influencia del diluyente en la recuperación de

Influencia Del Diluyente En La Recuperacioacuten De Microorganismos

Nuacutentildeez-Balmaceda-Canales-Cardoza

1

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE NICARAGUA

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS ESCUELA DE FARMACIA

UNAN-LEON

INFLUENCIA DEL DILUYENTE EN LA DETECCIOacuteN DE MICROORGANISMOS

EN MEDICAMENTOS DE USO TOacutePICOS

TESIS PARA OPTAR AL TITULO DE LICENCIADOS QUIMICOS FARMACEUTICOS

AUTORES

Br Hermes Salvador Balmaceda Jarquin

Br Joel de la Trinidad Canales Zamora

Br Ligia Amanda Cardoza Corea

Tutor Lic Kelvin Nuacutentildeez

Leoacuten Nicaragua Mayo 2005



2

igia Amanda Cardoza Corea

EDICATORIA

l producto de los esfuerzos y trabajos realizados durante cinco antildeos en esta

que fue realizado este trabajo lo dedico a las personas

Dios Padre Todopoderoso Farmaceuta Supremo le doy gracias por la vida

mis Padres Javier Cardoza y Marlene Corea por su compresioacuten en mis horas

mis Hermanas Margie Elizabeth y Marlen con un especial carintildeo siempre

Margie Valentina y Gonzalo Javier rayitos de luz que han alegrado mi vida

mis Abuelitos que partieron a la vida eterna dejando huellas en mi corazoacuten de

mi Abuelita Carmen por todos sus consejos atenciones carintildeo y buenos

AGRADECIMIENTO

mi tutor Lic Kelvin Nuacutentildeez por brindar gran parte de su tiempo y apoyo bor y

l Personal Docente y Administrativo por su sus labores y tolerancia al poner a

mis compantildeeros por sus horas compartidas sus nombres iraacuten escritos en mi

L D EldquoAlma Materrdquo llegan a su culminacioacuten brotando el fruto deseado y esperado durante mucho tiempo Con el mismo amor con que mi corazoacuten guarda para ellos un latido y una fibra Acapacidad y fuerza necesaria para condicioacuten exitosa de este trabajo Por guiarmeen el difiacutecil camino a seguir durante mi carrera profesional Ade ausencias y estar pendiente de todas mis necesidades y apoyarme en todas mis decisiones Aestuvieron en todo momento y me brindaron su apoyo incondicional Auniversitaria todo mi amor y carintildeo para ellos Asu carintildeo y sus consejos Adeseos de mi superacioacuten

Aincondicional en el proceso de esta investigacioacuten asiacute como su eficiente laguiacutea Anuestro servicio sus conocimientos Amente con la tinta indeleble del recuerdo



3

Hermes Salvador Balmaceda Jarquigraven

edicatoria abajo a mi madre y hermana las quiero mucho

al fin lo logreacute espero esteacutes orgulloso te

gradecimiento por ser mi fuerza de vida e impulso que motiva mis acciones

os

DDedico este trA mi mejor amigo Roberto y su familia A mi abuelo Salvador Balmaceda le digoextrantildeo mucho que Dios en paz te tenga AAgradegravezcole a DiosA mi madre Ana Mariacutea Jarquigraven y mi hermana Ana Mariacutea Balmaceda por su ayuda incondicional y amor imperecedero a traveacutes de la distancia A mi abuela Mariacutea Feacutelix Iglesias por aguantarme todos los diacuteas Al Lic Kelvin Nuacutentildeez por ayudarnen la elaboracioacuten de este trabajo



4

Joel de la Trinidad Canales Zamora

edicatoria dio fuerza para salir adelante y ser siempre mi guiacutea

mis padres Mercedes Zamora y Emilio Canales que me dieron su apoyo y

mi esposa e hija que siempre estuvieron apoyaacutendome y fueron mi mayor

mi abuelita Petrona Ramos por estar siempre muy pendiente de mi

mis hermanitos Roque Enoc Emilio Mercedes y Cristine Elisa Canales Zamora

gradecimiento

Dios por guiarme e iluminarme en todo momento

toda mi Familia que siempre creyeron en mi y no dudaron en brindarme su

mi Tutor Lic Kelvin Nuacutentildeez por todo su apoyo durante la realizacioacuten de este

DA Dios que me Anunca dudaron de mi Ainspiracioacuten para salir adelante A A A A Aapoyo incondicional Atrabajo



5

INDICE Paacuteg

Introduccioacuten 3

Objetivos 6

Marco Teoacuterico 8

Material y Meacutetodo 27

Resultados 33

Anaacutelisis de Resultados37

Conclusiones 39

Recomendaciones 41

Bibliografiacutea 42

Anexos 45



6



7

INTRODUCCION

En la deacutecada de los cincuenta se recomendaba la siembra directa de la muestra

sin diluir en el medio de cultivo pero no se obteniacutean resultados satisfactorios ya

que la mayor parte de los microorganismos no alcanzaban el medio nutritivo por la

escasa superficie de contacto y por quedar englobados en una capa de grasa si el

preparado era lipoacutefilo

En el presente estudio se evaluoacute la efectividad de un diluyente a diferentes

concentraciones de tween 20 y tween 80 que son utilizados en anaacutelisis

microbioloacutegico de productos farmaceacuteuticos toacutepicos siendo que los productos

toacutepicos incorporan como excipientes bases de origen oleaginosas alcoholes

grasos vaselina ceras fases de tipo ow (aceite en agua) y wo (agua en aceites)

Es posible que dichos excipientes puedan afectar la recuperacioacuten de

microorganismos que estuviesen presentes en dichas muestras (para el caso de

muestras contaminadas) no debe obviarse que debe tomarse siempre encuentra

la formulacioacuten ya sea de origen hidroacutefilo o lipoacutefilo

En el presente estudio se utilizaron agentes tensioactivos tween 20 y 80 en

concentraciones de 1 4 y 10 de los cuales los resultados muestran la

efectividad del tween 20 al 10 para los 3 productos analizados con 3

microorganismos indicadores diferentes tanto para el recuento en placa como

para la serie de evaluacioacuten de NMP ( nuacutemeros mas probables ) de los cuales para

el caso de muestras que contengan organismos fermentadores la serie de NMP

evidencia una mejor recuperacioacuten de microorganismos

Esperamos que el presente estudio sea un aporte para quienes laboran en aacutereas

de control microbioloacutegico de medicamentos puesto que las Farmacopeas

internacionales uacutenicamente establecen que para el anaacutelisis de muestras de este

tipo (uso toacutepico unguumlento pomadas cremas geles preparados ow y ow) se

utilicen agentes tensioactivos en rango del 1 al 10 estamos seguros que

nuestro trabajo seraacute por ello una importante referencia



8

En el presente estudio se evaluacutea la influencia de algunos diluyentes en la

deteccioacuten de la contaminacioacuten microbiana uacutenicamente de medicamentos hidroacutefilos

de administracioacuten toacutepica Los diluyentes empleados han sido triptona sal con

diferentes concentraciones de polisorbato 20 y 80



9



10

Objetivo General

bull Evaluar el efecto de un diluyente a diferentes concentraciones en el

anaacutelisis microbioloacutegico de medicamentos de uso toacutepico

Objetivo Especifico

bull Evidenciar mediante ensayos si existe diferencia significativa en la

recuperacioacuten de microorganismos al utilizar un diluyente a diferentes

concentraciones

bull Destacar la importancia que amerita la seleccioacuten del diluyente en la

recuperacioacuten de microorganismos

bull Comparar teacutecnicas de recuento de microorganismos para su deteccioacuten y

recuperacioacuten (NMP recuento en placa )



11



12

MARCO TEOacuteRICO

Influencia Del Diluyente En La Deteccioacuten De Microorganismos En Medicamentos Toacutepicos Los polisorbatos agentes tensioactivos tween o span han sido tradicionalmente

utilizado en el anaacutelisis de productos de base oleosa o de aspecto untuoso tales

como pomadas unguumlentos cremas lociones (1)

Polisorbatos (1) Uno de los componentes de un grupo agentes tensioactivos no ionicos que se

obtienen por esterificaciograven del sorbitol con una o tres moleacuteculas de un agravecido graso

