Estudio retrospectivo de portadores HBsAg en el Banco de Sangre de Navarra A. Medarde* /J. del Hierro* /E. Aramburu* /P. Esquíroz* /J. L. Martínez*

RESUMEN

Se trata de un trabajo de revisión, sobre serología de hepatitis B, efectuado a partir de Jos datos obtenidos durante 16 años en el Banco de Sangre de Navarra.

La prevalencia de portadores HBsAg es del 0,87 %, resultante de las 204 positividades encontradas entre los 23.409 donantes de sangre.

Las técnicas utilizadas a lo largo del tiempo, para la identificación del HBsAg, fueron AGD (7 pos.; 3,4 % ), CIEF (4 pos.; 1,9 %), HARP (78 pos.; 38,2 % ), EIA (93 pos.; 45,5 % ) y RIA (22 pos.; 10,7 % ).

La frecuencia media de donaciones realízadas por los portadores HBsAg, hasta el momento de encontrar la positívidad, experimenta una caída desde 7/8 unidades de sangre, a 4/5 y posteriormente a 1, debido a la introducción del "despistaje" para HBsAg y la utilización de técnicas cada vez más sensibles.

De los 204 portadores, se han realizado estudios de anti-HBs, anti-HBc, HBeAg y anti-HBe, en 120 de ellos, encontrándose un patrón serológico de baja infectividad en 92 ¡76,6 % ), de alta infectividad en 4 3,3 % ), de difícil interpretación en 8 6,6 % ) y de seroconversión en 16 13,3 %).

Colaborando en un estudio sobre control de calidad para técnicas de HBsAg, se establece para nuestro Banco· de Sangre una sensibilidad comprendida entre 0,5 y O, 1 ng/ml y una especificidad correcta.

* Banco de Sangre. Navarra.

29

Datos globales referentes al HBsAg

El número total de personas que acudieron a este Banco de Sangre, con intención de quedar inscritas como donantes, asciende a 28.918 hasta diciembre de 1987.

A comienzos del año 1972, fecha en la que se establece la determina­ción sistemática del HBsAg, el núme­ro total de donantes registrados era de 10.113, estando en activo solamen­te 6.502. Por tanto a los 3.611 restan­tes no se les determinó en ninguna ocasión el HBsAg. Queda así reduci­do el número inicial a 25.307.

Debido a los criterios de selección que seguimos de acuerdo a la norma­tiva vigente, el 7,5 % quedaron exclui­dos por diferentes motivos, entre los que podemos señalar, alergia medica­mentosa, insuficiente peso corporal, lipotimia en la extracción previa, de­ficientes venas, tensión arterial inade­cuada, diferentes tipos de anemia, he­patitis viral, paludismo, serología po­sitiva de sífilis, serología anti-HIV po­sitiva, antecedentes y/o toma de me­dicación antiepiléptica, patología car­diopulmonar, antecedentes de droga­dicción, etc. También son causas de exclusión los portadores HBsAg, pero debido a ser el motivo del presente trabajo, no son encuadrados en este 7,5 % al que nos referimos. Todas es­tas causas, suponen una reducción de 1.898 donantes, quedando el número a considerar cifrado en 23.409.

De este modo, el número global del que podemos partir para el cálcu­lo de la prevalencia de portadores HBsAg, es de 23.409 donantes, con 204 positividades, datos de los que ob­tenemos una prevalencia de 0,87 %.

Estos 204 portadores fueron detec­tados a lo largo de los últimos 16 años, durante los cuales se han realizado diferentes métodos de determinación del HBsAg en este Banco de Sangre.

La técnica de inmunodifusión ra­dial según Ouchterlony, también lla­mada agar gel difusión (AGD), que vino a definir las llamadas técnicas de primera generación, cuya especifici­dad es máxima debido al posible esta­blecimiento de líneas de identidad in­munológica, alcanzaba sólo una sensi­bilidad de 10 µg/ml, y durante su uti­lización en nuestro laboratorio se en­contraron las 7 primeras positividades HBsAg.

Dentro de las varias técnicas de segunda generación, que llegaron a conseguir una sensibilidad del orden .de 2,5 µg/ml, nosotros utilizamos sólo la electroinmunodifusión, también llamada contrainmunoelectroforesis (CIEF), durante un breve período de tiempo, en el que aparecieron otras 4 positividades.

Las técnicas de tercera generación alcanzan una sensibilidad de 1 µg/ml por hemaglutinación reversa pasiva (HARP); 0,5 µg/ml por enzimoinmu­noanálisis (EIA); y 0,1 µg/ml por ra­dioinmunoanálisis (RIA). Hemos uti­lizado las tres a lo largo del tiempo, y últimamente sólo empleamos EIA de

REVISTA DE MEDICINA DE LA UNIVERSIDAD DE NAVARRA - VOL XXXII - N.º 4 - OCTUBRE-DICIEMBRE 1988 209

modo sistemático y RIA como confir­mación de las positividades. Por HARP, fueron diagnosticados 78 por­tadores; por EIA 93; y por RIA 22 (Tabla I y Fig. 1).

