enzimas(1)
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Enzimas
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• Catalizadores biológicos. Proteínas de forma globular
• Específicas para un substrato particular (Estereo especificidad)
Enzimas
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COO-
C-H
H-C
COO-
COO-
H3+N-C-H
C-H2
COO-
COO-
C-H
C-H
COO-
+ N H3+
Fumarato (= ,trans)
AspartasaAspartasa
L-Aspartato D-Aspartato
Maleato (= ,cis)
COO-
H-C- NH3+
C-H2
COO-
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• Catalizadores biológicos. Proteínas de forma globular
• Específicas para un substrato particular (Estereo especificidad)
• Aceleran reacciones específicas químicas(103-10 20)
• Actúan en disolución acuosa, a pH y temp. óptimos
Enzimas
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Pepsina 1.5
Tripsina 7.7
Catalasa 7.6
Arginasa 9.7
Fumarasa 7.8
Ribonucleasa 7.8
Enzima pH óptimo
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Mamíferos 37
Bacterias y algas aprox. 100
Bacterias Árticas aprox. 0
Enzima Temp. Ópt. (oC)
Bacterias en muestra de hielo antigua
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• Catalizadores biológicos. Proteínas de forma globular
• Específicas para un substrato particular (Estéreo especificidad)
• Aceleran reacciones específicas químicas(103-10 20)
• Actúan en disolución acuosa, a pH y temp. Óptimos
• Son las unidades funcionales del metabolismo celular
Enzimas
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• Catalizadores biológicos. Proteínas de forma globular
• Específicas para un substrato particular (Estéreo especificidad)
• Aceleran reacciones específicas químicas(103-10 20)
• Actúan en disolución acuosa, a pH y temp. Óptimos
• Son las unidades funcionales del metabolismo celular
• Reacciones acopladas (catabolismo – anabolismo)
Enzimas
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• Catalizadores biológicos. Proteínas de forma globular
• Específicas para un substrato particular (Estéreo especificidad)
• Aceleran reacciones específicas químicas(103-10 20)
• Actúan en disolución acuosa, a pH y temp. Óptimos
• Son las unidades funcionales del metabolismo celular
Reacciones acopladas (catabolismo – anabolismo)
• Reguladoras de rutas metabólicas (Oligoméricas)
Enzimas
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Enzima (gr). : fermento
Vitalistas
Mecanicistas
1926, James B. Summer Ureasa
1930´s PepsinaTripsinaQuimotripsinaCarboxipeptidasaEnzima Amarillo viejo (flavoproteína NADPH)
1800´s fermentación del azúcar por levaduras
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Transformación de Alimentos
Fermentaciones Quesos Vinos
Medicina Transaminasas
Industria Química Penicilina
Agricultura Rhyzobium
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Estructura globular
Hervir con HCl
Tripsina
Temperatura elevada
pH extremo
Funcionalidad Inactiva
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E: PM 100000, 7 nm Ø
S: PM 250, 0.8 nm Ø
Cofactor
Orgánico: Coenzimas NAD, FAD, CoASH.
Orgánico: Coenzimas NAD, FAD, CoASH.
Inorgánico: Fe2+, Mn2+, Zn2+,etc.
Grupo ProstéticoGrupo Prostético
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Apoenzima Holoenzima
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Enzimas que requieren elementos inorgánicosCitocromo oxidasa
Catalasa, peroxidasa
Fe2+, Fe+,
Citocromo oxidasa Cu2+
DNA polimerasa
Anhídrasa carbónica
Alcohol deshidrogensa
Zn2+
Hexoquinasa
Glucosa 6-fosfatasa
Mg2+
Arginasa Mn2+
Piruvato quinasa K+, Mg2+
Ureasa Ni2+
Nitrato reductasa Mo2+
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Coenzimas: Actúan como transportadores eventuales de átomos específicos o de grupos funcionales
Coenzimas Entidad transferida
Pirofosfato de tiamina .
Dinucleótido de flavina y adenina.
Dinucleótido de nicotinamida y de adenina
Coenzima A .
Fosfato de Piridoxal .
5’-Desoxicobalamina (Coenzima B12)
Biocitina .
Tetrahidrofolato .