(esteagraverico lagraveurico palmigravetico oleico) en condiciones que causan la eliminacioacuten de

agua del sorbitol quedando sorbitano

bull Propiedades liacutequido aceitoso de color limoacuten o aacutembar Pe aprox 11

olor degravebil y sabor amargo la mayorigravea son soluble en alcohol agua y

acetato de etilo combustible no togravexico Aprobado su uso en

comestibles

bull Usos agente tensioactivo emulsionante dispersante manteca para

mezclar con la masa pastelerigravea y artigraveculos cocidos productos

farmacegraveuticos(7)

La presencia de sustancias antimicrobianas puede dificultar la recuperacioacuten de los

microorganimos que se encuentren presentes a su vez dificulta la homogenizacioacuten

de estos productos que suelen llevar componentes hidroacutefobos con los medios de

cultivo acuosos

Aunque algunos preparados liacutequidos pueden examinarse de forma directa La

mayoriacutea de los productos deben homogenizarse previamente en un liacutequido

adecuado el cual depende de la naturaleza del medicamento (hidroacutefilo o



13

hidroacutefobo) del meacutetodo de recuento que se vaya a utilizar y de la presencia del

poder inhibitorio intriacutenseco

Los productos grasos inmiscibles con el agua y soluciones acuosas de agentes

tensoactivos se homogenizan en disolventes oleosos siendo unaacutenime el empleo

de miristato de isopropilo como diluyente para las muestras oleosas

Por otra parte las muestras hidroacutefilas insolubles en miristato de isopropilo

pueden dispersarse en soluciones acuosas de las que el agua de peptona es la

maacutes aconsejable ya que ayuda a la revivificacioacuten de los microorganismos

lesionados Cuando el preparado tiene componentes insolubles en agua hay que

antildeadir agentes tensioactivos para formar un homogenizado estable

No existe unanimidad entre los diferentes autores consultados sobre queacute diluyente

es el maacutes adecuado para estos medicamentos toacutepicos hidroacutefilos por lo que en

este trabajo se ha realizado el estudio comparativo de varios diluyentes para

determinar su influencia sobre la deteccioacuten de la contaminacioacuten bacteriana y

fuacutengica de este tipo de medicamentos asiacute como sobre la recuperacioacuten de

microorganismos patoacutegenos inoculados en las mismas muestras

Pomadas Definicioacuten Y Caracteriacutesticas Generales

Las pomadas constituyen un grupo de preparados farmaceacuteuticos muy

heterogeacuteneos caracterizados por su consistencia semisoacutelida Estaacuten destinadas a

ser aplicadas sobre la piel o sobre ciertas mucosas con el fin de ejercer una accioacuten

local o de dar lugar a la penetracioacuten cutaacutenea de los medicamentos que contienen

Constan de un excipiente sencillo o complejo en cuyo seno se disuelven o se

dispersan los principios activos

Todos los preparados de consistencia semisoacutelida estaacuten de hecho englobados en

la definicioacuten geneacuterica de pomadas pero a menudo se utilizan otras definiciones



14

magraves especificas relacionadas con sus caracteriacutesticas fiacutesico quiacutemicas y su

consistencia man o menos blanda Asigrave en la Farmacopea Europea se distinguen

varias categoriacuteas de pomadas

Pomadas propiamente dichas constan de un excipiente de una sola fase en el

que se pueden dispersar solidos o liquidos

bull Hidrogravefobas (lipogravefilas) No pueden absorber magraves que pequentildeas cantidades

de agua La sustancia que se emplean con magraves frecuencia en su

formulaciograven son la vaselina la parafina la parafina ligravequida los aceites

vegetales las grasas animales los glicegraveridos sintegraveticos las ceras y los

polialquilsiloxanos liquidos

bull Absorbentes de agua Pueden absorber grandes cantidades de este

ligravequido Sus excipientes son los de las pomadas hidrogravefobas a los cuales se

incorporan emulgentes de tipo wo como la lanolina los alcoholes de grasa

de lana los egravesteres del sorbitano los monoglicegraveridos y los alcoholes grasos

bull Hidrogravefila Se elaboran con excipientes miscibles en agua tales como los

polietilenglicoles ligravequidos y solidos ( macrogoles) Pueden contener

cantidades adecuadas de agua

Cremas Son pomadas multifasicas constituidas por 2 fases una lipogravefila y otra

acuosa

bull Hidrogravefobas La fase continua o externa es la fase lipogravefila debido a la

presencia en su composicioacuten de emulgentes tipo wo

bull Hidrogravefilas La fase externa es de naturaleza acuosa debido a la presencia

en su composicioacuten de emulgentes de tipo ow tales como jabones sogravedicos

o de trietanolamina alcoholes grasos sulfatados y polisorbatados a veces

combinados en porciones convenientes con emulgentes tipo wo

Geles Estas preparaciones estan formadas por ligravequidos gelificados con ayuda de

agentes apropiados



15

bull Hidrogravefobos (oleogeles) Estagraven constituidos por excipientes como la

parafina ligravequida adicionada de polieteileno aceites grasos gelificados con

siacutelice coloidal o por jabones de aluminio o zinc

bull Hidrogravefilos (hidrogeles) Se elaboran con excipientes hidrogravefilos como el

agua el glicerol y los propilenglicoles gelificados con sustancias como

goma de tragacanto almidoacuten derivados de la celulosa poligravemeros

carboxivinigravelicos silicatos de magnesio y aluminio

Pastas Contienen elevadas proporciones sogravelidos finamente dispersos en el

excipiente por lo que generalmente su consistencia es bastante elevada (1)

Genero Staphylococcus(2)

Los Staphylococcus son ceacutelulas esfeacutericas gram positivas de cerca de 1microm de

diaacutemetro Suelen estar distribuidas en cuacutemulos irregulares a manera de racimos

de uvas En cultivos liacutequidos se encuentran tambieacuten cocos aislados en pares en

tetras y en cadenas

Los cocos joacutevenes se tintildeen intensamente con la coloracioacuten de gram al envejecer

se vuelven gram negativos Los estafilococos son microorganismos no moacutetiles y

no forman esporas Bajo la influencia de ciertos substancias quiacutemicas (por

ejemplo penicilina) experimentan lisis o cambian a forma L pero no los afectan

las sales biliares ni la optoquina

Staphylococcus aureus (3) Estos cocos claacutesicamente fermentan el manitol y la lactosa son proteoliacuteticos

producen coagulasa producen pigmento dorado producen lipasa forman amplias

zonas de hemoacutelisis aeroacutebica en las placas de agar sangre crecen en medios que

contengan un 10 de cloruro de sodio (5)



16

Los estafilococos crecen con facilidad en la mayor parte de los medios

bacterioloacutegicos bajo condiciones aerobias o microaeroacutefilas Crecen con mayor

rapidez a 37degC pero forman mejor el pigmento a temperatura ambiental (20 a

25degC)

Los Staphylococcus aureus forman colonias de color gris a amarillo dorado

intenso La mayor parte de las cepas de Staphylococcus aureus tienen

coagulosa o factor aglutinante sobre la superficie de la pared celular La

coagulasa se fija de manera enzimaacutetica con el fibrinoacutegeno y de esta manera

produce agregacioacuten bacteriana (8)

Patologiacutea

Los grupos de Staphylococcus aureus establecidos en un foliacuteculo piloso produce

necrosis tisular (factor dermonecroacutetico) (3) En caso de osteomilitis el foco primario

de crecimiento de Staphylococcus aureus es de manera tiacutepica un vaso

sanguiacuteneo terminal de la metaacutefisis del hueso largo que produce necroacutesis oacutesea y

supuracioacuten croacutenica Los Staphylococcus aureus puede producir tambieacuten

neumoniacutea meningitis empiema endocarditis y sepsis con supuracioacuten en cualquier

oacutergano

Los estafiacutelococos producen tambieacuten enfermedad mediante elaboracioacuten de toxinas

La exfoliacioacuten bulosa o siacutendrome de piel escaldada se debe a produccioacuten de

toxina exfoliativa

Genero Shigellas

Este geacutenero se compone de bacilos no moacuteviles y no encapsulados que fermentan

la glucosa y otros hidratos de carbono con produccioacuten de aacutecido pero no de gas