Esta última cifra de 22 portadores identificados por RIA, no guarda re­lación con la más alta sensibilidad de esta técnica, pero ello es debido a que solamente en algún corto período de tiempo (año 1975) los donantes fue­ron estudiados por RIA y actualmen­te sólo es utilizada para confirmación de resultados positivos obtenidos por EIA.

La prevalencia de portadores HBsAg en este Banco de Sangre en el año 1972, por técnica de AGD so­bre un estudio de 6.502 donantes, fue del 0,11 % 1

• La utilización progresiva de técnicas más sensibles, CIEF, HARP, EIA, RIA, hasta el momento actual, año 1987 ha incrementado esta prevalencia hasta el 0,87 % sobre un total de 23.409 donantes voluntarios de sangre.

Estas cifras se corresponden con las obtenidas por otros Bancos de Sangre de nuestro entorno, con una prevalen­cia del 0,25 % sobre 4.000 donantes por técnica de AGD 2 y del 0,97 % sobre 5.866 donantes por técnica de RIA 3 • Otro trabajo posterior, señala una prevalencia que osciló entre el 0,82 % y el 1,14 %, según se tratase de una muestra de donantes habitua­les o de personas que acudieron por vez primera el Banco de Sangre '.

Es indudable que la prevalencia de portadores HBsAg, entre los donan­tes de sangre, referida a un mismo

Tabla l. PORTADORES DE HBsAg

Acuden al Banco de Sangre Inactivos antes

de 1972 -3.611 Criterios de

selección -1.898

Número total de donantes Posítividades HBsAg

Prevalencia HBsAg

Portadores HBsAg (técnica para diagnóstico):

1 Agar gel difusión (AGD) j Contrainmunoelectroforesis

(CIEF) Hemaglutinación reversa

pasiva (HARP) Enzímoinmunoanálisis (EIA) Radioinmunoanálisis (RIA)

Total po1tadores

28.918

25.307

23.409 l

23.409 204

0,87%

7

4

78 93 22

204

78 Hemagl. rev. pas.

Contra inm. elect. 4

Agar gel difs. 7

Fig. 1.-Portadores de HBsAg (técnica para diagnóstico).

país, ha aumentado a lo largo de es­tos últimos años, dependiendo sobre todo de la utilización de técnicas cada vez más sensibles 5

- l2.

Esta detección cada vez más amplia de los portadores HBsAg, con exclu­sión de los mismos como donantes de sangre, tiene que verse reflejada en una menor incidencia de hepatitis postransfusionales tipo B, debido a la ruptura de la cadena epidemiológica que podría suponer el paso de VHB, partiendo del reservorio mundial cal­culado en 200 millones de portadores, al resto de la población no infectada, por uno de los mecanismos de trans-

, misión del virus tan importante como ' es la vía transfusional 1 3

•

En los primeros años de estudio sistemático del Ag. Australia en los Bancos de Sangre, no hubo una re­ducción significativa en la incidencia de HPT como señalan Reinicke y cols. y Arndt-Hanser y cols., siendo las téc­nicas de detección la CIE y AGD 1

'·15

•

De los estudios prospectivos lleva­dos a cabo por Alter y cols. se dedu­ce que la HPT tipo B, ha sufrido una reducción cifrada en un 83 % global y la caída progresiva del índice de prevalencia dependía del tipo de téc­nica que se utilizó para la exclusión de los portadores HBsAg. Este índi­ce pasó a ser de un 4,8 % usando técnicas de AGD, a un 3,7 % por CIEF, hasta un 0,8 % desde la utili­zación de RIA 1

' -1'.

En nuestro país, la incidencia de HPT en un estudio prospectivo reali­zado por Hernández y cols., fue del 17,4 % con signos clínicos y/o biológi­cos de hepatitis. Solamente 10 pacien­tes del total de HPT fueron de tipo B, lo que representa una incidencia del 2,3 %. Las técnicas utilizadas para la determinación del HBsAg fueron HARP y RIA 2º.

Queremos recoger una referencia de Blumberg en la que señala que una de las más importantes aplicacio­nes de la prueba para Ag. Australia es la prevención de la hepatitis pos­transfusional, excluyendo a los donan­tes y a las unidades de sangre con positividad a dicho antígeno 2 1

•

Frecuencia de donaciones hasta la positividad HBsAg. Técnicas utilizadas

Grupo 1 (Fig. 2)

De entre los 204 portadores cono­cidos, 60 (29 ,4 % ) pertenecen a un grupo de personas que fueron dadas de alta como donantes entre mayo de 1953 y enero de 1972, y por tanto no se realizó la determinación del HBsAg en el momento del estudio­previo a la incorporación al Banco de Sangre como donantes.

1-A. Este grupo realizó un total de 460 donaciones hasta enero de 1972

21 Ü REVISTA DE MEDICINA DE LA UNIVERSIDAD DE NAVARRA - VOL. XXXII - N.' 4 OCTUBRE·DICIEMBRE 1988 30

AGD

Fig. 2.

D AGD o CIE

Fig. 3.

