FROTIS SANGUINEO

¿Qué es?Es un examen de sangre que brinda información acerca del número y forma de las células sanguíneas. La práctica de un frotis sanguíneo también llamado extensión es de gran importancia en hematología ya que el diagnóstico de muchas enfermedades hematológicas puede realizarse con solo observar las características morfológicas de las células sanguíneas .Debido a ello la técnica de realización del frotis tiene que ser impecable procurando que este no sea excesivamente fino ni excesivamente grueso. Con ello se conseguirá una distribución adecuada de las células en las diferentes áreas del frotis cuyo conocimiento es fundamental tanto para la observación de la morfología eritrocitaria como para la realización de la fórmula leucocitaria o recuento diferencial de leucocitos.

1) La valoración de la estimulación eritropoyetica.

2) Las anomalías en la maduración nuclear y citoplásmica de las células hemática.

3) Los trastornos en la arquitectura de las células al formarse en la médula ósea.

4)Las alteraciones singulares en la forma de las células, que son una identificación especifica de algunas enfermedades.

5) Algún indicador de los efectos nocivos de la quimioterapia y de la radioterapia.

6) La diferenciación y recuento de los elementos celulares de la sangre.

Su realización es de vital importancia para obtener una orientación de:

Razones por las que se realiza el examen :Este examen se puede realizar como parte de una evaluación médica general para ayudar a diagnosticar muchas enfermedades o el médico lo puede ordenar si usted tiene signos de un trastorno sanguíneo.-Otras afecciones bajo las cuales se puede llevar a cabo el examen:1) Cualquier trastorno sanguíneo presunto o conocido2) Cáncer3) Leucemia de células pilosas4) Hemoglobinopatías5) Monitoreo de los efectos secundarios de la quimioterapia

Forma en que se realiza el examen

Una vez que se ha recogido la muestra de sangre, se retira la aguja y se cubre el sitio de punción para detener cualquier sangrado.

Luego, el médico introduce suavemente una aguja en la vena y recoge la sangre en un frasco hermético o en un tubo pegado a la

aguja. La banda elástica se retira del brazo.

La sangre se extrae típicamente de una vena, por lo general de la parte interior del codo o del dorso de la mano. El sitio se limpia con un desinfectante (antiséptico). El

médico envuelve una banda elástica alrededor de la parte superior del brazo con el fin de aplicar presión en el área y hacer que la vena se llene de sangre.

En bebés o en niños pequeños, se puede utilizar un instrumento puntiagudo llamado lanceta para punzar la piel y hacerla sangrar. La sangre se recoge en un tubo pequeño de vidrio llamado pipeta, en un portaobjetos o en una tira reactiva. Finalmente, se puede colocar un vendaje sobre el área si hay algún sangrado.

La muestra de sangre se envía a un laboratorio, donde un profesional de la salud la examina bajo un microscopio, o también se puede analizar por medio de una máquina automática. El frotis o extensión muestra el número y tipos de glóbulos blancos sanguíneos (fórmula leucocitaria), células sanguíneas anormalmente formadas, y da un estimado aproximado de los conteos de glóbulos blancos y de plaquetas.

Tipos de muestra• Frotis sanguíneo de sangre periférica en láminas portaobjetos.

• Sangre total con anticoagulante en tubos al vacío con citrato de sodio,heparina o EDTA.• Sangre total inoculada directamente al medio de cultivo bifásico ( imediatamente después de la extracción de la muestrasanguínea).• Biopsias de las lesiones, colocadas en recipiente estéril.

• Biopsias de las lesiones en formol al 10%

a) Para el diagnóstico directo:

b) Para aislamiento:

c) Para diagnóstico histopatológico:

Tipos de muestra Sangre capilar no anticoagulada o sangre venosa

adecuadamente anticoagulada. La forma correcta de extraer sangre es la siguiente:

Elegir el tercer o cuarto dedo de una de las manos.

Desinfectar el pulpejo del dedo seleccionado con un algodón embebido en un desinfectante apropiado.

Dejar que el desinfectante se evapore.

Con una lanceta, pinchar firme y rápidamente una cara lateral de este pulpejo. Tras lo anterior con un algodón seco retiramos la primera

gota emitida. Presionamos el extremo del dedo, a nivel del

lado opuesto al de la punción, hasta obtener la

cantidad de sangre deseada. Por último, tapamos el pulpejo con una tirita.

La sangre venosa tiene que haber sido extraída hace menos de 3 horas, ya que

pasado este tiempo, se producen unos cambios

apreciables en las células, que se manifiestan, al ser

teñidas éstas, como alteraciones en su

morfología.