(excepto ciertas especies) Los microorganismos son incapaces de utilizar el

citrato como uacutenica fuente de carbono el crecimiento es inhibido por el sulfuro de



17

bismuto no se producen ureasas ni H2S (sulfuro de hidrogeno) El KCN (cianuro

de potasio) tambieacuten inhibe su crecimiento

Las Shigellas son bastoncillos gramnegativos delgados en los cultivos recientes

se producen formas cocobacilares Son microorganismos anaerobios facultativos

pero crecen mejor en medios aerobios Las colonias de forma convexa circulares

y transparentes alcanzan un diaacutemetro cerca de 2mm en 24 hrs El haacutebitat natural

de las Shigellas estaacute limitado a las viacuteas intestinales del hombre y otros primates

en los cuales producen disenteriacutea bacilar (3)

Shigella dysenteriae

Las Shigellas causan trastornos intestinales que se traducen en diarreas desde

muy ligeras hasta graves a veces en una disenteriacutea fatal con inflamacioacuten intensa

y ulceraciones del intestino grueso a menudo con formacioacuten de cicatrices y

estenosis del intestino despueacutes de la recuperacioacuten Al contrario de Salmonella

typhi que causa siempre una bacteriemia Shigella no suele invadir la sangre

Shigella dysenteriae del tipo 1 (bacilo de shigas) produce una exotoxina

termolaacutebil que afecta tanto al intestino como al sistema nervioso central

La exotoxina es una proteiacutena antigeacutenica (que estimula la produccioacuten de

antitoxinas) mortal para los animales de experimentacioacuten Al actuar como

enterotoxina produce diarrea como la enterotoxina termolaacutebil de Ecoli quizaacutes por

el mismo mecanismo

En el hombre la exotoxina inhibe tambieacuten la absorcioacuten de azuacutecares y aminoaacutecidos

en el intestino delgado Al actuar como ldquoneurotoxinardquo puede contribuir a la

gravedad extrema y la naturaleza mortal de las infecciones por Shigella

dysenteriae y a las reacciones del sistema nervioso central (meningioma y

coma)



18

Bacterias Generalidades Clasificacioacuten De Los Microorganismos (2) Una clasificacioacuten hasta hace poco utilizada es la de Robert Whittaker (1969) quien

clasifica a los organismos en los siguientes 5 reinos

1 Procariotae (Monera)

2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia

Bacterias Gram Positivas La mayoriacutea de las bacterias Gram(+) poseen una pared celular compuesta por

varias capas de peptido-glucano asiacute las paredes de las Gram(+) son maacutes gruesas

que las Gram(-) Muchas bacterias Gram(+) poseen en su pared Acidos Teicoicos

(sirven para identificar por inmunodiagnosis)

Acidos Teicoicos Estaacuten formados por un alcohol (glicerol o ribitol) y fosfato y estaacuten unidos a las

capas de peptido-glucano o membrana citoplasmaacutetica Los aacutecidos teicoicos

debido a su carga negativa (de los grupos fosfatos) pueden controlar la entrada y

salida de cationes Tambieacuten juegan un papel en la actividad de crecimiento y

estaacuten implicados en el almacenaje del foacutesforo (5)

Bacterias Gram Negativas Poseen peptido-glucano pero en una proporcioacuten muy pequentildea No poseen aacutecidos

teicoicos y el peptido-glucano se encuentra en el espacio periplasmaacutetico (espacio

entre la membrana citoplasmaacutetica y membrana externa) Al tener menor cantidad

de peptido-glucano las paredes celulares de las bacterias Gram(-) son maacutes

sensibles a la ruptura mecaacutenica La capa de peptido-glucano de las bacterias

Gram(-) estaacute rodeada de una membrana externa compuesta de lipoproteiacutenas

lipopolisacaacuteridos y fosfoliacutepidos



19

Paredes Celulares Atipicas

1 MOLLICUTES Por no poseer pared celular pueden pasar a traveacutes de

los filtros bacterianos Sus membranas citoplasmaacuteticas pueden poseer

esteroles (se piensa que los protegen de la lisis de presioacuten osmoacutetica)En

micoplasmas la ceacutelula estaacute rodeada de paredes de fosfoliacutepidos

(glicoliacutepidos y liacutepidos neutros) En espiroplasmas la membrana estaacute

constituida por espiralina (PM 26000)

2 ARQUEOBACTERIAS Poseen paredes celulares compuestas por

azuacutecares y proteiacutenas pero no por peptido-glucano

3 FORMAS L Son bacterias mutantes defectivas en su pared (algunos

antibioacuteticos como la penicilina induce la formacioacuten de cepas de bacterias

que poseen esta caracteriacutestica)

Membrana Externa De La Pared Celular De Las Bacterias Gram Negativas La Membrana Externa de la Pared Celular de las bacterias Gram Negativas estaacute

compuesta por lipoproteiacutenas lipopolisacaacuteridos y fosfoliacutepidos (3)

Funciones 1 Proveer canales de difusioacuten pasiva de nutrientes o solutos hidrofiacutelicos

2 Establecer una barrera a antibioacuteticos (ej penicilina) detergentes metales

pesados enzimas digestivas colorantes u otros toacutexicos

3 Barrera contra enzimas como Lisozima (puede romper pared celular de

Gram(+) y de pocas Gram(-))

4 Alta carga negativa le permite evadirse de fagocitosis

5 Facilitar y mantener acoplamiento en Conjugacioacuten

6 Proveer sitios receptores a bacteriocinas y bacterioacutefagos

7 Otorgar hidrofilicidad a la superficie celular



20

Componente Lipopolisacaacuterido (Lps) De La Pared Celular De Las Bacterias

Gram(-)

Funciones bull Polisacaacuteridos O antiacutegenos que ayudan a distinguir especies de Gram(-) por

serologiacutea (ej Salmonella)

bull Liacutepido A se conocen como Endotoxinas por ser toacutexico cuando se libera a la

sangre (fiebre y shock)

Membrana Citoplasmaacutetica La membrana citoplasmaacutetica generalmente es de 8 nm de grosor y es la barrera

vital que separa el interior de la ceacutelula (citoplasma) de su medio ambiente Se

localiza al interior de la pared celular Es barrera altamente selectiva

(selectivamente permeable) incapaz de concentrar metabolitos especiacuteficos y

permite excretar desechos fuera de su citoplasma A traveacutes de la membrana

citoplasmaacutetica pasan todos los nutrientes a la ceacutelula y todos los desechos que

elimina Estaacute formada mayoritariamente por fosfoliacutepidos (30-40) y proteiacutenas (60-

70) (al no poseer esteroles es menos riacutegida que en eucariotas)

Funciones bull Selectivamente Permeable (semipermeable) Las proteiacutenas no pueden pasar

pero siacute el agua aminoaacutecidos y algunos azuacutecares Los iones penetran

lentamente las sustancias que se disuelven faacutecilmente en liacutepidos entran y

salen con facilidad (O2 CO2 moleacuteculas orgaacutenicas apolares)

bull Contiene Enzimas (para el metabolismo energeacutetico citocromos

citocromoxidasa deshidrogenasas ATPasas proteiacutenas sintetasas permeasas)

Pigmentos y enzimas implicados con fotosiacutentesis se localizan en invaginaciones

de la Membrana Citoplasmaacutetica que se extienden por todo el citoplasma eacutestas

se llaman Cromatoacuteforos Tilacoides



21

HONGOS Y LEVADURA GENERALIDADES

Mucha gente tiende a confundir hongo y seta De hecho el teacutermino hongo puede

resultar un tanto equiacutevoco en lenguaje coloquial Para algunos los hongos son

alguacuten tipo de seta comestible o no No obstante desde el punto de vista cientiacutefico

las diferencias son claras los hongos son unos organismos peculiares

fascinantes y muy diversos las setas son las fructificaciones o cuerpos fructiacuteferos

de ciertos hongos

Por tanto antes de continuar se hace necesario definir el teacutermino hongo

Baacutesicamente se aplica a todo aquel organismo estudiado por los micoacutelogos Y

iquestqueacute es un micoacutelogo Pues alguien dedicado al estudio de los hongos

