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GENERALIDADES 1.1 QUÉ ES EL CONTROL BIOLÓGICO Es la eliminación de insectos, plantas o animales que se comportan como plagas, mediante organismos vivos considerados sus enemigos bajo condiciones naturales, mismos que el hombre cultiva y pone en contacto con las plagas. 1.2 QUÉ ES UNA PLAGA Con el término plaga se señala la existencia de organismos de muchos tipos, los hay vegetales y animales, quienes se caracterizan por atacar y destruir a otros organismos de utilidad para el hombre. Conforme se mejora genéticamente para la productividad a estos últimos, su protección contra las diferentes plagas disminuye, viéndose fácilmente atacados y destruidos. 1.3 QUÉ SE ENTIENDE POR ENEMIGO NATURAL Este organismo es similar en su origen a los que producen las plagas, sin embargo, los enemigos naturales no atacan a los organismos de utilidad para el hombre sino que atacan y matan a los organismos que producen las plagas. Bajo condiciones naturales, el número de enemigos naturales no es tan alto como el de los organismos plaga, por lo que el hombre los cultiva y posteriormente confronta con los organismos dañinos. 1.4 CÓMO SE ORIGINÓ EL CONTROL BIOLÓGICO Desde que el hombre comenzó a cultivar la tierra para obtener sus alimentos, involuntariamente dio lugar a la proliferación de insectos y plantas que se transformaron en plagas, destruyendo todo lo que se cultivara. En el siglo XVII, se concibió la idea de atacar a los organismos perjudiciales mediante organismos que actuaran como enemigos de ellos bajo condiciones naturales. 1.5 QUÉ FACTORES PROPICIAN EL ESTABLECIMIENTO DE PLAGAS EN EL AGOSTADERO 1

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GENERALIDADES•

1.1 QUÉ ES EL CONTROL BIOLÓGICO

Es la eliminación de insectos, plantas o animales que se comportan como plagas, mediante

organismos vivos considerados sus enemigos bajo condiciones naturales, mismos que el

hombre cultiva y pone en contacto con las plagas.

1.2 QUÉ ES UNA PLAGA

Con el término plaga se señala la existencia de organismos de muchos tipos, los hay

vegetales y animales, quienes se caracterizan por atacar y destruir a otros organismos de

utilidad para el hombre. Conforme se mejora genéticamente para la productividad a estos

últimos, su protección contra las diferentes plagas disminuye, viéndose fácilmente atacados

y destruidos.

1.3 QUÉ SE ENTIENDE POR ENEMIGO NATURAL

Este organismo es similar en su origen a los que producen las plagas, sin embargo, los

enemigos naturales no atacan a los organismos de utilidad para el hombre sino que atacan y

matan a los organismos que producen las plagas. Bajo condiciones naturales, el número de

enemigos naturales no es tan alto como el de los organismos plaga, por lo que el hombre los

cultiva y posteriormente confronta con los organismos dañinos.

1.4 CÓMO SE ORIGINÓ EL CONTROL BIOLÓGICO

Desde que el hombre comenzó a cultivar la tierra para obtener sus alimentos,

involuntariamente dio lugar a la proliferación de insectos y plantas que se transformaron en

plagas, destruyendo todo lo que se cultivara. En el siglo XVII, se concibió la idea de atacar

a los organismos perjudiciales mediante organismos que actuaran como enemigos de ellos

bajo condiciones naturales.

1.5 QUÉ FACTORES PROPICIAN EL ESTABLECIMIENTO DE PLAGAS EN EL

AGOSTADERO

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Son muchas las causas, pero una de las más importantes es el uso de químicos. Estos

productos provocan el desequilibrio ecológico al eliminar junto con las plagas, a los

organismos benéficos, que bajo condiciones naturales son los responsables del control de

las plagas. La utilización frecuente de plaguicidas químicos, selecciona individuos

resistentes a esos productos, y la resistencia es transmitida a las generaciones posteriores;

otra causa importante en la proliferación de poblaciones plaga, es la utilización o

introducción de una sola especie de forraje o zacate (monocultivo).

1.6 QUÉ ORGANISMOS SE UTILIZAN EN EL CONTROL BIOLÓGICO

Entre los organismos que pueden utilizarse en el control de diversas plagas, tales como

insectos, plantas, vertebrados, etc., se tiene a:

Insectos predatores. Animal artropodo, de respiración traqueal, cabeza provista de•

antenas y tres pares de patas.

Nemátodos parásitos. Dicese de los gusanos nematelmintos provistos de tubo•

digestivo, casi todos se alimentan o crece con sustancias producidas por otro a quien vive

asido.

Vertebrados predatores. Aplicase a los animales que tienen vertebras. Tipo de•

reino animal que forman estos animales y comprende los peces, los reptiles, los batracios,

las aves y los mamíferos.

Protozoarios. Dicese de los animales de cuerpos unicelular y de forma•

rudimentaria, como los ciliados o infusorios, los flagelados, los rizopodos, el hematozoario

del paludismo.

Hongos parásitos. Cualquier planta talofita, sin clorofila que vive como saprofita,•

parasita o en simbiosis.

1.6.6 Bacterias. Microorganismo vegatal unicelular, de forma alargada o esferica.

Virus. Microbio invisible con el microscopico ordinario, responsable de las•

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enfermedades contagiosas.

1.7 CUÁLES SON LOS PRINCIPALES OBJETIVOS DEL CONTROL BIOLÓGICO

El control biológico persigue objetivos definidos como son combatir plagas sin provocar

contaminación ambiental, disminuir el uso de productos químicos que generen acumulación

de residuos tóxicos, evitar resistencia en organismos y proteger a los organismos benéficos

o enemigos naturales de las plagas.