1 A

Mayo 53

Enero 72

460 donaciones

frecuencia media

7/8

(1 -53)

43

HARP o RIA

14

HARP o RIA

GRUPO 1: 60 donantes

1-B

Enero 72 Hasta detección

439 donaciones

frecuencia media

7/8

(1 - 38)

~Hepatitis B aguda (2)

D Reincorporación (3)

~Antigenemia nueva (7)

EIA

GRUPO 2: 24 donantes

Enero 72 Diciembre 74

110 donaciones

frecuencia media

4/5

(0-24)

-------------- Hepatitis B aguda (2)

[J-----_Antigenemia nueva (2)

EIA

con una frecuencia media de 7/8 uni­dades de sangre por donante, con un máximo de 53 y un mínimo de l. Di­chas donaciones potencial o teórica­mente infectivas por VHB, bien sien­do ya positiva la persona durante todo

este período o bien habiendo adquiri­do tal condición en algún momento del mismo, fueron admitidas por no estar introducida en Bancos de San­gre la técnica para determinación del HBsAg.

1-B. Este mismo grupo realizó un total de 439 donaciones desde enero de 1972 hasta la detección de la posi­tividad HBsAg, con una frecuencia media de 7 /8 unidades de sangre por donante, con un máximo de 38 y un mínimo de 1. Dichas donaciones, tam­bién potencialmente infectivas fueron posibles porque las técnicas utilizadas desde 1972 hasta 1974, agar gel difu­sión (AGD) y contra-inmunoelectro­foresis (CIEF), son de baja sensibili­dad y sólo fueron capaces de detectar 5 positividades de este grupo de 60; otras 43 positividades fueron detecta­das bien por hemaglutinación reversa pasiva (HARP) o bien porque duran­te 1975 se llevó a cabo un estudio del HBsAg por radio-inmunoanálisis (RIA) a todos los donantes de sangre; las otras 12 positividades fueron de­tectadas con posterioridad por enzi­moinmunoanálisis (EIA): dos de ellas coincidiendo con hepatitis B aguda, tres al reincorporarse a la donación tras haber estado de baja por despla­zamiento temporal, y siete por posible antigenemia nueva adquirida en fe­chas próximas a la última donación, puesto que fueron diagnosticadas en­tre 1979 y 1985, y con anterioridad los sueros correspondientes fueron analizados por técnicas de tercera ge­neración (HARP y/o EIAy/o RIA) a un promedio de 19 veces cada uno, siendo todos ellos negativos hasta la aparición de la positividad.

Grupo 2 (Fig. 3)

De entre los 204 portadores .cono­cidos, 24 (11,7 % ) acudieron al Ban­co de Sangre entre enero de 1972 y diciembre de 1974. En este período se realizó la determinación del HBsAg de modo habitual por técnica de AGD y/o CIE, en el estudio-previo a la incorporación como donantes y en cada una de las unidades de san­gre donadas.

El número de donaciones efectua­das por todos ellos, fue de 110 hasta el momento de encontrar la positivi­dad HBsAg, que en algunos casos fue en el estudio-previo y en otros se pro­longó en el tiempo hasta 1986, como es el caso del último de este grupo diagnosticado; la frecuencia media de unidades de sangre por donante corresponde a 4/5, con un máximo de 24 y un mínimo de O.

De este grupo de 24 portadores, por AGD y/o CIE, fueron detectadas 6 positividades; por HARP o en el estudio de 1975 por RIA, 14; las 4

31 REVISTA DE MEDICINA DE LA UNIVERSIDAD DE NAVARRA - VOL XXXII - N.' 4 - OCTUBRE-DICIEMBRE 1988 211

restantes lo fueron con posterioridad por técnica de EIA, correspondiendo dos a hepatitis B aguda y las otras dos a posibles antigenemias nuevas.

Grupo 3 (Fig. 4)

Por último, de los 204 portadores conocidos, 120 (58,8 % ) acudieron al Banco de Sangre entre enero de 1975 y diciembre de 1987. En todo este tiempo se realizó la determinación del HBsAg de modo sistemático en el es­tudio-previo y en todas las unidades de sangre, por técnica de HARP y/o RIA hasta 1980 y por EIA confirma­do por RIA hasta 1987.

De estos 120 portadores, 88 fueron excluidos en el estudio-previo, 13 lo fueron en la primera donación, y a los otros 19 se les dio de alta realizan­do todos ellos más de 1 donación.

Al menos en 5 de estos 19 portado­res que fueron dados de alta, pode­mos tener la presunción de que adqui­rieron el HBsAg y por tanto el VHB con proximidad a la última donación de sangre, puesto que coincidió con hepatitis B aguda, puesta en eviden­cia al cabo de unos días con pruebas bioquímicas de función hepática alte­radas. Los otros 14 portadores, pudie­ron estar en activo como donantes, por diferentes motivos, entre los que señalamos defecto de técnica, bajo nivel HBsAg, presencia de ínmuno­complejos HBsAg-antíHBs o antige­nemia nueva próxima a la última do­nación.

El total de unidades de sangre correspondientes a este grupo ascien­de a 118, lo que significa una frecuen­cia media de 1 unidad de sangre por donante, con un máximo de 15 y un mínimo de O.