Organismos que parecen hongos pero que no lo son realmente Tratemos de

precisar maacutes la definicioacuten Los hongos constituyen un grupo ciertamente

heterogeacuteneo que incluye a seres no emparentados entre siacute Los hongos en

sentido amplio presentan estas caracteriacutesticas

bull Son eucariotas Al igual que nosotros mismos sus ceacutelulas poseen

nuacutecleos verdaderos donde estaacuten encerrados los cromosomas En eso se

diferencian de los procariotas como las bacterias cuyo ADN estaacute disperso

en el citoplasma Ademaacutes las ceacutelulas eucariotas suelen ser mayores y

maacutes complejas

bull Normalmente son multinucleados Por supuesto hay especies

microscoacutepicas con un solo nuacutecleo como las levaduras Sin embargo los

hongos suelen presentar muchos nuacutecleos en sus cuerpos En ocasiones

como en el caso de los animales el cuerpo estaacute dividido en muchas

ceacutelulas cada una con su correspondiente nuacutecleo



22

bull Se reproducen por medio de esporas Por supuesto no son los uacutenicos

organismos que lo hacen (las algas constituyen otro buen ejemplo) Sin

embargo en los hongos las esporas son tremendamente variadas moacuteviles

o inmoacuteviles sexuales o asexuales Muchos hongos producen sus esporas

en estructuras microscoacutepicas mientras que otros forman cuerpos

fructiacuteferos para liberarlas Las setas son las plataformas lanzadoras de

esporas de algunos grupos fuacutengicos

bull Son heteroacutetrofos sin clorofila y se alimentan por absorcioacuten Al no

poseer clorofila los hongos siguen una estrategia alimentaria muy simple

pudren cosas y absorben los productos resultantes de la descomposicioacuten

Algunos hongos paraacutesitos especializados presentan estructuras para

alimentarse de sus viacutectimas cual si se tratase de vampiros Algunos

hongos se alimentan por fagocitosis como los gloacutebulos blancos de nuestra

sangre

bull El talo (soma o cuerpo vegetativo) puede ser unicelular como en las

levaduras o tiacutepicamente filamentoso En este uacuteltimo caso recibe el nombre

de micelio De hecho muchos hongos y mohos tienen aspecto de pelusa

Algunos seres estudiados por los micoacutelogos como los mixomicetos

forman plasmodios

bull El talo estaacute recubierto de una pared de quitina (en los hongos tiacutepicos) o de

celulosa En algunos casos el talo no presenta pared (desnudo)

Los hongos son omnipresentes y cosmopolitas pueden aparecer praacutecticamente

en cualquier sitio y alimentarse de lo maacutes insospechado Se conocen maacutes de

80000 especies de hongos aunque probablemente existen muchiacutesimas auacuten no

descritas (tal vez maacutes de un milloacuten)



23

La mayor parte de los hongos son saprofitos (descomponen la materia muerta) y

juegan un papel de vital importancia en el mantenimiento de los ecosistemas

reciclando la materia orgaacutenica que luego podraacute ser utilizada por los vegetales Por

otro lado hay varios miles de especies que parasitan a las plantas de hecho los

hongos son los fitopatoacutegenos por excelencia En comparacioacuten soacutelo unas

cincuenta especies provocan enfermedades (micosis) en humanos Otros hongos

viven en simbiosis mutualistas como los liacutequenes (con algas) y las micorrizas

(con las raiacuteces vegetales casi siempre imprescindibles para la supervivencia de

las plantas en ecosistemas naturales)

A pesar de esta abundancia se constata que existe una reduccioacuten en el nuacutemero y

cantidad de muchas especies fuacutengicas Bastantes se habraacuten extinguido por culpa

de la accioacuten humana e incontables estaacuten en peligro una muestra maacutes del

constante deterioro al que la biosfera se ve sometida La situacioacuten es preocupante

Dejando a un lado los aspectos morales o conservacionistas del asunto y

cintildeeacutendonos a lo praacutectico iquestcuaacutentas fuentes de antibioacuteticos y otras sustancias

potencialmente uacutetiles estamos dejando morir Nuestro futuro mal que nos pese

estaacute ligado al de los demaacutes organismos que comparten el planeta Tierra

Para clasificar a estos organismos nos atendremos a las indicaciones de la IX

edicioacuten del famoso Dictionary of the fungi publicado por CAB INTERNATIONAL

en 2001 De todos modos en ocasiones seguiremos otros criterios

bull Reino Protozoa Protozoos Es un reino que incluye a seres tan conocidos

como los paramecios o las amebas Casi todos los integrantes de la

antigua div Myxomycota se agrupan aquiacute Son organismos que no

presentan pared celular y se alimentan por fagocitosis En otros libros

como Alexopoulos et al (1996) se duda que los distintos grupos de

hongos ameboides sean monofileacuteticos



24

bull Reino Chromista Incluye a protistas con mitocondrias de crestas

tubulares y con ceacutelulas cuyos flagelos presentan una especie de pelillos

adosados llamados mastigonemas Aquiacute se pueden encontrar las algas

pardas las diatomeas y algunos hongos que en realidad descienden de

algas que han perdido la clorofila como los mildius y tambieacuten algunos

hongos que antes se incluiacutean en Myxomycota como los labirintulales En

general las paredes celulares de estos seres no presentan quitina ni

glucanos Alexopoulos et al (1996) denominan a este reino Stramenopila

bull Reino Fungi Son los hongos verdaderos con paredes celulares de quitina

y glucanos Estaacuten maacutes emparentados con los animales que con las

plantas Incluye a Chytridiomycota (los quiacutetridos que antes se metiacutean en

Mastigomycotina) Zygomycota Ascomycota y Basidiomycota

Los hongos imperfectos o mitospoacutericos (asexuales) ya no constituyen un

grupo aparte sino que se conectan con grupos ya existentes

A modo de resumen

bull Las especies relacionadas se agrupan en geacuteneros

bull Los geacuteneros se agrupan en familias

bull Las familias en oacuterdenes

bull Los oacuterdenes en clases

bull Las clases en tipos o filos (los botaacutenicos prefieren usar el teacutermino

divisioacuten)

bull Los filos en reinos

bull Y los reinos en dominios

Como se ve hay 8 categoriacuteas baacutesicas (rangos o taxones) a la hora de clasificar

En ocasiones los cientiacuteficos usamos otras (superoacuterdenes subfamilias

subespecies etc) cuando se requiere una mayor precisioacuten



25

NomenclaturaComo se ve se puede llegar a hilar muy fino a la hora de clasificar Por supuesto

no todas esas categoriacuteas se utilizan en ocasiones su empleo indiscriminado es

criticado por algunos especialistas

Algunas categoriacuteas adoptan unas terminaciones especiales que pueden ser

distintas seguacuten el grupo (los zooacutelogos usan terminaciones diferentes a los

botaacutenicos los hongos diferentes a las algas etc) Por ejemplo

bull Los nombres de filos de hongos terminan en -mycota

bull Los subfilos en -mycotina

bull Las clases en -mycetes

bull Las subclases en -mycetidae

bull Los oacuterdenes en -ales

bull Los suboacuterdenes en -ineae

bull Las familias en -aceae

bull Las subfamilias en -oideae

bull Las tribus en -ieae

bull Las subtribus en -inae

Desde tiempos del insigne Linneo las especies se designan por un nombre

cientiacutefico Eacuteste consiste en un binomio formado por dos palabras latinas o

latinizadas La primera es el nombre geneacuterico se escribe en mayuacutesculas y hace

referencia al geacutenero La segunda es el nombre especiacutefico se escribe en

minuacutesculas y se refiere a la especie concreta de que se trata El binomio (y en

realidad todos los nombres de taxones) se escribe en cursiva (o subrayado si el

medio de escritura elegido no dispone de cursivas)



