Download - Tecnologías eficiencia reproductival
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7/30/2019 Tecnologas eficiencia reproductival
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Tecnologas para incrementar la eficiencia
reproductiva en ovinos tropicales
Ivette Rubio G. et al.
CEIEGT FMVZ UNAM
19 Octubre 2012
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Contenido
I. Introduccin
II. Evaluacin de la Salud Reproductiva del Semental
III. Sincronizacin
IV. Congelacin de Semen
V. Inseminacin Artificial
VI. Transferencia de Embriones
Desarrollo de biotecnologas reproductivas
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Preparacin es la clave del xito!
Animales
Nutricin
Salud
Facilidades
Personal
Partos
Empadre
Controlado Monta dirigida
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Evaluacin de salud reproductiva
Examen fsico general
Examen aparato reproductor
Evaluacin de semen
Bagley C. 1997
Examen fsico y aparatoreproductor de sementales
Parmetro n PromedioDesviacinestndar
Condicin corporal(1-5)
Russel A. 1969
22 3.1 0.99
Circunferenciaescrotal (cm)
22 32.1 2.76
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Evaluacin del semen
Resumen evaluacin de semen
Parmetro n Promedio Desv. std
Color/Densidad 22 cremoso -------
Volumen (ml) 22 0.8 0.39
Motilidad masa 22 3.4 0.85
Motilidadindividual (%)
22 74.8 13.14
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Evaluacin de salud reproductiva
Examen fsico general
Examen aparato reproductor
Evaluacin de semen
Bagley C. 1997
Examen fsico y aparatoreproductor de sementales
Parmetro n PromedioDesviacinestndar
Condicin corporal(1-5)
Russel A. 1969
22 3.1 0.99
Circunferenciaescrotal (cm)
22 32.1 2.76
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Evaluacin del semen
Resumen evaluacin de semen
Parmetro n Promedio Desv. std
Color/Densidad 22 cremoso -------
Volumen (ml) 22 0.8 0.39
Motilidad masa 22 3.4 0.85
Motilidadindividual (%)
22 74.8 13.14
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Consistencia o apariencia del semenVALOR CONSISTENCIA Cantidad* Rango
5 Cremosa espesa 5.00 4.5-6.004 Cremosa 4.00 3.5-4.53 Cremosa tenue 3.00 2.5-3.52 Lechosa 2.00 1.5-2.5
1 Nebulosa 0.7 0.3-1.00 Clara (acuosa) Insignificante
*Nmero de espermatozoides (X109) por ml. Nota:El semen lechoso, nebuloso o acuoso no debe usarse para IA
Motilidad en masa
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Motilidad individual y conteo
espermtico
Tincin Eosina/nigrosina para detectar espermatozoides vivos y muertos
En microscopio de luzEspermatozoides muertos en tincin purpura (flechas),Espermatozoides vivos son azul grisceo.Manchas purpura oscuras son grnulos de tincin
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Microscopa con luz fuorescente
Nota.2 flechas blancas muestran los mismos espermatozoides muertos dela transparencia anterior
Espermatozoides vivos y muertos usandomicroscopa fluorescente
Las fluorescencias rojas y doradas indicanEspermatozoides muertos, mientras que los vivosmas fciles de detectar que en la tincin purpura
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102 espermatozoides muertos
172 espermatozoides vivos
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Manejo semen fresco
Congelacin de semen
Llenado de pajillas
Refrigeracin (2 h) 5oC 2oC/3min
Fase de equilibrio 45 60 min
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Caractersticas semen congelado
IDSemental
Volumeneyaculado
(ml)
Motilidadindividual
(%)
Concentracinespermtica
No. dedosis
Volumentotal(ml)
Volumendiluyenterequerido
(ml)
9 8 2 80 8,448 x 106 84.48 21.12 17.12
6 10 3 80 14,256 x 106 142.5 35.64 29.64
50 10 1.7 85 8,539.9 x 106
85.39 21.34 17.94
Ineminacin artificial
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Ventajas de la IA Mejora gentica ( uso de sementales probados,
introduccin de otro genotipo).
Fcil transporte de material gentico.
Aumento de la eficiencia reproductiva (de un
eyaculado se pueden obtener 20-35 dosis con
semen fresco diluido y aprox 10 para semen
congelado)
VENTAJAS IA
Reduccin de sementalesen el rebao (bajancostos manutencin).
Prevencin deenfermedades.
Utilizacin ms adecuada
de registros. Utilizacin de programasreproductivos.
Facilidad de pruebas deprogenie
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Desventajas IA? Se necesita de personalcalificado y experto (esdesventaja?).
Dependiendo del mtodode sincronizacin laexperiencia delinseminador se puedenobtener resultados defertilidad bajos.
Es un mtodo costosocuando se realiza IAintrauterina
Se puede realizar la
tcnica con semen fresco,refrigerado y congelado
Factores a considerar
Anatoma (disposicin del cervix). Procesos de dilucin-conservacin del
semen. Va de aplicacin del semen.
Tipo de semen usado (fresco,refrigerado, congelado). Tipo de presentacin del semen (pellet
o pajilla).