Las técnicas utilizadas para el ha­llazgo de la positividad HBsAg, fue­ron, HARP y/o RIA en 43 casos, EIA en 77. Todos los sueros salvo alguna excepción, fueron confirmados por RIA

En la tabla II, sí observamos el gru­po 1 podemos apreciar que el núme­ro de donaciones efectuadas por los 60 donantes, antes de encontrar lapo­sítividad HBsAg, se eleva a 899. Gran parte de estas unidades de sangre, pu­dieron estar implicadas en la apari­ción de HPT tipo B, debido a que en este grupo no se realizó la determina­ción HBsAg o lo fue por técnicas de baja sensibilidad. ·

En el grupo 2 vemos que es impor­tante la caída del número de donacio-

nes, 110 efectuadas por 24 donantes, debido al establecimiento sistemático de técnicas para detección del HBsAg desde el momento del estudio-previo a la admisión como donantes.

En el grupo 3 la caída es aún más patente, 118 unidades de sangre rea­lizadas por 120 donantes, debido a la incorporación de técnicas de tercera generación.

Fig. 4.

53/9 7/1

15/10 4/6 3/16 1/1

9 4 1

1

1

2

3

LJ 77

HARP EIA o RIA

GRUPO 3: 120 donantes

Enero 75 Diciembre 87

118 donaciones frecuencia media

l (O- 15)

Hepatitis B aguda (5)

@ Defecto técnica

Bajo nivel AgHBs

AgHBs - antiHBs

Antigenemia nueva

(14)

Tabla 11. NUMERO DE DONACIONES HASTA LA POSITMDAD HBsAg

39/10 25/9 17/6 18/9 12/5 12/12 9/5 10/2 8/2 7/1 8/5 8/5 4/2 14/7 10/14 11/1 7/6 12/8 8/10 514 5/1 7/4 3/5 8/3 5/6 10/38 6/7 Grupo 1 7/5 6/16 314 417 9/10 617 7/7 517 4/8 3/4 2/1 117 3/7 4/4 6/11 4/2 3/3 115 1/4 217 2/19 1/4 1/7 115 1/17 1/7 1/24

6 3 s 5 1 2 1 20 3 3 2 2 14 2 Grupo 2 2 1 24

8 15 6 7 1

s 4 10 s 7 1 1

2 3 1 4 s 9 Grupo 3 2 1 1

2 1 1 s

En el grupo 1, cada conjunto de 2 cifras con barra (53/9), se refiere a un solo portador HBsAg. La l.' cifra corresponde a las donaciones efectuadas antes de 1972 y la 2.' cifra a las donaciones efectuadas con posterioridad a 1972 y hasta la positividad HBsAg. En los grupos 2 y 3, cada cifra corresponde a las d-onaciones efectuadas hasta la positividad HBsAg. Los signos (-) se refieren a portadores detectados en el estudio-previo y que por tanto no efectuaron ninguna donación.

212 REVISTA DE MEDICINA DE LA UNIVERSIDAD DE NAVARRA - VOL XXXII - N.° 4 - OCTUBRE-DICIEMBRE 1988 32

Frecuencia media de donaciones

8

6

4

2

o

1-A 1-B 2 3

Grupos de portadores

Fig. 5.-Cun•a significativa de la frecuencia media de donaciones correspondiente a los diferentes grupos de portadores HBsAg.

En la curva significativa (Fig. 5), vemos que la frecuencia media de do­naciones desciende desde 7 /8 en los grupos 1-A y 1-B, pasando por 4/5 en el grupo 2, hasta 1 donación por do­nante en el grupo 3. En este último grupo es importante señalar que de los 120 donantes, 88 fueron excluidos en el estudio-previo y por tanto no ' realizaron ninguna donación, siendo este uno de los objetivos a conseguir en un Banco de Sangre para evitar la aparición de HPT tipo B. También es obligatorio realizar la búsqueda siste­mática del HBsAg en todas las unida­des de sangre, con el fin de encontrar las posibles antigenemias adquiridas desde la última donación y los porta­dores de bajo nivel a medida que me­jora la sensibilidad de las técnicas em­pleadas.

Como queda reflejado en las figu­ras 2, 3 y 4, del total de los 204 por­tadores HBsAg, nueve lo fueron coin­cidiendo con una hepatitis B aguda, diagnosticada en dos casos en el mo­mento del estudio-previo a la incorpo­ración al Banco de Sangre y los otros siete lo fueron con motivo de una do­nación de sangre estando en activo previamente.

Marcadores de VHB. Patrones serológicos

De los 204 portadores HBsAg in­cluidos en nuestro registro, existen da­tos sobre marcadores séricos de VHB, para poder establecer los patrones se­rológicos correspondientes, en 120 ca­sos (Tabla III).

Tabla 111. MARCADORES DEL VHB. PATRONES SEROLOGICOS

Grupo HBsAg a111i-HBs anti-HBc HBeAg anti-HBe Portadores

1 + + + 92 2 + + + 4

3 + 8

4 + + + 16 TOTAL 120

Grupo 1

De estos 120 portadores HBsAg, 92 reflejan un perfil serológico defini­do por HBsAg ( + ), anti-HBs (-), an­ti-HBc .( + ), HBeAg (-) y anti-HBe ( + ), cuyo significado o interpretación corresponde a:

1) Portador sano de baja infectivi­dad resultante de infección aguda pa­sada subclínica (en nuestro estudio, 88 casos) o clínica ( 1 caso).