26

iquestQueacute son los hongos iquestCoacutemo se diferencian de las ceacutelulas humanas y de

las bacterias

Cuando se estudian uno expresa que los hongos son eucariotas que no es una

palabra difiacutecil sino que significa que las ceacutelulas tienen verdaderos nuacutecleos con

membrana pero que difieren de las ceacutelulas animales o vegetales Entre las

caracteriacutesticas mas importantes podemos mencionar que son multicelulares que

poseen una pared celular gruesa diferente de la pared celular de las bacterias y

que pueden crecer de diferentes formas Son ubicuos en el ambiente y se utilizan

con diferentes propoacutesitos tanto en la alimentacioacuten en la industria y lo que es

asombroso en la elaboracioacuten de muchos antibioacuteticos

Las especies que producen infecciones se dividen seguacuten la forma de

crecimiento o por el tipo de infeccioacuten que provocan Pueden existir como formas

filamentosas ramificadas o hifas o como levaduras Se reproducen en forma

asexuada y pueden formar esporangios que liberan esporas y asiacute se dispersan o

pueden hacerlo por divisioacuten o produciendo pequentildeos brotes que se llama

gemacioacuten

Se conocen dos tipos de micosis o infecciones producidas por hongos

bull Micosis superficiales los hongos crecen en la superficie del cuerpo la

piel el pelo las untildeas y en ciertas mucosas como la fariacutengea o vaginal

bull Micosis profundas afectan oacuterganos internos como el cerebro los

pulmones etc

Hay algunas especies que pueden formar parte de la flora normal Asiacute podemos

encontrar especies de Candida en el intestino y aun en la vagina

Las especies de hongos que producen infecciones se pueden cultivar en medios

artificiales y se observan con microscopio comuacuten



27

Taxonomiacutea de los Hongos Despueacutes de las uacuteltimas modificaciones hechas en el Congreso Internacional de

Micologiacutea de 1994 donde se han introducido muchos cambios el reino queda

Reino Fungi

bull Phylum Chtridiomycota

bull Phylum Zygomycota

bull Phylum Ascomycota

bull Phylum Basidiomycota

Factores Que Afectan El Crecimiento De Microorganismos En Los Medios

De Cultivo Los medios de cultivos utilizados deben contener todos los nutrientes requeridos

para el microorganismo a cultivarse y ciertos factores como temperatura PH

optimo de crecimiento aireacioacuten que deben ser controlados cuidadosamente Los

Agares son polisacaacuteridos que se extraen de algas marinas y son particularmente

adecuados para el cultivo microbiano porque resiste la accioacuten microbiana

generalmente se disuelven a 100degC pero no forman gel hasta que se enfriacutea por

debajo de 45degC (6)

Para muchos microorganismos un solo compuesto (como un aminoaacutecido) puede

servir como fuente de energiacutea otros requieren compuestos diferentes Es

importante a su vez considerar el PH oacuteptimo para cada especie generalmente los

microorganismos neutrofilos crecen mejor a PH 6-8 algunos acidoacutefilos tienen PH

oacuteptimo tan bajo como 3 y otros alcaloacutefilos PH altos como 105 (8)

La temperatura es otro aspecto importante que variacutea ampliamente las formas

psicroacutefilas crecen mejor a temperaturas bajas 15-20 degC las formas mesoacutefilas lo

hacen mejor 30-37degC la mayor parte de las termoacutefilas de 50-60degC las

temperaturas extremas inhiben el crecimiento de microorganismos por lo que son

bien utilizadas para esterilizar las preparaciones el friacuteo extremo igualmente inhibe

el crecimiento de las ceacutelulas bacterianas aunque su utilizacioacuten no es segura para

la esterilizacioacuten (4)



28



29

MATERIALES Y MEacuteTODOS

Tipo de estudio el presente estudio es de tipo experimental y descriptivo Aacuterea de estudio Area de control microbioloacutegico del departamento de anaacutelisis de Drogas toacutexicos y

medicamentos ubicado en el Campus Medico Facultad de Ciencias Quiacutemicas

Muestras Se emplearon 3 muestras correspondientes a especialidades farmaceacuteuticas de

uso toacutepico elegidas dentro de la liacutenea de produccioacuten de Laboratorios Mauricio Digraveaz

Muller y correspondientes a las formas farmaceacuteuticas de pasta y unguumlento

Unidad de anaacutelisis Diluyente utilizado a diferentes concentraciones en control microbioloacutegico de

medicamentos de uso toacutepico

Tipo de muestreo Por conveniencia

Criterios de seleccioacuten

bull Medicamentos de uso toacutepico

bull Analizados seguacuten especificaciones de la USP 26

Procedimiento para la recoleccioacuten de las muestras Las muestras analizadas fueron proporcionadas por el laboratorio Mauricio

Diacuteaz Muller previa coordinacioacuten con la direccioacuten del mismo para tal efecto

fueron proporcionadas 3 muestras de 10 unidades fiacutesicas cada una



30

Plan de Anaacutelisis

Los resultados se muestran en tablas comparativas que permitan visualizar los

resultados de manera individual asiacute como comparativa de los resultados

generales de todas las concentraciones del diluyente

Procedimiento Analiacutetico

1 Cultivo de microorganismos para el ensayo

Con un Asa esteacuteril se transfieren una o dos asadas de microorganismo

(Staphylococcus aureus) a un tubo inclinado esteacuteril que contenga 10ml de agar-

caseiacutena Este envase se marca y se incuba a 37degC por 24 horas estaacute operacioacuten se

realiza sucesivamente al menos de 3 diacuteas con el objetivo de lograr la activacioacuten

del microorganismo

Repetir este procedimiento para cultivo de microorganismo Ecoli Klebsiella

pneumoiae

2 Preparacioacuten de la suspensioacuten de microorganismo A las cepas previamente incubadas se procedioacute a adicionarles un volumen de

solucioacuten salina al 09 con el objetivo de disolver el microorganismo

posteriormente a esto se hacen diluciones necesarias hasta obtener una valor de

25 de transmitansia a 580 nm esto a fin de establecer un numero de ufc

estaacutendar para el ensayo previo a la inoculacioacuten de las muestras

3 Toma de muestras y preparacioacuten de las diluciones Se tomaron 5 unidades fiacutesicas de cada especialidad farmaceacuteutica del total de las

10 unidades de un mismo lote elegidas al azar Para cada diluyente se tomaron

en condiciones esteacuteriles de cada envase individual Una muestra representativa de

cada unidad fiacutesica (esto para obtener un pool) obtenieacutendose asiacute 10 g con las

cuales se prepararon las diluciones suspendieacutendolas en 90 ml de diluyente



31

La homogenizacioacuten se realizoacute por agitacioacuten mecaacutenica De esta se hicieron

diluciones sucesivas l0-1 10-2 y 10-3

4 Adicioacuten de las muestras para el anaacutelisis Posterior al vertido del medio en las placas aproximadamente 18 ml una vez que

estas habiacutean solidificado se procedioacute a adicionar las muestras en la superficie se

homogenizoacute y posteriormente se incubaron las placas de manera invertida a fin de

evitar que la condensacioacuten del medio pudiera contaminar la muestra

5 Procedimiento del NMP Se procedioacute a adicionar 1 ml de inoculo para cada una de las diluciones

correspondientes a l0-1 10-2 y 10-3 por triplicado para cada una de las muestras

analizadas en el presente estudio

6 Meacutetodos de recuento Para bacterias se empleoacute el meacutetodo de dilucioacuten en placa con agar triacuteptica soja

incubaacutendose a 37 degC por 24 horas y el nuacutemero maacutes probable (NMP) en series de

tres tubos con caldo triacuteptica soja incubando a 45degC en bantildeo mariacutea durante 24

horas

7 Deteccioacuten de microorganismos patoacutegenos Se inocularon 3 tubos con 9 ml de la dilucioacuten de cada muestra con 1 ml de

suspensiones de Escherichia coli Staphylococcus aureus y Klebsiella

pneumoniae que conteniacutean n x 10-3 ceacutelulasmI

Para detectar E coli se realizoacute el aislamiento en agar EMB para S aureus agar

110 y para Klebsiella agar Levine Las bacterias fueron incubadas a 37degC y se

comparoacute el nuacutemero de ufc con el obtenido de los tubos controles constituidos por

