informe peso seco2
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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
ESCUELA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA
INTEGRANTES: Aulestia Carla
Ocaña Eder
Pita Gabriela
Sandoval Gustavo
Trujillo David
GRUPO: B4
DIA: LUNES 10h00-12h00
FECHA:
TEMA: DETERMINACIÓN DE BIOMASA POR EL MÉTODO DE PESO SECO
OBJETIVOS
Determinar la masa microbiana de la bacteria Pseudomona Aeruginosa T5 mediante el método de peso seco.
Realizar la curva de crecimiento de la bacteria utilizando el método de peso seco.
FUNDAMENTO
Peso seco: El peso seco (contenido de sólidos) de las células bacterianas que se encuentran en una suspensión se obtiene por el secado de un volumen en una estufa a 105°C hasta peso constante. Esta técnica es útil para grandes volúmenes de muestra, debido a que diferencias del orden de los miligramos representan el peso de un gran número de bacterias.
La desventaja de este método es que componentes volátiles de la célula pueden perderse por el secado y puede existir alguna degradación. También la muestra seca puede recobrar humedad durante el pesado, principalmente si el ambiente tiene una humedad relativa alta.
MARCO METODOLÓGICO
90ml CALDO TSB
1 PERLA
108
1 mL
9 mL 9 mL
107 105
9 mL
1 mL 1 mL
106 104
9 mL
INCUBARINCUBAR 35oC, en
sheiker orbital (200rpm), realizar mediciones cada
BLANCOCaldo BHI (240mL)
1era. MEDICIÓN
Tomar 5mL y filtrar
1 mL
240 mL TSB
1 mL
REVIVIFICACIÓN E INCUBACIÓN
INCUBAR 35oC, en sheiker orbital (200rpm)
24h.
NOTA: Antes de realizar la técnica se debe previamente tarar cajas petri dependiendo el número de mediciones que se vayan a realizar, en nuestro caso 8 cajas petri incluido el blanco.
240mL medioV2= 250mL 3%240mL ----------- 100%X ------------------- 3%= 7,2mL
RESULTADOS
No. Deter.
TiempoPeso caja
vacíaPeso caja
+ filtroPeso caja
secax
g/5mlx
g/lLn X
Blanco 0 84,5312 84,5951 84,5955 0,0004
0.082,6878
1 0 91,0762 91,1440 91,2175 0,0735
14.702,7027
2 30 77,6993 77,7699 77,8445 0,0746
14.922,7985
3 60 87,3358 87,3998 87,4819 0,0821
16.422,8261
4 90 80,1361 80,2004 80,2848 0,0844
16.882,8320
5 120 87,8058 87,8652 87,9501 0,0849
16.982,8507
6 150 73,7770 73,8376 73,9241 0,0865
17.302,8599
7 180 85,0125 85,0819 85,1692 0,0873
17.462,6878
Gráfica #1: Biomasa en función del tiempo
0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 20013
13.514
14.515
15.516
16.517
17.518
Biomasa Vs. Tiempo
Biomasa vs. Tiempo
Tiempo (min.)
Biom
asa
(g/L
)
Gráfica #2: Logaritmo de biomasa en función del tiempo
0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 2002.6000
2.6500
2.7000
2.7500
2.8000
2.8500
2.9000
Ln X Vs. Tiempo
Ln X en función del tiempo
Tiempo (min.)
Ln X
ANALISIS DE RESULTADOS
OBSERVACIONES
Se debe manipular las cajas con mucho cuidado, para que no adquieran grasa o humedad de nuestras manos, preferiblemente manipular con pinzas.
Se debe transportar las cajas dentro de un desecador con sílica gel para que no adquieran humedad.
Se debe pesar el filtro blanco, ya que, existen dos papeles en el sobre, además de manipularlo con pinzas.
Se necesita enfriar las cajas antes de pesarlas. Al momento de filtrar se debe prender el mechero para evitar
contaminación.
DISCUSIÓN
Puede existir error, ya que, al momento de pesar se transporto las cajas una distancia considerable para pesarlas, con lo cual pudieron adquirir humedad del ambiente.
Los pesos varían considerablemente, ya que, al momento de pesar los filtros con las cajas existió una equivocación fortuita, lo cual puede ser la causa de la gran variación en nuestros resultados.
Al momento de realizar la práctica participaron dos grupos, lo cual quita exactitud en nuestros resultados.
Las cajas petri eran muy irregulares en sus pesos, es decir, que pueden incidir en nuestros resultados.
CONCLUSIONES
El método del peso seco es más preciso para la determinación de poblaciones microbianas.
El coeficiente de correlacion es La ecuación de la curva es La curva de nota un crecimiento exponencial de nuestra bacteria. Según el coeficiente de relación la practica esta bien hecha o no esta bien
hecha.
BIBLIOGRAFÍA Y FUENTES DE CONSULTA