hepatitis b oculta

Hepatitis B OcultaHepatitis B Oculta

"Programa de Educación Permanente" "Programa de Educación Permanente" de la Asociación Argentina de de la Asociación Argentina de

Hemoterapia e InmunohematologíaHemoterapia e Inmunohematología

28 de Agosto de 201328 de Agosto de 2013

"Programa de Educación Permanente" "Programa de Educación Permanente" de la Asociación Argentina de de la Asociación Argentina de

Hemoterapia e InmunohematologíaHemoterapia e Inmunohematología

28 de Agosto de 201328 de Agosto de 2013

Diego FlichmanDiego FlichmanFacultad de Farmacia y BioquímicaFacultad de Farmacia y Bioquímica

Universidad de Buenos AiresUniversidad de Buenos Aires

[email protected]@ffyb.uba.ar

Diego FlichmanDiego FlichmanFacultad de Farmacia y BioquímicaFacultad de Farmacia y Bioquímica

Universidad de Buenos AiresUniversidad de Buenos Aires

[email protected]@ffyb.uba.ar

A.A. Mas de Mas de 350 millones de personas infectadas 350 millones de personas infectadas en el mundo (> 5%).en el mundo (> 5%).

B.B. Incidencia anual ~ 50 millones de casos.Incidencia anual ~ 50 millones de casos.

B. Agente causal de ~ 600,000 muertes por año.B. Agente causal de ~ 600,000 muertes por año.

C. El 70-90% de las infecciones perinatales evolucionan a la cronicidad.C. El 70-90% de las infecciones perinatales evolucionan a la cronicidad.

D. En áreas de África y el este asiático 50% de la población es seropositiva, D. En áreas de África y el este asiático 50% de la población es seropositiva, 5 - 15 % infectada crónicamente. 5 - 15 % infectada crónicamente.

E. Los portadores tienen una probabilidad 200 veces mayor de desarrollar E. Los portadores tienen una probabilidad 200 veces mayor de desarrollar hepatocarcinoma.hepatocarcinoma.

F. Es el agente causal del ~80 % de los hepatocarcinomas en el mundo.F. Es el agente causal del ~80 % de los hepatocarcinomas en el mundo.

A.A. Mas de Mas de 350 millones de personas infectadas 350 millones de personas infectadas en el mundo (> 5%).en el mundo (> 5%).

B.B. Incidencia anual ~ 50 millones de casos.Incidencia anual ~ 50 millones de casos.

B. Agente causal de ~ 600,000 muertes por año.B. Agente causal de ~ 600,000 muertes por año.

C. El 70-90% de las infecciones perinatales evolucionan a la cronicidad.C. El 70-90% de las infecciones perinatales evolucionan a la cronicidad.

D. En áreas de África y el este asiático 50% de la población es seropositiva, D. En áreas de África y el este asiático 50% de la población es seropositiva, 5 - 15 % infectada crónicamente. 5 - 15 % infectada crónicamente.

E. Los portadores tienen una probabilidad 200 veces mayor de desarrollar E. Los portadores tienen una probabilidad 200 veces mayor de desarrollar hepatocarcinoma.hepatocarcinoma.

F. Es el agente causal del ~80 % de los hepatocarcinomas en el mundo.F. Es el agente causal del ~80 % de los hepatocarcinomas en el mundo.

Relevancia de HBVRelevancia de HBV

P

GlicoproteíaHBsAg

Genoma3,2 kb ADN

parcialmente doble cadena de circular laxo

CoreHBcAg

Polimerasa

Envoltura

EstructuraEstructura

P

PAdsorción

Liberación denucleocápsides

Liberación delgenoma

ReparacióncccADN

P

PRT

pC mRNApC mRNA

S mRNAS mRNA

X mRNAX mRNAX mRNAX mRNA

pg mRNApg mRNA

Transcripción

AntígenosAntígenos AnticuerposAnticuerpos

HBsAgHBsAg anti-HBs anti-HBs HBeAgHBeAg anti-HBe anti-HBe

anti-HBcanti-HBc

2 Enhancers

4 Promotores

4 Marcos de lectura

7 Proteinas

Organización genéticaOrganización genética

pCpC

XX

preS1 preS2

SS

Core

Core

Genoma: ADN parcialmente doble cadena de 3,2 kb circular laxo

HBV ADN+-EnhEnhIIEnhEnh

IIII

S1S1

prom

prom

S2S2promprom

XXpromprom

BCPBCP

AR

Nm

SL

AR

Nm

SM

Semanas post exposición0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 años

