TAMIZAJE FITOQUíMICO Y EVALUACITAMIZAJE FITOQUíMICO Y EVALUACIÓÓN N DE LA ACTIVIDAD ANTIHEMORRDE LA ACTIVIDAD ANTIHEMORRÁÁGICA Y GICA Y OXITOXITÓÓCICA DE LOS EXTRACTOS ACUOSO CICA DE LOS EXTRACTOS ACUOSO

Y ETANY ETANÓÓLICO DE Lepidium LICO DE Lepidium bipinnatifidum Desv. bipinnatifidum Desv. ““TikreTikre””

AUTORAS: Anchayhua Ramírez, Rúdyar. Huamán Avalos, Natalia. Fajardo Escate, Carmen.

ASESORAS: Q.F. Ferreyra Paredes Carmela. Dra. Chávez Orellana Haydeé

INTRODUCCIÓN

DROGAS VEGETALES

MEDICINACONVENCIONAL

HEMORRAGIAS POSPARTOMETRORRAGIAS

Lepidium bipinatifidum desv.

PERÚ POSEE 25000ESPECIES VEGETALES

PLANTA MEDICINALLepidium bipinnatifidum

Desv. “Tikre”

POBLADORES DE ABANCAY

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

¿Presentarán actividad antihemorrágica y oxitócica los extractos etanólico y acuoso obtenidos de la parte aérea de Lepidium bipinnatifidum Desv. “tikre”?

HIPÓTESIS

Los extractos etanólico y acuoso obtenidos de la parte aérea de Lepidium bipinnatifidum Desv. “tikre” poseen actividad antihemorrágica y oxitócica.

OBJETIVO GENERAL

Confirmar y evaluar el efecto antihemorrágico y oxitócico de los extractos acuoso y etanólico obtenidos de la parte aérea de Lepidium bipinnatifidum Desv. “tikre”.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Identificar los metabolitos secundarios presentes en los extractos obtenidos de la parte aérea de la especie en estudio.

Determinar el extracto y/o las fracciones del tamizaje fitoquímico, con mayor efecto antihemorrágico y oxitócico, de la parte aérea de Lepidium bipinnatifidum Desv. “tikre”.

Establecer el posible mecanismo de acción de los extractos obtenidos de la parte aérea de Lepidium bipinnatifidum Desv. “tikre.

TIPO DE ESTUDIO

EXPERIMENTAL

MATERIALES Y MÉTODOS

MATERIAL VEGETAL

Reino:PlantaeDivisión:MagnoliophytaClase : MagnoliópsidaOrden : CapparalesFamilia : BrasicaceaeGénero : Lepidium Especie : Lepidium bipinnatifidum Desv.Nombre vulgar: “tikre”

RECOLECCIÓN TAXONOMÍA

MATERIAL BIOLÓGICO

EQUIPOS

FÁRMACOS

•ETAMSILATO•HEPARINA•ADRENALINA•OXITOCINA

METODOLOGÍA

TAMIZAJE FITOQUÍMICO

ESTUDIO FARMACOLÓGICO

Determinación de las actividades:

Antihemorrágica.

Oxitócica.

TRATAMIENTO DE LA PLANTA

EXTRACTO

CONCENTRACIÓN

Rx :•Gelatina•FeCl3•Ninhidrina•Shinoda

Rx:•Libermann B.•Bortraguer

Rx:•Liebermann B.•Mayer•Dragendorff

Rx:•Shinoda•Rosenheim

Rx:•Shinoda•Rosenheim•Libermann B.•Mayer•Dragendorff

SCREENING FITOQUÍMICO

ENSAYOS FARMACOLÓGICOS

I.- EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIHEMORRÁGICA

Determinación preliminar de la dosis efectiva antihemorrágica

a) TIEMPO DE COAGULACIÓN

GRUPOS DE TRABAJO

VEHÍCULO

CONTROL POSITIVO ETAMSILATO

EXTRACTO ACUOSO

EXTRACTO ETANÓLICO O FRACCIÓN A

FRACCIÓN B

FRACCIÓN C

FRACCIÓN D

FRACCIÓN E

(TCB - TCP) x 100TCB

%DISMINUCIÓN DEL TIEMPO DE COAGULACIÓN

b) TIEMPO DE COAGULACIÓN MODIFICADO POR HEPARINA

c) DETERMINACIÓN DEL EFECTO VASOCONSTRICTOR IN SITU EN EL MESENTERIO DEL SAPO

Después de cada ensayo se realizó 3 lavados con la misma solución, dejando pasar como mínimo 3 minutos entre cada prueba.

II.- EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD OXITÓCICA

RESULTADOS

LEYENDA : (+) = presencia (-) = ausencia

Tabla Nº 01: Metabolitos secundarios presentes en la especie Lepidium bipinnatifidum Desv.

FRACCIÓN METABOLITO RESULTADOS

FRACCIÓN A FlavonoidesAminoácidosTaninos

++-

FRACCIÓN B Triterpenos y/o esteroidesQuinonas

+-

FRACCIÓN C AlcaloidesTriterpenos y/o esteroides

++

FRACCIÓN D FlavonoidesLeucoantocianidinas (Catequinas)Triterpenos y/o EsteroidesAlcaloides

+

+++

FRACCIÓN E FlavonoidesLeucoantocianidinas (Catequinas)

+

+

Tabla Nº 01:Tabla Nº 02: Comparación del porcentaje del tiempo de coagulación entre el fármaco Etamsilato y los grupos en estudio.

