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7/25/2019 Expo-Biologa.pptx

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UNIVERSIDAD TECNICA DE MANA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALESCUELA DE LABORATORIO CLINICO

CATEDRA DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULA

Docente: Dra. Mayra Parraa

N!"e# II $ara#e#o C $er!o% aca%. Oct. &'()* Fe+. &'(,


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TEMA:GENERACIN DE MOLCULAS DE ADNRECOMBINANTES.VESTORES PAR ADN RECOMBINANTE

GRUPO:N2

TRABA-O PRESENTADOPOR:o P!co P!noarote An!eo More!ra Ort! Va#er!oo S/nc0e Canto1 Me#anyo Or2aa Loor No0e#!ao Garc3a Mera -a23no Ro1a#e1 De2era L!11o C0/"e -ean Car#o1

BIOLOCELULA

MOLECU

PARALELOA


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PALABRAS CLAVES

Molcula Recombinante Vector Plsmidos Endonucleasas Fago Bacterifago


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GLOSARIO

Plsmidos: Son pequeas molculas circulares de !"# que puedenindependientemente$

Endonucleasas: %as endonucleasasson en'imas que catali'an la ruptura fosfodister en diferentes regiones ubicadas en el interior de una cadena polinEsto las diferencia de las e)onucleasas* que catali'an la escisin de enlaces foslos e)tremos de las cadenas$

Intrones.- +n intrn es una regin del !"# que debe ser eliminada de la tprimaria de !R#$

Splicing.- ,orte o empalme Bacterifagos$- son .irus que infectan e)clusi.amente a las bacterias$ Fago$- es un .irus bacterifago que infecta a la bacteria Esc/eric/ia coli$


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Los !"s#$%os &'(o#)$*+*,'s -' o&,+* $*s'&'%'* s'& $*,&o%($%os '* E. Co!$ 0 %o*%' &')+(,'&$+s +&+ %+& !+& + #$!!o*'s %' (o$+s %

's,os !"s#$%os '%' +$s!+&s' 0 o),'*$3*%os' %' #o!3(!+s &'(o#)$*+*,'s -' (o*,$'*'* *ADN /#+*o

GENERACI4N DEMOL5CULAS DE ADN

RECOMBINANTE


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%os fragmentos de !"# que pueden ser

clonados no se limitan a aquellos queterminan en sitios de cortes de en'imas derestriccion$ Es posible aadir a lose)tremos de cualquier fragmento de !"#sea ligado a un .ector 0 aislado como unclon molecular$


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S!ntet!ar 6na co$!a %e ADNa $art!r %e# ARN

ADN co$!a o ADNco2$#e2entar!o

Lo1 ene1

e6car!ot!co1 e1t/n!nterr62$!%o1 $or1ec6enc!a1 noco%!7cante1 o

!ntrone1.

S$#!c!n


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CLONACI4N DEADN

COMPLEMENTAR

O


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VECTORES PARA ADN RECOMBINANTE

%os plsmidos

1eneralmente se usan

Para clonar insertos de !"#c de un tamareducido* con pocas 2b

E)iste un sitio de origen* la cual sir.e pa

seali'ar al !"# polimerasa 0 marque el de clonacin dentro de la clula /ospeda

Estos .ectores portan un sitio de resisteun e3emplo es poner unantibitico4 ampicilina5 para crear una

resistencia en una bacteria


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E3emplo$- vectores pl

una pequecontiene un un gen queampicilina4!

restriccin4Epara insertapasa3ero4!".ector 0 los son usados %as bacteriaque contien;nicamente bacterias quson resisten

colonia de plsmido pu/acerse crecpara aisrecombinant


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+n grupo de fragmentos de !"# son ligados

plsmido de !"# pre.iamente dirigido med

una endonucleasa de restriccin$ %as molcu

!"# recombinantes resultantes se empleacontinuacin para transformar E$ coli$


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%as colonias resistentes a antibiticos* que contiene el !"# plasmidico*

son seleccionadas$ Puesto que cada plsmido recombinante da lugar q

una sola colonia resistente a antibiticos* las bacterias presentes en unacualquiera de estas colonias contendrn su ;nico inserto de !"#c$

%as bacterias que contengan el plsmido de inters pueden

grandes cantidades 0 e)tr


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%>S VE,?>RES "E BE?ER9>F!1> ?!MB9E#S># EMP%E!"> P!R! E% !9S%!M9E#?>?!#?> "E !"# 1E#>M9,> ,>M> %>S

,%>#ES "E !"#c ! P!R?9R "E ,E%+%!SE+,!R9>?!S* ES?!S M>%E,+%!SRE,>MB9#!#?ES P+E"E# SER9#?R>"+,9"!S E# E$ ,>%9* ">#"E SEREP%9,! @ 1E#ER!# M9%%>#ES "E F!1>PR>1E#9E A+E ,>#?9E#E +# S>%>9#SER?> "E !"#$


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En determinados estudios de anlisis de !"# genmico es preciso clonar fragme!"# ma0ores de lo que un fago puede portar$ E)isten < tipos principales de .

empleados con este fin:


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