UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE NICARAGUAUNAN – MANAGUA

INSTITUTO POLITECNICO DE LA SALUDI.P.S

ASIGNATURA: MICROBIOLOGIA

CARRERA: BIOANALISIS CLINICO

TEMA: EXUDADO OTICO Y FARINGEO

PROFESOR: DIANA SANCHEZ

ELABORADO POR: YURI VLADIMIR VILLALOBOS MILENA PAOLA VARGAS

JONATHAN ROGELIO SANDINO

Objetivos

Aplicar la técnica de recolecta de exudado faríngeo. Aplicar la técnica de recolecta de exudado otico. Identificar los medios de cultivos para los exudados faríngeos y otico. Interpretar resultados obtenidos.

Introducción

El exudado faríngeo es la toma de muestra que se realiza en el fondo de la garganta (en las amígdalas, generalmente), mediante el uso de un hisopo estéril. Sirve como herramienta de diagnóstico de padecimientos de origen bacteriano.

El hisopo se introduce y se dan vueltas sobre la muestra a fin de que todo éste quede impregnado. Se prosigue a sembrar en medios de cultivo, tomando como los más nutritivos agar sangre y agar chocolate, se pueden usar también el Agar MacConkey, entre otros. Después se procede a incubar a 37ºC y observar resultados en 48 horas.

El exudado otico es la toma de muestra que realiza atrás del pabellón de la oreja e introducir un hisopo de algodón estéril rotándolo suavemente. Sirve como herramienta de diagnóstico de padecimientos de origen bacteriano.

El cultivo del exudado faríngeo o frotis faríngeo se realiza utilizando un hisopo especial para detectar la presencia de estreptococo grupo A, que es la causa más común de la faringitis.

Una muestra tomada de la pared posterior de la garganta se coloca en un plato especial (cultivo) que permite el crecimiento de las bacterias. El tipo específico de infección se determina utilizando análisis químicos. Si no hay crecimiento de bacterias, el cultivo es negativo y la persona no tiene una infección.

La faringitis es una infección bacteriana que afecta la parte posterior de la garganta y las amígdalas, que se inflaman e irritan, lo cual provoca dolor de garganta particularmente molesto al tragar. Es posible que la garganta y las amígdalas presenten manchas o una capa de color amarillo y, quizás, los ganglios linfáticos del cuello estén inflamados.

OBTENCIÓN DE LA MUESTRA DE EXUDADO FARÍNGEO:

Incline ligeramente la cabeza del paciente hacia atrás e ilumine bien la garganta.

Presione la lengua hacia abajo con depresor de madera de modo que pueda observarse la parte posterior de la garganta.

Luego frote el hisopo de algodón estéril de arriba abajo contra ambas amígdalas, contra la parte posterior de la faringe y contra cualquier mancha blanca que se encuentre alrededor de las amígdalas.

Introduzca el hisopo en el medio de transporte de Stuart.

PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA:

Se recomienda la Sangre de Carnero como sangre de elección para detectar Streptococcus ß-hemolíticos.

No debe utilizarse sangre humana porque ésta puede contener anticuerpos específicos antiestreptococo, antimicrobianos. Por otro lado, contiene un factor antiestreptolisina S que puede inhibir la hemólisis. Este factor no tiene relación con el contacto previo a Streptococcus.

Las bolsas colectoras de sangre humana contienen citrato como anticoagulante, el cual inhibe el crecimiento bacteriano.

Rotular el plato de Agar Sangre de Carnero (ASC). Tomar el hisopo que contiene la muestra e inocular cerca de una sexta

parte del plato de forma redonda. Se hace girar el hisopo sobre la superficie del agar de modo que toda la superficie del hisopo entre en contacto con el agar.

Deje secar el inóculo durante 5 minutos. Estríe los medios de la forma convencional. Utilizando un asa redonda realizar de 3 a 4 estrías a profundidad para

observar la beta hemólisis con mayor facilidad, para ello se introduce el asa hasta el fondo del plato en forma perpendicular a la superficie.

Incubar de 35-37oC durante 18 a 24 horas en ambiente 5% de CO2 utilizando el método de la jarra con una vela de parafina blanca o incubadora con CO2.

EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS:

TOMA DE MUESTRA:

Hisopos estériles. Depresor de madera. Lámpara de baterías o de cuello de ganso.

TRANSPORTE DE LA MUESTRA:

Tubos conteniendo medio de transporte de Stuart

3. PROCESAMIENTO:

Equipos:

Incubadora a 35-37oC Incubadora con CO2

Jarra con vela de parafina blanca (si no cuenta con incubadora CO2). Refrigeradora a 6-8oC Mechero tipo Bunsen Reloj de mesa Microscopio con objetivo de 40X y 100X Rotador

Materiales:

Palillos de madera Marcadores indelebles Asas bacteriológicas rectas y redondas Guantes descartables y mascarillas Gradillas Láminas de vidrio Pinzas Contenedores con cloro al 5% para desechar material contaminante. Reactivos: Ninguno.