TítuloTotal anti-HBc

IgM anti-HBc

Anti-HBs

Semanas post exposiciónSemanas post exposición0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 años

Título Total anti-HBc

IgM anti-HBc

HBsAg

HBV-ADN

HBsAgHBsAg --

antiHBcantiHBc +/-+/-

HBV-ADNHBV-ADN ++

??

HBsAgHBsAg --

antiHBcantiHBc +/-+/-

HBV-ADNHBV-ADN ++

??

HBsAgHBsAg --

antiHBcantiHBc ++

HBV-ADNHBV-ADN --

Infección resueltaInfección resuelta

HBsAgHBsAg --

antiHBcantiHBc ++

HBV-ADNHBV-ADN --

Infección resueltaInfección resuelta

HBsAgHBV-ADN HBsAgHBsAg ++

antiHBcantiHBc ++

HBV-ADNHBV-ADN ++

Infección crónicaInfección crónica

HBsAgHBsAg ++

antiHBcantiHBc ++

HBV-ADNHBV-ADN ++

Infección crónicaInfección crónica

Curso serológico Curso serológico

En su interacción con el hospedador el virus explora En su interacción con el hospedador el virus explora

todos los caminos posibles con la finalidad de todos los caminos posibles con la finalidad de

permanecer en la naturalezapermanecer en la naturaleza

En su interacción con el hospedador el virus explora En su interacción con el hospedador el virus explora

todos los caminos posibles con la finalidad de todos los caminos posibles con la finalidad de

permanecer en la naturalezapermanecer en la naturaleza

Reseña historicaReseña historica

HBV-ADN en suero <10HBV-ADN en suero <1033 copias/ml copias/ml

SeronegativaSeronegativa

HBsAg negativoHBsAg negativoantiHBc negativoantiHBs negativoantiHBe negativo

SeronegativaSeronegativa

HBsAg negativoHBsAg negativoantiHBc negativoantiHBs negativoantiHBe negativo

SeropositivaSeropositiva

HBsAg negativoHBsAg negativoantiHBc positivopositivoantiHBs positivopositivo / negativoantiHBe positivopositivo / negativo

SeropositivaSeropositiva

HBsAg negativoHBsAg negativoantiHBc positivopositivoantiHBs positivopositivo / negativoantiHBe positivopositivo / negativo

1.1. VirusVirus

2.2. HospedadorHospedador

1.1. VirusVirus

2.2. HospedadorHospedador

HBsAg HBsAg 1.1.No se produceNo se produce

2.2.Se produce en concentraciones no detectablesSe produce en concentraciones no detectables

3.3.Se produce una variante no detectable por los métodos convencionalesSe produce una variante no detectable por los métodos convencionales

HBsAg HBsAg 1.1.No se produceNo se produce

2.2.Se produce en concentraciones no detectablesSe produce en concentraciones no detectables

3.3.Se produce una variante no detectable por los métodos convencionalesSe produce una variante no detectable por los métodos convencionales

HBV oculta (OBI)HBV oculta (OBI)HBV-ADN en hígadoHBV-ADN en hígado

1.1. Cuál es la frecuencia de ocurrencia de la OBI?Cuál es la frecuencia de ocurrencia de la OBI?

2.2. Cuál es la frecuencia de hepatitis post-transfusonal a partir de OBI?Cuál es la frecuencia de hepatitis post-transfusonal a partir de OBI?

