CARRERA

"INGENIEIUA BIOQUIMICA INDUSTRIAL1'

fC : N PRODUCCION DE BIOLOGICOS'p

I

1

MATRICULA: 86237469 86237407

LUGAR DE REALIZACION: GERENCIA GENERAL DE BIOLOGICOS Y REACTIVOS. INSTITUTO NACIONAL DE VIROLOGIA. Amores 1240, Col. del Valle, MCxico D.F.

HORAS SEMANA 4 horas diarias

ASESORES RESPONSABLES:

JEFE DEL DEPTO. DE PROCESOS FINALES: PERALES GARCIA

#

RESPONSABLE DEL LAB. CONTROL EN NZANO ROMERO PROCESO:

3 CONTROL BIOLOGIC0 Y DE MANUFACTURA BIOLOGICOS.

\ I)r B

PARA LA PRODUCCION DE

h

Justificaci6n:

La realizacidn de este trabajo esta destinado a establecer evidencias documentadas, que p e r m i t a n asegurar con alto grado de confianza la obtencidn de un producto que reuna las especificaciones de calidad preestablecidas.

La raz6n de esta actividad dentro de los departamentos, Control en Proceso y Procesos Finales, es poder utilizar toda su capacidad para controlar el proceso de produccidn de vacunas.

En la realizaci6n de este proceso de manufactura, el departamento de Procesos Finales, se esta dando a la tarea de conocer y controlar cada una de sus etapas, de tal manera que aquellas variables que afectan constantemente la produccidn se mantengan uniformes, asi cada producto terminado cubrid siempre todas las especificaciones de calidad y diseño.

Por lo tanto Procesos Finales se esfuerza en superar el manejo de las Buenas Pdcticas de Manufactura para poder tener un excelente resultado, logrando asi, una cobertura total de control de la maquinaria, actividades dentro de las zonas asepticas, así como tambib en el acondicionamiento y el almacenamiento de los biol6gicos producidos.

. .

Antecedentes:

El Instituto Nacional de Virología (I.N.V.) fue fundado en 1960, siendo Presidente de la República Mexicana el Lic. Adolfo L6pez Mateos.

La principal actividad del I.N.V. es la producci6n de vacunas, tales como, vacuna antin;ibica canina, vacuna antidbica humana, vacuna antisarampionosa y vacuna antipoliomielitica.

El personal y la tecnología de que se dispone en el I.N.V. permite que la producci6n de las vacunas basicas cumplan con las Normas establecidas por la Organizaci6n Mundial de la Salud.

El I.N.V. en la actualidad cuenta con tres departamentos de producci6n:

- Departamento de Producci6n de Vacuna AntirrAbica Humana y Canina. - Departamento de Producci6n de Vacuna Antisarampionosa. - Departamento de Producci6n de Vacuna Antipoliomielítica Trivalente de tipo Sabin.

AdemAs de:

- Tres departamentos de Control de Calidad. - Un departamento de Lavado y Esterilizado. - Un departamento de Investigacih. - Un departamento de Procesos Finales. - Un departamento de apoyo administrativo. - Un departamento de mantenimiento.

Así mismo el Instituto cuenta con los laboratorios de :

- Bacteriología. - Histopatología. - Cultivo de Tejidos. - Control en proceso.

Como tambiCn con tres bioterios:

- Dos bioterios de Ratones. - Un bioterio de Primates.

INTRODUCCION.

En los procesos de fabricacidn de la industria quimica farmacdutica y de productos biol6gicos se requiere de &as asepticas que garanticen que los productos ahi elaborados no solo cumplen con la actividad farmacoldgica e inmunogdnica para la cual fueron diseñados sino tambib que esten exentos de microorganismos contaminantes con el beneficio reciproco entre fabricantes y consumidores.

Para el control de la contaminacidn de productos biol6gicos se deben considerar varios factores como son el diseño de areas asepticas, limpieza y sanitizacidn de las mismas, control microbiol6gico y mantenimiento. Por otra parte es importante considerar la validacih de los procesos, ya que este es un programa destinado a establecer evidencia documentada que permita asegurar con alto grado de confianza y teniendo en cuenta el estado de los conocimientos farmaceuticos, que a traves de un proceso especifico, se obtendd un producto que reuna las especificaciones y atributos de calidad preestablecidos.

OBJETIVOS GENERALES:

1. Obtener biol6gicos de calidad uniforme y reproducibles comparables con los mejores fabricantes internacionales.

2. Reduccidn de costos evitando rechazos y devoluciones.

3. Reduccidn de tiempos muertos.

4. Mejoramiento de la productividad.

5. Integracidn del personal especializado en un equipo en el cual existan responsabilidades especificas para atender cada &ea.

OBJETIVOS PARTICULARES:

l . l. Participacidn en la validaci6n de la limpieza y sanitizaci6n de Areas &pticas.

1.2. Participacih en los diferentes andisis físicoquimicos y microbiol6gicos tanto para aguas destiladas como potables.

1.3 Participaci6n en el an6lisis bacteriol6gico de las placas expuestas durante la sanitizaci6n del Area de llenado de la vacuna (Antipoliomielftica y Antidbica).

1.4 Participaci6n en el control volumCtrico de la vacuna durante el llenado.

1.5 Participaci6n en el trabajo tknico de la producci6n final de las vacunas antipoliomielftica y antidbica.

CONTENIDO

I. DEPARTAMENTO DE PROCESOS FINALES.

l . l . Descripcidn del Departamento de Procesos Finales. 1.2. Descripcidn del equipo utilizado para el proceso final de las vacunas.

11. ANALISIS FISICOQUIMICO Y MICROBIOLOGIC0 DE LOS DIFERENTES TIPOS DE AGUA ( DESTILADA y/o OSMOSIS INVERSA Y AGUA POTABLE).

2. l . Muestreo del agua (potable y destilada) para el anaisis fisicoquimico. 2.2. Procedimientos de maisis.

2.2. l. Agua destilada y/o osmosis inversa. 2.2. l . l . Determinacidm de Calcio. 2.2.1.2. Determinacidn de Cloruros . 2.2.1 ,3. Determinacidn de Sulfatos. 2.2.1.4. Determinacidn de Bioxido de Carbono. 2.2. l . 5. Determinaci6n de Sustawncias Oxidables. 2.2.1.6. Determinacidn de Sdlidos Disueltos Totales (SDT). 2.2.1.7. Determinacidn de pH.

2.2.2.1. Determinacidn de Dureza de Calcio. 2.2.2.2. Determinacidn de Dureza Total. 2.2.2.3. Determinacidn de Alcalinidad. 2.2.2.4. Determinacidn de Sdlidos Totales. 2.2.2.5. Determinacidn de Cloro libre. 2.2.2.6. Determinaci6n de pH.

2.2.2. Agua potable.

2.3. Muestreo del agua (potable y destilada) para el andisis microbioldgico. 2.4. Andisis microbiol6gico para agua destilada y potable.

2.4, l . Determinacidn de bacterias mesofilicas. 2.4.2. Determinacidn de organismos coliformes.

III. ASPECTOS GENERALES Y VALIDACION DEL PROCEDIMIENTO DE SANITIZACION.

3. l . Germicidas para sanitizar Areas asepticas. 3. l . l . Rotacidn de germicidas. 3.1.2. Monitoreo microbiol6gico.

3.1.2. l. Resultados. 3.2. Registro del manejo de de germicidas. 3.3. Programa de sanitizaci6n de Areas asbpticas. 3.4. Programa de control de esterilidad en la maquinaria utilizada en ireas adpticas. 3.5. Limpieza y sanitizacidn de Areas asepticas. 3.6. Programa de control ambiental para Areas asepticas

3.6. l . Calidad microbioldgica del irea en condiciones estaticas y dinhicas. 3.6.2. Evaluacidn de filtros HEPA y de sanitizacidn.

3.6.2. l . Evaluacidn de la calidad microbiologica ambiental. 3.6.2.2. Evaluacidn de los filtros HEPA.

3.6.2.3. Evaluaci6n del proceso de sanitizacibn. 3.6.2.4. Exposici6n de placas (evaluaci6n Depto. de Procesos Finales). 3.6.2.5. Exposicibn de placas (evaluacibn del Depto. de Control en Proceso). 3.6.2.6. Exposici6n de placas durante el proceso de llenado (evaluacibn Depto.

de Procesos Finales). 3.6.3. Temperatura y humedad.

IV. ANALISIS MICROBIOLOGICO DE CADA SANTIZACION Y PROCESO DE LLENADO.

4. l. Identificaci6n de bacterias aerobias. 4. l. l. Tinci6n Gram. 4. l. 2. Pruebas bioquimicas. 4. l. 3. Claves de diferenciacibn.

V. ANALISIS MICROBIOLOGICO EN EL EQUIPO DE MANUFACTURA Y MATERIAS PRIMAS.

5. l. Validaci6n del equipo. 5.2. Pruebas de esterilidad en materia prima como: frasco, ta@n de hule, retapa de

aluminio, etc. los cuales se emplean durante el proceso de llenado.

VI. EVALUACION ANALITICA DURANTE EL PROCESO DE LLENADO.

6. l. Control volumCtrico de la vacuna durante el proceso de llenado. 6.2. Control de engargolado en la maquinaria durante el llenado.

VII. PROCEDIMIENTOS TECNICOS EN LA PRODUCCION FINAL DE LAS VACUNAS.

7. l. Revisi6n 6ptica. 7.2. Etiquetado. 7.3. Acondicionamiento. 7.4. Almacenamiento.

I. DEPARTAMENTO DE PROCESOS F'INAtES.

1.1. Descripci6n del Departamento de Procesos Finales.

Para el presente trabajo nos referiremos, principalmente a un departamento del I.N.V., al Departamento de Procesos Finales (P. F.).

Dicho departamento se encuentra ubicado en el edificio B del I.N.V. primer piso, su principal actividad es llevar a cabo la parte final de la producci6n de las vacunas virales; esto es, el envase, engargolado, revisi6n dptica, etiquetado, acondicionamiento y almacenamiento de estos biol6gicos.

El departamento de P. F., consta de dos heas asepticas indicadas con las letras A y B. El &ea A esta distribuida en dos secciones, una esta destinada para los trabajos de dilucibn, y la otra se utiliza para envasar de la vacuna Antipoliomielítica. El Area B se emplea para envasar las vacunas Antimibicas, Humana y Canina.

Estas heas estan clasificadas como Areas Verdes, (clasificacibn que se encuentra en las Buenas Pdcticas de Manufactura), son heas donde la materia particularizada, humedad y temperatura son rigurosamente controladas:

- Generalmente el aire es filtrado por filtros absolutos HEPA de 0.22 micras y manejado en flujo

- La humedad relativa no debe ser mayor de 33 % . - La temperatura de 20°C como mbimo. - La construcci6n y acabados son especiales. - Los pisos son lisos acabados con película de ep6xicos o pl6sticos, de tal manera que pueden

- Las paredes son lisas, acabadas con película de resinas ep6xicas o plhticas resistentes a las

- Las instalaciones de servicio estan ocultas, de tal manera que solo en

laminar.

lavarse y sanitizarse con cualquier soluci6n.

soluciones germicidas.

los puntos de uso aparecen conexiones.

Cada &ea consta de dos vestidores, que se utilizan para el cambio de ropa por ropa est6ril que usa el personal antes de entrar al ha adptica.

El laboratorio tiene un pasillo central donde se localizan dos dmaras refrigeradoras y dos dmaras congeladoras:

- Las camaras refrigeradoras se encuentran entre +PC y +PC. - Las camaras congeladoras se encuentran a -20°C. Cada una de las cfimaras tiene un registrador grfifico de temperatura.

En la planta baja del edificio se encuentran cinco cfimaras m h tres refrigeradores y dos charas congeladoras.

El &ea de acondicionamiento se encuentra al fondo del Departamento y esta dividido en tres secciones, dos secciones son para el lavado y revisidn 6ptica de los frascos, la seccibn m& grande es para el etiquetado y acondicionamiento de los mismos.

El &rea de acondicionamiento, estA catalogada coma &ea gris, que es aquella &ea que se caracteriza por permitir bajo control de particulas de celulosa, polvo, humedad, temperatura, etc.

La construcci6n y acabados no tienen especificaciones particulares, son íbeas correspondientes a trabajos industriales, como las actividades que se acaban de mencionar.

El Departamento cuenta ademiis con una Area de almacenamiento para el material de acondicionamiento, clasificada tambiCn como &ea gris.

Las Areas blancas, se caracterizan por tener limites m& estrechos para controlar el polvo, humedad y temperatura que las -S grises.

Las especificaciones de la construcci6n y acabados son: - Pisos de loseta lisa, paredes con acabados de pintura lavable, resistentes a las soluciones

- Techos con plafones lisos. - Instalaciones de servicios ocultos.

desinfectantes.

El departamento tambi6n cuenta con un h a similar a la descrita anteriormente de 24 m* la cual se utiliza para preparar las diferentes diluciones de los germicidas utilizados para la asepsia del Departamento, asi como la preparaci6n de la ropa para Areas astipticas la cual se debe esterilizar en calor humedo antes de usar.

1.2. Descripci6n del equipo utilizado para el proceso final de las vacunas.

AREA A:

En el &ea A se cuenta con el siguiente equipo: - Una mAquina llenadora de dos agujas marca Cozzoli. - Una mAquina engargoladora, marca De Vecchi. - Una campana de flujo laminar vertical que cubre toda la linea de envasado, marca Vecco.

En la secci6n de Diluci6n se tiene un flujo laminar vertical, marca Vecco.

AREA B:

- Se tiene una miiquina llenadora de seis agujas marca Cozzoli. - M6quina taponadora, marca Cozzoli. - MAquina engargoladora, marca De Vecchi. - Una campana de flujo laminar vertical que cubre toda la linea de envasado, marca Vecco.

AREA DE ACONDICIONAMIENTO:

En la seccidn m6s grande se encuentran: -Una miiquina etiquetadora marca Strunk. - Una m6quina etiquetadora marca Puttin 1, - Dos m6quinas engargoladoras, marca De Vecchi, una para frascos de 3 m1 y la otra para

frascos de 5 ml.

Por otra parte, el departamento cuenta con una oficina para los &¿imites administrativos.

II. ANALISIS FISICOQuIMICO Y BACTERIOLOGIC0 DE L O S DIFlERENTES TIPOS DE AGUA ( DESTILADA y/o OSMOSIS INVERSA Y AGUA POTABLE).

Para conocer la calidad del agua potable y destilada, se comparan los resultados de una serie de anzilisis, normas o limites de registro oficiales, que nos permiten determinar si el agua puede ser empleada o no para un fin previsto.

En el anexo No. 1, aparecen las normas de registro oficiales tanto para agua potable como destilada.

Las determinaciones que son necesarias para el andisis del agua potable son: dureza total, dureza de calcio, alcalinidad, sdlidos totales, cloro libre, ph y otros. Mientras que las determinaciones para el andisis del agua destilada son: calcio, cloruros, sulfatos, bioxido de carbono, sustancias oxidables, sdlidos disueltos totales, pH entre otros.

2.1. Muestre0 del agua (potable y destilada) para el analisis fiiicoqu6nico.

El muestreo es el proceso de coleccidn de una poblaci6n del total de un cuerpo receptor de a g u a , de tal forma que la muestra sea representativa de la calidad de este total.

Para el anaisis fisicoquímico el muestreo debe hacerse tomando muestras simples e insthtaneas, la cual consiste en colectar una sola muestra que representa la concentracidn de los componentes en ese momento. Y para que la muestra sea representativa del total del cuerpo receptor de agua, deben considerarse su homogeneidad, procedimientos de muestreo, tamaño de la muestra y número de efluentes muestreados.

Su prop6sito es de evaluar caracteristicas definidas, ya sea fisicas o quimicas.

1) ACONDICIONAMIENTO DE RECIPIENTES:

l. l. Los envases se lava& perfectamente enjuagando con suficiente agua potable y finalmente con agua destilada.

En el caso de no ser posible, lavar numerosas veces con agua limpia y enjuagarlo posteriormente con el agua que se va a muestra.

1.2. Los recipientes limpios deben identificarse adecuadamente.

2) TOMA DE MUESTRA:

De acuerdo al cuerpo receptor de agua el procedimiento de muestreo sed especifico para garantizar la homogeneidad y evitar alguna contaminacidn.

2.1. Para cuerpos receptores como en el caso de pozos, cisternas y tanques elevados dejar fluir el agua durante 5 a 10 minutos para desalojar el agua acumulada en la tuberfa y evitar posibles contaminaciones. Tomar la muestra en un recipiente limpio e identificado, llenar hasta 314 partes, aproximadamente, de su volumen nominal.

2.2. Para tanques de almacenamiento y tomas de agua dejar drenar el agua por espacio de 1 a

2 minutos, aproximadamente, tornar la muestra en la línea de salida por abajo del nivel para evitar alguna contaminacih.

2.2. Procedimientos de an8lisis.

2.2.1. Agua destilada y/o osmosis inversa.

2.2.1.1. Determinacidm de Calcio.

Los principales cationes que causan dureza son: Calcio, Magnesio, Estroncio, Fiemo Y Manganeso. La dureza se origina al contacto del agua con los suelos de formaciones rocosas Y donde hay calizas. Las aguas suaves se originan en Areas donde la capa vegetal es delgada y donde escasean o no hay calizas.

Asi el agua destilada y/o osmosis inversa, en principio por ser agua tratada carece de dureza, por lo que usamos principalmente un mCtodo cualitativo para su determinacidn.

Si se desea cuantificar su presencia, usamos el mCtodo para agua potable empleando el volumen de 100 m1 de agua muestra, el resto del procedimiento es igual.

DETERMINACION:

1.- En un matraz de 250 ml. agregar 100 ml. de agua problema. 2.- Añadir 2 ml. de soluci6n reactivo de oxalato de amonio (0.5 N). 3.- Leer el resultado. No debe producirse turbidez. 4.- Anotar el resultado en el reporte.

2.2.1.2. Determinacih cualitativa de Cloruros.

Los cloruros son iones que estan presentes en el agua en diversas concentraciones.

REACCION:

ci + Agcl + NO; AgCl + NO3 t I

I una vez agotado

4 (CrOJbajo (Ag,CrO, de color rojo).

DETERMINACION:

1.- Tomar 100 mi. de agua muestra. 2.- Aíladir 1 ml. de nitrato de plata solucidn reactivo O. 1 N. 3.- Leer. No debe producirse opalescencia en la soluci6n luego de transcurrir 15 minutos . 4.- Anotar el resultado en el reporte.

2.2.1.3. Xkterminmcidn de Sulfates.

DE"INAC1ON:

1.- Agmgar 100 ml. de agua muestra en un matraz de 250 ml. 2.- Afiadir 1 ml. de cloruro de bario 1 N. 3.- Leer. No debe producirse turbidez. 4.- Anotar el resultado en el reporte.

2.2.1.4. Determinacibn de Bioxido de Carbono.

DETERMINACION:

1.- Agregar en un matraz 25 ml. de agua problema. 2.- Ailadir 25 ml. de hidroxido de calcio 0.04 N. 3.- Leer. La mezcla debe permanecer transparente. 4.- Anotar el resultado en el reporte.

2.2.1.5. Detenmfnacibn de Sustancias Oxidables.

DETERMINACION:

1.- Agregar 100 mi. de agua muestra en un matraz de 250 ml. 2.- Agregar 10 ml. de Acid0 sulfúrico 2 N y colocar perlas de vidrio. 3.- Calentar hasta ebullicidn. 4.- Añadir 2 gotas de perganato de potasio 0.1 N y dejar hervir durante 10 min. 5.- Leer. El color rosado no debera desapareser por completo.

2.2.1.6. Determinacibn de Sdlidos Disueltos Totales (SDT).

La conduccidn de la corriente elktrica en agua, puede explicarse por medio de disocia&n electrolitica. Esta teoria establece que cuhdo se disuelve en agua un Bcido, una base o una sd, una porcirlin se disocia en iones positivos y otros negativos.