Medios de Cultivo:

Agar Sangre de Carnero al 5% (ASC)

Exudado otico

TOMA DE LA MUESTRA

Para tomar una muestra de exudado ótico se recomienda no haber recibido tratamiento local ni sistémico con antimicrobianos 3 días antes de la toma de la muestra.

1. OTITIS EXTERNA

Hacer una ligera tracción hacia arriba y atrás del pabellón de la oreja e introducir un hisopo de algodón estéril rotándolo suavemente. Tome dos muestras. Una muestra servirá para realizar un frotis y posterior tinción de Gram y la otra para el cultivo. En caso no de sembrar la muestra inmediatamente introduzca el hisopo en un medio de transporte de Stuart y transpórtela a temperatura ambiente.

Tome una nueva muestra con otro hisopo y realice un frotis en una lámina portaobjetos.

2. OTITIS MEDIA

El oído medio es estéril. Cuando ocurre una infección a este nivel, la muestra debe ser tomada por el médico, pues requiere de la punción del tímpano (miringostomía). Cualquier germen aislado de esta muestra debe ser completamente identificado y reportado. El tipo de microorganismo varía con la edad, pero usualmente se encuentran los siguientes:

Streptococcus pneumoniae Causa el 50% de todas las infecciones a cualquier edad.

Haemophilus influenzae: Es el microorganismo más frecuentemente aislado en niños: 30% de todas las causas.

Streptococcus pyogenes: 10-15% de todas las causas. Enterobacterias y Staphylococcus: Principales causas en recién nacidos.

PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

1. OTITIS EXTERNA:

Con uno de los dos hisopos con los cuales tomó la muestra, realice un frotis de 1.5 x 2 cm en una lámina portaobjetos nueva, con un grosor tal que sea posible leer a través de él. Coloree el frotis con tinción de Gram.

Con el otro hisopo, ya sea que provenga de un medio de transporte o sea directamente del paciente, siembre la muestra en los medios de Agar Sangre de Carnero y Agar MacConkey.

2. OTITIS MEDIA:

Del contenido de la jeringa, ponga una pequeña cantidad (menos de una gota) en el centro de una lámina portaobjetos y realice un frotis como se indica en el numeral 1 de otitis externa.

2.2. Con el contenido de la jeringa realice un inóculo cerca de la orilla de los platos de Agar. Sangre de Carnero y Agar MacConkey. Estríe en la forma convencional.

EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

TOMA DE LA MUESTRA

Otitis media:

Jeringa estéril descartable de 3mL

Otitis externa:

Hisopos estériles

TRANSPORTE

Medio de transporte de Stuart

PROCESAMIENTO

Equipos

Incubadora de CO2 (o jarra con vela en caso de carecer de incubadora de CO2 )

Microscopio con objetivo de 100x y ocular de 10x Mechero tipo Bunsen Reloj de mesa

Materiales y Reactivos

Guantes descartables no estériles Asas bacteriológicas con punta redonda y recta Contenedores con cloro al 0.5% para descarte de materiales descartables Láminas portaobjetos Solución salina estéril al 0.85% Colorantes para tinción de Gram: Cristal violeta, lugol, alcohol 70o o

alcohol-acetona (1:1), fucsina acuosa o safranina.

Medios de cultivo

Agar Sangre Agar MacConkey Agar Chocolate (*) Agar Sabouraud con Cloranfenicol (**) (*) Sólo en caso de cultivo de oído medio. (**) Sólo si observa levaduras sin seudohifas en el frotis.

Identificación

Haemophilus influenzae Streptococcus pyogenes Staphylococcus spp Enterobacterias Bacilos No Fermentadores Cándida sp

IMAGEN DEL EXUADO OTICO EN AGAR MacCONKEY.

IMAGEN DE EXUDADO OTICO EN AGAR SANGRE HUMANA.

IMAGEN DEL ST. AUREUS. PRUEBA DE CATALASA.

Resultado positivo se formaron burbujas que evidencian la reaccion

Prueba de coagulasa

1ml de3 suero más 4 ml de solución salina

Resultado

Prueba positiva de la coagulasa se formo el coagulo de fibrina.

Pba de Bacitracina

Prueba positiva se formo el halo de inhibición bacteriano alrededor de disco de Bacitracina

CAMP-TEST

La reacción fue negativa porque se sembró en un medio de cultivo no usual el ASH y era mejor en ASC en la que el resultado hubiera sido positivo.

Conclusión

Tras haber realizado este laboratorio concluimos que el estudio de los exudados otico y faríngeo son de vital importancia para la identificación de bacterias patógenas que se pueden alojar en estos lugares (oreja y faringe). Con ellos se hace mas fácil y eficaz el diagnostico de las bacterias que pueden afectar estos órganos tan importantes.

Bibliografia

MANUAL DE PRCEDIMIENTOS DE BACTEREOLOGIA MEDICA

www.slideshared.com

www.wilkipedia.com

www.buenastareas.com