enzimas de restricción - pccgenfq · fagos como vectores de clonación . bibliotecas genómicas ....
TRANSCRIPT
Enzimas de restricción
ADN recombinante
Separación de moléculas de ADN
Secuenciación automatizada de ADN
Marcaje de un fragmento de ADN
Hibridación y reconocimiento de secuencias con alta homología
65oC 50oC
Southern y Northern blot
Los plásmidos tienen sitios de clonación múltiple
Los plásmidos son vectores de clonación
Fragmentos entre 1000 y 30000 nucleótidos
Presentan marcadores de resistencia a antibióticos
Fagos como vectores de clonación
Bibliotecas genómicas
Bibliotecas de cDNA
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
La amplificación es exponencial
Determinar la secuencia de los dos primers o cebadores necesarios para amplificar por PCR esta secuencia.
Usos del PCR
Mutagénesis dirigida
Microarreglos
Animales transgénicos
Mutación en una helicasa causa envejecimiento prematuro
Plantas transgénicas
Transformación mediada por Agrobacterium tumefaciens
Transformación por biobalística
Proteínas reporteras
Vectores de expresión
Clonación de fragmentos de ADN
Se pueden generar proteínas mutadas manipulando su DNA