expo porfirias

7/25/2019 Expo Porfirias

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Lic. T.M. Carlos Ortega TumayServicio de Bioqumica

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HNERM

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ESSALUD


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La palabra porfiria deriva del griego porphyra que

significamorado opurpura.

Las porfirias, constituyen un grupo de enfermedadesmetablicas hereditarias, originadas comoconsecuencia de alteraciones en la biosntesis delgrupo Hemo.

Se caracteriza por la presencia de d-amino levulinicoy/o profobilinogeno en orinas y porfirinas en orinas

-heces que provocan alteraciones neurologicas ocutaneas o ambas.

Definicion de Porfiria


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Las porfirias fueron reconocidas por primera vez afines del siglo XIX, por Gunther en 1911 , quien

describi una porfiria congnita con lesionescutneas ( hidroa estival) y afectacin heptica, cuyapatogenia y tratamiento se desconocan, aunque sise conoca la predisposicin a padecer la

enfermedad.

Breve Historia


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Fisiopatologia

La sntesis del grupo Hemose realiza mediante unasecuencia de ocho reacciones

qumicas catalizadas porocho enzimas diferentes,cada una de ellascodificadas por otros tantosgenes.

El dficit parcial o total deestas enzimas (excepto laprimera de ellas) da lugar alos distintos tipos deporfiria.

Cada enfermedad estasociada al aumento y

acumulacin de algunode los intermediariosde la va metablica.

Siendo este incrementoel responsable directo o

indirecto de lossntomas y efectosclnicos de estas rarasenfermedades.


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Metabolismo de las Porfirinas

Las porfirinas, derivados tetrapirrlicos cclicos, se encuentranen todas las clulas vivas, tanto animales como vegetales; noposeen actividad farmacodinmica. Se encuentran como

sustancias intermedias en el ciclo metablico del hem. El cidosuccnico unindose a un aminocido, la glicina, dar lugarmediante una serie de pasos intermedios al hem, queunindose a una protena, la globina, dar lugar a lahemoglobina.

La deficiencia enzimtica parcial de algunas de los enzimascatalizadoras entre el primer paso y los siguientes en la sntesisdel hem dar lugar a un acumulo de porfirinas o de susprecursores.

En el ciclo metablico de las porfirinas existe una doble va,solamente una de ellas es una va til en la sntesis del hem.


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I.-Segn su origen:1.-Eritropoyeticas: -Congenita de Gunther

-Protoporfiria2.-Hepaticas-Cutanea tarda - Variegata

-Coproporfiria hereditaria - Aguda de DOSS-Aguda intermitente

Clases de Porfirias


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1.-Porfiria Aguda intermitente

Es la mas frecuente detoda las variedades.

La mayoria de lospacientes permanecenasintomaticos.

Las manifestacionesclinicas se relacionan confactores ambientales.

Mas comun en mujeres de20 a 30 aos.


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2.-Porfiria Variegata o Mixta

Esta constituida por unsindrome que asocia

ampollas, erosiones ycicatrices. Semeja a laprofiria cutanea tarda.Pero posee un patrn

clsico de laboratorioque la diferencia de lasdemas.


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3.-Coproporfiria hereditaria

Posee un cuadrosemejante a la porfiria

variegata, aunque masdiscreto acompaadode brotes de porfiriaaguda.


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4.-Porfiria cutanea tarda

Es la forma mas comun. Es causada por un

deficit de lauroporfobilinogenodescarboxilasa.

Se caracteriza por una

gran sensibilidadcutanea.


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5.-Porfiria aguda de Doss

La porfiria por deficiencia deALA deshidratasa, llamada

plumboporfiria o de Doss, esla mas minoritaria de lasporfirias.

Las mutaciones genticas anivel de esta enzima, logran

bloquear los sitios de unin deplomo, en las molculastransportadoras, causandoacumulacin del mismo.


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Epidemiologia

La prevalencia varia bastante de paias a pais. En el Norte de Europa se estima que es de 1 a 2 por

1000 habitantes son portadores del gen de paraporfiria aguda intermitente.

Mientras que en sudafrica se da la mayor prevalenciadel tipo variegata en 3 por 1000 habitantes.

En los EEUU se estima una prevalencia de 1 por25000 habitantes.

En el Per hay hasta ahora 15 casos confirmados.


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Rol del Laboratorio en

el Dx. Oportuno de lasporfirias.


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Pruebas a realizar segn el nivel

de complejidad. El primer nivel consiste

en evidenciar la presenciade los precursores y/o

porfirinas. en diferentes muestras

biolgicas: orina, sangrey heces.

