DETERMINACIN DE UREA EN SANGREOBJETIVO: Determinar la concentracin de UREA en suero sanguneo. Afianzar los conocimientos sobre la sntesis de urea en el hepatocito. INTRODUCCIN:La urea es uno de los constituyentes nitrogenados no proteico (NNP) ms importante en la mayora de los lquidos biolgicos. Es el principal producto final del metabolismo proteico. Se produce en el hgado y es excretada por la orina a travs de los riones.Una elevacin de la concentracin srica de urea, se interpreta generalmente como una posible disfuncin renal. Sin embargo, no debe dejarse de lado el hecho de que los valores sricos de urea se encuentran ntimamente relacionados con la dieta y el metabolismo proteico, por lo que cualquier alteracin en estas variables se traducir en un cambio de la concentracin de urea en suero.MATERIALES Y MTODOS: Tubos de ensayoMicropipetasEspectrofotmetroCentrifugaSolucin estndarSuero sanguneoReactivo de trabajo 1+ ureasa

*procedimiento

Marcar 3 tubos y agregar:B (Blanco)S (estndar)D (muestra)(problema)

Solucin estndar-10 ul-

Suero sanguneo--10 ul

Rx.Trabajo 1+ Ureasa1 ml1 ml1ml

1. colocamos en el tubo B Rx. De trabajo 1+ Ureasa (1ml)

Reactivo 1+ ureasa

2. En el tubo S se coloca la solucin estndar(10 ul) y Rx.Trabajo +1 (1ml)

Solucin estndar Reactivo 1+ ureasa Tubo S

3. En el tubo D se coloca suero sanguneo (10 ul) y Glicemia enzimtica (1ml)

Suero sanguneo Reactivo 1+ ureasa Tubo D

4. Llevamos todos los tubos a bao maria por 5 min a 37 grados centgrados.

5. Agregamos :REACTIVO 2Tubo B : 1mlTubo S : 1mlTubo D : 1ml

Y llevamos a leer al espectrofotmetro a 570 nm o en fotocolimetro con filtro naranja(560-580 nm)

6. OBTENEMOS LOS SIGUIENTES RESULTADOS:

Tubo B = 0Tubo S = 0.289Tubo D = 0.292

AHORA VAMOS A ENCONTRAR LA CONCENTRACIO DE UREA mg/dL DE LAS MUESTRAS DE SUERO

[UREA] =

Reemplazamos:

[UREA] = = 0.61 g/L (concentracin de Urea)

Bibliografa: 1. Murray, Mayes, Granner, Rodwell.Bioqumica de Harper, EditorialManualModerno, 15ava.Edicin, 2001.Pginas consultadas: 243 a 254, 700 a 715.2. Laguna Jos, Pia Enrique.Bioqumica, JGH Editores, 4ta. Edicin, 1990. Pginas Consultadas: 218 a 223.3. Guyton A.C.,Fisiologa Mdica, Editorial Interamericana, 5ta Edicin, 1977. Pginas Consultadas: 8980 a 902.