Insecto parásito; larva de una avispita Apanteles fulvipes, saliendo del cuerpo del

hospedero aun vivo, pero sentenciado a muerte. (Un gusano medidor de la palomilla

gitana), después de haberse alimentado del interior de su cuerpo durante varias semanas

(De U.S.D.A., Bur. Bul.91).

1.8 VENTAJAS.

Permanece bastante tiempo.

Fácil manejo.

Es muy seguro pues no produce toxicidad,

No contamina el ambiente.

Es muy económico comparado con el

Control químico.

1.9 CÓMO SE IMPLEMENTA

Introducción de especies exóticas.

Conservación de especies nativas.

Cría e incremento de los parasitoides para

Su posterior liberación.

QUÉ PLAGAS DEL AGOSTADERO SONORENSE PUEDEN CONTROLARSE•

BIOLÓGICAMENTE

En el agostadero de Sonora, es factible encontrar plagas de diversos tipos, que en un

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momento dado pueden ser controladas biológicamente, tal es el caso de la especie arbustiva

llamada rama blanca, y el insecto conocido como mosca pinta o salivazo de los pastos.

1.11 EXISTEN RESULTADOS DE CONTROL BIOLÓGICO SOBRE INSECTOS

En algunos países de los antes mencionados, ya hay resultados que indican la efectividad

del control biológico sobre insectos, por ejemplo: En Brasil, se ha utilizado una especie de

hongo que ataca a plagas de la caña de azúcar, obteniendo mortalidades de hasta 66% e

inclusive, existe ya una preparación comercial que es utilizada en las prácticas agrícolas. En

nuestro país, en el Estado de Colima particularmente, se han realizado pruebas de control

biológico usando diversas especies de hongos contra el gusano cogollero, logrando

resultados muy alentadores.

HAY RESULTADOS EN CUANTO AL CONTROL BIOLÓGICO CON CABRAS•

SOBRE ESPECIES ARBUSTIVAS INDESEABLES

En el CIPES, se llevó a cabo un experimento utilizando ganado caprino para el control de la

planta conocida como rama blanca, hierba ceniza o hierba del vaso, especie del tipo

indeseable en los agostaderos sonorenses, práctica con la cual se obtuvieron resultados de

hasta un 70% de control sobre la misma.

El escarabajo europeo de tierra, Colosoma aycophanta. Adulto, arriba alimentándose de una

pupa de la palomilla gitana, y la larva abajo, alimentándose de un gusano medidor de la

palomilla gitana. (De Mass. State Forester).

Mosca Sirfida. A, adulto de Didea fasciata; x, la falsa vena en el ala, que caracteriza a las

moscas de esta familia. (De metcalf, Maine Agr.Exp.Sta.Bul.253); C.larva alimentándose

de un pulgón (Tomado de un dibujo de Jones, Colo. Agr. Exp.Sta.); D. purparium de Didea

fasciata (De metcalf, from Ohio Naturalist).

Una avispa esfécida, Ammophila sp., introduciendo en su galería un gusano medidor

paralizado para que sirva como alimento de su descendencia. Cuando el nido es completado

y los huevecillos puestos, la avispa toma una pequeña piedrecita en sus mandíbulas y

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empaca la tierra, con la cual cierra su galería. (De Kellogg, "American Insects").

Una avista, Lysiphlebus testaceipes, depositando sus huevecillos en el cuerpo del pulgón de

la alfalfa. Muy aumentados. (De Essig. "Insects of Western North America"). En el CIPES,

se llevó a cabo un experimento utilizando ganado caprino para el control de la planta

conocida como rama blanca, hierba ceniza o hierba del vaso, especie del tipo indeseable en

los agostaderos sonorenses, práctica con la cual se obtuvieron resultados de hasta un 70%

de control sobre la misma.

LAS CABRAS: HERRAMIENTA EFECTIVA PARA EL CONTROL DE•

PLANTAS INDESEABLES

Cuando se utiliza el término "plantas indeseables" generalmente se piensa que se hace

referencia únicamente a aquellas que no consume el ganado o a las que por su toxicidad

provocan problemas y hasta la muerte del animal que las consume. Sin embargo, en esta

categoría también se incluyen algunas especies que tienen valor forrajero pero que son poco

consumidas por los bovinos, pero que al volverse tan abundantes limitan la producción de

mejores especies asociadas al competir por aire, agua, luz y nutrientes, lo que resulta

también en una menor calidad del forraje disponible.

Foto, la utilización de cabras en las praderas de zacate buffel, puede solucionar los

problemas de plantas indeseables, permitiendo recuperar la inversión realizada.

Este problema afecta tanto a los agostaderos nativos como a las praderas establecidas de

zacate buffel, por lo que se han venido realizado una serie de prácticas para tratar de

solucionarlo.

Entre las más comúnmente usadas podemos mencionar la aplicación de métodos mecánicos

como el desmonte, el chapeo, etc., píricos, o uso del fuego en quemas controladas, y

químicas, con el empleo de diferentes tipos de herbicidas, diesel, etc.

Foto, los hábitos alimenticios de las cabras, diferentes a los del ganado bovino, les permiten

consumir plantas que éste no incluye en su dieta.

