documentación de acompañamiento

Brucelosis bovina, ovina caprina, Clamidiasis, Salmonellosis

Perineumonía, Paratuberculosis

ANEXO 1 (*)

Leucosis, IBR, BVD, Maedi-Visna Brucelosis porcina, Enf. de Aujeszky, EVP, PPC, PPA, PRRS

ANEXO 1 ANEXO 2 (a y b) (*)

Leishmaniosis Toxoplasmosis

ANEXO 6

Rojo

Ninguno

PNIR (A5) ANEXO 8 Y/ O ANEXO 9

Lengua Azul IBR BVD Enfermedad de la Frontera

ANEXO 1 (*) Violeta

EDTA

Piroplasmosis Filariosis

ANEXO 6

Verde

Heparina Tuberculosis γ-interferón (**) ANEXO 1

(*) Para estas determinaciones, se cumplimenta:

- ANEXO 3 en caso de muestras cinegéticas.

- ANEXO 4 en el caso de Muestras para diagnóstico de Enfermedades No sujetas a Programas Oficiales de Control y Erradicación del C ENSYRA.

(**) No requiere refrigeración. Debe llegar al laboratorio antes de 8 h tras su ext racción


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Sangre adecuada para análisis : Ausencia de coágulos y sin signos de putrefacción Sueros adecuados para análisis: No hemolíticos y No contaminados . Suero no hemolítico: color ámbar, amarillo o rosado. Suero no contaminado: limpio traslucido y sin turbidez. Conservación y Transporte: Se recomienda no refrigerar inmediatamente la sangre tras su extracción, para permitir la formación del coágulo. La Temperatura de almacenamiento hasta remisión al laboratorio será Refrigeración. El transporte podrá realizarse a Temperatura ambiente, aunque deberá ser en refrigeración en días de calor. El tiempo máximo desde la toma de muestras hasta la recepción en el laboratorio será de 72 h, excepto en muestras de Campaña de Saneamiento Ganadero de ganado bovino, ovino y caprino, que como máximo podrá ser de 7 días, siempre que se conserven adecuadamente.

Identificación:

• Las muestras de sangre/ suero de rumiantes se remitirán ordenadas en gradillas de poliespan. Estas gradillas se identifican de forma indeleble en las solapas de las cajas, con el código correspondiente que consta de tres partes:

a) Código de identificación del veterinario, que es constante b) Fecha de toma de muestras (día y mes). c) Letra identificativa (de la A a la Z) de cada gradilla utilizada en ese

día. Los tubos deberán numerarse del 1 al 50. • Los sueros de porcino se identificarán individualme nte con el número de

crotal del animal y se remitirán ordenados en gradillas de poliespan identificadas con nombre del Veterinario o sus iniciales y la fecha de la extracción y en caso de varias gradillas en el mismo envío indicar orden.

• Las muestras de sangre para análisis parasitológicos se identificarán individualmente y se remitirán ordenadas en gradillas de poliespan.

• Las muestras de sangre remitidas para análisis de Tuberculosis (Gamma interferón) se enviarán ordenadas en gradillas con un máximo de 30 tubos por gradilla. Las gradillas se identificarán con el código del veterinario, la fecha (día y mes) y letra.

Documentación de acompañamiento : Dependiendo del motivo de análisis de las muestras, ver Anexos en Tabla 1 . 5.2. Heces para Análisis Parasitológicos: Las heces deben ser frescas, preferentemente se recogerán directamente del recto. Deben llegar en recipientes de plástico estériles, herméticamente cerrados, limpios e identificados. Se necesitan al menos 50 g de heces.

Documentación de acompañamiento: Anexo 6


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5.3. Culicoides. Programa Entomológico de Vigilanci a de la Lengua Azul.

Deberán venir en anaclines con alcohol de 70º adicionados de anticongelante. Serán identificados con lápiz.

Documentación de acompañamiento: Anexo 5 . 5.4. Pelos, costras y raspados cutáneos. Análisis p arasitológicos

El material recogido, incluida la cuchilla de raspado, se manda al laboratorio en anaclines herméticamente cerrados e identificados. La cantidad de raspado debe ser suficiente.

Documentación de acompañamiento: Anexo 6

5.5. Esperma prepucial para el diagnóstico de Trichomonas foetus Se realiza un lavado prepucial que se transportará en fresco (sin refrigerar). La muestra se enviará al laboratorio el mismo día de su recogida. Para determinar la cantidad de muestra contactar con el laboratorio. Documentación de acompañamiento: Anexo 6 5.6. Muestras (ganglios) para cultivo microbiológic o. La toma de muestras se refiere tanto a los ganglios de bovinos positivos que se toman en matadero como a los ganglios de pequeños rumiantes positivos que se toman en campo. Se enviarán los ganglios al laboratorio que corresponda al día siguiente de la toma de muestras, del siguiente modo:

• Los ganglios que tomemos en las comarcas de la provincia de Badajoz (vacuno en matadero/ ovino-caprino en campo) se enviarán al laboratorio de Badajoz , refrigerados desde la toma de muestras hasta su llegada a dicho laboratorio.