1 ml de baacuteculo con 9 ml de solucioacuten salina esteacuteril



32

Material Y Equipo Utilizado Para el Ensayo En el desarrollo experimental del presente trabajo monograacutefico se utilizaron los

siguientes equipos y materiales

1 Cristaleriacutea Erlenmeyer vidrio reloj probeta pipetas tubos de ensayo platos petri estaacutendar

beaker termoacutemetro

2 Equipos Balanza analiacutetica (Sartorious Modelo A-210P) cocina eleacutectrica (Corning Hot Plate

Modelo PC-100) horno (Prescision Cientific) agitador (Vortex Genie Modelo H-

550-G) soportes aros mallas autoclave (Omni-Clave Modelo OCM-A3)

autoclave (Electric-Steroclave Modelo 25X) mecheros incubadora (Precision

Scientific Modelo 6M) pHmetro (Corning Modelo 10) equipo de bantildeo mariacutea

(Presicion Scintific Modelo 270) horno (Presicion Scintific 368-A) balanza de

brazo (OHAUS) espectrofotoacutemetro (Espectronic 580 Modelo 20) pana de bantildeo

mariacutea gradillas metaacutelicas espaacutetula y asas

3 Material complementario (descartable) Bolsa plaacutesticas frascos color aacutembar papel filtro papel de aluminio guantes

nasobuco gorro aplicadores algodoacuten

4 Reactivos

bull Solucioacuten salina de cloruro de sodio 09 bull Agar Baird Parker bull Agar Cetrimide bull Agar XLD bull Agar 110 bull Agar EMB bull Twen 20 bull Twen 80 bull Agar TSA bull Agar Saburaud



33

5 Cepas

bull Staphylococcus aureus ATCC bull Klebsiella pneumoniae ATCC bull Ecoli ATCC

6 Diluyentes bull Triptona sal con 1 4 y 10 de polisorbato 20 bull Triptona sal con 1 y 4 y 10 de polisorbato80



34



35

RESULTADOS

TABLA 1 MUESTRA 1 MICROORGANISMO 1

TABLA 2 RECUPERACION DE Stphylococcus aureus UTILIZANDO DIFERENTES DILUYENTES

Diluyentes

Muestra

Control ufc x103 T201 T204 T2010 T801 T804 T8010 36a 27a75b 3083 b 2775b 09a25b 05a13b 11a30b 1

36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3

TABLA 3 RECUPERACION DE Escherischia coli UTILIZANDO DIFERENTES DILUYENTES

Diluyentes

Muestra

Control ufc x103 T201 T204 T2010 T801 T804 T8010

36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3

Numero de Bacterias por g

lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Diluyente Meacutetodo N0 N0 N0 N0

Placa 2 66 1 4 0 0 0 0 Tripona Sal 1 tween 20 NMP 3 79 1 33 3 12 1 4


Placa 3 70 3 16 1 6 0 0 Tripona Sal 10 tween

20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36

TABLA 4 RECUPERACION DE Klebsiella pneumoniae UTILIZANDO DIFERENTES DILUYENTES

Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3

TABLA 5 LIMITE MUESTRA 1


lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV

B TSA SB CV B TSA SB CV

B Placa Aufc Aufc Aufc Aufc Aufc Aufc Aufc Aufc Muestra

1

NMP Aufc Aufc Aufc Aufc

Placa Aufc Aufc Aufc Aufc Aufc Aufc Aufc Aufc Muestra 2


Placa Aufc Aufc Aufc Aufc Aufc Aufc Aufc Muestra 3


AufcAusencia total de unidaes formadoras de colonias NMP Numero mas probable



37

TABLA 6 CONTROL DE AMBIENTE

Numero de Bacteacuterias por m2

Numero de Hongos por m2

Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo

Meacutetodo Recuento

TSA Saburaud TSA Saburaud TSA SaburaudPlaca 3ufcm2 2ufcm2 3ufcm2 3ufcm2 4ufcm2 5ufcm2 1 Placa 3ufcm2 4ufcm2 4ufcm2 4ufcm2 4ufcm2 3ufcm2

Placa 3ufcm2 2ufcm2 7ufcm2 5ufcm2 5ufcm2 4ufcm2 2 Placa 7ufcm2 4ufcm2 4ufcm2 5ufcm2 2ufcm2 5ufcm2




38



39

Anaacutelisis De Los Resultados Los resultados muestran el grado de recuperacioacuten y deteccioacuten de

microorganismos seguacuten el diluyente a distintas concentraciones utilizadas tanto

para el meacutetodo de recuento en placa como para el anaacutelisis en tubos NMP

daacutendose el nuacutemero y porcentaje de recuperacioacuten de las muestras que tienen

menos de 10 de l0 a l00 de l00 a 1000 y maacutes de 1000 bacterias por gramo o

mililitro

La mayor deteccioacuten de la contaminacioacuten bacteriana se consiguioacute con diluyente de

triptona sal al 10 de polisorbato 20 tanto para el meacutetodo de placa como por el

NMP en los tres microorganismos utilizados Sin embargo no se muestran

diferencias relevantes entre este (tween 20 al 4 ) y tween 20 al 10

Al comparar los meacutetodos de recuento se aprecia que el del NMP detecta en todos

los casos mayor contaminacioacuten que el de la placa

A su vez las muestras demostraron pasar las pruebas para liacutemites establecidas

siendo esta un ensayo de importancia para asegurar la calidad de las muestras en

estudio



40



41

CONCLUSIONES

El presente estudio concluye que el mejor diluyente utilizado en el anaacutelisis de

medicamentos de uso toacutepico es el tween 20 al 10 ya que permite el mejor

porcentaje de recuperacioacuten de microorganismos que puedan haber presentes en

la muestra en comparacioacuten con las muestras que fueron analizadas utilizando

tween 20 (1 y 4) y tween 80 (1 4 y 10) pues no mostraron diferencias

en cuanto al porcentaje de microorganismos recuperados

Aunque lo ideal seriacutea utilizar el diluyente maacutes adecuado para cada muestra

teniendo en cuenta su naturaleza y composicioacuten esto no es posible cuando se

estudian medicamentos de diversos tipos o cuando se desconoce su formulacioacuten

por eso en la praacutectica se emplea un solo diluyente Por esta causa proponemos

como mejor diluyente para el anaacutelisis microbioloacutegico de los productos

farmaceacuteuticos hidroacutefilos de aplicacioacuten toacutepica triptona sal con 10 de polisorbato

20

Consideramos que el medio de cultivo liacutequido es mejor que el medio soacutelido para la

recuperacioacuten de los microorganismos dantildeados por las condiciones a las que se

exponen generalmente los medicamentos durante el transporte almacenamiento y

presencia de conservadores en su formulacioacuten



42



43

RECOMENDACIONES

bull Que el personal a cargo del aacuterea de microbiologiacutea evaluacuteen renueven y

actualicen las teacutecnicas de descontaminacioacuten de ambientes A manera de

observacioacuten se debe de mencionar que en el aacuterea esteacuteril estuvieron

trabajando 4 analistas lo cual puede ser un factor de contaminacioacuten que se

reflejo en la tabla VI se recomienda que en dicha aacuterea solo trabaje un

analista a la vez y tambieacuten que se coloque un filtro de aire para mejorar las

condiciones de trabajo

bull Ensayar las teacutecnicas descritas en el presente estudio para la deteccioacuten y

recuperacioacuten de hongos y levaduras lo cual no fue posible debido a la falta

de reactivos para llevarse a cabo (Agar triptona con azolecitina glucosada y

oxitetraciclina)

bull Garantizar que las cepas utilizadas sea de tipo ATCC a fin de cuidar de la

contaminacioacuten a los investigadores durante el ensayo



44

Bibliografiacutea

Referencias Generales

1 Void R Bunschen M

Tratado de Tecnologiacutea Farmaceacuteutica (V C R)

Editado en Zaragoza Espantildea 1982

Pag 483 497-499

2 8) Frobisher M Hindill R

Microbiologiacutea

5ta edicioacuten editorial Salvat SA

pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst

Microbiologiacutea Meacutedica

Editorial el manual moderno SA de CV

Pag 32 49 50

4 10) Farmacopea francesa-codex

Edicioacuten lengua espantildeola

Pag 903 904 905

5 Hardman J

Goodmen Gilman Alfred

Las bases Farmacologicas de la terapeacuteutica

Noena edicioacuten volumen II

Pag 184-186

6 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos

Sexta edicioacuten 1994 Pag



45

7 Diccionario quiacutemico y productos quiacutemicos

Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695

8 Farmacopea Europea

Segunda edicioacuten Parte volumen 3

Pag

Informacioacuten De Banco De Datos Y Artiacuteculos

9 T09507 Antiviral activity of oqueous extracts from medicinal

Plantas in tissue cultures

May g Willuhn g

Arz nerm-forsch 28 1-7 (1978)