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Desafortunadamente la mayoría de estas prácticas son costosas y no están al alcance de

muchos productores puesto que su aplicación requiere de equipo especial y ciertas medidas

preventivas. Además algunos de estos métodos eliminan el problema sólo en forma

temporal, y a la vuelta de algunos años, las plantas indeseables generalmente vuelven a

brotar y se multiplican hasta poblar los predios, sobre todo aquellos que siguen soportando

una carga animal más alta que la recomendada.

Una opción con potencial para solucionar estos problemas, que permita recuperar la

inversión realizada y en algunos casos una ganancia extra, la podría propiciar el uso de las

cabras, que aunque no son muy comunes en esta región, de todos es sabido que sus hábitos

alimenticios son diferentes a los del ganado bovino, consumiendo plantas que éste no

incluye en su dieta.

En muchas partes del mundo, con diferentes condiciones climáticas, topográficas y

distintos tipos de vegetación se han realizado estudios, donde se han observado que las

cabras poseen una gran habilidad para cambiar de dieta y utilizan más eficientemente los

pastizales con alta población de arbustos tales como gatuno, vinorama, chírahui,

gobernadora, chiricua, etc., sin dañar a las especies forrajeras.

También tienen la ventaja de no ser una diseminadora natural de semillas porque mastica

muy bien y tiene una gran capacidad para digerir sus alimentos, de tal manera que las

semillas que la cabra consume, pierden su capacidad para germinar.

En el PATROCIPES se han llevado a cabo estudios tendientes a determinar el efecto del

ramoneo por las cabras sobre los arbustos tomando en cuenta la estación del año, que tiene

un efecto directo sobre la vegetación y la disponibilidad de forraje, y por lo tanto, afectan la

selección y consumo por parte de los animales.

En estos estudios se observó que aunque las cabras consumen arbustos durante todo el año,

la utilización en los meses de invierno es más intensa debido a la falta de zacates verdes y

suculentos.

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Esto influye en la sobrevivencia de los arbustos al eliminárseles una gran cantidad de hojas

y corteza de los tallos.

En una pradera de zacate buffel con una alta población de rama blanca (Cuadro 1) se

realizó un estudio durante tres años consecutivos, pastoreando con cabras adultas cuatro

potreros de una hectárea cada uno en forma rotacional−estacional de tal manera que cada

uno de éstos fue utilizado siempre en la misma estación.

Las cabras pueden ser utilizadas en combinación con el ganado bovino para aprovechar la

vegetación que no es consumida por éste.

El número de cabras por hectárea que en promedio fue de 12, establecido de acuerdo a la

disponibilidad de forraje determinada al inicio del período y al tiempo de pastoreo, que era

de 90 días en cada potrero.

CUADRO 1. Densidad de la rama blanca por potrero pastoreado en cada estación durante

los tres años de estudio.

AÑO DEPASTOREO

PRIMAVERA VERANO OTOÑO INVIERNO

(Plantas por hectárea)

1987 2653 1343 4306 1389

1988 1980 1313 2172 586

1989 1367 956 2192 106

Los resultados obtenidos muestran una fuerte utilización de la rama blanca durante todo el

año, siendo la más alta en el potrero pastoreado durante el invierno, donde fue de 67% para

tallos y más del 80% de las hojas y la mortalidad de las plantas fue arriba del 90% para el

tercer año, sin efectos negativos para la población de zacates.

El pastoreo con cabras también puede ser usado en combinación con otras prácticas de

mejoramiento, para hacer más efectivo el control, pues se ha visto que las cabras pueden

mantenerse después de la aplicación de estos métodos, sin afectar negativamente la

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condición del pastizal.

También pueden ser utilizadas en combinación con el ganado bovino para aprovechar la

vegetación que no es usada por éste, haciendo más eficiente el uso de este recurso.

En el estado de Sonora la explotación de la cabra es muy reducida debido quizás a que en

esta región existe poco mercado para los productos que de ella se pueden obtener como

carne, leche, pieles, pelo y abono orgánico de excelente calidad, que en algunos estados de

la República Mexicana y en otros países son muy apreciados.

Por otra parte, se le ha dado más énfasis a las desventajas que presenta el uso de cabras que

a los beneficios de su explotación. Sin embargo, existen reportes de que en algunas otras

partes, como en Texas, E.U.A., la adición de cabras a los sistemas tradicionales de pastoreo

ha mejorado substancialmente la utilización total del forraje y ha diversificado la fuente de

ingresos para los rancheros.

Lógicamente, el uso de las cabras debe hacerse tomando en consideración la disponibilidad

de forraje, puesto que aun cuando prefieren consumir arbustos también consumen zacates,

sobre todo cuando están verdes suculentos, y un número excesivo de animales puede

ocasionar más problemas que los que pudiera resolver. Y, que por su tamaño, las cabras son

fácil presa de depredadores, por lo que se debe contar con un pastor o con perros para su

cuidado.

2. METODOLOGÍA PARA OBTENER CULTIVOS DE CONTROL

El control biológico se presenta como una alternativa relevante en el manejo de insectos

plagas en el mundo. En la actualidad existen más de 400 especies de hongos que atacan

insectos y ácaros, lo cual indica un gran potencial para el uso de estos organismos como

insecticidas biológicos. Los hongos son marcadamente superiores a otros

microorganismos puesto que generalmente no son específicos en su acción sobre insectos,

razón que les confiere importancia en el control de un amplio rango de insectos plagas.

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Beauveria bassiana es uno de los entomopatógenos más estudiados. En China se produce en

comunas para el control del perforador europeo del maíz (Ostrinia nubilalis Hubner),

saltamontes verde (Turpilia opaca Brunn.) y la oruga de los pinos (Lymanthria dispar L.).