3.3. Cómo diagnosticar la OBI?Cómo diagnosticar la OBI?

4.4. Cuales son los mecanismos que conllevan a OBI?Cuales son los mecanismos que conllevan a OBI?

1.1. Cuál es la frecuencia de ocurrencia de la OBI?Cuál es la frecuencia de ocurrencia de la OBI?

2.2. Cuál es la frecuencia de hepatitis post-transfusonal a partir de OBI?Cuál es la frecuencia de hepatitis post-transfusonal a partir de OBI?

3.3. Cómo diagnosticar la OBI?Cómo diagnosticar la OBI?

4.4. Cuales son los mecanismos que conllevan a OBI?Cuales son los mecanismos que conllevan a OBI?

InterrogantesInterrogantes

• Prevalencia de HBV en la región• Población en estudio

1.1. Grupos de riesgo1.2. Coinfectados con otros agentes virales (HCV, HIV)1.3. Donantes de sangre

3.1. Metodología para la detección

4.1. Mutaciones y deleciones en el genoma viral4.2. Coinfecciones con otros agentes virales4.3. Respuesta inmune del hospedador4.4. Cambios epigenéticos

2.1. Estado inmunológico del receptor2.2. Nivel de anti-HBs

1. Cuál es la frecuencia de ocurrencia de la OBI?1. Cuál es la frecuencia de ocurrencia de la OBI?• Prevalencia de HBV en la región• Población en estudio

1.1. Grupos de riesgo1.2. Coinfectados con otros agentes virales1.3. Donantes de sangre

Coinfectados HCV 15-33%

Coinfectados HIV 10-45%

Hepatitis criptogénica 32 %

Dializados 27%

Hepatocarcinoma 62%

Coinfectados HCV 15-33%

Coinfectados HIV 10-45%

Hepatitis criptogénica 32 %

Dializados 27%

Hepatocarcinoma 62%

Cacciola I, N. Engl. J. Med. 1999

Gupta S, 2010. BMC Infect. Dis. 2010

Chan HL, Am. J. Gastroenterol 2002

Di Stefano M, J. Nephrol. 2009.

Hassan ZK, Virol. J. 2011

Cacciola I, N. Engl. J. Med. 1999

Gupta S, 2010. BMC Infect. Dis. 2010

Chan HL, Am. J. Gastroenterol 2002

Di Stefano M, J. Nephrol. 2009.

Hassan ZK, Virol. J. 2011

Frecuencia en coinfectados con HCVFrecuencia en coinfectados con HCV250 pacientes con hepatitis crónica (HBsAg negativo)

200 anti-HCV +

Biopsias de hígado

•Occult hepatitis B virus infection in patients with chronic hepatitis C liver diseaseOccult hepatitis B virus infection in patients with chronic hepatitis C liver disease. Cacciola I. N Engl J Med1999.

HBV-ADN + en hígado 29%

HBV-ADN + en suero 18%

Anti-HBc

Anti-HCV

<0.001

<0.001n:73

45 de las 73 ADN-HBV+ en suero

1123 pacientes 160 anti-HBc 1 HBV-ADN

100 tratados con ATV (LAM/TFV) 1 muestra/pacienteCOBAS Amplicor HBV Monitor (200 cp/ml)

1123 pacientes 160 anti-HBc 1 HBV-ADN

100 tratados con ATV (LAM/TFV) 1 muestra/pacienteCOBAS Amplicor HBV Monitor (200 cp/ml)

2071pacientes 57 anti-HBc (33 anti-HCV) 51 HBV-ADN 89.5%

Sin tratamiento 3,5 muestras/paciente Nested PCR de 2 regiones (Core y S)

2071pacientes 57 anti-HBc (33 anti-HCV) 51 HBV-ADN 89.5%

Sin tratamiento 3,5 muestras/paciente Nested PCR de 2 regiones (Core y S)