Los iones se mueven independientemente y se dirigen a los electrodos de carga opuesta m e d i t e la aplicaci6n de un campo el&trico. La cantidad de molkulas disociadas dependan de la concentracidn de la solucidn.

Las soluciones al igual que los conductores met;Uicos, obedecen a Ley de Ohm.

La unidad Qhm/cm se expresa tambiCn en siemenjcm. El microohms/cm es la millonesima parte del ohmkm.

DETERMINACION:

1.- Enjuagar 3 veces la copa del conductfmetro, con la muestra del agua. 2.- Llenar la oopa con el agua-muestra si es necesario ajuste el factor de la escala de lectura. 3.- Realizar el disparo y anote la lectura.

CALCULO: Solidos Disueltos Totales: Lectura de conductividad x Factor empírico Factor empírico = 0.62.

2.2.1.7. Determinacidn de pH. (Potenciometro).

DETERMINACION:

1.- Tome 1 0 0 ml. de la muestra de agua potable en un vaso de precipitado. 2.- Se introduce el electrodo combinado en la muestra en la muestra, se agita esta y se hace el

3.- Leer el pH de la muestra, esperando que el electrodo de vidrio alcance el equilibrio (30 seg.)

4.- Regrese el boton de "Standby" a la posici6n de apagado. 5.- Enguajar el electrodo con agua destilada.

disparo del "Standby".

reporte el resultado.

2.2.2. Agua potable.

2.2.2.1. Determinacidn de Dureza de Calcio.

DETERMINACION:

1.- Medir con probeta 50 ml. de agua problema. 2.- Agregar 2 ml. de la disolucidn de hidr6xido de sodio 8 N. 3.- Agregar aproximadamente 0.2g. de indicador de purpurato de amonio (MUREXIDA). 4.- Titular con la disoluci6n de versenato de sodio 0.02 n. hasta el cambio de color rojo salmon

a purpura orquidea.

CALCULOS:

DUREZA Cat como (Caco,) = V X N X Eq X l o o Q = V X N X 50 X lw Vm 50

REACCION:

2 N H 4 (color purpura) + Ca++ Ca (color purpura) + 2 NH,'

2.2.2.2. Determinacidn de Dureza Total.

DETERMINACION:

1 .- Medir 50 ml. de agua problema. 2.- Transferirlos a un matraz erlenmeyer de 250 ml. 3.- Agregar 2 ml. de la disoluci6n reguladora de amonio. 4.- Agitar y agregar 5 gotas de la disoluci6n indicadora de ericromo negro "T". NOTA SI APARECE UNA COLORACION AZUL TURQUEZA EN LA MUESTRA ESTO INDICA QUE NO CONTIENE DUREZA.

5.- Titular con la disolucidn de versenato de sodio 0.02 N hasta el cambio de co~OraCi6n rojo vino a azúl trurqueza.

CALCULOS:

DUREZA TOTAL DE Caco,= V X N X Eq X loo0 = V X N X 50 X IO00

Vm 50 V = Volúmen de Versenato de Sodio. N = Normalidad del Versenato. Eq = Equivalente químico de CaCO,. Vm = Volúmen de la muestra. l o 0 0 = Factor de conversi6n de miligramos a microgramos.

2.2.2.3. Determinaci6n de Alcalinidad ( F y M ). DETERMINACION DE ALCALINIDAD F COMO CaCO, (Af):

1.- Medir 50 ml. de agua muestra. 2.- Transferirlos a un matraz erlenmeyer de 250 ml. 3.- Agragar tres gotas de indicador de Fenolftaleina, si la muestra no torna ningún d O r nos

4.- Pero si toma color rojo encendido, se titula con soluci6n de Acido clorhídrico O k i d 0 indica que la alcalinidad a la F = O.

sulfúrico 0.02 N hasta la desaparici6n del color rosa encendido, anotando el voldmen gastado.

CALCULOS:

DETERMINACION DE ALCALINIDAD M COMO Caco3 (Am):

5.- A la muestra anterior se le agregan tres gotas de indicador anaranjado de metilo, agitandose.

6.- Se titula con soluci6n de dcido clorhídrico o sulfúrico 0.02 N hasta el vire de color naranja

NOTA SI ALAGREGAR LA FENOLFTALEINA NO APARECE COLORACION ROSA EN EL AGUA LA ALCALINIDAD ES IGUAL A CERO. EN CASO CONTRARIO SE PROCEDE AL SIGUIENTE PASO.

a canela. 7.- Anotar el volumen gastado sumando a Cste el volumen gastado en la determinacidn anterior.

CALCULOS:

ALCLINIDAD TOTAL V,, + VH, X 20 (Como constante).

2.2.2.4. Determinaci6n de Sdlidos Totales.

La conducci6n de la corriente el&trica en agua, puede explicarse por medio de disociaci6n electrolitica. Esta teoria establece que cuindo se disuelve en agua un Acido, una base o una sal, una porci6n se disocia en iones positivos y otros negativos.

Los iones se mueven independientemente y se dirigen a los electrodos de carga opuesta mediante la aplicacidn de un campo elktrico. La cantidad de mol&ulas disociadas dependen de la concentraci6n de la solucibn.

Las soluciones al igual que los conductores meaicos, obedecen a Ley de Ohm. La unidad Ohmkm se expresa tambien en siemedcm. El microohms/cm es la millonesima parte del ohm/cm.

DETEFWINACION:

1.- Enjuague 3 veces la copa del conductimetro, con la muestra del agua. 2.- Llene la copa con el agua-muestra si es necesario ajuste el factor de la escala de lectura. 3.- Realize el disparo y anote la lectura.

CALCULO: Solidos Disueltos Totales: Lectura de conductividad x Factor empirico Factor empirico = 0.62.

2.2.2.5. Determinaci6n de Cloro libre.

Si existen altas concentraciones de monocloramina ( Cloro combinado ) Csta puede interferir en la determinaci6n de cloro libre despues de un minuto de desarrollo. Sin embargo es importante que los resultados se lean dentro del minuto como se explica en el paso 4.

DETERMINACION:

l. - En un tubo coloque 5 ml. de agua muestra y coloquelo en la abertura del lado izquierdo, del

2.- Coloque en otro tubo 5 ml. de agua muestra a ser probada. 3.- Use las pinzas y el corta uñas y abra una almohadilla de polvo BPD cloro libre. Adicione

4.- Agite para mezclar, coloque el tubo muestra en el lado derecho superior del comparador. 5.- Sostenga el comparador de color hacia arriba y hacia una fuente luminosa; foco, ventana,

6.- Lea a traves de la abertura que esta en la parte frontal y rote el disco hasta igualar el color.

comparador de color.

su contenido al tubo del agua muestra.

etc.

Lea los miligramos de cloro libre en un minuto a travCs de la escala.

2.2.2.6. Determinad611 de pH. (Potenciometro).

DETERMINACION:

1 .- Tome 100 ml. de la muestra de agua potable en un vaso de precipitado. 2.- Se introduce el electrodo combinado en la muestra en la muestra, se agita esta y se hace el

disparo del "Standby".

3.- Leer el pH de la muestra, esperando que el electrodo de vidrio alcance el equilibrio (30 seg.)

4.- Regrese el boton de "Standby" a la posici6n de apagado. 5.- Enguajar el electrodo con agua destilada.

reporte el resultado.

2.3. Muestre0 del agua (potable y destilada) para el an6lisis microbiolbgico.

1) ACONDICIONAMIENTO DE RECIPIENTES.

l . 1.- Para colectar las muestras de agua destinadas al andisis bacteriol6gico se deben usar frascos de vidrio transparentes y de boca ancha perfectamente lavados.

1.2.- Agregar a los tarros para agua potable O. 1 ml. de una disoluci6n de tiosulfato de sodio al 10 % P/V que actua como inhibidor del cloro libre.

1.3.- Tapar la boca de los recipientes y cubrirlos con papel Kraft en forma de capuchon el tap6n del frasco.

1.4.- Someter los recipientes preparados a un proceso de calentamiento previo y esterilizar en autoclave a 121°C y 21 LB/P2 durante 20 minutos o esterilizar los frascos de muestreo en estúfa a 210°C por un tiempo minimo de 60 minutos.

2) TOMA DE MUESTRA:

2.1 .- Sanitizar previamente la salida de la toma de agua con una torunda bañada con una mezcla de Benzal-Alcohol a una diluci6n de 1 : 1 .

2.2.- Limpiar el orificio de salida con una torunda de algod6n impregnada de soluci6n de hipoclorito de sodio con una concentraci6n de 100 mg/L.

2.3.- Drenar a presi6n el agua durante 1 minuto y tomar la muestra ( el chorro de agua debe ser similar al grosor de un lapiz ) esta debe llegar a 3/4 partes del tarro.

2.4.- Cubrir inmediatamente el frasco con la tapa y el papel Kraft.

2.5.- Cerca del orificio de salida quitar simultineamente el ta@n del frasco y el papel de protecci6n, manejandolos como unidad, evitando contaminar el ta@n y el papel de protecci6n, así como el cuello del frasco.

2.6.- Mantener el tap6n hacia abajo para evitar contaminacicin y proceder a tomar la muestra sin p6rdida de tiempo, sin enjuagar el frasco, dejar el espacio libre requerido para la agitaci6n de la muestra previa al andisis. Efectuada la toma de muestra, colocar el tap6n y el papel de protecci6n al frasco.

NOTA EL PERIODO MAXIM0 QUE DEBERA TRANSCURRIR ENTRE LA TOMA DE MUESTRA Y EL ANALISIS SERA DE 6 HORAS.

2.4. Analisis microbiol6gico para agua destilada y potable.

El an6lisis microbiol6gico es importante, ya que sin el no se puede hablar de un control total de la calidad del agua, porque de 61 depende la detecci6n de microorganismos coliformes y bacterias mesofilicas.

2.4.1. Determinaci6a de bacterias mesofilicas.

Esta evaluaci6n determina el número de bacterias contenidas en una muestra de agua. La determinaci6n es indirecta por que cada colonia generada en las placas de cultivo se infiere que corresponde a una bacteria originalmente presente.

1) MATERIAL Y EQUIPO:

1.1.- Incubadora a 37°C + 0.5"C. 1.2.- Autoclave capaz de mantener 121OC. 1.3.- Contador de Colonias Quebec o similar. 1.4.- Cajas Petri de 100 X 15 mm est6riles. 1.5 .- Baño Maria con term6metro. 1.6.- Pipetas bacteriol6gicas est6riles de 2 ml. 1.7.- Frasco de vidrio transparente y boca ancha. 1.8.- Tubos de cultivo de 150 X 18 mm. 1.9.- Matraz Erlenmeyer de 2000 ml.

2) MEDIO DE CULTIVO:

2.1 .- Agar cuenta esthdar.

Pesar al O. 1 g. 22.5 g. de Agar cuenta esthdar y transferirlos a un matraz Erlenmeyer de 2000 ml.Agregar loo0 rnl. de agua destilada o desmineralizada, dejar humectar durante 15 minutos.

Calentar hasta la completa disoluci6n y transferir de 12-15 ml. de agar a tubos de cultivo, tap= dejando ligeramente flojo el tapdn.

Esterilizar en autoclave a 121°C ( 21 lb/pulg* ) durante 20 min. posteriormente apretar los tapones y dejar que solidifique, mantener los tubos en prueba de esterilidad.

3) DETERMINACION:

3.1 .- Mezclar perfectamente la muestra sin retirar el papel que cubre la boca del frasco.

3.2.- Transferir en condiciones esteriles, 1 m1 de muestra a la caja petri, aplicando la punta de la pipeta en el fondo de la caja.

3.3.- Agregar el medio de cultivo, licuado y conservado a 45°C en baño maria, a la caja m muestra y mezclar mediante movimientos rotativos hacia la izquierda y derecha sobre una superficie lisa y horizontal. Dejar solidificar.

3.4.- Incubar las cajas en posici6n invertida ( la tapa hacia abajo ) a 37°C f 0 . K durante 48 hrs .

3.5-. Contar las colonias desarrolladas que aparecen en el medio, no importan las caraterkticas que presenten.

3.6.- Reportar los resultados en la bitAcora y hoja de reporte correspondientes.

2.4.2. Determinsci6n de organismos coliformes.

La evaluaci6n de este pdmetro en el agua cobra inter& sanitario aún en cantidades muy pequeñas. Por lo que la tecnica ha sido diseñada con base en la probabilidad, asi es posible estimar el contenido de estos microorganismos en el agua referido a volúmenes de 100 ml.

1) MATERIAL Y EQUIPO:

1.1.- Incubadora a 37°C + 0.SOC. 1.2.- Autoclave capaz de mantener 121°C. 1.3.- Tubos de cultivo de 175 X 22 mm. con campana de fermentaci6n. 1.4. - Tubos de cultivo de 150 X 18 mm. con campana de fermentaci6n. 1.5.- Tubos de cultivo de 100 X 13 mm. con campana de fermentacidn. 1.6.- Pipetas bacteriol6gicas estCriles de 10 y 1 ml. 1.7.- Asa de platino o micromel de 3 mm. de digmetro. l . 8. - Matraz Erlenmeyer de 2 O00 ml.

2) MEDIOS DE CULTIVO:

2.1 .- Caldo Lactosado al 50 % : a) Pesar al O. 1 g. 19.5 g. de Caldo Lactosado y transferir a un matraz erlenmeyer de 2000 ml. b) Agregar lo00 ml. de agua destilada o desmineralizada dejar humectar durante 15 min. c) Calentar hasta completa disoluci6n, tranferir 10 ml. de caldo a tubos de cultivo de 175 X 22

d) Esterilizar en autoclave a 121°C ( 21 lb/pulg2 ) durante 20 min., apretar los tapones y enfriar mm., taparlos dejando ligeramente flojo el tap6n.

inmediatamente despuCs de esterilizar.

2.2.- Caldo Lactosado al 100 %:

a) Pesar al 0.1 g. 13.0 g. de Caldo Lactosado y transferir a un matraz 2000 ml. b) Agregar l o 0 0 ml. de agua destilada o desmineralizada dejar humectar durante 15 min. c) Calentar hasta completa disoluci6n, tranferir 10 ml. de caldo a tubos de cultivo de 175 X 22

d) Esterilizar en autoclave a 12 1°C ( 21 Ib/pulg2 ) durante 20 min., apretar los tapones y enfriar mm., taparlos dejando ligeramente flojo el tap6n.

inmediatamente despuCs de esterilizar.

2.3.- Caldo Lactosado - Bilis Verde Brillante:

a) Pesar al O. 1 $. 40g. de Caldo Lactosado-Bilis Verde Brillante transferir a un matraz 2000 rnl. b) Agregar lo00 ml. de agua destilada o desmineralizada y disolver hasta total disoluci6n. c) Transferir a tubos de cultivo de 100 X 13 mm. taparlos dejando ligeramente flojo el tqx5n. d) Esterilizar en autoclave a 121°C ( 21 lb/puIg2 ) durante 20 min.

NOTA LOS TUBOS DE CULTIVO CON LOS TRES DIFERENTES MEDIOS ESTERILES MANTENERLOS EN PRUEBA DE ESTERLILIDAD, INCUBANDOLOS DURANTE 48 HORAS.

, "

3) DETERMINACION:

3.1 .- Mezclar perfectamente la muestra sin quitar los papeles protectores. 3.2.- En condiciones esteriles inocular con 5 ml. de muestra cada una de 5 tubos con 10 d. de

3.3.- Inocular COR 1 ml. de muestra 1 tubo con 10 ml. de medio lactosado al 100 96. 3.4.- Inocular con 0.1 mkl. de muestra 1 tubo con 10 ml. de caldo lactosado al 100 96. 3.5.- Incubar los tubos a 37°C durante 48 horas. La informaci6n de gas en cualquier cantidad

en alguno de los tubos hace positiva la prueba. 3.6.- Realizar una prueba confirmatoria a los tubos que dan positivo, sembrando de 2-3 usados

del contenido de estos tubos a un tubo con 3 ml. de Caldo lactosado-Bilis verde brillante. 3.7.- Incubar a 37°C durante 24 a 48 horas, la formaci6n de gas se considera una prueba

confirmatoria positiva. 3.8.- Reportar los resultados en la bitdcora y hoja de reporte correspondientes.

caldo lactosado al 150 %.

m. ASPECTOS GENERALES Y VALIDACION DEL PROCEDIMIENTO DE SANITIZACION.

Un producto con los componentes de la mejor calidad puede tomarse inaceptable dpidamente si el ambiente donde se procesa est6 contaminado o si el proceso de elaboraci6n no se hace en forma correcta. En consecuencia, las instalaciones para produccidn y el procedimiento que se emplea para procesar el producto deben ajustarse a normas adecuadas para el objetivo a lograr.

Para la producci6n de productos estdriles se requiere de Areas adpticas que garanticen que su elaboraci6n se ha realizado dentro de los requisitos previstos, de tal manera que el producto pueda calificarse no s610 farmacoldgica e inmunogenicamente útil sino tambidn exento de cualquier contaminante.

Dada la importancia de estas h s asepticas deben considerarse siertos factores como su disefío y construcci6n para facilitar la limpieza, operaci6n eficiente, con aspecto atrayente y comodidad para el personal. Los requisitos adicionales para el Area as6ptica e s a destinados a proveer un ambiente limpio donde, por ejemplo, una vacuna pueda estar expuesta al ambiente por S610 periodos breves durante el fraccionamiento del volumen de la vacuna a granel hacia los recipientes finales con dosis múltiples, sin que se contamine. Los contaminantes como polvo, pelusa y microorganismos flotan normalmente en el aire, se depositan en mesas y superficies corporales del personal y en el piso. El diseño y control de un hea asdptica se encamina a reducir la presencia de estos contaminantes para que dejen de ser un peligro para el envasado aseptico. Aunque el kea asbptica debe ser contigua a &eas de apoyo de modo que se consiga una circulaci6n eficiente de los componentes, se deben establecer barreras para reducir al mínimo el ingreso de contaminantes en el Area as6ptica. Tales barreras pueden consistir de tabiques sellados, a menudo con paneles de vidrio para mayor visibilidad e iluminaci6n. Otro tipo de barrera es una entrada a traves de puertas de seguridad que requieren el paso a travb de una trampa a h a disefiada de modo que no se puedan abrir ambas puertas al mismo tiempo.

Por tanto, el Brea aseptica debe tener rasgos de construcci6n y diseño para obtener seguridad mbima. El cielorraso, las paredes y el piso deben ser sellados, con materiales que no se desprendan como; por ejemplo, pinturas ep6xicas de colores que contribuyan al aumento de luz, para que se puedan lavar y desinfectar según se necesite. Todas las mesas deben ser de acero inoxidable y los apliques de luces, tuberías de servicio y ventiles o respiradores deben estar a ras de las paredes o cielo rraso para eliminar relieves, uniones y otros sitios donde se acumulan polvo o suciedad. El personal que ingresa al Area aseptica solo debe entrar a travCs de una trampa. La indumentaria debe consistir en una prenda enteriza esteril con gorro, barbijo, botas y guantes esteriles. El movimiento dentro del kea debe ser mínimo. En estas Areas se recomienda el empleo de flujo laminar, el aire que penetra a estas Areas debed ser filtrado por filtros absolutos HEPA para evitar contaminaci6n.

3.1. Germicidas para sanitizar 6reas adpticas.

Uno de los aspectos m& importantes en el control de la contaminacibn ambiental en el dptica, es el cuidado y mantenimiento. Este trabajo no se debe encomendar a personal de mantenimiento en general sino que debe hacerlo gente con, instrucciones especiales bajo la supervisidn de personal capacitado en el cuidado de las Areas adpticas. En general, la limpieza y mantenimiento deben hacerse luego de completar el trabajo del dfa con un intervalo de quietud

antes de iniciar otra operaci6n aseptica. Con el advenimiento de equipos de flujo laminar el aire filtrado a traves de filtros HEPA, los rigores de contaminacih se han reducido porque el flujo de aire limpio mantiene el &ea libre de contaminantes toda vez que esta ha sido limpiada. Todos los equipos de mantenimiento se deben elegir por su eficacia y por la ausencia de tendencias a producir particulas como pelusa y se los debe reservar para las &eas asepticas solamente.