Aldehídos
Átomos de hidrógeno
Ion hidruro (H-)
Grupos acilo
Grupos amino
Átomos de H y grupos alquilo
CO2
Otros grupos monocarbonados
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Adenosine Triphosphate (ATP)
Coenzyme A (CoA)
Flavin Adenine Dinucleotide (FAD)
Nicotinamide Adenine Dinucleotide (NAD+) Nicotinamide Adenine Dinucleotide
Phosphate (NADP+)
Coenzimas
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VITAMINAS FUNCIONESEnfermedades
carenciales
•C (ácido ascórbico)
•Coenzima de algunas peptidasas. Interviene en la síntesis de colágeno
•Escorbuto
•B1 (tiamina)•Coenzima de las descarboxilasas y de las enzima que transfieren grupos aldehídos
•Beriberi
•B2 (riboflavina)
•Constituyente de los coenzimas FAD y FMN
•Dermatitis y lesiones en las mucosas
•B3 (ácido pantoténico)
•Constituyente de la CoA•Fatiga y trastornos del
sueño
•B5 (niacina)•Constituyente de las coenzimas NAD y NADP
•Pelagra
•B6 (piridoxina)
•Interviene en las reacciones de transferencia de grupos aminos.
•Depresión, anemia
•B12 (cobalamina)
•Coenzima en la transferencia de grupos metilo.
•Anemia perniciosa
•Biotina•Coenzima de las enzimas que transfieren grupos carboxilo, en metabolismo de aminoácidos.
•Fatiga, dermatitis
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Urea
Arginina
Ureasa
Arginasa
Lis, Arg
Pepsina
Tripsina
Amilasa
EnzimaSubstrato
rec A
Proteína de choque térmico
Rec A
HSP70
gen
Caract.
Comité de la Unión Internacional de Bioq. y Biol. Mol. (IUBMB)
http://www.enzyme-database.org/ http://us.expasy.org/enzyme/
http://www.chem.qmul.ac.uk/iubmb/enzyme/
![Page 23: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/23.jpg)
EC 1.1.1.2
Accepted name:
alcohol dehydrogenase (NADP+)
Reaction: an alcohol + NADP+ = an aldehyde + NADPH + H+
Other name(s):
aldehyde reductase (NADPH2); NADP-alcohol dehydrogenase; NADP+-
aldehyde reductase; NADP+-dependent aldehyde reductase; NADPH-aldehyde reductase; NADPH-dependent aldehyde reductase; nonspecific succinic semialdehyde reductase; ALR 1; low-Km aldehyde reductase;
high-Km aldehyde reductase; alcohol dehydrogenase (NADP+)
Systematic name: alcohol:NADP+ oxidoreductase
Comments: A zinc protein. Some members of this group oxidize only primary alcohols; others act also on secondary alcohols. May be identical with EC 1.1.1.19 (L-glucuronate reductase), EC 1.1.1.33 [mevaldate reductase (NADPH)] and EC 1.1.1.55 [lactaldehyde reductase (NADPH)]. A-specific with respect to NADPH.
Links to other databases:
BRENDA, ERGO, EXPASY, IUBMB, KEGG, PDB, CAS registry number: 9028-12-0
![Page 24: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/24.jpg)
1. Oxidorreductasas
2. Transferasas
3. Hidrolasas
4. Liasas
5. Isomerasas
6. Ligasas
Clases de Enzimas:
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EC 1.1 Acting on the CH-OH group of donors
