República Bolivariana de VenezuelaMinisterio de Educación Superior

Universidad Arturo MichelenaFacultad de Ciencias para la Salud

Escuela De Patología Medica.

FijaciónQuímicas y

Físicas

FIJACION

• Se entiende por fijación toda manipulación de un ser vivo o parte de él. Tiene por objeto mantener toda su estructura, de tal modo que no se altere ni física ni químicamente para que sus componentes celulares mantengan las mismas características que cuando dicho ser o tejido estaban vivos.

• Entonces se dice que un fijador inmoviliza y estabiliza los elementos celulares.

En resumen un fijador tiene como misión:

• Preservar el tejido de putrefacción, autolisis, etc.• Endurecer el tejido para permitir su manipulación

y evitar alteraciones morfológicas y estructurales que pudieran ocasionarse debido al propio procesamiento histológico.

• Mantener intacta la cito arquitectura y ultra estructura.

• Preservar las características de las moléculas.

Como elegir un fijador apropiado

• La decisión para emplear un fijador es siempre función del tipo de estudio histológico que deba realizarse. Existen soluciones fijadoras que son más adecuadas que otras para cada tipo de procesamiento y estudio. Entonces los distinguimos:

• Fijación para microscopia óptica • Fijación para microscopia electrónica• Fijación para demostración de productos específicos • Fijación para estudios histoquimicos.• Fijacion para estudios inmucitoquimico.

Factores de la fijación

• Concentración del fijador: la capacidad de fijación que tenga la solución fijadora que empleemos vendrá determinada por la concentración del fijador utilizado.

• • Temperatura: la mayoría de los estudios que

se realizan con el microscopio óptico suelen realizarse a temperatura ambiente.

• Penetración de los fijadores: para facilitar la penetración de los fijadores se han de retirar todos los obstáculos que impidan su penetración, ejemplo, en el caso de que se fije un cerebro hay que retirar las meninges. Ahora para facilitar la fijación las muestras se han de cortar en rebanas lo más delgadas posibles.

• Volumen: para asegurar buenas fijaciones es necesario que

el volumen del fijador exceda en una proporción de 10:1 el volumen de las muestras.

• Tiempo de fijación: se tiene que ajustar adecuadamente el tiempo en función del fijador utilizado, su concentración, la temperatura y del objetivo del estudio.

Tipos de Fijadores

•Fijadores Químicos

•Fijadores Físicos

Fijaciones Físicas

Son varios los fijadores físicos que usualmente se utilizan, sobre todo por su simplicidad, pero la mayoría de ellos debemos desecharlos, porque alteran gravemente la estructura de los vegetales, entre algunas fijaciones Físicas tenemos:

El calor

• Es el más antiguo y más utilizado de estos fijadores. Tanto en microbiología, como en el frotis de células animales, la fijación se hace a la llama, con lo que se obtiene una coagulación rápida de las proteínas y por tanto su estabilización. Esta técnica no es recomendable cuando se trata de tejidos vegetales, puesto que produce alteraciones importantes y muy desiguales en las paredes celulares.

El Frio

• Como anteriormente hemos mencionado, el frío (congelación), se ha tenido y se tiene como agente de fijación, pero es realmente un agente conservador y por tanto no debe utilizarse como tal.

• Existen numerosos fijadores químicos, unos simples, y otros que son mezcla de varias sustancias, como son:

• Acido acético que Conserva la cromatina. Retrae los tejidos. Es más un conservante que un fijador.

• Las distintas fijaciones químicas son:

Fijaciones Químicas

Fijación por inmersión

• Este método consiste en tomar o extraer una muestra del tejido u órgano que se vaya a procesar y sumergirlo en una solución fijadora. Normalmente, se introduce la pieza de tejido en un frasco que contiene la cantidad adecuada de fijador.

Fijación por perfusión.

• Este método consiste en realizar una perfusión de la solución fijadora utilizando el torrente vascular. Es el método empleado normalmente con animales de experimentación