• Los ganglios que tomemos en las comarcas de la provincia de Cáceres (vacuno en matadero/ ovino-caprino en campo) se enviarán al laboratorio de Cáceres , refrigerados desde la toma de muestras hasta su llegada a dicho laboratorio, excepto los ganglios del matadero de Coria que se congelarán el mismo día tomarlos (viernes) y se enviarán el lunes congelados al citado laboratorio.


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Requisitos para la toma de ganglios:

• Se utilizarán recipientes de plástico estériles (anaclines), herméticamente cerrados, limpios e identificados. (Para aquellos ganglios que no se pueden introducir en anaclines pequeños, se usarán botes de 1/2 L.)

• Los ganglios deben ir limpios, sin órganos anexos. • No llenar los recipientes en exceso. • Cerciorarse del cierre correcto del recipiente que contiene la muestra. • Usar rotulador indeleble para identificar la muestra. • Introducir los anaclines en una bolsa de plástico. • La hoja de toma de muestras tiene que ir en el exterior del paquete que

contiene la muestra.

Para el envío al laboratorio de las muestras (anaclines dentro de bolsas), se utilizarán "Cajas de Poliespán" donde se introducirán dichas muestras junto con acumuladores de frío en cantidad suficiente para mantenerlos refrigerados o congelados durante el transporte. Los acumuladores de frío deberán estar congelados en el momento del envío.

Las Cajas de Poliespán irán identificadas externamente con pegatinas que indiquen la dirección del Laboratorio al que se envían (Cáceres o Badajoz) y el estado de conservación en el que se envían los ganglios (Refrigeración o Congelación). Si por algún motivo excepcional no se pudieran enviar los ganglios al día siguiente de haberse tomado entonces se congelarían y se enviarían lo antes posible. Documentación de acompañamiento: Anexo 7 "Hoja de toma de muestras para cultivo microbiológico"

5. 7. Muestras para Programa Nacional de Investigac ión de Residuos (PNIR) Se realizará la recogida y envío según el Plan Nacional de Investigación de residuos en explotaciones Ganaderas de la CCAA de Extremadura establecido para el año en curso. Documentación de acompañamiento: Anexo 8 y /o Anexo 9. 5.8. Muestras para análisis Toxicológicos. Documentación de acompañamiento: Anexo 9. 5.9. Muestras de PIENSO para determinación de Prote ínas animales elaboradas . Se realizará la recogida y envío según documento del Servicio de Sanidad Animal “Harinas de Carne y Hueso - Instrucciones para la toma de muestras” establecido para el año en curso. Documentación de acompañamiento: Anexo 8 “Acta oficial de toma de muestra”


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5.10. Pienso, cereales, leche o subproductos para a limentación animal mediante análisis físico- químicos :

Las muestras de pienso, ensilado, mezclas, concentrado, etc. se recogerán con guantes desechables y se introducirán en recipientes estériles (bolsas o anaclines). La cantidad mínima para el análisis será de 300 g/ determinación. Las muestras se enviarán a temperatura ambiente salvo en el caso de que hayan pasado más de 48 horas desde su recogida. En ese caso, se mantendrán y enviaran refrigeradas al laboratorio.

En el caso de muestra de leche se remitirá en anaclín estéril. La cantidad mínima será de 300ml. La muestra debe proceder de un ordeño reciente y remitirse refrigerada.

Documentación de acompañamiento: Anexo 8 o bien Anexo 15. 5.11. Muestras para análisis de Encefalopatías Espo ngiformes Transmisibles

La toma de muestras se realizará por personal formado específicamente para ello y de acuerdo al RD 3454/2000 y revisión en vigor del Programa Nacional. Toma de muestras en bovino : Tronco encefálico completo. Toma de muestras en ovino y caprino : Tronco encefálico completo, incluyendo el cerebelo.

Las muestras se remitirán en condiciones de refrigeración al Laboratorio por un sistema que garantice su llegada en un plazo máximo de 24-48 horas desde la toma, colocadas en cajas ó en neveras estancas. Para conseguir condiciones de refrigeración se recomienda el uso de acumuladores de frío. Deben remitirse en envases individuales herméticos e irrompibles (anaclin), limpios, bien cerrados y en posición vertical para evitar posibles derrames; perfectamente identificados y acompañados de la/ s hoja/ s de toma de muestras debidamente cumplimentadas. La identificación de las muestras se hará con una etiqueta adherida en el cuerpo del envase, en la que deberán figurar:

• Especie: Bov, Ov, Cap. • Fecha de la toma. • Identificación del animal: Nº de crotal completo.