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ANATOMIA DEL CERVIX No tiene una forma en especifico siendo la ms
usual la llamada forma de palomita de maz
Dimetro aproximado de 1 cm, una consistenciadura (tejido conjuntivo rico en fibras colgenas).
6 a 7 anillos que en realidad son pliegues
longitudinales y se inclinan caudalmenteadquiriendo una forma sinuosa.
Cuerpo del tero
Cuernos uterinos
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en hembras jvenes y no gestantes se localizaen el piso de la pelvis y en hembras gestantespor lo general se localiza por delante delborde de la pelvis .
El color del crvix es rosceo y solo adquiereuna ligera coloracin blanquecina cercano ala ovulacin
Cervix en forma depalomita de maz
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Cervix es una barrera inicial al ascenso de losspz.
Por la disposicin de los pliegues no pasa lapipeta de IA.
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Se realiza la IA a tiempo fijo y en el menortiempo ya que la viabilidad disminuye.
Volumen por dosis 0.05 a 0.1 ml con por lomenos 100 millones de spz vivos.
Tcnicas de IA
Inseminacin cervical.
Inseminacin transcervical.
Inseminacin intrauterina.
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IA cervical ytranscervical
Se coloca a lahembra en unpotro o una prensade contencin
Inseminacin artificial transcervical
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Fosa cervical
Entrada cervical
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INSEMINACIN ARTIFICIAL ENPEQUEOS RUMIANTES
Dpto de Reproduccin FMVZ UNAM
Tcnicas de IA
IA cervical
IA transcervical
IA intrauterina.
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INSEMINACIN INTRA UTERINA Inician en 1967 Salamon y Lighfoot depositaron
el semen descongelado en tero porlaparotomia.
En 1982 Killen y Caffery realizaron las primeraIA usando laparoscopia.
Se requieren 40 millones de spz en 0.1ml
Para realizar esta tcnica se realiza un programade sincronizacin de estros en la hembras.
Dietadas de agua y alimento pro lo menos 12 hrsantes de la tcnica.
Se requiere equipo y personal capacitado.
Se utiliza una anestesia disociativa (rompun-ketamina),0.01g/kg y 2.0mg/kgrespectivamente.
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CAMILLAS PARA REALIZAR LA IA INTRAUTERINA
Se rasura y desinfecta el rea anterior a la ubre
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Procedimiento quirrgico
Corte de piel
Introduccin aguja Veress
Colocacin trocar-cnula
Se introduce un gas a cavidad abdominal antesde introducir los trocar-cnula.
El gas puede ser CO2 o aire filtrado para crear
un pneumoperitoneo. se inclina a la oveja en un ngulo de 45 paraque con posicin y gas se Cree un espacio virtualy se desplacen las vsceras.
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Se visualiza el tero sin revisar ovarios
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Se procede a revisar lavascularizacin y tonouterino
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Se introduce elaspic sedeposita la mitad dela dosisen cada cuerno
Se corrobora el libremovimientode la aguja, se compruebaque. no se forme una
protuberancia
Se retiran los instrumentos y se procede a sacar el airede cavidad y a suturar piel
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Implementacin de Tecnologas
Reproductivas en un Rebao deOvejas Pelibuey en el Trpico
Sincronizacin de estros
Objetivo General
Implementar la sincronizacin de estros y
la inseminacin artificial en un rebao de
ovejas Pelibuey en el trpico
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Objetivos Especficos
Evaluar estado reproductivo de las ovejas previo
a la sincronizacin.
Medir la respuesta a la sincronizacin.
Estimar la tasa de gestacin de la tcnica de I.A.
utilizando semen fresco y semen congelado.
Introduccin I.A. transcervical con semen congelado se obtienen bajos
porcentajes de gestacin debido al proceso de congelacindel semen
(Donovan A. et al2004)
Estructura del crvix
(OHara L. et al2010)
(Senger, 2003)
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Tratamientos para sincronizar
Uso de ProstaglandinaF2 o sus anlogos paralisar el CL ( estro 48Hrsdespus de la aplicacin)
PG a todos los animaleslos que no entran repetirla dosis 11 das despus.
Sincronizacin con progesterona y
progestagenos Pueden utilizarse en cualquier etapa del ciclo
estral Alta eficiencia Baja Fertilidad
Productos: Progesterona
Norgestomet
Acetato de Fluorogestona
Acetato de Medroxiprogesterona
Acetato de Melengestrol
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Productos
Introduccin
Sincronizacin de celos
I.A. a tiempo fijo
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Material y mtodos
n= 50 ovejas Pelibuey
multparas: 2 - 7 aos
Condicin corporal 2.5 - 3.5
Peso promedio 40.93 kg
Asignacin 2 grupos:
n=25 semen fresco
n=25 semen congelado
Material y mtodos
Sincronizacin de estro
Cronipres CO
160 mg de progesterona por
dispositivo intravaginal
eCG 100 UI (Folligon)
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Pipeta de IA
I.A. Sistema RAMGO
www.tecnologiagentica.comDr. Hidalgo M.A.