En el departamento de P. F. se cuenta con dos & a s asepticas ( A y B ), descritas en el punto anterior. Para el mantenimiento de estas fieras asbpticas se realiza la sanitizaci6n de las mismas usando germicidas. Los germicidas tradicionalmente usados para la sanitizaci6n son los siguientes:

1) Fenol en soluci6n al 5%. 2) Cloruro de benzalconio (Roccal) en concentraciones del 2% al 5 % . 3) Alcohol al 70%. 4) Soluci6n de Iodo al 50%. 5 ) Soluci6n de hipoclorito de sodio al 2 % .

A partir de estos compuestos se han derivado germicidas comerciales que tienen el mismo principio activo, contandose a la fecha con una variedad de ellos en el almacen del Instituto y son los siguientes:

1) Gemi- gen Germicida dihalogenado.

2) BGC-3 Germicida multifen6lic0, concentrado con acci6n detergente, no fosfatado.

3) Control Compuesto mezclado y concentrado a base de sales cuaternarias de amonio.

4) lodet Compuesto yodof6rico.

5 ) GSC Germicida concentrado multifen6lico.

6) Klor Kleen SoluciCin bactericida a base de cloro estabilizado.

NOTA: Las especificaciones tknicas de estos germicidas se encuentran en el anexo No 2.

Germicidas y su modo de accibn.

Todos los agentes desnaturalizadores de las proteínas sirven como desinfectantes, estando entre ellos los fenoles, ficidos, lejías, alcoholes, hal6gerros y sales de metales pesados. Adem& las proteinas pueden desnaturalizarse por efecto de agentes físicos (calor, energfas de radiaciones).

Por otra parte hay sustancias desinfectantes que disuelven los lípidos de las membranas, los alquilizan, oxidan o se combinan con ellos con grupos sulfhidrilos, y de ese modo producen una destruccidn celular inespecifica. La desinfeccih química esa influenciada por tres fendmenos:

1. La sustancia debe adsorberse a la pared celular. 2. Debe penetrar en la cblula y 3. Debe reaccionar con uno o mfis componentes celulares.

Los buenos desinfectantesa deben de ser bactericidas aun cuando la muerte de los g6rmenes tarde en producirse horas o dias según las circunstancias.

La curva de muerte bacteriana sigue un modelo exponencial y la disminuci6n del número de gCrmenes s610 es espectacular al principio ( figura 1 ). Muy a menudo en la pdctica no se concede la importancia que tiene al tiempo necesario para la desinfecci6n efectiva.

F'igura No. 1. Curva de S. pamtyphi por la ( según Chick, H. Camb. 8, 92 ).

Fenoles;

El fenol ("ficido carbdico"), introducido por Lister en las operaciones prActicas de asepsia y antisepcia, en la actualidad S610 se emplea en forma de derivados, aun cuando su letalidad sigue sirviendo como patr6n comparativo para cuantificar el efecto letal de todos los demh desinfectantes: un coeficiente fen6lico de 100 significa que el desinfectante valorado actúa 100 veces m& potente contra un germen que el fenol. Los fenoles son venenos protoplasm4ticos desnaturalizantes, cuya acci6n se ve muy afectada por la presencia de de materia orghiea. TambiCn elevan la permeabilidad de las membranas, con lo que se vacía el contenido celular. Los derivados son por lo general fenoles alquilizados ( metil-fenol = p-cresol ) y la accidn bactericida de los mismos aumemnta considerablemente frente a los grampositivos cuando la cadena alquflica se alarga hasta el n-amil-fenol. S610 unos pocos derivados fendlicos se han extendido en el uso prictico, presentando acciones muy controvertidas, como sucede con la clorhexidina= hibitan y el hexaclorofeno ( pHisohex ). Este último se ha empleado como desinfectante cutArtso para las manos.

1 4 4 8 4 4

L o s ficidos inorghicos, como consecuencia de su corrosividad, no son adecuados. Lds &idos OrgAnicos, como el acCtico, benzoico, ldctico, citric0 y tarthico se emplean para la consemacicb de alimentos y el &ido malixidico se emplea como terap6utico para la desinfeccih de vias urinarias.

Los dlcalis son menos activos que los Acidos, porque el i6n hidroxilo actúa m& dbbilbilmente que los hidrogeniones, aun cuando esta acci6n depende siempre del grado de disociaci6n. Los dcalis se utilizan especialmente frente a virus ( sosa para la glosopeda ).

Oxidantes;

Actúan mediante la liberaci6n de oxígeno disuelto at6mico y su acci6n se ve afectada por las proteínas. El H,O, y el permanganato son oxidantes que tambiCn reaccionan intensamente con las proteínas y destruyen la estructura molecular de Cstas. Sin embargo, su accidn es muy fugaz.

Alcoholes:

Tienen una acci6n mhs bactericida que bacteriost5itica y actúan frente a las &lulas vegetativas, incluso las micobacterias y los hongos, pero no frente a las esporas. Esto causo, en principio, infecciones yatrogknicas. de tetanos y gangrena gaseosa producidas por gCrmenes cuyas esporas contaminaban el alcohol en que se conservaban las jeringas para inyectar.

El alcohol desnaturaliza las proteínas, su efectividad aumenta con el peso molecular, es decir, al aumentar la longitud de su cadena. Se emplean el alcohol etflico, el n-propilico y el isopropflico, así como el etilCn-glicol y el propilCn-glicol, siendo aplicados los glicoles en forma de aerosoles para la desinfeccidn del aire.

La concentraci6n 6ptima del alcohol etílico se encuentra alrededor del 70 96, ya que concentraciones mayores no consiguen penetrar en la profundidad del tejido al desnaturalizar las proteínas muy rhpidamente en la superficie.

Deterpentes:

Entre los compuestos activos para limpiar superficies se encuentran las sustancias cati6nicas, anidnicas y anfot6ricas. En el grupo de las cati6nicas los m6s importantes son los compuestos cuaternario de amonio ( quats, jabones invertidos ). Dada su actividad superficial actúan como detergentes y como desinfectantes, atacan las capas que delimitan la &hla y alteran las funciones osm6ticas de la membrana citoplasmhtica. Esto es posible porque los detergentes son compuestos polares que presentan grupos lip6filos ( anillos aromdticos o largas cadenas hidrocarbonadas ) y grupos hidr6filos. Ellos pueden interactuar con las membranas quienes tienen carActer polar, lo cual finalmente altera sus funciones. Adicionalmente los detergentes tambiCn inactiva enzimas.

Los quats tienen una acci6n opuesta a la de los compuestos ani6nicos y los jabones y su actividad se ve muy afectada por la presencia de materia orghica.

Hal6eenos;

Los compuestos de cloro y yodo han encontrado una gran aplicaci6n como desinfectantes. El yodo, sin embargo, estA siendo sustituído por otros productos.

El cloro posee una alta reactividad química y es un bactericida dpido y altamente efectivo

incluso en concentraciones muy bajas. El efecto desinfectante se consigue sobre todo usando hipocloritos, este efecto es menos intenso al usar cloraminas.

El yodo es un elemento bactericida altamente reactivo, que mata sin distinci6n a todas las bacterias. El yodo libre reacciona con las protefnas celulares y es igualmente activo frente a las esporas y a las c6lulas vegetativas, ademis tiene actividad como fungicida.

3.1.1. Rotaci6n de germicidas.

El &ea as6ptica se sanitiza con un germicida seleccionado. El germicida ad como su concentraci6n serin elegidos en base a los resultados que se obtengan mediante un monitorea microbiol6gico, el cual, debed efectuarse en condiciones est4ticas y dinhicas en el Area aseptica.

Cada germicida deber6 rotarse en forma sistemgtica semanalmente, en casos donde la persistencia de un determinado contaminante no pueda erradicarse debed rotarse cada 72, 48 6 24 horas, según el caso.

La rotaci6n se establece en forma alternada utilizando primero un multifenolico el cual sed seguido por un polihalogenado o compuestos cuaternarios de amonio.

3.1.2. Monitoreo microbiol6gico.

Antes de realizar la sanitizaci6n del &ea aseptica, se realizo un monitoreo microbiol6gico con el fin de determinar el grado de contaminaci6n microbiol6gica y asi poder especificar el tipo y concentraci6n del germicida a utilizar para sanitizar el &ea aseptica. Este monitoreo se lleva a cabo mediante la exposici6n de placas con medio de cultivo agar soya tripticaseha ( TSA ), como se indica en puntos posteriores.

3.1.2.1. Resultados.

Se realizo el monitoreo microbiol6gico en el kea aseptica B ( &ea donde se lleva a cabo el llenado de las vacunas antirr6bicas ) por medio de la exposici6n de placas con TSA.

Las placas se colocaron de acuerdo al esquema interior del Area, en el cual se indica su posicidn mediante números progresivos ( ver esquema anexo ). Las placas se expusieron durante un periodo de 30 minutos. Transcurrido este tiempo se cerraron las placas y se incubaron a una temperatura de 3537°C durante 24 horas y posteriormente a temperatura ambiente durante 48 horas. Los resultados se muestran en la tabla No. 1.

GERENCU GENERAL DE BIOLOGICOS Y RE4Cl7VOS INSZYTUTO NACIONAL, DE VIROLOGZA

PROCESOS FINMES

OBSERVACIONES

Area 1:

A: Mesa B: Banco de concreto C: Mesa

Area 2:

D: Mesa Bajo el flujo laminar: E: Alimentador de frasco F: Mdquina llenadora G: Mdquina taponadora H: Carril que comunica a la

nuíquina engargoladora

I: Mdquina engargoladora J: Tambor giratorio K: Mesa L y M: Bancos de concreto

RESULTADOS

W A No.

1

6

19

1: Area de material 2: Area de llenado

Fecha de exposicidn: 3 I *

Tabla No. 1. Resultados del monitoreo microbiol6gico antes de la saNtizaci6n del girea B.

EXPOSICION DE PLACAS CON MEDIO DE CULTIVO

EN PROCESO ANTES:- DURANTE:-

POSICION RESULTADO POSICION RESULTADO ( UFC 1 ( UFC 1

1 I II ll " 1 I II

Realizando un aniilisis de algunas de las placas expuestas se logro identificar los siguientes microorganismos (unicamente se identifico hasta su genero):

Caja No. 6;

- Se identificaron cocos Gram Positivos, Catalasa Positiva del genero Staphylococcus.

Caia No, 4;

- Se identificarh Cocos Gram Positivos, Catalasa Positiva de los generos Micrococcus y Staphylococcus. - Bacilos Gram Positivos del gCnero Bacillus. - Bacilo largo y delgado Gram variable compatible con actinomicetos.

Caja No. 7:

- Bacilo Gram positivo compatible con el genero Bacillus.

Caja No. 16:

- Se identific6 un bacilo Gram negativo que correspondia a una enterobacteria. - Cocos Gram Positivos del genero Micrococcus.

Caja No, 12:

- Cocos Gram Positivos Catalasa Positivos pertenecientes al gCnero Staphylococcus.

Las colonias se resembrardn en gelosa sangre, a las 18 horas se hizo tincidn de Gram, la prueba de Catalasa y oxidasa.

Como se puede observar hay variedad de microorganismos presentes en el &ea, por tanto las características que debe reunir un desinfectante quimico son tan diversas que phcticamente no se reunen en un sdlo germicida. El hecho de que existan cientos de germicidas indica ya de por sí que no existe ninguno ideal. Por lo que sería conveniente sanitizar el Area &ptica con una serie de germicidas efectivos contra microorganismos ( identificados tentativamente ) y rotarlos de manera sistemitica semanalmente o rotarlos cada 72-24 horas según la persistencia de un determinado contaminante, En la tabla No 3 se presenta un programa de sanitizacidn semanal, el cual es el que se recomienda seguir.

3.2. Registro del manejo de germicidas.

Para un mejor manejo de los germicidas se lleva un registro en una bit&ora, en la cual se especifica como se prepara cada uno de los germicidas, lote, fecha de preparacidn, quien la prepard y superviso. A continuacidn se presenta la tabla No 2, la cual resume la informacidn que existe en la bithora.

TABLA No 2. Preparaci6n de gerrnicidas.

ContinuacUn de la tabla No 2.

" " GERMI- SOL. STOCK SOL. DE TRABA- OBSER- SUPER- CIDA JO VACIO- VISO

LOTE FECHA DILUCI- PREPA- FECHA PREPA- DE ON RO DE RO PREPA- PREPA- RACION RACION

I "

1 4 4 8 4 4

3.3. Programa de sanitizaci6n de ireas asbpticas.

En seguida se muestran dos tablas indichdose en la tabla No 3 un programa de limpieza y sanitizaci6n semanal del &ea aseptica. Se sugiere que el día de limpieza exhaustiva y sanitizaci6n sea cada viernes para que el germicida actúe durante el fin de semana. En la tabla No 4 se indica un programa de sanitizacidn diario despub de cada operaci6n realizada en el h a adptica; se estipula el tipo de germicida y dilucidn usada por dfa, recomendandose que el germicida por usar sea el aplicado cada viernes para que de esta manera la rotacidn sea semanal.

TABLA No. 3. Limpieza y sanitizacidn semanal del 4rea asCptica. En esta tabla deberfin f m a r las penonas que realizan la limpieza y sanitizaei6n. asl como la del supervisor.

MES

L

SEMANA

1

2

3

4

5

DIA

VIERNES

VIERNES

VIERNES

VIERNES

VIERNES

FECHA

22 DE ABRIL

29 DE ABRIL

6 DE MAYO

13 DE MAYO

20 DE MAYO

INDICACIONES

LIMPIEZA EXHAUS- T N A CON DETER- GENTE DUFOME Y SANITIZACION CON GERMI-GEN, DILU- CION 1 : l O APLI- CANDOLO POR AS- PERSION Y DEJAN- DO ACTUAR 48-72 HORAS.

LIMPIEZA EXHAUS- TIVA CON DETER- GENTE DUFOME Y SANITIZACION CON

1:30, APLICANDOLO POR ASPERSION Y DEJANDO ACTUAR

BGC-3, DILUCION

48-72 HRS.

LIMPIEZA EXHAUS- TIVA CON DETER- GENTE DUFOME Y SANITIZACION CON CONTROL AL 1 Z, APLICANDOLO POR

JANDOLO ACTUAR ASPERSION Y DE-

48-72 HORAS.

LIMPIEZA EXHAUS- TIVA CON DETER- GENTE DUFOME Y SANITIZACION CON GSC, DILUCION 1:30 APLICANDOLO FOR

JANDOLO ACTUAR ASPERSION Y DE-

24-72 HORAS.

LIMPIEZA EXHAUS- TIVA CON DETER- GENTE DUFOME Y SANITIZACION CON COL KLOR WEEN

PLICANDOLO POR

JANDOLO ACTUAR

DILUCION 1:267, A-

ASPERSION Y DE-

48-72 HORAS.

REAL1 20

__1

- SUPEFW IS0

TABLA No. 4. Programa de sanitizaci6n diaria.

1

2

3

4

5

GERMI-GEN DILUCION 1 : l O

BGC-3 t

DILUCION 130

CONTROL AL 1 % 9

GSC DILUCION 1 :30

I6

GERMI-GEN

3.4. Programa de control de esterilidad en el equipo utilizado en el $rea ascptica.

El programa de control de esterilidad de la maquinaria se lloeva a cabo de manera semejante al programa de control de &reas asepticas.

3.5. Limpieza y sanitizacidn de B r e a s adpticas.

PROCEDIMIENTO.

1. El personal encargado de realizar estas operaciones debed contar con el material ( cepillos, agua, jergas, detergentes, etc. ) y ropa adecuada ( overol, cofia, cubrebocas y botas de hule) para la limpieza del &rea, previa a la sanitizacih.

2. Todo el material que sed introducido al &ea asbptica debed ser previamente esterilizado o sanitizado para evitar en lo posible el aumentar la carga microbiana.

3. La limpieza deber6 realizarse de adentro hacia afuera, lavandose con agua ear i l y detergentes que de preferencia no permitan la formaci6n de gotas en las superficies, que seque dpida y f6cilmente sin necesidad de frotarlo. El detergente DUFOME cubre estas caracterfsticas y se encuentra disponible en el alma& del Instituto. ( la informacih tknica de DUFOME se encuentra en el Anexo No 2).

4. Debed realizarse un tallado exhaustivo, utilizando cepillos con cerdas de material pUstico, en techos, paredes, piso y superficies; esmerando la limpieza en las uniones de techos y muros, pisos, etc. En el caso de usar detergentes cuyo secado en las superficies lavadas no sea dpido; se podr6n utilizar esponjas U I O telas que no desprendan pelusas.

5. Una vez lavada el &rea se proceder6 a sanitizarla con el germicida en turno.

6. El germicida así como su concentracidn serán elegidos en base a los resultados que se obtengan mediante un monitoreo microbioldgico, el cual, debed realizarse en condiciones estiiticas y din6micas en el Area aséptica tal como se describe m8s adelante. Para diluir el germicida se deber6 utilizar agua estkril,

7. Cada germicida debed rotarse en forma sistem4tica semanalmente, en casos d6nde la persistencia de un determinado contaminante no pueda erradicarse deber6 rotarse cada 72,48, o 24 horas, segdn el caso.

8. Para la aplicacidn de los germicidas se sugiere utilizar un atomizador marca HUDSON o en su defecto utilizar esponjas o telas est6riles que no desprendan pelusas; dicha aplicaci6n debed realizarse de adentro hacia afuera humedeciendo techos, paredes y superficies en general dejando actuar el desinfectante de 48 a 72 horas.

9. DespuCs de sanitizada el Area y antes de usarla deber6 realizarse un monitoreo microbiol6gico mediante exposici6n de placas con medio de cultivo agar soya tripticaseha durante treinta minutos manteniendo la tapa boca abajo y a un lado de la placa durante el monitoreo. El medio de cultivo utilizado debed ser de reciente preparacidn, debidamente lotificado y aprobado en cuanto a la prueba positiva y negativa asi como su capacidad promotora del crecimiento.

10.

11.

12.

14.

Una vez transcurrido el tiempo de exposicidn, tapar, rotular para su identificacibn, colectar las placas y salir del &rea con todas las precauciones propias del sitio dbnde se encuentre. Las placas se deber6n incubar a temperatura de 35-37oC durante 24 - 48 horas y posteriormente a temperatura de 2527°C o en su defecto a temperatura ambiente durante 48-72 horas para poner de manifiesto la presencia de hongos o eliminar esta posibilidad.

Los resultados se deberh reportar en una bitiicora de dicha &ea y analizandolos contra un esquema que indique la colocacidn exacta de las placas para poder identificar d6nde persiste alguna contaminaci6n.

Si el resultado es satisfatorio el &ea podra ser utilizada, pero una vez terminada la actividad diaria se deber6n sanitizar superficies y pisos con el germicida estipulando en el programa de la tabla No. 4.

El departamente de Control en Proceso realizd la validacidn del medio ambiente y flujos laminares cada 25 o 30 días así como la supervisibn del buen cumplimiento y funcionamiento en los registros.

3.6. Programa de control ambiental para 6reas adpticas.

A pesar de las extensas precauciones que toman los fabricantes farmaduticos para proveer condiciones satisfatorias durante el proceso correcto de los productos biol6gicos, el aire puede cargarse de bacterias y otras particulas, con la ponsible contaminacidn del producto. Para vigilar esto se deben realizar pruebas de control ambiental apropiados a intervalos regulares.

.

3.6.1. Calidad microbioliigica del Brea.

Exposici6n de placas { Diaria o por turno despues de sanitizacibn.