En el caso de ovino/ caprino se identicará igual que en bovino, con Nº de crotal completo. En caso de no disponer de este se pondrá el Nº de Registro de Explotación ligado a un número correlativo asignado a los animales de ese día.

Documentación de acompañamiento: Anexo 10 (a y b)


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5.12. Muestras para el Programa Nacional de Vigilan cia y Control de Salmonella

en Explotaciones Avícolas.

Las muestras remitidas al laboratorio serán tomadas por Veterinarios oficiales adscritos al Servicio de Sanidad Animal, dando cumplimiento fiel a lo que el Programa de Vigilancia correspondiente requiera para el análisis solicitado. REFERENCIAS:

Programas Nacionales de Vigilancia y Control de Salmonella en vigor para Broilers, Ponedoras, Reproductoras y Pavos. EMBALAJE: El embalaje de las muestras consistirá en el envase conteniendo las heces o calzas (embalaje primario), un embalaje secundario consistente en una bolsa que contiene los embalajes primarios y el embalaje exterior: caja isoterma o similar con acumuladores de frío. La documentación irá en el exterior del embalaje que contiene las muestras. PLAZOS Los plazos a cumplir tanto para la llegada al Laboratorio de la muestra tomada como para el inicio del análisis de la misma vendrán dados en el Programa en vigor que afecte a la explotación estudiada. RECHAZO: El laboratorio rechazará las muestras que no cumplan las condiciones que a continuación se detallan:

- Carecer de correcta identificación. - Utilizar envases distintos a los detallados al efecto. - Cumplimentar la hoja de toma de muestras y envío al laboratorio. - No mantener las condiciones de refrigeración desde la toma de muestras hasta

su llegada al laboratorio. - Presentar alguna incidencia adicional que pudiera indicar la no conformidad de

la muestra para la realización del ensayo (roturas, derrame o materia orgánica en el exterior del envase).

Documentación de acompañamiento: Anexo 11 (ay b)

5.13. Muestras para el Programa Regional de Vigilan cia Sanitaria permanente

de la Enfermedad de Newcastle, la Influenza aviar y la Salmonelosis Documentación de acompañamiento: Anexo 12

5.14. Muestras para el Programa de Vigilancia de la Influenza Aviar en España Documentación de acompañamiento: Anexo 13 o Anexo 14 5.15. Otras muestras. Documentación de acompañamiento: Anexo 15


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6. ANEXOS. Anexo1: Modelo de Hoja de envío de muestras. Progra mas Nacionales de Erradicación y Vigilancia de Enfermedades Animales.

Anexo 2: Modelos Solicitud de análisis de Patología Porcina a) Hoja de reproductores b) Hoja de animales de cebo


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Anexo 3: Modelo de Hoja de Envío de Muestras Cinegé ticas. Estudio de Prevalencia en Fauna Silvestre.

Anexo 4: Envío de Muestras al Laboratorio para diag nóstico de Enfermedades No sujetas a Programas Oficiales de Control y Errad icación. CENSYRA


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Anexo 5: Modelo de Hoja de Envío de muestras. Progr ama Entomológico de Vigilancia de la Lengua Azul.

Anexo 6: Hoja de envío para análisis parasitológico s.


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Anexo 7 : Toma de muestras cultivo microbiológico

Anexo 8: Modelo de Acta de Toma de muestras del Ser vicio de Sanidad Animal.


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Anexo 9: Solicitud de Análisis de Toxicología

Anexo 10: a.- Hoja de Toma de muestras: b.- Hoja de Toma de muestras: Programa Programa de Vigilancia de la EEB. de Vigilanc ia de la EET en Ovino y Caprino


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Anexo 11: a.- Hoja de Toma de muestras y envío al Laboratorio . Programa Nacional de Vigilancia y Control de Salmonella en Explotaciones Avícolas de Puesta.

b.- Hoja de Toma de muestras y envío al Laboratorio . Programa Nacional de Vigilancia y Control de Salmonella en Explotaciones Avícolas de Carne.


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Anexo 12.- Hoja de Toma de muestras y envío al Lab oratorio. Programa Regional de Vigilancia y Control en aves c inegéticas y silvestres.

Anexo 13: Hoja de Toma de muestras y envío al Labor atorio. Programa de Vigilancia de la Influenza Aviar en España


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Anexo 14: Hoja de Toma de muestras y envío al Labor atorio. Aves silvestres. Programa de Vigilancia de la Influenza Aviar en Esp aña

Anexo 15: Hoja de envío de muestras al Laboratorio

instrucciones de recogida y envío de muestras a los laboratorios de

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