Frecuencia en coinfectados con HIVFrecuencia en coinfectados con HIV

•Frequent chronic hepatitis B virus infection in HIV-infected patients positive for antibody to hepatitis B coreFrequent chronic hepatitis B virus infection in HIV-infected patients positive for antibody to hepatitis B core antigen only. Swiss HIV Cohort Study. Hofer M, antigen only. Swiss HIV Cohort Study. Hofer M, Eur J Clin Microbiol Infect Dis1998.•Occult hepatitis B virus infection in HIV-infected patients with isolated antibodies to hepatitis B core antigen:Occult hepatitis B virus infection in HIV-infected patients with isolated antibodies to hepatitis B core antigen: Aquitaine cohort, 2002-2003. Aquitaine cohort, 2002-2003. Neau D, Clin Infect Dis. 2005.

15 persistente (26.3%)36 intermitente (63.2%)

Frecuencia en donantes de sangreFrecuencia en donantes de sangre

• Impact of nucleic acid testing for hepatitis B virus, hepatitis C virus, and human immunodeficiency virus on theImpact of nucleic acid testing for hepatitis B virus, hepatitis C virus, and human immunodeficiency virus on the safety of blood supply in Italy: a 6-year surveysafety of blood supply in Italy: a 6-year survey. Velati C, Transfusion 2008.

3.405.497 donantes3.405.497 donantes 197 HBsAg- /HBV-DNA+HBV-DNA+ 8 período ventana (2001-2006) 189 OBI (0.055‰)3.405.497 donantes3.405.497 donantes 197 HBsAg- /HBV-DNA+HBV-DNA+ 8 período ventana (2001-2006) 189 OBI (0.055‰)

anti-HBe +

anti-HBc +

anti-HBs +

anti-HBc +

anti-HBe +

anti-HBs +

anti-HBc +

anti-HBc +

189 casos

64 (74.5%) 10 mIU/mlanti-HBsanti-HBs

22 (25.5%) < 10 mIU/ml

64 (74.5%) 10 mIU/mlanti-HBsanti-HBs

22 (25.5%) < 10 mIU/ml

4343

146146

(10-24)

•Type B hepatitis after transfusion with blood containing antibody to hepatitis B core Type B hepatitis after transfusion with blood containing antibody to hepatitis B core

antigen. antigen. Hoofnagle JH, N Engl J Med. 1978.

•A European perspective on the management of donors and units testing positive for A European perspective on the management of donors and units testing positive for

hepatitis B virus DNAhepatitis B virus DNA. Allain JP, Transfusion 2006.

•Transmission of occult hepatitis B virus by transfusion to adult and pediatric Transmission of occult hepatitis B virus by transfusion to adult and pediatric

recipients in Taiwanrecipients in Taiwan. Liu CJ, J Hepatol. 2006.

• Infectivity of blood components with low hepatitis B virus DNA levels identified in a Infectivity of blood components with low hepatitis B virus DNA levels identified in a

lookback programlookback program. Satake M, Transfusion 2007.

•HBsAg non-reactive HBV infection in blood donors: transmission and pathogenicityHBsAg non-reactive HBV infection in blood donors: transmission and pathogenicity.

Gerlich WH, J Med Virol 2007.

• Anti-HBs positive occult hepatitis B virus carrier blood infectious in two transfusion Anti-HBs positive occult hepatitis B virus carrier blood infectious in two transfusion

recipients. recipients. Levicnik-Stezinar S, Hepatol. 2008.

•Type B hepatitis after transfusion with blood containing antibody to hepatitis B core Type B hepatitis after transfusion with blood containing antibody to hepatitis B core

antigen. antigen. Hoofnagle JH, N Engl J Med. 1978.

•A European perspective on the management of donors and units testing positive for A European perspective on the management of donors and units testing positive for

hepatitis B virus DNAhepatitis B virus DNA. Allain JP, Transfusion 2006.

•Transmission of occult hepatitis B virus by transfusion to adult and pediatric Transmission of occult hepatitis B virus by transfusion to adult and pediatric

recipients in Taiwanrecipients in Taiwan. Liu CJ, J Hepatol. 2006.