AMBIENTE { Muestreador de aire { Por rutinas especificas en mnas críticas O de algún

inter& especial.

Raspado con hisopo

Placas de contacto { Evaluacidn de sanitizacih.

(RODAC SWABBING)

La exposici6n de cajas petri con medios de cultivo en las &reas de producci6n, es una Uknica muy usada, que permite evaluar la contaminacidn microbiana del aire en dichas W, esta evaluaci6n constituye un control en proceso, que permite la deteccidn de cualquier mal funcionamiento de los filtros HEPA y cualquier desviaci6n a Buenas Pdcticas de Manofactura.

Para la producci6n de productos esteriles son indispensables gabinetes de flujo laminar y/o estaciones de aire puro filtrado a travCs de filtros HEPA.Se deben llevar a cabo pruebas iniciales y rutinarias para asegurar el buen funcionamiento de los filtros HEPA.

El aire filtrado se usa en muchos procesos que puede por si s610 poner en contacto particulas con el producto esteril. Por lo que, la calidad microbiana del aire debe ser tal, que no contribuya a la biocarga del producto.

3.6.2. Evaluacibn de filtros HEPA y de sanitizacibn.

La eficacia de las operaciones de limpieza y sanitizacidn deben de ser evaluadas continuamente. Varias tknicas para evaluar dichas operaciones, se han desarrollado con respecto a la fonna de la superficie que se va a examinar y la naturaleza de la informacih requerida, pero todas tienen por objetivo asegurar que las instalaciones y el equipo esten adecuadamente limpios, y as€, reducir la posibilidad de contaminaci6n.

3.6.2.1. Evaluaci6n de la calidad microbiologica ambiental.

Para evaluar la calidad rnicrobiologica ambiental de las 6reas de produccih, nos valemos de la exposici6n de cajas petri con medios de cultivo, esto permite la detecci6n de cualquier desviaci6n a Buenas Pdcticas de Manufactura.

PROCEDIMIENTO DE EVALUACION:

a) El medio utilizado es agar soya tripticaseína (TSA), antes de utilizarlo debed pasar las pruebas de control microbioldgico y capacidad promotora del crecimiento.

b) La persona que evalue el 6rea debe estar entrenada en cuanto al comportamiento a observar dentro de las Areas.

c) Las placas son colocadas de acuerdo a un esquema; del interior del &ea, que indica su posicidn mediante numeros progresivos.

d) Las placas ya colocadas en su posici6n se exponen por 30 min., durante este tiempo se debe evitar en lo posible cualquier movimiento brusco o el hablar inecesariamente, para de esta manera evitar cualquier contaminacidn que afecte la evaluacidn. Transcurrido los 30 min. se cierran las placas y se abandona el &ea.

e) Al validar el Area durante el proceso, el personal de produccidn debe estar preparado ya y nuevamente se repiten los pasos c) y d),

f) Las placas se marcan con la fecha, &ea que fue evaluada, tiempo de exposicidn y si fue antes o durante el proceso, asf como el número de placas.

g) L o s limites se establecen de acuerdo al Area que se trata, al estar dentro de los limites se reporta como "ACEPTADA" al laboratorio correspondiente de este modo esta apta para

trabajar en ella.

En el caso de rebasar estos limites se reporta como "RECHAZADA" y se procederd a buscar el origen del problema y corregirlo.

E1 Area se evalua nuevamente despuds de haber sido sanitizada correctamente.

3.6.2.2. Evaluacih de los filtros HEPA.

MUESTREADOR DE AIRE:

En las operaciones de fabricaci6n y sintesis de productos farmac6uticos y biologicos, es necesario la vigilancia continua de los niveles bacterioldgicos, para verificar que se cumplan con los requisitos de efectividad de los filtros HEPA en las Areas asRpticas y de los sistemas de tratamiento a base de luz ultravioleta.

Para esto se cuenta con un detector Ambiental Centrifugo Biotest RCS, de operaci6n manual para la deteccidn y cuantificacidn de unidades formadoras de colonias por metro cúbico en el medio ambiental, con el Biotest se prueba periodicamente la calidad del aire.

PROCEDIMIENTO:

a) La persona que evalue el 6rea debe estar entrenada en cuanto al comportamiento a observar dentro de las ¿ireas.

b) Se eligen los sitios a evaluar ( principalmente filtros, difusores y extractores).

c) Se procede a montar las aspas y cilindro estcriler del muestreador centrffugo, el resto del instrumento se desinfecta con alcohol al 70% o bend.

d) El tiempo de muestre0 se determina según el volumen de aire que se desea examinar.

e) Se muestra utilizando tiras con medio Agar GK-A ( Agar-TSA para cuenta ) y tiras con medio Agar HS ( Agar-Rosa Bengala ) para hongos y levaduras.

f) Una vez que el detector haya efectuado la toma de muestra, se separa la tira de medio con Agar del cilindro y se introduce en la envoltura original y se sella, se etiqueta la tira para su iden tificaci6n .

g) Las tiras GK-A se incuban a 30- 35°C durante 48 horas y las de HS a 28-3o"c durante 120 horas.

L o s resultados se reportan en UFC/m3.

3.6.2.3. Evaluaci6n del proceso de sanitizaci6n.

SUPERFICIES.

La eficacia de las operaciones de limpieza y sanitizaci6n deben de ser evaluados continuamente.

Existen varias tknicas para evaluar dichas operaciones, Cstas se han desarrollado con respecto a la forma de la superficie que se va a examinar y la naturaleza de la informacih requerida.

Pero todas tienen por objeto asegurar que las instalaciones y el equipo esten limpios y asi reducir la posibilidad de contaminaci6n.

PROCEDIMIENTO:

Al evaluar la caliadad microbil6gica de las superficies en keas &pticas, se utiliza la t&nica de contacto RODAC, y como complemento se realiza el raspado con hisopo.

a) Se coloca en tubos de ensaye un volumen de 1.5 ml. de caldo de Tripticaseina y lecitina esterilizados y rotulados de acuerdo a zonas especificas del irea a validar.

b) La persona que evalue el irea debe estar entrenada en cuanto al comportamiento a observar dentro de ias keas .

c) Se procede a humedecer el hisopo estCril en el medio del tubo correspondiente ( previamente numerados ).

d) Se toma una muestra de 5 x 5 cm de la zona establecida, se coloca el hisopo en el tubo cortandolo por la mitad con tijeras previamente esterilizadas. Para asi evitar al mkimo posibles contaminaciones. El kea muestreada se limpia con el germicida en turno.

e) Terminando el muestreo, se abandona el &ea con todas las precauciones requeridas.

f) Los tubos se agitan mediante un agitador vortex durante 10 segundos para desprender los posibles microorganismos que pudieran encontrarse adheridos al hisopo.

g) Se vacia la totalidad del medio ( 1.5 ml. ) en condiciones de esterilidad, en placas de TSA previamente identificados.

h) El in6culo depositado en la superficie de la placa se extiende con una varilla de vidrio est614 a la flama de alcohol.

i) Dejar las placas a temperatura ambiente durante 15 minutos e incubarlas en posici6n invertida durante 48 horas a 37°C posteriormente se incuban 48 horas a 2527°C para favorecer el posible desarrollo de hongos.

j) El resultado de cada placa se deber& multiplicar por 5 debiendose reportar en UFC/25 cmz.

PLACAS RODAC;

El principal proposito de las placas RODAC es monitorear las superficies limpias para ello se debe neutralizar el principio activo de los desinfectantes.

PROCEDIMIENTO:

a) Remover la tapa, evitando al mtiximo una contaminacidn accidental. Aplicar las placas de agar directamente en la superficie a muestrear y ejercer presidn vertical moderada.

b) Tapar nuevamente la placa con cuidado.

c) Una vez terminado el muestreo, todas las placas debidamente identificadas se incuban em posici6n invertida por 48 horas a 37OC.

d) Una vez transcurrido este período contar el número de colonias y reportar los resultados en el formato correspondiente.

3.6.2.4. Exposici6n de placas (evaiuaci6n Depto. de Procesos Finales).

Antes de llevar a cabo el llenado de la vacuna, se expusier6n placas con medio TSA durante treinta minutos en el &-a B. Las placas se colocardn en base al esquema del Area ( ver esquema anexo ), enumerados en orden progresivo. Se incubaron a 35-37 “c durante 48 horas y posteriormente a temperatura ambiente por un periodo de 48 horas. Los resultados obtenidos se muestran en la siguiente tabla junto con el esquema anexo.

GERENCU GENERAL DE BZOLOGICOS Y REACTNOS ZNSZ7TUTO NACIONAL DE VIROLOGIA

PROCESOS FINALES

ESQUEMA QUE IMIICX DONDE SE COLOCAN CAJAS PE"I1pI CON TSA PARA D-INAR EL GRALIO DE ESTERILIDAD MICROBIOLOGIC4 ENAREAS DE DKUCION Y LLENADO.

OBSERVACIOh?ES

Area 1:

RESULTADOS

W A No.

A: Mesa B: Banco de concreto C: Mesa

Area 2:

D: Mesa Bajo eljlujo laminar: E: Alimentador de frasco F: M&uina llenadora G: M6quina tapomiora H: Carril que comunica a la

mcfquina engargoladora

I: M&quina engargoladora J: Tambor giratorio K: Mesa L y M: Bancos de concreto

1

4 i

I 3 c I

2

- L 11

12

I: Area de material 2: Area de llenado

Tabla No, 5. Resultados del monitoreo microbioldgico antes del llenado de la vacuna antidbica humana lote RH-139.

XPOSICION D E PLACAS CON MEDIO D E

Tabla No. 6. Resultados del monitoreo microbiol6gico antes del llenado de la vacuna antirrabica humana, lote "140.

EN PROCESO

3.6.2.5. Exposicibn de placas (evaluacibn del Depto. de Control en Proceso).

A continuacih se presentan los resultados de la validacih del Area B obtenidos por el departamento de control en proceso.

T "c -ms" *i 2 , . t. ,

GERENCIA GENERAL DE BIOLOGICOS Y REACTIVOS INSTITUTO NACIONAL DE VIROLOGIA

SUBDIRECCION DE CONTROL DE CALIDAD

REPORTE DE MONITOREO MlCROBlOLOGlCO AMBIENTAL

Reg. C. Procesos . . " Area U G A M Q O No.

oCU0 5 ~ I ~ A L E S Fecha de entrada 1s *e b . q3 Fecha de salida 1 ab$- I \ %?!

Fecha de monitoreo m a c z a q 3

MUESTREADOR AMBIENTAL CENTRIFUGO ANTES DÜRANTE ,+. EL PROCESO

TIRAS CON MEDIO DE CULTIVO TSA (CUENTA TOTAL) HS (ROSA DE BENGALA)

POSICION RESULTADO POSICION RESULTADO (UFC/m3) UFC/m3

1( I SO

ESPECIFICACIONES PARA TIRAS CON TSA

En Areas con flujo laminar;.sin personal mlximo so UFC/m3, con personal, m4ximoJ.&LLUFC/m3.

En Areas sin flujo laminar: sin personal mlximo UFC/m3 con personal, mlximo UFC/m3.

En Areas con flujo laminar, con personal cero UFC/m3 de hongos.

ESPECIFICACIONES: Se acepta un mlximo d e A U F C por placa ycero hongos en el &rea de trabajo durante el proceso en condiciones dinlmicas.

Se expusieron placas con medio de cultivo A (;=rBL No. de Lote?eMa-zb durante 30 min. Se incubaron a 35-37OC durante a hrs. y a 25-27OC Lud hrs. A\I

Germicida empleado biticora. /

Temperatura ambiente - Porcentaje de humedad

OBSERVACIONES S e alce s e e n c u e 0 4 c a poc \S que = e ,

CONCLUSION h C € W A 9 ,A

JEFE DEL LAB; CONTROL DE PROCESOS

u. h - - "_ - I . CONTROL DE PROCESOS

GERENCIA GENERAL DE BIOLOGICOS Y REACTIVOS INSTITUTO NACIONAL DE VIROLOGIA

SUBDIRECCION DE CONTROL DE CALIDAD

REPORTE DE MONITOREO MlCROBlOLOGlCO AMBIENTAL

:echa de monitoreo 4 4.3 EXPOSICION DE PLACAS CON MEDIO DE CULTIVO. ANTES --DURANTE \I EL PROCESO POSICION lRESVLTAQ0 I POSICION I RESULTADO

. ,

I I I

I I I I 2

O '3 o

I I I

'.1 I I I I I I I I

o I I I

16 17

MUESTREADOR AMBIENTAL CENTRIFUGO ANTES - DURANTE ELPROCESO

. .

TIRAS CON MEDIO DE CULTIVO TSA (CUENTA TOTAL) HS (ROSA DE BENGALA)

(UFC/ ma) UFC/m3

t I I I 1 I I

ESPECIFICACIONES PARA TIRAS CON TSA

En Areas con flujo laminar;.sin personal mlrximo sa UFC/m3, con personal, mlrxirnoASCLUFC/m3.

En Areas sin flujo laminar: sin personal maxim0 UFC/m3 con personal, mlrximo UFC/m3.

En lrreas con flujo laminar, con personal cero UFC/m3 de hongos.

SPECIFICACIONES: Se acepta un mlrximo d e 5 U F C por placa y cero hongos en el &rea de trabajo durante el proceso n condiciones dinbmicas.

e expusieron placas con medio de cultivo 20. de Lote 22y Oxo durante 30 min. Se incubaron 35-37°C durante I hrs. y a 25-27OC hrs.

iermicida empleado bitlrcora. emperatura ambiente c Porcentaje de humedad A

lUEBA DE HISOPO: SE ADMITE UN MAXIMO DE: S . Uf c/Scms2 .ACAS RODAC : SE ADMITE UN MAXIMO DE:

UEBA DE HISOPO: PREVIA AGITACION SE TOMA 1.5ml DE CALDO TWEEN-LECITINA LOTE o\o Y E LOCA EN R A C A CON MEDIO DE CULTIVO TSA Nb.DE LOTE 22NO ZO INCUBANOOSE Y d tiF6. A 35 -2

S Uf c/5cm2

. - Y d HRS A 25 - 27OC.

4CA ROOAC: MEDIO DE CULTIVO AGAR-TWEEN-LECITINA N 0 . E LOTE - INCUBANDOSE' 3, t-

35 - 37% Y - HRS. A 25 - 27OC

SERVACIONES: La C a y 5ic Q e u a em Q-

A C T 4 re d e 1 are w a 5 C CCl*fl

Q V Q b <\e

Un

1 RASPADO CON HISWO

JEFE OEL LAEORAtORIO OE CONTRA EN PROCESOS

Area I: a: Mesa b: Banco de concreto c: Mesa d: muros de concreto e: trampa de aire

PROCESOS FINALES

LLENADO RABIA

I

h

7

J

m

c

I

t C

El m -3 L

J

I: Area de material II: area de llenado

Area II: f: mesa g: bajo el flujo laminar h: bancos de concreto i: trampa de aire

Area 111:

j: cuarto de bailo ,i: vestidor u'- banca de m a de m

3.6.2.6. Exposicidn de placas durante el proceso de llenado (evaluacibn Depto. de Procesos Finales).

Se expusier6n placas con medio TSA como se indic6 en el punto 3.6.2.1.

Tabla No. 7. Resultados del monitoreo microbiol6gico durante del llenado de la vacuna a n t w bica humana. lote "139.

EXPOSICION DE PLACAS CON MEDIO DE CULTIVO

ANTES:- DURAN TE:^ EN PROCESO

POSICION RESULTADO POSICION RESULTADO ( UFC 1 ( UFC 1

l .

II o I It

Como se observa en los resultados, las placas No. 1 , 4 y 14 presentar6n crecimiento microbian0 siendo la placa número 4 la que presento mayor número de UFC ( Unidades Formadoras de Colonia ), sin embargo, el &rea aséptica B se en cuentra dentro de los limites establecidos. Es decir, en condiciones dinarnicas no se en contro m& de 5 UFC por placa y no hubo ningdn hongo en el Brea de trabajo en condiciones dinimicas durante el proceso. Por tanto, se puede decir que el proceso de llenado de la vacuna es adecuado.

, . ~ . . ., .*.

GERENCIA GENERAL. DE BIOLOGICOS Y REACTlvOS INSTITUTO NACIONAL, DE VIROLOGIA

PROCESOS FINALES

ESQUEMA QUE IhDIC4 DONDE SE COLOCAN W A S PE'I1pI CON TSA PARA L X " I N A R EL GRADO DE ESTERUIDAD MICROBIOLOGICA ENAREAS DE DILUCION Y LLENADO.

RESULTADOS

OBSERVACIONES W A No.

Area 1:

A: Mesa B: Banco de concreto C: Mesa

Area 2:

D: Mesa Bajo el flujo laminar: E: Alimentador de frasco F: Mdquina llenadora G: Mdquina taponadora H: Carril que comunica a la

mdquina engargoladora

I: M&quina engargoladora J: Tambor giratorio K: Mesa L y M: Bancos de concreto

Fecha de exposici&n: 4

2

L

1'1

-

1: Area de material 2: Area de llenado

~~ -

Tabla No. 8. Resultados del monitoreo microbiol6gico durante del llenado de la vacuna a n t w bica humana, lote RH-140.

EXPOSICION DE PLACAS CON MEDIO DE CULTIVO

3.6.3. Temperatura y humedad.

La medicidn de temperatura y humedad se realiza mediante un psic6metro previamente calibrado.

Se toma la lectura del bulbo seco y el bulbo húmedo y se compara la lectura en la carta psicometrica para obtener los valores reales.

TEMPERATURA Y HUMEDAD:

a) Medicidn de la temperatura de bulbo húmedo y seco mediante el psic6metro.

b) Lectura de la humedad y temperatura mediante el higroterm6grafo.

e) Frecuencia: 2 veces por semana.

IV. ANALISIS MICROBIOLOGIC0 DE CADA SANITIZACION Y PROCESO DE LLENADO.

4.1. Identificacibn de bacterias aerobias .

Podemos decir que la taxonomía de los microorganismos es una clasificacidn basada en varios tipos de anaisis bioquímico. Por ejemplo, la tinci6n de Gram, que se emplea comúnmente para diferenciacidn de bacterias. Esta tinci6n , por sf sola no proporciona informacidn suficiente para identificar una especie, pero si ayuda. La diferenciacibn entre organismos grampositivos y gramnegativos se basa en diferencias bioqufmicas estructurales reales. Adem& estas diferencias estan en funcidn de las características genkticas de los microorganismos. En otras palabras, los genes controlan la síntesis de todas las sustancias de un organismo dado, incluyendo aquellas que lo hacen ser grampositívo o gramnegativo. Por lo tanto, la tinci6n de Gram es un instrumento taxondmico vaido.

Ademas de las diversas tinciones, las cuales indican alguna caracterlstica genetica del organismo al cual se aplican, se utiliza tambiCn el andisis enzirnatico para clasificar a los organismos. Ya que cada enzima es una protefna, esta se produce bajo control gen6tico. Por ejemplo, si un organismo hidroliza el almid6n se sabe que este produce una enzima capaz de llevar a cabo esta hidrdlisis, y la enzima s610 se sintetiza si el organismo cuenta con el gen que lo codifica. La capacidad para utilizar las distintas fuentes de nitr6geno y carbono dependen del genotipo del organismo.

Toda informacidn referente a la clasificacidn de las bacterias ha sido compilada en un libro: el "Bergeys 'S Manual of Determinative Bacteriology ". En este manual se encuentran clasificadas todas las bacterias conocidas, así como una descripcidn de todas l a s caracterlsticas de cada organismo. El manual est6 estructurado en forma de "claves". Una clave es una "pista a seguir", procediendo a partir de determinadas características del organismo en cuestidn, las cuales se siguen a traves de las distintas claves hasta llegar a la identificacidn tentativa del organismo. Aqui se incluye una versi6n modificada y condensada de algunas claves del manual Bergey. Por medio de estas claves se puede identificar un microorganismo.