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Material y Mtodos
Muestras de sangre
Suero
Concentraciones de progesterona (P4)
Radioinmunoensayo (RIA)
COATACOUNT Progesterone, Siemens
Laboratorio Endocrinologa FMVZ, UNAM
Pulido A. et al. 1991
Protocolo de sincronizacin
muestrasangre
-21 -18 -15 -2 I.A. 7 9 13 17 21 25 35
InsercinCronipresCO
RetiroCronipresCOAplicacin100 UI eCG
55-58 h postretiro
12 Das
Diagnstico degestacin porUltrasonido
Das
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Resultados
Concentraciones progesterona 1.0 ng/mlen 2 mediciones consecutivas
Ciclicidad
Concentracin de P4 srica en ovejasPelibuey previo a la sincronizacin
0.00
1.00
2.00
3.00
4.00
5.00
6.00
-21 -18 -15 -2
ng/
ml
Das
Insercin dispositivoCronipresCO
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Respuesta a la sincronizacin
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
-21 -18 -15 -2 IA 7
ng/ml
Das
ID 30-7
ID 213-9
CronipresCO
Resultados por tipo de semen
Ciclando previoa sincronizacin
Respuesta a lasincronizacin
Retorno a estro Tasa degestacin
Semen Congelado
Semen Fresco
100%
76%68%
80%
68%
20%
32%
n=25n=25
n=19
n=17
n=20
n=17
n=5
n=8
Prueba X2 >0.333
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0.00
1.00
2.00
3.00
4.00
5.00
6.00
7.00
8.00
9.00
-21 -18 -15 -2 IA 7 9 13 17 21 25
ng/ml
Das
Gestantes
Vacas
Concentracin de P4 srica en ovejasdurante el programa reproductivo
CronipresCO
Resultados generales delprograma reproductivo
Ciclando previoa la
sincronizacin
Respuesta a lasincronizacin
Retorno a estro Tasa degestacin
100%
72% 74%
26%
n= 50
n= 36 n= 37
n= 13
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Discusin
Respuesta a la sincronizacin
Autor Producto RazaRespuesta
(%)
Cuevas EA. et al. Crestar Pelibuey 100
Hernndez OJ. Esponja MPA Pelibuey 100
Ozyurtlu N. et al. CIDR Rambouillet 90
Carballo E. et al. 2008 Cronipres Corriedale 100
CEIEGT Cronipres Pelibuey 72
Discusin
Porcentaje de gestacinTranscervical
semenfresco
Transcervicalsemen
congelado
Laparoscopasemen
congelado
Carballo E. et al. 2008(TF - 48H) 58 - -
Donovan A. et al. 2004
(TF - 57h)
70 44
Rivera R. 1997 (12h postcelo) 74.5 - -
Hiwasa M. et al. 2009(Celo) 5.5 0 72.2
Domnguez R.et al. 2007(TF 48h) 29.4 20 16.6
CEIEGT - 2012 (55-58h) 32 20 -
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Conclusiones
Implementacin de la tcnica de I.A. en
ElCenzontle.
Respuesta aceptable a la sincronizacin.
Tasa de gestacin baja con semen congelado.
Revisin del uso del dispositivoRamgo
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
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Objetivo de la transferencia de embriones
Aumentar la capacidad reproductora dehembras de gran valor gentico
Disminuye el intervalo generacional
Recuperacin de hembras de elevado valorgentico (edad, accidentes)
Conservacin de diversidad gentica.
Animales en peligro de extincin Intercambio de material Gentico
APARTE DE LAS HEMBRAS SELECCIONARMACHOS GENETICAMENTE SUPERIORES
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TCNICA DE TRANSFERENCIA SEREQUIERE: Tcnica compleja
Se requiere personal muy calificado
Buenas instalaciones (para los animales ylaboratorio etc)
Elevado costo ( hormonas, medicamentos,honorarios, equipo de trabajo etc)
Seleccin de animales DONADORA
Merito genticoPedigreeSin defectos genticosConformacin superiorHabilidad de transmitir
caractersticasComportamiento
productivo y reproductivoAlta produccinSin distociasSin problemas reproductivos
Otros60d pospartoVacunadaCondicin corporal 3.5
RECEPTORA Bajo mrito gentico
Frtiles
5-10 aos de edad (dependela especie)
Buena condicin corporal ytalla
Sanas
Vacunadas
Sin enfermedades abortivas
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DonadoraGenticamente superior
ReceptoraGentica estandar
Superovulacion y
sincronizacinDel estro
Sincronizacin del estroAplicacin eCG
Estros y servicio
Transferencia embrionesY revisin de CL
Colecta de embriones
Estro
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TCNICA DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
SUPEROVULACININSEMINACIN ARTIFICIAL oMONTA NATURAL (DONADORA
Transferencia a la receptora
O congelamiento de los embriones
Laparoscopa en ovinos
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Diagnstico de gestacin porultrasonografa
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Tecnologas para incrementar la eficiencia
reproductiva en ovinos tropicales
Ivette Rubio Gutirrez
CEIEGT FMVZ UNAM
Tel oficina: 232 3243941 ext. 120
mailto:[email protected]:[email protected] -
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