informes 4

VI. ANEXOS

ANEXO N 1

TEMA:

DETERMINACIN DE LA ACIDEZ DEL VINAGRE

FUNDAMENTO: El vinagre o vinagre de vino es un producto obtenido de compuestos amilceos mediante una fermentacin durante la cual, por la influencia de agentes microscpicos: Mycoderma aceti, Bacteriun oxidan, el alcohol etlico a cido actico.Presenta una acidez total expresada como cido actico, (CH3COOH).

La determinacin se fundamenta en la neutralizacin del cido actico mediante la adicin de una base fuerte. La localizacin del punto final con un indicador cido-base. El mtodo permite que el hidrxido de sodio reaccione con el cido actico del vinagre segn la siguiente reaccin cido-base: CH3-COOH + NaOH CH3COONa + H2O

OBJETIVO: Determinar la concentracin de cido actico en una muestra de vinagre a travs de una titulacin volumtrica cido-base para conocer su grado de acidez.

MATERIALES Y REACTIVOS

Bureta de 25 ml Pipeta Graduada de 10 ml Pipeta Volumtrica de 10 ml Erlenmeyer de 250 ml Probeta de 50 ml Agitador de Vidrio Vinagre Comercial o Vino Blanco Solucin de Hidrxido De Sodio (NaOH) 01 NPROCEDIMIENTO

1. Tomamos una pipeta volumtrica de 10 ml de muestra y transferimos a un erlenmeyer

2. Adicionamos 90 ml de agua destilada, 5 gotas de naranja o rojo de metilo y agitamos hasta homogenizacin total.

3. Calibramos una bureta con NaOH 0.1n y luego adicionamos gota a gota en la solucin cida hasta que cambie de color

1. Registramos el volumen de lcalis consumido y calculamos la acidez expresada en como cido actico (CH3 - COOH), usando la ecuacin de la acidez.

Clculos:

ACIDEZ = ml de NaOH X N X K X 100 / volumen de muestra

1000 ML 40g NAOH 1 N

250 ML X 0.1 N

X = 250 ML x 40g NAOH x 0.1 N / 1000 x 1 N

X= 1 g NAOH

ANEXOS

ANEXO 2ANEXO 1

ANEXO 4ANEXO 3

CONCLUSION

Concluida la prctica se determin la concentracin de cido actico en una muestra de vinagre, y a travs de una titulacin volumtrica tiene un grado acidez de 4.8 (un grado de acidez moderadamente bajo). FIRMA

ANEXO N 2

TEMA:

EFECTOS DE LA CONCENTRACIN DEL SUSTRATO EN LA CINTICA ENZIMTICA

FUNDAMENTO

Se fundamenta la prctica en la capacidad que posee el sustrato en diferentes concentraciones para formar un complejo sustrato-enzima, si aumenta la concentracin tambin lo hace la velocidad hasta su decrecimiento por la limitante que tiene la enzima.

OBJETIVO

Interpretar como afecta a la formacin del complejo sustrato enzima y la velocidad de la cintica enzimtica.


5 Tubos de ensayo de 15 ml Pipetas graduadas Vasos de precipitacin Buretas Bao de Mara Urea 0.25 M Ureasa Solucin buffer pH 6.2; 7.2; 8.2; 9.2 Cl2Hg 1% ClH 01 N Indicador rojo de metilo 0.05 %

PROCEDIMIENTO

1. Disponemos y rotulamos 5 tubos numerados del 1 al 5 y el ltimo como testigo.

2. Adicionamos en cada tubo urea 0.25 M, de acuerdo a lo siguiente:

T 1: 2.5 ml T 2: 5.0 ml T 3: 7.5 ml T 4: 10 ml T 5: 5.0 ml

3. Adicionamos la solucin buffer pH 7.2, de acuerdo a lo siguiente:

T 1: 9.5.ml T 2: 7.0 ml T 3: 4.5.ml T 4: 2.0 ml T 5: 7.0 ml

4. En el tubo testigo adicionamos 5 gotas de Hg Cl 2. 5. Sometemos al bao Mara a 50C por 15 minutos.

6. Adicionamos en cada uno de los tubos 0.5 ml de ureasa.

7. Colocamos a bao Mara durante 30 minutos a la misma temperatura.

8. Adicionamos en cada tubo 5 gotas de Hg Cl 2 a excepcin del testigo.

SOLUCINT1T2T3T4T

Urea 0.25 M2.5 ml5.0 ml7.5 ml10 ml5.0 ml

Buffer 7.2 pH9.5 ml7.0 ml4.5 ml2.0 ml7.0 ml

Cl 2Hg5 gotas5 gotas5 gotas5 gotas5 gotas

B. Mara 1550 C50 C50 C50 C50 C

ureasa0.5 ml0.5 ml0.5 ml0.5 ml0.5 ml

B. Mara 3050 C50 C50 C50 C50 C

Cl 2Hg5 gotas5 gotas5 gotas5 gotas5 gotas

VALORACIN DE LA CINTICA

Procedemos a valorar los micromoles de urea hidrolizados para lo cual se sigue el siguiente ordenamiento:

1. Con una pipeta volumtrica transferimos del tubo testigo 5 ml a un erlenmeyer, adicionamos, 10 ml agua destilada y 3 gotas del indicador rojo de metilo.