En la Unión Soviética se produce con el nombre de Boverin como agente biológico de

control de la polilla del manzano (Cydia pomonella L.). Actualmente Cenicafé produce

masivamente el hongo B. bassiana para el control de la broca del café, Hypothenemuis

hampei, a partir de un cultivo multiespórico mediante pases sucesivos en arroz, utilizado

como sustrato. En este medio artificial se ha registrado pérdida de la patogenicidad del

hongo luego de cultivarse por tres o más generaciones, por lo cual, se recomienda reactivar

la patogenicidad mediante pases o procesos de reinfección en el insecto

Un aislamiento monoespórico es aquel que se obtiene a partir de una espora, con un

contenido genómico único, que corresponde a un clon genéticamente uniforme de una

célula individual. Contrario sucede con un cultivo multiespórico, el cual presenta una

continua variación genética del ADN, debido a que cada espora suministra información

relacionada con la producción de esporas, toxinas, pigmentación, producción de enzimas y

patogenicidad, entre otras, lo cual genera constantemente una recombinación genómica.

En los hongos imperfectos se presenta la heterocariosis, fenómeno en el cual ocurre la

unión de núcleos de diferentes hifas sin que ocurra fusión de los mismos, es decir, la

reproducción que se efectúa es asexual. Este fenómeno juega un papel importante en el

aumento de la variabilidad genética, la cual puede ser reducida mediante la obtención de

cultivos monoespóricos.

Hall, afirma que con el uso de los cultivos monoespóricos del hongo Verticilliium lecanni

se deberían minimizar los riesgos de variación por la naturaleza mononuclear de estas

conidias. Sin embargo, los monocultivos evaluados en este estudio experimentaron cambios

relevantes para las variables patogenicidad, morfología y tasa de crecimiento radial.

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Samsinakova y Kalalova evaluaron la virulencia del hongo B. bassiana sobre larvas de

Galleria melonela. Estos estudios mostraron que algunos aislamientos de este hongo pueden

sufrir pérdida de virulencia a pesar de una estricta observación en todos los procedimientos

estandarizados de cultivo, aspersión y almacenamiento. En general, se encontró que el uso

de cepas no uniformes o multiespóricas de este entomopatógeno, fue la causa de la

atenuación en su virulencia.

Según Tuite, un aislamiento inicial de células individuales asegura pureza en las especies y

es probablemente con la mayoría de hongos y bacterias, la manera de producir pureza

genética. Sin embargo, existen hongos que producen esporas heterocarióticas lo cual no

garantiza su pureza genética; tampoco se asegura ésta en las siguientes generaciones,

puesto que pueden presentarse mutaciones. French y Hebert ecomiendan utilizar

técnicas de purificación genética mediante cultivos de puntas de hifa o monoespóricos,

aunque esto es relativo ya que la célula puede ser multinucleada.

2.1 TÉCNICAS PARA OBTENER CULTIVOS MONOESPÓRICOS

Dentro de las metodologías para obtener monocultivos se han propuesto varios

procedimientos: Kienholz, propuso un método en el cual se obtiene una suspensión de

2x102 esporas/ml y no se utilizan equipos especializados. Para ello, se sumerge el asa y se

deposita este inóculo en cada uno de diez círculos demarcados previamente en la cara

inferior de una caja de petri con medio de agar. Una vez ubicada la espora germinada en el

campo microscópico, se procede a transferirla a un medio nutritivo apropiado para su

crecimiento.

Instituto Micológico Internacional (IMI−CAB) de Inglaterra, propone la utilización de unas

líneas−guía en forma de "W" o "E" por el reverso de las cajas de petri con medio de agar,

con el fin de facilitar la lectura en el microscopio. Sobre estas estrías se dispersa el inóculo

y luego de ser ubicada la espora germinada, con la ayuda del microscopio, se corta el

bloque de agar y se lleva a un medio nutritivo.

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La Rue fue uno de los pioneros en describir un método para aislar esporas, el cual consistía

en adaptar un cilindro en forma fija al objetivo del microscopio (11, 13); sin embargo

presentaba el inconveniente de tener que remover contínuamente el cilindro para su

esterilización. Messner propuso una metodología similar, utilizando una resina

sintética para adaptar un cilindro cortante al objetivo del microscopio. Con este dispositivo

se obtuvieron monoesporas de hongos hyphomycetos, al igual que ascosporas,

basidiosporas, células de levaduras y de algas. Keyworth mejoró este sistema de tal

manera que el instrumento pudiera ser flameado sin necesidad de retirarlo del objetivo.

French y Hebert, y Gorgue estudiando hongos fitopatógenos y otros causantes de micosis

superficiales, respectivamente, encontraron que al adaptar al objetivo de menor aumento

del microscopio un pequeño cono de vidrio cortante en forma de sacabocado, se podían

obtener monoesporas de los géneros Trichophyton sp., Fusarium sp. y Rhizoctonia sp. Una

vez ubicada la espora germinada en el campo microscópico se procedía al corte del bloque

de agar con la ayuda del dispositivo y se transfería a un medio nutritivo. Gorgue

recomendó el medio Corn Meal, para conseguir una germinación rápida de las esporas

aisladas y la observación fácil de éstas en el microscopio.