Queremos hacer notar que en este grupo, dos portadores presentan una antigenemia HBs cíclica ( + /-/ +) correspondiéndose con anti-HBs (-/ + /-), todo ello por RIA, cuya inter­pretación pudiera ser la presencia de inmunocomplejos HBsAg/anti-HBs con cadenas libres de uno de ellos en cada momento de su positividad.

2) Infección crónica. En los 3 ca­sos restantes, habiéndose encontrado unas pruebas de función hepática al­teradas (GOT, GPT, Bilirrubina) y persistiendo las mismas, los pacientes fueron remitidos a Centro Asistencial en el que se les realizó biopsia hepá­tica y estudio histológico con resulta­do de 2 hepatitis crónicas activas y 1 hepatitis crónica persistente.

Grupo 2

Otro perfil serológico posible, que está presente en 4 de nuestros porta­dores, viene definido por HBsAg ( + ), anti-HBs (-), anti-HBC ( + ), HBeAg ( +) y anti-HBe (-), cuya interpreta­ción es:

1) Hepatitis B aguda. En el mo­mento actual, no conocemos ningún portador ni donante que se encuentre en esta situación.

2) Portador de alta infectividad (3 casos).

3) Infección crónica (1 caso). Se trata de un portador con alteraciones biológicas de función hepática, sin po­sibilidad de encuadrar su cronicidad por falta de estudio histológico.

Grupo 3

Pertenecen a este apartado, 8 por­tadores, con el siguiente perfil, HBsAg ( + ), HBeAg (-), anti-HBe (-), sin tener datos sobre los demás mar­cadores, pudiendo interpretarse este resultado por la presencia de inmuno­complejos HBeAg/anti-HBe, sin ca­denas libres de HBeAg o anti-HBe, o un hipotético período de ventana, por lo que aparecen ambos como negati­vos.

33 REVISTA DE MEDICINA DE LA UNIVERSIDAD DE NAVARRA - VOL XXXII - N.° 4 - OCTUBRE-DICIEMBRE 1988 213

Grupo 4

El patrón serológico HBsAg (-), anti-HBs ( + ), anti-HBc ( + ), HBeAg (-)y anti-HBe ( + ), que corresponde a recuperación de la infección por VHB, con seroconversión y estado de inmunidad, también lo vamos a con­siderar puesto que de los 120 casos estudiados, 16 hicieron una serocon­versión, encontrándose actualmente en este perfil serológico, demostrado para todos los marcadores por RIA. El tiempo medio de establecimiento de la seroconversión para los 16 ca­sos, considerado desde la positividad HBsAg hasta la negatividad HBsAg fue de 4 años y 5 meses.

También en este grupo queremos hacer la salvedad de dos portadores que presentan un anti-HBe (-) pu­diendo corresponder este perfil, bien a una seroconversión remota con caí­da total del anti-HBe o a un hipotéti­co período de ventana en el sistema HBeAg/anti-HBe.

La determinación de los marcado­res séricos de infección por VHB en los portadores HBsAg, constituye el medio idóneo para la identificación del riesgo de alta o baja infectividad, de la posible afectación hepática, así como de la evolución serológica de dicho portador 24 -Jo.

El estado de portador se caracteri­za serológicamente por la persistencia del antígeno de superficie de la hepa­titis B y ausencia de moléculas libres del anticuerpo correspondiente. El anti-core está presente y a menudo con títulos altos pudiendo permanecer detectables las moléculas de clase IgM 22

•

De los 112 portadores HBsAg de nuestro estudio investigados para an­ti-HBs y anti-HBc, 96 presentan ac­tualmente estas características seroló­gicas; los otros 16 que tuvieron estas mismas características, presentan ac­tualmente el perfil serológico de sero­conversión, con HBsAg negativo y an­ti-HBs positivo, lo que implica estado de inmunidad.

En algunos portadores, la actividad DNA-polimerasa permanece elevada y el antígeno-e persiste en el suero, pudiendo relacionarse esta situación con replicación vírica, circulación de partículas virales completas y estado de alta infectividad. En otros portado­res, la actividad DNA-polimerasa no es detectable y aparece el anti-e, sien­do su significado una reducida o rela­tivamente baja infectividad. La pro­ducción de virus ha sido reconocida en algunos portadores en presencia de anti-e 2 2

•

Mientras el 100 % de los sujetos HBeAg positivos resultan altamente infectivos, sólo el 10-15 % de los su­jetos anti-HBe pueden serlo, debido a la presencia de cantidades discretas de DNA vírico y de virus completos ".

Entre los 120 portadores de nues­tro estudio investigados para HBeAg y anti-HBe, solamente 4 son antíge­no-e positivos con alta infectividad y 108 son anti-e positivos de baja infec­tividad.

Control de calidad de las técnicas para HBsAg

En octubre de 1985, recibimos del Grupo para el Estudio de la Inmuno­hematología y Hemoterapia (GEIN­HE), de la Asociación Española de Hematología y Hemoterapia, un pro­yecto de protocolo de control de cali­dad sobre las técnicas de detección del HBsAg, cuyo objetivo era la valo­ración de sensibilidad y especificidad de dichas técnicas, en los diferentes Bancos de Sangre, que voluntaria­mente quisieran participar en este proyecto. ·

Una vez confirmada nuestra volun­tad de colaborar, recibimos un panel

de 10 muestras de plasma, numeradas del 1 al 10, para realizar la determi­nación del HBsAg con las técnicas en uso en aquel momento en nuestro Banco de Sangre.