Tipos de Frotis sanguíneo

Los frotis se pueden hacer

sobre portaobjetos o cubreobjetos

Frotis Portaobjeto Se prefieren los portaobjetos

porque:

•Son más fáciles de manipular

•Se rompen menos

•Se pueden rotular más fácilmente 

•No requieren montaje y pueden archivarse de forma automática

Ventajas y Desventajas de los frotis hechos en portaobjetos

Ventajas: Permite tener un mayor campo de observación para las células sanguíneas

Desventajas: Si se aplica mucha presión sobre el porta, pueden haber deformidad de las células sanguíneas, alterando el resultado durante la observación microscópica

¿ Cómo realizar el Frotis portaobjeto ?

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COLA CUERPO

CABEZA

Frotis Cubreobjetos Este frotis permite una distribución

más homogénea de los glóbulos.

Ventajas y Desventajas de los frotis hechos en cubreobjetos

Ventajas: utiliza

menos sangre y es más

fácil de realizar

Desventajas: el cubreobjetos es

muy frágil se rompe con

facilidad y no se puede visualizar con mejor campo

las células sanguíneas

¿Cómo hacer el frotis cubreobjetos?

Paso 1

Paso2

Paso 3

Tinción de Wright

Linfocito Basófilos Eosinófilos

Neutrófilos

Glóbulos blancos teñidos con colorante de Wright:

* La tinción de Wright es un tipo de tinción usada para facilitar la diferenciación de los tipos de células de la sangre. Se usa principalmente para teñir frotis de sangre y punciones medulares, para ser examinadas al microscopio.

* Debido a que ayuda a distinguir fácilmente las células de la sangre se convirtió en una técnica muy usada para el conteo de los glóbulos blancos, una técnica rutinaria usada cuando hay sospecha de infecciones.

Tinción de Wright

FUNDAMENTOS

• La tinción de Wright es tuna tinción de Romanowsky que consiste en azul de metileno y de sus productos de oxidación, así como eosina Y o eosina B. (lo cual tiñe el citoplasma de las células, ya que es un colorante acido, y el citoplasma es un medio básico)

• La acción combinada de estos colorantes produce el efecto Romanowsky que da una coloración púrpura a los núcleos de los leucocitos y a los gránulos neutrofílicos y da color rosado a los eritrocitos. Los componentes de este efecto son el azul B y la eosina Y.

El colorante de Giemsa se utiliza para la tinción de Frotis sanguíneo o médula ósea, que es de gran importancia en Hematología, ya que el diagnóstico de muchas enfermedades hematológicas puede realizarse con sólo observar las características morfológicas de las células sanguíneas. Es un método habitual para el examen de frotis sanguíneos, cortes histológicos y otro tipo de muestras biológicas.

Es una tinción diferencial que es capaz de distinguir distintas estructuras celulares según su afinidad por colorantes básicos, ácidos o mezcla de ellos. Se puede emplear, como variaciones, otras coloraciones como es la técnica de citoconcentración para parásitos sanguíneos.

Tinción de Giemsa

Tinción de GiemsaAl teñir las células con esta tinción las podemos observar de esta manera:

No Teñido

Teñido

1. Citoplasma: rosa

2. Núcleos: azul purpura

3. Eritrocitos: rojo

4. Gránulos de las células cebadas: violeta

5. Bacterias: azul

6. Parásitos: azul

Una fotomicrografía de los cambios histológicos causados por infección Myxobolus cerebralis de salmónidos cartílago, se tiñeron con Giemsa.

Tinción de GiemsaTrypanosoma cruzi (parásito causante de la Enfermedad de Chagas) teñido con Giemsa

Velocidad de Sedimentación globular (VSG)

Factores físicos que influyen en la VSG

InflamaciónAumento de la VSG. 

Usos de su medición• 1. Para detectar procesos

inflamatorios o infecciosos. Como discriminador o reactante de presencia de enfermedad.

• 2. Como control de la evolución de ciertas enfermedades crónicas ó infecciosas.

• 3. Para detectar procesos crónicos inflamatorios ocultos o tumores.

Fases Fase 1: Hemaglutinación

formación de agregados de

hematíes, aumentando su peso y disminuyendo su

superficie.

Fase 2: Sedimentación o desplazamiento

hacia debajo de los agregados ya

formados.

Fase 3: Acumulo de los hematíes en el

fondo del tubo. Duración de 40 a

60 minutos.

Técnicas de aplicaciónMÉTODO VENTAJA DESVENTAJA

Método de WestergrenSe detectan casos de

enfermedad perfectamente.

No detecta con tanta exactitud las pequeñas variaciones que se

producen en personas sanas.

Método de WintrobeDe que es más sensible a

pequeñas variaciones para valores normales

Es menos reproductible para valores patológicos

Método de ZetafugeDe eliminar el efecto de la

anemia y se realiza en menos de 5 minutos

Son el tener que utilizar un instrumental especial,

relativamente caro.