Constantinescu presenta el resultado de numerosos intentos por construir un equipo donde

el diámetro del cilindro cortador fuera inferior a 1 mm, y que éste a su vez fuera estable al

adaptarse al objetivo del microscopio, con lo cual no se hiciera necesario reenfocar cada

vez que se esterilizara; así mismo, que pudiera ser retirado del objetivo con el fin de no

interferir en los trabajos de rutina. Teniendo en cuenta la combinación de estas

características en el equipo, se logró aislar ascosporas y conidias con un diámetro de 4 ðm.

Mac Leod obtuvo cultivos monoespóricos de Beauveria sp y otros géneros de hongos

entomopatógenos a partir de una concentración de 100 a 200 esporas /ml; para tal

propósito, depositó 1ml de esta suspensión en un medio nutritivo y luego de 16 a20 horas

procedió a aislar la espora germinada, según la metodología empleada por Lambert.

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La dilución, es uno de los métodos propuestos para obtener monocultivos, que consiste en

desprender las esporas del cultivo original con la ayuda de un asa y un estereoscopio. Este

inóculo se diluye de gota en gota y a partir de aquella que contenga una cantidad mediana

de espora.

También se obtuvieron cultivos monoespóricos de hongos fitopatógenos a partir de una

suspensión con una concentración de 2,5x103 esporas/ml. De esta forma, una vez ubicada la

espora con el objetivo de menor aumento, se cerró el diafragma del condensador, quedando

concentrado un haz de luz y se bajó el objetivo para cortar el bloque de agar con la

monoconidia.

Hanna diseñó una aguja que se ajusta en forma mecánica a la plataforma del microscopio,

de modo que puede desplazarse fácilmente para sujetar la espora aislada.

Esta investigación tuvo como propósito desarrollar una metodología para aislar esporas

individuales del hongo B. bassiana en forma rutinaria y confiable, con el fin de llevar a

cabo estudios de caracterización de éstas en la búsqueda de cepas mejoradas utilizables

para el control biológico de la broca del café.

MATERIALES Y MÉTODOS• Origen del hongo. Los aislamientos monoespóricos fueron obtenidos a partir de un•

aislamiento multiespórico Bb 9205 de B. bassiana previamente reactivado en broca,

procedente del hospedante Diatraea saccharalis Fabricius (Lepidoptera:Pyralidae),

cultivado en SDA acidificado (1 ml de ácido láctico al 44% por cada 100 ml de medio), con

una edad del cultivo no superior a 30 días.

Procedimiento. Una vez esporulado el cultivo original, lo cual se logró entre los 15−•

30 días siguientes a la siembra, en el medio SDA acidificado, a una temperatura promedio

de 25ðC, se procedió a obtener una suspensión de esporas con una concentración de 3x105

esporas/ml(Figura1).

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Figura 1. Metodología para obtener cultivos monoespóricos

Previamente, con un marcador se hicieron 6 estrías por el reverso de las cajas de petri

esterilizadas, con el fin de facilitar la lectura al microscopio. Luego de servir una fina capa

del medio de cultivo SDA acidificado en las cajas de petri, se tomaron 3 ðl de la

suspensión de esporas (3x105 esporas/ml) y se depositaron en el extremo superior de la

estría. Con un asa en argolla y sin cambiar el lado del asa que se venía utilizando, se

esparció el inóculo. La incubación se hizo a temperatura ambiente durante 24 horas y se

observó la germinación de esporas al microscopio con el objetivo de 10X. Con un bisturí #3

y una cuchilla #10, debidamente desinfestados en alcohol y flameados, se cortaron y

colocaron las estrías sobre un portaobjeto estéril, teniendo en cuenta el orden en que fueron

cortadas. Se observaron al microscopio y una vez se ubicó la espora germinada fue

demarcada el área con el objetivo de 40X y se cortó el bloque de agar con el bisturí. Antes

de ser transferida al medio SDA acidificado, se observó de nuevo el bloque de agar para

asegurar el aislamiento de una sola espora y se llevó a incubación a 25ðC en luz constante

(Figura 2). Todo este proceso se realizó asépticamente, en cámara de flujo laminar.

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Figura 2. Bloque de agar con una conidia del hongo Beauveria bassiana

RESULTADOS Y DISCUSIÓN•

No existe una metodología general para el aislamiento de conidias individuales. Es así

como hay técnicas que emplean equipos especializados (3, 6, 8, 11, 13, 15) o micro−

manipuladores (5, 10,15, 18) adaptados al objetivo del microscopio, que requieren cierta

destreza del usuario para su manipulación adecuada e incluyen un costo adicional al

proceso de aislamiento de esporas en forma individual. La metodología sugerida en este

estudio no incluye la utilización de equipos adicionales sino el empleo del objetivo de 40X,

el cual demarca el área exacta en la cual debe hacerse el corte del bloque de agar con el

bisturí. Una vez se realiza el acercamiento del objetivo al medio de cultivo y la remoción

del bloque de agar, el objetivo debe limpiarse para evitar contaminación del lente; sin

embargo, cabe anotar que en este proceso la parte metálica externa del lente es la que se

pone en contacto con la superficie del agar.

En relación con el medio de cultivo empleado para el crecimiento de la espora aislada,

Gorgue y French y Hebert, recomiendan los medios de cultivo Corn meal y Agar

agua para facilitar la germinación y observación de las esporas en el microscopio. En el

presente estudio no se obtuvieron buenos resultados con los medios mencionados puesto

que presentan opacidad que interfiere con la observación microscópica de las esporas. El

medio enriquecido SDA empleado en este trabajo, facilitó la identificación rápida y el

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aislamiento posterior de la espora debido a su transparencia.