2. Desde una bureta adicionamos gota a gota ClH 0.1N, hasta el cambio de coloracin de la solucin.

3. Registramos el volumen del ClH consumido. 4. Realizamos el mismo proceso con cada uno de los tubos restantes y se obtiene el titulo corregido de cada tubo restando el valor del volumen consumido en el tubo testigo.

TUBOS TTULOT (TESTIGO)T. CORREGIDO

T13.2 ml 1.7 ml 1.5

T25.3 ml1.7 ml3.6

T35.0 ml1.7 ml4.3

T43.7 ml1.7 ml2.0

CLCULO DE LA UREA HIDROLIZADA

1. El titulo corregido de cada tubo se multiplica por 50 que corresponde al equivalente de micromoles de urea hidrolizados.

MUESTRAS VOLUMEN DE HCL F. DE CONVER.M DE UREA HIDROL.

T11.5 ml5075

T23.6 ml50180

T34.3 ml50215

T42.0 ml50100

2. Calculamos los micromoles de urea contenido en cada tubo, para lo cual se multiplica el volumen adicionado del sustrato por 250, que corresponde al equivalente de la urea 0.25 M, y se divide para 12.5, que es el volumen total de sustrato, buffer y enzima.

TUBOS TITULOT.CORREGIOOUREA ADICD.UREA HIDROL.

%

T12.5 ml1.57512

T25.03.618014.4

T37.5 ml4.3215 11.46

T410 ml2.0100 4

CALCULO DEL PORCENTAJE:

Tubo 1:

Sustrato: 2.5ml Urea

2.5ml Urea *250= 625 Urea hidrolizada

625 Urea Hidrolizada100%75 U hidrolizadax

Tubo 2:

Sustrato:5.0 ml Urea

5.0 ml Urea *250= 1250 Urea hidrolizada


Tubo3

Sustrato: 5.0 ml Urea

7.5 ml Urea *250= 1875 Urea hidrolizada


Tubo4:

Sustrato: 10 ml Urea

10 ml Urea *250= 2500 Urea hidrolizada


CALCULOS DE MICRO-MOLES DE UREA

Tubo 1:

Sustrato: 2.5ml Urea

2.5ml Urea *250= 625 Urea hidrolizada/ 12.5= 50 micromoles de urea

Tubo 2:


5.0 ml Urea *250= 1250 Urea hidrolizada/ 12.5= 100 micromoles de urea

Tubo3


7.5 ml Urea *250= 1875 Urea hidrolizada/12.5= 150 micromoles de urea

Tubo 4:

Sustrato: 10 ml Urea

10 ml Urea *250= 2500 Urea hidrolizada/ 12.5= 200 micromoles de urea

3. Representa en el eje de coordenadas los valores obtenidos de urea hidrolizada en cada tubo en el eje de las Y; mientras que la variable correspondiente en el eje de las X.

INTERPRETACIN

Se interpreta la cintica desarrollada en cada tubo estableciendo lo siguiente:

a. Valor ptimo en que se desarrolla la cintica enzimtica para cada uno de los factores.

Tubo testigo: 1.7 ml ClH consumido.

T1: 3.2 ml 1.7 ml = 1.5 mlT2: 5.3 ml 1.7 ml = 3.6 ml 5.7 valor optimoT3: 5.0 ml 1.7 ml = 4.3 ml T4: 3.7 ml 1.7 ml = 2.0 ml

Es los 4 tubos los valores de ml corregidos son menores que el valor optimo lo que significa que el sustrato es menor que el normal por lo tanto son des acelerados.

ANEXO

Anexo 1 Anexo 2 Anexo 3

CONCLUSIN

Concluida la prctica determinamos como afecta a la formacin del complejo sustrato enzima y la velocidad de la cintica enzimtica, observamos la reaccin obteniendo como resultados que las concentraciones utilizadas que dieron una desaceleracin de la velocidad de reaccin y el sustrato enzima pudo desarrollarse en todas las muestras.