DespuCs dee haber usado las claves para encontrar el genero y la especie del microorganismo que desea identificar, proceda a completar su identificacidn consultando los cuadros que se incluyen al final de este punto. Estos cuadros constituyen una lista de todos los organismos que usted pudiera encontrarse, asi como sus características esenciales y específicas resumidas.

4. l. l. Tinci6n Gram.

Las caracterfsticas morfol6gicas de las bacterias se pueden observar utilizando preparaciones de cClulas ya sea vivas o muertas (fijas). Sin embargg, el estudio microscdpico de las dlulas vivas es limitado debido a que en general s610 se detectan las configuraciones de contorno y estructurales de las cklulas por medio del microsc6pio de campo brillante. Las preparaciones teñidas de c6lulas fijas permiten:

1) Realizar un examen estructural m& detallado de las c6lulas. 2) Observar componentes celulares internos. 3) Lograr una diferenciacidn de las especies microbianas. 4) Conservar las preparaciones durante mayor tiempo.

”. .

La tincidn de las bacterias puede realizarse unicamente para revelar la forma, tamaiio y agrupaci6n de las cklulas, para lo cual se aplica una soluci6n colorante, esto es lo que se conoce como tinci6n simple.

TambiCn se puede adquirir informaci6n adicional acerca de la morfologia y composicidn qufmica de las bacterias mediante el uso de tknicas de tinci6n diferencial, las cuales involucran el tratamiento de la preparacidn con una serie de reactivos y mbs de un colorante, lo que nos permite distinguir entre dos bacterias con base al colorante que retienen. Por ejemplo con base a la tknica de Gram una bacteria puede aparecer roja y la otra azul.

Los colorantes que se usan unicamente para teñir bacterias pueden ser de tipo bcido o bfico. Los colorantes Bcidos, por ejemplo, la fucsina Bcida y la eosina, tiñen los componentes citoplAsmicos celulares que poseen una naturaleza m& alcalina, en tanto los colorantes bhicos tales como el cristal violeta, el azul de metileno y la safranina se combinan con los elementos celulares de naturaleza Bcida.

La tinci6n bacteriol6gica de caracter diferencial mbs usada es la de Gram. Con esta tincidn es posible clasificar las c6lulas en dos categorias ya que una dlula dada resulta14 positiva o negativa. La tinci6n de Gram es una herramienta de gran valor taxonbmico. Al aplicar la tincidn de Gram autombticamente se divide todo el reino de los microorganismos en dos grandes categorias.

La diferenciaci6n de Gram se basa en el color que adquieren las bacterias cuando se tratan con el colorante cristal violeta seguido de una soluci6n de yodo-yoduro de potasio ( lugol ). Ciertos microorganismos pierden la coloracidn con suma rapidez cuando se aplica una mezcla de alcohol- cetona, mientras que otros la retienen. Despu6s de la decoloraci6n se usa un colorante de contraste que generalmente es safranina.

Las bacterias resistentes a la decoloraci6n conservan una tonalidad azul ( o morada ) y no adquieren la colomci6n de contraste, clasificandose como Gram(+), los que no retienen el cristal violeta y toman la coloraci6n de contrate presentando una coloraci6n rosa o roja se les’ clasifica como Gram (-) .

La coloraci6n de muchas especies es variable, ademb, no todas las bacterias gramposifivus retienen el colorante primario con la misma intensidad, por lo cual puede hablarse de un gradiente de Grampositividad. La decoloraci6n es el paso m6s crftico de esta tknica, si usted decolora demasiado, todas las dlulas dej& escapar todo el colorante primario y por consiguiente aparecerh como gramnegacivas, aún cuando no sea asi. Por lo contrario si usted decolora dkbilmente, incluso las dlulas grurnnegativas retend& el complejo Cristal violeta- Yodo y aparecedn como grmpositivas. Otro factor importante que afecta el resultado & la tinci6n es la edad del cultivo, la tinci6n solo da resultados vaidos cuando se usan cultivos nuevos.

Materiales:

4 Portaobjetos 2 Mecheros 1 Piceta Microscdpio Asa microbiologica

..,

Juegos de reactivos para la tinci6n de Gram: - Sol. de safranina - Sol. alcohol-cetona - Sol. cristal violeta - Sol. lugol Aceite de inmersih muestra problema

PROCEDIMIENTO:

1. Preparacidn del frotis.

Si la muestra es liquida, se toma la muestra con el asa esteril al rojo vivo en el mechero y dejandola enfriar, se aplica en el centro del portaobjetos, se extiende a lo largo y a lo ancho del portaobjetos, se deja secar al aire y se fija con el calor de la flama.

Cuando la muestra esta en medio sdlido, primero se aplica una gota de agua con el asa sobre el portaobjetos, en seguida se toma la muestra con el asa esteril, picando o pasando el asa sobre el cultivo, se coloca sobre la gota y se extiende "perfectamente" en el portaobjetos, se seca a2 aire y se fija con el calor de la flama.

2. Tinci6n de Gram.

a) Cubrir los frotis con el Golorante cristal violeta y dejar actuar durante un minub.

b) Lavar los portaobjetos con una corriente suave de agua.

c) Cubrir los frotis con solucidn de lugol durante yn minutp.

d) Lavar los portaobjetos con una corriente suave de agua.

e) Decolorar con la mezcla alcohol-acetona, hasta que el colorante ya no fluya del frotis.

f) Lavar nuevamente con agua.

g) Cubrir el frotis con el colorante safranina durante x Segundos.

h) Lavar con agua y dejar secar al aire.

3. Observar cada frotis al microsc6pio utilizando el objetivo de inmersidn.

4.1.2. Pruebas Bioquimicas.

Al sembrar en diferentes medios de cultivo en placas ya se esth empleando, en el sentido de preseleccionar, las pruebas bioqufmicas. Así, por ejemplo, las placas con medios lactosados permiten diferenciar l a s Salmonella-Shigella de otros gbmenes fermentadores de lactosa. Pero la diferenciaci.on bioqufmica propiamente dicha se realiza en medios liquidos, sembrando una sola colonia de cada uno de los cultivos puros. Este paso de la investigacidn conduce, por lo

general, a un diagn6stico a nivel de ghero ( Salmonella, Escherichia, Pasteurella, etc. ) y, en algunas Ocasiones, al diagndstico específico ( Pasteurella multocida, Neisseria gonorrhoeae, C1. welchii, etc. ).

En primer lugar se investiga el metabolismo de los carbohidratos, es decir, de monosa&dos ( pentosas y exosas ), disac&ridos, trisacfidos y polisadridos, asi como de alcoholes y &idos organicos. La base de todos estos sustratos es el agua de peptona a la que se adiciona un indicador de color, como el azul de bromitol o el rojo de fenol.

Estas pruebas de fermentacidn de azúcares pueden complementarse con otras reacciones metab6licas tales como:

La citocromo-oxidasa cataliza la formacidn de azul de indofenol a partir de N-dimetil-p- fenildiamina, alfa-naftol y el oxígeno del aire ( + : Pseudomonas, Neisseria, etc.; - : enterobacterias y otras ). En la reducci6n de nitratos, el nitrito producido forma con el kid0 sulfanilic0 un enlace diazdnico que produce con la alfa-naftilamina color rojo ( + : enterobacterias, estafilococos, etc. ).

La fenilamina-desaminasa desamina la fenil alanina transformhdola en kid0 pinívico, el cual, con los iones de hierro 111 produce color verde ( + : Proteus, Providencia; - : todas las demb enterobacteriaceas ).

Los gCrmenes ureasa positivos atacan la urea formando CO, y amoniaco. Con la aparcici6n de NH,(OH) el pH se eleva, con lo que el rojo fenol aparece de color púrpura ( + : Proteus, Klebsiella y otros ).

Formaci6n de indol: el triptdfano, por la accidn de la triptofanasa, es desdoblado a indol, el cual forma un pigmento rojo con el p-dimetilamino-benzaldehido ( + : E. coli y otros; - : Salmonella, Shigella y otros ).

Producci6n de SH,: los aminokidos que contienen azufre son hidrolisados por las proteasas desprendihdose SH,. Este reacciona con acetato de plomo o sales de hierro, formtindose PbS o FeS, de color negro.

La kin-descarboxilasa transforma la lisina en cadaverina, con lo que el medio se alcaliniza y el púrpura de bromocresol pasa de violeta a rojo púrpura ( + : Salmonella, S. ariwne, E. hafiiae y otros; - : C1. freundii, E, cloacae y otros ).

La seleccidn adecuada de bacterias de pruebas bioquimicas amplias ( series de color ) para la rutina habitual es un trabajo arduo y para los Iaboratorios pequeiios que s610 hacen uso de tales diferenciaciones resulta costoso.

4.1.3. Claves de diferenciaci6n.

Las caracteristicas bioquímicas y fisioldgicas individuales de una cepa deben ser aplicadas ahora para la identificacidn de gCneros y especies. Cowan y Steele han publicado una clave de diferenciacidn ( Tabla No 9 ).

TABLA No 9. Clave de diagndstico con los primeros pasos para l a s bacterias gramnegativas ( resumido de Cowan, S.T. y K.J. Steele 1969,1974: Manual for the Identification of Medical Bacteria. Cambridge University Press ).

1 NEISSERIA L I . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . OEMELLA

ENTEROBACTERIACEAE ' '??!ifl : * * ' - ACTINOBACILLUS . . . . . . . . . . .

r- . . . . . . . . I PAS¡-EURELLA c"

I AEROMON4S

VlERlO

. . . . . . . . . '. * ' " ] . . t . . . :, . . . . . . . 1 PSEUDOMONAS

I . . . . . . . . . . . CHROMOBACTERIUM . . . . . . . .

1 FLAVORACT&RIUM . . . . . . . . . . . . . . .

. . . . . . . . . . .

. . . . . . . . . . . .

. . . . . . . . . . . . . . . * r i : : '

q . 1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

En una cepa bacteri

i

1 4 4 8 4 4

ana se comprueba primeramen producci6n de catalasa, de oxidasa y fermentaci6n

!te la morfologia, movilidad, aerobiosis, de la glucosa, distinguiendo en Csta la

transformaci6n oxidativa y la fermentativa. Con estos pocos criterios se alcanza el diagn6stico a nivel de familia o genero en l a s bacterias gramnegativas o grampositivas respectivamente; despuCs se pede llegar, en una segunda fase de pruebas, a un diagn6stico de gCnero y especie.

V. ANALISIS MICROBIOLOGIC0 EN EL EQUIPO DEMANUFACTURA Y MATERIAS PRIMAS.

5.1. Validaci6n del equipo.

La validacidn de la maquinaria se lleva a cabo por medio de la tdcnica de raspado con hisopo ( ver punto 3.6.2.3. ). 5.2. Pruebas de esterilidad en materias primas como frasco, tapbnes de hule, retapas de

aluminio, etc. los cuales se emplean durante el llenado.

Al llenar recipientes con un producto se deben observar las normas m b estrictas para evitar cualquier contaminacidn, en particular si el producto no se esteriliza en el recipiente final. En estas condiciones el proceso suele llamarse "envasado askptico". Durante el proceso de envasado el producto debe pasar de un recipiente que contiene el producto a granel a ser fraccionado en los recipientes posol6gicos. Esta operaci6n expone el producto al ambiente, equipos y t k n i c a manipulaci6n del operario hasta que se lo sella en el recipiente final. en consecuencia, esta operaci6n se hace en el &ea de envasado aseptico, donde se provee de una protecci6n ml3xima.

La USP provee dos metodos bgsicos para pruebas de esterilidad. Uno consiste en la introducci6n directa de las muestras del producto en medios de cultivo y el segundo contempla la filtracidn de las muestras a trav6s de menmbranas de 0.22 p , lavar los filtros con líquidos para eliminar las propiedades inhibidoras y trasladar asepticamente la membrana a medios de cultivo apropiados. Las muestras pueden ser artículos esterilizados que simplemente se sumergen en condiciones asepticas en el medio de cultivo apropiado en caldo, lavados del objeto estkril con diluyente estkril o diluciones de materiales esteriles.

PRUEBA DE ESTERILIDAD EN FRASCO:

Material:

40 frascos de vacuna ( material de llenado ). 1 matraz erlenmeyer de 10oO m1 estdril. - tap6n estkril. 1 estúfa. 1 par de guantes esteriles. 1 equipo de ropa esteril.

Substancias:

1% Lt. de medio de cultivo caldo de soya tripticaseina.

Procedimiento:

1. Se enumeran las charolas que contienen el frasco ( material que se utiliza el día de llenado de la vacuna ).

2. Se seleccionan 20 frascos al azar, tomando un frasco por cada charola y se enumera conforme al número de la charola del que fuk extrafdo.

3. A estos 20 frascos, selecionados anteriormente, se les agrega 10 ml. de caldo de soya tripticaseína est6ril. En seguida se tapan con tapones de hule tambiCn estCriles.

4. Colocar los 20 frascos con caldo de soya tripticaseína en la estúfa a una temperatura de 37°C durante un periodo de 48 horas.

5. Una vez transcurridas las 48 horas, sacar las muestras de la estúfa y observar si no hubo crecimiento de microorganismos.

PRUEBA DE ESTERILIDAD PARA EL TAPON DE LA VACUNA.

Material:

- Tapones ( material de llenado ). 4 vasos de boca ancha estdriles ). 1 estúfa. 1 par de guantes estkriles. 1 equipo de ropa estbril.

Substancias:

- Medio de cultivo caldo de soya tripticaseína.

Procedimiento:

1. Enumerar cada uno de los vasos que contienen los tapones ( 3 vasos con aproximadamente 2 O00 tapones).

2. Escoger al azar 10 tapones por cada vaso.

3. Tomar 4 frascos de voca ancha conteniendo 20 ml. de medio de cultivo, caldo de soya tripticasefna, previamente preparado y esterilizado.

4. Introducir en cada frasco 10 tapones ( selecionados anteriormente) y serrar debidamente cada frasco,

5. Dejar un frasco con medio como testigo negativo.

6. Introducir los frascos en la estúfa a una temperatura de 37°C durante 48 horas.

RESULTADOS:

NUMERO DE FRASCOS NO CONTAMINADOS: 20

@ @@@@@@@@ 00 (0 0 @ 0 @ @@ dp I@ CALDO DE SOYA TRIPTICASA.

OBSERVACIONES: A I examinar Ins f-cos /?n p r UP^

NUMERO DE FRASCOS CONTAMINADOS: 0

1 T) '1 Q M 1 1- 1'1 m e 1 7 1: 1428- .a CALDO DE SOYA TRIPTICASA.

OBSERVACIONES: o c rw-i m-

NUMERO DE TAPONES NO CONTAMINADOS: 30

NUMERO DE TAPONES CONTAMINADOS: O

Generalmente el llenado de un lote de la vacuna antirr6bica se realiza en dos días, por lo que despub de el primer día de llenado, la maquinaria y equipo utilizado que no esta en contacto directo con la vacuna se sanitiza y deja en alcohol, con el fin de evitar una posible contaminaci6n.

Por tanto, se realizo un monitoreo microbioldgico de la maquinaria, utilizando como medio de cultivo caldo de soya tripticaseína, frascos y tap& utilizados en el llenado de la vacuna antirrfibica lote RH- 139. Se llenaron los frascos con medio de cultivo llevando a cabo el mismo proceso de llenado que para la vacuna antirr6bica.Los resultados obtenidos son los mostrados en las paginas anteriores.

En base a estos resultados podemos decir que al parecer el sanitizar y mantener la maquinaria y equipo en alcohol es una buena medida que se aplica para evitar una posible contaminacith microbiana. Asf como tambien se puede decir que el proceso de esterilizaci6n es eficiente ya que no se encontro contaminaci6n debida a microorganismos.

VI. EVALUACION ANALITICA DURANTE EL PROCESO DE LLENADO.

6.1. Control volum6trico de la vacuna durante el proceso de llenado.

La calidad representa el conjunto de características que posee un producto, que define y determina su aceptabilidad . I

I

El criterio de calidad evoluciona inevitablemente con el tiempo, siendo una medida del progreso cientifico-tknico en un determinado campo. En el momento actual las comprobaciones de la calidad de un producto biol6gico est& determinadas bbicamente por las farmacopeas, ya que en ellas se expresan los requisitos que debe reunir esta forma posol6gica para calificarse como farmacologica e inmunogCnicamente útil. adem&, cada laboratorio tiene sus propios niveles y controles de calidad.

Existen múltiples pdmetros de comprobaci6n de la calidad, entre los cuales se encuentra la variaci6n de volumen.El volumen se determina, no s610 en las comprobaciones sobre lote terminado, sino tambiCn durante el proceso de llenado de la vacuna a intervalos regulares, registrando los resultados en formatos de control. La constataci6n tiene mayor importancia ya que la variaci6n de volumen que valla m8s alla de la norma estipulada indica que posiblemente la causa de esta variaci6n sea un mal funcionamiento de las conexiones de la mdquina llenadora, las cabezas llenadoras, etc. .

Por tanto, durante el proceso de llenado de la vacuna se verifica que el volumen del liquido de llenado se encuentre dentro de los limites estipulados.

Dentro del departamento de P. F. se lleva a cabo el llenado de las vacunas siguientes: Antipoliomielítica trivalente tipo Sabin, Antirr6bica para uso humano y Antidbica para uso canino.

CONTROL VOLUMETRIC0 DE LA VACUNA ANTIPOLIOMIELITICA TRIVALENTE TIPO SABIN.

Al iniciar el llenado se corrobora, que el volumen sea el correcto ( 5 ml. ) y se toma aleatoriamente cuatro frascos que han sido llenados por la m6quina llenadora ( dos por cada boquilla ) cada 30 minutos. se verifica el volumen que contiene los frascos, por medio de una probeta debidamente graduada y calibrada.

L o s datos obtenidos se anotan en una libreta, en caso de que el volumen no sea el adecuado, es decir, menor de 5 ml. o que exceda en m6s del 2% este volumen, se detiene el proceso y se realiza una acci6n correctiva como el de realizar los ajustes necesarios a la mAquina para corregir el volumen.

CONTROL VOLUMEiTRICO DE LA VACUNA ANTIRRABICA PARA USO HUMANO Y CANINO.

Se realiza de forma semejante al de la vacuna antipoliomielftica. se verifica periodicarnenk el volumen correcto de los frascos llenos ( 15 ml. ), por medio de una probeta calibrada, para lo

cual se escogen al azar 6 frascos que han sido llenados por la mdquina llenadora ( uno por cada boquilla ) y se mide el volumen que tiene los frascos. Los datos se anotan en la libreta, en caso de que el volumen no sea el adecuado se ajusta la miiquina llenadora.

El control de volumen para la vacuna antidbica para uso canino, se realiza de igual manera que para la vacuna antirrdbica para uso humano, s610 que se verifica que el volumen sea de 21 d..

ANALISIS ESTADISTICO:

A continuacidn se describe el andisis estadístico del control volumetrico durante el llenado de la vacuna. Tomando como ejemplo, el llenado de la vacuna antipoliomielítica, Lote VT-103, se tiene la siguiente tabla:

TABLA No 10. Registro del control volum6trico en el llenado de la vacuna antipoliomielftica. Se utiliza una mgquina llenadora de dos agujas (volumen de llenado 5 ml).

Numero de Tiempo de Volumen de Rango Movil Muestra muestre0 llenado

(Hn) ( m1 1

1 11:oo 5.3 O

2 11: 10 5.3 O

3 11:15 5.3 O

4 11:20 5.3 O

5 11:30 5.2 o. 1

6 11:40 5.3 o. 1

7 1150 5.2 o. 1

8 12:Oo 5.2 O

9 12:05 5.3 o. 1

10 12: 10 5.3 O

~~ ~”

Continuacidn de la tabla No.7

I 17 I 12:45 I 5.3 I o. 1 II 12:45 5.2 o. 1

II 19 I 1250 I 5.2 I o

I 1255 I 5.2 I o

C¿Ilculos:

CX = 110.5

CR = 1.1 - X = promedio = 5.26

R = intervalo promedio = 0.0524

XMAx = X + ]E2 * I‘c. = 5.26 + 2.66 * 0.0524 = 5.40

-

-

- X,, = X - E& * R = 5.26 - 2.66 * 0.0524 = 5.12

-

Su gdfica es la figura No 2. La curva superior de la gdfica es una curva de X ( volumen ) y la inferior es una curva R ( intervalo ). Las líneas que conectan los puntos sirven solamente para ayudar a visualizar la tendencia.

