DUPLICACIÓ DE L’ADN I TRANSCRIPCIÓ

Unitat 10

ADN

-Hipòtesi semiconservativa: Watson&Crick

1- Duplicació de l’ADN

Experiment de Meselson i StahlEscherichia coli

2. Com creixen els nous filaments

• DNA- Polimerassa: Pot sintetitzar DNA in vitro (PCR)

• Que necessita:• Desoxiribonucleòtids: A, T, G i C• Ions Mag2+• Un patró de DNA (“template”)• Un encebador (“Primer”)

2.2- Problemes de la direcció de duplicació in vivo

Experiment de Cairns (1963):

-Bidireccional

-Un sol origen de replicació

Dilemes:

-La polimerassa no pot sintetizar ADN sense encebador

-Si els dos filament de la forquilla creixen en paral.lel, un ho ha de fer en direcció 3´----5

1968- Okazaki: solució al dilema• Fragments d’Okazaki: sintetitzats per l’ARN

polimerassa que no necessita encebador i després per l’ADN polimerassa

Animació Fragments Okazaki

3- Mecanisme de duplicació: Procariotes

1- Una Senyal d’inici2- Helicasa: Trenca les ponts d’hidrogen entre filaments

– Tropoisomerasa: Elimina les tensions de la resta de l´ADN enroscat

3- Proteïnes estabilitzadores (SSB): Mantenen la separació dels dos filaments. FORQUETA DE REPLICACIÓ– Tot aquest procés és bidireccional

4- RNA Polimerasa (Primasa): Sintetiza un fragment d’ADN sobre el motlle (encebador)

5- ADN Polimerassa III: Sintetitza ADN en direcció 5´-----3´. Aquest filament es de creixement continu i conductor

Sobre l´altre motlle (ADN), es forma un filament d’ARN d’uns 40 nucleòtids sobre els que la polimerassa sintetiza l’ADN d’uns mil nucleòtids (Fragments d’Okazaki)

6- La DNA polimerassa I retira l’ARN i omple els buits amb ADN• La DNA Ligassa empalma els diferents fragments entre si

(filament de creixement discontinu i retardat).7- Cada filament es sintetizat en part de forma continua i en part

de forma discontínua

Vídeo Replicació ADNVideo Replicació ADN II

3.2- Duplicació en eucariotes

• Diferències respecte procariotes:– ADN lligat a Histones: El filament motlle del

filament conductor es queda les histones i tots dos s’enrotllen sobre els octàmers antics. El filament motlle del retardat s’enrotlla sobre nous octàmers d’histones

– ADN eucariotes més llarg: Hi ha vàries bombolles de replicació (Replicons) i és un procés molt més lent que en procariotes.

Expressió del missatge genètic

4. La teoria un gen-un enzim4.1- Investigació de Garrod

• Alcaptonuria: Artritis i ennegriment dels catílags• Conceptes:

Gen: Tros d’àcid nucleic que du informació per a un caràcter Locus: Lloc que ocupa un gen al cromosoma Diploide/haploide Gen dominant/gen recessiu Al.lel: Cadascun dels gens que ocupen un mateix locus

• Alcaptonuria : Malaltia hereditària Recessiva

4.2- Formulació de la teoria• 1948. Beadle&Tatum

5.5. Expressió del missatge genètic: ProcariotesExpressió del missatge genètic: Procariotes

Promotor: No es trascriu. Seqüències de consens RNA PolimerasaIniciació, elongació, finalització i maduració ( tan sols RNAt i RNAr)

EUCARIOTES•Varis RNA polimerases•Gens: Introns i exons•RNAm madura

Resum transcripció Eucariotes

• 1- Iniciació: • Regió Promotor: Té

unes seqüències consens (CAAT i TATA). Fixació de l´ARN polimerasa i factors de transcripció (proteïnes)

• ElongacióMetilguanosinatrifosfat invertida (

• Finalitzatció

• Maduració: Nucli

http://www.youtube.com/watch?v=qOA25GbUkdAhttp://www.youtube.com/watch?v=CWLgALHiIvI&feature=related

Video transcripcio

5.5. Expressió del missatge genètic.Expressió del missatge genètic.- TraduccióTraducció

http://www.youtube.com/watch?v=FNqmh4PoMPQhttp://www.youtube.com/watch?v=D5vH4Q_tAkY&feature=player_embedded