El resultado en nuestro laboratorio, por técnica EIA (Organón Téknika), queda reflejado en la tabla IV.

Estos resultados fueron confirma­dos por técnica de RIA (Sorin-Biomé­dica), para todas las muestras, excep­to la número 4 que resultó positiva débil con un número de cpm próximo a la línea de corte.

En el informe del protocolo envia­do por GEINHE, con los resu~ta~os del estudio (Tabla V), se nos md1ca que las 10 supuestas muestras de do­nantes de sangre, correspondían en realidad a plasmas preparados artifi­cialmente a partir de 2 donantes HBsAg positivos de concentración an­tigénica conocida. Las muestras nega­tivas correspondían a plasma de 3 do­nan tes conocidos negativos para HBsAg, anti-HBc y anti-HBs. U.n.a mezcla de dichos plasmas fue la ut1h­zada para realizar las diluciones en los controles positivos.

Analizando estos resultados pode­mos concluir que estamos trabajando a una sensibilidad de 0,5 ng/ml para

Tabla IV

Línea de corte: 0,110 (d.o.)

Muestran.° 1 : +2,000 Positiva (+) Muestra n.º 2 : 0,086 Negativa (-) Muestra n.º 3 : 1,586 Positiva (+) Muestra n." 4 : 0,095 Negativa (-) Muestra n.° 5 : 0,077 Negativa (-) Muestra n." 6 : +2,000 Positiva ( +) Muestra n." 7 : 0,449 Positiva (+) Muestra n." 8 : 0,278 Positiva (+) Muestra n.° 9 : 0,088 Negativa (-) Muestra n.° 10: +2,000 Positiva (+)

Tabla V

Resultados de referencia: Muestra n.º: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Concentración nglml HBsAg: 20 5 0,1 50 1 0,5 10 Presencia HBsAg: + + + + + + +

Resultados propios:

Método: EIA Presencia HBsAg: + + + + + +

(Sensib. 0,5 ng Especif.: correcta) Método: RIA Presencia HBsAg: + + + + + + +

(Sensib. 0,1 ng Especif.: correcta)

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EIA y de 0,1 ng/ml para RIA, con una especificidad correcta en ambas técnicas.

Tal como nos viene señalado en el informe de protocolo de GEINHE, para tener una idea de la significación de la concentración de HBsAg que pueda tener en el cribaje de donantes portadores, se considera que tan sólo alrededor del 9 % de los portadores sanos poseen una concentración infe­rior a 30 ng/ml y únicamente un 5 % inferior a 10 ng/ml.

Consideraciones finales

El índice de prevalencia de porta­dores HBsAg, aumenta en la pobla­ción de donantes de sangre a medida que se utilizan técnicas de detección más sensibles.

La exclusión de los portadores HBsAg de la donación de sangre, es uno de los factores que más puede contribuir a la desaparición de las HPT tipo B.

La frecuencia media de donaciones de sangre HBsAg positiva, ha confi­gurado una curva decreciente desde los años próximos al inicio de la bús­queda del antígeno Australia, hasta la utilización de técnicas de 3.' genera­ción de modo sistemático.

La incidencia de enfermedad hepá­tica entre los portadores HBsAg de­tectados en el Banco de Sangre, es escasa. La confirmación de la misma, indica la necesidad de asistencia mé­dica especializada.

En los portadores HBsAg asinto­máticos y con pruebas de función he­pática normales en el momento del diagnóstico, no parece estrictamente necesario un seguimiento médico pe­riódico.

Al menos una parte de las HPT tipo B, que siguen apareciendo actual­mente, podrían ser evitadas si toda la sangre obtenida para fines transfusio­nales fuera analizada con técnicas ca­paces de detectar aproximadamente 0,1-0,2 ng/ml de HBsAg.

La posibilidad de que un portador HBsAg negativo con o sin anticuerpos en circulación, pueda ser infectivo, es tan remota que no se aconseja en tér­minos de coste-beneficio la búsqueda de otros marcadores VHB.

El control de calidad sobre técnicas para HBsAg, a través de laboratorio de referencia o de estudio coordina­do entre Bancos de Sangre, nos pare­ce de utilidad para poder así compro­bar y en su caso corregir la sensibili­dad de las técnicas utilizadas.

35

El descubrimiento de marcadores para los posibles virus de las llamadas hepatitis noA noB, es indudable que puede contribuir a la desaparición de estas hepatitis postransfusionales.

Aparte de la detección sistemática en Bancos de Sangre del HBsAg, otras medidas han sido puestas en consideración y discusión para evitar las HPT como son, la selección de donantes, el cribaje analítico de la sangre para anti-HBc, títulos del mis­mo y anti-HBc tipo lgM, ALAT, tra­tamientos físico-químicos sobre el producto a transfundir, evitar las transfusiones innecesarias, utilizar el menor número posible de unidades de sangre en cada receptor, potenciar la autotransfusión y practicar la inmu­noprofilaxis activa en la población ge­neral. En este sentido la vacuna anti hepatitis B, puede de modo indirecto solucionar el problema de las hepati­tis postransfusionales tipo B.

