Extracción, aislamiento, cuantificación e identificación de Acido cafeico y Quercitina de la cascara de Piña var. Oro miel (Ananas sativus)

Ester BravoWilmar López

OBJETIVOS

• Comprobar la presencia del metabolito secundario, acido cafeico en la cascara de piña Ananas sativus L

• Comprobar la presencia del metabolito secundario, Quercitina en la cascara de piña Ananas sativus L.

INTRODUCCION

•En los últimos años, las personas desean reducir el riesgo o manejar un problema de salud específico a través de mejoras en la dieta. Las plantas han desarrollado diferentes fitoquímicos y enzimas como defensa antioxidante para mantener el crecimiento y el metabolismo ( Pandhair y Sekhon, 2006 ).

INTRODUCCION

• Muchas de las enfermedades degenerativas humanas como el cáncer, cardio y cerebro-vasculares han sido reconocidas como una posible consecuencia de los daños de los radicales libres a los lípidos, proteínas y ácidos nucleicos ( Choi y Lee, 2009 ).

INTRODUCCION

• El alto consumo de frutas y verduras se ha asociado con una menor incidencia de estas enfermedades degenerativas ( Bajpai, Yoon, y Kang, 2009 ).

METODOLOGIA

• Acido cafeico (C 9 H 8 O 4 ).

Densidad: 1.478 g / cm ³ . Punto de fusión: 223-225 ° C.Lambda – Max : 327nm. •Ácido cinámico C6-C3 = A. Cafeico

ACIDOS FENOLES• EXTRACCIÓN

• •Extracción con mezclas hidroalcohólicas

• •Hidrólisis posterior para obtención de geninas

• CARACTERIZACIÓN

• Separación por técnicas cromatográficas (CCF, HPLC CC)

• Detección: Cl 3Fe

• Vainillina sulfúrica

• P-nitroanilina diazotada + carbonato sódico

• PROPIEDADES FARMACOLÓGICAS

• Antimicrobianos´(antisépticos y desinfectantes)

• Anti-inflamatorio- analgésico l

• Antioxidante

• Colerétic

METODOLOGIAQuercitina (C15 H10 O7 )

Masa molar: 302,236 g / mol Densidad: 1,799 g / cm 3

Punto de fusión: 316 °CLambda – Max : 369 nmSoluble en soluciones acuosas alcalinas.

MARCHA FITOQUIMICA • METABOLITO RESULTADO• AMINOACIDOS ++• COMPUESTOS FENOLICOS ++• FLAVONOIDES ++• TRITERPENOIDES Y/O ESTEROIDES -• QUINONAS -• CARDIOTONICOS -• ALCALOIDES -• LEUCOANTOCIANINAS +• TANINOS ++

METODOLOGIA

FASE ACUOSA BASICA

HACER PARTICION CON : CHCL3 , CH2CL2 Ó CH3OH.

TOMAR CON AYUDA DEL ENBUDO DE SEPARACION LA FASE ACUOSA.

REALIZAR CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA EN CONTRASTE CON ESTANDAR DE A. CAFEICO.

METODOLOGIA• DETERMINAR EL ESPECTRO DE ABSORCION UV DE ESTANDAR

DE A. CAFEICO. • DETERMINAR EL ESPECTRO DE ABSORCION UV DE ESTANDAR

DE QUERCETINA. • DETERMINAR LA CONCENTRACIÓN DE FENOLES TOTALES EN

LOS EXTRACTOS MEDIANTE EL USO DE FOLIN-CIOCALTEU Y CALIBRACIÓN EXTERNA CON ESTANDAR DE ÁCIDO CAFEICO.

• DETERMINAR LA CONCENTRACIÓN DE FlAVONOIDES TOTALES EN LOS EXTRACTOS MEDIANTE EL USO DEL METODO COLORIMETRICO CLORURO DE ALUMINIO Y CALIBRACIÓN EXTERNA CON ESTANDAR DE QUERCITINA.

• DETERMINAR EL ESPECTRO DE ABSORCIÓN DEL COMPUESTO AISLADO Y COMPARAR.

FUENTES DE CONSULTA• Manual practicas de laboratorio de farmacognosia y fitoquimica pag 72:78.• Harborne, J. B., Phytochemical . Methods. A Guide to Modern Techniques of Plant Analysis, Chapman

& Hall, London -Weinheim-New York, 1998.• Wagner, hildebert, Bladt, Sabine. Plant Drug Analysis: A Thin Layer Chromatography Atlas. Springer-

Verlag, Berlin-Heidelberg-New York-Tokyo, 2001. Páginas 335-338.• Edwin Alvarez, Orfa Jimenez, Cristian Posada, Benjamín Rojano, Jesus Gil, Carlos M. Garcia, Diego L.

Durango. Actividad Antioxidante Y Contenido Fenólicos De Los Extractos Provenientes De Las Bayas De Dos Especies Del Genero Visnia (Guttiferea). Vitae Revista De La Facultad De Quimica Farmaceutica Volumen 15. Medellín Colombia. Páginas. 165-172.

• Spectral Data base for Organic Compounds SDBS: 4-hydroxycinnamic acid documento disponible en: http://riodb01.ibase.aist.go.jp/sdbs/cgi-bin/direct_frame_top.cgi. 8 Diciembre del 2010

• M. Amzad Hossain,SM Mizanur Rahman, Fenoles totales, flavonoides y la actividad antioxidante de la piña frutas tropicales.Instituto de Investigaciones Biotecnológicas, Universidad de Malasia Sabah, Locked Bag N º 2073, 88999 Kotakinabalu, Sabah, Malasia Departamento de Química de la Universidad de Dhaka, Dhaka-1000,

• Sheng Xiao-yuan,Zhen Guo Li,Wang Wei , Du Li-junio, BangladeshCaracterización de los activos fenólicos componentes en el extracto etanólico de Ananas comosus L. deja de alto rendimiento utilizando cromatografía líquida con detección de diodos y espectrometría de masas. Laboratorio de Ciencias Farmacéuticas, Departamento de Ciencias Biológicas y Biotecnología, Universidad de Tsinghua, Beijing 100084, China Facultad de Ciencias de la Vida y Tecnología, el Instituto de Tecnología de Beijing, Beijing 100081, China. El Instituto para el Control de Productos Farmacéuticos y Biológicos de la provincia de Henan, Zhengzhou 453000, China