• Infectivity of blood components with low hepatitis B virus DNA levels identified in a Infectivity of blood components with low hepatitis B virus DNA levels identified in a

lookback programlookback program. Satake M, Transfusion 2007.

•HBsAg non-reactive HBV infection in blood donors: transmission and pathogenicityHBsAg non-reactive HBV infection in blood donors: transmission and pathogenicity.

Gerlich WH, J Med Virol 2007.

• Anti-HBs positive occult hepatitis B virus carrier blood infectious in two transfusion Anti-HBs positive occult hepatitis B virus carrier blood infectious in two transfusion

recipients. recipients. Levicnik-Stezinar S, Hepatol. 2008.

2. Infección de HBV por transfusión de OBI2. Infección de HBV por transfusión de OBI

•Anti-HBs positive occult hepatitis B virus carrier blood infectious in two transfusion recipients. Anti-HBs positive occult hepatitis B virus carrier blood infectious in two transfusion recipients. Levicnik-Stezinar S Hepatol. 2008.

2. Infección de HBV por transfusión de OBI2. Infección de HBV por transfusión de OBI

2 muestras negativas

Detectable por métodos in house pero no por métodos comerciales

14 donaciones previas y 1 posterior no fueron infectivas

Metodología para la detecciónMetodología para la detección

• Nested PCR con elevado limite de sensibilidadNested PCR con elevado limite de sensibilidad

• Diferentes regiones del virus (PreCore, Polimerasa, gen X)Diferentes regiones del virus (PreCore, Polimerasa, gen X)

• Muestras secuenciales (viremia Muestras secuenciales (viremia intermitente en OBI)intermitente en OBI)

• Muestra analizada (tejido hepático vs suero)Muestra analizada (tejido hepático vs suero)




• Muestras secuenciales (viremia Muestras secuenciales (viremia intermitente en OBI)intermitente en OBI)

• Muestra analizada (tejido hepático vs suero)Muestra analizada (tejido hepático vs suero)

3. Cómo diagnosticar la OBI?3. Cómo diagnosticar la OBI?

• Reactivity of 13 in vitro expressed hepatitis B surface antigen variants in 7 commercial diagnostic assays. Reactivity of 13 in vitro expressed hepatitis B surface antigen variants in 7 commercial diagnostic assays. Ireland JH, Hepatology. 2000.

• Sensibilidad de los kits de HBsAgSensibilidad de los kits de HBsAg• Sensibilidad de los kits de HBsAgSensibilidad de los kits de HBsAg




• Muestras secuenciales (Muestras secuenciales (intermitente en la viremia puede ocurrir en OBI)intermitente en la viremia puede ocurrir en OBI)

• Detección en tejido hepático (biopsias)Detección en tejido hepático (biopsias)




• Muestras secuenciales (Muestras secuenciales (intermitente en la viremia puede ocurrir en OBI)intermitente en la viremia puede ocurrir en OBI)

• Detección en tejido hepático (biopsias)Detección en tejido hepático (biopsias)

• Sensibilidad de los kits de HBsAgSensibilidad de los kits de HBsAg• Sensibilidad de los kits de HBsAgSensibilidad de los kits de HBsAg

3. Cómo diagnosticar la OBI?3. Cómo diagnosticar la OBI?

• Reactivity of 13 in vitro expressed hepatitis B surface antigen variants in 7 commercial diagnostic assays. Reactivity of 13 in vitro expressed hepatitis B surface antigen variants in 7 commercial diagnostic assays. Ireland JH, Hepatology. 2000.

4. 4. Mecanismos que conllevan a OBI?Mecanismos que conllevan a OBI?

4.1. Mutaciones y deleciones en el genoma viral4.1. Mutaciones y deleciones en el genoma viral

4.2. Coinfecciones con otros agentes virales4.2. Coinfecciones con otros agentes virales

4.3. Respuesta inmune del hospedador4.3. Respuesta inmune del hospedador

4.4. Cambios epigenéticos4.4. Cambios epigenéticos





•Molecular genesis of drug-resistant and vaccine-escape HBV mutants. Molecular genesis of drug-resistant and vaccine-escape HBV mutants. Locarnini SA, Antivir Ther 2010.