Bibliografía

l. Medarde A, Aranaz L, Alfonso L, Ayesa C y Madoz P. Interés de la detección del antígeno Australia en donantes benévolos de sangre. Rev San Hig Pub 47: 529, 1973.

2. Castro R y Carmona M. Problemática ac­tual de las hepatitis virales en un banco de sangre. Jornadas de actualización en Medi­cina Nuclear sobre serología de las hepati­tis virales, Sevilla 1982, p. 87.

3. Herrera C y Hernández JL. Distribución epidemiológica de los diferentes marcadores de la hepatitis viral en la población nonnal y de alto riesgo de nuestro medio. Jornadas de actualización en Medicina Nuclear so­bre serología de las hepatitis virales, Sevi­lla 1982, p. 67.

4. Lissen E, Sánchez Quijano A, Rivera F, García de Pesquera F, Castro R, Castillón L, Arroyo F, Vázquez R, Carmona M, Lié­bana J, Lozano F, Pelaez S y Leal M. Pre­valencia de los marcadores serológicos de los vims A y B de la hepatitis en donantes voluntarios de sangre. Rev Esp Enf Ap Di­gest 65, supl. 1: 17, 1984.

5. García de Pesquera F y Latre JM. Técni­cas para la valoración de los marcadores de riesgo de la hepatitis viral. Jornadas de ac­tualización en Medicina Nuclear sobre se­rología de las hepatitis virales, Sevilla 1982, p. 53.

6. Zanetti AR, Bedarida G, Ferroni P, D'A­gostino F y Bianchi V. Status and signifi­cance of testing for hepatitis B swface anti­gen and swface antibody. Jour of Viro! Meth 2: 71, 1980.

7. Zorrilla JM, Medarde A, Martínez JL, Aranaz L y Esténoz JM. Detección del an­tíge110 superficial del vims de la hepatitis B y ulteriores estudios en donantes benévolos de Navarra. Rev Clin Esp 145: 2, 1977.

8. Hernández JM, Julia A, Pedreira JD, Es­teban R y Guardia J. Enzimoinmu11oanáli­sis (EIA) para la detecció11 del antígeno de la hepatitis B (HBsAg) en donantes de san­gre. Sangre 23: 39, 1978.

9. OMS. Progresos en el estudio de la hepatitis vírica. Serie de Informes Técnicos 602, 1977.

10. Crouzat-Reynes G, Perigois F y Lecureuil M. Détection de /'a11tigé11e HBs. Rev Frac Transfusion et Inmunohmématolog 25: 49, 1982.

11. Prince AM, Szmuness W, Brotman B e Ikram H. Recent Advances in our Urders­tanding of Hepatitis B Infections. Vox Sang 24, supl. 8, 1973.

12. Overby LR, Miller JP, Smith ID, Decker RH y Ling CM. Radioinmunoassay of He­patitis B Víms-Associated (Australia) Anti­gen Employing l Antibody. Vox Sang 24, supl. 102, 1973.

13. Medarde A, Del Hierro J, Panizo Ay Mar­tínez JL. Portador asintomático del VHB. En "Profilaxis de la hepatitis viral". Ana­les 19, supl. 49, 1984.

14. Reinicke V, Banke O y Dybkjaer E. Aus­tralia Antigen and Posttransfusion Hepatitis. Vox Sang 24, supl. 65, 1973.

15. Arndt-Hanser A y Pyka R. Blood Bank Sen•ice Screening of Australia Antigen and Antibodies at Mainz. Germany. Vox Sang 24, supl. 72, 1973.

16. Piqueras J y Hernández JM. Prevención de la hepatitis postransfusional. Reunión anual del GEINHE, Málaga 1986, p. l.

17. Alter HJ, Holland PV, Pureen RH, Lander JJ, Feinstone SM, Morrow AG y Schmidt PJ. Post-transfusion hepatitis after exc/usion of commercial and hepatitis B antigen posi­tive donors. Ano Inter Med 77: 691, 1972.

18. Alter HJ, Purcell RH, Holland PV y cols. Clinical and serological analysis of transfu­sio11 associated hepatitis. Lance! 11: 838, 1975.

19. Alter HJ, Pureen RH, Holland PV y cols. Transmissible agent in non-A, non-B hepa­titis. Lance! 1: 459, 1978.

20. Hernández JM, Piqueras J, Carrera A y Triginer J. Posttransfusio11 Hepatitis in Spain. A prospective study. Vox Sang 44: 231, 1983.

21. Blumberg BS. Australie Antigen and the Prevention of Posttra11sfusion Hepatitis. Vox Sang 48: 55, 1985.

22. Zuckerman AJ. Jntrodution to the virology of human hepatitis. Jour of Viro! Meth 2: 7, 1980.

23. Bonina F, Crivelli O y Rizzetto M. Hepa­titis vírica. Avances Recientes. Monografía Sorin Biomédica. 1984.

24. Hess G y Arnold W. The clinical relevance of the antibody to hepatitis B core antigen (Anti-HBc): A review. Jour of Viro! Meth 2: 107, 1980.