EC 1.1.1 With NAD+ or NADP+ as acceptor EC 1.1.1.1 alcohol dehydrogenaseEC 1.1.1.2 alcohol dehydrogenase (NADP+)EC 1.1.1.3 homoserine dehydrogenaseEC 1.1.1.4 (R,R)-butanediol dehydrogenaseEC 1.1.1.5 acetoin dehydrogenaseEC 1.1.1.6 glycerol dehydrogenase
EC 1.1.2 With a cytochrome as acceptor EC 1.1.2.1 now EC 1.1.99.5EC 1.1.2.2 mannitol dehydrogenase (cytochrome)
EC 1.1.3 With oxygen as acceptor EC 1.1.3.1 deleted, included in EC 1.1.3.15EC 1.1.3.2 now EC 1.13.12.4EC 1.1.3.3 malate oxidaseEC 1.1.3.4 glucose oxidase
EC 1.1.4 With a disulfide as acceptor EC 1.1.4.1 vitamin-K-epoxide reductase (warfarin-sensitive)
EC 1.1.5 With a quinone or similar compound as acceptor EC 1.1.5.1 Deleted, see EC 1.1.99.18 cellobiose dehydrogenase (acceptor)
EC 1.1.99 With other acceptors EC 1.1.99.1 choline dehydrogenaseEC 1.1.99.2 2-hydroxyglutarate dehydrogenase
![Page 26: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/26.jpg)
EC 1.2 Acting on the aldehyde or oxo group of donors
EC 1.2.1 With NAD+ or NADP+ as acceptor EC 1.2.1.1 deleted, replaced by EC 1.1.1.284 and EC 4.4.1.22EC 1.2.1.2 formate dehydrogenase
EC 1.2.2 With a cytochrome as acceptor EC 1.2.2.1 formate dehydrogenase (cytochrome)EC 1.2.2.2 pyruvate dehydrogenase (cytochrome)
EC 1.2.3 With oxygen as acceptor EC 1.2.3.1 aldehyde oxidase
EC 1.3 Acting on the CH-CH group of donors
EC 1.3.1 With NAD+ or NADP+ as acceptor EC 1.3.1.1 dihydrouracil dehydrogenase (NAD+)
EC 1.3.2 With a cytochrome as acceptor EC 1.3.2.1 now EC 1.3.99.2EC 1.3.2.2 now EC 1.3.99.3
EC 1.3.3 With oxygen as acceptor EC 1.3.3.1 dihydroorotate oxidaseEC 1.3.3.2 now EC 1.14.21.6
![Page 27: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/27.jpg)
1. Oxidorreductasas
2. Transferasas
3. Hidrolasas
4. Liasas
5. Isomerasas
6. Ligasas
Clases de Enzimas:
![Page 28: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/28.jpg)
Enzimas:
No. Clase Tipo de reacción que catalizan
Ejemplo
1 Oxidorreductasas De óxido reducción (transferencia de e-)
Deshidrogenasas
Peroxidasa Oxidasas
Oxigenasas
Reductasas
Reducción: ganancia de electrones (hidrógeno o pérdida de oxígeno)
Oxidación: pérdida de electrones (hidrógeno o ganancia de oxígeno).
La Oxidación y la Reducción son reacciones acopladas (REDOX)
![Page 29: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/29.jpg)
Si una molécula se reduce, tiene que haber otra que se oxide
1. Oxido-reductasas( Reacciones de oxido-reducción).
![Page 30: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/30.jpg)
Enzimas:
No. Clase Tipo de reacción que catalizan
Ejemplo
1 Oxidorreductasas De óxido reducción (transferencia de e-)
Deshidrogenasas
Peroxidasa Oxidasas
Oxigenasas
Reductasas
2 Transferasas Transferencia de grupos Kinasas
Transaminasas
![Page 31: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/31.jpg)
2. Transferasas(Transferencia de grupos funcionales)
•grupos aldehídos
•gupos acilos
•grupos glucosilos
•grupos fosfatos (kinasas)
Succinato Deshidrogenasa
Citocromo c oxidasa.
