7/24/2019 Guia de Micronucleos Peces

1/2

METODO DE MICRONUCLEOS EN PECES

Blgo. F. Javier Alvarez A.

Curso de Toxicologa

Ingeniera Ambiental

Laboratorio de Mejora Gentica y Reproduccin Animal.

Facultad de Ciencias Naturales y Matemticas.

I. Equipos, reactivos y materiales.

Reactivos.

Giemsa 10%

Metanol

Aceite de inmersin.

Agua destilada.

Equipos:

Microscopio.

Materiales.

Laminas portaobjetos y cubreobjetos. (DEBE TRAER EL ALUMNO)

Cuchilla o bistur. (DEBE TRAER EL ALUMNO)

Cmara para laminas portaobjetos.

Pipetas Pasteur.

Muestra Biolgica:

Cada grupo de laboratorio debe traer 4 peces cebra adultos de aprox. 5 cm.

7/24/2019 Guia de Micronucleos Peces

2/2

II. Mtodo.

1. Se seleccionan los peces y se sacrifican realizando un corte en la parte anterior del

mismo, entre el oprculo y las aletas pectorales, con la finalidad de obtener la

sangre perifrica.

2. Se colecta la sangre perifrica colocando una gota de sangre en un extremo de la

lmina porta objeto e inmediatamente se realiza el frotis.

3. Se deja secar a temperatura ambiente por 15 minutos.

4. Se sumergen las muestras en Etanol Absoluto frio por 15 minutos. Luego se

procede a retirarlas y dejarlas secar por 15 minutos a temperatura ambiente.

5. Las lminas se colorean con GIEMSA al 10% por 8 minutos.

6.

Se lava con agua destilada para retirar el exceso de colorante y dejar seca por 1

hora a temperatura ambiente.

7. Finalmente se procede a la observacin microscpica para el conteo final. Se

utiliza 400X y 1000X (usamos aceite de inmersin).