25. Katchaki JN, Siem TH, Brouwer R, Brand! KH y Van Der Waart M. Detection and significance of anti-HBc in the blood bank; preliminary results of a controlled prospecti­ve study. Jour of Viral Meth 2: 119, 1980.

26. Hoofnagle JH, Gerety RJ y Barker LF. Antibody to hepatitis B vims core in man. Lancet 2: 869, 1973.

27. Hoofnagle JH, Gerety RJ y Ni L. Antibody to hepatitis B core antigen: a sensitive indi­cator of hepatitis B vims replication. New Engl J Med 290: 1.336, 1974.

28. Hoofnagle JH. Serologic markers of hepati­tis B vims infection. Ano Rev Med 32: 1, 1981.

~EVISTA DE MEDICINA DE lA UNIVERSIDÁD DE NAVARRA - VOL. XXXII - N.' 4 - OCTUBRE·DICIEMBRE 1988 215

29. Magnius LD, Lindholm A, Lundin P e lwarson SA. A ne1v antigen-antibody system: c/inical significa11ce in long-ten11 can-iers of hepatitis B swface antigen. JAMA 231: 356, 1975.

30. Del Castillo S, Narbona M, De la Torre S y García Bredenberg R. Marcadores de he­patitis B. Reunión Anual del GEINHE, Málaga 1986.

31. Zamora C, Bárcena R y Pérez de Oteiza J. Hepatitis NANB y otras viriasis. Reunión Anual del GEINHE, Málaga 1986.

32. Reed JS y Boyer JL. Hepatitis vírica: mani­festaciones epidemiológicas, serológicas y clí­nicas. Disease-a-Month (edición españo­la) , vol. 2, núm. 1, 1981.

33. Coutinho RA. Hepatitis B vaccination. Jour of Viro! Meth 10: 327, 1985.

34. Deinhardt F y Gust ID. L 'hepatite viral. Bulletin de l'organization mondiale de la Santé 61 (2): 199, 1983.

35. Howdle PD, Wood GM, Ramskill SGA y Losowsky MS. Chro11ic Hepatitis B Carriers Found at Blood Donatio11: Do They Need Regular Follow-Up? Vox Sang 52: 200, 1987.

36. Launois JP, Lebonchanrd P y Cachin M. A11tigene Australia el Hepalite Chro11ique chez les donneurs de sang. Sem Hóp Paris 52 (11): 669, 1976.

37. Lissen E, Sánchez-Quijano A, Rivera F, García de Pesquera F, Castro R, Catillón L, Arroyo F, Vázquez R, Carmona M, Lié­bana J, Lozano F, Pelaez S y Leal M. In­cidencia y aspecto etiológico de la hepatitis postransfi1sional tras cimgía cardiaca con

circulación extracorpórea. Rev Esp Enf An Digest 65, supl. 1: 23, 1984.

38. Richard D. The usefii/11ex>: ofrnrrogale mar­kers a11ti-HBc a11d ALT for post-1ra11sfusio11 non-A, 11on-B hepalilis prevemio11. Jour of Virol Meth 17: 105 , 1987.

39. Nath N, Pielech M y Dodd RY. Hepatitis­Associa1ed Markers in lhe A 111elica11 Red Cross Blood Donor Populalion. Vox Sang 44: 312, 1983.

40. Vyas GN, Perkins HA y Schmid R (eds.) . Hepatilis and Blood Tra11sf11sion. Grune and Stratton, Nueva York 1972.

41. Greenwalt TJ y Jamieson GA (eds.). Transmisible Disease and Blood Transfu ­sion. Grune and Stratton, Nueva York 1975.

STUDY RETROSPECTIVE OF HBsAg CARRIERS IN THE BLOOD BANK OF NAVARRA

Summary

The following is a review of the data of hepatitis-B serology study obtained during the last sixteen years in the Blood Bank of Navarra.

The prevalence of HBsAg carriers is 0,87 % (204 positive cases in 23.409 blood donors studied). The methods used during this period have been: AGD (7 positive donors, i.e. 3,4 %), CIEP (4 positive donors, i.e. 1,9 %), HARP

(78 positive donors, i.e. 38,2 % ), EIA (93 positive donors, i.e. 45,5 % ) and RIA (22 positive donors, i.e. 10,7 % ). The number of previous donations befare the detection of HBsAg dropped from 7/8 in the first group of donors to 4/5 in the

second and to 1 in the third group. A deeper study has been carried out in 120 of those blood donors, including the detection of anti-HBs, anti-HBc, HBeAg and

anti-HBe. A low-infectivity pattern has been found in 92 (76,6 % ), high infectivity in 4 (3,3 % ) and seroconversion in 16 ( 13,3 % ). It hasn't been possible to interpret the pattern of the remaining 8 (6,6 % ).

Both the sensitivity and the specificity of our actual screening method have been found adequate in a cooperative study carried out in a group of Blood Banks in Spain in 1985.

Introducción ala Medicina Preventiva y Salud Pública J6séJavlerVlnes

PROXIMA APARICION

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