En el segundo nivel, una

vez demostrado elacumulo del/loscompuesto/s en las

diferentes muestrasestudiadas, debemos

cuantificar la actividadenzimtica

especfica responsable delmismo.

El tercer nivel ,trata deanalizar el gen quecodifica la enzimaalterada mediante el

empleo de tcnicasmoleculares que precisanel aislamiento previo delADN.


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I. Mtodos de cribadoMediante el empleo de este tipo de mtodos

podemos evidenciar de modo rpido la presencia decantidades anormales de precursores y/o porfirinas,indicativa de la existencia de una porfiria. Estosmtodos pueden aplicarse en diferentes tipos de

muestras biolgicas y son cualitativos.

Pruebas a realizar en el primer

nivel de atencin


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1. Observacin directa de una muestra de orinareciente bajo una lmpara de fluorescencia (lmpara

de Wood). 2. Test de Hoesch. Es un procedimiento rpido que

produce el inmediato cambio de color de la orina encontacto con el reactivo de Ehrlich. El reactivo a

emplear tiene un bajo costo por lo que debe estardisponible en los servicios de urgencias de loshospitales.

Muestras de orina


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Es la prueba clasica para diferenciar entreurobilinogeno y porfobilinogeno.

Se realiza una serie extracciones sucesivas consustancias quimica como cloroformo, butanol quebasados en las caracteristicas fisico quimica nos darauna reaccion de color rosa.

Test de Watson Schwartz


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Reactivo de Ehrlich 1 g de 4-dimetilamino-benzaldehido

42 cc de Acido actico 100% 8 cc de Acido perclrico 70% Mezclar bien hasta la disolucin y conservar en frascos de

color topacio de 10 cc a 4C protegidos de la luz.

Estabilidad de 2 meses. Desechar en cada uso el frasco empleado debido a la

oxidacin del reactivo por el oxgeno del aire.

Reactivo de Erlich


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Poner en un tubo de ensayo 2 cc de Reactivo deHoesch y aadir 2gotas de la orina problema

procedente de una miccin casual. En caso de test positivo, se produce una coloracin

rosada en la solucin resultante analizada.

Procedimiento del test de Hoesch


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Resultados de la deteccin

de Urobilinogeno


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Test de Watson

Schwartz


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1. Cuantificacin de porfirinas totalesen una muestra de sangre tras un

proceso de extraccin con unsolvente orgnico en medio cido. 2. Barrido espectrofluorimtrico. La

dilucin de una alcuota de plasmaen un buffer fosfato/salino, nos

mostrar un pico de emisin defluorescencia especfico para cadatipo de porfiria.

Muestras de Sangre


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Cuantificacin de porfirinastotales en una muestra de heces

tras un proceso de extraccin conun solvente orgnico en mediocido

Muestras de Heces


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A. Anlisis de precursores. cidodeltaaminolevulnico y Porfobilingeno.

La determinacin se realiza en una muestra de orinade 24 horas recogida en condiciones de refrigeracina 4C y protegida de la luz. Su cuantificacin puedellevarse a cabo tanto en columna abierta de

intercambio inico con valoracin finalespectrofotomtrica, o mediante cromatografalquida de alta resolucin con deteccin defluorescencia (mtodo de referencia).

Mtodos cuantitativos


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Muestras: Se puede utilizar sangre, orina de 24 horaso heces una sola depsicion.

Condicin que se guarden protegidas de la luz ysean guardadas bajo refrigeracin

Metodologa: se usa el mtodo de referencia que es lacromatografa liquida de alta resolucin con

deteccin de fluorescencia.

b.- Cuantificacin de porfirinas fraccionadas.


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Estudio de las EnzimasMuestras: se puede dosar en sangre, en leucocitos o

fibroblastos segn la enzima de que se trate. La metodologa a emplear puede ser una tcnica

espectrofotomtrica/espectrofluorimtrica o biencromatografa lquida de alta resolucin con

deteccin UVVIS o de fluorescencia.No son tan sensibles y especificas como el DNA.

Pruebas a realizar en el segundo

nivel de atencin


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Este tipo de estudio requiere la extraccin previa deADN procedente de una muestra de sangre

perifrica. Una vez obtenido, el anlisis molecularpuede llevarse a cabo mediante secuenciacin directadel gen si se trata del estudio del caso ndice, o bien

mediante el empleo de una simple reaccin en

cadena de la polimerasa (PCR) si lo que pretendemoses buscar una mutacin ya conocida por elconocimiento previo del citado caso ndice.

Pruebas a realizar en el tercer

nivel de atencin


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