GRUPO DOSIS n PROMEDIO TIEMPO DE COAGULACIÓN (segundos)

% DTC

BASAL 10min 20min 30min 40min

VEHÍCULO 300mg/kg 4 85 94 63 74 77 9.41

CONTROL (Etamsilato)

300mg/kg 4 60 30 24 25 24 57.08

EXTRACTO ACUOSO

300mg/kg 4 60 30 23 10 10 69.58

EXTRACTO ETANÓLICO

300mg/kg 4 120 73 60 50 60 49.38

FRACCIÓN B 300mg/kg 4 118 12 12 15 17 88.13

FRACCIÓN C 300mg/kg 4 173 40 18 12 10 88.44

FRACCIÓN D 300mg/kg 4 153 110 15 23 30 70.915

FRACCIÓN E 300mg/kg 4 165 120 20 12 120 58.79

Fuente: Datos obtenidos del trabajo experimental

%D.T.C.: Porcentaje de disminución del tiempo de coagulación

n: número de animales de experimentación por grupo

GRUPO DE RATONES n TIEMPO DE COAGULACIÓN 

BASAL En 10min  

HEPARINA 3 60 seg. >1800 seg.  

EXTRACTO ACUOSO + HEPARINA 3 150 seg. 245 seg.

EXTRACTO ETANÓLICO + HEPARINA 3 186 seg. 300 seg.

FRACCIÓN B + HEPARINA 3 120 seg. 238 seg.

FRACCIÓN C + HEPARINA 3 130 seg. 220 seg.

FRACCIÓN D + HEPARINA 3 180 seg. 240 seg.

FRACCIÓN E + HEPARINA 3 106 seg. 545 seg.

Tabla Nº 03: Efecto de la administración de los extractos y fracciones obtenidas a partir de Lepidium bipinnatifidum Desv. en ratones con tiempo de coagulación modificado por heparina.

n: número de animales de experimentación por grupo

Tabla Nº 04: Efecto de la aplicación de los extractos acuoso, etanólico y fracciones de Lepidium bipinnatifidum Desv. sobre el mesenterio del sapo en comparación con la vasoconstricción por adrenalina.

GRUPO RESPUESTA

ADRENALINA +++

EXTRACTO ACUOSO ++

EXTRACTO ETANÓLICO +

FRACCIÓN B +

FRACCIÓN C ++

FRACCIÓN D ++

FRACCIÓN E -

LEYENDA : (+++) = Vasoconstricción potente (+) = VC. Leve

(++) = VC. Moderada (-) = No presenta VC.

Tabla Nº 05: Comparación del efecto estimulante de oxitocina sobre el músculo liso uterino de cobayo, frente a los extractos y fracciones administrados.

GRUPO RESPUESTA (cm.) CONTRACCIÓN (%)

OXITOCINA 2 cm. 100 %

EXTRACTO ACUOSO

1,7 cm. 85 %

EXTRACTO ETANÓLICO

0.6 cm. 30 %

FRACCIÓN B 1.8 cm. 90 %

FRACCIÓN C 1.9 cm. 95 %

FRACCIÓN D 1.6 cm. 80 %

FRACCIÓN E 0.1 cm. 50 %

Con respecto al estudio fitoquímico de los extractos Lepidium bipinnatifidum Desv. presenta flavonoides, alcaloides, esteroides y/o triterpenos, esto concuerda con los datos reportados para otras especies del género lepidium. De los ensayos para evaluar el efecto antihemorrágico se observó que todos los extractos y fracciones presentan dicha actividad y al comparar los resultados con el fármaco antihemorrágico Etamsilato resultaron más efectivas las fracciones B y C con un %DTC de 88,13% y 88,44% respectivamente, superando al medicamento que obtuvo 57,8%.

DISCUSIÓN

Con respecto al mecanismo de acción se realizó un ensayo preliminar in situ en el mesenterio del sapo para evaluar el efecto vasoconstrictor, determinándose una moderada actividad. Además en el ensayo para evaluar la actividad oxitócica se observó un alto grado de efectividad para las fracciones B y C, atribuyendo los posibles efectos a los metabolitos aquí presentes.

Según estos ensayos el mecanismo de acción podría involucrar el efecto sobre la musculatura lisa y la intervención de los factores de coagulación.

CONCLUSIONES La marcha fitoquímica de la parte aérea de la especie

en estudio reportan la presencia de metabolitos secundarios tales como: flavonoides, aminoácidos, leucoantocianidinas (catequinas), alcaloides, triterpenos y/o esteroides.

Las fracciones B y C obtenidas del extracto etanólico de la parte aérea de Lepidium bipinnatifidum Desv. presentaron mayor actividad antihemorrágica y oxitócica, además el extracto acuoso demostró poseer un alto grado de actividad oxitócica.

El posible mecanismo de acción podría estar orientado hacia la contracción de la musculatura lisa del útero en la actividad oxitócica, y la vasoconstricción activando los factores de coagulación, para el efecto antihemorrágico

Los resultados hallados en los ensayos farmacológicos demuestran la actividad antihemorrágica y oxitócica Lepidium bipinnatifidum Desv. “tikre”

RECOMENDACIONES

Se recomienda aislar y elucidar los principios activos responsables de la actividad, así como realizar estudios de toxicidad.

“Cuando sueñes apunta siempre a la luna y aún si

fallas te encontrarás entre

las estrellas”

…Lou TiceMuchas gracias

Laguna de Huacachina-

Ica