Los límites maxim0 y minimo de control para el promedio del volumen de llenado fueron calculados como se muestra al final de la tabla No 10, usando las f6rmulas:

XU,, = 2 - * R -

donde x, es el promedio aritmbtico de todos los valores de X: g, el intervalo promedio es calculado como el promedio aritmCtico de los valores de R, y &, el factor para usar el intervalo al calcular los límites de tres desviaciones esdndar para el promedio, es una constante la cual para subgrupos de dos valores tiene un valor de 2.66.

Los límites maxim0 y mínimo de control para el intervalo fueron calculados de las fdrmulas:

R,,, = D, * R -

donde D, y D,, los factores para calcular los límites de tres desviaciones esthdar para el intervalo, son constantes, los cuales para subgrupos de dos en este caso tienen el valor de 0.0o0 y 3.267 respectivamente D, y D,.

En la figura No 2, se muestran dos lineas punteadas que indican los limites entre los cuales prkticamente todos los valores observados debe& caer en tanto el proceso este bajo variaci6n normal ( controlado estadisticamente ). La línea punteada superior es el límite superior, el cual normalmente estA tres desviaciones esthdar arriba de la linea central. Igualmente, la linea inferior es el limite inferior y esa tres desviaciones estandar abajo de la línea central.

Si el proceso esk4 bajo control las seis desviaciones esthdar que se extienden entre los límites superior e inferior abarcarh el 99.7% de los valores en una distribuci6n normal con su media en la lfnea central. En el ejemplo, se puede decir que el proceso esa bajo control, pues todos los puntos caen dentro de los limites de establecidos.

L o s resultados obtenidos para el control volumCtrico del llenado de la vacuna antidbica para uso humano, Lotes RH-139 y RH-140, se muestran en los anexos No 3 y No 4 respectivamente.

El limite interno, establecido por el instituto, debe cumplirse en todos los lotes para dar garantla de que se tiene el volumen que se especifica en la etiqueta. En el caso de que el volumen varie y Cste sea menor o mucho mayor al estipulado, se descalifica la operacih, debiendo hacer los ajustes necesarios en la rnaquina para corregir los defectos y así evitar rechazos por no estar dentro de las especificaciones de registro y la pCrdida de vacuna que es muy importante.

5.2. Control de engargolado en la maquinaria durante el llenado.

Durante el llenado de las vacunas mencionadas en el punto anterior, se verifica periodicamente que el engargolado de las mismas se realice adecuadamente.

Para el engargolado de las vacunas: Antipoliomielitica, Antidbica Humana, Antidbica Canina y Antisarampionosa, generalmente se ajusta la miiquina engargoladora al tamaño del frasco, se alimenta la gargola y el frasco con vacuna, y se procede a engargolar.

Se probo la engargoladora con dos tipos de retapa de aluminio, retapa grabada (RG) y retapa sin grabar (SG), obteniendose los siguientes resultadgs:

No. de charola

1

2

3

4

d Bien engargoladas RG Mal engargoladas RG

51 % 49 %

~ No. de charola 1 Bien engargoladas SG I Mal engargoladas SG

1 I I O

4 6 I 3 1 I

77.5 % I 42 %

Se pudo observar que el 51 % de las vacunas engargoladas con la retapa GG, resulto bien engargolada; mientras que de las vacunas engargoladas con la retapa SG el 75 % resulto bien engargolado. Lo cual tal vez indica que el hecho de que la retapa este o no grabada afecta el buen funcionamiento de la mdquina engargoladora. Sin embargo, realizando un buen ajuste de la mfiquina, el porcentaje de vacuna bien engargolada con GG podrla aumentar hasta un 95 96.

Por otra parte, durante el engargolado de la vacuna antirrdbica humana, lotes: RH-139 y RH- 140, se obtuvo un 4 % y un 1.7 % de vacuna mal engargolada respectivamente. Esto tal vez pudo ser debido a la gargola o tambien a la altura del frasco, ya que se ha observado que una altura de frasco diferente al de la especificaci6n desajusta la m6quina engargoladora.En el anexo NO5 se muestra las especificaciones para retapa de aluminio, tap6n y frasco.

Este aspecto referente a la altura del frasco es muy importante debido a que se ha detectado que la altura del frasco utilizado, para llenar la vacuna antidbica, es muy variable ocasionando problemas en los procesos de llenado, taponado y engargolado.

El departamento de Procesos Finales ha detectado unporcentahe del 5 %, de frasco defectuoso, que aunque sea minimo ocasiona desajustes en la mdquina taponadora y engargoladora, adem& de la pt5rdida de vacuna que es lo m6s importante.

MI. PROCEDIMIENTOS TECNICOS EN LA PRODUCCION m A L DE LAS VACUNAS.

Los procedimientos tknicos en la producci6n final de las vacunas comprende todos los pasos necesarios para identificar el producto terminado y que est6 debidamente preparado para su venta y entrega al usuario.

7.1. Revisi611 bptica.

Cada una de las vacunas producidas son sometidas individualmente a un examen visual. Esta inspecci6n 6ptica se hace para evitar la distribuci6n y uso de vacunas que contienen particub que podrian ser nosivas para los usuarios.

REVISION OPTICA DE LA VACUNA ANTIPOLIOMIELITXCA:

Se realiza en forma manual con ayuda de una lampara y pantalla de fondo blanco y negro. Mediante este procedimiento se eliminan aquellos viales que tengan particulas extrailas que pudieran ser nocivas o bien los que presenten un color diferente al normal de la vacuna.

REVISION OPTICA DE LAS VACUNAS ANTIRRABICAS:

La revisih 6ptica de las vacunas antirrAbicas, Humana y Canina, se realiza de la misma manera que para la vacuna antipoliomielftica.

Mediante este procedimiento se eliminan aquellos viales que tengan particulas extraiias que pudieran ser nocivas.

REVISION OPTICA DE LA VACUNA ANTISARAMPIONOSA:

Se hace en forma manual, con ayuda de una 18mpara; mediante este praceso se eliminan aquellos viales que tengan la pastilla del liofilizado diferente al muestrario fisico de referencia, a d como aquellas que denoten humedad.

7.2. Etiquetado.

En el departamento de P. F. se lleva a cabo el etiquetado de las vacunas: Antipoliomielftica, antisarampionosa y antidbica humana y canina.

CONTROL DE CALIDAD .DE ETIQUETAS.

La etiqueta de un producto farmacdutico debe proveer al mtMico u otros usuarios toda la informacidn necesaria para asegurar e4 uso correcto e inocuidad del agente terap&tico. En vista

de que no se puede consignar toda esta informacidn en el mismo envase para que sea legible, puede estar en un folleto adjunto.

Definiciones y requisitos de la USP para el rotulado de productos inyectables:

Por el tkrmino "rotulado" se entiende a todas las etiquetas y otro material escrito, impreso o gdfico que est4 en el envase primario o sobre cualquier envase o envultura en el cual est6 d recipiente que contiene el producto, con excepci6n del embalaje exterior. Por r6tulo se entiende a la leyenda que esa sobre el recipiente primario.

El rdtulo consigna el nombre del producto, el contenido porcentual del f6rmaco en un preparado liquido, la cantidad de componente activo en un preparado seco, el volumen de lfquido que se debe agragar para preparar una inyecci6n o suspensi6n con un preparado seco, la via de administracidn, una especificacidn de las condiciones de almacenamiento y la fecha de vencimiento. AdemBs, la etiqueta o rdtulo debe indicar el nombre del fabricante o distribuidor y tener un número que identifique el lote. El número de lote permite tener acceso a la historia completa de la elaboracidn del producto en cuestidn, la cual debe comprender cada uno de los pasos de su elaboracidn.

El rdtulo del envase est4 dispuesto de modo que quede descubierta un &ea suficiente del recipiente en toda su longitud o su circuferencia como para poder inspeccionar el contenido.

El r6tulo debe consignar el nombre del vehículo y las proporciones de cada constituyente, si es una mezcla; los nombres y proporciones de todas las sustancias agragadas para aumentar su estabilidad o utilidad y la fecha de vencimiento, cuando la monografía individual as€ lo requiere.

Las etiquetas utilizadas para identificar los productos biol6gicos producidos en el I.N.V. deben satisfacer los requisitos antes mencionados. Por lo que se realiza la revisi6n del 100% de las etiquetas recibidas,. En el anexo No 5 se muestran las especificaciones para etiqueta de envase primario de las vacunas que se producen en el I.N.V..

Es muy importante que cada una de las etiquetas cumplan con las especificaciones previamente establecidas para evitar rechazos del producto debido a la utilizaci6n de etiquetas defectuosas, adem& se evitarfa el desperdicio de etiquetas en casos donde el grosor de las mismas sea mayor al establecido, ya que si se usan con este defecto se desajusta la mgquina etiquetadora ocasionando la reetiquetacidn de un gran número de frascos.

ETIQUETADO DE LA VACUNA ANTIPOLIOMIELITICA.

Se lleva a cabo en la mdquina Strunk. En primer lugar se prepara el calificador de etiquetas para que imprima el número de lote y la fecha de caducidad y en seguida con etiquetas previamente revisadas al 100 % , por Control en Proceso, para verificar que cumplen con las especificaciones establecidas se procede a etiquetar los frascos con vacuna . En el proceso una persona se encarga del manejo de la mdquina y otra revisa las etiquetas y separa aquellos frascos con defectos en su etiqueta, para así despu6s volverlos a etiquetar.

Durante el acondicionamiento se debed cuidar que la vacuna no permanezca mucho tiempo a temperatura ambiente.

I

ETIQUETADO DE LAS VACUNAS ANTIRRABICAS:

Se lleva a cabo en la mAquina etiquetadora marca Rototichcf Puffin 1. Se ajusta la mQuina etiquetadora al tamaño del frasco ( con capacidad de 15 ml. para la vacuna antirdbica para uso humano y 21 ml. de capacidad para la vacuna antirrdbica canina ) y de la etiqueta. Ademh del operador de la mdquina debe de haber otra persona para revisar las etiquetas de los frascos y separar los frascos que tengan defectos en su etiqueta, para volverlos a etiqueta.

ETIQUETADO DE LA VACUNA ANTISARAMPIONOSA:

Se lleva a cabo en la mdquina etiquetadora marca Strunk. Se realiza de la misma manera que para la vacuna antipoliomielítica.

7.3. Acondicionamiento.

ACONDICIONAMIENTO DE LA VACUNA ANTIPOLIOMIELITICA:

La vacuna antipoliomielítica se empaca en cajas de earth con capacidad para 50 frascos, m cinco instructivos para explicar el uso adecuado de la vacuna, a su vez estas cajas se empacan en cajas colectivas de cart6n del No. 3 cuyo cupo es de 6 cajas con 50 frascos, dando un total de de 300 frascos por caja colectiva.

Estas cajas debe& estar identificadas con la siguiente informaci6n:

1) Tipo de vacuna. 2) No. de lote. 3) No. de frascos. 4) No. de dosis. 5) No. progresivo de caja.

ACONDICIONAMIENTO DE LA VACUNA ANTIRRABICA PARA USO HUMANO:

La vacuna se empaca en las cajas de cart6n No. 3-A; cada caja deber& contener 300 frascos con 10 instructivos. Estas cajas deberh estar identificadas con la siguiente informaci6n:

1) Tipo de vacuna. 2) No. de lote. 3) No. de frascos. 4) No. de dosis. 5) No. progresivo de caja.

ACONDICIONAMIENTO DE LA VACUNA ANTIRRABICA PARA USO CANINO:

La vacuna se empaca en las cajas de cart6n No. 3-A; cada caja debed contener 2 O0 frascos con 10 instructivos.

Estas cajas deberh estar identificadas con la siguiente informaci6n:

1) Tipo de vacuna, 2) No. de lote. 3) No. de frascos. 4) No. de dosis. 5) No. progresivo de caja.

ACONDICIONAMIENTO DE LA VACUNA ANTISARAMPIONOSA:

La vacuna se empaca en cajas de cart6n para 20 frascos cada una, con 2 instructivos; estas cajas a su vez se empacan en cajas colectivas de cart6n de No. 3 cuya capacidad es de 14 cajas con 20 frascos, dando un total de 280 frascos por caja. Ademas las ampolletas de diluyente est6ril se empacan por separado, las cuales pasan por un proceso de revisi6n 6ptica para evitar que contengan particulas estrañas.

Las características del empaque se especifican en el proceso de empaque de la vacuna antipoliomielítica.

7.4. Almacenamiento.

ALMACENAMIENTO DE LA VACUNA ANTIPOLIOMIELITICA:

Una vez empacada la vacuna, se almacena en las camaras congeladoras de cuarentena (a -2w) hasta SU liberaci6n por control de calidad cuando esto sucede la vacuna se transfiere a 1 s almaras congeladoras de producto liberado (a -20°C) hasta su entrega a la Gerencia General de Biologicos y Reactivos.

La vacuna debe ser transportada en refrigeracidn y para ello se aconseja el empleo de termos que contengan hielo de agua; o el uso de camiones especiales con sistema de refrigeraci6n los cuales pertenecen a la Gerencia General.

La entrega de vacuna se hace siguiendo el procedimiento diseñado para este proposito con la documentaci6n correspondiente.

ALMACENAMIENTO DE LAS VACUNAS ANTIRRABICAS:

Una vez empacada la vacuna, se almacena en las camaras refrigeradoras de cuarentena a -4°C hasta su liberaci6n por control de calidad cuando esto sucede la vacuna se transfiere a las almaras congeladoras de producto liberado a -4°C hasta su entrega a la Gerencia General de Biologicos y Reactivos.

El transporte y entrega de la vacuna antisarampionosa se realiza de la misma manera que para la vacuna antipoliomielítica.

ALMACENAMIENTO DE LA VACUNA ANTISARAMPIONOSA:

Se realiza de la misma manera que para la vacuna antidbica.

CONCLUSION

Un requisito fundamental de los productos bioldgicos, es que sean de mkima calidad para que ofrezcan una alta seguridad seguridad al consumidor. Por tanto, los procesos para preparar las vacunas: antipoliomielftica, antisarampionosa, antirrabica para uso humano y antidbica canina; deben apegarse a las Buenas Pdcticas de Manufactura para producir y mantener la calidad que el producto debe tener. Por lo que todo el personal involucrado en la elaboracidn de las vacunas debe utilizar su pericia y recursos al mhcimo nivel de efciciencia para lograr este objetivo.

Hay que establecer un programa bien definido y validado para asegurar la calidad del producto y la repeticidn de procedimientos de producci6n que nos permitan lograr constancia en la elaboracidn de las vacunas virales. Esto entraña una evaluacidn de todos los componentes, control de todos los pasos de los procedimientos de producci6n y cuidadosa evaluacidn del producto terminado. De esta manera ser6 posible obtener biol6gicos de calidad uniforme a la altura de los mejores fabricantes internacionales, asf como tambien, se reducirh costos por rechazos o devoluciones de producto terminado por desviaciones a los requerimientos establecidos en las normas oficiales.

Cabe mencionar que los objetivos planteados no son fhcil de alcanzar a corto plazo, sino m& bien a largo plazo. Sin embargo, seria muy beneficioso para el Depto. de Procesos Finales llevarlos a cabo, para conocer y controlar cada una de las variables que inciden en la produccidn de los viales, logrando asi, que cada producto terminado cubra siempre todas las especificaciones de calidad y diseiio.

ANEXO 1

NORMAS DE REGISTRO OFICIAL DE LA CALIDAD DEL AGUA DESTILADA Y POTABLE

AayI PAR4 Uso FAIIweBsTIW

A- GUEIULIDADES. El agua potable debe cunplir con los requisitos del Reglamento Federal sobre Obras de Provi- sibn de Agua Potable y con los lineamientos para la ca- lidad del Agua Potable de la Organizacibn Mundial de la Salud (1984). La práctica usual es preparar el agua descrita en las monograf las de la Farmacopea a partir de agua potable. Sin embargo, en algunas zonas del pafs, el abasto de agua puede no cumplir con las normas mencionadas. A pe- sar de ello, e! agua utilizada cano punto de partida de- berá tratarse de tal manera que el agua obtenida final- mente cumpla con todos los requisitos establecidos en las monograffas respectivas. Pwde usarse agua potable en la obtencidn de sustancias activas. No debe usarse agua potable en la preparacibn de formas farmaceúticas, reactivos o soluciones de prue- ba.

B. TIPOS DE A W L La Famcopea clasifica diferentes ti- pos de agua que en general presentan las caracterfsticas indicadas en la Tabla 1 y las mgraffas correspondien- tes detallan al respecto. De ellas, el m Purificada representa un material empleado como ingrediente, mien- tras que tas &más representan en sf, preparados farma- ceút i cos.

c. GUMS PARA EL m ~ x c l l o B x a O c x o 0 DE A(ILIA ENYE" Qll) AbITIVO.

Debido a que el m Purificada puede poseer diferentes cargas microbianas dependiendo de su metodo de obten- cibn, distrikrcibn y/o almacenamiento, se hace menester establecer criterios generales para practicar las accio- nes correctives necesarias cuando estas sean requeridas. En general, debe considerarse que todo metodo enpleado para el tratamiento y purificacibn del agua debe ser di- señado, certificado y validado antes de iniciar su ope- recibn, y controlado adecuadamente durante su proceso, de manera que se garantice la obtencibn de agua con la calidad tanto qufmica como ffsica y microbiol6gica de- seada. La carga microbiana aer6bica máxima admisible en los puntos de uso del Agua para Uso Farmaceutico es de 500 unidades formedoras de colonias (UFC) por 100 ml, mien- tras que la de Agua Purificada es de 800 UFC por 100 ml y la de Agua pare Fabricaci6n de lnyectables es de 50 UFC por 100 ml. Zn todos los casos anteriores no deberá haber presencia de microorganismos patbgenos. Las cargas microbianas anteriormente citadas pueden sei empleadas como referencia para establecer el procedi- miento general de tratamiento y/o purificaci6n de agua, que al salir de especificaciones, se requiera la apli-

Agua para Uso Farmacéutico 477

caci6n de una accibn correctiva. Necesariamente, la va- lidez de dicha acci6n corrective deberá ser corroborada. Es de primera importancia que el empleo de dichas accio. nes no sustituya, sino sea parte del sistema general de ~ W M S prácticas de manufactura.

A W A DE ALTA RREZA <Reactivo)-

Este tipo de agua posee una conductividad a 25 OC, no mayor a 0.15 ucho por cm, medida en una celda en lfnea, irmediatamente antes de emplearse. Además, reune los re- quisitos establecidos para Metales Pesados bajo el rubro de Agua Purificada y se encuentra exenta de cobre. Este tipo de agua puede ser preparada pasando agua destilada a traves de un cartucho de deionizaci6n empacado con una resina de lecho mixto, grado nuclear, para luego ser pa- sada a traves de una membrana de ester de celulosa con un tamaño de poro que no deberá exceder 0.45 u. No em- plear tuberia de cobre. Las lfneas de descarga del agua asf tratada deberán ser enjuagadas con parte del agua de alta pureza resultante, antes de que el resto de esta agua pueda ser envasada. Cuando el lfmite de conductividad sea excedido, deberá cambiarse el cartucho del deionizedor.