• HBV transmission from an occult carrier with five mutations in the major hydrophilic region of HBsAg to anHBV transmission from an occult carrier with five mutations in the major hydrophilic region of HBsAg to an immunosuppressed plasma recipient. immunosuppressed plasma recipient. Coppola N. J Clin Virol. 2013.


• Mutaciones en el determinante “a” (Falsas OBI, generalmente HBV-ADN >104 copis/ml)

Nucleocapside

HBV-DNA

HBsAg

I III VII IV

COOH

NH2

Determinante a

G145G145

137147

139

RHRHTPTP RT

• Mutaciones asociadas a tratamiento con análogos

833SpacerSpacerTerminalProtein

SSS2S2S1S1CC CC

EG A B C DF

Envoltura Polimerasa Afinidad (IC50 µg/ml)

Wild type Wild type 1G145R W153Q >55.0D144E/G145R G153E >55.0

F158Y F166L 1.86E164D V173L 14.86W196S M204I 8.29I195M M204V 5.26M198I V207I 12.50E164D/I195M V173L//L180M/M204V 54.53


•Occult hepatitis B virus infection in chronic liver disease: full-length genome and analysis of mutant surfaceOccult hepatitis B virus infection in chronic liver disease: full-length genome and analysis of mutant surface promoter. promoter. Chaudhuri V, Gastroenterology. 2004.Gastroenterology. 2004.

• Mutaciones en el determinante “a” (Falsas OBI, generalmente HBV-ADN >10Falsas OBI, generalmente HBV-ADN >1044 copis/ml copis/ml)

• Mutaciones asociadas a tratamiento con análogos

• Mutaciones en el promotor del gen S

591 HBsAg negativo591 HBsAg negativo 56 HBV-ADN positivo56 HBV-ADN positivo 9 secuenciados GC9 secuenciados GC

HNF-1HNF-1: 5-GTTAATCATTACT-3'

HNF-3HNF-3: 5'-CGTCCGCGGTGA3'

Sp1Sp1: 5'-(G/T)GGGCGG(G/A)(G/A)(C/T)-3'

•Occult hepatitis B virus infection in chronic liver disease: full-length genome and analysis of mutant surfaceOccult hepatitis B virus infection in chronic liver disease: full-length genome and analysis of mutant surface promoter. promoter. Chaudhuri V, Gastroenterology. 2004.

ARNm SL

ARNm SM


SpacerSpacerTerminalProtein

SSS2S2S1S1

G AF

S1 promoterS1 promoter

TBP Sp1

HNF-1 S2 promoterS2 promoter

HNF-3 Sp1 Sp1 Sp1

S3.2

Wild type

S5.1

S8.1

S3.1TAC GTTAC GT

CAA CTCAA CT

TAC GTTAC GT

TAC GTTAC GT

SM

SS

20 1

10 10

70 89

SL

Esférica

Partícula de Dane P

Tubular


HBx activa la transcripción

HCVHCVCoreCore

Se une a la polimerasa e inhibe la encapsidación

Se une a la HBx e inhibe la expresión de HBV

•Mechanisms for inhibition of hepatitis B virus gene expression and replication by hepatitis C virus core protein. Mechanisms for inhibition of hepatitis B virus gene expression and replication by hepatitis C virus core protein. Chen SY, J Biol Chem. 2003 .


HospedadorHospedador VirusVirus

Evolución de la

infección

Evolución de la

infección

•Cytokine expression during chronic versus occult hepatitis B virus infection in HIV co-infected individuals. Cytokine expression during chronic versus occult hepatitis B virus infection in HIV co-infected individuals. Martin CM, Cytokine. 2009.• Assessment of CXCL12 (SDF-1alpha) polymorphisms and its serum level in posttransfusion occult HBV-Assessment of CXCL12 (SDF-1alpha) polymorphisms and its serum level in posttransfusion occult HBV-infected patients in Southeastern Iraninfected patients in Southeastern Iran. Hassanshahi G, Arch. Med. Res 2010.