La concentración de esporas de las suspensiones a partir de las cuales se obtiene la espora

aislada, depende del género y de las estructuras del microorganismo en estudio, es así como

Kienholz recomienda una suspensión con una concentración de 2 x102 esporas/ml para la

obtención de esporas de Ascomycetos. French y Hebert obtuvieron cultivos

monoespóricos de hongos fitopatógenos a partir de suspensiones con una concentración de

2 x103 esporas/ml. En el presente trabajo, se llevó a cabo el aislamiento de esporas

individuales del hongo B. bassiana partiendo de una suspensión con una concentración

3x105 esporas/ml.

MacLeod obtuvo monoesporas de Beauveria sp luego de 16−20 horas de siembra. French y

Hebert afirman que la ubicación de la espora puede facilitarse si se deja transcurrir el

tiempo necesario para que se desarrolle ligeramente el tubo germinativo o una ramificación

micelial mayor, siempre y cuando se puedan distinguir todos sus detalles para asegurarse

que la colonia se origina a partir de una sola célula. En esta técnica propuesta se obtuvieron

buenos resultados con tiempos de germinación de 24horas.

En este estudio se presenta una metodología de obtención de cultivos monoespóricos, la

cual permite la recuperación de un gran número de esporas individuales de manera

confiable y rutinaria. Con esta técnica se evidencia en forma macroscópica, la presencia de

una o más esporas en el bloque de agar (Figura 3).

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Figura 3. Bloque de agar con dos conidias del hongo Beauveria bassiana

Dicha metodología permitió la obtención de cultivos monoespóricos del aislamiento Bb

9205 de B. bassiana, lo cual constituye una herramienta importante para estudios de

biología y caracterización del hongo, debido a que se parte de una información genómica

individual , lo cual puede originar una menor variación genética.

Con la técnica descrita para la obtención de esporas individuales del hongo B. bassiana, es

posible realizar estudios de variación genética a nivel del ADN, así mismo, evaluar la

producción de enzimas y su relación con la virulencia a la broca del café y el

comportamiento germinativo y patogénico del hongo.

De otro lado, con la obtención de esporas individuales se pueden realizar estudios acerca de

la biología de otros hongos entomopatógenos tales como Metarhizium anisopliae,

Paecilomyces lilacinus, Fusarium sp., Hirsutela sp., Nomuraea sp., entre otros. De igual

manera, hongos antagonistas de utilidad en control biológico de fitopatógenos como

Trichoderma sp., Verticillium lecanii y hongos patógenos al café y otros cultivos asociados

a éste, tales como Colletotrichum sp., Ceratocystis fimbriata y Phytophtora sp.

2.4 MÉTODOS DE CONTROL DE PLANTAS INDESEABLES EN PRADERAS

El sobrepastoreo al que han sido sometidos los pastizales en los últimos años ha traído

como consecuencia una baja en el potencial forrajero de estos; en donde la vegetación, con

el paso del tiempo, tiende a disminuir el porcentaje de las plantas forrajeras o deseables,

concordando con el aumento considerable de la población de las plantas indeseables.

El Estado de Sonora no esta exento de este problema, ya que la invasión de plantas

indeseables por el sobrepastoreo es notoria, tanto en praderas establecidas de zacate buffel

por arbustos, como la vegetación nativa por plantas tóxicas.

Arbustos indeseables en praderas. En Sonora existen actualmente cerca de 300 mil•

hectáreas resembradas con zacate buffel, siendo susceptible a establecerse hasta 5 millones

de hectáreas. Esta gramínea es de gran relevancia para la ganadería sonorense, ya que se

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necesitan de 4 a 6 hectáreas por unidad animal (Ha/U.A.) en praderas bien manejadas

mientras que en la vegetación nativa es necesario de 30−40´Ha/U.A.

Sin embargo una pradera sobrepastoreada o mal manejada tiende a presentar problemas de

invasión de arbustos, los cuales por lo regular proporcionan menor cantidad de forraje que

el buffel, además de reducir la densidad de esta gramínea debido a la competencia por

espacio, luz, agua y nutrientes del suelo.

Se estima que alrededor del 60% de las praderas establecidas con dicho zacate están

invadidas por arbustos indeseables. en el cuadro 1, se muestran algunos de los principales

arbustos invasores que se presentan en el Estado de Sonora.

Cuadro 2. Plantas invasoras en praderas de buffel.

NOMBRE CIENTIFICO NOMBRE COMUN

Encelia farinosa Rama blanca

Acacia oligochanta Chírahui

Prosopis juliflora Mezquite

Baccharis sarothroides Romerillo

Acacia farnesiana Vinorama

Acacia occidentalis Huizache

Para la rehabilitación de estos pastizales invadidos por arbustos es necesario la aplicación

de algún método de control, los cuales pueden ser los siguientes:

Control pírico. Este método esta relacionado con el uso de quemas prescritos para•

el control de arbustos indeseables.

Control biológico. Control que es ejercido por organismos tales como cabras,•

insectos, hongos, bacterias, etc.

Control integrado. Dicho control se refiere a la utilización de dos o más de los•

métodos antes mencionados.

El uso adecuado de cualquier método de control va a depender de las condiciones

topográficas, edáficas, tipo de plantas a controlar o, en un momento dado, las posibilidades

del propietario en cuanto a maquinaria y equipo.

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2.5 APLICACIÓN DE QUEMAS.

La aplicación del fuego se ha acentuado en los últimos años en el Estado, ya sea para

mantenimiento de las praderas de buffel o bien para control de arbustos o insectos.