AGUA PURIFICADA

El Agua Purificada puede ser obtenida por destilaci6n, osmbsis inversa, tratamiento por intercambio iónico u otro metodo apropiado, y no contiene sustancias que le hayan sido añadidas. No debe emplearse Agua Purificada como aditivo para la fabricación de inyectables.

DESCRIPCIOII. Ltquido transparente, incoloro e inodoro.

@l. MGA 0701. Entre 5.0 y 7.0 medido potenciowitricamen- te empleando una solucibn preparada por adici6n de 0.30 ml de soluci6n saturada de cloruro de potasio a 100 ml de muestra.

CLORUROS. A 100 m1 de muestra, añadir 5 gotas de ácido nítrico y 1 m1 de nitrato de plata SR. No debe aparecer opalescencia en la solución luego de transcurridos 15 minutos.

SULFATOS. A 100 m1 de muestra añadir 1 m1 de SR de clo- ruro de bario. No debe producirse turbidez.

Am*lIA#). 0.3 ppm. Añadir 2 m1 de SR de yoduro potásico mercúrico alcelino a 100 ml de la muestra. El color ama- rillo que se produce de inmediato no es mayor que el producido en una solucibn control que contenga 30 ug de NH3 añadidos al mismo volumen de Agua de Alta Pureza que

rl u

MARBETE. Cuando se le empaque, indicar en el marbete su ... de 50 ml, añadir 0 . 4 ml de soluci6n 0.1 N de permangana-

478 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos

el volunen de agua empleado para la muestra.

CALCIO. A 100 m1 de muestra añadir 2 ml de SR de oxalato de amnio. No debe producirse turbidez.

BlOXIDO DE CARBONO, A 25 m1 de muestra añadir 25 ml de SR de hidr6xido de calcio. La mezcla debe permanecer transparente.

METALES PESADOS. MCA 0561. Ajustar 40 ml de Agua Puri- ficada a un pH de 3.0 a 4 . 0 empleando solucidn 1N de ácido acetic0 (emplear para ajustar, papel indicador de pH con intervalo corto). Añadir 10 ml de SR de ácido sulfhídrico recidn preparado y dejar reposar la muestra. Al mismo t i e m p o que se prepare l a muestra se deberá co- rrer un control empleando 50 ml de la misma agua purifi- cada que este siendo analizada y la misma cantidad de ácido acetic0 añadido a l a muestra. Transcurridos 10 mi- nutos, inspeccionar la muestra y comparar con el con- trol, ambos en tubos de Nessler apareados y observados desde l a parte superior empleando un fondo blanco. El color de l a muestra no deber6 ser más oscuro que el del control.

SUSTANCIAS OXIDABLES. A 100 ml de muestra añadir 10 m[ de soluci6n 2 N de ácido sulfúrico y calentar hasta ebu- llición. Luego, añadir 0.1 ml de solucidn 0.1 N de per- manganato de potasio y hervir durante 10 minutos. E l to* lor rosado no deberá desaparecer por completo.

SOLIDOS TOTALES. Evaporar a sequedad 100 ml de muestra en un BM y secar a 105 'C durante una hora. El total de residuo no deberá ser mayor a 1 mg (0.001 por ciento).

PUREZA BACTERIOLOGICA. MGA 0571. No más de 800 UFC por 100 ml (mes6filos aerobios) y ausencia de patógenos.

10 m1 por Kg de peso.

ESTERILIDM. MGA 0381. Cunple los requisitos.

MTERIAL PARTICULADO. MCA 0651. Pare volúmenes mayores de 100 m1 cunple los requerimientos. Pera volúnenes me- nores, debera cumplir con los requisitos establecidos por l a Cmisi6n Permanente de la Farmacopea.

AI(OWIAC0. Para Agua lnyectable envasada en recipientes que contengan un volumen hasta de 50 ml, diluir 50 m1 con 50 ml ¿e Agua de Alta Pureza y emplear esta diluci6n c m la soluci6n de prueba. Cuando se trate de volúnenes mayores de 50 ml, emplear 100 m1 como la soluci6n de prueba. Agregar 2 ml de SR de yoduro de potasio mercúri- co alcelino a 100 m1 de la solucidn de prueba. E l color amarillo que se produce de inmediato no es mas oscuro que el de una soluci6n control que contenga 30 ug de NH3 añadidos al mismo volunen de Agua de Alta Pureza enplea- do en l a muestra (0.6 ppm para Agua lnyectable envasada en volúnenes hasta de 50 ml y 0.3 ppn para volúnenes ma- yores).

CLoRuRos. Agregar 5 gotas de acido nftrico y 1 ml de SR de nitrato de plata a 20 m1 de muestra colocados en un tubo de Nessler y agitar suavemente. Cualquier turbidez formada en un lapso de 10 minutos no es mayor que l a de un control tratado de manera similar y preparado con 20 ml de Agua de Alta Pureza a la que se haya añadido 10 ug de cloruros (0.5 ppn). La inspecci6n de los tubos deberá hacerse desde su parte superior, empleando un fondo os- curo y permitiendo que la Luz penetre lateralmente en los tubos.

SUSTANCIAS OXIDABLES. Agregar 10 ml de solucion 2 N,de ácido sulfúrico a 100 ml de muestra y calentar a ebulli- ci6n. Para Agua inyectable envasada en volúnenes hasta

?

método de preparacidn

COWSERVACIOLI. En recipientes herméticamente cerrados que conserven sus propiedades de pureza química y micro- biológica.

AGUA INYECTABLE

E l Agua Inyectable es Agua para la Fabricacibn de Inyec- tables que ha sido esterilizada y envasada y a la que no se le han agregado agentes antimicrobianos u otras sus- tancias.

PIROGEYOS. MCA 0701. Emplear una.muestra representativa del lote hacibndola isot6nica por l a edici6n de cloruro de sodio esteril y apirogenico. Inyectar al animal con

to de potasio y hervir durante 5 minutos. Para volúnenes mayores de 50 ml, añadir 0 . 2 ml de soluci6n 0.1 N de permanganato de potasio y hervir durante 5 minutos. El color rosado que se produce no debe desaparecer por cm. pleto.

SOLIDOS TOTALES. Emplear l a tbcnica descrita para ello en la monografla Purificada. Los lfmites pera enva- ses que contengan hesta 30 ml, es de 0.004 por ciento, más de 30 hasta 100 ml, 0.003 por ciento y para v o l h - nes mayores, 0.002 por ciento.

OTROS REWISITOS. Curple con los requisitos establecidos en las pruebas de pH, sulfatos. calcio, bi6xido de car- bono y Metales pesados de la monografla correspondiente de Agua Purificada.

72 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos 1 alcular el valor obtenido con el peso promedio por ta- .eta, calculado al principio de la Valoración.

;uA IWYECTABLE

8 agua inyectable esteril y libre de pirógenos. No debe mtener agentes antimicrobianos u otras sustancias.

!EWCIDYES.- El marbete debe indicar que no es adecua. I para inyección intravascular sin que antes se haya cho isotónica por medio de algún soluto conveniente.

ARIDAD Y COLOR.- El contenido de los envases debe ser ansparente e incoloro.

RETICIDAD.- MGA 0486. Cumple los requisitos.

RTICUUS EXTRM"- El contenido debe ser una soluci6n bre de partfculas visibles. Si el volumen es mayor de O m1 proceder según MGA 0651. Curple los requisitos.

RIAClOY DE MuIEW.- MGA 0981. CunpLe l os requisitos.

.- MGA 0701. Entre 5 . 0 y ? .O determinado potenciom6- icamente en 100 m1 de agua inyectable a la cual se ha regado 0.30 ml de una solución saturada de cloruro de tasio. MGA 0701.

DYIAC0.- Cuando el agua estéril para inyección está ?tenida en recipientes de vidrio de hasta 50 ml, di- ir 50 m1 con 50 m1 de agua de alta pureza (ver reacti- S) , y use esta solución como solución de prueba. Para :ipientes con mayor contenido usar 100 m1 de agua es- ril como solución de prueba. A 100 ml de la solución prueba agregar 2 m1 de SR de yoduro potasico-mercúri- alcalino cualquier color amarillo producido imedia- lente no debe ser más oscuro que el de un control que itenga 30 ug de NH3 en agua de alta pureza. (0.6 ppn 'a recipientes que contengan hasta 50 mL de agua esté- inyectable; 0.3 ppm para recipientes con contenidos

'ores de 50 ml).

.FAT"- A 100 ml de la muestra, adicionar 1 m1 de SR

cloruro de bario y mezclar. No debe producir turbie-

IRUR0S.- Pasar 20 m1 de muestra a un tubo de compara- n y agregar 5 gotas de ácido nítrico y 1 m1 de SR de rato de plata, y mezclar suavemente; cualquier tur- dad producida en 10 minutos no es mayor que la produ- 3 por un control tratado de manera similar y prepara- con 20 m1 de agua de alta pureza (ver reactivos) que tenga 10 ug de Cl (0.5 ppn), observar los tubos en un

plano verttcal de arriba hacia abajo y colocando éstos sobre una superficie negra.

SUSTANCIAS OXIDABLES.. A 100 ml de muestra agregar 10 m1 de solución 2 N de ácido sulfúrico, y calentar hasta ebullición. Para recipientes de hasta 50 m1 agregar 0.4 ml de solución 0.1 N de permanganato de potasio y hervir durante 5 minutos; para tamaiios mayores, agregar 0.2 m1 de solución 0.1 N de permanganato de potasio y hervir durante 5 minutos; el color rosa no desaparece completa- mente.

CALCIO.- A 100 m1 de muestra agregar 2 ml de SR de oxa- lato de amonio, no se produce turbiedad.

DItXIDO DE CARBONO.- A 25 m1 de muestra agregar 25 m1 de SR de hidr6xido de calcio, la mezcla permanece clara.

METALES PESADOS.- En un tubo de Nessler, ajustar 40 ml de muestra con solución 1 N de ácido acético hasta pH de 3.0 a 4.0 (usando papel indicador de pH de rango corto), agregar 10 ml de SR de sulfuro de hidr6geno preparado el día de uso, dejar reposar el lfquido durante 10 minutos. E l color del lfquido, cuando se observa de arriba hacia abajo colocando \os tubos de comparación sobre una su- perficie blanca, no es más oscuro que el color de una mezcla de 50 m1 de la misma agua estéril inyectable a la cual se le agrega la misma cantidad de solución 1 N de ácido acético que se agregó a la nuestra.

S O L I D O S TOTALES.- Evaporar una alfcuota de 100 m1 de la muestra sobre un BV hasta sequedad, y secar el residuo durante 1 hora a 105 'C. Los lfmites siguientes se aplican para recipientes de vidrio que contengan agua estéril para inyección: hasta 30 m1 0.004 por ciento; de más de 30 m1 hasta 100 ml, 0.003 por ciento; y tamaños mayores de 100 ml, 0.002 por ciento.

ESTERILIDAD: MCA 0381. Cunple los requisitos.

PIR0CEYOS.- MGA 0711. Inyectar 10 ml/kg de La muestra, agregándole 900 mg de cloruro de sodio libre de piróge- nos por cada 100 ml.

ALBENDAZOL. SUSPEWSIUI -L.

Contiene no menos del 95.0 por ciento y no más d e l 105.0 por ciento de la cantidad de C12H15N302S indicado en el marbete.

SUSTANCIAS DE REFERENCIA.- Albendazol. Mebendarol.

I

!

I !

.- I

Articulo 210.- Para consideras que el agua sea potable, I S i n v e s - j s "

y 'deben. d a r ' como resultado lo siguiente:

.I El número de organ.ismos coliforrnes totales, deberá ser como -

más probable (NMP) o de @ de filtro de membrana . y .

dentro de los límites siguientes: I . A s p e c t o líquido 1 1 . pH de 6.9 a 8 . 5 ' 1 1 1 . Sabor característico

~. ' . i . . . . . . .

. . _ _ ~

\

. . .

. I V . olor característico.. . . . .

' V . Color hasta 20 unidades de la escalg,Pt-m 0 . s ~ equivalente - .i

, . - .* en otro método, y . V I . Turbiedad: hasta- 10 unidades de la escala de-silice o sb ---

equivalente en o t r o método. .. r . .L* . .

T .

:!' Reglamento de la Ley General de Salud en Mateqta. de Control Sanitg :: r i d de Actividades, Establecimientos, ProductGg y Servicios. !

(Diario Oficial de la Federación 18 de enero de 1988). 1

. . . "

ANEXO 2

ESPECIFICACIONES TECNICAS DE ALGUNOS GERMICIDAS

DUFOME

Descripcibn: DUFOME es un líquido viscoso concentrado diseñado para usarse con el proporcionador de liquidos FOAMALATOR para el lavado de trastes de cocina, loza, vasos, etc. Usado con este equipo disminuye los costos de uso hasta un 50% en comparacidn con los productos similares en polvo. . DUFOME contiene emulsificantes superiores así como agentes humectantes sinteticos que separan la grasa y la suciedad por alimentos, haciendola flotar todo esto sin afectar la piel de las manos. DUFOME tiene un alto nivel de espuma de larga duracidn, aún en presencia de cargas pesadas de suciedades por alimentos. Inhibe la sensaci6n de aceitosa de los trastes de cocina, disminuyendo así el riesgo de rotura de la loza por ddas. Su enjuague queda libre de manchas.

Propiedades: Biodegradable.. ................... S i , todos sus surfactantes. Poder Emulsificante.. ............. Extremadamente activo. pH.. ................................. .Puro8.5 (en solucidn 7.5). Habilidad Humectante.. ......... .R6pida, positiva. Solubilidad.. ....................... .Instanhea, total. Enjuague.. ......................... .R4pido y completo. Espuma.. ........................... .Copiosay estable. Densidad.. .......................... 1 .O36 Seguridad en metales.. .......... .Seguro en todos.

Procedimiento de uso: DUFOME esa diseñado para usarse con el dosificador de lfquidos FOAMALATOR. Para lavado de loza, la concentracih recomendada es de 2 a 4 g/Lt de agua. DUFOME se puede usar sobre superficies pintadas en todos los metales y materiales y es seguro para las manos.

Precauciones: No es ingerible. Evite el contacto del producto concentrado con la piel y los ojos.

Presentacidn: Garrafdn de pl6stico con 50 kilos. Tambor cerrado con 2lOkilos.

B G C - 3 Desinfectante

Descripcih general: BGC-3 es un liquido limpiador desinfectante, sintetice. Con las diluciones adecuadas, limpia y desinfecta las tireas y el equipo común en hospitales, enfermerías y otras instituciones que requieren un limpiador desinfectante.

Es un líquido germicida multi-fen6lic0, concentrado, con acci6n detergente. Su actividad germicida incluye S. aureus, S. choleraesius, Ps. aureginosa, M. tuberculosis, T. interdigitable.

El BGC-3 contiene unicamente surfactantes biodegradables y no es fosfatado. Es efectivo en agua hasta con 400 ppm de dureza.

Propiedades: . . Apanencla.. ....................... .Líquido claro ambar.

Olor.. ............................... .Nofen6lico. Espuma ............................. Moderada. Enjuague.. ........................ ..Completo. Humectaci6n.. .................... .Inmediata.

Apariencia (en dilucibn). ....... .Opalescente-tipico de soluciones germicidas.

Instrucciones de uso: Para limpieza general: BGC-3 es usado para limpiar pisos y paredes con la concentraci6n de 1:30 a 1 :250 dependiendo de las condiciones prevalentes.

Para lavar instrumental de laboratorio y quirúrgico: Use BGC-3 1:250 como remojo antes de lavar manualmente o en la mfiquina, para suavizar sangre y mugres. Para desinfectar despues de limpiar, deje el instrumental en una soluci6n fresca durante 10 minutos.

Para baños y cuartos de vestidores: Use 4 grs. de BGC-3 por litro de agua para limpieza y desinfecci6n de paredes, pisos, lockers, lamparas y otras superficies duras en baños públicos, gimnasios, vestidores, etc.

Para desinfecci6n de Areas de tuberculosis: Use una parte de BGC-3 a 250 partes de agua para limpieza y desinfecci6n de pisos, paredes, muebles de metal, carros y otros equipos de superficie dura.

Precauciones: Las habituales con desinfectantes fenblicos. Evite el contacto directo con el cuerpo, lave la parte afectada inmediatamente. No se derrame o almacene cerca

del calor o flama.

G S C Limpiador germicida

Descripcidn general: El GSC (limpiador germicida), es un liquido detergente completo, de base sintetica, germicida, multifen6lico. Es efectivo contra un amplio espectro de bacterias Grampositivas y Gramnegativas.

Propiedades: Color.. .......................... .Cafe- verdoso.

Habilidad humectante.. ........ .Inmediata. Enjuague.. ..................... ..Completo.

Color de la diluci6n.. ......... .Translucido, tipico de las soluciones germicidas.

Estabilidad en agua dura.. ... .Desinfeccidn efectiva. Olor. .............................. Ligero-no fen6lico. Solubilidad.. .................... .Completamente soluble en todas las diluciones.

Pruebas gemicidas: Informaci6n Microbiologica. Oficial, metodos A.O.A.C., loa edici6n. 1965.

Coeficientes fendlicos. - Estafilococo dorado (ATCC No. 6538) ....... 12 Salmonella tiphy (ATCC No. 10708) ...... 10

Resultados Confirmados con Dilucidn de Uso: Est@lococo dorado (ATCC No. 6538) ......... 1 : 128 Salmonella Choleraesuis (ATCC No. 10708) . . 1: 128 Klebsiella pneumoniae (ATCC No. 8045) ...... 1 : 128 Escherichia coli (ATCC No. 11229) ............. 1 : 128 Shigella paradysenteriae ............................ 1 : 128

Actividad antituberculosa: Cepas de Micobacteria tuberculosa H37Hv y H37Rz ...................................... 1:40

Actividad fungicida: Trichophyton mentagrophytes ...................... 1 : 128

Recomendacibn de uso: Para la limpieza general y desinfecci6n use el GSC de 1 :40 a 1 :80. Para la limpieza y desinfeccidn ligeras, use 8 grs. por litro. El GSC tiene acci6n antituberculosa a una concentraci6n de 1:40.

CONTROL

Descripcih general: CONTROL, es un compuesto a base de sales cuaternarias de amonio. Hecho para limpiar, desinfectar y deodorizar en una sola operaci6n. CONTROL es efectivo en agua y es estable a altas temperaturas. Controla olores, moho, bacterias; limpia removiendo incrustaciones, sanea eliminando olores que causan las bacterias y da inmediata acci6n deodorizante.

Propiedades: pH sol. 1 % ........................... .8.3 Color ................................... Rosa fuerte. Espuma ................................. Ligera. Estabilidad ............................. Estable en agua dura.

Coeficiente de fenol: Salmonella ............................. .50 Mocrococus fogeres var. dorada ... 70 Estafilococo dorado .................. . 5 8

usos: Para sanear y deodorizar despuCs de limpiar y enjuagar, use 1 gr. de CONTROL PO 1 It. de agua (1:lOO).

...... """ Y."l. ._". _."I .....

ANEXO 3

HISTORIAL DEL LOTE RH-139

GERENCIA GENERAL DE BlOLOGlCOS Y INSTITUTO NACIONAL DE VIROLOGIA SUBDIRECCION DE PRODUCCION

REACT IVO S

PRESE NTE . MEXICO, D.F. A 28 DE Abril DE 1993

COMUNICO A UD. QUE EL LOTE RE 1.119 DE VACUNA

ANTIRHABICA fiUMANA SE TERMINO Sd PROCESO FINAL EL ' .

26-04-93 . CON U N TOTAL DE 238,000 DOS IS - IGUAL A 17.000 FRASCOS.

FUE ENV.ASADO Y REVISADO 3 3 - 0 4 - 9.1

LA FECHA DE CADUCIDAD ES n 1904

POR LO TANTO SE REQUIERE SOLICITAR DE INMEDIATO EL EvWSTREO PARA Q.UE - SE EFECTUE EL CONTROL EXTERNO DEL PRODUCIO TERMINADO.