ApoptosisApoptosis

InmunosupresiónInmunosupresión

Células TCélulas T

Receptor de la Receptor de la vitamina Dvitamina D

sFas modula la expresión de HBsAg

Respuesta específica no

citolítica

Reactivación en individuos anti-HBs

Polimorfismos del receptor regulan la

expresión de HBV

RespuestaRespuestainmuneinmune


•Cytokine expression during chronic Cytokine expression during chronic versus occult hepatitis B virus versus occult hepatitis B virus infection in HIV co-infected infection in HIV co-infected individuals. individuals. Martin CM, Cytokine. 2009.• Assessment of CXCL12 (SDF-Assessment of CXCL12 (SDF-1alpha) polymorphisms and its serum 1alpha) polymorphisms and its serum level in posttransfusion occult HBV-level in posttransfusion occult HBV-infected patients in Southeastern Iraninfected patients in Southeastern Iran. Hassanshahi G, Arch. Med. Res 2010.

Viral clearance without destruction of Viral clearance without destruction of infected. infected. Guidotti LG, Sciece 1999.

Reactivation of Reactivation of hepatitis B virus infection after hepatitis B virus infection after cytotoxic chemotherapy or immunosuppressive cytotoxic chemotherapy or immunosuppressive therapytherapy. Manzano-Alonso ML, World J. Gastroenterol. 2011.

Vitamin D receptor gene polymorphisms and Vitamin D receptor gene polymorphisms and distinct clinical phenotypes of hepatitis B distinct clinical phenotypes of hepatitis B carriers in Taiwan. carriers in Taiwan. Huang YW,. Genes Immun. 2010


•Cytokine expression during chronic versus occult hepatitis B virus infection in HIV co-infected individuals. Cytokine expression during chronic versus occult hepatitis B virus infection in HIV co-infected individuals. Martin CM, Cytokine. 2009.• Assessment of CXCL12 (SDF-1alpha) polymorphisms and its serum level in posttransfusion occult HBV-Assessment of CXCL12 (SDF-1alpha) polymorphisms and its serum level in posttransfusion occult HBV-infected patients in Southeastern Iraninfected patients in Southeastern Iran. Hassanshahi G, Arch. Med. Res 2010.

Apoptosis

pC

XX

preS1 preS2

SS

Core

Core

EnhEnhIIEnhEnh

IIII

S1S1

promprom

S2S2promprom

XXpromprom

BCPBCP


CpG

3C

p G 3

CpG 1CpG 1

CpG 2 CpG 2

• La metilación de regiones ricas en CpG es un mecanismo celular para regular la expresión del genes. (no metilado , metilado ).

• HBV contiene 3 “islas CpG” (isla 1isla 1: 7 sitios, isla 2isla 2: 25 sitios, isla 3:isla 3: 13 sitios).

• HBV induce la expresión de DNMTs.

HBV

Silenciamiento del gen

Hepatocito

Expresiónde proteínas

virales

Inducción de DNMTs

TACGTACGCGCGGAATACGAATACCGCGCCCC

MeMeMeMe

Metilación de CpG

• Methylation regulates hepatitis B viral protein expressionMethylation regulates hepatitis B viral protein expression. Vivekanandan P, J. Infect. Dis. 2009.• Hepatitis B virus replication induces methylation of both host and viral DNA. Hepatitis B virus replication induces methylation of both host and viral DNA. Vivekanandan P, J. Virol 2010.• DNA Methylation of Hepatitis B Virus (HBV) Genome Associated with the Development of HepatocellularDNA Methylation of Hepatitis B Virus (HBV) Genome Associated with the Development of Hepatocellular Carcinoma and Occult HBV Infection. Carcinoma and Occult HBV Infection. Pushpinder Kaur, J Infect Dis. 2010.• Replicative activity of hepatitis B virus is negatively associated with methylation of covalently Replicative activity of hepatitis B virus is negatively associated with methylation of covalently closed circular DNA in advanced hepatitis B virus infectionclosed circular DNA in advanced hepatitis B virus infection. Kim JW, Intervirology2011.