10 Bioactividad de productos naturales pate A

Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS

Anexo No 1 Cultivo de Microorganismos

CepasATCC

Repicar las cepas al menos 7 veces a fin de garantizar su completa y total activacioacuten

Pases a tubos Inclinados conteniendo Agar Caso para bacterias

Marcar e incubar a 37degC por 24 horas para Bacterias



48

Anexo No 2

PREPARACION DE LA SUSPENSION DE MICROORGANISMO

Se disuelve el microorganismo en volumen de solucioacuten salina al 09

Luego se hacen diluciones necesarias hasta obtener una T de 25 a 580nm

A fin de establecer un numero de UFC estaacutendar

Suspensioacuten para el ensayo previo a la inoculacioacuten de la muestra



49

Anexo No3 TOMA DE MUESTRAS Y PREPARACIOacuteN DE LAS DESILUSIONES

Se tomaron 5 unidades fiacutesicas de cada especialidad farmaceacuteuticas

Se tomo una muestra y se hizo el pool

Suspendieacutendola en 90 ml de diluyente esteacuteril

Homogenizar

Hacer diluciones susecivas 10-1 10-2 10-3



50

Anexo Ndeg4 Preparacioacuten de los medios de Cultivo

Pesar 40 g de Acaso

Disolver en 1 lt de agua destilada recientemente hervida

Calentar y agitar hasta lograr clarificar la solucioacuten

Medir PH (73 plusmn 02)

Autoclavar por 15 minutos a 121degC



51

Anexo Ndeg5 Preparacioacuten De La Solucioacuten Salina De Cloruro De Sodio 09

Pesar 09 G De Cloruro De Sodio

Disolver En 100 Ml De Agua Destilada Esteacuteril

Autoclavar Por 15 Minutos A 121degC



52

ANEXO Ndeg6

Preparacioacuten de la suspensiones de microorganismos

Tomar 2 a 3 asadas de microorganismo en estudio

Disolver en tubos con solucioacuten salina al 09

Agitar hasta homogenizar la suspensioacuten

Medir en espectrofotoacutemetro a 580 nm y 25 transmitancia esto es para ajustar la suspensioacuten



53

ANEXO Ndeg7 Preparacioacuten de los platos petri para el ensayo

Dejar enfriar en bantildeo Mariacutea a 55degC el agar CASO previamente

autoclavado

Vertir 99 ml de agar +01 ml de muestra

Agitar para homogenizar la mezcla

Dejar enfriar a temperatura ambiente



54



55

GLOSARIO

bull Criterio microbioloacutegico el valor o la gama de valores microbioloacutegicos establecidos mediante el empleo de procedimientos definidos para determinar la aceptacioacuten o rechazo del alimento muestreado

bull Paraacutemetro microbioloacutegico los anaacutelisis microbioloacutegicos especiacuteficos practicados a cada alimento tales como microorganismos indicadores microorganismos patoacutegenos toxinas etc

bull Indicador microbioloacutegico a los microorganismos no patoacutegenos pero bull frecuentemente asociados a eacutestos utilizados para reflejar el riesgo de la

presencia de agentes productores de enfermedades bull Severidad del muestreo el rigor que se aplicaraacute al muestreo Depende del

grado de riesgo para la salud y condiciones de uso posterior del alimento Determina los planes de muestreo con respecto al nuacutemero de unidades de muestras a ser examinadas (n) a la cantidad maacutexima de unidades defectuosas que puede contener la muestra ( c ) y al tipo de plan 2 o 3 clases

bull Plan de muestreo el procedimiento en que se estipula el tamantildeo de la muestra (n) y el criterio de aceptacioacuten o rechazo ( c ) de forma que pueda tomarse una decisioacuten respecto a si se debe aceptar o rechazar el alimento inspeccionado basaacutendose en los resultados del anaacutelisis

bull Plan de 2 clases un plan de muestreo por atributos donde la calidad de un producto de acuerdo con los criterios microbioloacutegicos puede dividirse en dos grados de calidad aceptable y rechazable basado en comprobar la presencia o ausencia de microorganismos o si la tasa microbioloacutegica es superior o inferior a un nivel criacutetico establecido copy Un plan de 2 clases queda descrito por n y c

bull Plan de 3 clases un plan de muestreo por atributos donde la calidad de un producto de acuerdo con los criterios microbioloacutegicos puede dividirse en tres grados de calidad aceptable medianamente aceptable y rechazable La clase aceptable tiene como liacutemites 0 y m la clase medianamente aceptable tiene como liacutemites m y M y la rechazable aquellos valores superiores a M Un plan de tres clases queda descrito por n m M y c

bull n = nuacutemero de unidades de muestras a ser examinadas bull m = valor del paraacutemetro microbioloacutegico para el cual o por debajo del cual el

alimento no representa un riesgo para la salud bull c = nuacutemero maacuteximo de unidades de muestra que puede contener un

nuacutemero de microorganismos comprendidos entre m y M para que el alimento sea aceptable

bull M = valor del paraacutemetro microbioloacutegico por encima del cual el alimento representa un riesgo para la salud

bull Categoriacutea de riesgo la relacioacuten entre el grado de peligrosidad que representa el alimento para la salud en relacioacuten con las condiciones posteriores de manipulacioacuten



2

igia Amanda Cardoza Corea

EDICATORIA

l producto de los esfuerzos y trabajos realizados durante cinco antildeos en esta

que fue realizado este trabajo lo dedico a las personas

Dios Padre Todopoderoso Farmaceuta Supremo le doy gracias por la vida

mis Padres Javier Cardoza y Marlene Corea por su compresioacuten en mis horas

mis Hermanas Margie Elizabeth y Marlen con un especial carintildeo siempre

Margie Valentina y Gonzalo Javier rayitos de luz que han alegrado mi vida

mis Abuelitos que partieron a la vida eterna dejando huellas en mi corazoacuten de

mi Abuelita Carmen por todos sus consejos atenciones carintildeo y buenos

AGRADECIMIENTO

mi tutor Lic Kelvin Nuacutentildeez por brindar gran parte de su tiempo y apoyo bor y

l Personal Docente y Administrativo por su sus labores y tolerancia al poner a

mis compantildeeros por sus horas compartidas sus nombres iraacuten escritos en mi

L D EldquoAlma Materrdquo llegan a su culminacioacuten brotando el fruto deseado y esperado durante mucho tiempo Con el mismo amor con que mi corazoacuten guarda para ellos un latido y una fibra Acapacidad y fuerza necesaria para condicioacuten exitosa de este trabajo Por guiarmeen el difiacutecil camino a seguir durante mi carrera profesional Ade ausencias y estar pendiente de todas mis necesidades y apoyarme en todas mis decisiones Aestuvieron en todo momento y me brindaron su apoyo incondicional Auniversitaria todo mi amor y carintildeo para ellos Asu carintildeo y sus consejos Adeseos de mi superacioacuten

Aincondicional en el proceso de esta investigacioacuten asiacute como su eficiente laguiacutea Anuestro servicio sus conocimientos Amente con la tinta indeleble del recuerdo



3





os




4







gradecimiento







5

INDICE Paacuteg

Introduccioacuten 3

Objetivos 6



Resultados 33


Conclusiones 39

Recomendaciones 41


Anexos 45



6



7

INTRODUCCION






























8







9



10

Objetivo General



Objetivo Especifico



concentraciones







11



12

MARCO TEOacuteRICO











comestibles







cultivo acuosos






13




























14



















acuosa








agentes apropiados



15














tetras y en cadenas












16




25degC)






Patologiacutea







oacutergano



toxina exfoliativa

Genero Shigellas







17




















el mismo mecanismo





coma)



18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















3





os




4







gradecimiento







5

INDICE Paacuteg

Introduccioacuten 3

Objetivos 6



Resultados 33


Conclusiones 39

Recomendaciones 41


Anexos 45



6



7

INTRODUCCION






























8







9



10

Objetivo General



Objetivo Especifico



concentraciones







11



12

MARCO TEOacuteRICO











comestibles







cultivo acuosos






13




























14



















acuosa








agentes apropiados



15














tetras y en cadenas












16




25degC)