![Page 32: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/32.jpg)
No. Clase Tipo de reacción que catalizan
Ejemplo
1 Oxidorreductasas De óxido reducción (transferencia de e-)
Deshidrogenasas
Peroxidasa Oxidasas
Oxigenasas
Reductasas
2 Transferasas Transferencia de grupos Kinasas
Transaminasas
3 Hidrolasas
Hidrólisis, con transferencia de grupos funcionales del agua
Pirofosfatasa
Tripsina
Aldolasa
Enzimas:
![Page 33: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/33.jpg)
Transforman polímeros en monómeros.Actúan sobre:
3. Hidrolasas(Reacciones de hidrólisis)
•enlace éster •enlace glucosídico •enlace peptídico •enlace C-N
![Page 34: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/34.jpg)
No. Clase Tipo de reacción que catalizan
Ejemplo
1 Oxidorreductasas De óxido reducción (transferencia de e-)
Deshidrogenasas
Peroxidasa Oxidasas
Oxigenasas
Reductasas
2 Transferasas Transferencia de grupos Kinasas
Transaminasas
3 Hidrolasas Hidrólisis, con transferencia de grupos funcionales del agua
Pirofosfatasa
Tripsina
Aldolasa
4 Liasas Lisis de un substrato, generando un doble enlace, o
Adición de un substrato a un doble enlace de un 2o. substrato
(Sintasas)
Descarboxilasa pirúvica
Enzimas:
![Page 35: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/35.jpg)
4. Liasas(Adición a los dobles enlaces)
•Entre C y C
•Entre C y O
•Entre C y N
![Page 36: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/36.jpg)
No. Clase Tipo de reacción que catalizan
Ejemplo
1 Oxidorreductasas De óxido reducción (transferencia de e-)
Deshidrogenasas
Peroxidasa Oxidasas
Oxigenasas
Reductasas
2 Transferasas Transferencia de grupos Kinasas
Transaminasas
3 Hidrolasas Hidrólisis, con transferencia de grupos funcionales del agua
Pirofosfatasa
Tripsina
Aldolasa
4 Liasas Lisis de un substrato, generando un doble enlace, o
Adición de un substrato a un doble enlace de un 2o. substrato
(Sintasa)
(Sintasas)
Descarboxilasa pirúvica
5 Isomerasas Transferencia de grupos en el interior de las moléculas para dar formas isómeras
Mutasas
Epimerasas
Racemasas
Enzimas:
![Page 37: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/37.jpg)
5. Isomerasas(Reacciones de isomerización)
![Page 38: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/38.jpg)
No. Clase Tipo de reacción que catalizan
Ejemplo
1 Oxidorreductasas De óxido reducción (transferencia de e-)
DeshidrogenasasPeroxidasa OxidasasOxigenasasReductasas
2 Transferasas Transferencia de grupos KinasasTransaminasas
3 Hidrolasas Hidrólisis, con transferencia de grupos funcionales del agua
PirofosfatasaTripsinaAldolasa
4 Liasas Lisis de un substrato, generando un doble enlace, o Adición de un substrato a un doble enlace de un 2o. substrato(Sintasa)
(Sintasas)Descarboxilasa pirúvica
5 Isomerasas Transferencia de grupos en el interior de las moléculas para dar formas isómeras
MutasasEpimerasasRacemasas
6 Ligasas Formación de enlaces C-C, C-S, C-O y C-N. Mediante reacciones de condensación, acopladas a la ruptura del ATP
Sintetasas
Enzimas:
![Page 39: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/39.jpg)
6. Ligasas(Formación de enlaces, con aporte de ATP)
•Entre C y O
•Entre C y S
•Entre C y N
•Entre C y C
![Page 40: Enzimas(1)](https://reader035.vdocuments.co/reader035/viewer/2022062514/55b3ad2abb61ebd7568b4641/html5/thumbnails/40.jpg)
E + S SE E + P
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1. Actuación global de la reacción catalizada.
2. Utilizar un procedimiento analítico para la determinación de S que desaparece o los productos de la reacción que aparecen.
3. Si la enzima requiere cofactores (iónes metálicos o coenzimas).
4. La dependencia de la actividad enzimática con la [S] o sea KM del S.
5. El pH óptimo.
6. Un intervalo de temperatura en la que la enzima es estable y muestra actividad elevada.
¿Cómo detectar una enzima?
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Es la cantidad que transforma 1.0 M (10-6 M) de S /min a 25oC, en las condiciones de medida óptima.
1.0 Unidad de Actividad Enzimática
Es el no. de U de enzima / mg de proteína.Es una medida de la pureza de la enzima.
La Actividad Específica
Catalasa de Aspergillius niger4000-8000 U/mg de prot.
100 mg $ 209.80 USD.
Catalasa de Aspergillius niger4000-8000 U/mg de prot.
100 mg $ 209.80 USD.
Catalasa de Hígado de bisonte
2000-5000 U/mg de prot.
1 g $ 768.50 USD.
Catalasa de Hígado de bisonte
2000-5000 U/mg de prot.
1 g $ 768.50 USD.
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Es el no. de moléculas de S transformadas / unidad de tiempo, por una molécula de enzima
(o por un sólo sitio catalítico, cuando la E, es el limitante).
El Número de Recambio de una Enzima
Anhidrasa carbónica
-Amilasa
-Galactosidasa
Fosfoglucomutasa
36 000 000
1 000 000
12 000
1 240
Enzima. Moles de S, transf./ min.
a 20-38 oC.