• Se demostró que el genoma de HBV se encuentra metilado en la célula hospedadora.

• Se observó una tasa de metilación significativa mayor en pacientes:1. con hepatocarcinoma y OBI.2. con cirrosis con baja carga viral.3. en pacientes antiHBe comparados con HBeAg.

• Se observó una tasa de metilación significativa mayor en pacientes:1. con hepatocarcinoma y OBI.2. con cirrosis con baja carga viral.3. en pacientes antiHBe comparados con HBeAg.


•. Evidence that methylation of hepatitis B virus covalently closed circular DNA in liver tissues of patients with . Evidence that methylation of hepatitis B virus covalently closed circular DNA in liver tissues of patients with chronic hepatitis B modulates HBV replication. chronic hepatitis B modulates HBV replication. Guo Y, J. Med. Virol. 2009.• DNA methylation of HBV genome associated with the development of hepatocellular carcinoma and occult HBVDNA methylation of HBV genome associated with the development of hepatocellular carcinoma and occult HBV infectioninfection. Kaur P, J Infect Dis. 2010.

Hepatitis crónica con OBI

HCC con OBI

HCC y cirrosis sin OBI

Tejido hepático de•6 Hepatitis crónica con OBI•6 HCC sin OBI•10 HCC con OBI

2- Riesgo de hepatitis post-transfusional2- Riesgo de hepatitis post-transfusional

• Es mayor debido al período ventana que a OBI (Carga viral).• La probabilidad es menor en muestras con título antiHBs >100 mIU/ml.• Depende del estado inmunológico del receptor.

2- Riesgo de hepatitis post-transfusional2- Riesgo de hepatitis post-transfusional

• Es mayor debido al período ventana que a OBI (Carga viral).• La probabilidad es menor en muestras con título antiHBs >100 mIU/ml.• Depende del estado inmunológico del receptor.

4- Mecanismo: 4- Mecanismo: multifactorial

• Interacción con otro virus (HCV).• Mutaciones y deleciones en el promotor del gen S.• Mutaciones asociadas al tratamiento ATV que afecten la tasa de replicación.• Metilación de islas CpG.

4- Mecanismo: 4- Mecanismo: multifactorial

• Interacción con otro virus (HCV).• Mutaciones y deleciones en el promotor del gen S.• Mutaciones asociadas al tratamiento ATV que afecten la tasa de replicación.• Metilación de islas CpG.

3- Detección3- Detección

• La detección en minipool es significativamente menor que en test individuales.• La viremia en OBI es intermitente, por lo cual el análisis de muestras

secuenciales aumenta la probabilidad de detección.• Nested PCR de diferentes regiones aumenta la probabilidad de detección.

3- Detección3- Detección

• La detección en minipool es significativamente menor que en test individuales.• La viremia en OBI es intermitente, por lo cual el análisis de muestras

secuenciales aumenta la probabilidad de detección.• Nested PCR de diferentes regiones aumenta la probabilidad de detección.

1- Frecuencia de OBI1- Frecuencia de OBI

• Depende del grupo en estudio y la prevalencia de HBV en la región.• OBI seropositiva > OBI negativa. (en la mayoría de los casos son anti-HBc +).• En donantes • anti-HBc + 1.00% (0 a 4.6%).• anti-HBc + / anti-HBs + 0.85% (0 a 3.5%)

1- Frecuencia de OBI1- Frecuencia de OBI

• Depende del grupo en estudio y la prevalencia de HBV en la región.• OBI seropositiva > OBI negativa. (en la mayoría de los casos son anti-HBc +).• En donantes • anti-HBc + 1.00% (0 a 4.6%).• anti-HBc + / anti-HBs + 0.85% (0 a 3.5%)

ResumenResumen

hepatitis b oculta

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