Patologiacutea







oacutergano



toxina exfoliativa

Genero Shigellas







17




















el mismo mecanismo





coma)



18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















4







gradecimiento







5

INDICE Paacuteg

Introduccioacuten 3

Objetivos 6



Resultados 33


Conclusiones 39

Recomendaciones 41


Anexos 45



6



7

INTRODUCCION






























8







9



10

Objetivo General



Objetivo Especifico



concentraciones







11



12

MARCO TEOacuteRICO











comestibles







cultivo acuosos






13




























14



















acuosa








agentes apropiados



15














tetras y en cadenas












16




25degC)






Patologiacutea







oacutergano



toxina exfoliativa

Genero Shigellas







17




















el mismo mecanismo





coma)



18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















5

INDICE Paacuteg

Introduccioacuten 3

Objetivos 6



Resultados 33


Conclusiones 39

Recomendaciones 41


Anexos 45



6



7

INTRODUCCION






























8







9



10

Objetivo General



Objetivo Especifico



concentraciones







11



12

MARCO TEOacuteRICO











comestibles







cultivo acuosos






13




























14



















acuosa








agentes apropiados



15














tetras y en cadenas












16




25degC)






Patologiacutea







oacutergano



toxina exfoliativa

Genero Shigellas







17




















el mismo mecanismo





coma)



18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















6



7

INTRODUCCION






























8







9



10

Objetivo General



Objetivo Especifico



concentraciones







11



12

MARCO TEOacuteRICO











comestibles







cultivo acuosos






13




























14



















acuosa








agentes apropiados



15














tetras y en cadenas












16




25degC)






Patologiacutea







oacutergano



toxina exfoliativa

Genero Shigellas







17




















el mismo mecanismo





coma)



18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















7

INTRODUCCION






























8







9



10

Objetivo General



Objetivo Especifico



concentraciones







11



12

MARCO TEOacuteRICO











comestibles







cultivo acuosos






13




























14



















acuosa








agentes apropiados



15














tetras y en cadenas












16




25degC)






Patologiacutea







oacutergano



toxina exfoliativa

Genero Shigellas







17




















el mismo mecanismo





coma)



18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















8







9



10

Objetivo General



Objetivo Especifico



concentraciones







11



12

MARCO TEOacuteRICO











comestibles







cultivo acuosos






13




























14



















acuosa








agentes apropiados



15














tetras y en cadenas












16




25degC)






Patologiacutea







oacutergano



toxina exfoliativa

Genero Shigellas







17




















el mismo mecanismo





coma)



18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















9



10

Objetivo General



Objetivo Especifico



concentraciones







11



12

MARCO TEOacuteRICO











comestibles







cultivo acuosos






13




























14



















acuosa








agentes apropiados



15














tetras y en cadenas












16




25degC)






Patologiacutea







oacutergano



toxina exfoliativa

Genero Shigellas







17




















el mismo mecanismo





coma)



18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















10

Objetivo General



Objetivo Especifico



concentraciones







11



12

MARCO TEOacuteRICO











comestibles







cultivo acuosos






13




























14



















acuosa








agentes apropiados



15














tetras y en cadenas












16




25degC)






Patologiacutea







oacutergano



toxina exfoliativa

Genero Shigellas







17




















el mismo mecanismo





coma)



18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















11



12

MARCO TEOacuteRICO











comestibles







cultivo acuosos






13




























14



















acuosa








agentes apropiados



15














tetras y en cadenas












16




25degC)






Patologiacutea







oacutergano



toxina exfoliativa

Genero Shigellas







17




















el mismo mecanismo





coma)



18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















12

MARCO TEOacuteRICO











comestibles







cultivo acuosos






13




























14



















acuosa








agentes apropiados



15














tetras y en cadenas












16




25degC)






Patologiacutea







oacutergano



toxina exfoliativa

Genero Shigellas







17




















el mismo mecanismo





coma)



18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















13




























14



















acuosa








agentes apropiados



15














tetras y en cadenas












16




25degC)






Patologiacutea







oacutergano



toxina exfoliativa

Genero Shigellas







17




















el mismo mecanismo





coma)



18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















14



















acuosa








agentes apropiados



15














tetras y en cadenas












16




25degC)






Patologiacutea







oacutergano



toxina exfoliativa

Genero Shigellas







17




















el mismo mecanismo





coma)



18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


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Pag 695



Pag




May g Willuhn g



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Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















15














tetras y en cadenas












16




25degC)






Patologiacutea







oacutergano



toxina exfoliativa

Genero Shigellas







17




















el mismo mecanismo





coma)



18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



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Muestras

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1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


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Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


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45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















16




25degC)






Patologiacutea







oacutergano



toxina exfoliativa

Genero Shigellas







17




















el mismo mecanismo





coma)



18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















17




















el mismo mecanismo





coma)



18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















18




2 Protista

3 Fungi

4 Plantae

5 Animalia



















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















19


























20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















20


Gram(-)
























21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















21







de ciertos hongos












maacutes complejas








22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


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Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















22














sangre





forman plasmodios









23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















23





























24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















24















A modo de resumen






divisioacuten)








25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















25


























26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















26


las bacterias














gemacioacuten





pulmones etc







27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















27



Reino Fungi



























28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















28



29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















29


















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



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Muestras

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Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


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Pag




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Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















30











del microorganismo


pneumoiae













31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



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Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


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3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




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45


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May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

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46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















31













horas










32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

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Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















32















4 Reactivos




33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















33

5 Cepas





34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















34



35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















35

RESULTADOS



Diluyentes

Muestra


36a 13a36b 28a77b 33a91 b 13a36b 12a33b 17a47b2

36a 20a46b 27a75b 23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


Diluyentes

Muestra


36a 21a58b 26a72b 2775b 12a33b 20a36b 18a50b 1

36a 13a36b 32a88b 34a94 b

13a36b 12a33b 17a47b2

36a 13a32b 30a83

b23a63b 20a55b 20a55b 22a61b 3


lt 10 10-100 100-1000 gt1000





20 NMP 3 75 3 37 3 32 1 6




80 NMP 1 58 2 52 2 22 2 3



36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









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Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




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45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

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46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















36


Diluyentes

Muestra


36a 00a0b 31a86 b

33 a91 b

10a27b 07a19b 11a21b 1

36a 13a36b 22

a61 b33a91 b

14a38b 04a11b 13a36b2

36a 20a46b 27

a75 b29 a80 b

21a58b 08a22b 21a58b 3



lt 10 10-100 100-1000 gt1000

Numero de

Muestras

Meacutetodo de

Recuento TSA SB C V

B TSA SB CV



1









37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




Pag 184-186





45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















37




Dia 1 Dia 2 Dia 3

Numeros de

Ensayo







38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




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45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

Pag 695



Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

Pag 642 645



46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















38



39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




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45


Gessner G Hawley

Ediciones omega SA

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Pag




May g Willuhn g



Arta-ur-rahman 1993

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46



47

ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















39






mililitro









estudio



40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

Bibliografiacutea


1 Void R Bunschen M



Pag 483 497-499


Microbiologiacutea


pag 208 209 475 476 514

3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




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45


Gessner G Hawley

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Pag




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Arta-ur-rahman 1993

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46



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ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















40



41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

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Microbiologiacutea


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3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



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5 Hardman J




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ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















41

CONCLUSIONES













20







42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

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Microbiologiacutea


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3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



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5 Hardman J




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46



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ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















42



43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

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ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















43

RECOMENDACIONES











oxitetraciclina)





44

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Microbiologiacutea


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3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



Pag 903 904 905

5 Hardman J




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ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















44

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Microbiologiacutea


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3 9) Jawetz Ernst



Pag 32 49 50



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5 Hardman J




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46



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ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








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autoclavado






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GLOSARIO
















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ANEXOS


CepasATCC






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Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








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autoclavado






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GLOSARIO
















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ANEXOS


CepasATCC






48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






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GLOSARIO
















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ANEXOS


CepasATCC






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Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















48

Anexo No 2








49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















49





Homogenizar




50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















50


Pesar 40 g de Acaso







51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















51







52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















52

ANEXO Ndeg6








53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















53



autoclavado






54



55

GLOSARIO
















54



55

GLOSARIO
















55

GLOSARIO














influencia del diluyente en la recuperación de

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