La quema es un método muy efectivo para el control de arbustos, además de mejorar la

pradera de buffel aumentando la calidad nutritiva de este, eliminando material viejo y duro

el cual no es consumido por el ganado e incrementando la cantidad de forraje permitiendo

una carga adicional de 30 a 100%.

Para la realización de esta práctica en el control de arbustos es necesario que exista zacate

seco disponible que sirva como combustible, con el fin de crear un fuego mas intenso, ya

que los árboles y arbustos, en sí, son malos combustibles; esto es, entre mayor cantidad de

combustible exista en la pradera, es mayor el porcentaje de mortandad de arbustos.

Se ha observado que en praderas con 2,300 kg de combustible por hectárea, se ha logrado

controlar en un 55% la rama blanca y en un 31% de mezquite; por otra parte, con 4,500 kg

de combustible por hectárea se ha controlado en un 100% la rama blanca y en el caso del

chírahui un 72%.

La quema ha dado buenos resultados en el control de pequeños arbustos, siendo un poco

menos efectiva en el control de árboles con tronco grueso o de gran altura, ya que en estos

casos es necesario aplicar dos o tres quemas consecutivas.

Hay que tener atención especial a las praderas donde se haya aplicado fuego; ya que es

recomendable permitir que el zacate alcance su tamaño normal antes de iniciar el pastoreo,

o solamente utilizar un 30 ó 40% de su producción, es decir en pastoreo ligero; esto con el

fin de que al siguiente año, si las condiciones son óptimas, la pradera se reestablezca

completamente.

2.6 PLANTAS TÓXICAS EN VEGETACIÓN NATIVA.

Las plantas tóxicas constituyen uno de los principales problemas en los agostaderos ya que

además de reducir la calidad de forraje puede causar pérdidas en la producción de carne en

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aquellos animales que hayan consumido este tipo de plantas, provocándoles una

disminución de peso, abortos en animales cargados o bien hasta la muerte en aquellos

animales altamente intoxicados.

Se le considera planta tóxica a aquella que contenga una sustancia química específica

(principio tóxico) que al ser consumido por los animales cause cambios fisiológicos y

bioquímicos a los mas susceptibles.

Este tipo de plantas por lo regular se le encuentra en mayor densidad en áreas

sobrepastoreadas, lugares con algún disturbio como terracerías, aguajes o bien en

resiembras sin éxito; sin embargo, en pastizales con buena condición, estas plantas, aunque

en menor densidad, también están presentes formando parte de los ecosistemas.

En los agostaderos donde se presentan plantas tóxicas, en la mayoría de los casos, los

ganaderos han aprendido a convivir con ellas; para esto es necesario que el ganadero

conozca algo sobre este tipo de plantas como: cuales son las principales plantas tóxicas,

cuando aparecen estas, en que lugares se encuentra y cual es su principio tóxico.

En la tabla 1 se enlistan algunas de las principales plantas tóxicas, que se presentan después

de las lluvias de verano o bien están presentes durante todo el año debido a que son

perennes.

Tabla 1. Plantas tóxicas perennes y anuales que se presentan de las lluvias de verano.

NOMBRE CIENTIFICO NOMBRE COMUN SUSTANCIA TOXICA DURACION

Amaranthus spp. Quelites Nitratos Anual

Chenopodium spp. Choales Nitratos Anual

Salsola kali Chamizo volador Nitratos y oxalatos Anual

Astragalus spp. Hierba loca Alcaloides Anual y Perenne

Lupinus spp. Lupinos Alcaloides Anual y Perenne

Crotalaria pumila Garbancillo Alcaloides Anual

Eritrina flabelliformis Chilicote Alcaloides Perenne

Datura spp. Toloaches Alcaloides Anual y Perenne

Nicotiana spp. Tabaquillo,Juan Loco Alcaloides Anual y Perenne

De las plantas antes mencionadas existen algunas que son fuertemente tóxicas, tal es el caso

de Nicotiana glauca (JUAN LOCO) que inmediatamente después de consumida se

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presentan los síntomas de intoxicación. También existen algunas plantas que solo algunas

partes son tóxicas, casos específicos el de Erytrina flabelliformis (chilicote) en la que los

frutos son tóxicos; o bien Acacia constricta (vinorama) en donde la sustancia tóxica la

presenta en las hojas.

En el tabla 2 se enlistan algunas plantas que se presentan después de las lluvias de invierno;

por lo regular en esa época la producción de zacates nativos es mínima y en lugares

sobrepastoreados pueden alcanzar grandes densidades.

Tabla 2. Plantas tóxicas que se presentan en las lluvias de invierno.

NOMBRE CIENTÍFICO NOMBRE COMUN SUSTANCIA DURACION

Cryptantha grayi Peludita Nitratos Anual

Lepidium lasiocarpum Cucharita Nitratos Anual

Descurainia pinnata Pamitón Nitratos Anual

Sisymbrium irio Pamita Nitratos Anual

Senecio longilobus Hierba ceniza Alcaloides Anual

En el caso de que en los agostaderos se presenten este tipo de problema, una de las formas

para prevenirlo es por medio del manejo del ganado en los potreros; algunas de las

recomendaciones son las siguientes:

Evite sobrepastorear, ya que esto induce a un consumo exagerado de plantas forrajeras

tendiendo estas a disminuir su población y estos lugares son ocupados por plantas

indeseables incluyendo las tóxicas.

Procure no poner animales hambrientos en lugares infestados, ya que la necesidad de

satisfacer sus necesidades alimenticias hace que el ganado consuma todo tipo de plantas sin

hacer una selección de las plantas deseables, por eso cada vez que haga cambio de potrero

cerciórese de que el ganado esté bien alimentado.