/ I

I

. . ~ . .. .. . . . .

dxfco,

. . ' '. . .

. I; 2 .

e- .

I I

1 I

I

': , i I

3

*1

1

. . . . .-.

J.'. , , .

INSTITUTO NACIONAL DE VIROLOCICA . .. .~

SITBDIRECCION DE PRODUCCION PROCEYOS FINALES

EL LABORATORIO DE PROCESOS FINALES SOLICITA AL DEPRRTBhlENTO DE

CONTROL DE VACUNA ANTIRRABICA:

PRUEBA DE ESTERILIDAD BACTERIOLOGICA :

MUESTRE0 :

ANTIRRABICA KUb'IANA

15 viales p o r garrafón

ANTIRRAB XCX CANINA -

15 viales p o r garrafdn

GERENCIA GENERAL DE BKXOGlCOS Y REAcTlvos -o NAclow~vtRoLoo~

VACUNA LOTE: CADUCIDAD:

\I

"y W (II z e P 3

.." . . . . x ._ . ... . . . . "" ... .

KAISER

_ . . . " i . x , , " . . . . . - , _ , ,l.""l."l. "

P R O C E S O S F I N A L E S

DE REVXSION OPTICA :

. "

No. de frascos para reengargolar .- 7 / '9 . _

" NO. de frascos con parttculas extraiias Y$% "_ ~ ~ -~ ~. .

. ..

P R O C E S O S F I N A L E S

. .

. . I ..

. "

REPOHTE DE ETIQUETADO:

LOTE /& 9 CADUCIDAD - 5/

ETIQUETADO I, .

.

. . -

P R O C E S O S F I N A L E S . ~- , . . ..

REPORTE DE EMPAQUE:

FECHA DE EMPAQUE : 3 <? 7

ANEXO 4

HISTORIAL DEL LOTE RH-140

__."_ *"."~"-."-..-- " . "" "..

GERENCIA GENERAL DE BIOCOGICOS Y REACTIVOS INSTITUTO NACIONAL DE VIROLOGIA SUBDIRECCION DE PRODUCCION

-QBP. MARTHA UPEZ C. SUBDIRECTOR DE CONTROL PRESENTE . MEXICO, D.F. A 10 DE &yo DE 1993

w

COMUNICO A UD. QUE EL LOTE RI: 140 DE VACUNA

ANTIRKABICA HUMANA SE TERMINO Sd PROCESO FINAL EL

10-05-93 CON U N TOTAL DE 238,000 DOS IS - IGUAL A 17,000 FRASCOS.,

FIJE ENVASADO 19-03-93 Y REVISADO 28 .II o k g 3

LA FECHA DE CADUCIDAD ES

POR LO TANTO SE REQUIERE SOLICITAR DE INMEDIATO EL EUAUESTREO PARA QUE - SE EFECTUE EL CONTROL EXTERNO DEL PRODUCl O TERA41NADO.

OWRVACIONES:

2

ATENTAMENTE , .~

. M,enC. GARCIA m u m s JEFE DEL DEPTO. DE PROCESOS FlNlALES SUBO , DE PRODUCCIO'~

*

GERENCIA QENERAL DE BlOLOGlCOS Y REACTNOS INSTITUTO NACIONAL DE VIROLOGIA

VACUNA: LOTE: - CADUCIDAD:

. _ . 1

P R O C E S O S F I N A L E S

REPORTE DE REVISION OPTICCI. ':

VACUNA

.. .

No,. de frascos para reengargolar

No. de frascos con particulas extrañas ~ ~~ ~

Total de frascos aprobados

P R O C E S O S F I N A L E S - ~~

.~ .

REPORTE DE ETIQUETADO:

VIZCUNA G

LOTE CADUCIDAD

FECHA DE ETIQUETADO df 38

MAQUINA UTILIZADA ”

ELABORADO 1’

SUPZHVISOR

HORA ETIQUETADO

TOTAL DE FRASCOS /’#? i‘

P R O C E S O S F I N A L E S

REPONTE DE EMPAQUE:

La impresion de las etiquetcrs fue hecha por I 1 . "

n

ANEXO 5

ESPECIFICACIONES PARA ETIQUETA DE ENVASE PRIMARIO

ESPECIFICACIONES PARA ETIQUETA DE ENVASE

PRIMARIO

CODIGO : EEP VT 93

FECHA DE EMISION :

VIGENCIA : 12 MESES

SUSTITUYE A

I

QBmNxAPEREz~Oz gpB CAROLINA m G A V. DR GUSTAVO RAD0 B. ELABORO: REVISO: APROBO:

JEFE DE REGISTROS Y DIRECTOR DEL INV LICENCIAS

DIRECTOR DE COMERCMLIZACION

AUTORIZO: QBP JORQE QOIUEZ E. DIRECTOR DE CONTROL DE CALIDAD Y DESARROLLO

1. MATERULES

CONCEPTO ESPECIFICACIONES

- TIPO DE PAPEL

- FORMA - DIMENSIONES

- IMPRESION EN TRES TINTAS A) TEXTO

B) SIMBOLOS - GRUPO EN CUADRO BASICO,

BANDA INFERIOR

- COLOR CARACTERISTICO DEL PRODUCTO. BANDA SUPERIOR

- GGBR

- P m m L A

- SECTOR SALUD

PAPEL LUSTROLITO DE UNA SOLA CARA DE 50 k g , COLOR BLANCO, MARCA KIMBERLY-CLARK, CORTE AL HILO

RECTANGULAR

5.0 cm 2 0.02 cm X 2.6 cm k 0.02 cm

PANTONE PROCESS BLACK C

SEMEJANTE A PANTONE GREEN C

SEMEJANTE A PANTONE REFLEX BLUE C

PANTONE PROCESS BLACK C

PANTONE PROCESS BLACK C

PANTONE PROCESS BLACK C

ESPECIFICACIONES PARA : EEP VAS 93

ETíQUETA DE ENVASE FECHADE

PRIMARIO EMISION :

VIGENCIA :12 MESES

H. N. v. ELABORO: g B ~ N I A P E a E z l y m k o z

1. MATERULES

CONCEPTO

I REVISO: APROBO: QFB CAROLmA m G A V. DR GUSTAVO XADO B. JEFE DE REGIS7ROS Y DIRECTOR DEL INV LICENCIAS

DIRECTOR DE COMERCIALIZACION

ESPECIFICACIONES

I AUTORIZO: @P JORGE GO- E. DIRECTOR DE COMROL DE CALDAD Y DESARROLLO

- FORMA - DIMENSIONES

- IMPRESION EN TRES TINTAS A) TEXTO

B) SIMBOLOS - GRUPO EN CUADRO BASICO, BANDA INF'EFUOR

- COLOR CARACTERISTICO DEL PRODUCTO, BANDA SUPERIOR

- GGBR

- PANTALLA

- SECTOR SALUD

PAPEL LUSTROLITO DE UNA SOLA CARA DE 50 kg, COLOR BLANCO, MARCA KIMBERLY-CLARK. CORTE AL HILO

RECTANGULAR

5.0 cm 2 0.02 cm X 2.6 cm f 0.02 cm

PANTONE PROCESS BLACK C

SEMEJANTE A PANTONE GREEN C

SEMEJANTE A PANTONE GREEN C

PANTONE PROCESS BLACK C

PANTONE PROCESS BLACK C

PANT'ONE PROCESS BLACK C

ESPECIFICACIONES PARA CoDIGo : EEP RH 93

ETIQUETA DE ENVASE FECHADE PRIMARIO EMISION :

VIGENCIA : 12 MESES

REVISO: QFB CAROL= m G A V. JEFE DE REOISIROS Y LICENCIAS

APROBO: DR GUSTAVO RAD0 B. DIRECTOR DEL INV

DIRECTOR DE COMERCIALIZACION

AUTORIZO: QBP JORGE QOMEZ E DIRECTOR DE CONTROL DE txmm Y DESARROLLO

1. MAmRIALEs

CONCEPTO ESPECIFICACIONES

-TIPO DE PAPEL PAPEL LUSTROLITO DE UNA SOLA CARA, 50 kg, eeLQ€& COLOR BLANCO, MARCA KIMBERLY-CLARK, CORTE AL HILO.

-FORMA RECTANGULAR

-DIMENSIONES 7.0 cm k 0.05 cm X 3.5 cm 2 0.05 cm

-1MPRESION EN TRES TINTAS

Al TEXTO PANTONE PROCESS BLACK C

BI SIMBOLOS

- GRUPO EN CUADRO BASIC0 BANDA INFERIOR SEMEJANTE A PANTONE GREEN C

- COLOR CARACTERISTICO DEL PRODUCTO - BANDA SUPERIOR SEMEJANTE A PANTONE 3135 C

- GGBR PANTONE PROCESS BLACK C

- PANTALLA PANTONE PROCESS BLACK C

- SECTOR SALUD PANTONE PROCESS BLACK C

ESPECIFICACIONES PARA CoDIGo : EEP RC 93

ETiQUETA DE ENVASE FECHADE

PRIMARIO EMISION :

I I VIGENCIA : 12 MESES

ELABORO: REVISO: ! APROBO: ~ M p r o w u P E ~ ~ ~ 8pg C A R O W A m G A V . DR OUSTAVO XADO B.

JEFE DE REoIsIRos Y DIRECIDR DEL INV LICENCIAS

AUTORIZO: m JOROE GOME2 E. DIRECK)R DE CONTROL DE CALIDAD Y DESARROLLO

I DIRECTOR DE COMERCLALIZACION

1. MATERIALES

CONCEPTO ESPECIFICACIONES

-TIPO DE PAPEL PAPEL LUSTROLITO DE UNA SOLA CARA, 50 kg, COLOR COLOR BLANCO, MARCA KIMBERLY-CLARK, CORTE AL HILO.

-FORMA RECTANGULAR

-DIMENSIONES 9.0 cm 2 0.05 cm X 5.5 cm 2 0.05 cm

-COLOR BASE (PLASTE) SEMEJANTE A PANTONE 116

-IMPRESION EN DOS TiNTAS

A) TEXTO

B) SIMBOLOS

- CARACTERISTICO DEL PRODUCTO, CABEZA DEL PERRO

- GGBR

- PANTALLA

PANTONE PROCESS BLACK C

SEMEJANTE A PANTONE 186 C

PANTONE PROCESS BLACK C

PANTONE PROCESS BLACK C

Vidrio Tipo: ' I Capacidad: ' 5 m l uso: Vacuna antipoliomielftica

Vacuna DPT Vacuna antitifoíddca Toxoide Tetdnico Suero Antialacrdn

Grueso del labio. .

*.3.614.1mm( I N H j

Didmetro intern( boca 12.4-12.8(INV) . . .

Diámetro externc' l a boca 19.6-20.0mm

. .

Altura del' 3.5-4.5'mm

Didmetro extern6 cue1 Io

.. 35.U-15.5 (INH)

"

. .

.Altura Eotal- ". 40 . 0.-42. Omm .

Altura del .cuerp 29.0-31.0mm'

.. . _""" -"" 4

I -.

J .

Diámetro del cuerpo 21.0-22.0mm

FRASCO AMPULA COLOR CLARO TRANSPARENTE

.Tipo' .de. vidrio: I Capacidad: 201111 uso: ' Vacuna antirrdbica humana

Suero antirrdbico Suero anti.viperino Antitoxina difterica Antitoxina Tetdnica

. Grueso de. , ' Diámetro.'interno . 3 . 6.-4. O m m boca

1.2.4-,12.8mm

I ..

. . . ' . . . .

. . .

..

""_ Diámetro externc cue1 Io 1 6 . 5 - 1 7 . 5 m m ' ,

'Al.tura. del c.uerp 44.0-46.0mm * .

1 Y J . Fondo semisumido ..- 1 . . J

. . . Diámetro del cuerpo 29.0-30.0 m m - _

. .

FKASCO COLOR. CLARO TRANSPARENTE

V i d r i o t i p o : I Capacidad: 30m 1

'. . .

.' uso: Vacuna Antirrdbica Albumina humana

. 3 -6.1.4 . Qmm - _ ' _. . 12.4h12.8' mm Diámetro boca. interna . . . . _ .

. . Grueso de: l'abio

ámetr

Di áme

o boca exter

j

tro exter'ic . .

Altura de. c u e l L 4.0-6.0mm de" cue1 lo

16.5-17.5mm

-I

. . ', * Altura' total

*74.0-76mm .

. .

I . . . . . . . . . .

A l t u r a del cuerpo 59.0-61.0mm . .

' . . . . . . . . . . . . . . . .

..

s .

* .

. .

... . . ( . .

.. . - . cI"

"""

I .- L 4 J . . 1 Fondo semisumido

l . ,: I T I .

' . . .Diámetro del cuerpo 29.0-30.0mm

.. . . . . . .

. .

. . .

. .. - -

SECRETARIA DE SALUD INSTITUTO NACIONAL Ule: VlltOLOCIA

1

Especificacibn de tap6n de hule gris TIPO S-127

WEST HUBHER DE M X l C O

Acotaciones en mm

1

9FCRETARIA DE SALUD STITUTO NACIONAL DE VIHOLOGIA

A

Especificaciones do retapa de ahminio de 20 mm WEST RUBBER DE MEXICO S.A.

Acotaciones en m. I

m: *

7.49 altura de labio

k20.00 I"I( di6metro interno l4-20.22 diemetro externo

,

*

BIBLIOGRAFIA:

Boletin de la Oficina Sanitaria Panamericana; Organizaci6n Mundial de la Salud, Vol. L. 11 N03, 1962.

Bradshaw, L. J.: Microbiología de Laboratorio. Mexico, Manual Moderno, 1980.

Collins, C. H. & Lyne, M. P.: Metodos Microbiolbpicos, España, Acribia, 1989.

DIARIO OFICIAL DE LA FEDERACION. 18 de enero de 1988.

FARMACOPEA DE LOS ESTADOS UNIDOS MEXICANOS. 4a edici6n en español. Mexico, 1988.

Hans Fey: Compendio de bacteriología general mMica. España, Acribia, 1978.

Manzano Romero, Mario R. : Manual de Procedimientos para la evaluaci6n de &reas est6riles

Mexico, I.N.V., 1992. us&QaL

Martin, Erick W.; et. al.: Farmacia Pdctica de Reminton& Mexico, CECSA.

NajerA Franco, A. N. y Garcia Blanco, S. : Manual de Laboratorio de Producci6n v Control & Biol6gicos. Mexico, E.N.C.B. del I.P.N., 1980.

Perales Garcia, Alberto: Manual de Procedimientos, Mexico, I.N.V., 1991.

Sindey H. W. & et. al.: Good Manufactury Practices for Pharmaceuticals. A ulan for T o a Ouality Control. 2da. edicidn, vol. 6; New York, Marcel Decker, 1982.

1963

SECRETARIA DE SALUD

M. en C. ROSAURA QRETHER GONZALEZ Directora de la Divisih de Ciencias Biol6gicas y de Salud de la Universidad Authoma Metropolitana Unidad lztapalapa Presente

Me dirijo a usted, para informarle que la C. LEET BOLANOS AWNS, estudiante de la carrera de lngenierla Bioquimica Industrial, con número de matrícula 86237469, realiz6 satisfactoriamente su Servicio Social en el Departamento de Apoyo Administrativo del Instituto Nacional de Virologla, habiendo iniciado el día 1* de septiembre de 1992 y concluldo el día 1* de mano de 1993, con un horario de 1O:OO a 14:OO horas de lunes a viernes.

Atentamente Jefe del ento de Desarrollo

S Y o r g e F. Gom6z Herrera .- Director de Control de Calidad y Desarrollo - Edificio .br . Gustaw, Kado Boll.- Director del Instituto Nacional de Virologla. Presente.

'"4

Instituto Nacional de Higiene / Instituto Nacional de Virología

Amores 1240. Colonia del Valle. Méx ico 03100, DF. Teléfono 575-9155; Telex 1764004 GGBRME

GERENCIA

REACTIVOS SECRETARIA DE SALUD

México, D.F., a 11 de agosto de 1993.

M.en C. ROSAURA GRETHER GONZALEZ Director de la División de Ciencias Biológicas y d& la Salud UAM - Iztapalapa

P R E S E N T E

Por este conducto le comunico, que las alumnas Lizet Bolaí5os Alanís con matrícula No. 86237469 y Patricia Gabino Noriega con matrícula No. 86237407, de la carrera de Ingeniería Bioquímica Industrial, concluyeron en forma satisfactoria el trabajo "CONTROL BIOLOGIC0 Y DE HANUFACTURA PARA LA PRODUCCION DE BIOLOGICOSu~ que reali - zaron en las instalaciones del INSTITUTO NACIONAL DE VIROLOGIA.

Por otra parte, reitero que no existe inconveniente en relación con la información contenida en el trabajo final y que esta puede ser usada para fines de apoyo -- académico.

Sin otro particular, quedo de usted.

A T E N T A M E N T E h

dsponsab? del Lagoratorio de Control n' Proceso del Instituto Nacional de Virología

Instituto Nacional de Higiene / Instituto Nacional de Virología

Amores 1240, Colonia del Valle. México 03100, DF. Teléfono 575-9155; Télex 1764004 GCBRME

SECRETARIA DE SALUD

M, enC, ROSAURA GHETHER GONZALEZ DIRECTORA DE LA D I V I S I O N DE CIENCIAS BIOLOGICAS Y DE LA SALUD. UNIVERSIDAD AUTONOMA METROPOLITANA UXID-4D IZTAPALAPA. PiiESENTE ,

Por medio de l a p r e s e n t e me permito comunicar a UD,, que las C, PATRICIA GABINO NORIEGA con No. de m a t r i c u l a 86237407, p a s a n t e de l a carrera de I n g e n i e r o B i o q u i m i c o I n d u s t r i a l y l a C. LIZET BOLANOS ALAN3.S con No, de m a t r i c u l a 86237469, pa-

s a n t e de l a carrera de I n g e n i e r o B i o q u i m i c o I n d u s t r i a l , r e a l i z a - r o n s a t i s f a c t o r i a m e n t e s u s e r v i c i o s o c i a l e n e l I n s t i t u t o N a c i o - n a l de V i r o l o g i a ; a s i mismo se hace constar que e l contenido d e l

i n f o r m e f i n a l que corresponde a l t r a b a j o t i t u l a d o " Contro l B i o l o g i c o y de Manufactura para l a Produccion de B i o l o g i c d s "

es e l r e a l i z a d o d u r a n t e s u permanencia en d i c h o I n s t i t u t o ,

QFB ALBERT LES GAHCIA

JEFE DEL D&ARTAIWNTO DE PROCESOS FINALES.

Instituto Nacional de Higiene / instituto Nacional de Virologia

Amores 1240, Colonia del Valle. México 03100, DF. Teléfono 575-9155; Telex 1764004 GGBRME

- _I. " ._ ". . . .. .~,. l.l"".Il." , .I. , - . . , ._LI - .,.

Mexico, D. F., a 14 de septiembre de 1993.

M. en C. ROSAURA GRETHER GONZQLEZ Director de la Divisidn de Ciencias Bioldgicas y de la Salud. Universidad Autonoma Metropolitana Unidad Iztapalapa.

P R E S E N T E

Por medio de este conducto nos permitmos comunicarle a Ud., que las alumnas LIZET BOLAROS ALANIS y PATRICIA GABINO NORIEGA, de la carrera de Ingeniería Bioqufmica industrial, no concluyeron su servicio social en el tiempo estipulado de O1 de septiembre de 1992 al O1 de marzo de 1993 de 1O:OO a 14:OO horas, debido a que tuvieron que reponer las horas por dias festivos y vacaciones que toma todo el personal del Instituto Nacional de Virologfa.

Sin m& por el momento agradecemos su atencibn prestada a la presente y le enviamos un cordial saludo.

A T E N T A M E N T E

ES GARCIA del Departamento de Procesos Finales del Control en Proceso del Instituto Nacional de Virologia Instituto Nacional de Wrologfa