enzimas recop 2011

5/12/2018 ENZIMAS RECOP 2011 - slidepdf.com

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Enzimas

Dr. Andres Aguirre Cruz



g z

CONTENIDO



Enzimas

² Catalizadores

² Clasificación

² Tipo de reacción



Enzimas① Oxidorreductasas② Trasfereasas③ Hidrolasas④ Liasas⑤ Isomerasas

⑥ Ligasas



Enzimas² Grupos prostéticos

² Cofactores

² Coenzimas

Función importante

M o l é c u l a s n

o p r o t e i c a s



Grupos prostéticos

Son molécula de origen no proteicocon actividad biológica.

Fosfato de piridoxal (B6)Hemoglobina

Globina (proteína)Grupo hemo



Enzimas

Sitio activo



Mecanismo de Ping pong para

la trasnominaciónα-cetoácido

+aminoácidoNH3

NH3



Modelo de adaptación inducidadel sitio activo de una Liasa



Estructura del NAD+ y NADP+

o NAD+, R = H

o NADP+, R =PO2−3

Nicotinamida

Adenina

Dinucleótido

Nicotinamida

Adenina

Dinucleótido

Fosfato



Sustrato dipeptídico

Glisil tirosina

Carboxipeptidasa A

Sitio activo



MECANISMOS DE

CATÁLISIS ENZIMÁTICA



Las enzimas

v Se emplean en muchos mecanismos.

v Facilitar la catálisis.



La catálisis

Es el proceso por el cual se aumenta o disminuye la

velocidad de una reacción química, debido a la

participación de una sustancia llamada catalizador .



Mecanismos de reacción

① Catálisis por proximidad

② Catálisis acido básica

③ Catálisis por tensión

④ Catálisis covalente



Catálisis mediantefructosa −2,6− bifosfatasa

Sustrato

① Estabilizar carga delsustrato.

② Ataque del nucleófilo al g.fosforilo−enzima.

③ Ataque del nucleófilo delH2O.Glu 327 actúa como una

b a s e è f o s f o r oinorgánico.

④ Liberación de ortofosfato inorgánico a partir de Arg257 y Arg 307.



Secuencia de aminoácidos

² Vecindad de los sitios catalíticos.

² Proteasas bobinas.



División del DNA

catalizado por unaendonucleasa de restricción



Espectros de absorción

NADH

NAD+

NADP+

NADPH



Valoración de la enzimática acopladapara la actividad de hexosinasa

Enzimas• Transferir • Grupo fosfato

• Transferir • Grupo fosfato



Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PD)

v Cataliza la 1a reacción

v Vía de la pentosa fosfato

v Ruta metabólica que provee

v NADPH

v Pentosas

v Para la síntesis de ácidos nucleicos.



Principales enzimas séricasutilizadas en el diagnostico clínico



Modelo Normal Patológico de isozimadel Lactato deshidrogenesa (LDH)

• LDH• Separada del suero• Visualizadas• Electroforesis en G.



Electroferograma de las isozimsa

de lactato deshidrogenasa

Isozimas especificas

Ataque la miocardio

Normal

Enfermedad apática

Suero



Electroforesis en Gel

Es un grupo de técnicas empleadas para separar moléculas basándose en propiedades como eltamaño, la forma o el punto isoeléctrico.



Electroforesis en Gel

v Propósitos analíticos

v Purificar parcialmente moléculas

v Antes de aplicar

v Espectrometría de masas

v PCR (reacción en cadena de la polimerasa)

v Clonación o secuenciación de ADN.



Uso de las proteínas de fusión

Glutatión−s−trasnferasa(GST)

§ Purificar § Proteínas recombinantes§ GSH, Glutatión

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