FIRMA

PRACTICA N 3

TEMA:DETERMINACIN DE ALMIDN EN HARINAMTODO: (HIDRLISIS ACIDA Y VOLUMETRA)

FUNDAMENTO

Aplicando calentamiento a ebullicin y destilacin con refrigerante de reflujo, con CIH concentrado, se produce la hidrlisis acida del almidn y su inversin completa en glucosa dextrosa), que ejerce una accin reductora en caliente sobre las sales alcalinas de cobre (reactivo de fellings, solucin a y b).

OBJETIVO

Determinar el peso de la muestra, con sus valores propios, los resultados finales y determinar el porcentaje del almidn en la muestra de harina.


Matraz Erlenmeyer Algodn Vaso De Precipitacin Pipeta Volumtrica Baln Aforado Bureta HCL Concentrado Fenolftalena KOH Al 25% Tiosulfato De Sodio (Na2S2O3) Agua Destilada Harina

PROCEDIMIENTO

1. Pesamos dos gramos de muestra (harina) en un erlenmeyer, adicionamos 100 ml de agua destilada y 50 ml de HCL concentrado y seguidamente ponemos a hervor por 1 hora.

2. Dejamos enfriar y adicionamos 7 gotas de fenolftalena.

3. Desde una bureta adicionamos KOH al 25 %, hasta neutralidad fenolftalena y se neutraliza KOH al 25%, es decir hasta tener una coloracin rosa.

4. Seguidamente de esto filtramos en un vaso de precipitado.

5. Tomamos 50 ml del filtrado con una pipeta volumtrica y transferimos a un baln aforado de 250 ml de capacidad, enrasamos con agua destilada; obtenindose esta manera la solucin lista para la titulacin.

6. Finalmente titulamos con Tiosulfato de sodio hasta su decoloracin, en el cual se utilizaron 22 ml.

CALCULOS:

% DE ALMIDN = g. de Dextrosa 250x100 x 0,9 / 100 x 2g x 50

%DE ALMIDN= 2.25

ANEXO

ANEXO 1 ANEXO 2

ANEXO 3 ANEXO 4

CONCLUSIN

Concluida la prtica determinamos el peso de la muestra y con sus valores propios, y por ultimo determinamos que el porcentaje del almidn en la muestra de harina (2.25%) en 2gr, y la neutralizacin de la fenolftalena que tuvo una coloracin rosa.

ANEXO N 4

TEMA:

MATERIA INSAPONIFICABLE

FUDAMENTO

El porcentaje de materia insaponificable se determina por halogenacin de la grasa en medio alcohlico valorando el contenido de materia Insaponificable con NaOH, en presencia de un indicador como la fenolftalena.

OBJETIVO

Determinar el contenido de materia insaponificable en una muestra de manteca de chancho a travs de la titulacin con NaOH en presencia del indicador fenolftalena.


Vaso de precipitacin de 250 ml Erlenmeyer 250 ml Bureta de 25 ml Probeta Agita de vidrio Hidrxido de sodio Bao Mara Solucin (NaOH) Fenolftalena Agua destilada Etanol Manteca de chancho ter di etlico

PROCEDIMIENTO

1. Pesamos alrededor de 5 g. de muestra bien homogenizada en un Erlenmeyer de 250 ml y adicionar 30 ml. de alcohol y 5 ml de solucin de hidrxido potsico acuoso (50%).

2. Calentamos a 75C por una hora hasta saponificacin completa.

2. Adicionamos en frio 50 ml de etanol y 50 ml de ter dietilico, agitar vigorosamente y dejar en reposo hasta la clarificacin de dos capas lipdicas.

4. Extraemos con una pipeta la capa superior de la solucin lipdica sin que se absorba el residuo de la capa inferior.

1. Evaporamos el alcohol-ter en bao de Mara a 75C, hasta que no haya la emanacin de vapores.

6. El residuo lipdico extrado se lleva a neutralizacin, para lo cual se adiciona 50 ml de etanol, 1 ml de fenolftalena, y se titula con NaOH 0.1 N, hasta el cambio de color dbilmente.

CLCULOS:

M.I. = 1 ml de NaOH 0,1N x 0,0056 / Peso de la muestra

M.I. = 1 ml de NaOH 0,1N x 0,0056 / 5g

M.I. = 0.0012 ml

ANEXO

ANEXO 1 ANEXO 2

CONCLUSIONConcluida la prctica determinamos el contenido de materia insaponificable en una muestra de manteca de chancho que tiene una cantidad 0.0012 ml a travs de la titulacin (NaOH) en presencia de la fenolftalena que tiene un indicador de disoluciones bsicas que vara desde un pH 8 a 10, transformando disoluciones incoloras en disoluciones con rosados.

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