El crustáceo anacostraco Thamnocephalus platyurus es más susceptible que Artemia

salina (Crustacea: Anacostraca) en bioensayos de letalidad con

extractos vegetales

Karen Rebeca PÉREZ CIFUENTES;

Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, USAC

Pablo MAYORGA SAGASTUME

Servicios y Productos Ambientales (SEPRA)

Guatemala

Bioensayos con Artemia salina

• Usados desde hace décadas

• Bioensayo rutinario a nivel mundial para medir actividad biológica de extractos vegetales potencialmente medicinales (tamizaje)

¿Hay otras opciones?

Objetivo

• Comparar la susceptibilidad de Thamnocephalus platyurus (crustáceo anacostraco de agua dulce) con la de Artemia salina (crustáceo anacostraco marino) en bioensayos de letalidad con 10 extractos vegetales y 5 fármacos

Metodología

• Los bioensayos:– Thamnotoxkit F, con el crustáceo anacostraco

de agua dulce Thamnocephalus platyurus

– Artoxkit M, con el crustáceo anacostraco marino Artemia salina

Thamnotoxkit F

Artoxkit M

Metodología

• 5 extractos (etanólicos) vegetales con actividad anti-Artemia conocida:– Solanum americanum (hojas)– Ocimum micranthum (aceite)– Petiveria alliacea (raíz)– Gliciridia sepium (corteza)– Neurolaena lobata (hoja)

Metodología

• 5 extractos sin actividad anti-Artemia conocida:– Curatella americana (hoja)– Rhizophora mangle (corteza)– Prunus barbata (hoja)– Quercus crispifolia (hoja)– Smilax domingensis (rizoma)

Proporcionados por el Laboratorio de Citohistología, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, USAC

Metodología

• 5 fármacos:– Furosemida– Amoxicilina– Cefadroxilo– Secnidazol– Acetaminofén

Proporcionados por laboratorios farmacéuticos locales

Metodología

• Extracto concentrado redisuelto con etanol o DMSO + aguas estándar:– agua de mar (ARC-test)

– agua dulce moderadamente dura (USEPA)

• Toxkits: Procedimientos Estándar Operacionales– Eclosión: medio preaereado, caja Petri

9 cm, 25º C, 3000-4000 lux, 20-22 h

– 5 diluciones y un control en placa multipozos

O O O O O OO O O O O O O O O O O O O O O O O O

control C5 C4 C3 C1C2

ENJUAGUE<------------

•enjuague: 50 organismos / concentración•10 organismos en cada pozo

diluido concentrado

Metodología

• Incubación– 25º C, oscuridad

• T. platyurus: 24h

• A. salina: 48h

• Cálculo de CL50– método USEPA/600/4-85/013, 1985

• manual y computarizado

Resultados

CL50 de extractos vegetales con actividad anti-Artemia conocida

0

100

200

300

400

500

600

Sa Om Pa Gs Nl

CL

50 (

pp

m)

As 24hAs 48hTp 24h

Resultados

CL50 de extractos vegetales sin actividad anti-Artemia conocida

0

50

100

150

200

250

300

350

Ca Rm Pb Qc Sd

CL

50 (

pp

m)

As 24hAs 48hTp 24h

Resultados

CL50 de fármacos

0

100

200

300

400

500

600

Furo Amoxi Cefa Secni Aceta

CL

50 (

pp

m)

As 24hAs 48hTp 24h

Conclusión

• Thamnocephalus platyurus es más susceptible que Artemia salina a extractos vegetales

Recomendaciones• Estudios más extensos con T. platyurus y A.

salina• Estudios con otros Toxkits (protozoos,

algas verdes unicelulares, rotíferos y otros crustáceos)

• Bioensayos con organismos patógenos con extractos sin actividad anti-Artemia conocida letales a T. platyurus

•Estos son resultados parciales de la tesis de Licenciatura en Química Farmacéutica de Karen R. Pérez C.

•Financiamiento: K. Pérez SEPRA Microbiotests, Inc.

(Deinze, Bélgica)

•Agradecimientos: Dra. Ana Lucía ValleDr. Armando Cáceres

www.sepra-gt.com

info@ sepra-gt.com