Hay que poner atención especial en animales que provengan de otra región o Estado, ya que

estos desconocen la vegetación de los potreros y pueden consumir plantas tóxicas.

Procure suministrarle todo el tiempo sal y minerales, porque una deficiencia de estas incita

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a los animales a consumir plantas que normalmente no comen.

Cuando empiece a notar síntomas de intoxicación en el ganado, cámbielo inmediatamente a

otro potrero libre de plantas tóxicas.

En animales intoxicados consulte un médico veterinario, aunque este le solucionará el

problema del animal, no es la solución para el problema de las plantas tóxicas; por eso lo

mas recomendable es mantener sus potreros en buena condición y asi evitar el problema de

las plantas tóxicas.

2.7 QUÉ ES UNA PLANTA INDESEABLE

Son aquellas que se presentan en lugares donde se ha hecho un mal uso del agostadero y

desde el punto de vista ganadero no tiene ningún beneficio.

Enfocándose a nivel ganadero, existen dos tipos; plantas invasoras son aquellas plantas de

bajo valor forrajero que debido a su agresividad tienden a desplazar a las plantas forrajeras

y plantas tóxicas son aquellas que presentan una sustancia tóxica específica (principio

tóxico) que al ser consumidas por los animales cause daño a los más susceptibles.

2.7.1 Cuáles son las principales causas por las que se presentan las plantas indeseables.

Una de las causas es el sobrepastoreo se observa como a medida que pasa el tiempo en

lugares sobrepastoreados se presenta una disminución en las plantas deseables y un

aumento en las indeseables.

La reducción de fuegos por el hombre es otra de las posibles causas, ya que en forma

natural el fuego ha mantenido en equilibrio las poblaciones de los arbustos.

Las fluctuaciones climáticas como sequías prolongadas, aunadas con el sobrepastoreo, son

otra causa de la invasión de plantas indeseables.

Resiembras sin éxito, abandono de áreas e infraestructura como terracerías o corrales, dejan

el suelo desnudo favoreciendo el crecimiento de plantas indeseables.

Cuáles son los diferentes métodos para controlar las plantas indeseables. Existen•

varias formas para controlar este tipo de plantas, el tipo de control a utilizar va a depender

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de las condiciones tanto vegetativas como topográficas, estos métodos son:

2.7.2.1 Biológico. Control ejercido por algún organismo

2.7.2.2 Integrado. Es la combinación de dos o más métodos.

CUÁLES SON LOS DAÑOS DIRECTOS QUE CAUSAN LAS PLANTAS•

TÓXICAS

Al hablar de daños directos se refiere a los causados sobre el ganado y éstos son:

Muerte de animales por intoxicación debido al consumo exagerado de este tipo de•

plantas.

2.8.2 Disminución en la ganancia de peso ya que al consumir cierto tipo de plantas tóxicas

crean hábitos en el consumo de éstas, las cuales por lo regular son de bajo valor forrajero.

Disminución en el porcentaje de preñez o bien pueden causar aborto en vacas•

cargadas, lo cual trae como consecuencia una baja en la producción animal.

CUÁLES SON LOS DAÑOS INDIRECTOS QUE CAUSAN LAS PLANTAS•

TÓXICAS A LA GANADERÍA

Los daños indirectos se consideran a los causados sobre la vegetación y son:

2.9.1 Disminución en la producción forrajera.

Al disminuir el forraje se tiene que reducir la carga animal y por lo tanto se presenta•

una baja en la producción de carne.

2.9.3 Los potreros infectados con plantas tóxicas deben de ser excluidos, además de que se

tiene que ejercer un control sobre estas plantas lo cual trae pérdidas económicas.

QUÉ DEBE CONOCER EL GANADERO ACERCA DE LAS PLANTAS•

TÓXICAS

En muchos casos el ganadero ha aprendido a convivir con este tipo de plantas, ya que por lo

regular están presentes en los potreros debido a que son parte del ecosistema; para convivir

con estas el ganadero debe conocer principalmente:

2.10.1 Cuáles son las plantas tóxicas de sus potreros.

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2.10.2 Conocer el principio tóxico (sustancia química)

Saber en qué época del año se presentan o pueden causar daño, además de los•

lugares específicos donde se encuentran.

Qué tratamiento aplicar al ganado con problemas de intoxicación. Todo ésto con el•

fin de estar prevenido en caso de que se pueda presentar un problema de

intoxicación.

2.11 QUÉ SE RECOMIENDA HACER EN CASO DE PRESENTAR PROBLEMAS DE

INVASIÓN CON PLANTAS TÓXICAS

Evite poner animales hambrientos en lugares infestados con plantas tóxicas, sobre•

todo en épocas secas, ya que con tal de satisfacer sus necesidades alimenticias, tienden a

consumir cualquier tipo de plantas incluyendo las tóxicas.

Suministre sal y minerales durante todo el año, ya que la ausencia de éstos incita a•

los animales a consumir plantas que por lo regular no consumían.

A los primeros síntomas de intoxicación en el ganado, cámbielos a otro potrero que•

no esté invadido con plantas tóxicas o bien meterlos en corrales dándole otro tipo de

alimento.

En caso de altas intoxicaciones consulte a su médico veterinario. Una vez resuelto el caso

de intoxicación del ganado, el problema seguirá latente en los potreros, por eso es muy

importante tener un buen manejo de los potreros recomendadas.

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